Генотипирование впч что это: Human Papillomavirus низкого (HPV 6, 11, 44) и высокого (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) канцерогенного риска, ДНК (выявление, генотипирование и количественное определение) [реал-тайм ПЦР, Россия]

Содержание

Human Papillomavirus низкого (HPV 6, 11, 44) и высокого (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) канцерогенного риска, ДНК (выявление, генотипирование и количественное определение) [реал-тайм ПЦР, Россия]

Молекулярно-генетическое исследование, которое позволяет определить и дифференцировать 21 генотип вируса папилломы человека в исследуемом материале, что дает возможность охарактеризовать онкогенный потенциал инфекции и спланировать тактику лечения.

Синонимы русские

Вирус папилломы человека (ВПЧ) с определением генотипа.

Синонимы английские

Human Papillomavirus (HPV), DNA, Genotyping.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Вирус папилломы человека – ДНКсодержащий вирус из семейства паповавирусов, ассоциированный с развитием остроконечных кондилом, бородавок, предраковых изменений аногенитальной области, рака шейки матки.

Существует более 100 типов ВГЧ, около 30 из них могут инфицировать половые пути, и около 14 генотипов связаны с развитием рака шейки матки, прямой кишки, полового члена и новообразований других локализаций (например, орофарингеальной плоскоклеточной карциномы).

Онкогенные папиллома-вирусы имеют в составе ДНК белки Е6/Е7, которые способны супрессировать процессы апоптоза (запрограммированной гибели) в клетках с измененным генетическим материалом. Генотипы 1, 2, 3, 5 считаются неонкогенными, а генотипы 6, 11, 42, 43, 44 относятся к папиллома-вирусам низкого онкогенного риска. ВПЧ высокого онкогенного риска – это генотипы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73 и 82.

Основной путь распространения вируса – половой. Возможна вертикальная (от матери к ребенку) и контактно-бытовая передача инфекции. В организм человека может попасть несколько типов ВПЧ одновременно. Заражаются обычно после начала половой жизни в возрасте 16-25 лет. При инфицировании онкогенными генотипами вируса между 25 и 35 годами вероятны интраэпителиальные поражения и через несколько лет развитие рака. В 70  % случаев в течение первого года и в 90  % случаев через 2 года после инфицирования возможно самоизлечение.

Инфицирование различными путями, а также разными типами вируса обуславливает особенности течения заболевания, локализацию эпителиальных изменений и риск развития неопластических процессов в местах поражения кожи и слизистых. Подошвенные бородавки вызываются генотипами 1, 2, 4, 63, а обычные бородавки – 2-м и 7-м типом ВПЧ. Папиллома-вирус 6-го, 7-го, 11-го, 16-го и 32-го типов может стать причиной папиллом ротовой полости и гортани, а ВПЧ 6-го, 11-го, 42-го, 44-го типов – аногенитальных бородавок. Папилломы, вызванные даже неонкогенными или низкоонкогенными папиллома-вирусами, рекомендовано удалять. Следует также отметить, что риск возникновения новообразований выше у людей с иммуннодефицитами.

Инфицирование онкогенными вирусами не означает, что у пациента будет раковое заболевание, однако требует дальнейшего тщательного регулярного наблюдения за инфицированным.

При выявлении изменений кожи и слизистой с образованием кондилом, бородавок или внутриэпителиальной дисплазии рекомендовано исключение папиллома-вирусной инфекции и определение генотипа вируса, что позволяет оценить риск развития рака и определить тактику лечения.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) выявляет ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) с высокой специфичностью и чувствительностью. Определение ДНК различных генотипов вируса должно обязательно проводиться с учетом результатов цитологического и гистологического исследований биоптата, удаленной папилломы, бородавки, мазка из шейки матки или участка с дисплазией, метаплазией или признаками малигнизации.

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения наличия папиллома-вирусной инфекции.
  • Для диагностики одновременного инфицирования несколькими типами ВПЧ.
  • Для дифференциальной диагностики генотипов ВПЧ.
  • Для того чтобы оценить риск развития новообразований, ассоциированных с ВПЧ (рак шейки матки, рак прямой кишки, рак аногенитальной области, орофарингеальная карцинома).

Когда назначается исследование?

  • При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, в мазке по Папаниколау.
  • При наличии кондилом, бородавок и других морфологических изменений эпителия различных локализаций.
  • При выявлении вируса папилломы человека неуточненного типа (по данным лабораторного анализа).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

КВМ: ≥ 4,0

* Контроль взятия материала (КВМ) – требуется для анализа качества взятия исследуемого материала. В относительном типе анализа используется для нормализации количества ДНК вируса в образце.

Причины положительного результата

  • Инфицирование вирусом папилломы человека
    • Генотипы низкого онкогенного риска: 6, 11, 44
    • ВПЧ высокого онкогенного риска: 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73 и 82

Причины отрицательного результата

  • Отсутствие генетического материала вируса папилломы человека в исследуемом материале

Анализ на ВПЧ, Комплексное генотипирование ДНК 28 типов, полукол.

формат,REAL TIME ПЦР

Общая характеристика

Комплексное генотипирование ДНК ВПЧ определение 19 высокоонкогенных 16,18,31,33,35,39,45,52,56,58,59, 26,51,53,66,68,69,73,82 и 9 низкоонкогенных: 6,11,40,42,43,44,54,61,70.
ВПЧ-инфекция является очень распространённой (около 75-80% женщин в течение своей жизни по крайней мере единожды подвергается воздействию вируса).

Описано около 150 типов ВПЧ.
Большинство случаев ВПЧ-инфекции связано с началом сексуальной активности и являются транзиторными, хотя в некоторых случаях ВПЧ-инфекция остаётся латентной и может активироваться через несколько лет.
В течении двух лет после инфицирования самостоятельно происходит элиминация вируса до 80-90%.
По истечении этого срока при оставшейся хронической инфекции незначительное количество ВПЧ прогрессирует и приводит к развитию цервикальной интраэпителиальной неоплазии (дисплазии), а затем — рака шейки матки.
Определение типа вируса позволяет оценить степень риска развития неоплазии и дифференцировать персистенцию вируса от случая нового заражения при динамическом наблюдении.

Высокая вирусная нагрузка рассматривается как один из факторов, снижающих спонтанную элиминацию вируса и увеличивающих риск развития неоплазии.
Выполняется анализ методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) с детекцией результатов в режиме реального времени (RЕАL TIME).
Ее принципиальной особенностью является мониторинг и количественный анализ накопления продуктов ПЦР и автоматическая регистрация и интерпретация полученных результатов.

Показания для назначения

1. В комплексе с цитоморфологическим исследованием с окраской мазков по Папаниколау или жидкостной цитологией — для проведения скрининга рака шейки матки. 2. Патология шейки матки: доброкачественные патологические процессы (воспаление, эктопия, эрозия) и предраковые изменения (лейкоплакия, дисплазия различной степени, полипы). 3. Генитальный кондиломатоз. 4. Контроль эффективности лечения.

Маркер

Маркер наличия возбудителя ВПЧ в исследуемом биоматериале.

Клиническая значимость

1. Оценка прогноза онкогенного потенциала. Риск прогрессии ВПЧ – инфекции, дисплазий возрастает при:
• Определении ВПЧ в количестве «»++»»: 6,5 ~ 3,5 lg ГЭ/образец и более
• Выявлении 16 и/или 18 генотипов ВПЧ
• Одновременном выявлении нескольких генотипов ВПЧ (в различной комбинации)

Состав показателей:

Генотип. ВПЧ 9 низкоонкогенных типов 6,11,40,42,43,44,54,61,70
: Полимеразная цепная реакция в реальном времени
Диапазон измерений: 0-0
Единица измерения: геномных эквивалентов/образец

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

Генотип.
ВПЧ 19 высокоонкогенных типов 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,69,73,82 : Полимеразная цепная реакция в реальном времени
Диапазон измерений: 0-0
Единица измерения: геномных эквивалентов/образец

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Объем

соскоб из ЦК, шейки матки, зоны поражения

Условия доставки:

48 час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Эппендорф с транспортной средой

Объем:

1.5 Миллилитров

соскоб слиз. оболочки канала шейки матки

Условия доставки:

48 час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Контейнер с консервантом SurePath

Объем:

10 Миллилитров

соскоб из уретры

Условия доставки:

48 час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Эппендорф с транспортной средой

Объем:

1.5 Миллилитров

Правила подготовки пациента

Стандартные условия подготовки (если иное не определено врачом): Воздерживаться от половых контактов 48 часов. Прекратить прием интравагинальных средств различного назначения (суппозитории, спермициды, спринцевания, тампоны, местные процедуры и др.). За 2 часа Воздерживаться от мочеиспускания. Важно: Сдавать до лечения или через 21 день после окончания антибактериальной, антимикотической терапии (если иное не определено врачом).

Стандартные условия подготовки (если иное не определено врачом): Воздерживаться от половых контактов 48 часов. Прекратить прием интравагинальных средств различного назначения (суппозитории, спермициды, спринцевания, тампоны, местные процедуры и др.). За 2 часа Воздерживаться от мочеиспускания. Важно: Сдавать до лечения или через 21 день после окончания антибактериальной, антимикотической терапии (если иное не определено врачом).

Стандартные условия подготовки (если иное не определено врачом): Воздерживаться от половых контактов 48 часов. Прекратить прием любых местных лекарственных препаратов и процедур в области взятия биоматериала. За 2 часа Воздерживаться от мочеиспускания. Важно: Сдавать до лечения или через 21 день после окончания антибактериальной, антимикотической терапии (если иное не определено врачом).

Стандартные условия подготовки (если иное не определено врачом): За 24 часа Прекратить прием любых местных лекарственных препаратов и процедур в области взятия биоматериала.

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Интерференция:

  • Не обнаружена.
  • Не обнаружена.

Интерпретация:

  • Положительный результат: концентрация выдается в «+»:+++ >105 копій/реакцію >6,5 lg.
    ++ 105-102 копій/реакцію 6,5-3,5 lg.
    + <102 копій/реакцію <3,5 lg. 

    При обнаружении в ходе диагностики или мониторинга клинически значимых типов ВПЧ дальнейшее ведение пациентов осуществлять в соответствии с методическими рекомендациями для врачей.

  • Отрицательный результат: ДНК вируса папилломы, связанного с риском развития рака шейки матки, не выявлено.

Количественное определение и генотипирование ДНК ВПЧ КВАНТ-21 (6, 11, 44, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) в соскобе (ПЦР)

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 96-127, 95-873 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, пр-т. Ленина, 85А

+7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска (генотипирование 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68), количественное определение ДНК с указанием типа вируса

На сегодняшний день учеными открыто более 100 видов папилломавирусов. Часть из них может стать причиной раковых заболеваний, чаще всего рака шейки матки.

Видовые группу по степени риска развития онкозаболеваний:

  1. Группа «низкого риска». Чаще вызывают появление генитальных бородавок (остроконечных кондилом). В группу входят ВПЧ 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81, и CP6108.

2.     Группа «высокого риска». Почти каждый из этих типов обнаруживался при раке шейки матки, опухолей в области заднего прохода и в полости рта. Группа включает 16, 18, 31 и 33,  35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 и 82. Перечисленные типы официально признаны канцерогенами.

Таким образом, основной целью анализа является диагностика степени риска развития рака шейки матки. Степень риска зависит от уровня обсемененности – количества вирусных частиц на 100 тысяч клеток.

Определение вируса папилломы человека методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР) отличается высокой чувствительностью и специфичностью (98%). Принцип ПЦР заключается в идентификации уникального фрагмента ДНК, принадлежащего данному вирусу, после многократного удвоения исследуемого генетического материала в пробирке. Однако, стоит помнить, что выявление в материале ВПЧ еще не говорит о наличии у пациента рака. Судить о риске развития дисплазии и РШМ позволит количественное определение ВПЧ в материале.

В сети КДЛ «ОЛИМП» ПЦР-исследования выполняются в режиме REAL-TIME – это означает, что после каждого аппаратного цикла (амлификации) происходит измерение количества ДНК в биоматериале. Данная процедура сводит вероятность ложноположительного результата практически к нулю!

Исследуемым материалом является соскоб из влагалища.

Следовательно, результат анализа говорит об обсемененности вирусом папилломы человека непосредственно места взятия биоматериала.

Страница статьи : Вопросы вирусологии

Bosch F.X. Human papillomavirus: science and technologies for the elimination of cervical cancer. Expert. Opin. Pharmacother. 2011; 12(14): 2189-204.

Tungteakkhun S.S., Duerksen-Hughes P.J. Cellular binding partners of the human papillomavirus E6 protein. Archiv. Virol. 2008; 153(3): 397-408.

Ершов В.В., Чирский А.В., Вязовая А.А., Нарвская О.В., Лисянская А. С. Активность процессов пролиферации и апоптоза при интеграции ДНК вируса папилломы человека 16-го типа в цервикальный эпителий. Архив патологии. 2013; 75(2):16-9.

Apgar B.S., Zoschnick L., Wright Jr T.C. The 2001 Bethesda System terminology. Am. Fam. Physician. 2003; 68(10): 1992-8.

Jiang M.R., Baseman J.G., Koutsky L.A. Sequence variation of human papillomavirus type 16 and measurement of viral integration by quantitative PCR.J. Clin. Microbiol. 2009; 47(3): 521-6.

Роговская С.И. Папилломавирусная инфекция у женщин и патология шейки матки: в помощь практикующему врачу. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2008.

Bruni L., Diaz M., [email protected]é M., Ferrer E., Bosch F.X., de Sanjosé S. Cervical human papillomavirus prevalence in 5 continents: meta-analysis of 1 million women with normal cytological findings. J. Infect. Dis. 2010; 202(12): 1789-99.

Коломиец Л.А., Чуруксаева О.Н., Шпилева О.В., Уразова Л.Н., Родичева Н.С. Особенности распространения различных типов вирусов папилломы человека (ВПЧ) у пациенток с цервикальными неоплазиями и раком шейки матки в г. Томске. Сибирский онкологический журнал. 2012; (3): 41-5.

Munoz N.N., Bosch F.X. Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer. N. Engl. J. Med. 2003; 348(6): 518-27.

Афанасьева Л.Н., Игнатьева М.Е., Лялина Л.В., Саввина Н.В., Сметанина В.Д. Региональный опыт профилактики рака шейки матки в республике Саха (Якутия). Инфекция и иммунитет. 2014; 4(2): 137-42.

Роик Е.Е., Баранов А.Н., Трещева Н.Д. Эпидемиологические особенности папилломавирусной инфекции. Экология человека. 2015; (5): 21-6.

Лечение ВПЧ (папиломавирус) в СПб в Клинике Нарвская

Как проявляется ВПЧ?

Инфицированию ВПЧ подвержены абсолютно все — более того, примерно половина мирового населения является его носителем, вирус при этом никак не проявляется. Другие же, наоборот, регулярно сталкиваются с проявлениями кожного папилломатоза: образованием наростов, которые, чаще всего, локализуются:

  • на лице и шее;
  • под грудью и на животе;
  • на слизистой оболочке органов интимной зоны;
  • в подмышечных впадинах;
  • на слизистой ротовой полости и губ, в носу.

Передача вируса от носителя происходит при контакте с кожей либо слизистой, по этой причине заражение возможно, прежде всего, при половом контакте, не исключая анального и орального секса.

Инфицирование также происходит:

  • во время родов, когда новорожденный перемещается по родовым путям матери-носителя ВПЧ;
  • во время бритья либо эпиляции общим лезвием;
  • в ряде мест общего пользования с высокой влажностью среды: в общественных уборных, саунах, бассейнах, душевых спортзалов.

Людям с обострившимся папилломавирусом следует избегать во время лечения тактильной близости — объятий, рукопожатий — с членами семьи и коллегами, а также пользоваться отдельной посудой, полотенцем, средствами личной гигиены. По мнению ряда исследователей, передача ВПЧ возможна даже при рукопожатии, если на ладони есть крохотный порез.

Риску заражения подвержены люди с нестабильным гормональным фоном, страдающие нарушением обмена веществ, переживающие хронический стресс либо переутомление, а также беременные.

Комплексная диагностика папилломатоза

Активизация ВПЧ в виде появления новых наростов свидетельствует о необходимости безотлагательного обращения к врачу. Самолечение исключено — удаление нароста подручными средствами может привести к быстрому образованию новых отростков, кроме того, важно сдать анализы и получить по факту лабораторных исследований заключение об отсутствии онкологических рисков.

Появление наростов в подмышечных впадинах либо в зоне половых органов, помимо того, что доставляет дискомфорт, еще и чревато риском повреждения новообразования, вплоть до нечаянного отрыва с кровотечением. Наросты под грудью затрудняют ношение белья, на лице — причиняют психологические страдания.

Для избавления от дефектов следует обращаться за квалифицированной медицинской помощью, минуя этапы самолечения. В противном случае быстрое увеличение паразитов может привести к дисплазии шейки матки, образованию остроконечных кондилом мочевых путей и половых органов, раку шейки матки.

В зависимости от места локализации наростов пациенту следует обратиться к профильному специалисту. Как правило, это дерматолог, если бородавки появились на лице и теле, уролог либо гинеколог — в случае новообразований в интимной зоне, проктолог — в области анального отверстия.

В ряде случаев по итогам первичного осмотра пациенту предстоит консультация онколога, уролога, венеролога.

Комплексное обследование включает визуальный осмотр с пальпацией, анализ крови, кольпоскопию, цитологию мазка, гистологию ткани, ПЦР — полимеразную цепную реакцию, иногда — уретроскопию и биопсию.

Лечение папилломавируса

Лечение новообразований, спровоцированных проникновением ВПЧ, сводится к их удалению. Поскольку препараты, способные полностью избавить организм от вируса, на сегодняшний день неизвестны, вероятность появления со временем новых бородавчатых образований остается.

Оптимальный способ удаления наростов — лазерный. Сегодня все еще используются радиоволновая, электро-, криокоагуляционная и даже хирургическая методики, однако наиболее эффективным и безболезненным является использование лазерного оборудования. Чаще всего для избавления от нароста достаточно одного, максимум, двух, сеансов. Направленный луч воздействует только на новообразование, не затрагивая соседних тканей. Контакта с поверхностью кожи во время процедуры не происходит, на месте нароста остается корочка, которая спустя непродолжительное время бесследно исчезает.

Наиболее действенной профилактической мерой против заражения ВПЧ считается вакцинация. К эффективным препаратам для прививок относятся Гардасил и Церварикс.

В повседневной жизни важно соблюдать гигиену посещения общественных мест, вести осторожную половую жизнь — с проверенным партнером либо, при его смене, с использованием презерватива, следить за общим состоянием здоровья, включая бесканцерогенное питание и достаточность в рационе витаминов.

Важность генотипирования ВПЧ для скрининга, терапии и лечения неоплазии шейки матки

Geburtshilfe Frauenheilkd. 2012 июнь; 72(6): 507–512.

Язык: английский | German

M. Jentschke

Кафедра гинекологии и акушерства Ганноверской медицинской школы, Ганновер

P.

Soergel

Кафедра гинекологии и акушерства Ганноверской медицинской школы, Ганновер

P. Hillemanns Кафедра гинекологии и акушерства

7 Ганноверская медицинская школа, Ганновер

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

Для переписки Dr.Ганноверская медицинская школа им. Маттиаса Йенчке, отделение гинекологии и акушерства, Carl-Neuberg-Straße 1, 30625 Hannover, [email protected]

Поступила в редакцию 13 января 2012 г.; Пересмотрено 23 апреля 2012 г.; Принято 4 мая 2012 г.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

В последнее десятилетие выявление вирусов папилломы человека (ВПЧ) приобретает все большее значение при скрининге рака шейки матки и лечении предшественников рака. Скрининг на ВПЧ рекомендуется для дальнейшей оценки отклонений от нормы Пап-теста или во время последующего наблюдения после лечения предраковых поражений.Несколько рандомизированных контролируемых исследований показали, что скрининг рака шейки матки с использованием обнаружения ВПЧ может быть более эффективным, чем только цитологическое исследование. Генотипирование различных типов ВПЧ высокого риска (врВПЧ), полученных с помощью тестов мазка, еще не получило широкого распространения в клинической практике. Однако были отмечены значительные различия в онкогенности генотипов врВПЧ. ВПЧ 16 на сегодняшний день является наиболее распространенным и онкогенным генотипом. Генотипирование врВПЧ может быть полезным для стратификации риска у ВПЧ-позитивных женщин.

Ключевые слова: рак шейки матки, цервикальная институтная неоплазия (CIN), человеческий папилломавирус

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

der Nachweis Passherer Papillomviren (HPV) IM Rahmen der Vorsorge und undlung des zervixkarzinom und unsbesondere seiner vorstufen шляпа в Ден Верганген Jahren zunehmend Bedeutung gewonnen. Die HPV-Bestimmung wird beispielsweise zur weiteren Abklärung auffälliger Pap-Abstriche oder in der Nachsorge nach Behandlung präinviver Veränderungen empfohlen. Mehrere randomisierte kontrollierte Studien konnten zudem eine Überlegenheit gegenüber einem reinen Zytologie-Screening zeigen. Die Typisierung der unterschiedlichen Hochrisiko-HPV-Typen aus Abstrichproben hat dagegen erst in geringerem Maße Anwendung in der Praxis gefunden. Es zeigen sich jedoch große Unterschiede in der onkogenen Potenz und Relevanz der unterschiedlichen Genotypen. HPV 16 шляпа zahlenmäßig und auch prospektiv mit Abstand die höchste Bedeutung für die Entstehung zervikaler Neoplasien.Die Genotypisierung kann daher für eine bessere Risikostratifizierung HPV-positive Frauen hilfreich sein.

Schlüsselwörter: Zervixkarzinom, Zervixpräkanzerose, Humane Papillomviren

Введение

Роль выявления ВПЧ в скрининге рака шейки матки до сих пор вызывает споры в Германии. Одной из двух основных тем прошлогодней конференции EUROGIN (Европейская исследовательская организация по генитальным инфекциям и новообразованиям), состоявшейся в Лиссабоне в мае 2011 г. , была – помимо вакцинации против ВПЧ – важность обнаружения ВПЧ.Четырехдневная конференция в меньшей степени сосредоточилась на вопросе о том, следует ли проводить тестирование на ВПЧ в рамках скрининга рака. Вместо этого во многих статьях основное внимание уделялось возможности более дифференцированной оценки инфекции ВПЧ на основе подтверждения отдельных генотипов ВПЧ высокого риска (hrHPV).

Процедуры тестирования на ВПЧ и генотипирования

После одобрения Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) в 2003 г. тест Hybrid Capture 2 (hc2; Qiagen, Hilden, Germany) стал стандартным тестом для выявления ВПЧ. в клинической практике почти 10 лет.Тест позволяет выявить 13 генотипов врВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68) и основан на гибридизации ДНК ВПЧ с РНК ВПЧ. Связи ДНК-РНК маркируют антителами и выявляют с помощью хемилюминесценции. Однако тест не различает отдельные генотипы ВПЧ. Результаты представлены либо как положительные по врВПЧ, либо как отрицательные по врВПЧ. Анализ также можно использовать для выявления генотипов ВПЧ низкого риска (lrHPV). Преимуществом теста hc2 является его давнее и широкое применение в клинической практике; недостатком является возможность перекрестной реактивности с другими, обычно генотипами лрВПЧ, что может привести к ложноположительным результатам 1.

За последнее десятилетие на рынке появились многочисленные новые тесты на врВПЧ, основанные на обнаружении ДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Эти тесты обычно позволяют выявить любой из 14 генотипов врВПЧ (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68). Более того, некоторые из них предлагают возможность отдельного определения индивидуального генотипа hrHPV. Как правило, наиболее часто выявляемыми генотипами являются ВПЧ 16 и 18, а некоторые производители также предлагают тесты, позволяющие выявлять и другие генотипы.В принципе, с помощью ПЦР можно обнаружить даже очень небольшое количество вирусной ДНК. Однако такие высокочувствительные методы обнаружения не имеют значения в рутинной клинической диагностике, поскольку они часто выявляют инфекции ВПЧ, не имеющие клинической значимости (ср. ). Поэтому наиболее распространенные коммерческие тесты на основе ПЦР соответствующим образом адаптировали свои пороги обнаружения. Недостатком методов ПЦР является ограниченный клинический опыт. хотя в последние годы были проведены многочисленные исследования этих тестов 1,2.

Чувствительность Количество лиц с заболеванием (в данном случае женщин с высокой степенью CIN), которые были правильно идентифицированы с помощью используемого метода тестирования (тест на ВПЧ или цитологический мазок) как имеющие заболевание по сравнению с общим числом лиц с заболеванием.
Специфичность Количество здоровых людей, которые были правильно идентифицированы тест-методом как здоровые, по сравнению с общим числом здоровых людей в исследовании.
Тест с максимальной чувствительностью выявит всех больных: чувствительность теста будет 100 %. Однако такой тест обычно имеет низкую специфичность, т.е. много ложноположительных результатов.
Положительное прогностическое значение (PPV): Количество лиц с фактическим заболеванием из всех лиц с положительными результатами теста. У более молодых женщин тест на ВПЧ имеет относительно низкий PPV для высокой степени CIN, так как многие транзиторные инфекции ВПЧ могут возникать в этой возрастной группе без диспластических изменений шейки матки.
Отрицательная прогностическая ценность (NPV): Количество фактически здоровых лиц среди всех лиц с отрицательными результатами теста. NPV правильно проведенного теста на ВПЧ очень высок, так как рак шейки матки или поражения CIN высокой степени не являются ВПЧ-отрицательными; если мазок ВПЧ-отрицательный, любые такие изменения можно исключить с большой долей вероятности.
Цитологическая сортировка после положительного теста на ВПЧ: Все женщины впервые прошли тестирование на ВПЧ. ВПЧ-позитивных женщин дополнительно исследуют с помощью обычного мазка Папаниколау или жидкостной цитологии.Женщин с аномальной цитологией обследуют дополнительно, обычно с помощью кольпоскопии, в то время как женщин с нормальной цитологией повторно обследуют с помощью теста на ВПЧ и, возможно, цитологическое исследование по прошествии определенного времени.

Скрининг на основе ВПЧ по сравнению с цитологией

Несколько недавних крупных европейских рандомизированных контролируемых исследований смогли продемонстрировать превосходство скрининга на рак шейки матки на основе ВПЧ по сравнению с цитологией – независимо от того, используется ли обнаружение ВПЧ отдельно или в сочетании с цитологией (см. .). Однако важно рассматривать результаты с точки зрения их специфичности и положительной прогностической ценности (PPV), поскольку это важные параметры для осуществимых программ скрининга.

Таблица 2  Обзор рандомизированных контролируемых исследований по скринингу рака шейки матки путем выявления ВПЧ.

Результаты и комментарии 2 Исследования с интервалом 3 года
исследование Страна Количество пятен Возрастные брюки Возраст (лет) Способ скрининга Способ скрининга Sequence Colposcopy Repeate Дополнительные ресурсы (годы)
Группа HPV
hc2: гибридный тест Capture 2 HPV; ПЦР: обнаружение ВПЧ с помощью ПЦР; LBC: жидкостная цитология; Пап: обычная цитология; против. : против; н. с.: не указано; ICC: инвазивный рак шейки матки; АИС: аденокарцинома in situ
ARTISTIC 15 UK 24 510 20–64 hc2 + LBC LBC 2 исследования с интервалом в 2 года n. с. 4,8 1-й тур: без различий 2-й тур: означ. меньше CIN 2+/CIN 3+ в группе ВПЧ, но небольшая абсолютная разница
Финляндия 16 Финляндия 58 076 30–60 hc2 + Triage Pap Pap 1 исследование, последующее наблюдение в раковом регистре hc2: 7. 2 % Пап: 6,6 % 3,3 1-й раунд: на ⅓ больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ После 3,3 года: ВПЧ: 11 ICC/AIS против Пап: 6 ICC/AIS
фаза 5 Италия 45 174 25-60 25-60 HC2 + LBC PAP 2 исследования с интервалом 3 года HC2: 9,4% PAP: 3.0% 3.5 1-й раунд: 2 × больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ; аналогичное количество ICC2-й раунд: ВПЧ: 0 ICC против Папаниколау: 9 ICC (p = 0.004)Возраст 35–60 лет: 1-й раунд ВПЧ: вдвое больше CIN 2 и 3; 2-й раунд ВПЧ: ок. половина числа CIN 2 и 3
NTCC фаза 2 5 ИТАЛИЯ 49 196 25-60 HC2 PAP 2 расследования с интервалом 3 года
Pobascam 4, 17, 18 Нидерланды 44 105 (1-й раунд)33 499 (2-й раунд) 29–56 ПЦР + Пап Пап 2 исследования с интервалом 90 2 5 лет. 3 %, 1,3 % Пап: 1,3 %, 1,9 % 6,5 1-й раунд: на 24 % больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 28 % меньше CIN 3+ и на 71 % меньше ICC в группе ВПЧ→ с более ранним выявлением ПЦР клинически значимых CIN 2+
Swedescreen 3 SWEDEN 12 527 32-38 PCR + PAP PAP ПЦР: 1.6% 4.1 1-й раунд: 51% больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 42 % меньше CIN 2+ в группе ВПЧ
Индия 19 (слаборазвитый регион, ранее не проводившаяся программа скрининга) 131 746 30–59 одноэтапный скрининг:hc2 vs. Папаниколау в сравнении с осмотром шейки матки с уксусной кислотой в сравнении со «стандартным лечением» hc2: 1,3 %Пап: 4,9 %вдох: 10,8 % 8 относительный риск выявления распространенного рака шейки матки (≥ II) и количество смертность от рака сократилась вдвое с помощью ВПЧ по сравнению с контрольной группой (без Папаниколау или осмотра шейки матки)

В период с 1997 по 2005 год обширная шведская популяционная исследовательская программа Swedescreen оценила 11 различных алгоритмов скрининга, основанных либо только на тестах на ВПЧ, или только на тестах Папаниколау, или на различных комбинациях ВПЧ и Папаниколау.В подгруппе женщин в возрасте 32–38 лет из коллектива Swedescreen продемонстрировано повышение чувствительности на 35 % для выявления CIN 3 и инвазивной карциномы (CIN 3+) в группе, прошедшей «Пап- и типоспецифическую персистенцию ВПЧ». двойное тестирование по сравнению с одним только цитологическим исследованием 3. Положительная прогностическая ценность также была сопоставимой. Но эта стратегия скрининга является дорогостоящей и трудоемкой, поскольку для получения таких хороших результатов скрининга требуется в два раза больше тестов. Другой алгоритм использовал тест на ВПЧ в качестве начального теста с последующей цитологической сортировкой у ВПЧ-положительных женщин с последующим тестированием на персистирующие ВПЧ-инфекции у женщин с отрицательным Папаниколау и сравнивал этот алгоритм с результатами цитологического исследования. в одиночестве.Этот алгоритм достиг увеличения чувствительности на 30% для обнаружения CIN 3 или инвазивной карциномы (CIN 3+). Более того, этот дифференциально-диагностический алгоритм имел сопоставимую положительную прогностическую ценность (PPV), но количество необходимых скрининговых тестов увеличилось только на 12 % (с 6257 до 7019).

Голландское исследование POBASCAM также продемонстрировало более высокую чувствительность комбинированного скрининга по сравнению с только цитологией 4. Было проведено два этапа скрининга с интервалом между фазами 5 лет.В 1-й фазе было выявлено на 24 % больше CIN 2+ в группе, которой выполняли комбинированное цитологическое исследование и ВПЧ-тесты, по сравнению с группой, в которой применяли только цитологию. Во 2-й фазе частота обнаружения CIN 3+ в группе с тестом на ВПЧ была на 28 % ниже, а частота инвазивного рака была на 71 % ниже по сравнению с группой цитологии, несмотря на сопоставимое общее количество CIN 3+ в обеих группах. Эти данные показывают, что комбинированный скрининг может привести к более раннему выявлению клинически значимых интраэпителиальных неоплазий.

Итальянское исследование NTCC показало аналогичные результаты 5. В общей сложности 47 000 женщин были рандомизированы на две группы, при этом 1-я группа подвергалась только цитологическому скринингу, а 2-я группа подвергалась скринингу с использованием цитологии и теста на ВПЧ (позже в ходе исследования цитология не проводилась). сделано у более поздних новобранцев 2-й когорты). Выявление отклонений сопровождалось соответствующей терапией. Через 2 года обе группы повторно прошли цитологический скрининг. При 1-м скрининге в обеих группах было выявлено одинаковое количество инвазивных карцином шейки матки ().Во время 2-го скрининга в группе, прошедшей скрининг с помощью теста на ВПЧ, больше не было обнаружено раковых заболеваний, в то время как в группе цитологического исследования было обнаружено еще 9 раковых заболеваний. Первоначальные цитологические данные во всех 9 случаях с карциномами, обнаруженными при 2-м скрининге, были нормальными.

Плоскоклеточный рак шейки матки pT1b1, N0, G2 после радикальной эндоскопической гистерэктомии и комбинированного синего красителя/технеция 99м радиоколлоидного (интрацервикального) выявления сторожевых лимфатических узлов.

Что касается CIN 2 и CIN 3 (), почти в два раза больше случаев было обнаружено в группе ВПЧ в 1-м раунде скрининга и примерно вдвое меньше во 2-м раунде по сравнению с группой цитологического исследования. Это привело авторов к выводу, что первоначальный скрининг на ВПЧ приводит к лучшему раннему выявлению клинически значимых предраковых поражений. Обнаружение в два раза большего количества CIN 2 и CIN 3 с помощью теста на ВПЧ во время начального раунда скрининга означало, что эти поражения были своевременно вылечены, и было предотвращено прогрессирование в более инвазивные виды рака. Следует предположить, что предраковые поражения, не обнаруженные во время 1-го этапа скрининга в группе цитологии, привели к 9 раковым заболеваниям, обнаруженным при 2-м скрининге.Тем не менее, авторы рекомендуют проводить скрининг, включая тестирование на ВПЧ, только женщинам старше 35 лет с последующей цитологической сортировкой в ​​случаях с положительным результатом на ВПЧ.

Кольпоскопия поражения CIN 2 после аппликации 5 % уксусной кислоты. Вставка показывает диагностическую флуоресцентную визуализацию той же CIN 2 после применения гексаминолевулината.

В 2008 г. Dillner et al. исследовали 6-летний риск развития поражения CIN 3+ в зависимости от статуса врВПЧ и цитологии в многонациональном когортном исследовании 6. В этом исследовании генотипирование ВПЧ не проводилось. Как и ожидалось, врВПЧ-положительные женщины с аномальной цитологией имели самый высокий риск — 34%. У врВПЧ-позитивных женщин с нормальной цитологией частота CIN 3+ через 6 лет составила 10 %, в то время как в обратном случае (т.е. врВПЧ-отрицательная, аномальная цитология) частота составила всего 2,7 %. У женщин с отрицательным статусом по врВПЧ в начале исследования 6-летний риск развития CIN 3+ составлял всего 0,27% — независимо от исходных цитологических данных. Таким образом, авторы пришли к выводу, что если первоначальный результат на врВПЧ был отрицательным, интервал скрининга можно было бы увеличить до 6 лет без дополнительного риска для женщин.

Потенциальный риск для различных типов врВПЧ

Многочисленные ретроспективные и несколько проспективных исследований показали четкие различия между различными генотипами врВПЧ в отношении риска развития CIN или инвазивного рака. В одном из крупнейших ретроспективных исследований женщин с инвазивным раком шейки матки, проведенных во всем мире, de Sanjose et al. смогли определить ДНК ВПЧ в 85 % из более чем 10 000 исследованных случаев 7. ВПЧ 16 был наиболее часто встречающимся генотипом с частотой 61 %, за ним следовали ВПЧ 18 (10 %) и ВПЧ 45 (6 %). %).Более того, женщины, у которых был обнаружен один из этих 3 генотипов ВПЧ, были примерно на 4 года моложе на момент обнаружения рака по сравнению с женщинами, у которых в раковых клетках были определены другие генотипы ВПЧ.

Американское исследование 1213 женщин с карциномой in situ (CIN 3) и 808 женщин с инвазивным раком шейки матки выявило ДНК ВПЧ в 97,1 % поражений CIN 3 и в 91,0 % инвазивных карцином. общий генотип с частотой 56,3 и 53.2 % соответственно. В случаях с ЦИН 3 за ним следовали ВПЧ 31 (12,6%), ВПЧ 33 (8,0%) и ВПЧ 18 (5,9%), а у женщин с инвазивный рак. Это исследование также выявило значительную разницу в возрасте между женщинами с инвазивным раком и положительными на ВПЧ 16 или ВПЧ 18 по сравнению с женщинами с другими генотипами ВПЧ (48,1 и 45,9 года соответственно против 52,3 года).

ВПЧ 16 также играет наиболее важную роль в непосредственных предраковых поражениях.В американском исследовании ALTS ДНК ВПЧ была обнаружена у 98,8% из 608 исследованных женщин с CIN 3–9. 59,9% случаев были положительными на ВПЧ 16. В этом исследовании ВПЧ 18 (13,2%) был только пятым наиболее распространенным генотипом после ВПЧ 31 (18,1%), ВПЧ 52 (14,8%) и ВПЧ 51 (14,0%). Здесь снова предраковые поражения, вызванные ВПЧ 16, возникали у более молодых женщин (23,5 года) по сравнению с поражениями, вызванными другими генотипами (25 лет). Интересно, что ВПЧ 16-положительные поражения CIN 3 чаще встречались у курящих женщин и реже у повторнородящих женщин.

В 2005 г. Khan et al. показали в проспективном когортном исследовании ВПЧ-специфического типа с участием более 20 000 женщин без полноценного цитологического исследования, что женщины с ВПЧ 16 и ВПЧ 18 имели значительно повышенный риск развития CIN 3+ 10. Для женщин, которые были ВПЧ 16 положительными на момент В начале исследования кумулятивная 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 17 %, а для ВПЧ 18-позитивных женщин — 14 %. Для сравнения, риск для других генотипов врВПЧ составлял 3%, а для врВПЧ-отрицательных женщин — всего 1%.Это распределение риска было еще более значительным для женщин старше 30 лет. У ВПЧ-16 положительных женщин в возрасте > 30 лет 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 20 %, в то время как у ВПЧ-18 положительных женщин в возрасте > 30 лет этот показатель составил 10%. -летняя заболеваемость 15 %.

Также была четко продемонстрирована более высокая чувствительность тестов на ВПЧ для скрининга по сравнению с обычным цитологическим исследованием. Авторы сравнивали женщин старше 30 лет с аномальной цитологией независимо от их статуса ВПЧ (LSIL: плоскоклеточные внутриэпителиальные поражения низкой степени; женщины с высокой степенью цитологии не были включены в исследование) с женщинами, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18. в начале исследования.10-летняя частота CIN 3+ в группе с аномальной цитологией составила всего 11% по сравнению с 20% и 15% соответственно в группах с ВПЧ 16 и ВПЧ 18. Более того, было показано, что даже женщины с нормальной цитологией, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18, имели повышенный риск развития ЦИН 3+.

Основываясь на этих данных, авторы выступают за то, чтобы при скрининге женщин старше 20 лет проводились типоспецифические тесты на ВПЧ 16 и ВПЧ 18, и рекомендуют кольпоскопию, если результат положительный. Если результаты положительны для других генотипов врВПЧ, они считают достаточным повторный скрининг через 1 год.

Другое недавно опубликованное последующее исследование того же исследовательского коллектива показало очень низкую кумулятивную вероятность развития CIN 3+ у женщин с отрицательным статусом ВПЧ 11. в возрасте старше 30 лет он составил всего 0,7% за период наблюдения более 15 лет. Повышенный риск развития CIN 3+ у женщин с ВПЧ 16 был вновь подтвержден в этом исследовании. По сравнению с другими генотипами врВПЧ риск у женщин старше 30 лет был более чем в два раза выше (2.7-кратный относительный риск), и по сравнению с ВПЧ-негативностью он был более чем в 6 раз выше (6,2-кратный относительный риск). Чтобы сравнить независимую валидность тестирования на ВПЧ с цитологией, авторы рассчитали соответствующий относительный риск развития CIN 2+ после положительного по сравнению с отрицательным теста на врВПЧ (7,1 для возраста < 30 лет и 8,5 для 30+ лет) и при аномальных (ASC-US/LSIL) по сравнению с нормальной цитологией (NILM) (1,5 для женщин в возрасте до 30 лет и 2,9 для женщин в возрасте 30+). Это ясно показывает более высокую достоверность положительных результатов теста на ВПЧ по сравнению с аномальными результатами цитологического исследования.

Из-за очень высокой отрицательной прогностической ценности (NPV) отрицательного теста на ВПЧ в этом исследовании авторы пришли к выводу, что для женщин старше 30 лет с отрицательным тестом на ВПЧ и нормальной цитологией повторное обследование через 3 года – как в настоящее время является стандартом в США — может быть, это не нужно так рано.

Популяционное проспективное датское когортное исследование, начатое в 1991 г., пришло к аналогичным выводам 12. Около 7500 женщин с нормальной цитологией в начале исследования подверглись 2 гинекологическим исследованиям с мазком Папаниколау и генотипированием врВПЧ с интервалом в 2 года между исследованиями.Начало исследования было определено как время второго исследования. Все граждане Дании имеют личный идентификационный номер, и в стране дополнительно имеется национальная база данных патологий, в которую вносятся все цитологические и гистологические исследования шейки матки. Это позволяет отслеживать такие учебные коллективы практически без отсева и при относительно низких затратах. Оценка результатов исследования проводилась в 2007 г. после максимального периода наблюдения 13,4 года.

Было показано, что у четверти (26 %) женщин, у которых во 2-м исследовании был обнаружен ВПЧ 16, в период наблюдения развилось поражение CIN 3+.Для ВПЧ 18 заболеваемость составила 15,4%. Цифры были намного ниже для других генотипов врВПЧ (ВПЧ 33: 12,8%; ВПЧ 31: 9,8%; ВПЧ 35: 9,1%; ВПЧ 58: 8,3%; ВПЧ 45: 6,4%). Для врВПЧ-отрицательных женщин риск CIN 3+ через 12 лет составил 3,0 %.

Взятие 2 мазков из шейки матки с интервалом в 2 года позволило авторам оценить влияние персистирующей ВПЧ-инфекции. ВПЧ 16, 31, 33, 35, 52 и 58 имели самую высокую распространенность в начале исследования, более высокую степень персистенции и более высокий потенциал, если они персистируют, привести к поражению CIN 3+.Таким образом, 29,4 % ВПЧ-16-инфекций были персистирующими, т.е. ВПЧ-16 выявлялся при обоих исследованиях, а у 46 % женщин с персистирующей ВПЧ-16-инфекцией развилась CIN 3+. Интересно, что 12-летний риск CIN 3+ у женщин, у которых врВПЧ был обнаружен в обоих исследованиях с использованием hc2, составил 19,3%, независимо от генотипа ВПЧ, и, таким образом, аналогичен риску, зарегистрированному для женщин, у которых ВПЧ 16 был обнаружен один раз (17,3). %).

В 2011 году при анализе подгрупп исследования ATHENA HPV у женщин с цитологией ASCUS (атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения) Stoler et al. обнаружили четкую корреляцию между уровнем положительных результатов на ВПЧ 16 и/или ВПЧ 18 и более тяжелой степенью ЦИН 13. Два генотипа ВПЧ были обнаружены только у 8% женщин без ЦИН, но в 18% случаев с ЦИН 1, 44 % случаев с CIN 2 и 61 % случаев с CIN 3+. Абсолютный риск CIN 3+ составил 20 % для женщин, инфицированных ВПЧ 16. По сравнению с ВПЧ-отрицательными женщинами относительный риск CIN 3+ составил 70,9 для ВПЧ-16-позитивных женщин и 15,4 для ВПЧ-18-позитивных женщин. Относительный риск для 12 других генотипов врВПЧ составлял всего 15.всего 7. Когда ВПЧ 16 сравнивали с этими 12 другими генотипами врВПЧ, ВПЧ 16 по-прежнему имел относительный риск 4,5.

Обсуждение

Представленные здесь исследования ясно показывают потенциал ВПЧ-тестов для скрининга рака шейки матки. С одной стороны, отрицательный результат, особенно у женщин старше 30 лет, дает высокую степень уверенности в том, что у них вряд ли разовьется CIN 3+ в течение нескольких лет. Для этих женщин увеличение интервалов между скринингами, рекомендованное некоторыми авторами, безусловно, оправдано. Ввиду необходимости снижения затрат в здравоохранении сегодня это особенно актуально.

Надлежащее ведение женщин с положительным результатом теста на врВПЧ является более сложной задачей. Необходима дифференцированная оценка в каждом конкретном случае, которая также учитывает данные цитологического исследования. Генотипирование ВПЧ также дает преимущества для оценки индивидуального риска развития CIN 3+ у ВПЧ-положительной женщины в будущем. Во всех цитируемых здесь исследованиях было обнаружено, что ВПЧ 16 является генотипом с самым высоким онкогенным потенциалом среди генотипов врВПЧ.Дело было не только в том, что в большинстве случаев ВПЧ 16 обнаруживался у женщин с CIN 3 или карциномой; проспективно, инфицирование ВПЧ 16 чаще приводило к развитию интраэпителиальной неоплазии, чем другие генотипы врВПЧ. Возраст, в котором заразились ВПЧ 16, также был ниже, чем возраст, в котором женщины были инфицированы другими генотипами врВПЧ.

Исследования не пришли к какому-либо последовательному заключению в отношении других генотипов врВПЧ, несомненно, также из-за региональных различий. В дополнение к ВПЧ 18 наиболее важные генотипы после ВПЧ 16, ВПЧ 31, 33 и 45, в частности, по-видимому, связаны с несколько более высоким риском. Кроме того, генотипирование ВПЧ также позволяет окончательно идентифицировать женщин с персистирующей инфекцией, что является значительным фактором риска развития поражений более высокой степени.

В клинической практике это может означать, что женщины с положительным результатом на ВПЧ 16 и, возможно, также женщины с положительным результатом на ВПЧ 18 могут проходить кольпоскопию и наблюдаться более тщательно, чем женщины с другими генотипами врВПЧ.Тем не менее, важно иметь в виду, что долгосрочный риск развития CIN 3+ составляет всего 20–25%, в зависимости от исследования, после первого выявления ВПЧ 16 10,12,13. 16 ВПЧ-позитивных женщин это влечет за собой ненужные дополнительные исследования. Однако, если ВПЧ 16 сохраняется, риск развития поражения CIN 3+ возрастает почти до 50% 12. Более интенсивное ведение женщин, положительных на ВПЧ 16, ложится бременем на пациентов и врачей и, очевидно, также сопровождается более высокими затратами на лечение. Могут ли эти дополнительные расходы быть компенсированы за счет сокращения количества проверок, требуемых ВПЧ-отрицательных женщин еще предстоит увидеть.

При интерпретации цитируемых исследований также важно помнить, что результаты, полученные в некоторых случаях, не могут быть легко перенесены в немецкую систему раннего выявления, так как другие страны уже используют значительно более длительные интервалы скрининга в рамках организованной программы скрининга. Например, в голландском исследовании POBASCAM интервал между двумя исследованиями составлял 5 лет, тогда как в итальянском исследовании NTCC интервал составлял 2 года.

Представленные здесь данные вскоре могут иметь практическое значение в Нидерландах. В мае 2011 года Совет по здравоохранению Нидерландов, консультирующий правительство Нидерландов, пересмотрел свои рекомендации по скринингу рака шейки матки. В новых рекомендациях предлагается проводить первичный скрининг на ВПЧ, при этом в течение жизни женщины делается около 5 тестов: первый в 30 лет, затем в 35, 40, 50 и 60 лет. ВПЧ-положительные женщины будут дополнительно исследованы с помощью цитологического сортирования 14.

Резюме

Таким образом, становится ясно, что включение тестирования на ВПЧ в программу скрининга рака шейки матки дает высокую степень достоверности. Для ВПЧ-отрицательных женщин интервалы между исследованиями могут быть увеличены. Генотипирование ВПЧ в настоящее время обсуждается с целью лучшей стратификации риска и выявления женщин с повышенным риском, которым потребуется более интенсивный мониторинг.

Сноски

Конфликт интересов М. Йенчке получил от Abbott GmbH & Co гонорары за выступления и транспортные расходы.КГ, Висбаден.

Ссылки

1. Poljak M, Kocjan B J. Коммерчески доступные тесты для мультиплексного обнаружения альфа-вирусов папилломы человека. Expert Rev Anti Infect Ther. 2010;8:1139–1162. [PubMed] [Google Scholar]2. Мейер С. Дж., Беркхоф Дж., Касл П. Э. и др. Руководство по требованиям к тесту ДНК на вирус папилломы человека для первичного скрининга рака шейки матки у женщин 30 лет и старше. Инт Джей Рак. 2009; 124: 516–520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Науклер П., Райд В., Торнберг С.и др. Эффективность тестирования ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой и/или повторным тестированием ДНК ВПЧ при первичном скрининге рака шейки матки. J Natl Cancer Inst. 2009; 101:88–99. [PubMed] [Google Scholar]4. Балкманс Н.В., Беркхоф Дж., Розендал Л. и др. Тестирование ДНК вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени и рака: 5-летнее наблюдение за рандомизированным контролируемым исследованием внедрения. Ланцет. 2007; 370:1764–1772. [PubMed] [Google Scholar]5. Ронко Г., Джорджи-Росси П., Кароцци Ф. и др.Эффективность тестирования на вирус папилломы человека для выявления инвазивного рака шейки матки и внутриэпителиальной неоплазии шейки матки: рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет Онкол. 2010; 11: 249–257. [PubMed] [Google Scholar]6. Dillner J, Rebolj M, Birembaut P. et al. Долгосрочные прогностические значения цитологии и тестирования на вирус папилломы человека при скрининге рака шейки матки: совместное европейское когортное исследование. БМЖ. 2008; 337: а1754. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]7. de Sanjose S, Quint WG, Alemany L. et al. Атрибуция генотипа вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки: ретроспективное кросс-секционное всемирное исследование.Ланцет Онкол. 2010; 11:1048–1056. [PubMed] [Google Scholar]8. Wheeler C M, Hunt WC, Joste N E. и др. Распределение генотипов вируса папилломы человека: значение для вакцинации и скрининга рака в Соединенных Штатах. J Natl Cancer Inst. 2009; 101: 475–487. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Castle PE, Schiffman M, Wheeler C M. et al. Генотипы вируса папилломы человека при цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени. Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2010;19:1675–1681. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10.Хан М.Дж., Кастл П.Е., Лоринц А.Т. и др. Повышенный 10-летний риск предрака и рака шейки матки у женщин с вирусом папилломы человека (ВПЧ) типа 16 или 18 и возможная полезность тестирования на типоспецифический ВПЧ в клинической практике. J Natl Cancer Inst. 2005; 97: 1072–1079. [PubMed] [Google Scholar] 11. Шиффман М., Гласс А.Г., Венценсен Н. и др. Долгосрочное проспективное исследование типоспецифической папилломавирусной инфекции человека и риска неоплазии шейки матки среди 20 000 женщин в когортном исследовании Portland Kaiser.Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2011;20:1398–1409. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. Kjaer S K, Frederiksen K, Munk C. et al. Долгосрочный абсолютный риск цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени или хуже после инфицирования вирусом папилломы человека: роль персистенции. J Natl Cancer Inst. 2010; 102:1478–1488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]13. Stoler M H, Wright TC jr., Sharma A. et al. Тестирование на вирус папилломы человека высокого риска у женщин с цитологией ASC-US: результаты исследования ATHENA HPV.Ам Джей Клин Патол. 2011; 135: 468–475. [PubMed] [Google Scholar] 14. Совет здравоохранения Нидерландов. Скрининг населения на рак шейки матки. 2011/07. ISBN 978-90-5549-841-3 Гаага: 2011 [Google Scholar] 15. Kitchener HC Almonte M Gilham C et al.ARTISTIC: рандомизированное исследование тестирования на вирус папилломы человека (ВПЧ) при первичном скрининге шейки матки Health Technol Assess 2009131–150.iii–iv [PubMed] [Google Scholar]16. Анттила А., Котаниеми-Талонен Л., Лейнонен М. и др. Частота рака шейки матки, тяжелой внутриэпителиальной неоплазии и аденокарциномы in situ при первичном скрининге ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой: рандомизированное исследование в рамках организованной программы скрининга.БМЖ. 2010;340:c1804. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]17. Bulkmans NW, Rozendaal L, Snijders PJ. et al. POBASCAM, популяционное рандомизированное контролируемое исследование по внедрению тестирования на ВПЧ высокого риска при скрининге шейки матки: дизайн, методы и исходные данные 44 102 женщин. Инт Джей Рак. 2004; 110:94–101. [PubMed] [Google Scholar] 18. Rijkaart DC, Berkhof J, Rozendaal L. et al. Тестирование вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии и рака высокой степени: окончательные результаты рандомизированного контролируемого исследования POBASCAM.Ланцет Онкол. 2012; 13:78–88. [PubMed] [Google Scholar] 19. Санкаранараянан Р., Нене Б.М., Шастри С.С. и др. Скрининг ВПЧ на рак шейки матки в сельских районах Индии. N Engl J Med. 2009; 360:1385–1394. [PubMed] [Google Scholar]

Важность генотипирования ВПЧ для скрининга, терапии и лечения неоплазии шейки матки

Geburtshilfe Frauenheilkd. 2012 июнь; 72(6): 507–512.

Язык: английский | German

M. Jentschke

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

P.Soergel

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

P. Hillemanns

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

, Ганноверская медицинская школа им. Пересмотрено 23 апреля 2012 г.; Принят 4 мая 2012 г.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

В последнее десятилетие выявление вирусов папилломы человека (ВПЧ) приобретает все большее значение при скрининге рака шейки матки и лечении предшественников рака. Скрининг на ВПЧ рекомендуется для дальнейшей оценки отклонений от нормы Пап-теста или во время последующего наблюдения после лечения предраковых поражений. Несколько рандомизированных контролируемых исследований показали, что скрининг рака шейки матки с использованием обнаружения ВПЧ может быть более эффективным, чем только цитологическое исследование.Генотипирование различных типов ВПЧ высокого риска (врВПЧ), полученных с помощью тестов мазка, еще не получило широкого распространения в клинической практике. Однако были отмечены значительные различия в онкогенности генотипов врВПЧ. ВПЧ 16 на сегодняшний день является наиболее распространенным и онкогенным генотипом. Генотипирование врВПЧ может быть полезным для стратификации риска у ВПЧ-позитивных женщин.

Ключевые слова: рак шейки матки, цервикальная институтная неоплазия (CIN), человеческий папилломавирус

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

der Nachweis Passherer Papillomviren (HPV) IM Rahmen der Vorsorge und undlung des zervixkarzinom und unsbesondere seiner vorstufen шляпа в Ден Верганген Jahren zunehmend Bedeutung gewonnen.Die HPV-Bestimmung wird beispielsweise zur weiteren Abklärung auffälliger Pap-Abstriche oder in der Nachsorge nach Behandlung präinviver Veränderungen empfohlen. Mehrere randomisierte kontrollierte Studien konnten zudem eine Überlegenheit gegenüber einem reinen Zytologie-Screening zeigen. Die Typisierung der unterschiedlichen Hochrisiko-HPV-Typen aus Abstrichproben hat dagegen erst in geringerem Maße Anwendung in der Praxis gefunden. Es zeigen sich jedoch große Unterschiede in der onkogenen Potenz und Relevanz der unterschiedlichen Genotypen.HPV 16 шляпа zahlenmäßig und auch prospektiv mit Abstand die höchste Bedeutung für die Entstehung zervikaler Neoplasien. Die Genotypisierung kann daher für eine bessere Risikostratifizierung HPV-positive Frauen hilfreich sein.

Schlüsselwörter: Zervixkarzinom, Zervixpräkanzerose, Humane Papillomviren

Введение

Роль выявления ВПЧ в скрининге рака шейки матки до сих пор вызывает споры в Германии. Одной из двух основных тем прошлогодней конференции EUROGIN (Европейская исследовательская организация по генитальным инфекциям и новообразованиям), состоявшейся в Лиссабоне в мае 2011 г., была – помимо вакцинации против ВПЧ – важность обнаружения ВПЧ.Четырехдневная конференция в меньшей степени сосредоточилась на вопросе о том, следует ли проводить тестирование на ВПЧ в рамках скрининга рака. Вместо этого во многих статьях основное внимание уделялось возможности более дифференцированной оценки инфекции ВПЧ на основе подтверждения отдельных генотипов ВПЧ высокого риска (hrHPV).

Процедуры тестирования на ВПЧ и генотипирования

После одобрения Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) в 2003 г. тест Hybrid Capture 2 (hc2; Qiagen, Hilden, Germany) стал стандартным тестом для выявления ВПЧ. в клинической практике почти 10 лет.Тест позволяет выявить 13 генотипов врВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68) и основан на гибридизации ДНК ВПЧ с РНК ВПЧ. Связи ДНК-РНК маркируют антителами и выявляют с помощью хемилюминесценции. Однако тест не различает отдельные генотипы ВПЧ. Результаты представлены либо как положительные по врВПЧ, либо как отрицательные по врВПЧ. Анализ также можно использовать для выявления генотипов ВПЧ низкого риска (lrHPV). Преимуществом теста hc2 является его давнее и широкое применение в клинической практике; недостатком является возможность перекрестной реактивности с другими, обычно генотипами лрВПЧ, что может привести к ложноположительным результатам 1.

За последнее десятилетие на рынке появились многочисленные новые тесты на врВПЧ, основанные на обнаружении ДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Эти тесты обычно позволяют выявить любой из 14 генотипов врВПЧ (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68). Более того, некоторые из них предлагают возможность отдельного определения индивидуального генотипа hrHPV. Как правило, наиболее часто выявляемыми генотипами являются ВПЧ 16 и 18, а некоторые производители также предлагают тесты, позволяющие выявлять и другие генотипы.В принципе, с помощью ПЦР можно обнаружить даже очень небольшое количество вирусной ДНК. Однако такие высокочувствительные методы обнаружения не имеют значения в рутинной клинической диагностике, поскольку они часто выявляют инфекции ВПЧ, не имеющие клинической значимости (ср. ). Поэтому наиболее распространенные коммерческие тесты на основе ПЦР соответствующим образом адаптировали свои пороги обнаружения. Недостатком методов ПЦР является ограниченный клинический опыт. хотя в последние годы были проведены многочисленные исследования этих тестов 1,2.

Чувствительность Количество лиц с заболеванием (в данном случае женщин с высокой степенью CIN), которые были правильно идентифицированы с помощью используемого метода тестирования (тест на ВПЧ или цитологический мазок) как имеющие заболевание по сравнению с общим числом лиц с заболеванием.
Специфичность Количество здоровых людей, которые были правильно идентифицированы тест-методом как здоровые, по сравнению с общим числом здоровых людей в исследовании.
Тест с максимальной чувствительностью выявит всех больных: чувствительность теста будет 100 %. Однако такой тест обычно имеет низкую специфичность, т.е. много ложноположительных результатов.
Положительное прогностическое значение (PPV): Количество лиц с фактическим заболеванием из всех лиц с положительными результатами теста. У более молодых женщин тест на ВПЧ имеет относительно низкий PPV для высокой степени CIN, так как многие транзиторные инфекции ВПЧ могут возникать в этой возрастной группе без диспластических изменений шейки матки.
Отрицательная прогностическая ценность (NPV): Количество фактически здоровых лиц среди всех лиц с отрицательными результатами теста. NPV правильно проведенного теста на ВПЧ очень высок, так как рак шейки матки или поражения CIN высокой степени не являются ВПЧ-отрицательными; если мазок ВПЧ-отрицательный, любые такие изменения можно исключить с большой долей вероятности.
Цитологическая сортировка после положительного теста на ВПЧ: Все женщины впервые прошли тестирование на ВПЧ. ВПЧ-позитивных женщин дополнительно исследуют с помощью обычного мазка Папаниколау или жидкостной цитологии.Женщин с аномальной цитологией обследуют дополнительно, обычно с помощью кольпоскопии, в то время как женщин с нормальной цитологией повторно обследуют с помощью теста на ВПЧ и, возможно, цитологическое исследование по прошествии определенного времени.

Скрининг на основе ВПЧ по сравнению с цитологией

Несколько недавних крупных европейских рандомизированных контролируемых исследований смогли продемонстрировать превосходство скрининга на рак шейки матки на основе ВПЧ по сравнению с цитологией – независимо от того, используется ли обнаружение ВПЧ отдельно или в сочетании с цитологией (см. .). Однако важно рассматривать результаты с точки зрения их специфичности и положительной прогностической ценности (PPV), поскольку это важные параметры для осуществимых программ скрининга.

Таблица 2  Обзор рандомизированных контролируемых исследований по скринингу рака шейки матки путем выявления ВПЧ.

Результаты и комментарии 2 Исследования с интервалом 3 года
исследование Страна Количество пятен Возрастные брюки Возраст (лет) Способ скрининга Способ скрининга Sequence Colposcopy Repeate Дополнительные ресурсы (годы)
Группа HPV
hc2: гибридный тест Capture 2 HPV; ПЦР: обнаружение ВПЧ с помощью ПЦР; LBC: жидкостная цитология; Пап: обычная цитология; против.: против; н. с.: не указано; ICC: инвазивный рак шейки матки; АИС: аденокарцинома in situ
ARTISTIC 15 UK 24 510 20–64 hc2 + LBC LBC 2 исследования с интервалом в 2 года n. с. 4,8 1-й тур: без различий 2-й тур: означ. меньше CIN 2+/CIN 3+ в группе ВПЧ, но небольшая абсолютная разница
Финляндия 16 Финляндия 58 076 30–60 hc2 + Triage Pap Pap 1 исследование, последующее наблюдение в раковом регистре hc2: 7.2 % Пап: 6,6 % 3,3 1-й раунд: на ⅓ больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ После 3,3 года: ВПЧ: 11 ICC/AIS против Пап: 6 ICC/AIS
фаза 5 Италия 45 174 25-60 25-60 HC2 + LBC PAP 2 исследования с интервалом 3 года HC2: 9,4% PAP: 3.0% 3.5 1-й раунд: 2 × больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ; аналогичное количество ICC2-й раунд: ВПЧ: 0 ICC против Папаниколау: 9 ICC (p = 0.004)Возраст 35–60 лет: 1-й раунд ВПЧ: вдвое больше CIN 2 и 3; 2-й раунд ВПЧ: ок. половина числа CIN 2 и 3
NTCC фаза 2 5 ИТАЛИЯ 49 196 25-60 HC2 PAP 2 расследования с интервалом 3 года
Pobascam 4, 17, 18 Нидерланды 44 105 (1-й раунд)33 499 (2-й раунд) 29–56 ПЦР + Пап Пап 2 исследования с интервалом 90 2 5 лет.3 %, 1,3 % Пап: 1,3 %, 1,9 % 6,5 1-й раунд: на 24 % больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 28 % меньше CIN 3+ и на 71 % меньше ICC в группе ВПЧ→ с более ранним выявлением ПЦР клинически значимых CIN 2+
Swedescreen 3 SWEDEN 12 527 32-38 PCR + PAP PAP ПЦР: 1.6% 4.1 1-й раунд: 51% больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 42 % меньше CIN 2+ в группе ВПЧ
Индия 19 (слаборазвитый регион, ранее не проводившаяся программа скрининга) 131 746 30–59 одноэтапный скрининг:hc2 vs.Папаниколау в сравнении с осмотром шейки матки с уксусной кислотой в сравнении со «стандартным лечением» hc2: 1,3 %Пап: 4,9 %вдох: 10,8 % 8 относительный риск выявления распространенного рака шейки матки (≥ II) и количество смертность от рака сократилась вдвое с помощью ВПЧ по сравнению с контрольной группой (без Папаниколау или осмотра шейки матки)

В период с 1997 по 2005 год обширная шведская популяционная исследовательская программа Swedescreen оценила 11 различных алгоритмов скрининга, основанных либо только на тестах на ВПЧ, или только на тестах Папаниколау, или на различных комбинациях ВПЧ и Папаниколау.В подгруппе женщин в возрасте 32–38 лет из коллектива Swedescreen продемонстрировано повышение чувствительности на 35 % для выявления CIN 3 и инвазивной карциномы (CIN 3+) в группе, прошедшей «Пап- и типоспецифическую персистенцию ВПЧ». двойное тестирование по сравнению с одним только цитологическим исследованием 3. Положительная прогностическая ценность также была сопоставимой. Но эта стратегия скрининга является дорогостоящей и трудоемкой, поскольку для получения таких хороших результатов скрининга требуется в два раза больше тестов. Другой алгоритм использовал тест на ВПЧ в качестве начального теста с последующей цитологической сортировкой у ВПЧ-положительных женщин с последующим тестированием на персистирующие ВПЧ-инфекции у женщин с отрицательным Папаниколау и сравнивал этот алгоритм с результатами цитологического исследования. в одиночестве.Этот алгоритм достиг увеличения чувствительности на 30% для обнаружения CIN 3 или инвазивной карциномы (CIN 3+). Более того, этот дифференциально-диагностический алгоритм имел сопоставимую положительную прогностическую ценность (PPV), но количество необходимых скрининговых тестов увеличилось только на 12 % (с 6257 до 7019).

Голландское исследование POBASCAM также продемонстрировало более высокую чувствительность комбинированного скрининга по сравнению с только цитологией 4. Было проведено два этапа скрининга с интервалом между фазами 5 лет.В 1-й фазе было выявлено на 24 % больше CIN 2+ в группе, которой выполняли комбинированное цитологическое исследование и ВПЧ-тесты, по сравнению с группой, в которой применяли только цитологию. Во 2-й фазе частота обнаружения CIN 3+ в группе с тестом на ВПЧ была на 28 % ниже, а частота инвазивного рака была на 71 % ниже по сравнению с группой цитологии, несмотря на сопоставимое общее количество CIN 3+ в обеих группах. Эти данные показывают, что комбинированный скрининг может привести к более раннему выявлению клинически значимых интраэпителиальных неоплазий.

Итальянское исследование NTCC показало аналогичные результаты 5. В общей сложности 47 000 женщин были рандомизированы на две группы, при этом 1-я группа подвергалась только цитологическому скринингу, а 2-я группа подвергалась скринингу с использованием цитологии и теста на ВПЧ (позже в ходе исследования цитология не проводилась). сделано у более поздних новобранцев 2-й когорты). Выявление отклонений сопровождалось соответствующей терапией. Через 2 года обе группы повторно прошли цитологический скрининг. При 1-м скрининге в обеих группах было выявлено одинаковое количество инвазивных карцином шейки матки ().Во время 2-го скрининга в группе, прошедшей скрининг с помощью теста на ВПЧ, больше не было обнаружено раковых заболеваний, в то время как в группе цитологического исследования было обнаружено еще 9 раковых заболеваний. Первоначальные цитологические данные во всех 9 случаях с карциномами, обнаруженными при 2-м скрининге, были нормальными.

Плоскоклеточный рак шейки матки pT1b1, N0, G2 после радикальной эндоскопической гистерэктомии и комбинированного синего красителя/технеция 99м радиоколлоидного (интрацервикального) выявления сторожевых лимфатических узлов.

Что касается CIN 2 и CIN 3 (), почти в два раза больше случаев было обнаружено в группе ВПЧ в 1-м раунде скрининга и примерно вдвое меньше во 2-м раунде по сравнению с группой цитологического исследования.Это привело авторов к выводу, что первоначальный скрининг на ВПЧ приводит к лучшему раннему выявлению клинически значимых предраковых поражений. Обнаружение в два раза большего количества CIN 2 и CIN 3 с помощью теста на ВПЧ во время начального раунда скрининга означало, что эти поражения были своевременно вылечены, и было предотвращено прогрессирование в более инвазивные виды рака. Следует предположить, что предраковые поражения, не обнаруженные во время 1-го этапа скрининга в группе цитологии, привели к 9 раковым заболеваниям, обнаруженным при 2-м скрининге.Тем не менее, авторы рекомендуют проводить скрининг, включая тестирование на ВПЧ, только женщинам старше 35 лет с последующей цитологической сортировкой в ​​случаях с положительным результатом на ВПЧ.

Кольпоскопия поражения CIN 2 после аппликации 5 % уксусной кислоты. Вставка показывает диагностическую флуоресцентную визуализацию той же CIN 2 после применения гексаминолевулината.

В 2008 г. Dillner et al. исследовали 6-летний риск развития поражения CIN 3+ в зависимости от статуса врВПЧ и цитологии в многонациональном когортном исследовании 6.В этом исследовании генотипирование ВПЧ не проводилось. Как и ожидалось, врВПЧ-положительные женщины с аномальной цитологией имели самый высокий риск — 34%. У врВПЧ-позитивных женщин с нормальной цитологией частота CIN 3+ через 6 лет составила 10 %, в то время как в обратном случае (т.е. врВПЧ-отрицательная, аномальная цитология) частота составила всего 2,7 %. У женщин с отрицательным статусом по врВПЧ в начале исследования 6-летний риск развития CIN 3+ составлял всего 0,27% — независимо от исходных цитологических данных. Таким образом, авторы пришли к выводу, что если первоначальный результат на врВПЧ был отрицательным, интервал скрининга можно было бы увеличить до 6 лет без дополнительного риска для женщин.

Потенциальный риск для различных типов врВПЧ

Многочисленные ретроспективные и несколько проспективных исследований показали четкие различия между различными генотипами врВПЧ в отношении риска развития CIN или инвазивного рака. В одном из крупнейших ретроспективных исследований женщин с инвазивным раком шейки матки, проведенных во всем мире, de Sanjose et al. смогли определить ДНК ВПЧ в 85 % из более чем 10 000 исследованных случаев 7. ВПЧ 16 был наиболее часто встречающимся генотипом с частотой 61 %, за ним следовали ВПЧ 18 (10 %) и ВПЧ 45 (6 %). %).Более того, женщины, у которых был обнаружен один из этих 3 генотипов ВПЧ, были примерно на 4 года моложе на момент обнаружения рака по сравнению с женщинами, у которых в раковых клетках были определены другие генотипы ВПЧ.

Американское исследование 1213 женщин с карциномой in situ (CIN 3) и 808 женщин с инвазивным раком шейки матки выявило ДНК ВПЧ в 97,1 % поражений CIN 3 и в 91,0 % инвазивных карцином. общий генотип с частотой 56,3 и 53.2 % соответственно. В случаях с ЦИН 3 за ним следовали ВПЧ 31 (12,6%), ВПЧ 33 (8,0%) и ВПЧ 18 (5,9%), а у женщин с инвазивный рак. Это исследование также выявило значительную разницу в возрасте между женщинами с инвазивным раком и положительными на ВПЧ 16 или ВПЧ 18 по сравнению с женщинами с другими генотипами ВПЧ (48,1 и 45,9 года соответственно против 52,3 года).

ВПЧ 16 также играет наиболее важную роль в непосредственных предраковых поражениях.В американском исследовании ALTS ДНК ВПЧ была обнаружена у 98,8% из 608 исследованных женщин с CIN 3–9. 59,9% случаев были положительными на ВПЧ 16. В этом исследовании ВПЧ 18 (13,2%) был только пятым наиболее распространенным генотипом после ВПЧ 31 (18,1%), ВПЧ 52 (14,8%) и ВПЧ 51 (14,0%). Здесь снова предраковые поражения, вызванные ВПЧ 16, возникали у более молодых женщин (23,5 года) по сравнению с поражениями, вызванными другими генотипами (25 лет). Интересно, что ВПЧ 16-положительные поражения CIN 3 чаще встречались у курящих женщин и реже у повторнородящих женщин.

В 2005 г. Khan et al. показали в проспективном когортном исследовании ВПЧ-специфического типа с участием более 20 000 женщин без полноценного цитологического исследования, что женщины с ВПЧ 16 и ВПЧ 18 имели значительно повышенный риск развития CIN 3+ 10. Для женщин, которые были ВПЧ 16 положительными на момент В начале исследования кумулятивная 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 17 %, а для ВПЧ 18-позитивных женщин — 14 %. Для сравнения, риск для других генотипов врВПЧ составлял 3%, а для врВПЧ-отрицательных женщин — всего 1%.Это распределение риска было еще более значительным для женщин старше 30 лет. У ВПЧ-16 положительных женщин в возрасте > 30 лет 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 20 %, в то время как у ВПЧ-18 положительных женщин в возрасте > 30 лет этот показатель составил 10%. -летняя заболеваемость 15 %.

Также была четко продемонстрирована более высокая чувствительность тестов на ВПЧ для скрининга по сравнению с обычным цитологическим исследованием. Авторы сравнивали женщин старше 30 лет с аномальной цитологией независимо от их статуса ВПЧ (LSIL: плоскоклеточные внутриэпителиальные поражения низкой степени; женщины с высокой степенью цитологии не были включены в исследование) с женщинами, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18. в начале исследования.10-летняя частота CIN 3+ в группе с аномальной цитологией составила всего 11% по сравнению с 20% и 15% соответственно в группах с ВПЧ 16 и ВПЧ 18. Более того, было показано, что даже женщины с нормальной цитологией, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18, имели повышенный риск развития ЦИН 3+.

Основываясь на этих данных, авторы выступают за то, чтобы при скрининге женщин старше 20 лет проводились типоспецифические тесты на ВПЧ 16 и ВПЧ 18, и рекомендуют кольпоскопию, если результат положительный. Если результаты положительны для других генотипов врВПЧ, они считают достаточным повторный скрининг через 1 год.

Другое недавно опубликованное последующее исследование того же исследовательского коллектива показало очень низкую кумулятивную вероятность развития CIN 3+ у женщин с отрицательным статусом ВПЧ 11. в возрасте старше 30 лет он составил всего 0,7% за период наблюдения более 15 лет. Повышенный риск развития CIN 3+ у женщин с ВПЧ 16 был вновь подтвержден в этом исследовании. По сравнению с другими генотипами врВПЧ риск у женщин старше 30 лет был более чем в два раза выше (2.7-кратный относительный риск), и по сравнению с ВПЧ-негативностью он был более чем в 6 раз выше (6,2-кратный относительный риск). Чтобы сравнить независимую валидность тестирования на ВПЧ с цитологией, авторы рассчитали соответствующий относительный риск развития CIN 2+ после положительного по сравнению с отрицательным теста на врВПЧ (7,1 для возраста < 30 лет и 8,5 для 30+ лет) и при аномальных (ASC-US/LSIL) по сравнению с нормальной цитологией (NILM) (1,5 для женщин в возрасте до 30 лет и 2,9 для женщин в возрасте 30+). Это ясно показывает более высокую достоверность положительных результатов теста на ВПЧ по сравнению с аномальными результатами цитологического исследования.

Из-за очень высокой отрицательной прогностической ценности (NPV) отрицательного теста на ВПЧ в этом исследовании авторы пришли к выводу, что для женщин старше 30 лет с отрицательным тестом на ВПЧ и нормальной цитологией повторное обследование через 3 года – как в настоящее время является стандартом в США — может быть, это не нужно так рано.

Популяционное проспективное датское когортное исследование, начатое в 1991 г., пришло к аналогичным выводам 12. Около 7500 женщин с нормальной цитологией в начале исследования подверглись 2 гинекологическим исследованиям с мазком Папаниколау и генотипированием врВПЧ с интервалом в 2 года между исследованиями.Начало исследования было определено как время второго исследования. Все граждане Дании имеют личный идентификационный номер, и в стране дополнительно имеется национальная база данных патологий, в которую вносятся все цитологические и гистологические исследования шейки матки. Это позволяет отслеживать такие учебные коллективы практически без отсева и при относительно низких затратах. Оценка результатов исследования проводилась в 2007 г. после максимального периода наблюдения 13,4 года.

Было показано, что у четверти (26 %) женщин, у которых во 2-м исследовании был обнаружен ВПЧ 16, в период наблюдения развилось поражение CIN 3+.Для ВПЧ 18 заболеваемость составила 15,4%. Цифры были намного ниже для других генотипов врВПЧ (ВПЧ 33: 12,8%; ВПЧ 31: 9,8%; ВПЧ 35: 9,1%; ВПЧ 58: 8,3%; ВПЧ 45: 6,4%). Для врВПЧ-отрицательных женщин риск CIN 3+ через 12 лет составил 3,0 %.

Взятие 2 мазков из шейки матки с интервалом в 2 года позволило авторам оценить влияние персистирующей ВПЧ-инфекции. ВПЧ 16, 31, 33, 35, 52 и 58 имели самую высокую распространенность в начале исследования, более высокую степень персистенции и более высокий потенциал, если они персистируют, привести к поражению CIN 3+.Таким образом, 29,4 % ВПЧ-16-инфекций были персистирующими, т.е. ВПЧ-16 выявлялся при обоих исследованиях, а у 46 % женщин с персистирующей ВПЧ-16-инфекцией развилась CIN 3+. Интересно, что 12-летний риск CIN 3+ у женщин, у которых врВПЧ был обнаружен в обоих исследованиях с использованием hc2, составил 19,3%, независимо от генотипа ВПЧ, и, таким образом, аналогичен риску, зарегистрированному для женщин, у которых ВПЧ 16 был обнаружен один раз (17,3). %).

В 2011 году при анализе подгрупп исследования ATHENA HPV у женщин с цитологией ASCUS (атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения) Stoler et al.обнаружили четкую корреляцию между уровнем положительных результатов на ВПЧ 16 и/или ВПЧ 18 и более тяжелой степенью ЦИН 13. Два генотипа ВПЧ были обнаружены только у 8% женщин без ЦИН, но в 18% случаев с ЦИН 1, 44 % случаев с CIN 2 и 61 % случаев с CIN 3+. Абсолютный риск CIN 3+ составил 20 % для женщин, инфицированных ВПЧ 16. По сравнению с ВПЧ-отрицательными женщинами относительный риск CIN 3+ составил 70,9 для ВПЧ-16-позитивных женщин и 15,4 для ВПЧ-18-позитивных женщин. Относительный риск для 12 других генотипов врВПЧ составлял всего 15.всего 7. Когда ВПЧ 16 сравнивали с этими 12 другими генотипами врВПЧ, ВПЧ 16 по-прежнему имел относительный риск 4,5.

Обсуждение

Представленные здесь исследования ясно показывают потенциал ВПЧ-тестов для скрининга рака шейки матки. С одной стороны, отрицательный результат, особенно у женщин старше 30 лет, дает высокую степень уверенности в том, что у них вряд ли разовьется CIN 3+ в течение нескольких лет. Для этих женщин увеличение интервалов между скринингами, рекомендованное некоторыми авторами, безусловно, оправдано.Ввиду необходимости снижения затрат в здравоохранении сегодня это особенно актуально.

Надлежащее ведение женщин с положительным результатом теста на врВПЧ является более сложной задачей. Необходима дифференцированная оценка в каждом конкретном случае, которая также учитывает данные цитологического исследования. Генотипирование ВПЧ также дает преимущества для оценки индивидуального риска развития CIN 3+ у ВПЧ-положительной женщины в будущем. Во всех цитируемых здесь исследованиях было обнаружено, что ВПЧ 16 является генотипом с самым высоким онкогенным потенциалом среди генотипов врВПЧ.Дело было не только в том, что в большинстве случаев ВПЧ 16 обнаруживался у женщин с CIN 3 или карциномой; проспективно, инфицирование ВПЧ 16 чаще приводило к развитию интраэпителиальной неоплазии, чем другие генотипы врВПЧ. Возраст, в котором заразились ВПЧ 16, также был ниже, чем возраст, в котором женщины были инфицированы другими генотипами врВПЧ.

Исследования не пришли к какому-либо последовательному заключению в отношении других генотипов врВПЧ, несомненно, также из-за региональных различий.В дополнение к ВПЧ 18 наиболее важные генотипы после ВПЧ 16, ВПЧ 31, 33 и 45, в частности, по-видимому, связаны с несколько более высоким риском. Кроме того, генотипирование ВПЧ также позволяет окончательно идентифицировать женщин с персистирующей инфекцией, что является значительным фактором риска развития поражений более высокой степени.

В клинической практике это может означать, что женщины с положительным результатом на ВПЧ 16 и, возможно, также женщины с положительным результатом на ВПЧ 18 могут проходить кольпоскопию и наблюдаться более тщательно, чем женщины с другими генотипами врВПЧ.Тем не менее, важно иметь в виду, что долгосрочный риск развития CIN 3+ составляет всего 20–25%, в зависимости от исследования, после первого выявления ВПЧ 16 10,12,13. 16 ВПЧ-позитивных женщин это влечет за собой ненужные дополнительные исследования. Однако, если ВПЧ 16 сохраняется, риск развития поражения CIN 3+ возрастает почти до 50% 12. Более интенсивное ведение женщин, положительных на ВПЧ 16, ложится бременем на пациентов и врачей и, очевидно, также сопровождается более высокими затратами на лечение.Могут ли эти дополнительные расходы быть компенсированы за счет сокращения количества проверок, требуемых ВПЧ-отрицательных женщин еще предстоит увидеть.

При интерпретации цитируемых исследований также важно помнить, что результаты, полученные в некоторых случаях, не могут быть легко перенесены в немецкую систему раннего выявления, так как другие страны уже используют значительно более длительные интервалы скрининга в рамках организованной программы скрининга. Например, в голландском исследовании POBASCAM интервал между двумя исследованиями составлял 5 лет, тогда как в итальянском исследовании NTCC интервал составлял 2 года.

Представленные здесь данные вскоре могут иметь практическое значение в Нидерландах. В мае 2011 года Совет по здравоохранению Нидерландов, консультирующий правительство Нидерландов, пересмотрел свои рекомендации по скринингу рака шейки матки. В новых рекомендациях предлагается проводить первичный скрининг на ВПЧ, при этом в течение жизни женщины делается около 5 тестов: первый в 30 лет, затем в 35, 40, 50 и 60 лет. ВПЧ-положительные женщины будут дополнительно исследованы с помощью цитологического сортирования 14.

Резюме

Таким образом, становится ясно, что включение тестирования на ВПЧ в программу скрининга рака шейки матки дает высокую степень достоверности. Для ВПЧ-отрицательных женщин интервалы между исследованиями могут быть увеличены. Генотипирование ВПЧ в настоящее время обсуждается с целью лучшей стратификации риска и выявления женщин с повышенным риском, которым потребуется более интенсивный мониторинг.

Сноски

Конфликт интересов М. Йенчке получил от Abbott GmbH & Co гонорары за выступления и транспортные расходы.КГ, Висбаден.

Ссылки

1. Poljak M, Kocjan B J. Коммерчески доступные тесты для мультиплексного обнаружения альфа-вирусов папилломы человека. Expert Rev Anti Infect Ther. 2010;8:1139–1162. [PubMed] [Google Scholar]2. Мейер С. Дж., Беркхоф Дж., Касл П. Э. и др. Руководство по требованиям к тесту ДНК на вирус папилломы человека для первичного скрининга рака шейки матки у женщин 30 лет и старше. Инт Джей Рак. 2009; 124: 516–520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Науклер П., Райд В., Торнберг С.и др. Эффективность тестирования ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой и/или повторным тестированием ДНК ВПЧ при первичном скрининге рака шейки матки. J Natl Cancer Inst. 2009; 101:88–99. [PubMed] [Google Scholar]4. Балкманс Н.В., Беркхоф Дж., Розендал Л. и др. Тестирование ДНК вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени и рака: 5-летнее наблюдение за рандомизированным контролируемым исследованием внедрения. Ланцет. 2007; 370:1764–1772. [PubMed] [Google Scholar]5. Ронко Г., Джорджи-Росси П., Кароцци Ф. и др.Эффективность тестирования на вирус папилломы человека для выявления инвазивного рака шейки матки и внутриэпителиальной неоплазии шейки матки: рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет Онкол. 2010; 11: 249–257. [PubMed] [Google Scholar]6. Dillner J, Rebolj M, Birembaut P. et al. Долгосрочные прогностические значения цитологии и тестирования на вирус папилломы человека при скрининге рака шейки матки: совместное европейское когортное исследование. БМЖ. 2008; 337: а1754. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]7. de Sanjose S, Quint WG, Alemany L. et al. Атрибуция генотипа вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки: ретроспективное кросс-секционное всемирное исследование.Ланцет Онкол. 2010; 11:1048–1056. [PubMed] [Google Scholar]8. Wheeler C M, Hunt WC, Joste N E. и др. Распределение генотипов вируса папилломы человека: значение для вакцинации и скрининга рака в Соединенных Штатах. J Natl Cancer Inst. 2009; 101: 475–487. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Castle PE, Schiffman M, Wheeler C M. et al. Генотипы вируса папилломы человека при цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени. Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2010;19:1675–1681. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10.Хан М.Дж., Кастл П.Е., Лоринц А.Т. и др. Повышенный 10-летний риск предрака и рака шейки матки у женщин с вирусом папилломы человека (ВПЧ) типа 16 или 18 и возможная полезность тестирования на типоспецифический ВПЧ в клинической практике. J Natl Cancer Inst. 2005; 97: 1072–1079. [PubMed] [Google Scholar] 11. Шиффман М., Гласс А.Г., Венценсен Н. и др. Долгосрочное проспективное исследование типоспецифической папилломавирусной инфекции человека и риска неоплазии шейки матки среди 20 000 женщин в когортном исследовании Portland Kaiser.Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2011;20:1398–1409. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. Kjaer S K, Frederiksen K, Munk C. et al. Долгосрочный абсолютный риск цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени или хуже после инфицирования вирусом папилломы человека: роль персистенции. J Natl Cancer Inst. 2010; 102:1478–1488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]13. Stoler M H, Wright TC jr., Sharma A. et al. Тестирование на вирус папилломы человека высокого риска у женщин с цитологией ASC-US: результаты исследования ATHENA HPV.Ам Джей Клин Патол. 2011; 135: 468–475. [PubMed] [Google Scholar] 14. Совет здравоохранения Нидерландов. Скрининг населения на рак шейки матки. 2011/07. ISBN 978-90-5549-841-3 Гаага: 2011 [Google Scholar] 15. Kitchener HC Almonte M Gilham C et al.ARTISTIC: рандомизированное исследование тестирования на вирус папилломы человека (ВПЧ) при первичном скрининге шейки матки Health Technol Assess 2009131–150.iii–iv [PubMed] [Google Scholar]16. Анттила А., Котаниеми-Талонен Л., Лейнонен М. и др. Частота рака шейки матки, тяжелой внутриэпителиальной неоплазии и аденокарциномы in situ при первичном скрининге ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой: рандомизированное исследование в рамках организованной программы скрининга.БМЖ. 2010;340:c1804. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]17. Bulkmans NW, Rozendaal L, Snijders PJ. et al. POBASCAM, популяционное рандомизированное контролируемое исследование по внедрению тестирования на ВПЧ высокого риска при скрининге шейки матки: дизайн, методы и исходные данные 44 102 женщин. Инт Джей Рак. 2004; 110:94–101. [PubMed] [Google Scholar] 18. Rijkaart DC, Berkhof J, Rozendaal L. et al. Тестирование вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии и рака высокой степени: окончательные результаты рандомизированного контролируемого исследования POBASCAM.Ланцет Онкол. 2012; 13:78–88. [PubMed] [Google Scholar] 19. Санкаранараянан Р., Нене Б.М., Шастри С.С. и др. Скрининг ВПЧ на рак шейки матки в сельских районах Индии. N Engl J Med. 2009; 360:1385–1394. [PubMed] [Google Scholar]

Важность генотипирования ВПЧ для скрининга, терапии и лечения неоплазии шейки матки

Geburtshilfe Frauenheilkd. 2012 июнь; 72(6): 507–512.

Язык: английский | German

M. Jentschke

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

P.Soergel

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

P. Hillemanns

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

, Ганноверская медицинская школа им. Пересмотрено 23 апреля 2012 г.; Принят 4 мая 2012 г.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

В последнее десятилетие выявление вирусов папилломы человека (ВПЧ) приобретает все большее значение при скрининге рака шейки матки и лечении предшественников рака. Скрининг на ВПЧ рекомендуется для дальнейшей оценки отклонений от нормы Пап-теста или во время последующего наблюдения после лечения предраковых поражений. Несколько рандомизированных контролируемых исследований показали, что скрининг рака шейки матки с использованием обнаружения ВПЧ может быть более эффективным, чем только цитологическое исследование.Генотипирование различных типов ВПЧ высокого риска (врВПЧ), полученных с помощью тестов мазка, еще не получило широкого распространения в клинической практике. Однако были отмечены значительные различия в онкогенности генотипов врВПЧ. ВПЧ 16 на сегодняшний день является наиболее распространенным и онкогенным генотипом. Генотипирование врВПЧ может быть полезным для стратификации риска у ВПЧ-позитивных женщин.

Ключевые слова: рак шейки матки, цервикальная институтная неоплазия (CIN), человеческий папилломавирус

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

der Nachweis Passherer Papillomviren (HPV) IM Rahmen der Vorsorge und undlung des zervixkarzinom und unsbesondere seiner vorstufen шляпа в Ден Верганген Jahren zunehmend Bedeutung gewonnen.Die HPV-Bestimmung wird beispielsweise zur weiteren Abklärung auffälliger Pap-Abstriche oder in der Nachsorge nach Behandlung präinviver Veränderungen empfohlen. Mehrere randomisierte kontrollierte Studien konnten zudem eine Überlegenheit gegenüber einem reinen Zytologie-Screening zeigen. Die Typisierung der unterschiedlichen Hochrisiko-HPV-Typen aus Abstrichproben hat dagegen erst in geringerem Maße Anwendung in der Praxis gefunden. Es zeigen sich jedoch große Unterschiede in der onkogenen Potenz und Relevanz der unterschiedlichen Genotypen.HPV 16 шляпа zahlenmäßig und auch prospektiv mit Abstand die höchste Bedeutung für die Entstehung zervikaler Neoplasien. Die Genotypisierung kann daher für eine bessere Risikostratifizierung HPV-positive Frauen hilfreich sein.

Schlüsselwörter: Zervixkarzinom, Zervixpräkanzerose, Humane Papillomviren

Введение

Роль выявления ВПЧ в скрининге рака шейки матки до сих пор вызывает споры в Германии. Одной из двух основных тем прошлогодней конференции EUROGIN (Европейская исследовательская организация по генитальным инфекциям и новообразованиям), состоявшейся в Лиссабоне в мае 2011 г., была – помимо вакцинации против ВПЧ – важность обнаружения ВПЧ.Четырехдневная конференция в меньшей степени сосредоточилась на вопросе о том, следует ли проводить тестирование на ВПЧ в рамках скрининга рака. Вместо этого во многих статьях основное внимание уделялось возможности более дифференцированной оценки инфекции ВПЧ на основе подтверждения отдельных генотипов ВПЧ высокого риска (hrHPV).

Процедуры тестирования на ВПЧ и генотипирования

После одобрения Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) в 2003 г. тест Hybrid Capture 2 (hc2; Qiagen, Hilden, Germany) стал стандартным тестом для выявления ВПЧ. в клинической практике почти 10 лет.Тест позволяет выявить 13 генотипов врВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68) и основан на гибридизации ДНК ВПЧ с РНК ВПЧ. Связи ДНК-РНК маркируют антителами и выявляют с помощью хемилюминесценции. Однако тест не различает отдельные генотипы ВПЧ. Результаты представлены либо как положительные по врВПЧ, либо как отрицательные по врВПЧ. Анализ также можно использовать для выявления генотипов ВПЧ низкого риска (lrHPV). Преимуществом теста hc2 является его давнее и широкое применение в клинической практике; недостатком является возможность перекрестной реактивности с другими, обычно генотипами лрВПЧ, что может привести к ложноположительным результатам 1.

За последнее десятилетие на рынке появились многочисленные новые тесты на врВПЧ, основанные на обнаружении ДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Эти тесты обычно позволяют выявить любой из 14 генотипов врВПЧ (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68). Более того, некоторые из них предлагают возможность отдельного определения индивидуального генотипа hrHPV. Как правило, наиболее часто выявляемыми генотипами являются ВПЧ 16 и 18, а некоторые производители также предлагают тесты, позволяющие выявлять и другие генотипы.В принципе, с помощью ПЦР можно обнаружить даже очень небольшое количество вирусной ДНК. Однако такие высокочувствительные методы обнаружения не имеют значения в рутинной клинической диагностике, поскольку они часто выявляют инфекции ВПЧ, не имеющие клинической значимости (ср. ). Поэтому наиболее распространенные коммерческие тесты на основе ПЦР соответствующим образом адаптировали свои пороги обнаружения. Недостатком методов ПЦР является ограниченный клинический опыт. хотя в последние годы были проведены многочисленные исследования этих тестов 1,2.

Чувствительность Количество лиц с заболеванием (в данном случае женщин с высокой степенью CIN), которые были правильно идентифицированы с помощью используемого метода тестирования (тест на ВПЧ или цитологический мазок) как имеющие заболевание по сравнению с общим числом лиц с заболеванием.
Специфичность Количество здоровых людей, которые были правильно идентифицированы тест-методом как здоровые, по сравнению с общим числом здоровых людей в исследовании.
Тест с максимальной чувствительностью выявит всех больных: чувствительность теста будет 100 %. Однако такой тест обычно имеет низкую специфичность, т.е. много ложноположительных результатов.
Положительное прогностическое значение (PPV): Количество лиц с фактическим заболеванием из всех лиц с положительными результатами теста. У более молодых женщин тест на ВПЧ имеет относительно низкий PPV для высокой степени CIN, так как многие транзиторные инфекции ВПЧ могут возникать в этой возрастной группе без диспластических изменений шейки матки.
Отрицательная прогностическая ценность (NPV): Количество фактически здоровых лиц среди всех лиц с отрицательными результатами теста. NPV правильно проведенного теста на ВПЧ очень высок, так как рак шейки матки или поражения CIN высокой степени не являются ВПЧ-отрицательными; если мазок ВПЧ-отрицательный, любые такие изменения можно исключить с большой долей вероятности.
Цитологическая сортировка после положительного теста на ВПЧ: Все женщины впервые прошли тестирование на ВПЧ. ВПЧ-позитивных женщин дополнительно исследуют с помощью обычного мазка Папаниколау или жидкостной цитологии.Женщин с аномальной цитологией обследуют дополнительно, обычно с помощью кольпоскопии, в то время как женщин с нормальной цитологией повторно обследуют с помощью теста на ВПЧ и, возможно, цитологическое исследование по прошествии определенного времени.

Скрининг на основе ВПЧ по сравнению с цитологией

Несколько недавних крупных европейских рандомизированных контролируемых исследований смогли продемонстрировать превосходство скрининга на рак шейки матки на основе ВПЧ по сравнению с цитологией – независимо от того, используется ли обнаружение ВПЧ отдельно или в сочетании с цитологией (см. .). Однако важно рассматривать результаты с точки зрения их специфичности и положительной прогностической ценности (PPV), поскольку это важные параметры для осуществимых программ скрининга.

Таблица 2  Обзор рандомизированных контролируемых исследований по скринингу рака шейки матки путем выявления ВПЧ.

Результаты и комментарии 2 Исследования с интервалом 3 года
исследование Страна Количество пятен Возрастные брюки Возраст (лет) Способ скрининга Способ скрининга Sequence Colposcopy Repeate Дополнительные ресурсы (годы)
Группа HPV
hc2: гибридный тест Capture 2 HPV; ПЦР: обнаружение ВПЧ с помощью ПЦР; LBC: жидкостная цитология; Пап: обычная цитология; против.: против; н. с.: не указано; ICC: инвазивный рак шейки матки; АИС: аденокарцинома in situ
ARTISTIC 15 UK 24 510 20–64 hc2 + LBC LBC 2 исследования с интервалом в 2 года n. с. 4,8 1-й тур: без различий 2-й тур: означ. меньше CIN 2+/CIN 3+ в группе ВПЧ, но небольшая абсолютная разница
Финляндия 16 Финляндия 58 076 30–60 hc2 + Triage Pap Pap 1 исследование, последующее наблюдение в раковом регистре hc2: 7.2 % Пап: 6,6 % 3,3 1-й раунд: на ⅓ больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ После 3,3 года: ВПЧ: 11 ICC/AIS против Пап: 6 ICC/AIS
фаза 5 Италия 45 174 25-60 25-60 HC2 + LBC PAP 2 исследования с интервалом 3 года HC2: 9,4% PAP: 3.0% 3.5 1-й раунд: 2 × больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ; аналогичное количество ICC2-й раунд: ВПЧ: 0 ICC против Папаниколау: 9 ICC (p = 0.004)Возраст 35–60 лет: 1-й раунд ВПЧ: вдвое больше CIN 2 и 3; 2-й раунд ВПЧ: ок. половина числа CIN 2 и 3
NTCC фаза 2 5 ИТАЛИЯ 49 196 25-60 HC2 PAP 2 расследования с интервалом 3 года
Pobascam 4, 17, 18 Нидерланды 44 105 (1-й раунд)33 499 (2-й раунд) 29–56 ПЦР + Пап Пап 2 исследования с интервалом 90 2 5 лет.3 %, 1,3 % Пап: 1,3 %, 1,9 % 6,5 1-й раунд: на 24 % больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 28 % меньше CIN 3+ и на 71 % меньше ICC в группе ВПЧ→ с более ранним выявлением ПЦР клинически значимых CIN 2+
Swedescreen 3 SWEDEN 12 527 32-38 PCR + PAP PAP ПЦР: 1.6% 4.1 1-й раунд: 51% больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 42 % меньше CIN 2+ в группе ВПЧ
Индия 19 (слаборазвитый регион, ранее не проводившаяся программа скрининга) 131 746 30–59 одноэтапный скрининг:hc2 vs.Папаниколау в сравнении с осмотром шейки матки с уксусной кислотой в сравнении со «стандартным лечением» hc2: 1,3 %Пап: 4,9 %вдох: 10,8 % 8 относительный риск выявления распространенного рака шейки матки (≥ II) и количество смертность от рака сократилась вдвое с помощью ВПЧ по сравнению с контрольной группой (без Папаниколау или осмотра шейки матки)

В период с 1997 по 2005 год обширная шведская популяционная исследовательская программа Swedescreen оценила 11 различных алгоритмов скрининга, основанных либо только на тестах на ВПЧ, или только на тестах Папаниколау, или на различных комбинациях ВПЧ и Папаниколау.В подгруппе женщин в возрасте 32–38 лет из коллектива Swedescreen продемонстрировано повышение чувствительности на 35 % для выявления CIN 3 и инвазивной карциномы (CIN 3+) в группе, прошедшей «Пап- и типоспецифическую персистенцию ВПЧ». двойное тестирование по сравнению с одним только цитологическим исследованием 3. Положительная прогностическая ценность также была сопоставимой. Но эта стратегия скрининга является дорогостоящей и трудоемкой, поскольку для получения таких хороших результатов скрининга требуется в два раза больше тестов. Другой алгоритм использовал тест на ВПЧ в качестве начального теста с последующей цитологической сортировкой у ВПЧ-положительных женщин с последующим тестированием на персистирующие ВПЧ-инфекции у женщин с отрицательным Папаниколау и сравнивал этот алгоритм с результатами цитологического исследования. в одиночестве.Этот алгоритм достиг увеличения чувствительности на 30% для обнаружения CIN 3 или инвазивной карциномы (CIN 3+). Более того, этот дифференциально-диагностический алгоритм имел сопоставимую положительную прогностическую ценность (PPV), но количество необходимых скрининговых тестов увеличилось только на 12 % (с 6257 до 7019).

Голландское исследование POBASCAM также продемонстрировало более высокую чувствительность комбинированного скрининга по сравнению с только цитологией 4. Было проведено два этапа скрининга с интервалом между фазами 5 лет.В 1-й фазе было выявлено на 24 % больше CIN 2+ в группе, которой выполняли комбинированное цитологическое исследование и ВПЧ-тесты, по сравнению с группой, в которой применяли только цитологию. Во 2-й фазе частота обнаружения CIN 3+ в группе с тестом на ВПЧ была на 28 % ниже, а частота инвазивного рака была на 71 % ниже по сравнению с группой цитологии, несмотря на сопоставимое общее количество CIN 3+ в обеих группах. Эти данные показывают, что комбинированный скрининг может привести к более раннему выявлению клинически значимых интраэпителиальных неоплазий.

Итальянское исследование NTCC показало аналогичные результаты 5. В общей сложности 47 000 женщин были рандомизированы на две группы, при этом 1-я группа подвергалась только цитологическому скринингу, а 2-я группа подвергалась скринингу с использованием цитологии и теста на ВПЧ (позже в ходе исследования цитология не проводилась). сделано у более поздних новобранцев 2-й когорты). Выявление отклонений сопровождалось соответствующей терапией. Через 2 года обе группы повторно прошли цитологический скрининг. При 1-м скрининге в обеих группах было выявлено одинаковое количество инвазивных карцином шейки матки ().Во время 2-го скрининга в группе, прошедшей скрининг с помощью теста на ВПЧ, больше не было обнаружено раковых заболеваний, в то время как в группе цитологического исследования было обнаружено еще 9 раковых заболеваний. Первоначальные цитологические данные во всех 9 случаях с карциномами, обнаруженными при 2-м скрининге, были нормальными.

Плоскоклеточный рак шейки матки pT1b1, N0, G2 после радикальной эндоскопической гистерэктомии и комбинированного синего красителя/технеция 99м радиоколлоидного (интрацервикального) выявления сторожевых лимфатических узлов.

Что касается CIN 2 и CIN 3 (), почти в два раза больше случаев было обнаружено в группе ВПЧ в 1-м раунде скрининга и примерно вдвое меньше во 2-м раунде по сравнению с группой цитологического исследования.Это привело авторов к выводу, что первоначальный скрининг на ВПЧ приводит к лучшему раннему выявлению клинически значимых предраковых поражений. Обнаружение в два раза большего количества CIN 2 и CIN 3 с помощью теста на ВПЧ во время начального раунда скрининга означало, что эти поражения были своевременно вылечены, и было предотвращено прогрессирование в более инвазивные виды рака. Следует предположить, что предраковые поражения, не обнаруженные во время 1-го этапа скрининга в группе цитологии, привели к 9 раковым заболеваниям, обнаруженным при 2-м скрининге.Тем не менее, авторы рекомендуют проводить скрининг, включая тестирование на ВПЧ, только женщинам старше 35 лет с последующей цитологической сортировкой в ​​случаях с положительным результатом на ВПЧ.

Кольпоскопия поражения CIN 2 после аппликации 5 % уксусной кислоты. Вставка показывает диагностическую флуоресцентную визуализацию той же CIN 2 после применения гексаминолевулината.

В 2008 г. Dillner et al. исследовали 6-летний риск развития поражения CIN 3+ в зависимости от статуса врВПЧ и цитологии в многонациональном когортном исследовании 6.В этом исследовании генотипирование ВПЧ не проводилось. Как и ожидалось, врВПЧ-положительные женщины с аномальной цитологией имели самый высокий риск — 34%. У врВПЧ-позитивных женщин с нормальной цитологией частота CIN 3+ через 6 лет составила 10 %, в то время как в обратном случае (т.е. врВПЧ-отрицательная, аномальная цитология) частота составила всего 2,7 %. У женщин с отрицательным статусом по врВПЧ в начале исследования 6-летний риск развития CIN 3+ составлял всего 0,27% — независимо от исходных цитологических данных. Таким образом, авторы пришли к выводу, что если первоначальный результат на врВПЧ был отрицательным, интервал скрининга можно было бы увеличить до 6 лет без дополнительного риска для женщин.

Потенциальный риск для различных типов врВПЧ

Многочисленные ретроспективные и несколько проспективных исследований показали четкие различия между различными генотипами врВПЧ в отношении риска развития CIN или инвазивного рака. В одном из крупнейших ретроспективных исследований женщин с инвазивным раком шейки матки, проведенных во всем мире, de Sanjose et al. смогли определить ДНК ВПЧ в 85 % из более чем 10 000 исследованных случаев 7. ВПЧ 16 был наиболее часто встречающимся генотипом с частотой 61 %, за ним следовали ВПЧ 18 (10 %) и ВПЧ 45 (6 %). %).Более того, женщины, у которых был обнаружен один из этих 3 генотипов ВПЧ, были примерно на 4 года моложе на момент обнаружения рака по сравнению с женщинами, у которых в раковых клетках были определены другие генотипы ВПЧ.

Американское исследование 1213 женщин с карциномой in situ (CIN 3) и 808 женщин с инвазивным раком шейки матки выявило ДНК ВПЧ в 97,1 % поражений CIN 3 и в 91,0 % инвазивных карцином. общий генотип с частотой 56,3 и 53.2 % соответственно. В случаях с ЦИН 3 за ним следовали ВПЧ 31 (12,6%), ВПЧ 33 (8,0%) и ВПЧ 18 (5,9%), а у женщин с инвазивный рак. Это исследование также выявило значительную разницу в возрасте между женщинами с инвазивным раком и положительными на ВПЧ 16 или ВПЧ 18 по сравнению с женщинами с другими генотипами ВПЧ (48,1 и 45,9 года соответственно против 52,3 года).

ВПЧ 16 также играет наиболее важную роль в непосредственных предраковых поражениях.В американском исследовании ALTS ДНК ВПЧ была обнаружена у 98,8% из 608 исследованных женщин с CIN 3–9. 59,9% случаев были положительными на ВПЧ 16. В этом исследовании ВПЧ 18 (13,2%) был только пятым наиболее распространенным генотипом после ВПЧ 31 (18,1%), ВПЧ 52 (14,8%) и ВПЧ 51 (14,0%). Здесь снова предраковые поражения, вызванные ВПЧ 16, возникали у более молодых женщин (23,5 года) по сравнению с поражениями, вызванными другими генотипами (25 лет). Интересно, что ВПЧ 16-положительные поражения CIN 3 чаще встречались у курящих женщин и реже у повторнородящих женщин.

В 2005 г. Khan et al. показали в проспективном когортном исследовании ВПЧ-специфического типа с участием более 20 000 женщин без полноценного цитологического исследования, что женщины с ВПЧ 16 и ВПЧ 18 имели значительно повышенный риск развития CIN 3+ 10. Для женщин, которые были ВПЧ 16 положительными на момент В начале исследования кумулятивная 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 17 %, а для ВПЧ 18-позитивных женщин — 14 %. Для сравнения, риск для других генотипов врВПЧ составлял 3%, а для врВПЧ-отрицательных женщин — всего 1%.Это распределение риска было еще более значительным для женщин старше 30 лет. У ВПЧ-16 положительных женщин в возрасте > 30 лет 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 20 %, в то время как у ВПЧ-18 положительных женщин в возрасте > 30 лет этот показатель составил 10%. -летняя заболеваемость 15 %.

Также была четко продемонстрирована более высокая чувствительность тестов на ВПЧ для скрининга по сравнению с обычным цитологическим исследованием. Авторы сравнивали женщин старше 30 лет с аномальной цитологией независимо от их статуса ВПЧ (LSIL: плоскоклеточные внутриэпителиальные поражения низкой степени; женщины с высокой степенью цитологии не были включены в исследование) с женщинами, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18. в начале исследования.10-летняя частота CIN 3+ в группе с аномальной цитологией составила всего 11% по сравнению с 20% и 15% соответственно в группах с ВПЧ 16 и ВПЧ 18. Более того, было показано, что даже женщины с нормальной цитологией, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18, имели повышенный риск развития ЦИН 3+.

Основываясь на этих данных, авторы выступают за то, чтобы при скрининге женщин старше 20 лет проводились типоспецифические тесты на ВПЧ 16 и ВПЧ 18, и рекомендуют кольпоскопию, если результат положительный. Если результаты положительны для других генотипов врВПЧ, они считают достаточным повторный скрининг через 1 год.

Другое недавно опубликованное последующее исследование того же исследовательского коллектива показало очень низкую кумулятивную вероятность развития CIN 3+ у женщин с отрицательным статусом ВПЧ 11. в возрасте старше 30 лет он составил всего 0,7% за период наблюдения более 15 лет. Повышенный риск развития CIN 3+ у женщин с ВПЧ 16 был вновь подтвержден в этом исследовании. По сравнению с другими генотипами врВПЧ риск у женщин старше 30 лет был более чем в два раза выше (2.7-кратный относительный риск), и по сравнению с ВПЧ-негативностью он был более чем в 6 раз выше (6,2-кратный относительный риск). Чтобы сравнить независимую валидность тестирования на ВПЧ с цитологией, авторы рассчитали соответствующий относительный риск развития CIN 2+ после положительного по сравнению с отрицательным теста на врВПЧ (7,1 для возраста < 30 лет и 8,5 для 30+ лет) и при аномальных (ASC-US/LSIL) по сравнению с нормальной цитологией (NILM) (1,5 для женщин в возрасте до 30 лет и 2,9 для женщин в возрасте 30+). Это ясно показывает более высокую достоверность положительных результатов теста на ВПЧ по сравнению с аномальными результатами цитологического исследования.

Из-за очень высокой отрицательной прогностической ценности (NPV) отрицательного теста на ВПЧ в этом исследовании авторы пришли к выводу, что для женщин старше 30 лет с отрицательным тестом на ВПЧ и нормальной цитологией повторное обследование через 3 года – как в настоящее время является стандартом в США — может быть, это не нужно так рано.

Популяционное проспективное датское когортное исследование, начатое в 1991 г., пришло к аналогичным выводам 12. Около 7500 женщин с нормальной цитологией в начале исследования подверглись 2 гинекологическим исследованиям с мазком Папаниколау и генотипированием врВПЧ с интервалом в 2 года между исследованиями.Начало исследования было определено как время второго исследования. Все граждане Дании имеют личный идентификационный номер, и в стране дополнительно имеется национальная база данных патологий, в которую вносятся все цитологические и гистологические исследования шейки матки. Это позволяет отслеживать такие учебные коллективы практически без отсева и при относительно низких затратах. Оценка результатов исследования проводилась в 2007 г. после максимального периода наблюдения 13,4 года.

Было показано, что у четверти (26 %) женщин, у которых во 2-м исследовании был обнаружен ВПЧ 16, в период наблюдения развилось поражение CIN 3+.Для ВПЧ 18 заболеваемость составила 15,4%. Цифры были намного ниже для других генотипов врВПЧ (ВПЧ 33: 12,8%; ВПЧ 31: 9,8%; ВПЧ 35: 9,1%; ВПЧ 58: 8,3%; ВПЧ 45: 6,4%). Для врВПЧ-отрицательных женщин риск CIN 3+ через 12 лет составил 3,0 %.

Взятие 2 мазков из шейки матки с интервалом в 2 года позволило авторам оценить влияние персистирующей ВПЧ-инфекции. ВПЧ 16, 31, 33, 35, 52 и 58 имели самую высокую распространенность в начале исследования, более высокую степень персистенции и более высокий потенциал, если они персистируют, привести к поражению CIN 3+.Таким образом, 29,4 % ВПЧ-16-инфекций были персистирующими, т.е. ВПЧ-16 выявлялся при обоих исследованиях, а у 46 % женщин с персистирующей ВПЧ-16-инфекцией развилась CIN 3+. Интересно, что 12-летний риск CIN 3+ у женщин, у которых врВПЧ был обнаружен в обоих исследованиях с использованием hc2, составил 19,3%, независимо от генотипа ВПЧ, и, таким образом, аналогичен риску, зарегистрированному для женщин, у которых ВПЧ 16 был обнаружен один раз (17,3). %).

В 2011 году при анализе подгрупп исследования ATHENA HPV у женщин с цитологией ASCUS (атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения) Stoler et al.обнаружили четкую корреляцию между уровнем положительных результатов на ВПЧ 16 и/или ВПЧ 18 и более тяжелой степенью ЦИН 13. Два генотипа ВПЧ были обнаружены только у 8% женщин без ЦИН, но в 18% случаев с ЦИН 1, 44 % случаев с CIN 2 и 61 % случаев с CIN 3+. Абсолютный риск CIN 3+ составил 20 % для женщин, инфицированных ВПЧ 16. По сравнению с ВПЧ-отрицательными женщинами относительный риск CIN 3+ составил 70,9 для ВПЧ-16-позитивных женщин и 15,4 для ВПЧ-18-позитивных женщин. Относительный риск для 12 других генотипов врВПЧ составлял всего 15.всего 7. Когда ВПЧ 16 сравнивали с этими 12 другими генотипами врВПЧ, ВПЧ 16 по-прежнему имел относительный риск 4,5.

Обсуждение

Представленные здесь исследования ясно показывают потенциал ВПЧ-тестов для скрининга рака шейки матки. С одной стороны, отрицательный результат, особенно у женщин старше 30 лет, дает высокую степень уверенности в том, что у них вряд ли разовьется CIN 3+ в течение нескольких лет. Для этих женщин увеличение интервалов между скринингами, рекомендованное некоторыми авторами, безусловно, оправдано.Ввиду необходимости снижения затрат в здравоохранении сегодня это особенно актуально.

Надлежащее ведение женщин с положительным результатом теста на врВПЧ является более сложной задачей. Необходима дифференцированная оценка в каждом конкретном случае, которая также учитывает данные цитологического исследования. Генотипирование ВПЧ также дает преимущества для оценки индивидуального риска развития CIN 3+ у ВПЧ-положительной женщины в будущем. Во всех цитируемых здесь исследованиях было обнаружено, что ВПЧ 16 является генотипом с самым высоким онкогенным потенциалом среди генотипов врВПЧ.Дело было не только в том, что в большинстве случаев ВПЧ 16 обнаруживался у женщин с CIN 3 или карциномой; проспективно, инфицирование ВПЧ 16 чаще приводило к развитию интраэпителиальной неоплазии, чем другие генотипы врВПЧ. Возраст, в котором заразились ВПЧ 16, также был ниже, чем возраст, в котором женщины были инфицированы другими генотипами врВПЧ.

Исследования не пришли к какому-либо последовательному заключению в отношении других генотипов врВПЧ, несомненно, также из-за региональных различий.В дополнение к ВПЧ 18 наиболее важные генотипы после ВПЧ 16, ВПЧ 31, 33 и 45, в частности, по-видимому, связаны с несколько более высоким риском. Кроме того, генотипирование ВПЧ также позволяет окончательно идентифицировать женщин с персистирующей инфекцией, что является значительным фактором риска развития поражений более высокой степени.

В клинической практике это может означать, что женщины с положительным результатом на ВПЧ 16 и, возможно, также женщины с положительным результатом на ВПЧ 18 могут проходить кольпоскопию и наблюдаться более тщательно, чем женщины с другими генотипами врВПЧ.Тем не менее, важно иметь в виду, что долгосрочный риск развития CIN 3+ составляет всего 20–25%, в зависимости от исследования, после первого выявления ВПЧ 16 10,12,13. 16 ВПЧ-позитивных женщин это влечет за собой ненужные дополнительные исследования. Однако, если ВПЧ 16 сохраняется, риск развития поражения CIN 3+ возрастает почти до 50% 12. Более интенсивное ведение женщин, положительных на ВПЧ 16, ложится бременем на пациентов и врачей и, очевидно, также сопровождается более высокими затратами на лечение.Могут ли эти дополнительные расходы быть компенсированы за счет сокращения количества проверок, требуемых ВПЧ-отрицательных женщин еще предстоит увидеть.

При интерпретации цитируемых исследований также важно помнить, что результаты, полученные в некоторых случаях, не могут быть легко перенесены в немецкую систему раннего выявления, так как другие страны уже используют значительно более длительные интервалы скрининга в рамках организованной программы скрининга. Например, в голландском исследовании POBASCAM интервал между двумя исследованиями составлял 5 лет, тогда как в итальянском исследовании NTCC интервал составлял 2 года.

Представленные здесь данные вскоре могут иметь практическое значение в Нидерландах. В мае 2011 года Совет по здравоохранению Нидерландов, консультирующий правительство Нидерландов, пересмотрел свои рекомендации по скринингу рака шейки матки. В новых рекомендациях предлагается проводить первичный скрининг на ВПЧ, при этом в течение жизни женщины делается около 5 тестов: первый в 30 лет, затем в 35, 40, 50 и 60 лет. ВПЧ-положительные женщины будут дополнительно исследованы с помощью цитологического сортирования 14.

Резюме

Таким образом, становится ясно, что включение тестирования на ВПЧ в программу скрининга рака шейки матки дает высокую степень достоверности. Для ВПЧ-отрицательных женщин интервалы между исследованиями могут быть увеличены. Генотипирование ВПЧ в настоящее время обсуждается с целью лучшей стратификации риска и выявления женщин с повышенным риском, которым потребуется более интенсивный мониторинг.

Сноски

Конфликт интересов М. Йенчке получил от Abbott GmbH & Co гонорары за выступления и транспортные расходы.КГ, Висбаден.

Ссылки

1. Poljak M, Kocjan B J. Коммерчески доступные тесты для мультиплексного обнаружения альфа-вирусов папилломы человека. Expert Rev Anti Infect Ther. 2010;8:1139–1162. [PubMed] [Google Scholar]2. Мейер С. Дж., Беркхоф Дж., Касл П. Э. и др. Руководство по требованиям к тесту ДНК на вирус папилломы человека для первичного скрининга рака шейки матки у женщин 30 лет и старше. Инт Джей Рак. 2009; 124: 516–520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Науклер П., Райд В., Торнберг С.и др. Эффективность тестирования ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой и/или повторным тестированием ДНК ВПЧ при первичном скрининге рака шейки матки. J Natl Cancer Inst. 2009; 101:88–99. [PubMed] [Google Scholar]4. Балкманс Н.В., Беркхоф Дж., Розендал Л. и др. Тестирование ДНК вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени и рака: 5-летнее наблюдение за рандомизированным контролируемым исследованием внедрения. Ланцет. 2007; 370:1764–1772. [PubMed] [Google Scholar]5. Ронко Г., Джорджи-Росси П., Кароцци Ф. и др.Эффективность тестирования на вирус папилломы человека для выявления инвазивного рака шейки матки и внутриэпителиальной неоплазии шейки матки: рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет Онкол. 2010; 11: 249–257. [PubMed] [Google Scholar]6. Dillner J, Rebolj M, Birembaut P. et al. Долгосрочные прогностические значения цитологии и тестирования на вирус папилломы человека при скрининге рака шейки матки: совместное европейское когортное исследование. БМЖ. 2008; 337: а1754. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]7. de Sanjose S, Quint WG, Alemany L. et al. Атрибуция генотипа вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки: ретроспективное кросс-секционное всемирное исследование.Ланцет Онкол. 2010; 11:1048–1056. [PubMed] [Google Scholar]8. Wheeler C M, Hunt WC, Joste N E. и др. Распределение генотипов вируса папилломы человека: значение для вакцинации и скрининга рака в Соединенных Штатах. J Natl Cancer Inst. 2009; 101: 475–487. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Castle PE, Schiffman M, Wheeler C M. et al. Генотипы вируса папилломы человека при цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени. Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2010;19:1675–1681. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10.Хан М.Дж., Кастл П.Е., Лоринц А.Т. и др. Повышенный 10-летний риск предрака и рака шейки матки у женщин с вирусом папилломы человека (ВПЧ) типа 16 или 18 и возможная полезность тестирования на типоспецифический ВПЧ в клинической практике. J Natl Cancer Inst. 2005; 97: 1072–1079. [PubMed] [Google Scholar] 11. Шиффман М., Гласс А.Г., Венценсен Н. и др. Долгосрочное проспективное исследование типоспецифической папилломавирусной инфекции человека и риска неоплазии шейки матки среди 20 000 женщин в когортном исследовании Portland Kaiser.Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2011;20:1398–1409. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. Kjaer S K, Frederiksen K, Munk C. et al. Долгосрочный абсолютный риск цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени или хуже после инфицирования вирусом папилломы человека: роль персистенции. J Natl Cancer Inst. 2010; 102:1478–1488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]13. Stoler M H, Wright TC jr., Sharma A. et al. Тестирование на вирус папилломы человека высокого риска у женщин с цитологией ASC-US: результаты исследования ATHENA HPV.Ам Джей Клин Патол. 2011; 135: 468–475. [PubMed] [Google Scholar] 14. Совет здравоохранения Нидерландов. Скрининг населения на рак шейки матки. 2011/07. ISBN 978-90-5549-841-3 Гаага: 2011 [Google Scholar] 15. Kitchener HC Almonte M Gilham C et al.ARTISTIC: рандомизированное исследование тестирования на вирус папилломы человека (ВПЧ) при первичном скрининге шейки матки Health Technol Assess 2009131–150.iii–iv [PubMed] [Google Scholar]16. Анттила А., Котаниеми-Талонен Л., Лейнонен М. и др. Частота рака шейки матки, тяжелой внутриэпителиальной неоплазии и аденокарциномы in situ при первичном скрининге ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой: рандомизированное исследование в рамках организованной программы скрининга.БМЖ. 2010;340:c1804. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]17. Bulkmans NW, Rozendaal L, Snijders PJ. et al. POBASCAM, популяционное рандомизированное контролируемое исследование по внедрению тестирования на ВПЧ высокого риска при скрининге шейки матки: дизайн, методы и исходные данные 44 102 женщин. Инт Джей Рак. 2004; 110:94–101. [PubMed] [Google Scholar] 18. Rijkaart DC, Berkhof J, Rozendaal L. et al. Тестирование вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии и рака высокой степени: окончательные результаты рандомизированного контролируемого исследования POBASCAM.Ланцет Онкол. 2012; 13:78–88. [PubMed] [Google Scholar] 19. Санкаранараянан Р., Нене Б.М., Шастри С.С. и др. Скрининг ВПЧ на рак шейки матки в сельских районах Индии. N Engl J Med. 2009; 360:1385–1394. [PubMed] [Google Scholar]

Важность генотипирования ВПЧ для скрининга, терапии и лечения неоплазии шейки матки

Geburtshilfe Frauenheilkd. 2012 июнь; 72(6): 507–512.

Язык: английский | German

M. Jentschke

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

P.Soergel

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

P. Hillemanns

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

Кафедра гинекологии и акушерства, Ганноверская медицинская школа, Ганновер

, Ганноверская медицинская школа им. Пересмотрено 23 апреля 2012 г.; Принят 4 мая 2012 г.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

В последнее десятилетие выявление вирусов папилломы человека (ВПЧ) приобретает все большее значение при скрининге рака шейки матки и лечении предшественников рака. Скрининг на ВПЧ рекомендуется для дальнейшей оценки отклонений от нормы Пап-теста или во время последующего наблюдения после лечения предраковых поражений. Несколько рандомизированных контролируемых исследований показали, что скрининг рака шейки матки с использованием обнаружения ВПЧ может быть более эффективным, чем только цитологическое исследование.Генотипирование различных типов ВПЧ высокого риска (врВПЧ), полученных с помощью тестов мазка, еще не получило широкого распространения в клинической практике. Однако были отмечены значительные различия в онкогенности генотипов врВПЧ. ВПЧ 16 на сегодняшний день является наиболее распространенным и онкогенным генотипом. Генотипирование врВПЧ может быть полезным для стратификации риска у ВПЧ-позитивных женщин.

Ключевые слова: рак шейки матки, цервикальная институтная неоплазия (CIN), человеческий папилломавирус

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

4 Zusammenfassung

der Nachweis Passherer Papillomviren (HPV) IM Rahmen der Vorsorge und undlung des zervixkarzinom und unsbesondere seiner vorstufen шляпа в Ден Верганген Jahren zunehmend Bedeutung gewonnen.Die HPV-Bestimmung wird beispielsweise zur weiteren Abklärung auffälliger Pap-Abstriche oder in der Nachsorge nach Behandlung präinviver Veränderungen empfohlen. Mehrere randomisierte kontrollierte Studien konnten zudem eine Überlegenheit gegenüber einem reinen Zytologie-Screening zeigen. Die Typisierung der unterschiedlichen Hochrisiko-HPV-Typen aus Abstrichproben hat dagegen erst in geringerem Maße Anwendung in der Praxis gefunden. Es zeigen sich jedoch große Unterschiede in der onkogenen Potenz und Relevanz der unterschiedlichen Genotypen.HPV 16 шляпа zahlenmäßig und auch prospektiv mit Abstand die höchste Bedeutung für die Entstehung zervikaler Neoplasien. Die Genotypisierung kann daher für eine bessere Risikostratifizierung HPV-positive Frauen hilfreich sein.

Schlüsselwörter: Zervixkarzinom, Zervixpräkanzerose, Humane Papillomviren

Введение

Роль выявления ВПЧ в скрининге рака шейки матки до сих пор вызывает споры в Германии. Одной из двух основных тем прошлогодней конференции EUROGIN (Европейская исследовательская организация по генитальным инфекциям и новообразованиям), состоявшейся в Лиссабоне в мае 2011 г., была – помимо вакцинации против ВПЧ – важность обнаружения ВПЧ.Четырехдневная конференция в меньшей степени сосредоточилась на вопросе о том, следует ли проводить тестирование на ВПЧ в рамках скрининга рака. Вместо этого во многих статьях основное внимание уделялось возможности более дифференцированной оценки инфекции ВПЧ на основе подтверждения отдельных генотипов ВПЧ высокого риска (hrHPV).

Процедуры тестирования на ВПЧ и генотипирования

После одобрения Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) в 2003 г. тест Hybrid Capture 2 (hc2; Qiagen, Hilden, Germany) стал стандартным тестом для выявления ВПЧ. в клинической практике почти 10 лет.Тест позволяет выявить 13 генотипов врВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68) и основан на гибридизации ДНК ВПЧ с РНК ВПЧ. Связи ДНК-РНК маркируют антителами и выявляют с помощью хемилюминесценции. Однако тест не различает отдельные генотипы ВПЧ. Результаты представлены либо как положительные по врВПЧ, либо как отрицательные по врВПЧ. Анализ также можно использовать для выявления генотипов ВПЧ низкого риска (lrHPV). Преимуществом теста hc2 является его давнее и широкое применение в клинической практике; недостатком является возможность перекрестной реактивности с другими, обычно генотипами лрВПЧ, что может привести к ложноположительным результатам 1.

За последнее десятилетие на рынке появились многочисленные новые тесты на врВПЧ, основанные на обнаружении ДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Эти тесты обычно позволяют выявить любой из 14 генотипов врВПЧ (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68). Более того, некоторые из них предлагают возможность отдельного определения индивидуального генотипа hrHPV. Как правило, наиболее часто выявляемыми генотипами являются ВПЧ 16 и 18, а некоторые производители также предлагают тесты, позволяющие выявлять и другие генотипы.В принципе, с помощью ПЦР можно обнаружить даже очень небольшое количество вирусной ДНК. Однако такие высокочувствительные методы обнаружения не имеют значения в рутинной клинической диагностике, поскольку они часто выявляют инфекции ВПЧ, не имеющие клинической значимости (ср. ). Поэтому наиболее распространенные коммерческие тесты на основе ПЦР соответствующим образом адаптировали свои пороги обнаружения. Недостатком методов ПЦР является ограниченный клинический опыт. хотя в последние годы были проведены многочисленные исследования этих тестов 1,2.

Чувствительность Количество лиц с заболеванием (в данном случае женщин с высокой степенью CIN), которые были правильно идентифицированы с помощью используемого метода тестирования (тест на ВПЧ или цитологический мазок) как имеющие заболевание по сравнению с общим числом лиц с заболеванием.
Специфичность Количество здоровых людей, которые были правильно идентифицированы тест-методом как здоровые, по сравнению с общим числом здоровых людей в исследовании.
Тест с максимальной чувствительностью выявит всех больных: чувствительность теста будет 100 %. Однако такой тест обычно имеет низкую специфичность, т.е. много ложноположительных результатов.
Положительное прогностическое значение (PPV): Количество лиц с фактическим заболеванием из всех лиц с положительными результатами теста. У более молодых женщин тест на ВПЧ имеет относительно низкий PPV для высокой степени CIN, так как многие транзиторные инфекции ВПЧ могут возникать в этой возрастной группе без диспластических изменений шейки матки.
Отрицательная прогностическая ценность (NPV): Количество фактически здоровых лиц среди всех лиц с отрицательными результатами теста. NPV правильно проведенного теста на ВПЧ очень высок, так как рак шейки матки или поражения CIN высокой степени не являются ВПЧ-отрицательными; если мазок ВПЧ-отрицательный, любые такие изменения можно исключить с большой долей вероятности.
Цитологическая сортировка после положительного теста на ВПЧ: Все женщины впервые прошли тестирование на ВПЧ. ВПЧ-позитивных женщин дополнительно исследуют с помощью обычного мазка Папаниколау или жидкостной цитологии.Женщин с аномальной цитологией обследуют дополнительно, обычно с помощью кольпоскопии, в то время как женщин с нормальной цитологией повторно обследуют с помощью теста на ВПЧ и, возможно, цитологическое исследование по прошествии определенного времени.

Скрининг на основе ВПЧ по сравнению с цитологией

Несколько недавних крупных европейских рандомизированных контролируемых исследований смогли продемонстрировать превосходство скрининга на рак шейки матки на основе ВПЧ по сравнению с цитологией – независимо от того, используется ли обнаружение ВПЧ отдельно или в сочетании с цитологией (см. .). Однако важно рассматривать результаты с точки зрения их специфичности и положительной прогностической ценности (PPV), поскольку это важные параметры для осуществимых программ скрининга.

Таблица 2  Обзор рандомизированных контролируемых исследований по скринингу рака шейки матки путем выявления ВПЧ.

Результаты и комментарии 2 Исследования с интервалом 3 года
исследование Страна Количество пятен Возрастные брюки Возраст (лет) Способ скрининга Способ скрининга Sequence Colposcopy Repeate Дополнительные ресурсы (годы)
Группа HPV
hc2: гибридный тест Capture 2 HPV; ПЦР: обнаружение ВПЧ с помощью ПЦР; LBC: жидкостная цитология; Пап: обычная цитология; против.: против; н. с.: не указано; ICC: инвазивный рак шейки матки; АИС: аденокарцинома in situ
ARTISTIC 15 UK 24 510 20–64 hc2 + LBC LBC 2 исследования с интервалом в 2 года n. с. 4,8 1-й тур: без различий 2-й тур: означ. меньше CIN 2+/CIN 3+ в группе ВПЧ, но небольшая абсолютная разница
Финляндия 16 Финляндия 58 076 30–60 hc2 + Triage Pap Pap 1 исследование, последующее наблюдение в раковом регистре hc2: 7.2 % Пап: 6,6 % 3,3 1-й раунд: на ⅓ больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ После 3,3 года: ВПЧ: 11 ICC/AIS против Пап: 6 ICC/AIS
фаза 5 Италия 45 174 25-60 25-60 HC2 + LBC PAP 2 исследования с интервалом 3 года HC2: 9,4% PAP: 3.0% 3.5 1-й раунд: 2 × больше CIN 2+ и CIN 3+ в группе ВПЧ; аналогичное количество ICC2-й раунд: ВПЧ: 0 ICC против Папаниколау: 9 ICC (p = 0.004)Возраст 35–60 лет: 1-й раунд ВПЧ: вдвое больше CIN 2 и 3; 2-й раунд ВПЧ: ок. половина числа CIN 2 и 3
NTCC фаза 2 5 ИТАЛИЯ 49 196 25-60 HC2 PAP 2 расследования с интервалом 3 года
Pobascam 4, 17, 18 Нидерланды 44 105 (1-й раунд)33 499 (2-й раунд) 29–56 ПЦР + Пап Пап 2 исследования с интервалом 90 2 5 лет.3 %, 1,3 % Пап: 1,3 %, 1,9 % 6,5 1-й раунд: на 24 % больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 28 % меньше CIN 3+ и на 71 % меньше ICC в группе ВПЧ→ с более ранним выявлением ПЦР клинически значимых CIN 2+
Swedescreen 3 SWEDEN 12 527 32-38 PCR + PAP PAP ПЦР: 1.6% 4.1 1-й раунд: 51% больше CIN 2+ в группе ВПЧ2-й раунд: на 42 % меньше CIN 2+ в группе ВПЧ
Индия 19 (слаборазвитый регион, ранее не проводившаяся программа скрининга) 131 746 30–59 одноэтапный скрининг:hc2 vs.Папаниколау в сравнении с осмотром шейки матки с уксусной кислотой в сравнении со «стандартным лечением» hc2: 1,3 %Пап: 4,9 %вдох: 10,8 % 8 относительный риск выявления распространенного рака шейки матки (≥ II) и количество смертность от рака сократилась вдвое с помощью ВПЧ по сравнению с контрольной группой (без Папаниколау или осмотра шейки матки)

В период с 1997 по 2005 год обширная шведская популяционная исследовательская программа Swedescreen оценила 11 различных алгоритмов скрининга, основанных либо только на тестах на ВПЧ, или только на тестах Папаниколау, или на различных комбинациях ВПЧ и Папаниколау.В подгруппе женщин в возрасте 32–38 лет из коллектива Swedescreen продемонстрировано повышение чувствительности на 35 % для выявления CIN 3 и инвазивной карциномы (CIN 3+) в группе, прошедшей «Пап- и типоспецифическую персистенцию ВПЧ». двойное тестирование по сравнению с одним только цитологическим исследованием 3. Положительная прогностическая ценность также была сопоставимой. Но эта стратегия скрининга является дорогостоящей и трудоемкой, поскольку для получения таких хороших результатов скрининга требуется в два раза больше тестов. Другой алгоритм использовал тест на ВПЧ в качестве начального теста с последующей цитологической сортировкой у ВПЧ-положительных женщин с последующим тестированием на персистирующие ВПЧ-инфекции у женщин с отрицательным Папаниколау и сравнивал этот алгоритм с результатами цитологического исследования. в одиночестве.Этот алгоритм достиг увеличения чувствительности на 30% для обнаружения CIN 3 или инвазивной карциномы (CIN 3+). Более того, этот дифференциально-диагностический алгоритм имел сопоставимую положительную прогностическую ценность (PPV), но количество необходимых скрининговых тестов увеличилось только на 12 % (с 6257 до 7019).

Голландское исследование POBASCAM также продемонстрировало более высокую чувствительность комбинированного скрининга по сравнению с только цитологией 4. Было проведено два этапа скрининга с интервалом между фазами 5 лет.В 1-й фазе было выявлено на 24 % больше CIN 2+ в группе, которой выполняли комбинированное цитологическое исследование и ВПЧ-тесты, по сравнению с группой, в которой применяли только цитологию. Во 2-й фазе частота обнаружения CIN 3+ в группе с тестом на ВПЧ была на 28 % ниже, а частота инвазивного рака была на 71 % ниже по сравнению с группой цитологии, несмотря на сопоставимое общее количество CIN 3+ в обеих группах. Эти данные показывают, что комбинированный скрининг может привести к более раннему выявлению клинически значимых интраэпителиальных неоплазий.

Итальянское исследование NTCC показало аналогичные результаты 5. В общей сложности 47 000 женщин были рандомизированы на две группы, при этом 1-я группа подвергалась только цитологическому скринингу, а 2-я группа подвергалась скринингу с использованием цитологии и теста на ВПЧ (позже в ходе исследования цитология не проводилась). сделано у более поздних новобранцев 2-й когорты). Выявление отклонений сопровождалось соответствующей терапией. Через 2 года обе группы повторно прошли цитологический скрининг. При 1-м скрининге в обеих группах было выявлено одинаковое количество инвазивных карцином шейки матки ().Во время 2-го скрининга в группе, прошедшей скрининг с помощью теста на ВПЧ, больше не было обнаружено раковых заболеваний, в то время как в группе цитологического исследования было обнаружено еще 9 раковых заболеваний. Первоначальные цитологические данные во всех 9 случаях с карциномами, обнаруженными при 2-м скрининге, были нормальными.

Плоскоклеточный рак шейки матки pT1b1, N0, G2 после радикальной эндоскопической гистерэктомии и комбинированного синего красителя/технеция 99м радиоколлоидного (интрацервикального) выявления сторожевых лимфатических узлов.

Что касается CIN 2 и CIN 3 (), почти в два раза больше случаев было обнаружено в группе ВПЧ в 1-м раунде скрининга и примерно вдвое меньше во 2-м раунде по сравнению с группой цитологического исследования.Это привело авторов к выводу, что первоначальный скрининг на ВПЧ приводит к лучшему раннему выявлению клинически значимых предраковых поражений. Обнаружение в два раза большего количества CIN 2 и CIN 3 с помощью теста на ВПЧ во время начального раунда скрининга означало, что эти поражения были своевременно вылечены, и было предотвращено прогрессирование в более инвазивные виды рака. Следует предположить, что предраковые поражения, не обнаруженные во время 1-го этапа скрининга в группе цитологии, привели к 9 раковым заболеваниям, обнаруженным при 2-м скрининге.Тем не менее, авторы рекомендуют проводить скрининг, включая тестирование на ВПЧ, только женщинам старше 35 лет с последующей цитологической сортировкой в ​​случаях с положительным результатом на ВПЧ.

Кольпоскопия поражения CIN 2 после аппликации 5 % уксусной кислоты. Вставка показывает диагностическую флуоресцентную визуализацию той же CIN 2 после применения гексаминолевулината.

В 2008 г. Dillner et al. исследовали 6-летний риск развития поражения CIN 3+ в зависимости от статуса врВПЧ и цитологии в многонациональном когортном исследовании 6.В этом исследовании генотипирование ВПЧ не проводилось. Как и ожидалось, врВПЧ-положительные женщины с аномальной цитологией имели самый высокий риск — 34%. У врВПЧ-позитивных женщин с нормальной цитологией частота CIN 3+ через 6 лет составила 10 %, в то время как в обратном случае (т.е. врВПЧ-отрицательная, аномальная цитология) частота составила всего 2,7 %. У женщин с отрицательным статусом по врВПЧ в начале исследования 6-летний риск развития CIN 3+ составлял всего 0,27% — независимо от исходных цитологических данных. Таким образом, авторы пришли к выводу, что если первоначальный результат на врВПЧ был отрицательным, интервал скрининга можно было бы увеличить до 6 лет без дополнительного риска для женщин.

Потенциальный риск для различных типов врВПЧ

Многочисленные ретроспективные и несколько проспективных исследований показали четкие различия между различными генотипами врВПЧ в отношении риска развития CIN или инвазивного рака. В одном из крупнейших ретроспективных исследований женщин с инвазивным раком шейки матки, проведенных во всем мире, de Sanjose et al. смогли определить ДНК ВПЧ в 85 % из более чем 10 000 исследованных случаев 7. ВПЧ 16 был наиболее часто встречающимся генотипом с частотой 61 %, за ним следовали ВПЧ 18 (10 %) и ВПЧ 45 (6 %). %).Более того, женщины, у которых был обнаружен один из этих 3 генотипов ВПЧ, были примерно на 4 года моложе на момент обнаружения рака по сравнению с женщинами, у которых в раковых клетках были определены другие генотипы ВПЧ.

Американское исследование 1213 женщин с карциномой in situ (CIN 3) и 808 женщин с инвазивным раком шейки матки выявило ДНК ВПЧ в 97,1 % поражений CIN 3 и в 91,0 % инвазивных карцином. общий генотип с частотой 56,3 и 53.2 % соответственно. В случаях с ЦИН 3 за ним следовали ВПЧ 31 (12,6%), ВПЧ 33 (8,0%) и ВПЧ 18 (5,9%), а у женщин с инвазивный рак. Это исследование также выявило значительную разницу в возрасте между женщинами с инвазивным раком и положительными на ВПЧ 16 или ВПЧ 18 по сравнению с женщинами с другими генотипами ВПЧ (48,1 и 45,9 года соответственно против 52,3 года).

ВПЧ 16 также играет наиболее важную роль в непосредственных предраковых поражениях.В американском исследовании ALTS ДНК ВПЧ была обнаружена у 98,8% из 608 исследованных женщин с CIN 3–9. 59,9% случаев были положительными на ВПЧ 16. В этом исследовании ВПЧ 18 (13,2%) был только пятым наиболее распространенным генотипом после ВПЧ 31 (18,1%), ВПЧ 52 (14,8%) и ВПЧ 51 (14,0%). Здесь снова предраковые поражения, вызванные ВПЧ 16, возникали у более молодых женщин (23,5 года) по сравнению с поражениями, вызванными другими генотипами (25 лет). Интересно, что ВПЧ 16-положительные поражения CIN 3 чаще встречались у курящих женщин и реже у повторнородящих женщин.

В 2005 г. Khan et al. показали в проспективном когортном исследовании ВПЧ-специфического типа с участием более 20 000 женщин без полноценного цитологического исследования, что женщины с ВПЧ 16 и ВПЧ 18 имели значительно повышенный риск развития CIN 3+ 10. Для женщин, которые были ВПЧ 16 положительными на момент В начале исследования кумулятивная 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 17 %, а для ВПЧ 18-позитивных женщин — 14 %. Для сравнения, риск для других генотипов врВПЧ составлял 3%, а для врВПЧ-отрицательных женщин — всего 1%.Это распределение риска было еще более значительным для женщин старше 30 лет. У ВПЧ-16 положительных женщин в возрасте > 30 лет 10-летняя заболеваемость CIN 3+ составила 20 %, в то время как у ВПЧ-18 положительных женщин в возрасте > 30 лет этот показатель составил 10%. -летняя заболеваемость 15 %.

Также была четко продемонстрирована более высокая чувствительность тестов на ВПЧ для скрининга по сравнению с обычным цитологическим исследованием. Авторы сравнивали женщин старше 30 лет с аномальной цитологией независимо от их статуса ВПЧ (LSIL: плоскоклеточные внутриэпителиальные поражения низкой степени; женщины с высокой степенью цитологии не были включены в исследование) с женщинами, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18. в начале исследования.10-летняя частота CIN 3+ в группе с аномальной цитологией составила всего 11% по сравнению с 20% и 15% соответственно в группах с ВПЧ 16 и ВПЧ 18. Более того, было показано, что даже женщины с нормальной цитологией, которые были положительными по ВПЧ 16 или ВПЧ 18, имели повышенный риск развития ЦИН 3+.

Основываясь на этих данных, авторы выступают за то, чтобы при скрининге женщин старше 20 лет проводились типоспецифические тесты на ВПЧ 16 и ВПЧ 18, и рекомендуют кольпоскопию, если результат положительный. Если результаты положительны для других генотипов врВПЧ, они считают достаточным повторный скрининг через 1 год.

Другое недавно опубликованное последующее исследование того же исследовательского коллектива показало очень низкую кумулятивную вероятность развития CIN 3+ у женщин с отрицательным статусом ВПЧ 11. в возрасте старше 30 лет он составил всего 0,7% за период наблюдения более 15 лет. Повышенный риск развития CIN 3+ у женщин с ВПЧ 16 был вновь подтвержден в этом исследовании. По сравнению с другими генотипами врВПЧ риск у женщин старше 30 лет был более чем в два раза выше (2.7-кратный относительный риск), и по сравнению с ВПЧ-негативностью он был более чем в 6 раз выше (6,2-кратный относительный риск). Чтобы сравнить независимую валидность тестирования на ВПЧ с цитологией, авторы рассчитали соответствующий относительный риск развития CIN 2+ после положительного по сравнению с отрицательным теста на врВПЧ (7,1 для возраста < 30 лет и 8,5 для 30+ лет) и при аномальных (ASC-US/LSIL) по сравнению с нормальной цитологией (NILM) (1,5 для женщин в возрасте до 30 лет и 2,9 для женщин в возрасте 30+). Это ясно показывает более высокую достоверность положительных результатов теста на ВПЧ по сравнению с аномальными результатами цитологического исследования.

Из-за очень высокой отрицательной прогностической ценности (NPV) отрицательного теста на ВПЧ в этом исследовании авторы пришли к выводу, что для женщин старше 30 лет с отрицательным тестом на ВПЧ и нормальной цитологией повторное обследование через 3 года – как в настоящее время является стандартом в США — может быть, это не нужно так рано.

Популяционное проспективное датское когортное исследование, начатое в 1991 г., пришло к аналогичным выводам 12. Около 7500 женщин с нормальной цитологией в начале исследования подверглись 2 гинекологическим исследованиям с мазком Папаниколау и генотипированием врВПЧ с интервалом в 2 года между исследованиями.Начало исследования было определено как время второго исследования. Все граждане Дании имеют личный идентификационный номер, и в стране дополнительно имеется национальная база данных патологий, в которую вносятся все цитологические и гистологические исследования шейки матки. Это позволяет отслеживать такие учебные коллективы практически без отсева и при относительно низких затратах. Оценка результатов исследования проводилась в 2007 г. после максимального периода наблюдения 13,4 года.

Было показано, что у четверти (26 %) женщин, у которых во 2-м исследовании был обнаружен ВПЧ 16, в период наблюдения развилось поражение CIN 3+.Для ВПЧ 18 заболеваемость составила 15,4%. Цифры были намного ниже для других генотипов врВПЧ (ВПЧ 33: 12,8%; ВПЧ 31: 9,8%; ВПЧ 35: 9,1%; ВПЧ 58: 8,3%; ВПЧ 45: 6,4%). Для врВПЧ-отрицательных женщин риск CIN 3+ через 12 лет составил 3,0 %.

Взятие 2 мазков из шейки матки с интервалом в 2 года позволило авторам оценить влияние персистирующей ВПЧ-инфекции. ВПЧ 16, 31, 33, 35, 52 и 58 имели самую высокую распространенность в начале исследования, более высокую степень персистенции и более высокий потенциал, если они персистируют, привести к поражению CIN 3+.Таким образом, 29,4 % ВПЧ-16-инфекций были персистирующими, т.е. ВПЧ-16 выявлялся при обоих исследованиях, а у 46 % женщин с персистирующей ВПЧ-16-инфекцией развилась CIN 3+. Интересно, что 12-летний риск CIN 3+ у женщин, у которых врВПЧ был обнаружен в обоих исследованиях с использованием hc2, составил 19,3%, независимо от генотипа ВПЧ, и, таким образом, аналогичен риску, зарегистрированному для женщин, у которых ВПЧ 16 был обнаружен один раз (17,3). %).

В 2011 году при анализе подгрупп исследования ATHENA HPV у женщин с цитологией ASCUS (атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения) Stoler et al.обнаружили четкую корреляцию между уровнем положительных результатов на ВПЧ 16 и/или ВПЧ 18 и более тяжелой степенью ЦИН 13. Два генотипа ВПЧ были обнаружены только у 8% женщин без ЦИН, но в 18% случаев с ЦИН 1, 44 % случаев с CIN 2 и 61 % случаев с CIN 3+. Абсолютный риск CIN 3+ составил 20 % для женщин, инфицированных ВПЧ 16. По сравнению с ВПЧ-отрицательными женщинами относительный риск CIN 3+ составил 70,9 для ВПЧ-16-позитивных женщин и 15,4 для ВПЧ-18-позитивных женщин. Относительный риск для 12 других генотипов врВПЧ составлял всего 15.всего 7. Когда ВПЧ 16 сравнивали с этими 12 другими генотипами врВПЧ, ВПЧ 16 по-прежнему имел относительный риск 4,5.

Обсуждение

Представленные здесь исследования ясно показывают потенциал ВПЧ-тестов для скрининга рака шейки матки. С одной стороны, отрицательный результат, особенно у женщин старше 30 лет, дает высокую степень уверенности в том, что у них вряд ли разовьется CIN 3+ в течение нескольких лет. Для этих женщин увеличение интервалов между скринингами, рекомендованное некоторыми авторами, безусловно, оправдано.Ввиду необходимости снижения затрат в здравоохранении сегодня это особенно актуально.

Надлежащее ведение женщин с положительным результатом теста на врВПЧ является более сложной задачей. Необходима дифференцированная оценка в каждом конкретном случае, которая также учитывает данные цитологического исследования. Генотипирование ВПЧ также дает преимущества для оценки индивидуального риска развития CIN 3+ у ВПЧ-положительной женщины в будущем. Во всех цитируемых здесь исследованиях было обнаружено, что ВПЧ 16 является генотипом с самым высоким онкогенным потенциалом среди генотипов врВПЧ.Дело было не только в том, что в большинстве случаев ВПЧ 16 обнаруживался у женщин с CIN 3 или карциномой; проспективно, инфицирование ВПЧ 16 чаще приводило к развитию интраэпителиальной неоплазии, чем другие генотипы врВПЧ. Возраст, в котором заразились ВПЧ 16, также был ниже, чем возраст, в котором женщины были инфицированы другими генотипами врВПЧ.

Исследования не пришли к какому-либо последовательному заключению в отношении других генотипов врВПЧ, несомненно, также из-за региональных различий.В дополнение к ВПЧ 18 наиболее важные генотипы после ВПЧ 16, ВПЧ 31, 33 и 45, в частности, по-видимому, связаны с несколько более высоким риском. Кроме того, генотипирование ВПЧ также позволяет окончательно идентифицировать женщин с персистирующей инфекцией, что является значительным фактором риска развития поражений более высокой степени.

В клинической практике это может означать, что женщины с положительным результатом на ВПЧ 16 и, возможно, также женщины с положительным результатом на ВПЧ 18 могут проходить кольпоскопию и наблюдаться более тщательно, чем женщины с другими генотипами врВПЧ.Тем не менее, важно иметь в виду, что долгосрочный риск развития CIN 3+ составляет всего 20–25%, в зависимости от исследования, после первого выявления ВПЧ 16 10,12,13. 16 ВПЧ-позитивных женщин это влечет за собой ненужные дополнительные исследования. Однако, если ВПЧ 16 сохраняется, риск развития поражения CIN 3+ возрастает почти до 50% 12. Более интенсивное ведение женщин, положительных на ВПЧ 16, ложится бременем на пациентов и врачей и, очевидно, также сопровождается более высокими затратами на лечение.Могут ли эти дополнительные расходы быть компенсированы за счет сокращения количества проверок, требуемых ВПЧ-отрицательных женщин еще предстоит увидеть.

При интерпретации цитируемых исследований также важно помнить, что результаты, полученные в некоторых случаях, не могут быть легко перенесены в немецкую систему раннего выявления, так как другие страны уже используют значительно более длительные интервалы скрининга в рамках организованной программы скрининга. Например, в голландском исследовании POBASCAM интервал между двумя исследованиями составлял 5 лет, тогда как в итальянском исследовании NTCC интервал составлял 2 года.

Представленные здесь данные вскоре могут иметь практическое значение в Нидерландах. В мае 2011 года Совет по здравоохранению Нидерландов, консультирующий правительство Нидерландов, пересмотрел свои рекомендации по скринингу рака шейки матки. В новых рекомендациях предлагается проводить первичный скрининг на ВПЧ, при этом в течение жизни женщины делается около 5 тестов: первый в 30 лет, затем в 35, 40, 50 и 60 лет. ВПЧ-положительные женщины будут дополнительно исследованы с помощью цитологического сортирования 14.

Резюме

Таким образом, становится ясно, что включение тестирования на ВПЧ в программу скрининга рака шейки матки дает высокую степень достоверности. Для ВПЧ-отрицательных женщин интервалы между исследованиями могут быть увеличены. Генотипирование ВПЧ в настоящее время обсуждается с целью лучшей стратификации риска и выявления женщин с повышенным риском, которым потребуется более интенсивный мониторинг.

Сноски

Конфликт интересов М. Йенчке получил от Abbott GmbH & Co гонорары за выступления и транспортные расходы.КГ, Висбаден.

Ссылки

1. Poljak M, Kocjan B J. Коммерчески доступные тесты для мультиплексного обнаружения альфа-вирусов папилломы человека. Expert Rev Anti Infect Ther. 2010;8:1139–1162. [PubMed] [Google Scholar]2. Мейер С. Дж., Беркхоф Дж., Касл П. Э. и др. Руководство по требованиям к тесту ДНК на вирус папилломы человека для первичного скрининга рака шейки матки у женщин 30 лет и старше. Инт Джей Рак. 2009; 124: 516–520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Науклер П., Райд В., Торнберг С.и др. Эффективность тестирования ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой и/или повторным тестированием ДНК ВПЧ при первичном скрининге рака шейки матки. J Natl Cancer Inst. 2009; 101:88–99. [PubMed] [Google Scholar]4. Балкманс Н.В., Беркхоф Дж., Розендал Л. и др. Тестирование ДНК вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени и рака: 5-летнее наблюдение за рандомизированным контролируемым исследованием внедрения. Ланцет. 2007; 370:1764–1772. [PubMed] [Google Scholar]5. Ронко Г., Джорджи-Росси П., Кароцци Ф. и др.Эффективность тестирования на вирус папилломы человека для выявления инвазивного рака шейки матки и внутриэпителиальной неоплазии шейки матки: рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет Онкол. 2010; 11: 249–257. [PubMed] [Google Scholar]6. Dillner J, Rebolj M, Birembaut P. et al. Долгосрочные прогностические значения цитологии и тестирования на вирус папилломы человека при скрининге рака шейки матки: совместное европейское когортное исследование. БМЖ. 2008; 337: а1754. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]7. de Sanjose S, Quint WG, Alemany L. et al. Атрибуция генотипа вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки: ретроспективное кросс-секционное всемирное исследование.Ланцет Онкол. 2010; 11:1048–1056. [PubMed] [Google Scholar]8. Wheeler C M, Hunt WC, Joste N E. и др. Распределение генотипов вируса папилломы человека: значение для вакцинации и скрининга рака в Соединенных Штатах. J Natl Cancer Inst. 2009; 101: 475–487. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Castle PE, Schiffman M, Wheeler C M. et al. Генотипы вируса папилломы человека при цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени. Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2010;19:1675–1681. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10.Хан М.Дж., Кастл П.Е., Лоринц А.Т. и др. Повышенный 10-летний риск предрака и рака шейки матки у женщин с вирусом папилломы человека (ВПЧ) типа 16 или 18 и возможная полезность тестирования на типоспецифический ВПЧ в клинической практике. J Natl Cancer Inst. 2005; 97: 1072–1079. [PubMed] [Google Scholar] 11. Шиффман М., Гласс А.Г., Венценсен Н. и др. Долгосрочное проспективное исследование типоспецифической папилломавирусной инфекции человека и риска неоплазии шейки матки среди 20 000 женщин в когортном исследовании Portland Kaiser.Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2011;20:1398–1409. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. Kjaer S K, Frederiksen K, Munk C. et al. Долгосрочный абсолютный риск цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени или хуже после инфицирования вирусом папилломы человека: роль персистенции. J Natl Cancer Inst. 2010; 102:1478–1488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]13. Stoler M H, Wright TC jr., Sharma A. et al. Тестирование на вирус папилломы человека высокого риска у женщин с цитологией ASC-US: результаты исследования ATHENA HPV.Ам Джей Клин Патол. 2011; 135: 468–475. [PubMed] [Google Scholar] 14. Совет здравоохранения Нидерландов. Скрининг населения на рак шейки матки. 2011/07. ISBN 978-90-5549-841-3 Гаага: 2011 [Google Scholar] 15. Kitchener HC Almonte M Gilham C et al.ARTISTIC: рандомизированное исследование тестирования на вирус папилломы человека (ВПЧ) при первичном скрининге шейки матки Health Technol Assess 2009131–150.iii–iv [PubMed] [Google Scholar]16. Анттила А., Котаниеми-Талонен Л., Лейнонен М. и др. Частота рака шейки матки, тяжелой внутриэпителиальной неоплазии и аденокарциномы in situ при первичном скрининге ДНК ВПЧ с цитологической сортировкой: рандомизированное исследование в рамках организованной программы скрининга.БМЖ. 2010;340:c1804. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]17. Bulkmans NW, Rozendaal L, Snijders PJ. et al. POBASCAM, популяционное рандомизированное контролируемое исследование по внедрению тестирования на ВПЧ высокого риска при скрининге шейки матки: дизайн, методы и исходные данные 44 102 женщин. Инт Джей Рак. 2004; 110:94–101. [PubMed] [Google Scholar] 18. Rijkaart DC, Berkhof J, Rozendaal L. et al. Тестирование вируса папилломы человека для выявления цервикальной интраэпителиальной неоплазии и рака высокой степени: окончательные результаты рандомизированного контролируемого исследования POBASCAM.Ланцет Онкол. 2012; 13:78–88. [PubMed] [Google Scholar] 19. Санкаранараянан Р., Нене Б.М., Шастри С.С. и др. Скрининг ВПЧ на рак шейки матки в сельских районах Индии. N Engl J Med. 2009; 360:1385–1394. [PubMed] [Google Scholar]

Генотип ВПЧ и скрининг рака шейки матки

Мария Демарко, доктор философии, магистр здравоохранения, научный сотрудник отделения клинической генетики (CGB), Марк Шиффман, М.D., магистр здравоохранения, старший исследователь CGB, и его сотрудники изучали естественное течение типоспецифического ВПЧ и его значение для современных программ скрининга рака шейки матки. Эти результаты были опубликованы в журнале EClinicalMedicine 24 апреля 2020 г. 

генотипов ВПЧ значительно различаются по риску прогрессирования до предрака/рака шейки матки, но клиническая ценность типирования обсуждается. Данные 11 573 ВПЧ-положительных женщин, за которыми наблюдали в течение девяти лет в рамках исследования персистенции и прогрессирования (PaP), проведенного Национальным институтом рака/Kaiser Permanente в Северной Калифорнии, показали, что типы ВПЧ существенно различаются по кумулятивному риску и годовой скорости прогрессирования до предрака.Частичное типирование ВПЧ является важной частью точной оценки риска и оптимального клинического ведения: (1) ВПЧ16 является уникальным канцерогеном, и его следует различать отдельно; (2) HPV18 и HPV45 представляют более высокий риск, особенно риск развития аденокарциномы и плоскоклеточного рака; (3) HPV31, HPV33, HPV35, HPV52 и HPV58 (типы, связанные с HPV16) представляют значительно более высокий риск, чем (4) HPV39, HPV51, HPV56, HPV59 и HPV68, которые представляют очень небольшой риск, если предрак не обнаружен сразу.

Кроме того, это исследование продемонстрировало, что вначале быстрая, а затем замедляющаяся скорость выведения большинства канцерогенных типов ВПЧ клинически неразличима; и судьба большинства инфекций ВПЧ стала очевидной в течение трех лет, когда подавляющее большинство (80%) инфекций больше не выявлялось.Стойкость без прогрессирования была редкостью. Возраст женщины не влиял на риск; скорее важна продолжительность настойчивости. Прогностическая ценность аномальной цитологии была наиболее очевидна для распространенного предрака, но менее очевидна при последующем наблюдении.

Подавляющее большинство женщин, наблюдаемых в связи с аномальными результатами скрининга на рак шейки матки, имеют инфекцию ВПЧ без признаков предрака. В программе скрининга рака шейки матки, основанной на тестировании на ВПЧ, начиная с 30 лет, наиболее важными предикторами риска предрака при исходном тестировании являются статус ВПЧ (положительный или отрицательный), группа типа ВПЧ, распространенность ВПЧ по сравнению со случайным обнаружением ВПЧ (длительность инфекции). и полноценная цитология.Сохранение типов ВПЧ с самым высоким риском в течение примерно двух-трех лет после базового скрининга является в высокой степени предиктором предрака.

Артикул:

Демарко М. и др. Изучение естественного течения типоспецифического ВПЧ и последствий для современных программ скрининга рака шейки матки. EClinicalMedicine, , 25 апреля 2020 г. DOI: 10.1016/j.eclinm.2020.100293. [Epub перед печатью].

Генотипирование ВПЧ высокого риска на основе РНК и определение транскрипционной активности ВПЧ высокого риска в тканях шейки матки

  • Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ).https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/human-papillomavirus-(hpv)-and-cervical-cancer. По состоянию на 3 января 2019 г.

  • Walboomers JM, Jacobs MV, Manos MM, Bosch FX, Kummer JA, Shah KV и др. Вирус папилломы человека является необходимой причиной инвазивного рака шейки матки во всем мире. Джей Патол. 1999; 189:12–9.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Андерссон С., Риландер Э., Ларссон Б., Стрэнд А., Сильфверсвард С., Виландер Э.Роль вируса папилломы человека в канцерогенезе аденокарциномы шейки матки. Евр Джей Рак. 2001; 37: 246–50.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бурд Э.М. Вирус папилломы человека и рак шейки матки. Clin Microbiol Rev. 2003; 16:1–17.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ли Н., Франчески С., Хауэлл-Джонс Р., Снайдерс П.Дж., Клиффорд Г.М.Распределение типов вирусов папилломы человека в 30 848 инвазивных формах рака шейки матки по всему миру: вариации по географическим регионам, гистологическим типам и годам публикации. Инт Джей Рак. 2011; 128:927–35.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Nguyen HP, Ramirez-Fort MK, Rady PL. Биология вирусов папилломы человека. Курр Пробл Дерматол. 2014;45:19–32.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хо Г.Ю., Бирман Р., Бердсли Л., Чанг С.Дж., Берк Р.Д.Естественное течение цервиковагинальной папилломавирусной инфекции у молодых женщин. N Engl J Med. 1998; 338: 423–8.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Родригес А.С., Шиффман М., Эрреро Р., Вакхолдер С., Хильдесхайм А., Касл П.Е. и др. Быстрая элиминация вируса папилломы человека и последствия для клинической направленности на персистирующие инфекции. J Natl Cancer Inst. 2008; 100: 513–7.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Винк М.А., Богардс Дж.А., ван Кеменаде Ф.Дж., де Мелькер Х.Е., Мейер С.Дж., Беркхоф Дж.Клиническое прогрессирование цервикальной интраэпителиальной неоплазии высокой степени: оценка времени до доклинического рака шейки матки по данным национального регистра, подвергнутым двойной цензуре. Am J Эпидемиол. 2013; 178:1161–9.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Bulk S, Bulkmans NW, Berkhof J, Rozendaal L, Boeke AJ, Verheijen RH, et al. Риск цервикальной интраэпителиальной неоплазии высокой степени на основании цитологического исследования и тестирования на ВПЧ высокого риска исходно и через 6 месяцев.Инт Джей Рак. 2007; 121:361–7.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Атлас исследований генома рака N, Колледж Альберта Эйнштейна M, Аналитическая биология S, Рак Барретоса H, Колледж Бейлора M, Научно-исследовательский институт Бекмана города Х. et al. Комплексная геномная и молекулярная характеристика рака шейки матки. Природа. 2017; 543: 378–84.

    Артикул КАС Google ученый

  • Макбрайд А.А., Уорбертон А.Роль интеграции в онкогенном прогрессировании рака, связанного с ВПЧ. PLoS Патог. 2017;13:e1006211.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Столер М.Х., Родс Ч.Р., Уитбек А., Волински С.М., Чоу Л.Т., Брокер Т.Р. Экспрессия генов вирусов папилломы человека 16 и 18 при неоплазиях шейки матки. Хум Патол. 1992; 23: 117–28.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Цакояннис Д., Горцилас П., Кириакопулу З., Рютер И.Г., Димитриу Т.Г., Орфанудакис Г. и др.Участки нарушения в генах E1 и E2 HPV16 и связь с дисплазией шейки матки. J Med Virol. 2015; 87: 1973–80.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Oyervides-Munoz MA, Perez-Maya AA, Rodriguez-Gutierrez HF, Gomez-Macias GS, Fajardo-Ramirez OR, Trevino V, et al. Понимание интеграции ВПЧ и его прогрессирования в рак шейки матки. Заразить Генет Эвол. 2018;61:134–44.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Cripe TP, Haugen TH, Turk JP, Tabatabai F, Schmid PG 3rd, Durst M, et al.Транскрипционная регуляция промотора E6-E7 вируса папилломы человека-16 с помощью кератиноцит-зависимого энхансера, а также продуктов вирусного транс-активатора и репрессора E2: значение для канцерогенеза шейки матки. EMBO J. 1987; 6: 3745–53.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Takebe N, Tsunokawa Y, Nozawa S, Terada M, Sugimura T. Сохранение областей E6 и E7 вирусов папилломы человека типов 16 и 18, присутствующих при раке шейки матки.Biochem Biophys Res Commun. 1987; 143: 837–44.

    Артикул КАС Google ученый

  • Вусден К.Х., Донигер Дж., ДиПаоло Дж.А., Лоуи Д.Р. Открытая рамка считывания E7 вируса папилломы человека типа 16 кодирует трансформирующий ген. Онкоген рез. 1988; 3: 167–75.

    КАС пабмед Google ученый

  • Doorbar J, Egawa N, Griffin H, Kranjec C, Murakami I. Молекулярная биология папилломавируса человека и ассоциация заболеваний.Преподобный Мед Вирол. 2015; 25:2–23.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Park TW, Fujiwara H, Wright TC. Молекулярная биология рака шейки матки и его предшественников. Рак. 1995; 76: 1902–13.

    Артикул КАС Google ученый

  • Steenbergen RD, Snijders PJ, Heideman DA, Meijer CJ. Клинические последствия (эпи)генетических изменений в предраковых поражениях шейки матки, вызванных ВПЧ.Нат Рев Рак. 2014;14:395–405.

    Артикул КАС Google ученый

  • Doorbar J. Молекулярная биология папилломавирусной инфекции человека и рака шейки матки. Клин науч. 2006; 110: 525–41.

    Артикул КАС Google ученый

  • Беневоло М., Вокатуро А., Карачени Д., Френч Д., Розини С., Заппакоста Р. и др. Чувствительность, специфичность и клиническая ценность анализа мРНК вируса папилломы человека (ВПЧ) E6/E7 в качестве сортировочного теста для цитологии шейки матки и теста на ДНК ВПЧ.Дж. Клин Микробиол. 2011;49:2643–50.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ван Х.И., Ким Х., Парк С., Парк К.Х., Ли Х. Аналитическая оценка эффективности анализа HPV OncoCheck для выявления инфекции ВПЧ высокого риска в жидких образцах шейки матки. Опыт Мол Патол. 2019;106:149–56.

    Артикул КАС Google ученый

  • У И, Чжао Дж, Донг С, Ван И, Ли А, Цзян И и др.Секвенирование всего экзома и РНК раскрывает новое понимание патогенеза рака шейки матки, связанного с ВПЧ. Биомарк рака. 2019;25:341–50.

  • Melchers WJ, Bakkers JM, Wang J, de Wilde PC, Boonstra H, Quint WG, et al. Полимеразная цепная реакция с короткими фрагментами Анализ линии обратной гибридизации для обнаружения и генотипирования широкого спектра типов вирусов папилломы человека. Далее следует клиническая оценка. Ам Джей Патол. 1999; 155:1473–8.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • де Биттер Т., ван де Уотер С., ван ден Хевел С., Зеелен С., Эйкеленбум А., Топс Б. и др.Профилирование метаболического транскриптома с помощью одномолекулярных зондов молекулярной инверсии. Научный доклад 2017; 7:11402.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Boyle EA, O’Roak BJ, Martin BK, Kumar A, Shendure J. MIPgen: оптимизированное моделирование и разработка молекулярных инверсионных зондов для целевого повторного секвенирования. Биоинформатика. 2014;30:2670–2.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • ван ден Хеувел С., ван Эвейк А., Зеелен С., де Биттер Т., Хайнен М., Малдерс П. и другие.Молекулярное профилирование мишеней, поддающихся лечению, при светлоклеточной почечно-клеточной карциноме с помощью направленного секвенирования РНК. Передний. Онкол. 2019;9:117.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Rashmi R, Huang X, Floberg JM, Elhammali AE, McCormick ML, Patti GJ, et al. Радиорезистентный рак шейки матки чувствителен к ингибированию гликолиза и окислительно-восстановительного метаболизма. Рак рез. 2018;78:1392–403.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Арбин М., Ронко Г., Анттила А., Мейер С.Дж., Поляк М., Огилви Г. и др.Данные о тестировании на вирус папилломы человека при вторичной профилактике рака шейки матки. вакцина. 2012;30:F88–99.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ebisch RM, Siebers AG, Bosgraaf RP, Massuger LF, Bekkers RL, Melchers WJ. Сортировка ВПЧ-позитивных женщин высокого риска при скрининге рака шейки матки. Эксперт Rev Anticancer Ther. 2016;16:1073–85.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Нанда К., МакКрори Д.К., Майерс Э.Р., Бастиан Л.А., Хассельблад В., Хикки Д.Д. и др.Точность теста Папаниколау при скрининге и последующем наблюдении за цитологическими аномалиями шейки матки: систематический обзор. Энн Интерн Мед. 2000; 132:810–9.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Arbyn M, Snijders PJ, Meijer CJ, Berkhof J, Cuschieri K, Kocjan BJ, et al. Какие тесты на ВПЧ высокого риска соответствуют критериям для использования при первичном скрининге рака шейки матки? Клин Микробиол Инфект. 2015;21:817–26.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Castle PE, Cuzick J, Stoler MH, Wright TC, Jr., Reid JL, et al. Обнаружение вируса папилломы человека 16, 18 и 45 у женщин с цитологией ASC-УЗИ и риск предрака шейки матки: результаты исследования CLEAR HPV. Ам Джей Клин Патол. 2015; 143:160–7.

  • Haedicke J, Iftner T. Обзор клинической эффективности анализа Aptima HPV.Джей Клин Вирол. 2016; 76 (Приложение 1): S40–S8.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Луттмер Р., Беркхоф Дж., Дейкстра М.Г., ван Кеменаде Ф.Дж., Снайдерс П.Дж., Хайдеман Д.А. и др. Сравнение алгоритмов сортировки с использованием генотипирования ДНК ВПЧ, обнаружения мРНК ВПЧ E7 и цитологического исследования у женщин с положительным ДНК ВПЧ высокого риска. Джей Клин Вирол. 2015;67:59–66.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Origoni M, Cristoforoni P, Carminati G, Stefani C, Costa S, Sandri MT, et al.Тестирование мРНК E6/E7 на индуцированное вирусом папилломы человека внутриэпителиальное заболевание шейки матки высокой степени (CIN2/CIN3): многообещающая перспектива. Ecancermedicalscience. 2015;9:533.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Джорджи Росси П., Беневоло М., Вокатуро А., Карачени Д., Чиккочиоппо Л., Фрега А. и др. Прогностическое значение анализа мРНК HPV E6/E7 у женщин с отрицательным результатом кольпоскопии или гистологии CIN1: последующее исследование.ПЛОС ОДИН. 2013;8:e57600.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Лентинг К., Хуршед М., Питерс Т.Х., ван ден Хевел С., ван Лит С.А.М., де Биттер Т. и др. Глиомы человека с мутацией изоцитратдегидрогеназы 1 зависят от лактата и глутамата для облегчения метаболического стресса. FASEB J. 2019;33:557–71.

    Артикул КАС Google ученый

  • ван ден Хевел К., Дас А.И., де Биттер Т., Симмер Ф., Вурдингер Т., Молина-Вила М.А. и др.Количественная оценка и локализация транскриптов варианта тирозинкиназы онкогенного рецептора с использованием зондов молекулярной инверсии. Научный доклад 2018; 8: 7072.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Thierry F, Yaniv M. Трансактивный белок BPV1-E2 может быть либо активатором, либо репрессором регуляторной области HPV18. EMBO J. 1987; 6: 3391–7.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Леунг Т.В., Лю С.С., Леунг Р.К., Чу М.М., Чеунг А.Н., Нган ХИ.Сайты связывания E2 HPV 16 1 и 2 становятся более метилированными, чем сайт связывания E2 4 во время канцерогенеза шейки матки. J Med Virol. 2015;87:1022–33.

    Артикул КАС Google ученый

  • Пэн Г., Дэн В., Джун В., Цзюньцзюнь Ю., Тонг Р., Баоли З. и др. Профилирование транскриптома рака и прилегающих неопухолевых тканей у пациентов с плоскоклеточным раком шейки матки с помощью секвенирования РНК. Опухоль биол. 2015;36:3309–17.

    Артикул КАС Google ученый

  • Чантима В., Тептай К., Чеунсухон П., Дхаракул Т.Экспрессия ЕрСАМ при плоскоклеточном раке шейки матки выявляется с помощью моноклональных антител к проксимальной к мембране части ЕрСАМ. БМК Рак. 2017;17:811.

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Вернике А.Г., Ким С., Лю Х., Бандер Н.Х., Пирог Э.С. Экспрессия простатспецифического мембранного антигена (PSMA) в новых сосудах гинекологических злокачественных новообразований: последствия для терапии, нацеленной на PSMA.Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2017;25:271–276.

    Артикул КАС Google ученый

  • Noel JC, Bucella D, Fayt I, Simonart T, Buxant F, Anaf V, et al. Экспрессия рецепторов андрогенов при цервикальной интраэпителиальной неоплазии и инвазивной плоскоклеточной карциноме шейки матки. Int J Gynecol Pathol. 2008; 27: 437–41.

    Артикул Google ученый

  • Атлас белков человека.https://www.proteinatlas.org/ENSG00000169083-AR/патология. По состоянию на 9 января 2019 г.

  • Ten Broeke SW, van der Klift HM, Tops CMJ, Aretz S, Bernstein I, Buchanan DD, et al. Риск рака при синдроме Линча, связанном с ПМС2. Дж. Клин Онкол. 2018;36:2961–8.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Полимеразная цепная реакция Обнаружение вируса папилломы человека (ВПЧ) и генотипирование ВПЧ при инвазивном раке шейки матки с ранее отрицательными результатами теста на HC2 | Американский журнал клинической патологии

    Аннотация

    Цели: Недавно три крупных китайских когортных исследования показали, что 7.От 5% до 15,5% пациентов с раком шейки матки имели отрицательные результаты теста на вирус папилломы человека высокого риска (врВПЧ) в предыдущих цитологических образцах. Эти исследования поднимают вопрос о том, представляют ли эти отрицательные результаты на врВПЧ действительно отрицательные по врВПЧ карциномы или ложноотрицательные результаты теста на врВПЧ из-за ограничений в тестировании цитологических образцов. Этот вопрос становится все более важным в связи с растущим стремлением использовать только тестирование на врВПЧ для скрининга рака шейки матки.

    Методы: Мы исследовали статус врВПЧ в хирургических образцах тех же пациентов с раком шейки матки, используя три метода полимеразной цепной реакции и метод линейного генотипирования.

    Результаты: Различные генотипы ВПЧ были обнаружены в 28 (45,9%) из 61 случая, все они относились к канцерогенным или, возможно, канцерогенным категориям. ВПЧ 16 был наиболее распространенным генотипом, обнаруженным в положительных случаях (66,7%). ВПЧ был обнаружен в 25 (50%) из 50 плоскоклеточных карцином и двух (66,7%) из трех аденоплоскоклеточных карцином и только в одной (12,5%) из восьми эндоцервикальных аденокарцином.

    Выводы: Наши результаты показывают, что отрицательный результат теста на врВПЧ в образцах цервиковагинальной цитологии у женщин, у которых позже диагностирована карцинома шейки матки, может быть объяснен появлением действительно ВПЧ-отрицательных карцином у более чем половины пациенток.Эти результаты следует учитывать при разработке будущих руководств по скринингу рака шейки матки.

    По завершении этого задания вы сможете:

    • обсудить значение отрицательного результата тестирования на вирус папилломы человека высокого риска (врВПЧ) в образцах цервико-вагинального цитологического исследования у женщин, у которых позже диагностирована карцинома шейки матки.

    • оценить процент истинно-отрицательных и ложно-отрицательных результатов на врВПЧ у женщин, у которых впоследствии развился рак шейки матки.

    • коррелировать истинно отрицательные результаты теста на врВПЧ в образцах цервико-вагинальной цитологии с карциномой шейки матки, не связанной с ВПЧ.

     ASCP аккредитован Советом по аккредитации непрерывного медицинского образования для обеспечения непрерывного медицинского образования врачей. ASCP определяет для этой журнальной деятельности CME максимум 1 AMA PRA Category 1 Credit ™ за статью. Врачи должны претендовать только на кредит, соизмеримый со степенью их участия в деятельности. Это мероприятие квалифицируется как модуль самооценки Американского совета по патологии, поддерживающий сертификацию, часть II.

      Авторы этой статьи, а также члены и сотрудники комитета по планированию не имеют соответствующих финансовых отношений с коммерческими интересами, которые следует раскрывать.

     Экзамен можно найти на сайте www.ascp.org/ajcpcme.

    Рак шейки матки является вторым наиболее распространенным видом рака среди женщин в развивающихся странах. Считается, что практически все виды рака шейки матки и их предшественники вызваны персистирующей инфекцией, вызываемой вирусом папилломы человека высокого риска (врВПЧ). Было высказано предположение, что жидкостное тестирование на врВПЧ обладает более высокой чувствительностью, чем цитологический тест Папаниколау (Пап) для выявления предраковых поражений шейки матки, а Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США недавно одобрило тест Кобаса на вирус папилломы человека (ВПЧ) (Roche Molecular Diagnostics, Плезантон, США). CA) для использования в качестве первичного скринингового теста первой линии на рак шейки матки у женщин в возрасте 25 лет и старше. 1-4

    В то время как существует стремление использовать только тестирование на врВПЧ в качестве скринингового теста первой линии для выявления рака шейки матки, многочисленные исследования выявили широкий диапазон отрицательных на врВПЧ показателей (10%- 30%) в цервикальных цитологических образцах от больных раком шейки матки. 5-12 Наше недавнее многоцентровое исследование в Соединенных Штатах показало, что частота ВПЧ-отрицательных результатов составляет 9%, 23% и 25% менее чем за 1 год, от 1 до 3 лет и от 3 до 5 лет, соответственно, до гистологического диагноза ВПЧ. рак шейки матки. 13 Дополнительное исследование, проведенное Quest, также показало, что у 526 пациенток с инвазивным раком шейки матки частота ВПЧ-отрицательных результатов составляет 19% в течение 1 года. 14

    На Китай приходится 14% годовой заболеваемости раком шейки матки в мире, и большой объединенный анализ в Китае показывает, что заболеваемость раком шейки матки в Китае может быть выше, чем нынешняя расчетная заболеваемость 9,6 на 100 000 женщин. 15 , 16

    Недавно мы опубликовали три независимых исследования из Китая и продемонстрировали, что тест на врВПЧ (Hybrid Capture 2 (Qiagen, Gaithersburg, MD) на образцах цитологии Папаниколау) был отрицательным в 15 случаях.5% (64/477), 7,5% (32/427) и 9,8% (13/133) пациентов с инвазивной карциномой шейки матки, соответственно, из больницы акушерства и гинекологии Университета Фудань (OGHFU), Guangzhou Kingmed Diagnostics, и Госпиталь китайско-японской дружбы. 17-19

    Потенциальные причины отрицательного результата теста на врВПЧ в условиях скрининга на рак шейки матки включают вариабельность выборки, низкую вирусную нагрузку при некоторых видах рака, быстрое развитие карциномы шейки матки, возникающее между интервалами скрининга, и редкое возникновение истинного врВПЧ- негативные карциномы шейки матки. 20 , 21 В этом исследовании мы стремились выяснить, можно ли обнаружить ДНК врВПЧ различными молекулярными методами в хирургических тканях, резецированных у пациентов с инвазивным раком шейки матки с предварительным тестированием врВПЧ на цитологических образцах в ранее опубликованных когортах и поэтому определите, являются ли предыдущие отрицательные результаты теста на врВПЧ истинно отрицательными или ложноотрицательными у этих пациентов.

    Материалы и методы

    Начисление пациентов

    Основываясь на когортах в наших предыдущих исследованиях, проведенных OGHFU и Guangzhou Kingmed Diagnostics в Китае, в настоящее исследование были включены случаи рака шейки матки с отрицательным тестом на врВПЧ (тест HC2) на цитологических образцах за 1 год до гистологического диагноза и доступной резецированной опухолевой тканью.Все слайды хирургической патологии были рассмотрены как минимум двумя патологами-хирургами для подтверждения диагноза и наличия достаточного количества опухолевой ткани для молекулярных тестов ВПЧ. В общей сложности был отобран 61 случай с предшествующим отрицательным тестом на врВПЧ на цитологических образцах и доступных тканях, залитых парафином, включая 50 плоскоклеточных карцином, восемь аденокарцином (пять обычных типов, две карциномы с минимальным отклонением и одну светлоклеточную карциному) и три аденосквамозных карциномы. карциномы Изображение 1 . Средний возраст пациентов составил 47 лет с диапазоном от 27 до 78 лет.Средний интервал между отрицательным результатом теста на врВПЧ в цитологических образцах и гистологическим диагнозом рака шейки матки составил 1,8 месяца (диапазон 0,2–12 месяцев).

    Изображение 1

    Карциномы шейки матки с предшествующими отрицательными результатами на вирус папилломы человека (H&E). A , инвазивная плоскоклеточная карцинома. Высокодифференцированная карцинома состоит из островков и гнезд плоского эпителия с ороговевающей инфильтрирующей строму (×100). B Эндоцервикальная инвазивная аденокарцинома обычного типа.Переполненные железы демонстрируют гибрид эндометриоидных и муцинозных признаков и множество митозов (×100). C , D , Аденокарцинома с минимальным отклонением. Хорошо дифференцированные муцинозные железы глубоко инфильтрируют отечную и десмопластическую строму. Неопластические железы имеют неправильную форму и разные размеры ( C , ×40; D , ×100).

    Изображение 1

    Карциномы шейки матки с предшествующими отрицательными результатами на вирус папилломы человека (H&E). A , инвазивная плоскоклеточная карцинома.Высокодифференцированная карцинома состоит из островков и гнезд плоского эпителия с ороговевающей инфильтрирующей строму (×100). B Эндоцервикальная инвазивная аденокарцинома обычного типа. Переполненные железы демонстрируют гибрид эндометриоидных и муцинозных признаков и множество митозов (×100). C , D , Аденокарцинома с минимальным отклонением. Хорошо дифференцированные муцинозные железы глубоко инфильтрируют отечную и десмопластическую строму. Неопластические железы имеют неправильную форму и разные размеры ( C , ×40; D , ×100).

    Экстракция ДНК

    Блоки парафина

    были обработаны в строгих условиях, чтобы избежать загрязнения. ДНК выделяли из 10 парафиновых срезов (4 мкм каждый) блока каждого пациента с использованием набора тканей QIAamp DNA FFPE (Qiagen GmbH, Hilden, Germany) в соответствии с протоколом производителя. Вкратце, в центрифужную пробирку добавляли 1 мл ксилола, интенсивно встряхивали в течение 10 секунд и центрифугировали. Супернатант удаляли, добавляли 1 мл 100% этанола, образец перемешивали и центрифугировали.Снова удаляли супернатант и давали всему остатку этанола испариться. Добавляли буфер для лизиса тканей животных (ATL) и белок K и инкубировали при 56°C и 90°C в течение 1 часа каждый. Затем добавляли буфер ATL, лизат переносили в колонку MinElute (прилагается набор), центрифугировали и дважды промывали. Затем ДНК элюировали, используя буфер для элюирования тканей животных, и образцы хранили при –20°C для последующего использования.

    Выявление ДНК ВПЧ с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и генотипирование ВПЧ проводились независимо друг от друга в двух разных лабораториях одновременно и двойным слепым методом, не зная результатов друг друга.

    ПЦР для обнаружения ДНК ВПЧ

    Для повышения чувствительности ПЦР для выявления ВПЧ проводили с тремя обычно используемыми наборами консенсусных праймеров (GP5+/6+, MY09/11 и SPF1/2) для различных областей L1 вирусного генома Таблица 1 . Условия для трех методов ПЦР были аналогичны предыдущим публикациям с некоторыми следующими корректировками:

    Таблица 1

    Наборы праймеров для полимеразной цепной реакции для обнаружения присутствия общей области L1 вируса папилломы человека . Последовательность . Прогнозируемый размер продукта, п.н. . + MY09 / 11 F: 5′-CGTCCMARRGGAWACTGATC-3′ + 450 Р: 5′-GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3′ + GP5 + / 6 + F: 5′-TTTGTTACTGTGGTAGATACTAC-3′ 150 Р: 5′-GAAAATAAACTGTAAATCATATTC-3′ SPF1A F: 5′-GCiCAGGGiCACAATAATGG-3′ девяносто одна тысяча восемьсот восемьдесят одна 65 SPF1B Р: 5′-GCiCAGGGiCATAACAATGG-3′ SPF1C F: 5′-GCiCAGGGiCATAATAATGG-3 ‘ SPF1D Р: 5′-GCiCAAGGiCATAATAATGG-3′ SPF2B-био F: 5′-GTiGTATCiACAACAGTAACAAA-3 ‘ SPF2D- био F: 5′-GTiGTATCiACTACAGTAACAAA-3′

    +
    Праймер . Последовательность . Прогнозируемый размер продукта, п.н. . +
    MY09 / 11 F: 5′-CGTCCMARRGGAWACTGATC-3′ 450
    Р: 5′-GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3′
    GP5 + / 6 + F: 5′-TTTGTTACTGTGGTAGATACTAC-3′ 150
    Р: 5′-GAAAATAAACTGTAAATCATATTC-3′
    SPF1A F: 5′-GCiCAGGGiCACAATAATGG-3′ 65
    SPF1B Р: 5′-GCiCAGGGiCATAACAATGG-3′
    SPF1C F: 5′-GCiCAGGGiCATAATAATGG-3 ‘
    SPF1D Р: 5′-GCiCAAGGiCATAATAATGG-3′
    SPF2B-био F: 5′-GTiGTATCiACAACAGTAACAAA-3 ‘
    SPF2D- bio  F: 5′-GTiGTATCiACTACAGTAACAAA-3′ 
    01 Грунтовка . Последовательность . Прогнозируемый размер продукта, п.н. . + MY09 / 11 F: 5′-CGTCCMARRGGAWACTGATC-3′ + 450 Р: 5′-GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3′ + GP5 + / 6 + F: 5′-TTTGTTACTGTGGTAGATACTAC-3′ 150 Р: 5′-GAAAATAAACTGTAAATCATATTC-3′ SPF1A F: 5′-GCiCAGGGiCACAATAATGG-3′ девяносто одна тысяча восемьсот восемьдесят одна 65 SPF1B Р: 5′-GCiCAGGGiCATAACAATGG-3′ SPF1C F: 5′-GCiCAGGGiCATAATAATGG-3 ‘ SPF1D Р: 5′-GCiCAAGGiCATAATAATGG-3′ SPF2B-био F: 5′-GTiGTATCiACAACAGTAACAAA-3 ‘ SPF2D- био F: 5′-GTiGTATCiACTACAGTAACAAA-3′
    Праймер . Последовательность . Прогнозируемый размер продукта, п.н. . +
    MY09 / 11 F: 5′-CGTCCMARRGGAWACTGATC-3′ 450
    Р: 5′-GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3′
    GP5 + / 6 + F: 5′-TTTGTTACTGTGGTAGATACTAC-3′ 150
    Р: 5′-GAAAATAAACTGTAAATCATATTC-3′
    SPF1A F: 5′-GCiCAGGGiCACAATAATGG-3′ 65
    SPF1B Р: 5′-GCiCAGGGiCATAACAATGG-3′
    SPF1C F: 5′-GCiCAGGGiCATAATAATGG-3 ‘
    SPF1D Р: 5′-GCiCAAGGiCATAATAATGG-3′
    SPF2B-био F: 5′-GTiGTATCiACAACAGTAACAAA-3 ‘
    SPF2D- bio  F: 5′-GTiGTATCiACTACAGTAACAAA-3′ 

    Как MY09/11, так и GP5+/6+  выполняли в конечном реакционном объеме 20 мкл, содержащем 3 мкл выделенной ДНК, 2 мкл 10× буфера, .8 мкл каждого dNTP, по 0,4 мкл каждого прямого и обратного праймеров и 1,0 ЕД ДНК-полимеразы Taq (Genebase Bioscience, Гуанчжоу, Китай). Температурные циклы ПЦР для MY09/11 были следующими: предварительный нагрев в течение 5 минут при 94 °C, затем 40 циклов по 30 секунд при 94 °C, 1 минута при 45 °C и 1 минута при 72 °C и окончательное удлинение 7 минут при 72 °C. Условия ПЦР с набором праймеров GP5+/6+  были следующими: предварительный нагрев в течение 10 минут при 94 °C, затем 40 циклов по 1 минуте при 94 °C, 2 минутах при 40 °C и 1.5 минут при 72 °C и окончательное продление на 7 минут при 72 °C. ПЦР с использованием праймеров SPF проводили в конечном реакционном объеме 40 мкл, содержащем 4 мкл выделенной ДНК, 4 мкл буфера 10×, по 3,2 мкл каждого dNTP, по 0,5 мкл каждого прямого и обратного праймеров и 2,5 ЕД ДНК-полимеразы Taq. Условия ПЦР были следующими: предварительный нагрев в течение 1 минуты при 94 °C, затем 40 циклов по 1 минуте при 94 °C, 1 минуте при 45 °C и 1 минуте при 72 °C и заключительном удлинении в течение 5 минут при 72 °C. С. Все ПЦР-амплификации проводили с соответствующими положительными и отрицательными контролями.Продукты ПЦР MY09/11 и GP5+/6+  разделяли электрофорезом в 1,8% агарозном геле. Продукты СПФ фракционировали электрофорезом в 12% полиакриламидном геле.

    Тест Roche Linear Array для генотипирования ВПЧ

    Генотипирование ВПЧ

    выполняли с использованием набора для тестирования линейных массивов (LA) Roche (Roche Molecular Diagnostics) в соответствии с рекомендациями производителя. Этот метод позволяет обнаружить 37 различных типов ВПЧ, 13 типов ВПЧ высокого риска и 13 типов ВПЧ низкого риска, семь возможных канцерогенных типов и четыре неустановленных типа (6, 11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 40). , 42, 45, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 58, 59, 61, 62, 64, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 81, 82, 83, 84 , и 89).Вкратце, часть очищенной ДНК, используемой для выявления ВПЧ с помощью ПЦР, использовали для генотипирования. Затем амплифицировали 10 мкл матричной ДНК, продукты гибридизовали и выявляли с использованием системы окрашивания с автоматическим анализом зондов (LiPA) (Innogenetics, Гент, Бельгия) с использованием 2,5 мл каждого реагента на полоску. Результаты ЛА на полосках оценивались двумя независимыми наблюдателями. Однозначная непрерывная полоса считалась указывающей на положительный результат.

    Статистический анализ

    Различие в частоте положительных результатов на ВПЧ между гистологическими типами рака было проанализировано с помощью точного теста Фишера.По результатам ВПЧ и цитологического исследования проводили корреляционный тест Пирсона. Все анализы проводились с помощью программного обеспечения SPSS (версия 16.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс). Значение P менее 0,05 (двусторонний тест) считалось значимым.

    Результаты

    Двадцать (32,8%) из 61 случая с достаточным количеством ДНК были положительными на ВПЧ с помощью ПЦР с использованием набора праймеров GP5+/6+ , 22 (36,1%) были положительными с использованием праймеров MY9/11 и 22 (36,1%) были положительными с использованием SPF1/ 2 грунтовки. Всего 17 (27.9%) были положительными на ВПЧ при использовании всех трех наборов праймеров. В целом, ДНК ВПЧ можно было обнаружить в 27 (44,3%) случаях с использованием хотя бы одного из трех наборов праймеров для ПЦР Таблица 2 . Репрезентативные результаты ПЦР показаны на изображении 2 . Таблица 2 Частота обнаружения ДНК вируса папилломы человека

    в образцах после хирургической резекции с помощью трех различных наборов праймеров для ПЦР (n = 61)

    70056
    Наборы праймеров для ПЦР . Количество (%) дел .
    Три набора 17 (27.9)
    два набора 3 (4.9)
    One Set 7 (11.5)
    Всего 27 (44.3)
    PrR Promer Sets . Количество (%) дел . три набора 17 (27.9) Две наборы 3 (4.9) One Set 7 (11.5) Всего 27 (44.3) Таблица 2

    Человеческих папилломавируса ДНК. Оценки обнаружения ДНК по хирургической резекции Образец резакции тремя различными наборами грунтовки ПЦР (N = 61)

    наборы грунтовки PCR . Количество (%) дел . три набора 17 (27.9) Две наборы 3 (4.9) One Set 7 (11.5) Итого 27 (44,3)
    Наборы праймеров для ПЦР . Количество (%) дел .
    три набора 17 (27.9)
    2 набора 3 (4.9)
    One Set 7 (11.5)
    Всего 27 (44.3)

    Изображение 2

    Репрезентативные результаты электрофореза ампликонов (окрашенных бромистым этидием) из тканей больных раком шейки матки для обнаружения ДНК вируса папилломы человека L1.Были использованы три разные пары праймеров, включая MY09/11 (450 пар оснований [п.н.]), GP5+/6+  (150 п.н.) и SPF1/2 (65 п.н.). ДНК, выделенную из клеточных линий SiHa и CasKi, использовали в качестве положительного контроля. На изображении показаны продукты полимеразной цепной реакции (ПЦР) 20 образцов с тремя парами праймеров. Образцы 1, 2, 3, 5, 7, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 17 и 19 были положительными для всех трех пар праймеров ПЦР. Образцы 4, 8, 11, 16, 18 и 20 были отрицательными для всех трех пар праймеров ПЦР. Образец 6 был положительным для наборов праймеров GP5+/6+, SPF1/2, но отрицательным для набора праймеров MY09/11.Большинство случаев продемонстрировали согласованные результаты по этим трем парам праймеров для ПЦР.

    Изображение 2

    Репрезентативные результаты электрофореза ампликонов (окрашенных бромистым этидием) из тканей больных раком шейки матки для обнаружения ДНК вируса папилломы человека L1. Были использованы три разные пары праймеров, включая MY09/11 (450 пар оснований [п.н.]), GP5+/6+  (150 п.н.) и SPF1/2 (65 п.н.). ДНК, выделенную из клеточных линий SiHa и CasKi, использовали в качестве положительного контроля. На изображении показаны продукты полимеразной цепной реакции (ПЦР) 20 образцов с тремя парами праймеров.Образцы 1, 2, 3, 5, 7, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 17 и 19 были положительными для всех трех пар праймеров ПЦР. Образцы 4, 8, 11, 16, 18 и 20 были отрицательными для всех трех пар праймеров ПЦР. Образец 6 был положительным для наборов праймеров GP5+/6+, SPF1/2, но отрицательным для набора праймеров MY09/11. Большинство случаев продемонстрировали согласованные результаты по этим трем парам праймеров для ПЦР.

    Генотипирование Roche LA также было проведено для изучения статуса ВПЧ и определения генотипов ВПЧ в 61 образце рака. ЛА-тест выявил ВПЧ у 27 (44.3%) случаев. Один случай был положительным на ВПЧ с помощью LA-теста, но отрицательным с помощью ПЦР с использованием всех трех наборов праймеров для ПЦР, а один случай был положительным на ВПЧ с помощью ПЦР (GP5+/6+ и SPF+, MY9/11–), но отрицательным с помощью LA-теста. Следовательно, при рассмотрении всех четырех методов ВПЧ был обнаружен в 28 (45,9%) из 61 общего случая. Всего было идентифицировано семь различных генотипов ВПЧ. Все, кроме одного случая, были положительными для одного генотипа ВПЧ, и в этом случае были обнаружены оба ВПЧ 26 и 58. Из положительных случаев наиболее распространенным был генотип ВПЧ 16 (18/27, 66.7%), за которым следует ВПЧ 58 (14,8%). Двадцать пять случаев были положительными на канцерогенные типы ВПЧ (врВПЧ) и два случая были положительными на ВПЧ с возможным канцерогенным риском (типы 26 и 73) Таблица 3 . ВПЧ 26 и 73 не были обнаружены методом HC2.

    Таблица 3

    Распределение генотипов ВПЧ в 61 случае рака шейки матки, протестированном с помощью набора Roche Linear Array Kit

    27 (44.3)
    Генотипирование ВПЧ . Количество (%) положительных случаев .
    16 18 (29.5)
    18 1 (1,6)
    26 2 (3,3)
    45 1 (1,6)
    58 4 ( 6.6)
    59 59 1 (1.6)
    7001 1 (1.6)
    (44.3)
    Тотальный отрицательный 34 (55.7)
    1 (1.6)
    Генотипирование ВПЧ . Количество (%) положительных случаев .
    16 18 (29,5)
    18 1 (1.6)
    26 A 2 (3.3)
    45 1 (1.6)
    58 58 4 (6.6)
    59
    59 1 (1.6)
    73 1 (1.6)
    Общая позиция 27 (44.3)
    Общая отрицательная 34 (55.7)
    Таблица 3

    HPV Распределение генотипа 61 случаев рака шейки матки, протестированные набором линейного массива Roche

    HPV генотипирование . Количество (%) положительных случаев .
    16 18 (29.5)
    18 18 1 (1.6)
    26 A 2 (3.3)
    45 45 1 (1.6)
    58 A

    4 (6.6)
    59 1 (1.6)
    73 1 (1.6)
    Всего положительных 27 (44,3)
    Всего отрицательных 34 (55,7)

    Генотипирование HP . Количество (%) положительных случаев . 16 18 (29,5) 18 1 (1.6) 26 A 2 (3.3) 45 1 (1.6) 58 + 4 (6,6) 59 1 (1,6) 73 1 (1,6) Всего положительных 27 (44,3) Всего отрицательных 34 (55.7) 

    При стратификации по гистологическому типу ДНК ВПЧ была обнаружена в половине плоскоклеточных карцином (25/50) и в двух из трех хирургических образцов аденосквамозной карциномы. Напротив, ДНК ВПЧ была обнаружена только в одном (12,5%) из восьми хирургических образцов аденокарциномы шейки матки Таблица 4 .

    Таблица 4

    Результаты тестирования на ВПЧ по гистологическому типу a

    Гистологический тип . Результаты исследования ВПЧ, №(%)
    .
    Всего № .
    Положительный . Отрицательный . 90 104
    плоскоклеточная карцинома 25 (50,0) 25 (50,0) 50
    Аденокарцинома 1 (12.5) 7 (87,5) 8
    Adenosquamous карциномы 2 (66,7) 1 (33.3) 3 3
    всего 28 (45.9) 33 (54.1) 61
    Гистологический тип . Результаты исследования ВПЧ, № (%)
    .
    Всего № .
    Положительный . Отрицательный .
    Плоскоклеточный рак 25 (50,0) 25 (50.0) 50
    Аденокарцинома 1 (12.5) 7 (87,5) 8
    Adenosquamous карциномы 2 (66.7) 1 (33,3) 3
    Всего 28 (45.9) 33 (54.1) 61 61
    Таблица 4

    HPV Тестирование результатов гистологического типа A

    Гистологический тип . Результаты исследования ВПЧ, № (%)
    .
    Всего № .
    Положительный . Отрицательный . +
    плоскоклеточная карцинома 25 (50,0) 25 (50,0) 50
    Аденокарцинома 1 (12.5) 7 (87,5) 8
    Adenosquamous карциномы 2 (66.7) 1 (33.3) 3
    всего 28 (45.9) 33 (54.1) 61
    Гистологический тип . Результаты исследования ВПЧ, № (%)
    .
    Всего № .
    Положительный . Отрицательный .
    Плоскоклеточный рак 25 (50.0) 25 (50,0) 50
    Аденокарцинома 1 (12.5) 7 (87,5) 8
    Adenosquamous карциномы 2 (66.7) 1 (33,3) 3
    Общая сумма 28 (45.9) 33 (54.1) 61 61

    Среди этих 61 пациентов с инвазивным раком шейки матки и предыдущим негативным вспомогательным тестированием HPV на образцах цитологии 44 пациента имели имеющиеся цитологию PAP. находки в течение 1 года до гистологического диагноза.Как показано в таблице 5 , ДНК ВПЧ была обнаружена только в одном из четырех хирургических образцов, отнесенных к категории атипичных железистых клеток (АГК) по результатам предшествующей цитологии (25%), но в четырех (50%) из восьми хирургических образцов, классифицированных как плоскоклеточная карцинома. по данным предшествующей цитологии и 10 (58,8%) из 17 отнесены к плоскоклеточному внутриэпителиальному поражению высокой степени. Примечательно, что ДНК ВПЧ была фактически обнаружена в трех (42,9%) из семи хирургических образцов как с предшествующими отрицательными результатами теста Папаниколау, так и с отрицательными результатами теста на ВПЧ в цитологических образцах (таблица 5).

    Таблица 5

    ДНК ВПЧ, обнаруженная в тканях рака шейки матки методами полимеразной цепной реакции по результатам Папаниколау в течение 1 года до постановки диагноза рака

    ,18)
    Предварительное цитологическое исследование . № Испытано . № (%) ВПЧ положительный a .
    SCC 8 4 (50,0)
    HSIL 17
    ASC-H 5 4 (80,0)
    AGC 4 1 (25.0)
    ASC-US 3 3 (100.0)
    NILM 7 3 (42,9)
    Нет мазок результат 17 3 (17,7)
    Итого 61 28 (45.9)
    28 (45.9) 28 (45.9)
    Предыдущая цитология . № Испытано . № (%) ВПЧ положительный a .
    ТПС 8 4 (50,0)
    HSIL 17 10 (58,8)
    ASC-Н 5 4 (80,0)
    AGC 4 4 1 (25.0)
    ASC-US 3 3 (100.0)
    NILM 7 3 (42.9)
    No Pap Result 17 3 (17.7)
    Всего 61 28 (45.9)
    Таблица 5

    ДНК HPV Обнаружена из тканей рака шейки по полимеразной цепной реакции Методы по результатам Папаниколау в течение 1 года до постановки диагноза рака

    Предварительное цитологическое исследование . № Испытано . № (%) ВПЧ положительный a .
    ТПС 8 4 (50,0)
    HSIL 17 10 (58,8)
    ASC-Н 5 4 (80,0)
    AGC 4 4 1 (25.0)
    ASC-US 3 3 (100.0)
    Nilm 7 3 (42.9)
    No Pap Result 17 3 (17.7)
    Итого 61 28 (45,9)
    Предшествующая цитология . № Испытано . № (%) ВПЧ положительный a .
    SCC 8 8 4 (50.0)
    HSIL 17 10 (58.8)
    ASC-H 5 4 (80.0)
    АРУ 4 1 (25,0)
    ASC-США 3 3 (100,0)
    NILM 7 3 (42,9)
    Нет Pap Result 17 17 3 (17.7)
    Всего 61 61 61 28 (45.9)

    Таблица 6 Подвескает результаты цитологии PAP и результаты HPV в как цитологии, так и хирургические образцы для всех восьми случаев инвазивной аденокарциномы шейки матки.Как и ожидалось, ДНК ВПЧ не была обнаружена в двух случаях карциномы с минимальными отклонениями и в одном случае светлоклеточной карциномы. Если рассматривать только пять случаев аденокарциномы обычного типа, все три с результатами цитологического исследования по Папаниколау в предыдущем году были отнесены к категории AGC, все пять имели отрицательные результаты HC2 в образце цитологии, и только один из пяти был положительным на ВПЧ в предыдущем году. образец хирургической резекции.

    Таблица 6

    Результаты тестирования на ВПЧ в цитологических и хирургических образцах в семи случаях аденокарциномы шейки матки

    Отрицательный Отрицательный Отрицательный
    . Возраст, г . Тип АЦП . HC2 по цитологии . Пап-тест . ПЦР на хирургический . Тип ВПЧ . 90 104
    1 28 Обычная Отрицательный АРУ Положительный ВПЧ 16
    2 34 МЦС Отрицательный АРУ Отрицательный Отрицательный
    3 42 Обычные Отрицательный Н. А. Отрицательных Отрицательный
    4 43 Обычных Отрицательный АРУ Отрицательных Отрицательный
    5 45 МЦС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    6 50 КТС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    7 68 Обычный Н.А. Отрицательный
    8 40 Обычная Отрицательный АРУ Отрицательный
    91 843 Дело №.
    Возраст, г . Тип АЦП . HC2 по цитологии . Пап-тест . ПЦР на хирургический . Тип ВПЧ . 90 104
    1 28 Обычная Отрицательный АРУ Положительный ВПЧ 16
    2 34 МЦС Отрицательный АРУ Отрицательный Отрицательный
    3 42 Обычные Отрицательный Н. А. Отрицательных Отрицательный
    4 43 Обычных Отрицательный АРУ Отрицательных Отрицательный
    5 45 МЦС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    6 50 КТС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    7 68 Обычный Отрицательные NA Отрицательный Отрицательные
    8 40 Обычная Отрицательные AGC Отрицательные Отрицательный
    Таблица 6

    Результаты тестирования ВПЧ в цитологии и хирургических образцах в Семь случаев аденокарциномы шейки матки

    Отрицательный Отрицательный Отрицательный
    Дело №. Возраст, г . Тип АЦП . HC2 по цитологии . Пап-тест . ПЦР на хирургический . Тип ВПЧ . 90 104
    1 28 Обычная Отрицательный АРУ Положительный ВПЧ 16
    2 34 МЦС Отрицательный АРУ Отрицательный Отрицательный
    3 42 Обычные Отрицательный Н. А. Отрицательных Отрицательный
    4 43 Обычных Отрицательный АРУ Отрицательных Отрицательный
    5 45 МЦС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    6 50 КТС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    7 68 Обычный Н.А. Отрицательный
    8 40 Обычная Отрицательный АРУ Отрицательный
    91 843 Дело №.
    Возраст, г . Тип АЦП . HC2 по цитологии . Пап-тест . ПЦР на хирургический . Тип ВПЧ . 90 104
    1 28 Обычная Отрицательный АРУ Положительный ВПЧ 16
    2 34 МЦС Отрицательный АРУ Отрицательный Отрицательный
    3 42 Обычные Отрицательный Н. А. Отрицательных Отрицательный
    4 43 Обычных Отрицательный АРУ Отрицательных Отрицательный
    5 45 МЦС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    6 50 КТС Отрицательный Н. А. Отрицательный Отрицательный
    7 68 Обычный отрицательный NA NA отрицательный отрицательный
    8 40 обычно отрицательный AGC отрицательный отрицательный

    обсуждение

    Насколько нам известно, это первое исследование, в котором изучается способность обнаруживать ДНК ВПЧ методами ПЦР и ЛА в хирургических тканях пациентов с инвазивной карциномой шейки матки с отрицательным результатом цитологического исследования ВПЧ HC2 перед гистологической постановкой диагноза.Отрицательные показатели при тестировании на ВПЧ, проведенном на цитологических образцах от пациентов с инвазивным раком шейки матки, сильно различались в предыдущих исследованиях. 5‐13 Наши недавние исследования в Китае, а также несколько исследований в США показали, что частота ВПЧ-отрицательных результатов колеблется от 8% до 19%, в среднем 14% в цитологических образцах. 13 , 14 , 17-19 ДНК ВПЧ была обнаружена в 28 (45,9%) из 61 хирургического образца, и ВПЧ 16 был наиболее распространенным генотипом ВПЧ, обнаруженным в нашей когорте (66.7% всех ВПЧ-позитивных случаев), за которым следует ВПЧ 58 (14,8%). Поскольку метод тестирования ВПЧ HC2, использованный на цитологических образцах, позволил выявить только 13 типов врВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68), показанные случаи содержащие ВПЧ 26 или 73 (n = 2), также были исключены из анализа. При рассмотрении только тех опухолей, для которых показано наличие генотипов ВПЧ, обнаруживаемых с помощью HC2, метода, используемого для обнаружения ВПЧ в цитологических образцах, наши данные показывают, что 44,1% (26/59) случаев с предшествующим отрицательным результатом цитологического исследования на ВПЧ представляют собой «истинные» ложноотрицательные результаты. , что означает, что тест на ВПЧ на цитологических образцах не смог обнаружить ВПЧ, который фактически был обнаружен на соответствующем операционном образце.Два (7,4%) из 27 случаев с положительными результатами теста на ВПЧ в тесте на генотипирование содержали ВПЧ 26 или 73, которые не могли быть обнаружены ни с помощью HC2, ни с помощью других методов (тест Cobas HPV или тест Aptima hrHPV, Hologic, Бедфорд, Массачусетс). Это еще один потенциальный риск пропустить предраковые поражения или рак шейки матки, если тест на ВПЧ используется в качестве основного метода скрининга.

    Потенциальные причины отрицательного результата тестирования на врВПЧ в условиях скрининга на рак шейки матки включают вариабельность выборки, низкую вирусную нагрузку при некоторых видах рака, быстрое развитие карциномы шейки матки, возникающее между интервалами скрининга, и редкое возникновение истинной аденокарциномы шейки матки с отрицательным результатом на врВПЧ.Изучая наличие ВПЧ в соответствующих хирургических резекциях этих ранее зарегистрированных пациентов, у которых ранее были ВПЧ-отрицательные цитологические образцы, мы показываем, что «истинные» ложноотрицательные результаты тестирования составляют почти половину этих случаев, но также что истинно отрицательные результаты объясняют больше половины случаев. Те случаи с «истинными» ложноотрицательными результатами цитологического исследования (т. е. ВПЧ не был обнаружен при цитологическом исследовании, но присутствовал в резецированной карциноме), скорее всего, представляют собой врожденное техническое ограничение в тестировании цитологических образцов и могут быть объяснены либо низкой вирусная нагрузка ниже предела обнаружения для анализа или в результате ограниченного отбора проб (т. е. ошибки отбора проб).Хотя нельзя полностью исключить, что некоторые из этих случаев представляют собой быстро развивающийся рак, развившийся в период между скринингом и хирургической резекцией, это маловероятно, учитывая короткий интервал между скринингом и гистологическим диагнозом.

    Напротив, более чем в половине случаев ДНК ВПЧ не обнаруживалась в хирургически удаленных опухолях, и, следовательно, предварительное тестирование на ВПЧ у этих пациентов фактически дает истинно отрицательный результат. Эти случаи демонстрируют ограниченность стратегии скрининга женщин с помощью только тестирования на ВПЧ в качестве теста первой линии, поскольку по крайней мере небольшой процент случаев рака шейки матки этиологически не связан с ВПЧ-инфекцией.

    При рассмотрении гистологического типа рака шейки матки частота ВПЧ-отрицательных результатов цитологического исследования по Папаниколау у пациентов с аденокарциномой шейки матки была выше, чем у пациентов с плоскоклеточным раком или аденосквамозным раком. Потенциальные причины более высоких показателей ВПЧ-отрицательных результатов при аденокарциноме шейки матки включают тот факт, что аденокарцинома шейки матки чаще является фокальной и/или локализуется выше в эндоцервикальном канале и, следовательно, чаще ускользает от обнаружения. Другое объяснение этого явления заключается в том, что аденокарциномы шейки матки не так часто этиологически связаны с инфекцией ВПЧ, и поэтому тестирование на ВПЧ никогда не выявит некоторые случаи аденокарциномы.Это особенно верно в отношении таких вариантов, как карцинома с минимальными отклонениями и светлоклеточная карцинома. Недавний анализ 760 залитых в парафин образцов аденокарциномы шейки матки с использованием метода генотипирования ВПЧ показал, что ВПЧ-позитивность составляет 71,8% для обычного типа аденокарциномы, но значительно более низкие показатели для этих необычных типов. 21 Точно так же наши данные показали, что ДНК ВПЧ была обнаружена только в 12,5% хирургических образцов от пациентов с аденокарциномой шейки матки, у которых был отрицательный тест на ВПЧ в цитологических образцах.Это намного ниже, чем у пациентов с плоскоклеточным раком шейки матки или адено-плоскоклеточным раком (50,9%, 27/53), и подчеркивает опасения по поводу возможности пропуска большего числа пациентов с аденокарциномой шейки матки в программе скрининга только на ВПЧ. . Кроме того, хотя цитологический скрининг по Папаниколау также имеет ограничения в обнаружении поражений желез, половина случаев аденокарциномы в этой серии с предшествующими отрицательными результатами ВПЧ в образце цитологического исследования была обозначена как AGC, и это включает все четыре случая с предшествующими результатами цитологического исследования. , и только в одном из четырех случаев, классифицированных как AGC по результатам цитологии, были положительные результаты на ВПЧ.

    Таким образом, наши результаты доказывают, что предшествующие отрицательные результаты тестирования на ВПЧ в цитологических образцах у пациентов с инвазивным раком шейки матки обусловлены как ложноотрицательными результатами тестирования в опухолях с ВПЧ, так и действительно отрицательными результатами тестирования на ВПЧ в опухолях без ВПЧ. Как показали другие исследования, некоторые типы карцином этиологически не связаны с ВПЧ-инфекцией, включая необычные типы аденокарциномы шейки матки. Опухоли, связанные с инфекцией ВПЧ, вероятно, не учитываются при цитологическом тестировании ВПЧ из-за низкого титра вируса, низкого количества копий вирусного генома, ошибки отбора проб или наличия редких типов ВПЧ, которые не могут быть обнаружены современными методами тестирования ВПЧ.

    Каталожные номера

    1

    Walboomers

    JM

    ,

    Jacobs

    MV

    ,

    Manos

    MM

    , и др. .

    Вирус папилломы человека является необходимой причиной инвазивного рака шейки матки во всем мире

    .

    Дж Патол

    .

    1999

    ;

    189

    :

    12

    19

    .2 —

    19

    .2

    Castle

    PE

    ,

    Stoler

    MHH

    ,

    REAGE

    TC

    JR, et al..

    Эффективность тестирования на канцерогенный вирус папилломы человека (ВПЧ) и генотипирования ВПЧ16 или ВПЧ18 для скрининга рака шейки матки у женщин в возрасте 25 лет и старше: субанализ исследования ATHENA

    .

    Ланцет Онкол

    .

    2011

    ;

    12

    :

    880

    880

    890

    .3

    890

    .3

    Stoler

    MH

    ,

    Райт

    TC

    JR,

    Sharma

    A

    , et al. .

    Тестирование на вирус папилломы человека высокого риска у женщин с цитологией ASC-US: результаты исследования ATHENA HPV

    .

    Ам Дж. Клин Патол

    .

    2011

    ;

    135

    :

    468

    475

    475

    .4

    475

    .4

    Wright

    TC

    JR,

    Stoler

    MH

    ,

    Behrens

    см

    , et al. .

    Исследование вируса папилломы человека ATHENA: дизайн, методы и исходные результаты

    .

    Am J Obstet Gynecol

    .

    2012

    ;

    206

    :

    46.E1

    46.E1

    46.e46

    .5

    KATKI

    HA

    ,

    Kinney

    WK

    ,

    FETTERMAN

    B

    , et al..

    Риск рака шейки матки у женщин, проходящих одновременное тестирование на вирус папилломы человека и цитологическое исследование шейки матки: популяционное исследование в рутинной клинической практике

    .

    Ланцет Онкол

    .

    2011

    ;

    12

    :

    663

    663

    672

    .6

    LI

    Z

    ,

    austin

    RM

    ,

    GUO

    M

    ,

    Zhao

    C.

    Результаты скрининговых тестов, связанные с диагнозом рака у 287 женщин с плоскоклеточным раком шейки матки

    .

    Медицинская лаборатория Arch Pathol

    .

    2012

    ;

    136

    :

    1533

    1540

    .7

    Нарышкин

    С

    ,

    Остин

    РМ.

    Ограничения широко используемых лабораторных тестов на вирус папилломы человека высокого риска для скрининга рака шейки матки

    .

    Безопасность для пациентов с лекарственными препаратами

    .

    2012

    ;

    4

    :

    167

    177

    172

    .8

    Kang

    WD

    ,

    KIM

    CH

    ,

    CO

    MK

    , et al..

    Сравнение анализа Hybrid Capture II с тестом на ДНК-чипе вируса папилломы человека для выявления поражений шейки матки высокой степени

    .

    Int J Gynecol Рак

    .

    2009

    ;

    19

    :

    924

    928

    .9

    Чжао

    C

    ,

    Li

    Z

    ,

    Остин 9.0

    Результаты скрининга шейки матки, связанные с 265 гистопатологическими диагнозами неоплазии шейки матки

    .

    Ам Дж. Клин Патол

    .

    2013

    ;

    140

    :

    47

    54

    54

    .10

    Kinney

    W

    ,

    FETTERMAN

    B

    ,

    COX

    JT

    , et al. .

    Характеристики 44 случаев рака шейки матки, диагностированных после Пап-отрицательного скрининга на ВПЧ высокого риска в обычной клинической практике

    .

    Гинекол Онкол

    .

    2011

    ;

    121

    :

    309

    313

    .11

    Bohmer

    G

    ,

    van den Brule

    AJC

    ,

    Brummer

    O

    и др. .

    Нет подтвержденных случаев ДНК-негативной цервикальной интраэпителиальной неоплазии 3 степени папилломавируса человека или инвазивного первичного рака шейки матки среди 511 пациентов

    .

    Am J Obstet Gynecol

    .

    2003

    ;

    189

    :

    118

    128

    120

    .12

    Hopenhayn

    C

    ,

    Christian

    A

    ,

    Christian

    WJ

    , et al..

    Распространенность типов вируса папилломы человека при инвазивном раке шейки матки из 7 раковых регистров США до введения вакцины

    .

    J Нижний отдел половых органов

    .

    2014

    ;

    18

    :

    182

    182

    189

    .13

    Zhao

    C

    ,

    Li

    Z

    ,

    Nayar

    R

    , et al. .

    Предыдущее тестирование на вирус папилломы человека высокого риска и результаты теста Папаниколау 70 инвазивных карцином шейки матки, диагностированных в 2012 году: результаты ретроспективного многоцентрового исследования

    .

    Медицинская лаборатория Arch Pathol

    .

    2015

    ;

    139

    :

    184

    184

    188

    .14

    BLATT

    AJ

    ,

    KENNEDY

    R

    ,

    LUFF

    RD

    , et al. .

    Сравнение результатов скрининга рака шейки матки среди 256 648 женщин в различных клинических практиках

    .

    Рак цитопатола

    .

    2015

    ;

    123

    :

    282

    282

    282

    288

    .15

    Zhao

    FH

    ,

    Lewkowitz

    AK

    ,

    HU

    SY

    , et al..

    Распространенность вируса папилломы человека и цервикальной интраэпителиальной неоплазии в Китае: объединенный анализ 17 популяционных исследований

    .

    Int J Рак

    .

    2012

    ;

    131

    :

    2929

    :

    2929

    2929

    2938

    .16

    Ferlay

    J

    ,

    Shin

    HR

    ,

    BRAY

    F

    , et al. .

    Оценки мирового бремени рака в 2008 г.: GLOBOCAN 2008

    .

    Int J Рак

    .

    2010

    ;

    127

    :

    2893

    :

    2893

    2993

    .17

    Tao

    x

    ,

    Griffith

    CC

    ,

    Zhou

    x

    et al. .

    История ВПЧ высокого риска и результаты теста Папаниколау у большой когорты пациентов с инвазивной карциномой шейки матки: опыт крупнейшей женской больницы в Китае

    .

    Рак цитопатола

    .

    2015

    ;

    123

    :

    421

    427

    .18

    Zheng

    B

    ,

    Li

    Z

    ,

    Griffith

    CC

    , и др. .

    Предыдущее тестирование на ВПЧ высокого риска и результаты мазка Папаниколау для 427 инвазивных раков шейки матки в крупнейшей лаборатории Китая, сертифицированной CAP

    .

    Рак цитопатола

    .

    2015

    ;

    123

    :

    428

    428

    428

    434

    .19

    Liang

    H

    ,

    Griffith

    CC

    ,

    мА

    L

    , et al..

    Чувствительность цитологии Папаниколау и ВПЧ-тестирования для выявления случаев рака шейки матки: результаты предшествующих исследований у 178 пациентов с инвазивным раком шейки матки в крупной больнице общего профиля в Китае

    .

    J Am Soc Цитопатол

    .

    2016

    ;

    5

    :

    64

    64

    70

    .20

    Park

    KJ

    ,

    Kiyokawa

    T

    ,

    SOSLOW

    RA

    , et al. .

    Необычные эндоцервикальные аденокарциномы: иммуногистохимический анализ с молекулярной детекцией вируса папилломы человека

    .

    Ам Дж. Сург Патол

    .

    2011

    ;

    35

    :

    633

    646

    646

    .21

    Pirog

    EC

    ,

    LLOVERAS

    B

    ,

    MOLIJN

    A

    , et al. ;

    Исследовательская группа RIS HPV TT

    .

    Распространенность и генотипы ВПЧ в различных гистологических подтипах аденокарциномы шейки матки, анализ 760 случаев во всем мире

    .

    Мод Патол

    .

    2014

    ;

    27

    :

    1559

    1567

    .

    Примечания автора

    © Американское общество клинической патологии, 2017 г. Все права защищены. Для разрешений, пожалуйста, по электронной почте: [email protected]

    .
    Leave a Reply

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.

    2022 © Все права защищены.