Лейкоциты 300 в моче: Педиатр «СМ-Доктор» рассказала, о чем могут говорить лейкоциты в моче у ребенка

Содержание

Лабораторные исследования, медицинские анализы | Цены, записаться на анализы

Клинические исследования Цена
Анализ (гинекологического) дерматологического материала на флору (женщины) 65,00
Анализ гинекологического материала на цитологию 170,00
Анализ дерматологического материала на флору (мужчины) 65,00
Анализ кала на капрологию 215,00
Анализ кала на я/глист и простейшие 110,00
Анализ кала на я/глист методом сосокоба 110,00
Анализ крови на микрореакцию 105,00
Анализ крови на определение уровня тромбоцитов 215,00
Анализ крови краткий (СОЭ, Нв, лейкоциты, микроревкция, без забора крови) 300,00
Анализ крови краткий (СОЭ, Нв, лейкоциты, микрореакция, забор) 340,00
Анализ крови краткий (СОЭ, Нв, лейкоциты, без забора крови) 195,00
Анализ крови краткий (СОЭ, Нв, лейкоциты, забор) 235,00
Анализ крови на определение уровня ретикулоцитов 165,00
Анализ крови на определение времени свертываемости крови 90,00
Анализ крови на определение группы и резус фактора 375,00
Анализ крови на определение длительности кровотечения 90,00
Анализ крови на определение лейкоцитарной формулы 105,00
Анализ крови на определение лейкоцитов 60,00
Анализ крови на определение СОЭ 65,00
Анализ крови на определение уровня гемоглобина 70,00
Анализ крови на определение эритроцитов 100,00
Анализ крови на определение тел Гейнца 190,00
Анализ крови на содержание глюкозы в плазме крови 180,00
Анализ крови на тест толерантности к глюкозе 375,00
Анализ крови общий (без микрореакции и забора) 400,00
Анализ крови общий (без микрореакции) 440,00
Анализ крови общий (с микрорекцией и без забора крови) 505,00
Анализ крови общий (с микрорекцией) 545,00
Анализ мочи на микроскопию осадка 55,00
Анализ мочи на содержание белка 45,00
Анализ мочи на содержание глюкозы 45,00
Анализ мочи на цвет, плотность и наличие осадка 50,00
Анализ мочи краткий (белок, сахар) 90,00
Анализ мочи на определение уровня порфиринов и их производных 150,00
Анализ мочи общий 195,00
Анализ мочи по Зимницкому 165,00
Анализ мочи по Нечипоренко 165,00
Анализ соскоба на дерматомикозы, чесотку и пр. 400,00
Забор дерматологического материала для исследования на дерматомикозы, чесотку и пр.(соскоб) 150,00
Забор крови из пальца 120,00
Услуги по клиническим исследованиям сторонних организаций  
Исследование крови на антитела к ВИЧ-1,2 методом ИФА 420,00
Исследование крови на антитела к гепатиту «А» методом ИФА 415,00
Исследование крови на антитела к гепатиту «В» методом ИФА 415,00
Исследование крови на антитела к гепатиту «С» методом ИФА 415,00
Паталого-анатомическое исследование биопсийного (операционного) материала (1 кусочек) (окрашенный одной верифицирующей окраской) 500,00

Клинические исследования мочи — сдать анализ по доступной цене в Сургуте

* цены, указанные в прейскуранте, предоставлены для ознакомления и не являются публичной офертой. Точную стоимость и подробности оказания услуг можно узнать у администраторов медицинского центра по телефонам (3462) 771-003, 241-000, или в регистратуре отделений.

Общий анализ мочи

Этот анализ включает оценку физико-химических свойств мочи (рН, прозрачность, цвет, наличие пигментов, плотность, концентрация белка, глюкозы и пр.) и микроскопию осадка (слущенные клетки эпителия, эритроциты, лейкоциты, бактерии, наличие слизи, кристаллов солей).

Благодаря ОАК можно заподозрить:

  • наличие инфекций мочевых путей
  • заболевания почек
  • заболевания печени
  • диабет

Правила сбора мочи на общий анализ

Для общего анализа предпочтительно использовать утреннюю порцию мочи. Биоматериал должен быть собран после тщательного туалета наружных половых органов в пластиковый (асептический или стерильный) одноразовый контейнер для мочи с герметично завинчивающейся крышкой на 100-150 мл.

В отсутствие стандартной посуды можно использовать сухую, чистую, хорошо отмытую от чистящих и дезинфицирующих средств посуду или посуду разового пользования, выпускаемую специально для сбора мочи.

Анализ мочи по Нечипоренко

Это оценка количественного содержания в 1 мл мочи эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров, что позволяет диагностировать заболевания почек и мочевыводящих путей даже на ранних стадиях.

Правила сбора мочи по методу Нечипоренко

Для анализа предпочтительно использовать утреннюю среднюю порцию мочи. Биоматериал должен быть собран после тщательного туалета наружных половых органов в пластиковый (асептический или стерильный) одноразовый контейнер для мочи с герметично завинчивающейся крышкой на 100-150 мл. В отсутствие стандартной посуды можно использовать сухую, чистую, хорошо отмытую от чистящих и дезинфицирующих средств посуду или посуду разового пользования, выпускаемую специально для сбора мочи.

Стаканные пробы мочи

Помогают уточнить локализацию воспалительного процесса в мочеполовых органах.

Правила сбора мочи на стаканные пробы:

  • Для анализа предпочтительно использовать утреннюю мочу. В некоторых случаях используют произвольные порции, при этом перед пробой пациент не должен мочиться в течение 3-5 часов.
  • Для проведения стаканной пробы исследуют две или три порции мочи, полученные последовательно при однократном мочеиспускании.
  • При двухстаканной пробе больной собирает мочу в 2 стаканчика: в первом должно быть 100 мл мочи, во втором — остальная.
  • При трёхстаканной
    пробе больной собирает мочу в 3 стаканчика: в первом — начальная порция, во втором — средняя, в третьем — конечная.

Моча должна быть собрана после тщательного туалета наружных половых органов в пластиковый одноразовый контейнер.

Необходимую уточняющую информацию можно получить у врача-консультанта медицин-ской лаборатории «Наджа» по телефону (3462) 72-85-59 (с понедельника по пятницу с 9:00 до 11:00 часов).

Анализ мочи в Одинцово и Голицыно — сеть медицинских центров «Бэби Плюс»

Семейный медицинский центр «Бэби плюс» предлагает полный спектр медицинских услуг. Одним из востребованных направлений является диагностирование различных патологий с использованием проверенных временем или современных технологий. Одним из простых, но максимально информативных способов является общий анализ мочи. Его рекомендуют сдавать педиатры и терапевты при подозрении на развитие патологии или воспалительного процесса в организме. Делается это вначале и в конце лечения для отслеживания динамики.

Что представляет собой анализ мочи?

Это исследование определяет такие биохимические показатели, как кетоновые тела, эритроциты, белок, глюкоза, эпителиальные клетки, лейкоциты. Основной его задачей является определение состояния работы выделительной системы, выявления отклонений или заболеваний.

Обязательным этапом диагностики является определение солей в моче. В случае их выявления – необходимо классифицировать, к какой группе они относятся — ураты, оксалаты, фосфаты и кристаллы гипуровой кислоты.

Обнаружение в общем анализе мочи бактерий, грибков или простейших требует ее дальнейшего исследования методом бактериального посева.

Как делается анализ мочи?

Назначается анализ мочи у взрослого при подозрении на заболевание мочеполовой системы, при диагностировании системных заболеваний, как, к примеру, гепатита или сахарного диабета. Не обойтись без этого исследования при профилактическом осмотре и в период беременности. Сдавать эту биологическую жидкость женщине в положении надо один раз в месяц. Но чтобы результат был максимально информативным, требуется точно знать, как собрать анализ мочи. Есть несколько простых правил в этом деле:

  1. Собирается моча в стерильный контейнер или чистую, простерилизованную банку. Её лучше подготовить заранее, с вечера, так как потребуется утренняя струя.
  2. Перед забором половые органы моются с детским мылом или специальным средством для интимной гигиены.
  3. В период менструации не рекомендуется сдача анализ мочи, так как добиться достаточной для исследования чистоты проблематично.
  4. Важный вопрос, сколько мочи для анализа требуется. В баночке должно содержаться не менее 10 мл образца. Доставить её в клинику для изучения требуется в течение 2 часов.

Взять анализ мочи у детей лучше с использованием специального мочеприёмника. Перед тем как установить приспособление грудничку, следует снять памперс или пелёнки и подмыть его. Не допускается исследование жидкости, которая была отжата из ткани или одноразового подгузника.

Правильно собранный материал позволяет получить точный результат. Он в свою очередь является основанием для назначения курса препаратов, помогает в выборе тактики лечения и выявлении скрытых патологий или обострения состояний.

Особенность проведения анализа у детей и беременных женщин

Забор пробы у новорожденных и грудных детей осуществляется при помощи специального детского мочеприемника. Нельзя использовать для анализа мочу, выжатую из одноразового подгузника или пеленки.

Беременные женщины сдают анализ мочи регулярно на протяжении всего периода гестации. Если анализ назначил не врач, ведущий беременность, то нужно предупредить специалиста о своем положении. Это важно для интерпретации результатов.

После родов, а также других гинекологических операций и манипуляций моча на анализ берется при помощи стерильного (одноразового) катетера. Такой способ забора гарантирует чистоту пробы.

Какие анализы мочи бывают?

Семейный медицинский центр «Бэби плюс» располагает современными лабораториями, укомплектованными качественным оборудованием, позволяющим получать оперативно точные результаты. Какие виды исследования мочи предлагаются?

  1. Общий. Назначается практически каждому пациенту, который обратился с недомоганием или жалобами на работу мочеполовой системы, температурой. С его помощью врач контролирует динамику назначенной терапии, тяжесть состояния больного. Сдаётся утренняя порция мочи объемом 50 мл. В лаборатории определяют её цвет, прозрачность, запах, кислотность, удельный вес, наличие белка, количество лейкоцитов и эритроцитов.
  2. По Нечипоренко. Применяют его при необходимости уточнения диагноза или при выявлении патологий половых органов, работы почек, мочевыводящих путей. Для анализа делается забор средней струи, причём достаточно 15-25 мл. Исследование показывает количество эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров в 1 мл мочи. Для максимальной информативности полученного результата, важно тщательно провести утренний гигиенический ритуал.
  3. Анализ суточной нормы. Определяет количество сахара в биологической жидкости. Прибегают к нему для выявления нарушений функции почек. Процесс забора мочи происходит по специальной схеме.
  4. Проба Зимницкого. Используется для диагностирования проблем с сердцем или почками. Собирают мочу в течение суток в отдельные контейнеры. Для сохранения её свойств биологическую жидкость помещают в холодильник.

Независимо от вида исследования предлагается доступная цена. При этом каждый пациент, который обратился в семейный медицинский центр «Бэби плюс» может быть на 100 % уверен в высокой точности полученного результата.


Общий анализ мочи в Троицке, цены

Клиника ELEOS осуществляет различные виды лабораторных исследований, выполняет широкий спектр анализов, необходимых для уточнения диагноза. Визит к терапевту, гинекологу, или урологу, как правило, не обходится без назначения проведения общего анализа мочи.

Общий анализ мочи, где сдать в Троицке

В каких случаях назначают общий анализ мочи?

Общий анализ мочи – это распространенное исследование, необходимое:

  • при регулярных диспенсерных осмотрах, профосмотрах;
  • при хронических и острых заболевания почек и/или желчевыводящих путей;
  • после перенесенного инфекционного заболевания;
  • для мониторинга динамики заболевания и терапии.

При подготовке к сдаче общего анализа мочи не рекомендуется употреблять в пищу активно красящие продукты: свеклу, чернику, морковь, цитрусовые. Следует воздержаться от чрезмерно острого и соленого, не употреблять мочегонные средства. Не следует сдавать анализ после усиленных тренировок или тяжелого физического труда. Мочу для анализа сразу после ночного сна собирают в специальный контейнер, который следует доставить в лабораторию в течение 2-3 часов. Получить расшифровку и рекомендации по готовому анализу вы сможете у врача.

Показатели, которые отражены в общем анализе мочи, могут указать на наличие воспалительного процесса, остаточные явления после перенесенной стрептококковой инфекции, позволят уточнить диагноз.

Обычно в анализе исследуют такие показатели, как:

  • Цвет – в норме от светло-желтого до темных оттенков желтого цвета.
  • Прозрачность мочи – в норме она остается прозрачной даже спустя часы. Мутность сигнализирует о возможном наличии солей, бактерий или клеток крови. В этом случае врач назначает повторный анализ мочи.
  • Запах мочи не должен быть резким. Он меняется при наличии инфекции. Диабет может проявляться в виде сладковатого запаха, запах аммиака свидетельствует об образовании камней в мочевом пузыре.
  • Плотность или удельный вес – количество солей и мочевины.
  • Кислотность. В норме pH – 5-6. Повышенная физическая нагрузка или особенности питания могут менять этот показатель. Это стоит учитывать при сдаче анализа мочи.
  • Белок. В норме его нет или крайне мало. Увеличение показателя свидетельствует о патологии почек или о возникновении опухоли.
  • Сахар. Увеличение его содержания указывает на сахарный диабет. Кроме того, есть другие заболевания, при которых этот показатель также растёт: инсульт, менингит, сотрясение головного мозга.
  • Билирубин. Появляется в моче при различных формах желтухи, проявляется потемнением цвета.
  • Кетоновые тела (промежуточные продукты метаболизма). Увеличение их количества свидетельствует о нарушении углеводного или жирового обмена.
  • Лейкоциты (клетки крови) – их обнаружение в осадке указывает на воспалительный процесс, анализ говорит о заболевании почек или о том, что поражены мочевыводящие пути.
  • Бактерии – в норме их нет. Появляются в острый период воспалительного процесса в органах.
  • Грибки. В норме в моче не содержатся. Появляются как свидетельство иммунодефицита или нерационального лечения с помощью антибиотиков.
  • Соли. Повышение этого показателя может быть свидетельством заболевания почек или мочевыводящих путей, а также нерациональной диеты.

После получения результата вы сможете обсудить его с врачом, получить полную расшифровку и рекомендации.

Записаться на консультацию к врачу можно по телефону +7 (499) 370-44-08 или заполнив форму на сайте.

Белок в моче (протеинурия): причины, симптомы и лечение

Люди с протеинурией имеют необычно высокое количество белка в моче. Состояние часто является признаком заболевания почек.

Ваши почки – это фильтры, которые обычно не пропускают большое количество белка. Когда болезнь почек повреждает их, белки, такие как альбумин, могут попасть из вашей крови в мочу. У вас также может быть протеинурия, когда ваш организм вырабатывает слишком много белка.

Болезнь почек часто не имеет ранних симптомов.Белок в моче может быть одним из первых признаков. Ваш врач может обнаружить протеинурию в анализе мочи во время обычного медицинского осмотра.

Белок в моче Симптомы

Большинство людей с протеинурией не замечают никаких признаков, особенно в ранних или легких случаях. Со временем, по мере ухудшения состояния, у вас могут появиться следующие симптомы:

  • Пенистая или пузырьковая моча
  • Отек (отек) рук, ног, живота и лица
  • Учащенное мочеиспускание
  • Одышка
  • Усталость
  • Потеря аппетита
  • Расстройство желудка и рвота
  • Мышечные судороги по ночам

Белок в моче Причины

Протеинурию могут вызывать некоторые обычные явления. К ним относятся:

  • Dehydration
  • Dehydration
  • Низкое кровяное давление
  • Лихорадка
  • Entense Activity
  • высокий стресс
  • высокий стресс
  • почечные камни
  • Принимая аспирин каждый день
  • Очень низкие температуры

Условия, которые повреждают ваши почки также сделать вас иметь слишком много белка в моче. Двумя наиболее распространенными являются диабет и высокое кровяное давление.

Другие серьезные состояния, которые могут вызывать протеинурию, включают:

  • Иммунные нарушения, такие как волчанка
  • Воспаление почек (гломерулонефрит)
  • Рак крови, называемый множественной миеломой
  • Преэклампсия, поражающая беременных женщин
  • A органов (амилоидоз)
  • Сердечно-сосудистые заболевания
  • Внутрисосудистый гемолиз, состояние, при котором разрушаются красные кровяные тельца в моче включают:

    • Ожирение
    • Возраст старше 65 лет
    • Семейный анамнез заболевания почек
    • Афроамериканец, коренной американец, латиноамериканец или житель тихоокеанских островов

    Некоторые люди получают больше белка в моче, когда стоят, чем лежа. Это состояние называется ортостатической протеинурией.

    Диагностика белка в моче

    Анализ мочи, называемый анализом мочи, может определить, слишком ли много белка в моче. Сначала вы пописаете в чашку. Лаборант окунает палочку с химикатами на конце. Если палочка меняет цвет, это признак слишком большого количества белка. Возможно, вам придется пройти этот тест более одного раза, чтобы узнать, как долго присутствует белок.

    Техник также посмотрит мочу под микроскопом.Они проверяют вещи, которых там быть не должно, что может означать проблемы с почками. К ним относятся красные и белые кровяные тельца, кристаллы и бактерии.

    Если ваш врач подозревает заболевание почек, вам могут потребоваться другие анализы мочи. Ваш врач может также заказать:

    • Анализы крови. Они измеряют определенные химические вещества, чтобы проверить, насколько хорошо работают ваши почки.
    • Визуальные тесты. Компьютерная томография и УЗИ позволяют выявить камни в почках, опухоли и другие закупорки.
    • Биопсия почки. Возможно, вашему врачу потребуется взять небольшой образец ткани почки, чтобы лаборант мог изучить его под микроскопом.

    Белок в моче Лечение

    Протеинурия признак другого заболевания. Таким образом, лечение зависит от выяснения того, что его вызвало. Вам может не понадобиться лечение, если протеинурия легкая или длится недолго. Но крайне важно лечить заболевание почек до того, как оно приведет к почечной недостаточности.

    Ваш врач может прописать лекарства, особенно если у вас диабет и/или высокое кровяное давление.Большинство людей будут принимать один из двух типов лекарств от артериального давления:

    • ингибиторы АПФ (ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента)
    • БРА (блокаторы рецепторов ангиотензина)

    Статус HTTP 500 — Ошибка внутреннего сервера Ошибка


    Тип Отчет об исключении

    Сообщение Обработка запроса не удалась; вложенным исключением является java. lang.NullPointerException

    Описание Сервер столкнулся с непредвиденной ситуацией, которая не позволила ему выполнить запрос.

    Исключение

     org.springframework.web.util.NestedServletException: Ошибка обработки запроса; вложенным исключением является java.lang.NullPointerException
    org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.processRequest(FrameworkServlet.java:982)
    org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.doGet(FrameworkServlet.java:861)
    javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:626)
    org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.service(FrameworkServlet.java:846)
    javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:733)
    org.apache.tomcat.websocket.server.WsFilter.doFilter(WsFilter.java:52)
    com.wolterskluwer.mrce.web.filter.MRCEUserFilter.doFilter(MRCEUserFilter.java:73)
    org.springframework.web.filter.DelegatingFilterProxy.invokeDelegate(DelegatingFilterProxy.java:346)
    org.springframework.web.filter.DelegatingFilterProxy. doFilter(DelegatingFilterProxy.java:262)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.ява: 330)
    org.springframework.security.web.access.intercept.FilterSecurityInterceptor.invoke(FilterSecurityInterceptor.java:118)
    org.springframework.security.web.access.intercept.FilterSecurityInterceptor.doFilter(FilterSecurityInterceptor.java:84)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.access.ExceptionTranslationFilter.doFilter(ExceptionTranslationFilter.java:113)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.session.SessionManagementFilter.doFilter(SessionManagementFilter.java:103)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.authentication.AnonymousAuthenticationFilter.doFilter(AnonymousAuthenticationFilter. java:113)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.ява: 342)
    org.springframework.security.web.authentication.rememberme.RememberMeAuthenticationFilter.doFilter(RememberMeAuthenticationFilter.java:139)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.servletapi.SecurityContextHolderAwareRequestFilter.doFilter(SecurityContextHolderAwareRequestFilter.java:154)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    орг.springframework.security.web.savedrequest.RequestCacheAwareFilter.doFilter(RequestCacheAwareFilter.java:45)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.authentication.rememberme.RememberMeAuthenticationFilter.doFilter(RememberMeAuthenticationFilter.java:139)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain. doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.authentication.AbstractAuthenticationProcessingFilter.doFilter(AbstractAuthenticationProcessingFilter.java:199)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.web.filter.CompositeFilter$VirtualFilterChain.doFilter(CompositeFilter.java:107)
    org.springframework.security.web.authentication.preauth.AbstractPreAuthenticatedProcessingFilter.doFilter(AbstractPreAuthenticatedProcessingFilter.java:107)
    com.wolterskluwer.mrce.security.SSOPreAuthenticationProcessingFilter.doFilter(SSOPreAuthenticationProcessingFilter.java:58)
    org.springframework.web.filter.CompositeFilter$VirtualFilterChain.doFilter(CompositeFilter.java:112)
    org.springframework.security.web.authentication.preauth.AbstractPreAuthenticatedProcessingFilter.doFilter(AbstractPreAuthenticatedProcessingFilter.java:107)
    com.wolterskluwer.mrce.security.EJPPreAuthenticationProcessingFilter.doFilter(EJPPreAuthenticationProcessingFilter. java:88)
    org.springframework.web.filter.CompositeFilter$VirtualFilterChain.doFilter(CompositeFilter.java:112)
    org.springframework.security.web.authentication.preauth.AbstractPreAuthenticatedProcessingFilter.doFilter(AbstractPreAuthenticatedProcessingFilter.java:107)
    org.springframework.web.filter.CompositeFilter$VirtualFilterChain.doFilter(CompositeFilter.java:112)
    org.springframework.web.filter.CompositeFilter.doFilter(CompositeFilter.java:73)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.authentication.logout.LogoutFilter.doFilter(LogoutFilter.java:110)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.authentication.logout.LogoutFilter.doFilter(LogoutFilter.java:110)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.context. request.async.WebAsyncManagerIntegrationFilter.doFilterInternal(WebAsyncManagerIntegrationFilter.ява:50)
    org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.context.SecurityContextPersistenceFilter.doFilter(SecurityContextPersistenceFilter.java:87)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy$VirtualFilterChain.doFilter(FilterChainProxy.java:342)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy.doFilterInternal (FilterChainProxy.ява: 192)
    org.springframework.security.web.FilterChainProxy.doFilter(FilterChainProxy.java:160)
    org.springframework.web.filter.DelegatingFilterProxy.invokeDelegate(DelegatingFilterProxy.java:346)
    org.springframework.web.filter.DelegatingFilterProxy.doFilter(DelegatingFilterProxy.java:262)
     

    Основная причина

     java.lang.NullPointerException
     

    Примечание Полная трассировка стека основной причины доступна в журналах сервера.


    Apache Tomcat/9.0,39

    Анализ мочи в сравнении с соотношением белка и креатинина в моче для прогнозирования значительной протеинурии при беременности

  • Комитет ACOG по акушерской практике. Практический бюллетень ACOG. Диагностика и лечение преэклампсии и эклампсии. Номер 33, январь 2002 г. Американский колледж акушеров и гинекологов. Int J Gynaecol Obstet 2002; 77 : 67–75.

    Артикул Google ученый

  • Мейер Н.Л., Мерсер Б.М., Фридман С.А., Сибай Б.М.Белок в моче: плохой предиктор отсутствия или тяжелой протеинурии. Am J Obstet Gynecol 1994; 170 : 137–141.

    КАС Статья Google ученый

  • Во Дж.Дж., Кларк Т.Дж., Дивакаран Т.Г., Хан К.С., Килби М.Д. Точность методов анализа мочи в прогнозировании значительной протеинурии во время беременности. Акушерство Гинекол 2004; 103 : 769–777.

    Артикул Google ученый

  • Куо В.С., Кумантакис Г., Галерея ЭД .Протеинурия и ее оценка при нормальной и гипертонической беременности. Am J Obstet Gynecol 1992; 167 : 723–728.

    КАС Статья Google ученый

  • Браун М.А., Баддл М.Л. Неадекватность протеинурии тест-полосками при гипертонической беременности. Aust NZ J Obstet Gynaecol 1995; 35 : 366–369.

    КАС Статья Google ученый

  • Саудан П.Дж., Браун М.А., Фаррелл Т., Шоу Л. .Усовершенствованные методы оценки протеинурии при гипертонической беременности. Br J Obstet Gynaecol 1997; 104 : 1159–1164.

    КАС Статья Google ученый

  • Родригес-Томпсон Д. , Либерман Э.С. Использование случайного соотношения белка и креатинина в моче для диагностики значительной протеинурии во время беременности. Am J Obstet Gynecol 2001; 185 : 808–811.

    КАС Статья Google ученый

  • Янг Р.А., Бьюкенен Р.Дж., Кинч Р.А.Использование соотношения белок/креатинин в одном образце мочи при подозрении на гипертензию, вызванную беременностью. J Fam Pract 1996; 42 : 385–389.

    КАС Google ученый

  • Ал Р.А., Байкал С., Карачай О., Гейик П.О., Алтун С., Долен И. Случайное соотношение белка и креатинина в моче для прогнозирования протеинурии при впервые возникшей легкой гипертензии на поздних сроках беременности. Акушерство Гинекол 2004; 104 : 367–371.

    КАС Статья Google ученый

  • Роберт М. , Сепандж Ф., Листон Р.М., Дули К.С. Случайное соотношение белок-креатинин для количественного определения протеинурии при беременности. Акушерство Гинекол 1997; 90 : 893–895.

    КАС Статья Google ученый

  • Нейтхардт А.Б., Дули С.Л., Боренштайн Дж. Прогнозирование 24-часовой экскреции белка при беременности по соотношению белка к креатинину в однократной моче. Am J Obstet Gynecol 2002; 186 : 883–886.

    КАС Статья Google ученый

  • Квадри К. Х., Бернардини Дж., Гринберг А., Лайфер С., Сайед А., Холли Дж. Л. . Оценка функции почек во время беременности с использованием случайного соотношения белка мочи к креатинину и формулы Кокрофта-Голта. Am J Kidney Dis 1994; 24 : 416–420.

    КАС Статья Google ученый

  • Дюрнвальд С. , Мерсер Б. .Проспективное сравнение соотношения общего белка/креатинина и белка в моче за 24 часа у женщин с подозрением на преэклампсию. Am J Obstet Gynecol 2003; 189 : 848–852.

    КАС Статья Google ученый

  • Кларк Л.С., Томпсон Х., Бек Э.И. Экскреция креатина и креатинина при беременности. Am J Obstet Gynecol 1951; 62 : 576–583.

    КАС Статья Google ученый

  • Браун М.А., Линдхеймер М.Д., де Свит М., Ван Аш А., Муткин Дж.М.Классификация и диагностика гипертонических расстройств беременных: заявление Международного общества по изучению гипертензии беременных (ISSHP). Гипертония Беременность 2001; 20 : IX–XIV.

    КАС Статья Google ученый

  • Альтман Д.Г., Бланд Дж.М. Диагностические тесты 1: чувствительность и специфичность. БМЖ 1994; 308 : 1552.

    КАС Статья Google ученый

  • Альтман Д.Г., Бланд Дж.М.Диагностические тесты 2: прогностические значения. БМЖ 1994; 309 : 102.

    CAS Статья Google ученый

  • Симел Д.Л., Самса Г.П., Матчар Д.Б. Отношения правдоподобия с уверенностью: оценка размера выборки для диагностических тестов. J Clin Epidemiol 1991; 44 : 763–770.

    КАС Статья Google ученый

  • Делонг Э.Р., Делонг Д.М., Кларк-Пирсон Д.Л.Сравнение площадей под двумя или более коррелированными кривыми рабочих характеристик приемника: непараметрический подход. Биометрия 1988; 44 : 837–845.

    КАС Статья Google ученый

  • Яшке Р. , Гайатт Г., Сакетт Д.Л. Руководства пользователя медицинской литературы. III. Как пользоваться статьей о диагностическом тесте. A. Являются ли результаты исследования достоверными? Рабочая группа по доказательной медицине. ЯМА 1994; 271 : 389–391.

    КАС Статья Google ученый

  • Mattix HJ, Hsu CY, Shaykevich S, Curhan G . Использование соотношения альбумин/креатинин для выявления микроальбуминурии: последствия пола и расы. J Am Soc Нефрол 2002; 13 : 1034–1039.

    КАС пабмед Google ученый

  • Границы | Глубокое фенотипирование лейкоцитов мочи с помощью масс-цитометрии выявляет лейкоцитарную сигнатуру для раннего и неинвазивного прогнозирования ответа на лечение при активном волчаночном нефрите

    Введение

    Системная красная волчанка (СКВ) — редкое потенциально опасное для жизни аутоиммунное заболевание со сложной и до конца не изученной иммунной патофизиологией (1).

    Почти у половины больных СКВ развивается волчаночный нефрит (ВН) (2), что является причиной значительного увеличения смертности (18% в течение 5 лет) и заболеваемости (терминальная стадия почечной недостаточности, сердечно-сосудистые события) (3). Существует несколько типов почечных заболеваний при СКВ, которые в основном представляют собой гломерулонефрит, опосредованный иммунными комплексами. Их можно дифференцировать при гистопатологическом исследовании биоптатов почек. Морфологические изменения подразделяются на шесть различных классов в соответствии с классификацией ВН Международного общества нефрологов/Общества почечной патологии (ISN/RPS) 2003 г. и имеют решающее значение для лечения пациентов (4, 5).В то время как классы I и II характеризуются чисто мезангиальным поражением и не требуют специфической терапии, классы III и IV ВН характеризуются очаговой (III) или диффузной (IV) эндокапиллярной пролиферацией и часто лечатся мощной иммуносупрессией. Наконец, при мембранозном гломерулонефрите V класса и VI класса, проявляющемся прогрессирующим склеротическим поражением, можно лечить консервативно с помощью антипротеинурических и ренопротекторных мер (6). Могут наблюдаться комбинации пролиферативных (III или IV) и мембранозных (V) поражений.Кроме того, у больных СКВ редко могут наблюдаться почечные заболевания, такие как малоиммунный гломерулонефрит.

    При подозрении на ВН на основании повышенного уровня креатинина в сыворотке, впервые возникшей протеинурии, эритроцитурии с появлением акантоцитов или цилиндров в моче необходима биопсия почки для подтверждения диагноза и определения характера поражения почек (2). Однако могут возникнуть некоторые клинические ситуации, в которых биопсия почки противопоказана из-за тяжелой артериальной гипертензии, геморрагического диатеза или единственной почки или не проводится, например, при легкой протеинурии и немом ВН (7).В этих случаях диагноз является неопределенным, и начало индукционной терапии может быть отсрочено, что может привести к продолжающемуся воспалению и последующему хроническому поражению органов, в то время как ранние диагностированные и пролеченные пациенты с ВН имеют лучший результат (8, 9). Кроме того, если ответ на индукционную терапию не был достигнут через 6 месяцев и есть подозрение на изменение гистопатологической классификации почек или хроническое почечное повреждение, необходимы дополнительные биопсии, чтобы помочь в принятии терапевтических решений и прогнозировании исходов (2).На самом деле, лабораторные параметры, на которых основаны текущие критерии ремиссии (10), особенно креатинин сыворотки и протеинурия, не могут отличить активное заболевание от установленного повреждения органов, и несколько исследований показали их низкую чувствительность для прогнозирования исходов заболевания (11, 12).

    Чтобы преодолеть ограничения биопсии почки и улучшить прогноз ВН, необходимы надежные неинвазивные биомаркеры для ранней диагностики и прогнозирования исхода. С этой целью осадок мочи пациентов с ВН уже исследовали с помощью обычной проточной цитометрии ранее, и было описано присутствие мононуклеарных клеток в моче пациентов с активным заболеванием почек (13–15). Примечательно, что эти исследования показали, что фенотип мочевых иммунных клеток отличается от фенотипа лейкоцитов периферической крови (PB), в то время как он напоминает фенотип воспалительных клеток, инфильтрирующих почки, что позволяет предположить, что мочевые лейкоциты, скорее всего, происходят из лейкоцитарного почечного инфильтрата внутрипочечных резидентных клеток, а не от просачивания крови в мочу (12–15). В частности, Т-клетки мочи были выявлены как перспективные биосенсоры для выявления активного пролиферативного лимфатического узла. В то время как их частота коррелировала со степенью воспаления почек, исчезновение Т-клеток в моче при индукционной терапии было связано с лучшим исходом.У пациентов с СКВ с неактивным ВН или непролиферативными формами ВН наблюдался «иммунологически неактивный» осадок мочи (13, 14). Эти результаты подтверждают первоначальную гипотезу о том, что клетки мочи дают надежные биомаркеры для клинического использования.

    Обычная проточная цитометрия использовалась на основе гипотезы для анализа мочи в отношении определенных типов клеток. Там не только ограниченное количество цитометрических показаний, но также аутофлуоресценция мочевых клеток и проблемы с компенсацией артефактов спектрального перелива ограничивали возможности анализа на основе флуоресценции.Поэтому мы впервые использовали масс-цитометрию без флуоресценции (цитометрия по времени полета, CyTOF) для систематического картирования всех основных и многих второстепенных подмножеств лейкоцитов, обычно обнаруживаемых в PB, с беспрецедентной детализацией в моче человека. Эта технология использует моноклональные антитела, конъюгированные с изотопами металлов, для определения на сегодняшний день до 50 параметров одновременно на уровне одной клетки и обходит технические ограничения традиционной проточной цитометрии, упомянутые ранее (16). Эта технология позволила нам провести углубленный анализ лейкоцитов мочи в отношении их конкретных фенотипов, связанных с клеточной дифференцировкой и активацией.Идентификация надежной клеточной сигнатуры в моче представляет потенциальный интерес в качестве неинвазивного биомаркера для диагностики ВН.

    Материалы и методы

    Исследуемая группа

    Образцы мочи и ПБ были собраны у пациентов, отвечающих как минимум 4 критериям СКВ, пересмотренным Американским колледжем ревматологии 2010 г. (17) и подозревающимся активным поражением почек. Активное поражение почек было заподозрено клинически при ухудшении функции почек, аномальной протеинурии и/или эритроцитурии неизвестного происхождения.Всем больным СКВ ( n = 16) была проведена биопсия почки, и у них был диагностирован активный ВН. Гистологические данные оценивали в соответствии с классификацией ВН ISN/RPS 2003 (4). У одного пациента (Р12) был диагностирован очаговый ВН (класс III), у девяти пациентов был диагностирован диффузный ВН (класс IV), у трех пациентов (Р01, Р10 и Р15) был диагностирован смешанный пролиферативный и мембранозный ВН (класс IV). + V), у одного пациента (P05) был диагностирован чисто мембранозный ВН (класс V), а у двух пациентов (P07 и P08) был выявлен слабоиммунный полулунный гломерулонефрит (таблица 1).

    Таблица 1. Исходные характеристики и лечение всех включенных пациентов.

    В подгруппе из 13 пациентов с пролиферативным ВН (классы ВН III, IV и смешанные формы) были проанализированы парные образцы мочи и крови для выявления специфических для пролиферативного ВН мочевых биомаркеров. Для P01 и P16 образцы крови не были доступны, поэтому анализировались только образцы мочи. Образцы от больных СКВ с малоиммунными формами ВН (P07 и P08), с подтвержденным биопсией гломерулонефритом, ассоциированным с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA) (P17 и P19), и с острым гранулематозным интерстициальным тубулонефритом (gITN; P18) использовали в качестве непролиферативная контрольная группа (табл. 1).P05 (класс V) не использовался для дальнейшего анализа, поскольку определялось относительно небольшое количество клеток мочи, и большинство из них были гранулоцитами.

    Для каждого пациента с СКВ оценивали индекс активности заболевания СКВ (SLEDAI) (18); Элементы SLEDAI, отвечающие за заболевание почек (протеинурия, лейкоцитурия, эритроцитурия и цилиндры), представлены как почечный SLEDAI, при этом каждый положительный элемент оценивается четырьмя баллами. Обычные лабораторные показатели, а также результаты анализа осадка мочи были извлечены из медицинских записей.

    Все пациенты с пролиферативным ВН получали индукционную терапию комбинацией высоких доз кортикостероидов (> 1 мг/кг массы тела) и либо циклофосфамида (CYC), либо микофенолата мофетила (MMF) в течение 6 месяцев (в случае пациента 03 только 3 месяца) (Таблица 2). Пациенты находились под клиническим наблюдением в течение 6 мес. В это время ответ на индукционную терапию оценивали, приняв упрощенную версию критериев почечного ответа ACR и проверив мнение врача (таблица 2). Мы определяли пациентов как респондеров, когда уровень креатинина оставался стабильным (если расчетная скорость клубочковой фильтрации (рСКФ) была >60 мл/мин на исходном уровне) или улучшался не менее чем на 50% (если рСКФ была <60 мл/мин на исходном уровне) и/или протеинурия показала улучшение не менее чем на 50% без ухудшения других показателей (креатинин, протеинурия и осадок мочи/гематурия) с течением времени. Пациенты, которые не соответствовали этим критериям, считались не ответившими на лечение. Согласно этой оценке, девять пациентов ответили на лечение, а четыре — не ответили (таблица 2).

    Таблица 2. Клинический и лабораторный ответ на индукционную терапию.

    Все пациенты были набраны в течение 4 лет (между 2014 и 2017) из отделения ревматологии и клинической иммунологии университетской больницы Шарите, Берлин, Германия. Информированное согласие было получено от всех пациентов.Исследование было одобрено этическим комитетом университетской больницы Шарите (EA1/356/14) и проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией.

    Подготовка проб

    Буферы, химикаты и материалы

    Использовали следующие буферы и химические вещества: буфер для лизиса эритроцитов (Qiagen, Hilden, Германия), 1 × PBS, приготовленный из 10 × PBS (Rockland, Gilbertsville, PA, США; pH 7,2) с использованием воды Millipore, проницаемость клеток 0,1%. буфер, приготовленный из 10-кратного пермеабилизирующего буфера на основе сапонина (eBioscience), 4% раствор формальдегида в PBS, приготовленный из 16% параформальдегида (EMS, Hatfield, PA, США), PBS с добавлением 0.5% BSA (PAN Biotech, Айденбах, Германия) и 0,02% азида натрия (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) (PBS/BSA). Буферы стерильно фильтровали через мембраны 0,22 мкм и хранили в одноразовых бутылях Stericup (Merck, Дармштадт, Германия). Кровь, мочу и клетки обрабатывали в 50-мл, 15-мл и 5-мл полистирол/полипропиленовых пробирках с круглым дном (Corning, Corning, NY, United States and Sarstedt, Nümbrecht, Germany).

    Наборы для мечения антител

    MAXPAR, калибровочные гранулы EQ Four Element, раствор для промывки и настройки и интеркаляторы ДНК были приобретены у Fluidigm Corporation (Южный Сан-Франциско, Калифорния, США).Предварительно конъюгированные и немеченые антитела приведены в дополнительной таблице S1.

    Цис -платина(II)-диаминдихлорид (цисплатин) был приобретен у Enzo Life Sciences GmbH (Lörrach, Германия). Исходный раствор с концентрацией 25 мМ готовили в ДМСО (Sigma-Aldrich) и аликвоты хранили при -20°С.

    Сбор проб и сохранение клеток мочевыводящих путей
    У каждого пациента было взято

    пробы крови с антикоагулянтом ЭДТА и свежей мочи (от 50 до 150 мл).Пациентки с активными инфекциями мочевыводящих путей или менструацией на момент сбора мочи были исключены. Свежую мочу разбавляли 30% об./об. PBS с добавлением 1% БСА и быстро центрифугировали (300 × г , 10 мин, 4°C) в течение 60 мин после сбора, чтобы свести к минимуму артефакты, возникающие в результате отложенной обработки образцов. Мочевые клетки дважды промывали PBS/BSA. Кровь подвергали лизису эритроцитов в течение 1 ч после забора. Один объем цельной крови смешивали с 4 объемами EL-буфера, инкубировали 10 мин на льду, центрифугировали (300 × g , 10 мин, 4°C), клетки промывали один раз EL-буфером и дважды PBS. /БСА.

    Количество лейкоцитов и их жизнеспособность проверяли с помощью обычной проточной цитометрии с последовательным окрашиванием CD45 (Miltenyi Biotec; конъюгат Vio770, разведенный 1:50) и 4,6-диамидино-2-фенилиндола дигидрохлоридом (DAPI) (Sigma-Aldrich; конечная концентрация 1 мкг/мл) непосредственно перед измерением на проточном цитометре MACSQuant (Miltenyi Biotec, Бергиш-Гладбах, Германия). Образцы мочи, содержащие не менее 1 × 10 5 жизнеспособных CD45-позитивных клеток, использовали для масс-цитометрического анализа.В то время как жизнеспособность клеток крови всегда была >95%, для клеток мочи наблюдалась большая вариабельность, которая колебалась от 5% до 55% (в среднем 33%; стандартное отклонение ± 29%).

    Обработка проб для масс-цитометрического анализа

    До 3 × 10 6 клеток инкубировали с цисплатином, как описано выше, для окрашивания мертвых клеток. Коктейль, включающий 26 моноклональных антител против человека (дополнительная таблица S1), использовали для окрашивания клеток крови и мочи в течение 30 минут при комнатной температуре, как описано ранее (19).Все конъюгированные антитела собственного производства титровали перед использованием клеток крови. Коммерческие антитела использовали в соответствии с рекомендациями производителя.

    После промывки клетки фиксировали в течение ночи с использованием 4% PFA. На следующий день образцы промывали, а ядросодержащие клетки окрашивали интеркалятором иридия в пермеабилизирующем буфере в течение 30 мин при комнатной температуре. После двукратной промывки PBS/BSA, а затем дважды водой Millipore, клетки доводили до 0,5×10 6 клеток/мл, используя воду Millipore с добавлением 1/10 v/v EQ Four element beads.

    Масс-цитометрическое измерение

    Суспензии клеток получали на приборе CyTOF v1, управляемом программным обеспечением CyTOF v5.1.6.4.8 и v6.0.626) (Fluidigm). Прибор устанавливали и настраивали ежедневно в соответствии с рекомендациями производителя. Клетки вводили в петлю объемом 450 мкл со скоростью потока 45 мкл/мин. Данные были получены в режиме двойной калибровки с включенным шумоподавлением и нижним и верхним пороговыми значениями параметра длины ячейки, установленными на 10 и 75. Абсолютное количество ячеек каждого конкретного образца суммировано на дополнительном рисунке S1.Для образцов крови было получено около 2,5 × 10 6 событий.

    Анализ данных и статистика

    Данные нормализованы на основе сигналов гранул внутреннего стандарта. Нулевые значения были рандомизированы до значений от -1 до 0. Затем данные были проанализированы с помощью ручного стробирования с использованием программного обеспечения FlowJo 10.6 (Treestar, Ashland, OR, United States). Лейкоциты крови и мочи идентифицировали по экспрессии CD45. Стратегия стробирования, применяемая к образцам мочи и крови, показана на дополнительном рисунке S2.viSNE-анализ парных образцов мочи и крови выполняли с помощью Cytobank premium (Санта-Клара, Калифорния, США) с использованием следующих параметров: недоумение = 100, тета = 0,5, итерации = 1000.

    Статистические анализы проводились с использованием GraphPad Prism 8.0 (GraphPad Software, Сан-Диего, США). Для парных анализов крови и мочи использовали непараметрический критерий Вилкоксона. Корреляционный анализ с активностью заболевания оценивали с использованием ранговой корреляции Спирмена. Непараметрический критерий Манна-Уитни U был принят для анализа различий между группами ответивших и не ответивших.Двусторонние p -значения менее 0,05 считались статистически значимыми. Иерархический кластерный анализ был сгенерирован на основе z -балльной стандартизированной частоты клеточных субпопуляций, полученных из образцов мочи пациентов с активным ВН и другими острыми почечными заболеваниями. Частоты клеток были получены путем ручного стробирования масс-цитометрических данных. Иерархическая кластеризация была выполнена на основе расстояния Спирмена и критерия сцепления Уорда.

    Результаты

    Идентификация жизнеспособных ядерных клеток в сыворотке крови и моче

    Сначала присутствие живых одноядерных клеток оценивали в соответствии со стратегией ручного стробирования, показанной в качестве примера для клеток PB и мочи на дополнительном рисунке S2.В то время как стабильное количество живых одиночных клеток CD45 + было извлечено из образцов PB, соответствующие образцы мочи пациентов с ВН показали большие различия в отношении плотности клеток в моче и жизнеспособности клеток в диапазоне от 5% до 55%. На дополнительной фигуре S1 суммировано абсолютное количество ядерных клеток, полученных с помощью масс-цитометрии.

    Какие иммунные клетки можно найти в моче пациентов с ВН?

    Применение комплексной панели антител для масс-цитометрии позволило провести углубленный анализ состава лейкоцитов в моче по сравнению с аутологичными образцами крови.Нейтрофилы, моноциты/макрофаги и Т-лимфоциты были идентифицированы как преобладающие популяции лейкоцитов в моче, составлявшие 32–84% всех ядерных клеток (рис. 1А). Кроме того, были обнаружены незначительные частоты (<4% ядерных клеток) В-лимфоцитов, эозинофилов и естественных киллеров (NK) (рис. 1А).

    Рисунок 1. Распределение иммунных клеток крови и мочи. (A) Частота лейкоцитов в моче (% ядерных клеток) по сравнению с кровью. (B) Частота субпопуляций CD4 + наивных и эффекторных клеток в моче и крови (% CD4 + Т-клеток). (C) Частота субпопуляций CD8 + наивных и эффекторных клеток в моче и крови (% CD8 + клеток). EM, эффекторные Т-клетки памяти; TEMRA, терминально дифференцированные эффекторные Т-клетки памяти; CM, Т-клетки центральной памяти. Критерий Уилкоксона для парных выборок, p — значения: * p < 0,05, ** p < 0.01, *** p < 0,001, н.с.: не значимо.

    В отличие от парных образцов PB, в образцах мочи не было обнаружено приемлемого количества дендритных клеток, базофилов или плазматических клеток/плазмобластов. По сравнению с образцами ПБ наблюдалась большая вариабельность клеточного состава осадка клеток мочи в отношении нейтрофилов (17–53% ядерных клеток), моноцитов/макрофагов (12–78% ядросодержащих клеток) и Т-клеток (0,2%). –16% ядерных клеток) (рис. 1А). В дополнительной таблице S2 суммированы все фенотипы, идентифицированные с помощью ручного отбора.

    Результаты, полученные с помощью ручного стробирования, могут быть подтверждены анализом t-SNE, который выявил аналогичные кластеры клеток (рис. 3B). Наиболее очевидная разница между ПБ и мочой наблюдалась в миелоидных компартментах. Здесь скопления гранулоцитов и моноцитов/макрофагов показали явные изменения в их пространственной классификации. Измененный фенотип гранулоцитов, наблюдаемый в образцах мочи, скорее всего, отражает их чувствительное поведение в ответ на химическую природу мочи.

    Можно ли идентифицировать специфические для мочи фенотипы иммунных клеток?

    Помимо обилия основных подмножеств лейкоцитов, мы дополнительно проанализировали иммунофенотипические характеристики мочевых Т-клеток и моноцитов более подробно.Мочевые Т-клетки показали значительно более низкое соотношение CD4/CD8 по сравнению с парными образцами ПБ (0,8 ± 0,8 против 1,6 ± 0,7, p = 0,02), и наблюдалась только плохая корреляция между кровью и мочой ( r = 0,2760, р = нс).

    Т-клеток, лишенных CD4 и CD8 (DN), были значительно увеличены в моче по сравнению с кровью (28% ± 13% против 8% ± 5% клеток CD3 + ; p = 0,002).

    Наивный (CD45RA + CCR7 + ), центральная память (CM, CD45RA CCR7 + ), эффекторная память (EM, CD45RA CCR7 ) и терминальная дифференцированная память , CD45RA + CCR7 ) Подмножества Т-клеток показали значительно различное распределение в моче и крови (рис. 1B, C).В моче как CD4 + , так и CD8 + Т-клетки эффекторной памяти представлены самой большой субпопуляцией Т-клеток (CD4 + EM, 68% ± 24%; CD8 + EM, 84% ± 19% CD4 + и CD8 + клеток соответственно), в то время как при ПБ преобладали наивные Т-клетки (CD4 + наивные: 46% ± 16%; CD8 + наивные: 55% ± 28% по отношению к все клетки CD4 + и CD8 + соответственно).

    Далее мы исследовали экспрессию маркеров активации на определенных субпопуляциях Т-клеток, т.е.д., HLA-DR, CD69 и CD38. Большинство Т-клеток мочи показали CD69 + CD38 + двойно-положительный фенотип (52% ± 23% клеток CD3 + ), тогда как в крови этот фенотип практически отсутствовал (3% ± 3%) ( Рисунок 2А). Процент CD69 + CD38 + Т-клеток был самым высоким среди CD8 + EM-клеток (66% ± 21%), за которыми следовали CD4 + EM-клетки (45% ± 13%) (рис. 2A).

    Рис. 2. Активированные Т-клетки в моче и крови. (A) Частоты субпопуляций CD69 + CD38 + двойных положительных Т-клеток, относящихся ко всем субпопуляциям CD3 + и CD4 + EM и CD8 + EM-клеток. Поскольку в крови почти не было обнаружено активированных Т-клеток, анализы, связанные с CD4 и CD8, были показаны только для клеток мочи (закрашенные символы). (B) Средняя интенсивность экспрессии HLA-DR на всех клетках CD3 + , CD4 + EM и CD8 + EM в моче (закрашенные символы) и крови (открытые символы).Критерий Уилкоксона для парных выборок, p — значения: * p < 0,05, *** p < 0,001.

    Активированный фенотип Т-клеток мочи также отражался более высокой экспрессией HLA-DR (рис. 2В). Здесь клетки CD4 + EM показали в два раза более высокие средние значения интенсивности, чем клетки CD8 + EM.

    Результаты, полученные с помощью ручного стробирования, могут быть подтверждены анализом t-SNE, который выявил похожие кластеры клеток (рис. 3А). Наиболее очевидная разница между ПБ и мочой наблюдалась в миелоидных компартментах.Здесь скопления гранулоцитов и моноцитов/макрофагов показали явные изменения в их пространственной классификации. Измененный фенотип гранулоцитов, наблюдаемый в образцах мочи, скорее всего, отражает их чувствительное поведение в ответ на химическую природу мочи. Анализ t-SNE позволил провести углубленную фенотипическую характеристику кластеров моноцитов/макрофагов, показанных в качестве примера на рисунке 3B. В то время как моноциты обнаруживались по совместной экспрессии CD14, CD36, CD16 и HLA-DR в PB, очевидно, импринтированные в ткани макрофаги характеризовались высокими значениями экспрессии HLA-DR и CD11c в моче (рис. 3A, B).CD36, CD14 и CD38 были значительно ниже экспрессированы на макрофагах мочи по сравнению с моноцитами PB (рисунок 3C и дополнительный рисунок S3).

    Рисунок 3. Активированные моноциты/макрофаги в моче и крови. (A) Анализ viSNE всех предварительно гейтированных жизнеспособных ядерных клеток из мочи и крови (график 5, дополнительная фигура S1) с клеточными популяциями, определенными на основе основных фенотипических маркеров, показанных в качестве примера для пациента 04 (равная выборка для сравнения, выборка события = 200 000 клеток на образец, 1 000 итераций, окончательное KL-расхождение: 5.11). (B) Экспрессия HLA-DR и CD11c в клеточной популяции предварительно гейтированных моноцитов/макрофагов показана на двумерном графике; цвет соответствует экспрессии CD14, показанной на примере пациента 04 в моче и крови. (C) Миелоидные клетки, отобранные ранее для HLA-DR и CD11c, далее анализировали на экспрессию HLA-DR, CD11c, CD36, CD14 и CD38 в виде средней интенсивности (медиана I). Критерий Уилкоксона для парных выборок, p — значения: * p < 0,05; ** р < 0. 01; *** р < 0,001.

    Можно ли использовать сигнатуру лейкоцитов в моче для выявления пациентов с пролиферативным ВН?

    Затем мы проанализировали, можно ли использовать клеточные фенотипы, выявленные в моче пациентов с ВН, для различения пролиферативных и непролиферативных форм ВН и других острых воспалительных заболеваний почек. Для этого анализа клеточные популяции учитывали, когда обнаруживалось не менее 25 клеток; т. е. клетки CM, TEMRA, Treg и DC были исключены.По этой причине P05 (мембранозный ЛУ) был исключен из анализа, так как здесь обнаруживались почти исключительно нейтрофилы в моче. Как показано в иерархическом кластерном анализе на рисунке 4, частоты 23 подмножеств лейкоцитов в моче, обобщенные в дополнительной таблице S2, позволили разделить пациентов на два основных кластера. Эта классификация в значительной степени согласуется с гистопатологической оценкой биоптатов почек. Фактически, 11 из 13 образцов пролиферативных ЛУ сгруппировались вместе и четко отделены от других (рис. 4).Интересно, что P02 и P16, которые группировались отдельно вместе с образцами без волчанки, были единственными пациентами класса IV, показывающими сегментарные поражения в клубочках вместо глобальных поражений, наблюдаемых у всех других пациентов класса IV. Два из пяти контролей (P17 и P18) сгруппированы вместе с образцами пролиферативного ЛУ.

    Рисунок 4. Двумерный иерархический кластерный анализ с использованием 23 клеточных фенотипов мочи для классификации активного пролиферативного ВН ( n = 13) и других заболеваний почек ( n = 5).Тепловая карта была создана на основе стандартизированных частот z баллов клеточных субпопуляций, полученных из образцов мочи пациентов с активным ВН и другими острыми почечными заболеваниями, которые были получены путем ручного гейтирования данных масс-цитометрии. Иерархическая кластеризация была выполнена на основе расстояния Спирмена и критерия сцепления Уорда. Значения выше 2 и ниже -2 стандартных отклонений выделены светло-красным и зеленым соответственно. Пациенты с пролиферативным ВН, не ответившие на индукционную терапию, были отмечены темно-желтым цветом.Анализ выявил две основные группы пациентов, согласующиеся с гистологическими результатами для пациентов с пролиферативным ВН (желтый цвет) и заболеваниями почек с различными диагнозами (синий цвет). Однако два пациента с пролиферативным ВН сгруппировались в контрольной группе, а два контрольных пациента сгруппировались в группе с пролиферативным ВН. Сокращения в соответствии с таблицей 1 и дополнительной таблицей S2 соответственно, p.i.: слабоиммунный.

    Коррелируют ли субпопуляции Т-клеток в моче с клиническими параметрами?

    Затем мы исследовали, какие подмножества клеток мочи коррелируют с клиническими параметрами.Единственная наблюдаемая достоверная корреляция была между CD4 + Т-клетками и протеинурией. Здесь можно установить отрицательную корреляцию, которая отражает низкое соотношение CD4/CD8, обнаруженное в PB и моче пациентов с ЛН (дополнительная фигура S4). Другие клинические параметры, такие как почечный SLEDAI, активный мочевой осадок и креатинин, не показали значительной корреляции ни с одним из идентифицированных подмножеств клеток.

    Могут ли сигнатуры мочевых клеток использоваться в качестве предикторов ответа на терапию?

    Наконец, было интересно узнать, можно ли использовать субпопуляции мочевых клеток для прогнозирования ответа на индукционную терапию.Пациенты с ВН были классифицированы через 6 месяцев после начала индукционной терапии как респондеры и нереспондеры (таблица 2). У 9 из 13 больных ВН наблюдалось клиническое улучшение в ответ на стандартную иммуносупрессивную терапию. Высокая частота клеток CD4 + EM (> 90% от общего количества CD4 + ) была идентифицирована на исходном уровне как наиболее многообещающий предиктор недостаточного ответа на терапию (рис. 5). Все другие подмножества клеток мочевыводящих путей не позволяли прогнозировать ответ на терапию или отсутствие ответа.

    Рисунок 5. CD4 + ЭМ-клеток как предикторы ответа на исходную индукционную терапию у пациентов с активным пролиферативным ВН ( n = 13). Частота клеток эффекторной памяти CD4 + на исходном уровне в группах пациентов, ответивших и не ответивших. Реактивность рассчитывали через 6 месяцев после начала индукционной терапии, как описано в таблице 2. Критерий Манна-Уитни для непарных выборок, p — значение: * p < 0.05.

    Что касается PB, мы не смогли идентифицировать какую-либо подгруппу лейкоцитов, предсказывающую ответ на терапию.

    Обсуждение

    Доступность неинвазивных биомаркеров ВН, которые можно было бы диагностически использовать для уточнения почечной недостаточности и которые могли бы помочь в индивидуальном принятии терапевтических решений, до сих пор остается неудовлетворенной клинической потребностью. Поэтому в этом исследовании использовалась современная масс-цитометрия, позволяющая провести углубленное профилирование лейкоцитов в моче по сравнению с ПБ в отношении выявления новых клеточно-ассоциированных биомаркеров, которые можно использовать вместе с гуморальными маркерами сыворотки и мочи для инновационное, неинвазивное лечение ВН.

    Хотя клеточный состав осадка мочи уже был проанализирован в нескольких исследованиях (13–15, 20–23), эти обычно основанные на флуоресценции проточные цитометрические анализы были ограничены методологическими ограничениями, такими как ограниченное количество параметров, необходимых для глубокого и всестороннее профилирование подмножеств лейкоцитов, проблемы, возникающие из-за аутофлуоресценции клеток, присутствующих в моче, и то, как их можно соответствующим образом компенсировать, когда они перетекают в интересующие каналы флуоресценции.Поскольку масс-цитометрия устраняет эти технические ограничения, мы использовали ее для глубокого сравнительного анализа лейкоцитов крови и мочи. Таким образом, нам удалось выявить существенные различия в распределении субпопуляций лейкоцитов и фенотипических признаков, которые экспрессируются исключительно мочевыми клетками, что подтверждает предположение о том, что лейкоциты в моче могут отражать воспалительный инфильтрат в ВН. Это предположение подтверждается данными недавнего исследования, анализирующего кластеры клеток, связанных с мочой и почками, в ЛУ с помощью транскриптомики одиночных клеток (24).Здесь в моче были идентифицированы различные подмножества макрофагов, NK-клеток и подмножеств лимфоцитов, которые также можно отнести к тканевым лейкоцитам в воспаленной почке. В отличие от исследования Arazi et al. (24), наш подход масс-цитометрии позволил обнаружить нейтрофилы, которые, наряду с моноцитами/макрофагами, являются доминирующими субпопуляциями лейкоцитов, обнаруживаемых в осадке мочи, и, следовательно, оказывают сильное влияние на относительный количественный состав мочевых клеток.

    Имея настоящие данные, мы смогли не только подтвердить наличие основных типов воспалительных клеток в моче из пораженных почек, но также обнаружить редкие типы клеток, такие как В-клетки, NK-клетки или эозинофилы на уровне отдельных клеток.За исключением исследования Brito эозинофилов в моче (20), большинство исследований, проведенных до сих пор, были сосредоточены на субпопуляциях мононуклеарных клеток, хотя на их долю приходится только 20% от общего числа клеток, обнаруживаемых в моче пациентов с ВН (21). Несколько недавних публикаций указывают на то, что гранулоциты (нейтрофилы, базофилы и эозинофилы) играют важную роль в патогенезе СКВ, стимулируя врожденные и адаптивные аберрантные аутоиммунные реакции и усиливая повреждение тканей (25). Поэтому наша панель антител была задумана для исследования популяций как гранулоцитарных, так и мононуклеарных клеток.По нашим данным, нейтрофильные гранулоциты и мононуклеары составляют примерно 50% ядерных клеток в моче. При сравнении нейтрофилов из мочи и крови фенотипические различия были обнаружены в соответствии с анализом t-SNE. Невозможно определить четко определенные фенотипы, поскольку гранулоцитарный компартмент показал высокие межиндивидуальные различия, которые могут быть вызваны химической природой мочи. Очевидно, что гранулоциты особенно чувствительны к этому виду клеточного стресса, и будут инициированы программы апоптоза.

    Вторая по величине популяция клеток мочевыводящих путей состояла из моноцитов/макрофагов. По сравнению с моноцитами крови клетки мочи демонстрировали более дифференцированный макрофагоподобный фенотип, на что указывает повышенная экспрессия HLA-DR и CD11c (26).

    Т-клетки

    чаще всего исследуют в моче ВН (21–23). Преобладающее появление в моче Т-клеток и моноцитов, помимо гранулоцитов, подтверждает гистопатологические данные о воспаленной ткани в ВН (22, 27–29), что еще раз подтверждает мнение о том, что лейкоциты, притянутые в воспаленную почку, могут выходить из поврежденных гломерулярных капилляров и канальцев в мочу. .Наши данные позволили провести углубленное фенотипирование Т-клеток мочи, которые уже были описаны как надежные биомаркеры пролиферативного ВН (14). В соответствии с выводами Dolff et al. (15), мы смогли подтвердить, что мочевые Т-клетки имеют преимущественно фенотип эффекторной памяти, но дополнительно смогли показать, что они коэкспрессируют маркеры активации CD38 и CD69. Сопоставимые результаты были получены при анализе транскриптома одиночных клеток лимфатических узлов почек, в котором CD69-позитивные центральные Т-хелперы памяти и эффекторные Т-хелперы памяти были идентифицированы как один из основных кластеров лимфоцитов (24).Наиболее поразительно, что количество эффекторных Т-клеток памяти предсказывало ответ на иммуносупрессивную индукционную терапию. Кроме того, большинство клеток CD4 + EM могут быть идентифицированы как CCR5-экспрессирующие клетки Th2 в подгруппе пациентов, проанализированных второй панелью антител (дополнительная фигура S5), которые, как известно, в первую очередь ответственны за прогрессирование заболевания при ВН ( 30–32).

    Помимо субпопуляций Т-клеток CD4 + и CD8 + , как в крови, так и в моче были обнаружены двойные негативные (DN) CD3 + Т-клетки.Обсуждалось, что эти клетки являются продуцентами IL-17, и было обнаружено, что их количество увеличивается при гломерулонефрите (33).

    Несмотря на многообещающие результаты, экспрессия этой сигнатуры активации, связанной с Т-клетками (CD69, CD38 и HLA-DR), не показала какой-либо прогностической значимости в нашей когорте. Вместо этого было поразительным открытием, что те пациенты, у которых был высокий процент ЭМ-Т-клеток в моче на исходном уровне (особенно CD4 + ЭМ), не отвечали должным образом на терапию.

    Согласно современным данным, иммунные клетки в моче обнаруживаются не только при активном пролиферативном ВН, но и при других воспалительных заболеваниях почек.Однако распределение популяций лейкоцитов и их соответствующих фенотипов различается среди групп пациентов (22, 23, 34), что, вероятно, свидетельствует о различиях в соответствующих почечных инфильтратах. Чтобы показать, что сигнатуры лейкоцитов в моче можно использовать для дифференциальной диагностики различных почечных патологий, мы провели контролируемый иерархический кластерный анализ, включающий образцы пролиферативных ВН, а также непролиферативные формы ВН и другие острые воспалительные заболевания, и смогли продемонстрировать, что 11 из 13 образцов пролиферативных ЛУ сгруппированы вместе и четко отделены от других.Интересно, что один из обоих неправильно классифицированных образцов пролиферативного ВН (P16) показал клеточный состав, который был очень похож на состав образцов крови ВН и мог быть вызван наложенным кровотечением, вызванным инфекцией мочеполового тракта. Два контрольных образца сгруппированы вместе с пролиферативными образцами ВН, и поэтому специфичность заболевания сигнатуры мочевых клеток должна быть подтверждена в большей когорте.

    Таким образом, мы смогли показать, что мультиплексная способность масс-цитометрии позволила более подробно описать сигнатуры Т-клеток и моноцитов в моче, раскрыть многообещающие инструменты биомаркеров для клинических целей, а также выявить некоторые новые знания о тех фенотипах, которые вызывают воспаление в пролиферативный ВН.Из-за ограниченного числа пациентов, включенных в это исследование, мы знаем о его исследовательском характере. Таким образом, выводы, сделанные на основе наших результатов, должны быть подтверждены независимыми и более крупными когортами, чтобы надежно оценить диагностическую и прогностическую ценность сигнатур мочевых клеток для прецизионной медицины у пациентов с ВН.

    Как-то неясно наблюдение, что в осадке мочи можно найти большое количество мертвых клеток. С одной стороны, на жизнеспособность, безусловно, влияет pH и гипер- или гипоосмотическая природа мочи, но, с другой стороны, мертвые и апоптотические клетки в моче могут отражать неполноценный клиренс апоптотических клеток в воспаленной почке, что однозначно вовлечены в этиопатогенез СКВ (35, 36).Помимо лейкоцитов, в осадке мочи также могут быть обнаружены эпителиальные клетки из поврежденных паренхиматозных структур, таких как клубочки, канальцы и собирательные трубочки. Соответственно, более подробный анализ мертвых клеток в отношении молекул, связанных с апоптозом, и эпителиальных маркеров может предоставить дополнительную информацию о патофизиологическом состоянии поврежденной почки. Тем не менее, мы рекомендуем разбавлять мочу буфером PBS/BSA сразу после мочеиспускания в качестве простой преддиагностической процедуры обработки для достижения более стандартизированного сбора образцов мочи.

    В заключение, мочевые клетки, будучи доступными необременительным образом, идеально позволяют проводить продольный мониторинг клеточных изменений в воспаленной почке в реальном времени. Кажется бесспорным, что отдельные маркеры сами по себе вряд ли будут обладать достаточной чувствительностью и специфичностью, как это требуется для клинического ведения пациентов. Следовательно, многопараметрические панели мочи, включающие гуморальные факторы, микроРНК и клеточные маркеры, должны быть протестированы в надлежащим образом спланированных клинических исследованиях.Чем глубже знания о тщательно оцененных характеристиках мочи, тем больше вероятность успешного создания неинвазивного инструмента для дифференциальной диагностики и прогностической стратификации пациентов с ВН.

    Заявление о доступности данных

    Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

    Заявление об этике

    Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены Комитетом по этике университетской больницы Шарите (EA1/356/14).Пациенты/участники предоставили письменное информированное согласие на участие в этом исследовании.

    Вклад авторов

    MB, SB и AG написали рукопись. MB, SB, PE, HM и AG разработали исследование и экспериментальную стратегию. MB, SB и PD отвечали за анализ данных. MB, TR и PE отвечали за отбор пациентов и их клиническую характеристику. SB и AP выполнили пробоподготовку и измерения.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Финансирование

    Эта работа была поддержана DFG Me3644/5-1, BMBF KMU-innovativ 031B0758B, проектом RTCure, финансируемым IMI JU, соглашение о гранте № 777357 и концепция исследований и финансирования e:Med sysINFLAME, грант № 01ZX1606_B, Leibniz ScienceCampus Chronic Inflammation ( www.chronischeentzuendung.org) и Берлинский институт здравоохранения – Программа клинических инноваций.

    Благодарности

    Особая благодарность Марианне – без нее подготовка рукописи заняла бы буквально годы.

    Дополнительный материал

    Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2020.00256/full#supplementary-material

    .

    Сноски

    Каталожные номера

    2. Bertsias GK, Tektonidou M, Amoura Z, Aringer M, Bajema I, Berden JHM, et al. Совместные рекомендации Европейской лиги против ревматизма и Европейской почечной ассоциации – Европейской ассоциации диализа и трансплантации (EULAR/ERA-EDTA) по лечению волчаночного нефрита у взрослых и детей. Энн Реум Дис. (2012) 71:1771–82. doi: 10.1136/annrheumdis-2012-201940

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    3. Hermansen M-L, Lindhardsen J, Torp-Pedersen C, Faurschou M, Jacobsen S. Риск сердечно-сосудистых заболеваний и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний при системной красной волчанке и волчаночном нефрите: датское общенациональное популяционное когортное исследование. Ревматология. (2017) 56:709–15. doi: 10.1093/ревматология/kew475

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    4.Weening JJ, D’agati VD, Schwartz MM, Seshan SV, Alpers CE, Appel GB, et al. Пересмотрена классификация гломерулонефрита при системной красной волчанке. Почки, внутр. (2004) 65:521–30. doi: 10.1111/j.1523-1755.2004.00443.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    5. Остин Х.А., Бумпас Д.Т., Воган Э.М., Балоу Д.Э. Прогнозирование почечных исходов при тяжелом волчаночном нефрите: вклад клинических и гистологических данных. Почки, внутр. (1994) 45:544–50.

    Реферат PubMed | Академия Google

    7. Забалета-Ланц М., Варгас-Аренас Р.Е., Тапанес Ф., Дабоин И., Атауальпа Пинто Х., Бьянко Н.Э. Тихий нефрит при системной красной волчанке. Волчанка. (2003) 12:26–30. дои: 10.1191/0961203303lu259oa

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    8. Fiehn C, Hajjar Y, Mueller K, Waldherr R, Ho AD, Andrassy K. Улучшение клинических исходов волчаночного нефрита за последнее десятилетие: важность ранней диагностики и лечения. Энн Реум Дис. (2003) 62:435–9.

    Реферат PubMed | Академия Google

    9. Faurschou M, Starklint H, Halberg P, Jacobsen S. Прогностические факторы при волчаночном нефрите: задержка диагностики и лечения увеличивает риск терминальной почечной недостаточности. J Ревматол. (2006) 33:1563–9.

    Реферат PubMed | Академия Google

    10. Gordon C, Jayne D, Pusey C, Adu D, Amoura Z, Aringer M, et al. Европейский консенсус в отношении терминологии, используемой при лечении волчаночного гломерулонефрита. Волчанка. (2009) 18:257–63. дои: 10.1177/0961203308100481

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    11. Wofsy D, Hillson JL, Diamond B. Абатацепт при волчаночном нефрите: альтернативные определения полного ответа подтверждают противоречивые выводы. Ревматоидный артрит. (2012) 64:3660–5. дои: 10.1002/арт.34624

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    13. Enghard P, Humrich JY, Rudolph B, Rosenberger S, Biesen R, Kuhn A, et al.CXCR3+CD4+ Т-клетки обнаруживаются в воспаленных почках и моче и являются новым биомаркером обострений острого нефрита у пациентов с системной красной волчанкой. Ревматоидный артрит. (2009) 60:199–206. дои: 10.1002/арт.24136

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    14. Enghard P, Rieder C, Kopetschke K, Klocke JR, Undeutsch R, Biesen R, et al. Т-клетки CD4 в моче выявляют больных СКВ с пролиферативным волчаночным нефритом и могут использоваться для мониторинга ответа на лечение. Энн Реум Дис. (2014) 73:277–83. doi: 10.1136/annrheumdis-2012-202784

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    15. Dolff S, Abdulahad WH, van Dijk MCRF, Limburg PC, Kallenberg CGM, Bijl M. Мочевые Т-клетки при активном волчаночном нефрите демонстрируют фенотип эффекторной памяти. Энн Реум Дис. (2010) 69:2034–41. doi: 10.1136/ard.2009.124636

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    16. Бандура Д.Р., Баранов В.И., Орнацкий О.И., Антонов А., Кинач Р., Лу Х. и соавт.Масс-цитометрия: метод многоцелевого иммуноанализа отдельных клеток в режиме реального времени, основанный на времяпролетной масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Анальная хим. (2009) 81:6813–22. дои: 10.1021/ac9w

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    18. Гладман Д.Д., Ибаньес Д., Уровиц М.Б. Индекс активности системной красной волчанки 2000. J Rheumatol. (2002) 29:288–91.

    Реферат PubMed | Академия Google

    19.Баумгарт С., Педдингхаус А., Шульте-Вреде У., Мей Х.Е., Грюцкау А. OMIP-034: комплексное иммунное фенотипирование периферических лейкоцитов человека с помощью масс-цитометрии для мониторинга иммуномодулирующей терапии. Цитометрия А. (2017) 91:34–8. doi: 10.1002/cyto.a.22894

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    20. Brito TNS, Vilar MJ, Almeida JB, Faria ALSB, Medeiros SDV, Medeiros MCC и соавт. Измерение эозинофилурии, катионного белка эозинофилов в моче и интерлейкина-5 в моче у пациентов с волчаночным нефритом. Аллергия Астма Клин Иммунол. (2014) 10:61. doi: 10.1186/s13223-014-0061-x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    21. Chan RW-Y, Lai FM-M, Li EK-M, Tam LS, Chung KY, Chow K-M, et al. Мононуклеарные клетки мочевыводящих путей и системная красная волчанка. Волчанка. (2006) 15:262–7. дои: 10.1191/0961203306lu2287oa

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    22. Скотт Э., Дули М.А., Вилен Б.Дж., Кларк С.Х.Иммунные клетки и ИФН 1 типа в моче больных СКВ коррелируют с иммунопатологией в почках. Клин Иммунол. (2016) 168:16–24. doi: 10.1016/j.clim.2016.04.005

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    23. Копечке К., Клоке Дж., Гриссбах А.С., Хамрих Дж.Ю., Бизен Р., Драгун Д. и соавт. Клеточная подпись мочевых иммунных клеток при волчаночном нефрите: новый взгляд на потенциальные биомаркеры. Артрит Res Ther. (2015) 17:94. дои: 10.1186/с13075-015-0600-й

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    24. Arazi A, Rao DA, Berthier CC, Davidson A, Liu Y, Hoover PJ, et al. Ландшафт иммунных клеток в почках больных волчаночным нефритом. Нат Иммунол. (2019) 20:902–14. doi: 10.1038/s41590-019-0398-x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    27. Д’Агати В.Д., Аппель Г.Б., Эстес Д., Ноулз IIDM, Пирани К.Л. Идентификация моноклональных антител инфильтрирующих мононуклеарных лейкоцитов при волчаночном нефрите. Почки, внутр. (1986) 30:573–81. doi: 10.1038/ki.1986.223

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    28. Alexopoulos E, Seron D, Barrie Hartley R, Stewart Cameron J. Волчаночный нефрит: корреляция интерстициальных клеток с функцией клубочков. Почки, внутр. (1990) 37:100–9. doi: 10.1038/ki.1990.14

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    29. Fiore N, Castellano G, Blasi A, Capobianco C, Loverre A, Montinaro V, et al.Незрелые миелоидные и плазмацитоидные дендритные клетки инфильтрируют тубулоинтерстиций почек у пациентов с волчаночным нефритом. Мол Иммунол. (2008) 45:259–65. doi: 10.1016/j.molimm.2007.04.029

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    30. Segerer S, Mack M, Regele H, Kerjaschki D, Schlöndorff D. Экспрессия хемокинового рецептора СС 5 при заболеваниях почек человека. Почки, внутр. (1999) 56:52–64. doi: 10.1046/j.1523-1755.1999.00544.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    31.Масутани К., Акахоши М., Цуруя К., Токумото М., Ниномия Т., Косака Т. и др. Преобладание иммунного ответа Th2 при диффузном пролиферативном волчаночном нефрите. Ревматоидный артрит. (2001) 44:2097–106. doi: 10.1002/1529-0131(200109)44:93.0.CO;2-6

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    32. Калигарис-Каппио Ф., Берги Л., Тесио Л., Зиано Р., Камюсси GHLA-DR. + Т-клетки типа Leu 3 (хелперы) инфильтрируют почки больных системной красной волчанкой. Clin Exp Immunol. (1985) 59:185–9.

    Реферат PubMed | Академия Google

    34. Hotta O, Yusa N, Ooyama M, Unno K, Furuta T, Taguma Y. Обнаружение макрофагов в моче, экспрессирующих молекулу CD16 (Fc gamma RIII): новый маркер острого воспалительного повреждения клубочков. Почки, внутр. (1999) 55:1927–34. doi: 10.1046/j.1523-1755.1999.00431.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    35. Макино Х., Сугияма Х., Ямасаки Ю., Маэсима Ю., Вада Дж., Кашихара Н.Апоптоз клубочков при волчаночном нефрите человека. Арка Вирхова. (2003) 443:67–77. doi: 10.1007/s00428-003-0827-x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Педиатрическая протеинурия (избыток белка в моче)

    Клубочки — это крошечные кровеносные сосуды в почках, которые обычно фильтруют из крови соль, воду и продукты жизнедеятельности. Они удерживают белок в крови, что помогает им поглощать воду из тканей. Когда эти фильтры повреждены, белок может просачиваться из крови в мочу, что приводит к протеинурии — избытку белка в моче.Протеинурия также называется альбуминурией или альбумином мочи.

    Что такое детская протеинурия (избыток белка в моче)?

    Протеинурия – это избыток белка в моче вашего ребенка. Если у вашего ребенка протеинурия, часто это несерьезно. Но иногда это может указывать на более серьезную проблему с почками. Вы должны следить за любыми признаками того, что жидкости вашего ребенка кажутся неуравновешенными, и проконсультироваться с врачом.

    Если протеинурия указывает на заболевание почек, ваш врач направит вашего ребенка к нефрологу, врачу, специализирующемуся на лечении заболеваний почек.

    Каковы признаки и симптомы детской протеинурии (избыток белка в моче)?

    Ваш ребенок может не иметь симптомов на самых ранних стадиях протеинурии. Поскольку большое количество белка перемещается из крови в мочу и из организма, могут возникнуть следующие признаки и симптомы, которые могут указывать на прогрессирование заболевания почек.

    • Затрудненное дыхание
    • Высокое кровяное давление
    • Усталость
    • Отек (отек), особенно вокруг глаз, рук, ног и живота
    • Моча пенистая или пузырчатая из-за большого количества белка

    Как диагностируется детская протеинурия (избыток белка в моче)?

    Если вы или педиатр вашего ребенка подозреваете, что у вашего ребенка протеинурия, состояние, при котором белок попадает из крови в мочу, врач порекомендует провести анализ мочи.

    Раньше для диагностики протеинурии требовался сбор мочи за 24 часа. Пациент собирал мочу в один контейнер с момента первого посещения туалета утром до первого посещения на следующий день. Этот тест все еще можно использовать, но в большинстве случаев простой анализ мочи можно сделать в кабинете врача, чтобы определить, сколько белка содержится в моче вашего ребенка. Химически обработанная бумага, смоченная в образце мочи, изменит цвет при высоком уровне белка.

    Если у вашего ребенка нет симптомов, а образец мочи, собранный первым делом утром, показывает отсутствие белка или наличие только следовых количеств, врач может предложить вашему ребенку пройти повторный анализ через год.Если в моче обнаружен белок, необходимо провести еще одну первую утреннюю пробу и также исследовать ее под микроскопом, а также провести дальнейшие анализы мочи — физическое, химическое и микроскопическое исследование пробы мочи. Если анализы мочи показывают избыток белка, а результаты анализа мочи не соответствуют норме, вашему ребенку может потребоваться дальнейшее обследование, потому что, если протеинурия сохраняется, это может означать, что функция почек вашего ребенка ухудшается.

    Чтобы проверить общее состояние здоровья вашего ребенка и его почек, врач расспросит вас о полной истории болезни вашего ребенка, проведет медицинский осмотр и возьмет образцы крови для измерения уровня креатинина и азота мочевины — отходов, которые фильтруются почками у здоровых людей.Превышение количества может указывать на плохую функцию почек.

    В некоторых случаях врач может порекомендовать УЗИ почек для выявления структурных повреждений или аномалий. Этот тест предоставляет врачу информацию о размере и форме почки и помогает обнаружить кисты, камни в почках, обструкции, объемные образования в почках и другие проблемы. Тест безболезненный и неинвазивный. Технолог перемещает датчик над почкой снаружи тела, что создает звуковые волны, которые отражаются от почки, формируя изображение на видеоэкране.

    В редких случаях вашему ребенку может потребоваться биопсия почки. Врач может рассмотреть образец почечной ткани под микроскопом, чтобы точно определить заболевание почек. Для биопсии, которая включает в себя пребывание в больнице в течение ночи, ваш ребенок получит легкое седативное средство и местную анестезию. Врач направит иглу для биопсии в почку, ориентируясь либо на изображения, полученные с помощью ультразвука, либо на компьютерную томографию (КТ) — тест, в котором используются несколько рентгеновских изображений для получения подробной картины структур тела.Ткань почки будет исследована для диагностики заболевания почек, вызывающего появление белка в моче.

    Каковы причины детской протеинурии (избыток белка в моче)?

    Одна из функций белка в крови — помочь сбалансировать уровень жидкости в организме. Когда белок попадает в мочу, он вызывает утечку жидкости в ткани организма, что приводит к отеку.

    Хотя протеинурия часто безвредна и может быть вызвана стрессом, лихорадкой или физической нагрузкой, она также может быть признаком серьезного основного заболевания почек (также называемого почечной болезнью) или заболевания, которое началось в другой части тела вашего ребенка.Протеинурия также может быть признаком другого состояния, нефротического синдрома, который может указывать на основное заболевание почек.

    Наиболее распространенными факторами риска протеинурии являются диабет и гипертония или высокое кровяное давление. Оба этих заболевания могут вызывать поражение почек и протеинурию.

    Факторы риска включают:

    • Семейный анамнез болезни почек
    • Повреждение или заболевание почек
    • Ожирение
    • Раса и этническая принадлежность: афроамериканцы, выходцы из Латинской Америки, коренные американцы и жители островов Тихого океана более склонны к развитию протеинурии, чем представители европеоидной расы.

    Без лечения протеинурия может привести к серьезным проблемам с почками. Это наиболее частая причина хронического заболевания почек.

    Как лечится детская протеинурия (избыток белка в моче)?

    Если у вашего ребенка протеинурия, выделение белка из крови в мочу, это может сигнализировать о более серьезных проблемах с почками. В других случаях проблема не имеет известной причины и может быть легко устранена. В любом случае, вам следует немедленно обратиться за лечением для вашего ребенка.

    Детский педиатр или нефролог, специалист по заболеваниям почек, будет лечить протеинурию с неизвестной причиной, называемую идиопатической протеинурией, путем остановки выделения белка с мочой. Врач также порекомендует лечение, чтобы облегчить симптомы вашего ребенка, такие как отек и усталость. Обычно врач назначает такие лекарства, как преднизолон, который является кортикостероидом. Если преднизон не помогает или вызывает нежелательные побочные эффекты, врач может порекомендовать другие препараты, такие как циклофосфамид, хлорамбуцил или циклоспорин.У пациентов с заболеванием почек, которые не реагируют на эти препараты, можно использовать другой тип лекарств, называемый ингибитором АПФ.

    Когда лечащий врач вашего ребенка определит причину протеинурии, вашему ребенку будет назначено лечение для устранения проблемы, вызывающей просачивание белка в мочу, и предотвращения повреждения почек. Например, детям с диабетом необходимо контролировать уровень сахара в крови. Врач вашего ребенка может предложить внести некоторые изменения в диету вашего ребенка, чтобы ограничить потребление им соли и белка.

    Если протеинурия вызывает повреждение почек вашего ребенка, специалист по заболеваниям почек оценит повреждение и решит проблему, пытаясь максимально сохранить нормальную функцию почек вашего ребенка. Протеинурия является основной причиной хронического заболевания почек, поэтому важно держать это состояние под контролем.

    .
Leave a Reply

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.

2022 © Все права защищены.