Лекарство от гепатита: Пациенты с гепатитом С попросили Путина выделить деньги на их лечение

Содержание

Лекарства для лечения Хронического вирусного гепатита c

A.NATTERMANN and Cie., GmbH [А.Наттерманн энд Сие. ГмбХ]

Abbott [Эбботт]

AbbVie [ЭббВи]

Gedeon Richter [Гедеон Рихтер]

GlaxoSmithKline [ГлаксоСмитКляйн]

Laboratoires Rosa-Phytopharma [Лабаратория Роза-Фитофарма]

Madaus [Мадаус]

Merckle [Меркле]

Orion Corporation [Орион Корпарейшен]

Orion Pharma [Орион Фарма]

Pharmproject [Фармпроект]

Ursapharm Arzneimittel [Урсафарм Арцнаймиттель]

Армавирская биофабрика

Бизнес Консалтинг Инвестмент

Бионокс

Биосинтез

Вектор-Медика

Верофарм

Вертекс

Вифитех

Восток

Галичфарм

Европа-Биофарм ЗАО НПО

Здоровье — фармацевтическая компания

Канонфарма продакшн ЗАО

Озон ООО

Партнер

Полисан

Полисорб

Российский кардиологический НПК ФГУ Росмедтехнологий — Экспериментальное производство медико-биологических препаратов

Санофи-Авентис/Sanofi-Aventis

Северная Звезда ЗАО

Силма

Сэлвим ООО

ФАРМА ВАМ

Фармсинтез

Фармстандарт-Лексредства

Фармстандарт-Уфавита

Фармцентр ВИЛАР

Ферон

Эвалар

Лекарство от гепатита симепревир оказалось эффективно против коронавируса — Наука

ТАСС, 27 мая.  Медики из Гонконга выяснили, что симепревир – недавно созданное лекарство от гепатита С – может подавлять размножение коронавируса нового типа (SARS-CoV-2) в клетках человека и усиливать действие другого противовирусного препарата – ремдесивира. Результаты их опытов опубликованы в электронной научной библиотеке bioRxiv.

«Наши опыты показывают, что симепревир и ремдесивир усиливают действие друг друга, благодаря чему дозы и того, и другого препарата при лечении коронавирусной инфекции можно уменьшать. Это очень важно еще и потому, что вирус может выработать устойчивость к одному из этих веществ, если их начнут широко применяться на практике», – пишут исследователи.

С самого начала вспышки коронавируса нового типа ученые и медики исследуют, как на него действуют уже существующие противовирусные препараты и другие лекарства. За последние три месяца биологи выделили десятки препаратов и антител, которые гипотетически могут подавлять размножение вируса, а также проверили в действии несколько лекарств, в том числе гидроксихлорохин, лекарство от малярии, средство от ВИЧ нельфинавир или другой антималярийный препарат, мефлохин.

Пока исследователи выделили лишь несколько препаратов, которые могут действовать на коронавирус: например, фавипиравир, ремдесивир и рекомбинантный белок интерферон-2-альфа. Они были созданы для борьбы с вирусом гриппа, гепатитом C и лихорадкой Эбола, однако уже зарекомендовали себя в различных экспериментах против COVID-19.

Изучая действие разных лекарств на культуры зараженных клеток, гонконгские молекулярные биологи и медики под руководством доцента Китайского университета Гонконга Майкла Чана открыли еще один подобный препарат. Он может быть эффективнее всех существующих средств для борьбы с SARS-CoV-2.

Новое лекарство от COVID-19

В ходе исследования ученые обрабатывали клетки разными дозами 11 популярных противовирусных препаратов, уже одобренных в США и других странах для лечения различных инфекций. Они отслеживали, как внутри пробирок менялась концентрация вирусных частиц и вирусной РНК, а также количество жизнеспособных клеток.

Эксперименты показали, что подавлять размножение вируса и при этом не убивать большую часть клеток смогло только одно из этих веществ – симепревир. Этот препарат создали в начале XXI века для борьбы с вирусом гепатита С. Молекулы симепревира блокируют работу фермента, который отвечает за сборку новых вирусных частиц.

Опыты Чана и его коллег показали, что при низких концентрациях это вещество было так же эффективно, как и ремдесивир. А в больших дозировках оно было еще действеннее. Дальнейшие эксперименты показали, что смесь из ремдесивира и симепревира действовала на вирус еще эффективнее, при этом не становясь более опасной для здоровых клеток.

Ученые пока не знают, как именно симепревир подавляет размножение SARS-CoV-2. Как показали их наблюдения за активностью генов вируса в зараженных клетках, препарат почти не мешает работе белков, которые участвуют в формировании новых копий коронавируса. Тем не менее, симепревир каким-то образом блокирует этот процесс и не дает вирусу размножаться.

Как предполагают ученые, это лекарство может напрямую взаимодействовать с белками, из которых состоят вирусные частицы, а также блокировать работу различных клеточных ферментов, которые SARS-CoV-2 использует для размножения. Чан и его коллеги надеются, что их последующие эксперименты помогут узнать механизм работы симепревира и создать аналоги этого препарата, менее токсичные для клеток печени.

Следует добавить, что статью ученых не рецензировали независимые эксперты и редакторы научных журналов, как это обычно бывает в подобных случаях. Поэтому к выводам из нее и аналогичных статей следует относиться осторожно.

Описание СОФОСБУВИР показания, дозировки, противопоказания активного вещества SOFOSBUVIR

Нежелательные реакции, идентифицированные при применении софосбувира в комбинации с рибавирином

Со стороны системы кроветворения: очень часто — снижение концентрации гемоглобина; часто — анемия.

Нарушения психики: очень часто — бессонница; часто — депрессия.

Со стороны нервной системы: очень часто — головная боль; часто — нарушение внимания.

Со стороны дыхательной системы: часто — назоварингит, одышка, одышка при физической нагрузке, кашель.

Со стороны пищеварительной системы: очень часто — тошнота, повышение концентрации билирубина в крови; часто — дискомфорт в животе, запор, диспепсия.

Со стороны кожи и подкожно-жировой клетчатки: часто — алопеция, сухость кожи, зуд.

Со стороны костно-мышечной системы: часто — артралгия, боль в спине, мышечные спазмы, миалгия.

Прочие: очень часто — раздражительность, утомляемость; часто — лихорадка, астения.

Нежелательные реакции, идентифицированные при применении софосбувира в комбинации с пэгинтерфероном альфа/рибавирином

Со стороны системы кроветворения: очень часто — анемия, нейтропения, снижение числа лимфоцитов, снижение числа тромбоцитов.

Нарушения психики: очень часто — бессонница; часто — депрессия, тревожность, возбуждение.

Со стороны нервной системы: очень часто — головокружение, головная боль; часто — мигрень, ухудшение памяти, нарушение внимания.

Со стороны органа зрения: часто — неясное зрение.

Со стороны дыхательной системы: очень часто — одышка, кашель; часто — одышка при физической нагрузке.

Со стороны пищеварительной системы: очень часто — снижение аппетита, диарея, тошнота, рвота, повышение концентрации билирубина в крови; часто — запор, сухость во рту, гастроэзофагеальный рефлюкс.

Со стороны кожи и подкожно-жировой клетчатки: очень часто — сыпь, зуд; часто — алопеция, сухость кожи.

Со стороны костно-мышечной системы: очень часто — артралгия, миалгия; часто — мышечные спазмы.

Прочие: очень часто — озноб, утомляемость, гриппоподобное состояние, раздражительность, боль, лихорадка; часто — снижение массы тела, боль в спине, боль в груди, астения.

Новые препараты для лечения гепатита С

Традиционным способом лечения hepatitis C в течении более, чем двадцати лет, считался “золотой стандарт” терапии:

  1. Внутривенные инъекции интерферона.

  2. Таблетки рибавирина.

Такой метод отличается низкой эффективностью (от 40 до 50% излечения пациентов). Серьезным препятствием для проведения данного лечения является возникновение тяжелейших побочных реакций, в числе которых:

  • сердечно-сосудистые проблемы;

  • негативное влияние на психику, вплоть до возникновения стрессов.

Кроме того, длительная продолжительность курса (от года до полутора лет), обязательное нахождение в стационаре в это время, вынуждает заболевшего бросать работу, терять социальные связи.

Появление на рынке фармацевтики новых препаратов для лечения гепатита С

Наука постоянно движется вперед, синтезируются новые лекарства. Так, в 2013 году произошла настоящая революция в области борьбы с ВГС. Американские ученые из корпорации Gilead Sciences разработали противовирусные препараты прямого действия на вирус (ПППД), эффективность которых составляет 97-99%. То есть практически все пациенты выздоравливают за три — шесть месяцев. Длительность курса приема таблеток зависит от того, есть ли у больного сопутствующие осложнения, например, цирроз печени.

Характеристика инновационных средств

Действуют лекарства нового поколения посредством блокирования специальных ферментов возбудителя, которые требуются для репликации вирусной РНК (рибонуклеиновой кислоты). То есть с использованием особых веществ прекращается процесс размножения патогена с дальнейшей его элиминацией из организма.

Всего через две недели наблюдается неуклонное снижение вирусной нагрузки, после завершения курса терапии фиксируется УВО — устойчивый вирусологический ответ.

Востребованные ПППД состоят из таких веществ — ингибиторов:

  1. Sofosbuvir.

  2. Velpatasvir.

  3. Daclatasvir.

  4. Ledipasvir.

Даклатасвир, Велпатасвир, Софосбувир и Ледипасвир купить выгодно в качестве дженерика. Это лекарства — аналоги дорогостоящих оригинальных препаратов американского производства. Индийские медикаменты от гепатита С обладают всеми свойствами патентованных средств, но стоят в несколько десятков раз дешевле. Компонент Sofosbuvir входит во все препараты для лечения ВГС, комбинируется с другими ингредиентами в зависимости от генотипа, который определили в результате анализов. Средство ингибирует NS5B полимеразу, в комплексе с Велпатасвиром (блокировщик фермента NS5A) эффективно уничтожает вирус hepatitis C всех известных разновидностей — от 1 до 6.

Два вещества Sofosbuvir и Velpatasvir входят в состав популярных индийских дженериков: Велакаст, Совихет, Велпанат. Цена Velakast, других препаратов из Индии приемлема для большинства пациентов, если заказать в интернет — аптеке India-help.

Сочетание противовирусных веществ выбирается лечащим врачом на основе анализа собранных тестов и проведенного полного обследования пациента.

Учитываются такие факторы:

  • генотип гепатита С;

  • степень инфекционной нагрузки;

  • в каком состоянии находится печень, обнаружены ли фиброз или цирроз;

  • есть ли другие осложнения или патологии.

Какими свойствами и преимуществами обладают новые препараты для лечения ВГС

  • высокая эффективность лекарств, излечивается почти 100% заболевших;

  • если приобретать в интернете дженерики, курс терапии доступен для пациентов с низким и средним доходом;

  • лечение продолжается недолго: от 12 до 24 недель;

  • принимать таблетки просто: график несложный — одна штука в сутки. Только важным условием является прием в одно и то ж время, чтобы действующие вещества распределялись равномерно;

  • лекарства можно пить дома, не нужно ложиться в больницу;

  • редкие побочные эффекты быстро проходят после привыкания организма к новому препарату;

  • количество противопоказаний невелико. Не назначается для беременных женщин, кормящих грудью младенцев матерей, несовершеннолетних пациентов. В случае возникновения аллергической реакции, лекарство заменяется лечащим врачом.


Было интересно? Хотите быть в курсе самых интересных событий в Ростове-на-Дону? Подписывайтесь на наши страницы в ВКонтакте и канал в ЯндексДзен и Telegram.

Вы можете сообщить нам свои новости или прислать фотографии и видео событий, очевидцами которых стали, на электронную почту.



Более миллиона пациентов получили лечение высокоэффективными препаратами от от гепатита С

\n

За два года с момента их появления на рынке лечение новыми революционными препаратами против гепатита С получили более миллиона человек в странах с низким и средним уровнем доходов.

\n

\nКогда в 2013 г. были лицензированы первые антивирусные препараты прямого действия (АППД), высказывалось множество опасений в связи с тем, что ввиду их высокой стоимости лечение будет недоступным для более 80 миллионов человек, страдающих от хронического гепатита С во всем мире.

\n

\nНовые препараты отличаются высокой эффективностью (более 95%), имеют меньше побочных эффектов по сравнению с ранее известными препаратами и обеспечивают полное излечение пациента за три месяца. Однако, по цене, которая, как прогнозировалось на момент вывода препаратов на рынок, должна была составить порядка 85 000 долл. США, они были недоступны даже для пациентов из стран с высоким уровнем доходов.

\n

Опыт стран подтверждает выполнимость задачи по обеспечению населения лекарствами от гепатита С

\n

\nБлагодаря ряду механизмов обеспечения доступа к лечению, которые реализуются при поддержке Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и других партнеров, в ряде стран с низким и средним уровнем доходов, включая Аргентину, Бразилию, Египет, Грузию, Индонезию, Марокко, Нигерию, Пакистан, Филиппины, Румынию, Руанду, Таиланд и Украину, отмечаются первые успехи в выполнении задачи по обеспечению нуждающихся в лечении пациентов необходимыми лекарственными средствами. К числу таких механизмов относятся создание условий для конкуренции со стороны производителей препаратов-генериков посредством лицензионных соглашений, местное производство и переговоры о ценах.

\n

\n«Расширение доступа к спасающим жизнь препаратам от гепатита С является одним из приоритетных вопросов для ВОЗ, – говорит д-р Gottfried Hirnschall, директор Департамента ВОЗ по ВИЧ и Глобальной программы по борьбе с гепатитом. – Мы с удовлетворением отмечаем первые успехи, достигнутые некоторыми странами. Однако, для большинства людей эти препараты по-прежнему остаются недоступными».

\n

\nВ опубликованном сегодня «Глобальном докладе о доступе к лечению от гепатита С: курс на преодоление барьеров», подготовленном ВОЗ, представлены примеры того, каким образом политическая воля, активная работа гражданского общества и переговоры о ценах могут способствовать решению проблемы гепатита С, заболевания, от которого каждый год умирает почти 700 000 человек и которое ложится тяжелым бременем на системы здравоохранения, оттягивая на себя кадровые и финансовые ресурсы.

\n

\n«В некоторых странах использование лицензионных соглашений и организация местного производства позволили добиться существенных результатов для повышения доступности лечения, – отмечает д-р Suzanne Hill, директор Департамента ВОЗ по основным лекарственным средствам и медицинской продукции. – Например, стоимость трехмесячного курса лечения в Египте упала с 900 долл. США в 2014 г. до менее 200 долл. США в 2016 году».

\n

\n«Однако, сохраняется колоссальный разрыв между ценами на препараты в разных странах. Некоторые страны со средним уровнем доходов и наибольшим бременем гепатита С по-прежнему вынуждены покупать эти препараты по очень высоким ценам. ВОЗ работает над новыми моделями ценообразования на эти и другие дорогостоящие лекарственные средства в целях расширения доступа ко всем основным лекарственными средствам во всех странах», – говорит д-р Suzanne Hill.

\n

80% нуждающихся в лечении людей по-прежнему сталкиваются с трудностями в доступе к лекарствам

\n

\nВ группе стран со средним уровнем доходов отмечается очень широкий разброс цен на трехмесячный курс софосбувира и даклатасвира, от 9400 долл. США в Бразилии до 79 900 долл. США в Румынии.

\n

\nВысокая стоимость привела к нормированию выдачи препаратов в ряде стран, включая страны Европейского союза, где ценовые соглашения не позволили обеспечить возможность лечения всех больных.

\n

\n«Опубликованный сегодня доклад о доступности, ценах, патентах и регистрации препаратов для лечения гепатита С поможет добиться прозрачности на рынке, которой так не хватает и которая может помочь странам в их работе по обеспечению доступа к АППД, – говорит д-р Gottfried Hirnschall. – Мы надеемся, что страны обновят свои руководства по лечению гепатита, проведут работу по устранению барьеров для доступа к лечению и в короткие сроки сделают эти препараты доступными для всех людей, которые в них нуждаются».

\n

\nВ мае 2016 г. на сессии Всемирной ассамблеи здравоохранения 194 страны приняли первую в истории Глобальную стратегию по борьбе с вирусным гепатитом, в которой была поставлена цель по ликвидации гепатита как угрозы здоровью населения к 2030 году.\nВ стратегию также включена целевая задача по обеспечению лечения 80% больных к 2030 году.\n

\n

\nВ 2014 и 2016 гг. ВОЗ выпустила руководства, в которых было рекомендовано использование АППД, и включила АППД в свой Перечень основных лекарственных средств, целью составления которого является удовлетворение приоритетных потребностей населения в сфере здравоохранения, обеспечение наличия необходимых основных лекарственных средств в любой момент времени, в нужных количествах и по цене, которую могут себе позволить страны и местные сообщества.

«,»datePublished»:»2016-10-27T00:00:00.0000000+00:00″,»image»:»https://www.who.int/images/default-source/infographics/hepatitis-c-infographic-jpg.jpg?sfvrsn=5679037d_0″,»publisher»:{«@type»:»Organization»,»name»:»World Health Organization: WHO»,»logo»:{«@type»:»ImageObject»,»url»:»https://www.who.int/Images/SchemaOrg/schemaOrgLogo.jpg»,»width»:250,»height»:60}},»dateModified»:»2016-10-27T00:00:00.0000000+00:00″,»mainEntityOfPage»:»https://www.who.int/ru/news/item/27-10-2016-over-1-million-treated-with-highly-effective-hepatitis-c-medicines»,»@context»:»http://schema.org»,»@type»:»NewsArticle»};

CBMS

Гепатит

Прорыв в лечении гепатита

Еще несколько лет назад вирусные гепатиты B и С считались неизлечимыми заболеваниями. Заразившись одним из них, человек мог либо стать носителем вируса на всю жизнь, либо приобрести хроническую форму вирусного гепатита, которая всегда заканчивалась циррозом и смертью. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) представила данные, что вирусом хронического гепатита С в мире заражены от 130 до 150 миллионов человек. Ежегодно от гепатита С умирают от 350 тысяч до 500 тысяч человек

Вирус гепатита С был выявлен сравнительно недавно – в 1991 году,
а уже в 1992 Израиль стал одной из первых стран мира, где детям начали делать прививки от гепатитов А и B.

Но основной проблемой до сих пор является то, что многие люди не знают, что они являются носителями вируса (хотя выявить его можно простым анализом крови!), потому что гепатит С может не проявлять себя годами. У 30% больных, которые вовремя не приступили к лечению, могут возникнуть хронические заболевания, которые в течение короткого времени приводят к циррозу и, в результате, к необходимости в пересадке печени, а у 1-4 % больных циррозом развивается рак печени. Особенно подвержены данному заболеванию люди, относящиеся к так называемой группе риска: наркоманы, больные на гемодиализе (аппарат «искусственная почка»), люди, которым были пересажены органы или переливали кровь до 1992 года.

По словам заведующей отделением болезней печени клиники ШИБА профессором Зив Бен-Ари*, гепатит С стал мировой проблемой. Но, высокоэффективные израильские методики лечения гепатита и новейшие лекарства полностью побеждают болезнь! В зависимости от генотипа вируса эффективное лечение новыми препаратами помогает в более чем 90%!**

Современные методы лечения гепатита С

Современные медикаментозные методы лечения гепатита С, при условии ранней диагностики гепатита С первого генотипа со 2-й или 3-й степенью фиброза печени, дают очень хорошие результаты: до 80% полного излечения!

До недавнего времени единственным лечением этого заболевания были уколы интерферона и назначение препарата рибавирина, которые укрепляли и усиливали иммунную систему пациента. Затем – препараты Incivo и Victrelis (группы «ингибиторы протеаз»), напрямую подавляющие жизнеспособность вируса и тормозящие его размножение. Но, данные медикаменты достаточно узконаправленные – они подходят только пациентам с первым генотипом вируса, которые ранее не проходили лечение этими препаратами.

40 новых лекарств от гепатита С – это не миф,
а настоящая сенсация!

Incivo и Victrelis – первые лекарства от Гепатита С, которые начали разрабатывать только в 2004 году – настоящее медицинское чудо. Только в 1989-м году впервые обнаружили вирус, и уже через четверть века мы можем говорить о полной победе над этой болезнью. В истории медицины нет такого другого примера, – говорит профессор Зив Бен-Ари. – Этот фармакологический прорыв в лечении гепатита можно сравнить с изобретением пенициллина.
По значимости эти медицинские открытия равноценны».**

Сейчас в мире на различных стадиях разработки находятся 40! новых лекарств от гепатита С, которые будут использоваться самостоятельно, без интерферона и рибавирина, как по отдельности, так и в различных комбинациях друг с другом. Три из них проходят последние этапы клинических испытаний и в ближайшее время будут доступны для всех. Новые лекарства – еще более эффективные и с меньшим количеством побочных эффектов. Они подходят больным всех генотипов – от первого до шестого, и более чем в 90% случаев приводят к полному излечению! Это дает надежду на то, что в достаточно скором времени мир полностью избавится от гепатита С – болезни, которая еще недавно считалась неизлечимой! 

Итак, подведем итог: Помните! Выявить заболевание может простой анализ крови! Не стоит ждать, ибо промедление для больных гепатитом С может закончится плачевно – цирроз печени-рак-смерть… Так что – вовремя сделанные проверки и начатое лечение – это гарантия полного выздоровления!

 

*Профессор Зив Бен-Ари, заведующая отделением болезней печени в медицинском центре «Шиба» в Тель ха-Шомер, специалист по лечению заболеваний печени и пересадке печени, член Израильской и Американской ассоциаций гепатологов, председатель израильской организации по лечению цирроза печени, профессор медицинского факультета Тель-Авивского университета.

**По материалам интервью Маши Хинич с Зив Бен-Ари с портала salat. zahav.ru.

Для дополнительной информации и личной консультации обращайтесь:
Israel, CBMS Group — Центральное Бюро Медицинских Услуг

 

Препарат для лечения гепатита Софосбуфир+Даклатасфир

Как действует Софосбувир

Софосбувир действует целенаправленно, точечно ударяя по вирусу гепатита С. Действующее вещество лекарства подавляет вирус, не давая ему размножаться. Без копирования собственного РНК вирус гепатита С не способен к репликации (размножению).

 

Способ применения

Препарат принимается один раз в сутки в дозировке 400 мг (1 таблетка). Таблетку лучше не разжевывать, так как она имеет насыщенный горький вкус. Лекарство лучше принимать во время еды, запивая обильным количеством воды. Принимайте препарат ежедневно, в одно и то же время.

С какими препаратами нельзя принимать Софосбувир

Не рекомендуется совместное употребление Софосбувира с Телапревиром и Боцепревиром.

 

Кому нельзя принимать Софосбувир

Софосбувир не разрешается принимать детям до 18 лет, беременным женщинам, при грудном вскармливании, при индивидуальной непереносимости. Для вышеуказанных категорий пациентов исследования не проводились, поэтому лечение пока не утверждено. Люди старше 65 лет могут принимать препарат без коррекции дозы.

 

Побочные эффекты

В целом, препарат переносится хорошо и не имеет ярко выраженных побочных явлений. Самые распространенные из них – это усталость, головная боль и тошнота. Выраженность побочных эффектов возрастает при комбинированной терапии с интерфероном и другими противовирусными препаратами.

Форма выпуска

Овальные таблетки в дозировке 400 мг. По 28 таблеток в упаковке.

 

Условия хранения

Держите препарат в сухом, защищенном от солнца и недоступном для детей месте. Дата изготовления и срок хранения указаны на упаковке. Не принимайте препарат по истечении срока годности, указанного на упаковке. Хранить препарат следует при температуре от 15 до 30° С.

 

Даклатасвир

 

Natdac – это новое противовирусное средство индийского производителя Natco Pharma, лицензионный дженерик препарата Даклинза. Действующее вещество – даклатасвир. Тормозя размножение вируса на клеточном уровне, даклатасвир прекращает распространение вируса и позволяет добиться устойчивого вирусологического ответа человеческого организма. Он подавляет размножение вируса гепатита С, воздействуя на белковую молекулу NS5A. Даклатасвир одобрен Европейской комиссией по лекарственным препаратам и в продажу на мировой рынок поступает под торговым названием Daklinza™.

 

Daklatasvir тормозит размножение вируса гепатита и снижает вирусную нагрузку. Чтобы эффект был устойчивым и максимальным, применяют комбинации антивирусных средств. Даклатасвир и Софосбувир принимают в виде таблеток внутрь. Схема лечения проста и результативна, не предполагает использования интерферона, имеющего много побочных эффектов.
Клинические исследования демонстрируют стропроцентный лечебный результат даже у больных с печеночными патологиями и с вирусным генотипом 3.

Противопоказания к использованию
Средство Daclatasvir Natdac не применяют в следующих случаях:
— при наличии повышенной чувствительности к лактозе и другим компонентам препарата;
— при беременности и грудном вскармливании младенцев (грудное вскармливание прекращают при лечении) для исключения беременности используют надежные средства контрацепции, если лечится женщина или ее партнер; 
— в детском возрасте до 18 лет; 
— в качестве монотерапии.
При циррозе печени, после пересадке печени и других хирургических манипуляциях на этом органе терапия проводится только под контролем врача.

Побочные эффекты
Натдак (Даклатасвир) может вызывать некоторые негативные реакции организма. В сочетании с софосбувиром отмечены такие нежелательные эффекты:
— более чем у 0,1% пациентов – тошнота, слабость, головные боли;
— менее чем у 0, 1 % больных – потеря аппетита, головокружение, нарушение сна, желудочные расстройства, сухость кожных покровов, мышечные и суставные боли, анемичные явления, боли в зоне живота, запор, тревожность и повышенная раздражительность.

 

Нежелательное взаимодействие с лекарственными средствами
Индийский препарат Natdac Natco снижает свою терапевтическую эффективность при параллельном использовании его с фенобарбитаомл, рифабутином, дексаетазоном, зверобоем, карбамазепином, рифабутином, окскарбазепином, рифампицином, так как все эти средства выделяют цитохром и гликопротеин.

 

Дозы и способ применения
Таблетку Натдака пьют один раз в день независимо от приема пищи, глотая целиком и запивая водой. Средство не используется в качестве монотерапии, потому купить натдак стоит совместно с другими антивирусниками, например в комплексе с софосбувиром. Курс лечения длится 12-24 недели, срок определяет лечащий врач, учитывая особенности заболевания конкретного пациента.
Хронический гепатит С 1 и 4 генотипа хорошо поддается лечению при трехмесячном курсе. Если пациент уже принимал противовирусную терапию другими препаратами, а также если у него диагностирован цирроз печени, курс длится 24 недели.

 

Форма выпуска
Натдак выпускают в виде оранжевых таблеток круглой формы, содержание действующего вещества составляет 60 мг.

 

Условия хранения
Натдак необходимо хранить вне досягаемости для детей в сухом темном месте при температуре 15-30 градусов тепла по Цельсию. Срок годности указан на упаковке.

 

границ | Традиционная китайская медицина, Маото, подавляет выработку вируса гепатита В

Введение

Гепатит В — это инфекционное заболевание, вызываемое вирусом гепатита В (ВГВ). Несмотря на разработку эффективной вакцины, все еще существует более 250 миллионов носителей ВГВ, и в 2015 г. произошло 887 000 смертей из-за острых и хронических заболеваний, связанных с ВГВ, включая цирроз печени (ЦП) и гепатоцеллюлярную карциному (ГЦК) (Dienstag, 2008; Schweitzer et al., 2015; ВОЗ, 2015; Honda and Rahman, 2019).Прогрессирование и тяжесть заболевания в основном зависят от множества вирусных факторов и факторов хозяина (Rahman et al., 2016; Al-Sadeq et al., 2019; Jia et al., 2019; Hossain et al., 2020). Пегилированный интерферон (ПЕГ-ИФН) и терапия аналогами нуклеотидов в настоящее время считаются «стандартной терапией» для лечения хронического гепатита В; однако даже в сочетании они не эффективны на 100%, имеют побочные эффекты и являются дорогостоящими (Sonnveld and Janssen, 2010; Bruix et al., 2019). Например, на начальном этапе терапии ПЕГ-ИФН среди пациентов часто встречаются гриппоподобный синдром, головная боль, миалгия, утомляемость и местные реакции в месте инъекции, тогда как на более поздних этапах у пациентов появляются легкие миелосупрессивные симптомы, такие как нейтропения и тромбоцитопения. Сообщалось о нейропсихиатрических симптомах (Van Zonneveld et al., 2005; Sonneveld and Janssen, 2010). Таким образом, все еще ожидается разработка новых безопасных агентов с активностью против HBV.

HBV представляет собой небольшой ДНК-вирус с геномом частично двухцепочечной релаксированной кольцевой ДНК (кДНК) длиной 3,2 т.п.н. (Honda, 2016). Геном HBV кодирует не менее пяти генов: pre-core , HBc , Pol , HBs и HBx (Beck and Nassal, 2007; Patient et al., 2007). Антиген е гепатита В (HBeAg) и поверхностный антиген гепатита В (HBsAg) представляют собой HBV-специфические антигены, полученные из генов pre-core/HBc и HBs соответственно.При инфицировании HBV восстанавливает геном ркДНК и образует ковалентно замкнутую кольцевую ДНК (кзкДНК), которая может действовать как матрица для синтеза вирусных транскриптов, включая прегеномную РНК (пгРНК), в ядре (Summers et al., 1975; Seeger и Mason, 2000; Beck and Nassal, 2007; Li et al. , 2017). pgRNA инкапсулируется в цитоплазме, а обратная транскрипция pgRNA происходит внутри нуклеокапсида с образованием потомства rcDNA (Beck and Nassal, 2007). Впоследствии взаимодействия нуклеокапсида с HB и/или белками-хозяевами запускают оболочку нуклеокапсида с последующим отпочковыванием вирусных частиц (Ning et al., 2011; Куи и др., 2013 г.; Зельцер и Злотник, 2015). Только зрелые нуклеокапсиды, содержащие ркДНК, взаимодействуют с HBs, подвергаясь последующей оболочке (Cui et al., 2013). Накопление двухцепочечной ДНК (дцДНК) в результате удлинения второй цепи во время обратной транскрипции запускает структурное изменение в нуклеокапсиде, что, в свою очередь, сигнализирует об инициации образования оболочки и секреции ВГВ (Perlman et al., 2005; Roseman и др., 2005). Наряду с инфекционными частицами HBV (частицами Дейна) из инфицированных клеток также высвобождается ряд вирусных субвирусных частиц, не содержащих генома (SVP) (Mabit and Schaller, 2000).Все эти этапы инфицирования ВГВ могут стать мишенью для новых анти-ВГВ-лечений.

На протяжении всей истории человечества растения использовались в качестве источника лекарств от болезней человека. Традиционная китайская фитотерапия, также называемая кампо, уже более 2000 лет широко используется для лечения различных типов заболеваний, включая хронический гепатит В, и дает очень мало побочных эффектов (Liu et al., 2001). Здесь мы проверили библиотеку Kampo на анти-HBV-активность и нашли эффективного кандидата с анти-HBV-активностью.

Материалы и методы

Кампос

Библиотека INM Kampo была предоставлена ​​Институтом натуральной медицины Университета Тоямы, Тояма, Япония. Библиотека состояла из 42 экстрактов, приготовленных на основе формулы Кампо. Состав каждой формулы Кампо доступен в базе данных TradMPD (https://dentomed.toyama-wakan.net/index_en) Университета Тояма. Смесь сырых препаратов (в 2 раза больше суточной дозы) кипятили в 500 мл воды очищенной в течение 17 мин с последующим нагреванием в течение 13 мин.Отвар фильтруют и лиофилизируют, получая сухой порошок экстракта. Экстракты растворяли в сверхчистой воде с концентрацией 10 мг/мл и перед использованием хранили при температуре -80°С.

Культура клеток

Клетки HepG2, клеточную линию гепатомы человека, культивировали в модифицированной по Дульбекко базовой среде Игла/Хэма F-12 (DMEM/Ham’s F-12) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки (FBS). Клетки HepAD38.7, полученные из клеток HepG2, поддерживали с помощью DMEM/Ham’s F-12 с добавлением 10% FBS, 5 мкг/мл инсулина и 0.5 мг/мл G418 (Nacalai Tesque, Киото, Япония) с 0,4 мкг/мл тетрациклина (Tet (+)) или без тетрациклина (Tet (-)) (Ladner et al., 1997; Ogura et al., 2014). Свежекультивированные первичные клетки гепатоцитов человека (PXB-клетки, PhenixBio, Япония) культивировали в среде Williams’ Medium E (Gibco) с добавлением 10% FBS, 1% антибиотиков-антимикотиков, 50 мкМ гидрокортизона, 3 мкг/мл инсулина, 5 мкг/мл. мл трансферрина, 10 нг/мл EGF, 5 нг/мл селенита натрия и 2 мМ L-глютамина. Клетки HepG2-NTCP представляют собой клетки HepG2, стабильно экспрессирующие котранспортирующий полипептид таурохолата натрия (NTCP), функциональный рецептор HBV (Yan et al., 2012; Ивамото и др., 2014). Клетки HepG2-NTCP поддерживали в той же среде, что и для PXB-клеток, в дополнение к 0,5 мг/мл G418.

Анализ жизнеспособности клеток

Жизнеспособность клеток HepAD38.7 и HepG2-NTCP определяли с помощью люминесцентного анализа жизнеспособности клеток CellTiter-Glo (Promega, Мэдисон, Висконсин) в соответствии с инструкциями производителя. Клетки высевали с плотностью 1×10 4 клеток/лунку в 96-луночные планшеты и культивировали в течение 9 дней после обработки Кампо. Люминесценцию клеточных лизатов измеряли с помощью устройства для чтения микропланшетов GloMax Discover (Promega).

Получение и заражение вирусом гепатита В

HepAD38.7 — это специализированная клеточная линия, которая продуцирует HBV в отсутствие тетрациклина (Ogura et al., 2014). Клетки культивировали без тетрациклина, и культуральный супернатант собирали каждые 3 дня в течение до 60 дней. Культуральные супернатанты фильтровали через фильтр 0,22 мкм, а вирусы очищали осаждением полиэтиленгликолем (ПЭГ). Вирус использовали для заражения клеток HepG2-NTCP и PXB-клеток в количестве 2 × 10 3 геномных эквивалентов (GEq)/клетку.Заражение проводили в присутствии 2% ДМСО и 4% ПЭГ 8000. Через 24 часа после заражения клетки трижды промывали для удаления оставшихся внеклеточных частиц ВГВ.

Иммуноферментный анализ

Культуральный супернатант собирали через 9 дней после обработки Kampos, и HBeAg и HBsAg в супернатанте оценивали с помощью набора для диагностики HBeAg (Shanghai Rongsheng Biotech Co., Ltd, Китай) и Набор для количественного определения антигена HBs S ELISA, Rapid-II (Beacle, Inc, Киото, Япония), соответственно, в соответствии с инструкциями производителя.Сигнал люминесценции измеряли с использованием устройства для считывания микропланшетов SpectraMax 190 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA).

Оценка ДНК вируса гепатита В

Внеклеточная ДНК HBV и кор-ассоциированная ДНК (core-DNA) были выделены, как описано ранее, с небольшими модификациями (Kleines et al., 2003; Gao and Hu, 2007; Cui et al., 2013). Вкратце, супернатант культуры обрабатывали ДНКазой при 37°C в течение 30 мин, а внеклеточную ДНК экстрагировали с помощью мини-набора QIAmp DNA (Qiagen, Hilden, Germany) в соответствии с протоколом производителя.Для выделения ядерной ДНК клетки лизировали в лизирующем буфере (50 мМ Tris-HCl [pH 8,0], 1 мМ EDTA, 1% Nonidet P-40) (Gao and Hu, 2007). После удаления ядерного осадка центрифугированием супернатант обрабатывали 20 ед/мл ДНКазы (Takara, Shiga, Япония), 5 мкг/мл РНКазы (Roche Diagnostics GmbH, Мангейм, Германия), 5  мМ MgCl 2 и 5 мМ CaCl 2 при 37°C в течение 3 ч для деградации нуклеиновых кислот вне нуклеокапсидов. Затем ДНКазу инактивировали добавлением 10 мМ ЭДТА.После инактивации ДНКазы для разрушения нуклеокапсидов добавляли протеиназу К (конечная концентрация 0,6 мг/мл), додецилсульфат натрия (SDS; 0,5%) и NaCl (50 мМ). Наконец, основную ДНК выделяли с помощью набора QIAmp DNA Mini Kit (Qiagen). Количество внеклеточной ДНК и ядерной ДНК измеряли с помощью ПЦР в реальном времени с использованием Fast SYBR Green Mater Mix (Applied Biosystems) с HBs-специфичными праймерами. Термический профиль был следующим: 40 циклов 95°С в течение 1 с и 60°С в течение 20 с.

Центрифугирование в градиенте плотности хлорида цезия

Оболочечные частицы HBV (частицы Дейна) очищали путем равновесного центрифугирования в градиенте плотности хлорида цезия (CsCl).Вкратце, 500 мкл культурального супернатанта наслаивали на градиенты CsCl и центрифугировали в течение 20 часов в роторе SW40 (Beckman Coulter) при 50 000 об/мин. Полученные фракции (по 150 мкл) собирали с верхней части пробирки. Фракции, содержащие как HBsAg, так и ДНК HBV, рассматривались как фракции частиц Дейна.

Транскриптомный анализ

Тотальную РНК выделяли из обработанных маото и необработанных клеток HepAD38.7 и подвергали анализу секвенирования РНК. Подготовку библиотеки выполняли с использованием набора для подготовки образцов мРНК TruSeq (Illumina, Сан-Диего, Калифорния) в соответствии с инструкциями производителя.Секвенирование проводили на платформе Illumina NovaSeq 6000. Секвенированные чтения были картированы с последовательностями эталонного генома человека (hg38) с использованием HISAT2. Фрагменты на тысячу оснований экзона на миллион картированных фрагментов (FPKM) рассчитывали с использованием Cufflinks. Затем сравнивали экспрессию клеточных мРНК в клетках с обработкой маото и без нее. Дифференциально экспрессируемые гены идентифицировали путем отбора генов, которые были более чем в 20 раз подавлены по сравнению с необработанным контролем.Мы установили пороговое значение FPKM как 0,1 для генов в необработанных клетках. Из этих подавленных генов мы дополнительно выбрали гены, локализованные в цитоплазме. Данные были депонированы со ссылками на инвентарный номер BioProject PRJDB10116 в базе данных DDBJ BioProject.

Анализ экспрессии генов

Экспрессию генов анализировали, как описано ранее (Nishikawa et al., 2018; Nakayama et al., 2019). Вкратце, тотальную РНК экстрагировали из клеток с использованием реагента TRIzol (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в соответствии с инструкциями производителя.Обратную транскрипцию (ОТ) выделенной РНК проводили с использованием набора для синтеза кДНК Verso (Thermo Fisher Scientific). Затем экспрессию генов оценивали с использованием смеси Fast SYBR Green Mater Mix с геноспецифическими праймерами в системе ПЦР в реальном времени QuantStudio 6 Flex (Applied Biosystems). Термический профиль был следующим: 40 циклов 95°С в течение 1 с и 60°С в течение 20 с.

Препарат плазмиды

Для создания плазмид, экспрессирующих РНК с короткой шпилькой (shRNA) против TPM2 (sh2-TPM2 и sh3-TPM2), пару олигонуклеотидов (5′-ACC GGC AGA GAA ATC TGC ATT CTA TTG TTA ATA TTC ATA GCA ATA GAA TGC AGA TTT CTC TGT TTT-3′ и 5′-CGA AAA AAC AGA GAA ATC TGC ATT CTA TTG CTA TGA ATA TTA ACA ATA GAA TGC AGA TTT CTC TGC-3′ для ш2-ТПМ2;5′-ACC GGG TAT TCT GAA TCT GTG AAG GAG TTA ATA TTC ATA GCT TCA CGG ATT CAG AAT ACT TTT-3′ и 5’CGA AAA AAG TAT TCT GAA TCC GTG AAG GAG CTA TGA ATA TTA ACT CCT TCA CAG ATT CAG AAT ACC-3 ‘ для sh3-TPM2) отжигали и вставляли в сайты Bbs I pRSI9-U6-(sh)-UbiC-RFP-2A-Puro (Cellecta).Для создания HBV-экспрессирующей плазмиды (pHBI) 1,5-кратный геном HBV (регистрационный номер X01587 ) (Fujiyama et al., 1983) был клонирован в pBR322 (Takara). Полноразмерный транскрипт TPM2 (инвентарный номер XM_017015092) клонировали в pLV-SIN-CMV-Hyg (Takara).

Получение транзиторного вируса гепатита В

Клетки HepG2 котрансфицировали pHBI вместе с pGL3 (Promega) для нормализации эффективности трансфекции и плазмиды, экспрессирующей кшРНК, с использованием реагента для трансфекции ДНК GenJet In Vitro (Ver.II) (SignaGen Laboratories, Ijamsville, MD) в соответствии с инструкциями производителя. Через 7 дней после трансфекции культуральный супернатант использовали для измерения уровня продукции HBV с помощью ПЦР в реальном времени, а клеточные лизаты использовали для проверки эффективности трансфекции с помощью системы анализа люциферазы (Promega).

Создание клеток со сверхэкспрессией цепи тропомиозина

Лентивирус, содержащий трансген TPM2, был получен с использованием pLV-SIN-CMV-Hyg-TPM2. Клетки HepG2-NTCP инфицировали полученным лентивирусом.Затем клетки обрабатывали гигромицином B (Wako Pure Chemicals, Токио, Япония) в концентрации 1 мг/мл для отбора устойчивых к гигромицину B клонов, которые эктопически экспрессировали TPM2.

Вестерн-блоттинг

Вестерн-блоттинг проводили, как описано ранее (Nakayama et al., 2019; Teng et al., 2019). Вкратце, гомогенат клеток подвергали SDS-PAGE и переносили на поливинилидендифторидные мембраны. Затем мембраны блокировали 5% обезжиренным молоком и инкубировали с антителом к ​​ТРМ2 (GeneTex, Irvine, CA) или тубулином (Wako Pure Chemicals).После трехкратной промывки 0,05% Tween 20 в TBS мембраны инкубировали со вторичными антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена, в течение 1 ч при 37°С. Связанные антитела выявляли с использованием субстрата Clarity Western ECL (BioRad).

Иммунофлуоресцентный анализ

Иммунофлуоресцентный анализ проводили, как описано ранее (Nakayama et al., 2019). Вкратце, клетки фиксировали в течение 30 мин в 4% параформальдегиде и пермеабилизировали путем инкубации в PBS, содержащем 0,25% Тритон Х-100, в течение 10 мин.После пермеабилизации клетки инкубировали с антителом к ​​TPM2 в течение 2 часов, после чего инкубировали с соответствующими вторичными антителами, конъюгированными с Alexa Fluor. Клетки контрастировали 4’,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI). Конфокальный лазерный сканирующий микроскоп Leica TCS SP8 HyVolution (Leica Microsystems) использовали для визуализации иммунофлуоресценции клеток и сбора данных.

Праймеры

Праймеры и зонды, использованные в этом исследовании, были следующими: GAT GAT GGG AT-3′

GAPDH мРНК-F: 5′-AGC GAG ATC CCT CCA AAA TC-3′

GAPDH мРНК-R: 5′-AAA TGA GCC CCA GCC TTC TC-3′

TPM2 мРНК-F: 5′-GTG GGG ACC TAG AGG AGG AG-3′

TPM2 мРНК-R: 5′-CAC AGA CCT CTC GGC AAA CT-3′

Статистический анализ

Статистическую значимость оценивали с использованием двух -критерий Стьюдента t с порогом P < 0.05.

Результаты

Скрининг библиотеки Кампо на подавление продукции вируса гепатита В

Для выявления анти-HBV Кампо библиотека INM Кампо, содержащая 42 экстракта Кампо, была сначала проверена на клеточную токсичность. Клетки HepAD38.7 обрабатывали экстрактами Кампо, и жизнеспособность клеток оценивали через 9 дней после обработки Кампо (рис. 1А). Среди 42 экстрактов 41 привел к> 80% жизнеспособности (рис. 1B). Затем экстракты без цитотоксичности подвергали скринингу на их анти-HBV-активность.Продукцию HBV индуцировали путем удаления тетрациклина, и одновременно клетки обрабатывали экстрактами Кампо или без них для оценки анти-HBV-активности. Четыре из 41 экстракта подавляли внеклеточную продукцию HBV в клетках HepAD38.7 более чем на 25% (рис. 1А, С). Поскольку экстракт маото в наибольшей степени подавлял выработку ВГВ (рис. 1С), мы сосредоточились на экстракте маото для дальнейшего исследования.

Рисунок 1 Скрининг Кампоса на активность против вируса гепатита В (HBV) в HepAD38.7 кл. (A) Схематическое изображение протокола скрининга. Клетки обрабатывали дистиллированной водой (контроль) или 100 мкг/мл экстракта Кампо в культуральной среде без тетрациклина (Tet(-)) для индукции продукции HBV. Клетки инкубировали в течение 9 дней с обновлением среды и Кампо (МС) каждые 3 дня. (B) Жизнеспособность клеток HepAD38.7. Клетки обрабатывали 100 мкг/мл Кампо в течение 9 дней с обновлением среды и Кампо каждые 3 дня. Жизнеспособность определяли через 9 дней обработки с помощью анализа CellTiter-Glo. (C) Внеклеточная ДНК HBV. ДНК HBV в культуральных супернатантах клеток HepAD38.7 измеряли с помощью ПЦР в реальном времени. Ламивудин (1 мкМ, 3TC) использовали в качестве положительного контроля ингибирования продукции HBV. Показаны значения первичного скрининга.

Маото подавляет продукцию внеклеточного вируса гепатита В в клетках HepAD38.7

Чтобы подтвердить эффект маото, мы более подробно оценили его в клетках HepAD38.7 (рис. 2А). Сначала мы подтвердили, что экстракт маото не проявлял цитотоксичности при концентрации 100 мкг/мл (рис. 2В).Затем оценивали влияние маото на продукцию HBV при различных концентрациях ниже 100 мкг/мл (рис. 2C, D). В соответствии с результатами, представленными на рис. 1C, маото ингибировал внеклеточную продукцию HBV в клетках HepAD38.7 дозозависимым образом (рис. 2C). Маото не влиял на выработку HBeAg, которая, как считается, коррелирует с продукцией пгРНК HBV в тестируемом диапазоне концентраций (рис. 2D). Эти результаты подтвердили ингибирующее действие маото на внеклеточную продукцию HBV без какой-либо цитотоксичности и позволяют предположить, что маото ингибирует стадию в процессе продукции HBV после экспрессии пгРНК HBV.

Рисунок 2 Маото в зависимости от дозы ингибирует продукцию вируса гепатита В (HBV) в клетках HepAD38.7. (A) Схематическое изображение протокола лечения маото в клетках HepAD38.7. Клетки обрабатывали дистиллированной водой (контроль) или концентрациями 1,5625, 6,25, 25 и 100 мкг/мл экстракта маото в культуральной среде без тетрациклина (Tet(-)) для индукции вируса гепатита В (продукция HBV). инкубировали в течение 9 дней с обновлением среды и Кампо (MC) каждые 3 дня. (B) Жизнеспособность клеток HepAD38.7. Клетки обрабатывали 100 мкг/мл экстракта маото в течение 9 дней. Жизнеспособность определяли через 9 дней обработки с помощью анализа CellTiter-Glo. (C) Внеклеточная ДНК HBV. ДНК HBV в культуральных супернатантах клеток HepAD38.7 измеряли с помощью ПЦР в реальном времени. (D) Внеклеточный HBeAg. HBeAg в культуральных супернатантах клеток HepAD38.7 определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Ламивудин (1 мкМ, 3TC) использовали в качестве положительного контроля ингибирования продукции HBV.Значения выражены в виде среднего процента + S.E. из трех независимых экспериментов. * Р < 0,05; ** Р < 0,01; **** Р < 0,001; N.S., значения не имеет.

Маото подавляет выработку вируса гепатита В в контексте инфекции

Затем мы изучили значимость ингибирующего действия маото на продукцию HBV в контексте инфекции HBV с использованием клеток HepG2-NTCP и первичных гепатоцитов человека, выделенных из PXB-мышей. (PXB-ячейки).Клетки HepG2-NTCP и PXB-клетки инфицировали HBV в количестве 2×10 3 GEq/клетку и обрабатывали маото в указанных концентрациях (рис. 3A и рис. S1A). Влияние маото на HBV оценивали на 6-й и 9-й день лечения маото в клетках HepG2-NTCP и на 11-й день лечения в клетках PXB (рис. 3А и рис. S1A). Как показано на рисунке 3B и рисунке S1B, маото не проявлял цитотоксичности по отношению к клеткам HepG2-NTCP и клеткам PXB. Затем мы обнаружили, что лечение маото приводило к дозозависимому подавлению продукции внеклеточной ДНК HBV, не влияя на экспрессию HBeAg, аналогично эффектам при HepAD38.7 ячеек (рис. 3C, D и рисунки S1C, D). IC 50 экстракта маото для ингибирования продукции HBV составляла 33,2 ± 5,6 мкг/мл в клетках HepG2-NTCP и 7,5 ± 5,4 мкг/мл в клетках PXB (рис. 3C и рис. S1C). Эти результаты подтвердили актуальность ингибирующего действия маото на HBV в контексте HBV-инфекции.

Рисунок 3 Maoto ингибирует продукцию вируса гепатита В (HBV), препятствуя включению нуклеокапсида HBV в вирусные частицы в клетках HepG2-NTCP. (A) Схематическое изображение протокола лечения маото и инфекции HBV в клетках HepG2-NTCP. Клетки инфицировали ВГВ, а затем обрабатывали дистиллированной водой (контроль) или экстрактом маото в концентрациях 1,5625, 6,25, 25 и 100 мкг/мл в течение 9 дней с обновлением среды и Кампо (МС) каждые 3 дня. (B) Жизнеспособность клеток HepG2-NTCP. Клетки обрабатывали экстрактом маото в концентрациях 1,5625, 6,25, 25 и 100 мкг/мл в течение 9 дней. Жизнеспособность определяли через 9 дней обработки с помощью анализа CellTiter-Glo. (C) Внеклеточная ДНК HBV. ДНК HBV в культуральных супернатантах клеток через 6 и 9 дней обработки маото измеряли с помощью ПЦР в реальном времени. (D) Внеклеточный HBeAg. HBeAg в культуральных супернатантах клеток после 9-дневной обработки маото определяли с помощью ИФА. (E) Core-ДНК. Ядерную ДНК экстрагировали из клеток после 9 дней обработки маото и измеряли с помощью ПЦР в реальном времени. (F) Соотношение Ex/In HBsAg. Внеклеточный и внутриклеточный HBsAg через 9 дней лечения маото определяли с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) и соотношение рассчитывали путем деления внеклеточного HBsAg на внутриклеточный HBsAg. (G) Схематическое изображение протокола очистки частиц Дейна. Фракции, содержащие как ДНК HBV, так и HBsAg, считались оболочечными вирионами (частицами Дейна). (H) Влияние маото на производство частиц Дейн. Количество частиц Дейна определяли путем измерения ДНК HBV с помощью ПЦР в реальном времени. Ламивудин (1 мкМ, 3TC) использовали в качестве положительного контроля ингибирования продукции HBV. Значения выражены в виде среднего процента + S.E. из трех-четырех независимых экспериментов.* Р < 0,05; ** Р < 0,01; **** Р < 0,001; N.S., значения не имеет.

Маото препятствует включению нуклеокапсида вируса гепатита В в вирусные частицы -ячейки NTCP и PXB-ячейки. Хотя внеклеточное производство HBV было подавлено маото (рис. 3C и рис. S1C), мы не обнаружили какого-либо снижения ядерной ДНК при лечении маото (рис. 3E и рис. S1E).Поэтому мы пришли к выводу, что почкование HBV может быть уменьшено при лечении маото. Чтобы оценить эту возможность, мы определили отношение количества внеклеточного HBsAg к количеству внутриклеточного HBsAg (отношение Ex/In HBsAg) во время лечения маото. В отличие от нашей гипотезы, соотношение Ex/In HBsAg в клетках, обработанных маото, было сравнимо с таковым в контрольных клетках (рис. 3F и рис. S1F), что свидетельствует о том, что обработка маото не повлияла на процесс почкования HBV. Затем мы проверили, уменьшилось ли производство оболочечных частиц HBV, содержащих ДНК HBV (частицы Дейна), при лечении маото.Мы очистили частицы Dane с помощью центрифугирования в градиенте плотности CsCl, как показано на рисунке 3G, и обнаружили, что количество частиц Dane HBV уменьшилось при обработке маото (рис. 3H). В совокупности эти результаты позволяют предположить, что маото, вероятно, препятствует процессу включения нуклеокапсида HBV в вирусные частицы.

Совместное использование маото и ламивудина снижает репликацию вируса гепатита В более эффективно, чем индивидуальное использование

Учитывая, что маото подавляет стадию инфицирования ВГВ, отличную от стадии ламивудина (3TC), i.т. е. этап обратной транскрипции, мы пришли к выводу, что комбинированное использование 3TC и маото будет более эффективно подавлять репликацию HBV. Поэтому мы сравнили влияние монотерапии маото, монотерапии 3ТС и комбинированного применения на репликацию ВГВ. По сравнению с монотерапией маото или 3ТС комбинированное применение более эффективно снижало репликацию ВГВ, как и ожидалось (рис. 4). Эти результаты предполагают потенциал маото для повышения эффективности современных препаратов против ВГВ при использовании в комбинации.

Рисунок 4 Совместное использование маото и 3ТС снижает репликацию вируса гепатита В (ВГВ) более эффективно, чем индивидуальное использование.Клетки обрабатывали дистиллированной водой (контроль), 30 мкг/мл только маото, только 250 нМ ламивудина (3ТС) или маото и 3ТС в течение 9 дней с обновлением среды и препаратов каждые 3 дня, как показано на рисунке 3А. ДНК HBV в культуральных супернатантах клеток после 9 дней обработки маото измеряли с помощью ПЦР в реальном времени. Значения выражены в виде среднего процента + S.E. из трех независимых экспериментов. * Р < 0,05; ** Р < 0,01; **** Р < 0,001; N.S., значения не имеет.

Бета-цепь тропомиозина поддерживает продукцию внеклеточного вируса гепатита В

Наконец, мы исследовали молекулярные механизмы того, как маото подавляет продукцию внеклеточного вируса гепатита В. С этой целью мы проанализировали транскриптомы маото-обработанных и необработанных клеток. Анализ РНК-секвенций общей РНК, выделенной из клеток, обработанных маото, показал, что 38 генов были подавлены обработкой маото более чем в 20 раз. Поскольку маото, вероятно, подавлял процесс включения нуклеокапсида HBV в частицы HBV, который происходит в цитоплазме, мы сосредоточились на цитоплазматических белках, которые состояли из 6 генных продуктов с подавленной регуляцией.Среди шестигенов ( TPM2 , TNNT2 , MYO18B , CYP2D7 , Sec1b , GSTT2B , GSTT2B ), Tropomyosin β-цепь ( TPM2 ) было наиболее сильно сокращено Maoto; поэтому мы сосредоточились на этом гене для дальнейшего анализа. С помощью анализа RT-PCR в реальном времени мы подтвердили, что TPM2 дозозависимо подавлялся маото-лечением (рис. 5A). Затем мы исследовали, снижает ли снижение экспрессии TPM2 выработку HBV, как это было обнаружено при лечении маото.Мы трансфицировали плазмиду, экспрессирующую HBV, pHBI и плазмиду, экспрессирующую sh-TPM2, и оценили продукцию HBV (рис. 5B). Снижение экспрессии TPM2 с помощью sh-TPM2 было подтверждено измерением количества мРНК TPM2 (рис. 5C), а также иммунофлуоресцентным анализом (рис. S2). В этих условиях нокдаун TPM2 подавлял продукцию HBV в клетках, трансфицированных pHBI (рис. 5D). Кроме того, экстракт маото не снижал продукцию HBV в клетках с нокдауном sh-TPM2 (рис. 5E), что свидетельствует о том, что маото оказывает ингибирующее действие посредством подавления экспрессии TPM2.Чтобы подтвердить эти результаты, мы оценили влияние сверхэкспрессии TPM2 на внеклеточную продукцию HBV. В соответствии с результатами нокдауна TPM2 сверхэкспрессия TPM2 увеличивала продукцию HBV (рис. 6 и рис. S2). Эти результаты показывают, что маото подавляет продукцию HBV за счет снижения экспрессии TPM2.

Рисунок 5 Нокдаун β-цепи тропомиозина (TPM2) снижает продукцию вируса гепатита В (HBV). (A) мРНК TPM2 в клетках, обработанных маото. Клетки HepG2-NTCP обрабатывали дистиллированной водой (контроль) или концентрациями 1.5625, 6,25, 25 и 100 мкг/мл экстракта маото в течение 9 дней. Количество мРНК TPM2 измеряли с помощью RT-PCR в реальном времени. (B) Схематическое изображение протокола лечения маото и трансфекции плазмиды, экспрессирующей HBV, вместе с плазмидой, экспрессирующей sh-TPM2, в клетки HepG2. Остальные плазмиды промывали через 6 ч после трансфекции и обновляли среду (MC). Среду дополнительно обновляли через 3 дня после трансфекции (МС). (C) мРНК TPM2 в клетках, экспрессирующих sh-TPM2.Нокдаун TPM2 был подтвержден через 7 дней после трансфекции с помощью RT-PCR в реальном времени. (D) Влияние нокдауна TPM2 на продукцию HBV. ДНК HBV в культуральных супернатантах клеток измеряли с помощью ПЦР в реальном времени и нормализовали с эффективностью трансфекции, основанной на люциферазной активности клеток. Ламивудин (1 мкМ, 3TC) использовали в качестве положительного контроля ингибирования продукции HBV. (E) Влияние экстракта маото на продукцию HBV в клетках, экспрессирующих sh-TPM2. Значения выражены в виде среднего процента + S.E. из трех независимых экспериментов. * Р < 0,05; ** Р < 0,01; **** Р < 0,001; N.S., значения не имеет.

Рисунок 6 Сверхэкспрессия β-цепи тропомиозина (TPM2) увеличивает продукцию HBV. (A) Экспрессия TPM2 в клетках HepG2-NTCP, экспрессирующих TPM2. Сверхэкспрессия TPM2 в экспрессирующих TPM2 клетках HepG2-NTCP была подтверждена вестерн-блоттингом. Тубулин использовали в качестве внутреннего контроля. (B) Внеклеточная ДНК HBV. Клетки HepG2-NTCP, экспрессирующие TPM2, инфицировали HBV и затем культивировали в течение 9 дней с обновлением среды каждые 3 дня.ДНК HBV в культуральных супернатантах клеток измеряли с помощью ПЦР в реальном времени. Значения выражены в виде среднего процента + S.E. из трех независимых экспериментов. * Р < 0,05.

Обсуждение

Мы провели скрининг библиотеки экстрактов Кампо на активность против ВГВ в клетках HepAD38.7 и обнаружили, что экстракт маото обладает активностью против ВГВ (рис. 1 и 2). Маото (ma-huang-tang по-китайски), который был разработан в древнем Китае, используется для облегчения симптомов гриппа, таких как головная боль, озноб, лихорадка, артралгия и кашель, и назначается в качестве альтернативы ингибиторам нейраминидазы (препараты, обычно используемые вируса гриппа) более 40 лет в Японии (Arita et al., 2016; Йошино и др., 2019). Его также можно применять при ревматоидном артрите, бронхиальной астме, заложенности носа у младенцев и затруднениях при сосании молока у детей (Arita et al., 2016; Yoshino et al., 2019). Маото представляет собой многокомпонентный состав, первоначально извлеченный из четырех растительных продуктов, т. е. травы эфедры (32,3%), косточек абрикоса (32,3%), коры корицы (25,8%) и корня солодки (9,6%) (Yoshino et al., 2019). . Это одно из тщательно изученных растительных лекарственных средств, которое было включено в национальную систему медицинского страхования Японии.Кроме того, он разработан в соответствии с надлежащей производственной практикой (GMP), предусмотренной японским законодательством и рекомендациями GMP, для обеспечения воспроизводимости и стандартизации биологической эффективности, а также для строгих научных исследований (Кубо и Нисимура, 2007; Ториуми и др., 2012). ; Ниши и др., 2017). Сообщалось, что введение маото в дозе 180 мг/кг/день (что эквивалентно ~1200-1350 мкг/мл/день) детям в возрасте от 5 до 10 лет потенциально сокращало продолжительность лихорадки, вызванной вирусом гриппа А, без любые побочные эффекты, связанные с приемом лекарств (Toriumi et al., 2012). У здоровых взрослых в возрасте от 20 до 45 лет маото применяли в концентрации 7,5 г/сутки (что эквивалентно примерно 1500 мкг/мл/сутки) (Kitagawa et al., 2019). В нашем исследовании мы использовали максимальную концентрацию маото 100 мкг/мл, и это гораздо более низкая концентрация, чем безопасные дозы, основанные на этих отчетах. Более того, стоимость препарата маото составляет 1,4 доллара США на человека за курс лечения, что намного меньше стоимости альтернативных методов лечения (Arita et al., 2016). Вместе с нашими выводами эти факты указывают на то, что маото будет безопасным и дешевым вариантом для агента с активностью против HBV, хотя необходима дальнейшая оценка in vivo .

В настоящее время из-за присутствия в маото больших и разнообразных соединений неясно, какие соединения маото влияют на репликацию HBV. Комплексный фармакологический профиль показал, что в общей сложности в экстракте маото и в плазме крыс после лечения маото было обнаружено 352 соединения, определяемых химическим составом (CCD), и 113 CCD (Nishi et al., 2017). Среди 113 ПЗС в плазме крови крыс только 19 присутствовали в экстракте маото, в то время как другие 94 ПЗС, как предполагалось, образовались либо в результате метаболизма маото, либо в результате воздействия эндогенных веществ, вызванных воздействием маото (Nishi et al., 2017). Они также предположили, что комбинация составляющих трав, по-видимому, необходима для оказания эффекта маото, потому что ни одна из трав не может показать эффект (Nishi et al., 2017). Мы также проверили все отдельные травяные составляющие маото; тем не менее, мы не обнаружили ни одного отдельного растения, которое бы подавляло репликацию ВГВ, сравнимое с маото (данные не показаны), что позволяет предположить, что комбинация экстрактов трав необходима для оказания ингибирующего действия на репликацию ВГВ.

В этом исследовании мы определили этап жизненного цикла HBV, на который нацелен maoto, — включение нуклеокапсида HBV в частицы HBV с использованием клеток HepG2-NTCP и PXB-клеток (рис. 3 и рис. S1).На сегодняшний день большинство препаратов против ВГВ нацелены на кзкДНК, вирусные транскрипты, сборку нуклеокапсида, обратную транскрипцию и секрецию белков оболочки вируса (Durantel and Zoulim, 2016). Сообщается, что Маото регулирует pH эндосомы с помощью АТФазы H + вакуолярного типа (V-АТФазы), ингибируя снятие оболочки вирусов гриппа во время проникновения (Masui et al., 2017). Однако в нашем исследовании мы использовали клетки HepAD38.7, где мы могли оценить процессы HBV только после синтеза pgRNA, и добавили maoto после инфицирования HBV в клетках HepG2-NTCP и PXB-клетках, тем самым исключив возможность ингибирования проникновения HBV.В целом, маото кажется уникальным кандидатом, который воздействует на процесс, отличный от тех, на которые нацелены существующие лекарства, и может усиливать анти-ВГВ-активность современных лекарств при использовании в комбинации, как показано на рисунке 4. нуклеокапсидная оболочка ограничена. Несколько исследований показали, что события фосфорилирования и дефосфорилирования HBc клеточными ферментами происходят до образования оболочки (Mabit and Schaller, 2000). Однако мы не обнаружили никаких киназ, которые были бы подавлены обработкой маото.Наше профилирование транскриптома показало, что обработка маото снижает экспрессию TPM2. На основании базы данных Expression Atlas (https://www.ebi.ac.uk/gxa/licence.html), экспрессия TPM2 составляла 2–13 FPKM в клетках печени. Соответственно, в нашей РНК-секвенции экспрессия TPM2 составляла ~ 7,3 FPKM в контрольных клетках, тогда как в клетках, обработанных маото, она составляла 0,2 FPKM. Тропомиозины (TPM) представляют собой семейство цитоплазматических белков, связывающих актиновые филаменты, которые регулируют различные клеточные функции, включая подвижность клеток, адгезию, передачу сигналов, транспорт везикул и сократимость актомиозина (Gunning et al., 2015). Предыдущее исследование показало, что TPM2 взаимодействует с основными белками ВИЧ и поддерживает репликацию ВИЧ (Santos et al., 2012). Учитывая, что маото, вероятно, подавляет выработку HBV, препятствуя включению нуклеокапсида HBV в вирионы, мы можем предположить, что TPM2 может взаимодействовать с нуклеокапсидом HBV, облегчая вирусную оболочку. Когда TPM2 подавляется маото или кшРНК против TPM2, нуклеокапсиды HBV не могут включаться в частицы HBV, тем самым подавляя образование зрелых частиц Dane, содержащих ДНК HBV, как показано на рисунке 3H.С другой стороны, сверхэкспрессия TPM2 увеличивала продукцию HBV (рис. 6). Несколько транскриптомных анализов продемонстрировали, что экспрессия TPM2 увеличивается примерно в 4–6 раз при ГЦК, связанной с ВГВ, или при острой печеночной недостаточности, соответственно (Hass et al., 2016; Chen et al., 2018). Эти наблюдения предполагают возможность того, что HBV может усиливать экспрессию TPM2 и регулировать актиновый цитоскелет для его эффективного распространения и/или репликации в печени. Кроме того, мы также обнаружили MYO18B как еще один ген, подавленный обработкой маото.Сообщается, что MYO18B участвует в прогрессировании ГЦР путем активации сигнального пути PI3K/AKT/mTOR (Zhang et al., 2018). Поскольку путь PI3K/AKT/mTOR регулирует цитоскелет подобно TPM2, подавление MYO18B может также влиять на включение нуклеокапсида HBV в вирионы вместе с TPM2. Известно, что помимо актинового цитоскелета микротрубочки играют жизненно важную роль в транспортировке вирусных компонентов, сборке и оболочке ряда вирусов, таких как вирус везикулярного стоматита, вирус гепатита С и вирус гриппа А (Amorim et al., 2011; Акил и др., 2016; Яковоне и др., 2016). Микротрубочки хозяина также поддерживают репликацию HBV, поскольку пермиссивность HBV нарушалась при лечении ингибитором микротрубочек нокодазолом за счет ингибирования образования капсида (Iwamoto et al., 2017). Однако мы исключили эту возможность в нашем исследовании, потому что маото не влиял на основную ДНК (рис. 3E и рис. S1E), предполагая, что образование капсида не было затронуто.

В заключение, маото подавлял продукцию HBV, препятствуя включению нуклеокапсида HBV в вирионы, возможно, за счет снижения экспрессии TPM2.Поскольку безопасность маото уже подтверждена, маото может стать привлекательным кандидатом на роль препарата с анти-HBV-активностью, хотя необходима дальнейшая оценка in vivo . Кроме того, наши результаты также предлагают TPM2 в качестве новой терапевтической мишени для инфекции HBV.

Заявление о доступности данных

Данные, представленные в исследовании, депонированы в репозитории DDBJ BioProject, инвентарный номер PRJDB10116.

Вклад авторов

MAR, KU и TH провели эксперименты.MAR и TH проанализировали данные и написали статью. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Это исследование было частично поддержано AMED под номерами грантов JP19fk0310101 и JP20fk0310101, номерами грантов JSPS KAKENHI 18H02664 и 18K19449, а также грантами от Takeda Science Foundation, Senri Life Science Foundation, Kobayashi International Scholarship Foundation (Международный стипендиальный фонд Кобаяши)

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Это исследование было частично поддержано грантом на совместный исследовательский проект Института натуральной медицины Университета Тоямы в 2017 г. (TH).

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fcimb.2020.581345/full#supplementary-material

Ссылки

Акил А., Пэн Дж., Омране М., Гондо К., Дестерке К., Марин М., и другие. (2016). Септин 9 индуцирует рост липидных капель с помощью фосфатидилинозитол-5-фосфата и механизма, зависимого от микротрубочек, захваченного HCV. Нац. коммун. 7, 12203. doi: 10.1038/ncomms12203

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Al-Sadeq D.W., Taleb S.A., Zaied R.E., Fahad S.M., Smatti M.K., Rizeq B.R., et al. (2019). Молекулярная эпидемиология вируса гепатита В, взаимодействие хозяина и вируса, коинфекция и лабораторная диагностика в регионе MENA: обновление. Pathogens 8, 63. doi: 10.3390/pathogens8020063

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Аморим М. Дж., Брюс Э. А., Рид Э. К. К., Фоглейн А., Махен Р., Стюарт А. Д. и др. (2011). Rab11- и микротрубочкозависимый механизм цитоплазматического транспорта вирусной РНК гриппа А. Дж. Вирол. 85, 4143–4156. doi: 10.1128/jvi.02606-10

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Арита Р., Йошино Т., Хотта Ю., Миямото Ю., Осава И., Такемото О. и др. (2016). Национальная оценка затрат на маото, препарат Кампо, по сравнению с осельтамивиром для лечения гриппа в Японии. Трад. Кампо Мед. 3, 59–62. doi: 10.1002/tkm2.1027

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Брюикс Дж., да Фонсека Л.Г., Рейг М. (2019). Взгляд на успехи и неудачи системной терапии гепатоцеллюлярной карциномы. Нац. Преподобный Гастроэнтерол. Гепатол. 16, 617–630. doi: 10.1038/s41575-019-0179-x

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Чен З., Diaz G., Pollicino T., Zhao H., Engle R.E., Schuck P., et al. (2018). Роль гуморального иммунитета против корового антигена вируса гепатита В в патогенезе острой печеночной недостаточности. Проц. Натл. акад. науч. США 115, E11369–E11378. doi: 10.1073/pnas.18015

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Дюрантель Д., Зулим Ф. (2016). Новые противовирусные мишени для инновационных концепций лечения вируса гепатита В и вируса гепатита дельта. Дж.Гепатол. 64, С117–С131. doi: 10.1016/j.jhep.2016.02.016

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Фудзияма А., Миянохара А., Нодзаки К., Йонеяма Т., Отомо Н., Мацубара К. (1983). Клонирование и структурный анализ ДНК вируса гепатита В, подтип adr. Рез. нуклеиновых кислот. 11, 4601–4610. doi: 10.1093/nar/11.13.4601

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Gunning P.W., Hardeman E.C., Lappalainen P., Малвихилл Д. П. (2015). Тропомиозин — основной регулятор функции актиновых филаментов в цитоскелете. J. Cell Sci. 128, 2965–2974. doi: 10.1242/jcs.172502

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Хасс Х. Г., Фогель У., Шерлен М., Джобст Дж. (2016). Анализ экспрессии генов идентифицирует специфические паттерны нерегулируемых молекулярных путей и генетические подгруппы гепатоцеллюлярной карциномы человека. Противораковый рез. 36, 5087–5095. дои: 10.21873/anticanres.11078

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Хонда Т., Рахман М. (2019). Профилирование генов, связанных с LINE-1, при гепатоцеллюлярной карциноме. Междунар. Дж. Мол. науч. 20, 645. doi: 10.3390/ijms20030645

CrossRef Full Text | Google Scholar

Хоссейн М. Г., Махмуд М. М., Рахман М. А., Актер С., Назир К. Х. М. Н. Х., Саха С. и др. (2020). Полная последовательность генома штамма генотипа D2 вируса гепатита В с дефектом ядра, выделенного в Бангладеш. Микробиолог. Ресурс. Объявить 9, 11. doi: 10.1128/mra.00083-20 ​​

CrossRef Full Text | Google Scholar

Ивамото М., Ватаси К., Цукуда С., Али Х. Х., Фукасава М., Фуджимото А. и др. (2014). Оценка и идентификация ингибиторов проникновения вируса гепатита В с использованием клеток HepG2, сверхэкспрессирующих мембранный транспортер NTCP. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 443, 808–813. doi: 10.1016/j.bbrc.2013.12.052

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ивамото М., Цай Д., Сугияма М., Судзуки Р., Айзаки Х., Рё А. и др. (2017). Функциональная ассоциация клеточных микротрубочек со сборкой вирусного капсида поддерживает эффективную репликацию вируса гепатита В. науч. Rep. 7, 10620. doi: 10.1038/s41598-017-11015-4

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Jia J., Li Y., Wei C., Guo R., Xu H., Jia Y. и др. (2019). Факторы, связанные с прогрессированием заболевания и репликацией вируса у пациентов с хронической вирусной инфекцией гепатита В. Экспл. тер. Мед. 17, 4730. doi: 10.3892/etm.2019.7482

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Китагава Х., Охбути К., Мунекаге М., Фудзисава К., Каваниши Ю., Намикава Т. и др. (2019). Фенотипический анализ японской медицины Кампо маото у здоровых людей с использованием широконаправленного метаболомного анализа плазмы. Дж. Фарм. Биомед. Анальный. 164, 119–127. doi: 10.1016/j.jpba.2018.10.026

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Кляйнс М., Шелленберг К., Риттер К. (2003). Эффективное выделение вирусной ДНК и вирусной РНК с помощью набора Chemagic Viral DNA/RNA Kit обеспечивает чувствительное обнаружение цитомегаловируса, вируса гепатита B и вируса гепатита G с помощью ПЦР. Дж. Клин. микробиол. 41, 5273–5276. doi: 10.1128/JCM.41.11.5273-5276.2003

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Кубо Т., Нисимура Х. (2007). Жаропонижающее действие Мао-то, японского растительного лекарственного средства, для лечения гриппа типа А у детей. Фитомедицина 14, 96–101. doi: 10.1016/j.phymed.2006.09.015

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ладнер С. К., Отто М. Дж., Баркер К. С., Зайферт К., Ван Г. Х., Го Дж. Т. и др. (1997). Индуцибельная экспрессия вируса гепатита В человека (HBV) в стабильно трансфицированных клетках гепатобластомы: новая система для скрининга потенциальных ингибиторов репликации HBV. Антимикроб. Агенты Чемотер. 41, 17:15–17:20. doi: 10.1128/AAC.41.8.1715

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Li X., Чжао Дж., Юань Ц., Ся Н. (2017). Обнаружение ковалентно замкнутой кольцевой ДНК HBV. Вирусы 9, 139. doi: 10.3390/v

39

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мабит Х., Шаллер Х. (2000). Внутриклеточные нуклеокапсиды гепаднавируса отбирают для секреции путем независимого от белков оболочки связывания с мембраной. Дж. Вирол. 74, 11472–11478. doi: 10.1128/jvi.74.24.11472-11478.2000

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Масуи С., Набесима С., Аджисака К., Ямаути К., Ито Р., Исии К. и др. (2017). Маото, традиционное японское лекарственное средство на травах, ингибирует обнажение вируса гриппа. Доказательное дополнение. Альтерн. Мед. 2017, 1062065. doi: 10.1155/2017/1062065

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Накаяма Р., Уэно Ю., Уэда К., Хонда Т. (2019). Латентная инфекция герпесвирусом, ассоциированным с саркомой Капоши, усиливает ретротранспозицию длинных вкраплений элемента-1. Онкоген 38, 4340–4351.doi: 10.1038/s41388-019-0726-5

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ning X., Nguyen D., Mentzer L., Adams C., Lee H., Ashley R. и др. (2011). Секреция бесгеномного вируса гепатита В — модель одноцепочечной блокировки морфогенеза вириона пара-ретровируса. PLoS Патог. 7, е1002255. doi: 10.1371/journal.ppat.1002255

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ниши А., Охбути К., Кусида Х., Мацумото Т., Ли К., Куроки Х. и др. (2017). Деконструкция традиционной японской медицины «Кампо»: соединения, метаболиты и фармакологический профиль маото, средства от гриппоподобных симптомов. NPJ Сист. биол. заявл. 3, 32. doi: 10.1038/s41540-017-0032-1

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Нисикава Ю., Накаяма Р., Обика С., Осаки Э., Уэда К., Хонда Т. и др. (2018). Ингибирование ретротранспозиции LINE-1 капсаицином. Междунар. Дж. Мол. науч. 19, 3243. doi: 10.3390/ijms1

43

CrossRef Full Text | Google Scholar

Огура Н., Ватаси К., Ногучи Т., Вакита Т. (2014). Формирование ковалентно замкнутой кольцевой ДНК в клетках Hep38.7-Tet, клеточной линии экспрессии вируса гепатита В, индуцируемой тетрациклином. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 452, 315–321. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.08.029

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Пациент Р., Уриу С., Сизарет П. Ю., Трассар С., Сюро С., Ройнгард П. (2007). Морфогенез частиц субвирусной оболочки вируса гепатита В и внутриклеточный перенос. Дж. Вирол. 81, 3842–3851. doi: 10.1128/JVI.02741-06

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Перлман Д. Х., Берг Э. А., О’Коннор П. Б., Костелло К. Э., Ху Дж. (2005). Дефосфорилирование нуклеокапсидов гепаднавируса, связанное с обратной транскрипцией. Проц. Натл. акад. науч. США 102, 9020–9025. doi: 10.1073/pnas.0502138102

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Рахман М. А., Хаким Ф., Ахмед М., Ахсан Ч. Р., Несса Дж., Ясмин М. (2016). Распространенность генотипов и подтипов вирусов гепатита В среди населения Бангладеш. Springerplus 5, 278. doi: 10.1186/s40064-016-1840-2

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Роземан А. М., Берриман Дж. А., Винн С. А., Батлер П. Дж. Г., Кроутер Р. А. (2005). Структурная модель созревания ядра вируса гепатита В. Проц. Натл. акад. науч. США 102, 15821–15826. doi: 10.1073/pnas.0504874102

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Сантос С., Обухов Ю., Нехай С., Букринский М., Иорданский С. (2012). Вируспродуцирующие клетки определяют профили белков-хозяев ядер вирионов ВИЧ-1. Retrovirology 9, 65. doi: 10.1186/1742-4690-9-65

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Швейцер А., Хорн Дж., Миколайчик Р.Т., Краузе Г., Отт Дж. Дж. (2015). Оценки распространенности хронического гепатита В во всем мире: систематический обзор данных, опубликованных в период с 1965 по 2013 год. Lancet 386, 1546–1555. doi: 10.1016/S0140-6736(15)61412-X

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Sonneveld MJ, Janssen HLAA (2010). Плюсы и минусы пегинтерферона по сравнению с аналогами нуклеоз(т)идов для лечения хронического гепатита В. Curr. Гепат. 9, 91–98.doi: 10.1007/s11901-010-0041-7

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Саммерс Дж., О’Коннелл А., Миллман И. (1975). Геном вируса гепатита В: расщепление ферментами рестрикции и структура ДНК, выделенной из частиц Дейна. Проц. Натл. акад. науч. США 72, 4597–4601. doi: 10.1073/pnas.72.11.4597

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Тенг Д., Обика С., Уэда К., Хонда Т. (2019). Коктейль малых интерферирующих РНК, нацеленный на гены нуклеопротеинов и крупных белков, подавляет инфекцию вируса болезни Борна. Фронт. микробиол. 10, 2781. doi: 10.3389/fmicb.2019.02781

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ториуми Ю., Камей Т., Мурата К., Такахаши И., Судзуки Н., Мазда О. (2012). Полезность маото в сезон гриппа, когда наблюдалось снижение эффективности осельтамивира — клиническое нерандомизированное исследование у детей. Форш. Дополнение. 19, 179–186. doi: 10.1159/000341547

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Зонневельд М., Flink H.J., Verhey E., Senturk H., Zeuzem S., Akarca U.S., et al. (2005). Безопасность пегилированного интерферона альфа-2b при лечении хронического гепатита В: прогностические факторы для снижения дозы и прекращения лечения. Алимент. Фармакол. тер. 21, 1163–1171. doi: 10.1111/j.1365-2036.2005.02453.x

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Яковоне С. К., Смелсер А. М., Макоско Дж. К., Хольцварт Г., Орнеллес Д. А., Лайлс Д. С. (2016).Миграция нуклеокапсидов в клетках, инфицированных вирусом везикулярного стоматита, зависит как от микротрубочек, так и от актиновых филаментов. Дж. Вирол. 90, 6159–6170. doi: 10.1128/jvi.00488-16

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Yan H., Zhong G., Xu G., He W., Jing Z., Gao Z. и др. (2012). Котранспортирующий полипептид таурохолата натрия является функциональным рецептором вирусов гепатита В и D человека. Элиф 1, e00049. doi: 10.7554/eLife.00049

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Йошино Т., Арита Р., Хориба Ю., Ватанабэ К. (2019). Использование маото (Ма-Хуан-Тан), традиционного японского лекарства Кампо, для облегчения симптомов гриппа: систематический обзор и метаанализ. BMC Дополнение. Альтерн. Мед. 19, 68. doi: 10.1186/s12906-019-2474-z

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Zhang Z., Zhu J., Huang Y., Li W., Cheng H. (2018). MYO18B способствует прогрессированию гепатоцеллюлярной карциномы путем активации сигнального пути PI3K/AKT/mTOR. Диагн.Патол. 13, 85. doi: 10.1186/s13000-018-0763-3

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Лечение гепатита В | Stanford Health Care

Как лечится гепатит В?

Лечение инфекции гепатита В зависит от того, насколько активен вирус. Это также зависит от того, подвержены ли вы риску повреждения печени, такого как цирроз.

Лечение краткосрочного (острого) гепатита В

Лечение зависит от того, были ли вы:

  • Недавно были инфицированы вирусом.
  • Имеют симптомы острой инфекции.
  • Хроническая инфекция.

Если вы не получали вакцину против гепатита В и думаете, что могли подвергнуться воздействию вируса, вам следует сделать прививку иммуноглобулина против гепатита В (HBIG). Вам также следует сделать первую из трех прививок от гепатита В. Обязательно пройдите это лечение в течение 7 дней после укола иглой и в течение 2 недель после полового контакта, который мог подвергнуть вас риску заражения вирусом. Чем раньше вы получите лечение после воздействия, тем лучше оно работает.

Если у вас есть симптомы острой инфекции, лечение противовирусными препаратами обычно не требуется. Домашнее лечение обычно облегчает ваши симптомы. Это включает в себя правильное питание, употребление большого количества жидкости и отказ от алкоголя и наркотиков.

В некоторых случаях вы можете получить лекарство для лечения острой инфекции. Но это обычно не делается, если вы не очень больны.

Лечение длительного (хронического) гепатита В

Лечение зависит от того, насколько активен вирус в вашем организме, и от вероятности повреждения печени.Целью лечения является прекращение повреждения печени путем предотвращения размножения вируса.

Противовирусные препараты используются, если вирус активен и существует риск повреждения печени. Медицина замедляет скорость размножения вируса.

Противовирусное лечение предоставляется не всем, у кого хронический гепатит В.

Последующие визиты

Независимо от того, принимаете ли вы лекарства, вам необходимо регулярно посещать врача. Он или она сделает анализы крови, чтобы проверить вашу печень и активность вируса гепатита В в вашем организме.

Некоторые тесты могут определить, размножается ли вирус в вашей печени, что увеличивает риск ее повреждения.

Пересадка печени

Если у вас серьезное повреждение печени и ваше состояние становится опасным для жизни, вам может потребоваться пересадка печени. Но не каждый является хорошим кандидатом на пересадку печени.

Экспериментальные препараты для лечения гепатита D

1 Кафедра гастроэнтерологии, гепатологии и эндокринологии, Ганноверская медицинская школа, Ганновер, Германия; 2 Центр индивидуализированной инфекционной медицины (CiiM), Центр исследований инфекций им. Гельмгольца, Брауншвейг, Германия.1, Hannover, 30625, Germany
Tel +49511 532 6821
Электронная почта [email protected]

Резюме: Хронический вирусный гепатит D является наиболее тяжелой формой вирусного гепатита. Противовирусное лечение срочно необходимо для предотвращения развития терминальной стадии заболевания печени или гепатоцеллюлярной карциномы. Варианты лечения ограничивались использованием пегилированного интерферона альфа не по прямому назначению до тех пор, пока EMA (Европейское агентство по лекарственным средствам) в июле 2020 года не одобрило условное одобрение булевиртида.Однако в настоящее время исследуются несколько других противовирусных соединений, которые представляют собой многообещающие средства для лечения хронической инфекции HDV.

Ключевые слова: гепатит дельта, коинфекция HBV/HDV, интерферон, булевиртид, лонафарниб

Введение

Инфекция, вызванная вирусом хронического гепатита D (HDV), также известная как дельта-гепатит, является наиболее тяжелой формой вирусного гепатита. 1 Приблизительно 5% всех HBsAg-позитивных пациентов коинфицированы HDV, что составляет 10–12 миллионов случаев во всем мире. 2 Однако в гиперэндемичных регионах наблюдается более высокий уровень коинфекции, и показатели скрининга могут различаться в разных регионах мира. Хроническая инфекция ВГD (ИБС) связана с 3,8-кратным повышением риска развития цирроза печени по сравнению с пациентами, инфицированными только вирусом гепатита В (ВГВ), и у пациентов в 1,28 раза выше риск развития гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). 3,4 В целом, 5-летняя смертность выше у пациентов с коинфекцией HBV/HDV по сравнению с пациентами с моноинфекцией HBV. 5,6

Из-за его прогрессирующего течения остро необходима противовирусная терапия для лечения инфекции HDV. Пегилированный интерферон-альфа (ПЕГ-ИФН-α) одобрен для лечения ВГВ, а также эффективен против ВГД. В двух крупных контролируемых проспективных исследованиях HIDIT частота ответа составила 23–48% в конце терапии. 7,8 Однако через 24 недели после окончания терапии только около 25% пациентов были РНК HDV-негативными, а в отдаленные сроки около 50% этих пациентов имели поздний рецидив HDV-RNA. 9 Несмотря на ограниченную частоту долговременного вирусологического ответа, противовирусное лечение ПЕГ-ИФН-α связано с более низким риском развития клинических осложнений, а поддержание вирусологического ответа еще более тесно связано с более благоприятным долгосрочным течением. 10–12 Тем не менее, противовирусное лечение на основе IFN сопровождается тяжелыми побочными эффектами, лечение ограничивается пациентами с компенсированным заболеванием печени, а желаемый сохраняющийся вирусологический ответ наблюдается редко.Поэтому существует острая необходимость в новых терапевтических подходах, и несколько веществ в настоящее время оцениваются в клинических испытаниях фазы II и III. Недавно ингибитор проникновения булевиртид получил условное одобрение EMA, в то время как результаты продолжающегося исследования фазы III все еще ожидаются. Ингибитор пренилирования лонафарниб вошел в фазу III клинических испытаний. Кроме того, полимеры нуклеиновых кислот, соединения РНК-интерференции и лямбда-интерферон являются другими потенциальными веществами, которые в настоящее время проходят испытания.Важно отметить, что лечение аналогами нуклеотидов (NA), которые ингибируют обратную транскрипцию HBV, не оказывает прямого влияния на репликацию HDV. Тем не менее, NA рассматривается с точки зрения тяжести заболевания печени и уровня ДНК HBV при терапии пациентов с коинфекцией HBV/HDV. 13 Обзор терапевтических подходов представлен на рисунке 1, а подробная информация о различных веществах приведена ниже.

Рисунок 1 Терапевтические подходы к лечению хронической инфекции HDV показаны в зависимости от жизненного цикла вируса.(1) прикрепление вирионов HDV к протеогликанам сульфата гепарана и связывание пре-S1 области L-HBsAg со специфическим рецептором HBV/HDV, hNTCP. Вирусные частицы проникают в клетку путем эндоцитоза, и вирусный рибонуклеопротеин (РНП) высвобождается в цитоплазме. (2) Транслокация вирусных РНП в ядро. (3) Транскрипция мРНК HDAg и репликация РНК HDV. (4) L-HDAg содержит сайт пренилирования, который фарнезилируется клеточной фарнезилтрансферазой перед повторным перемещением в ядро. (5) Обе формы HDAg взаимодействуют с вновь синтезированной геномной РНК с образованием нового вируса (RNP), который экспортируется в цитоплазму.(6) Вирусные РНП взаимодействуют с цитозольной частью HBsAg на поверхности эндоплазматического ретикулума, индуцируя их оболочку. (7) Вирионы HDV секретируются из инфицированной клетки. Изображены различные этапы, на которые направлено противовирусное лечение. Коинфекция ВГВ представлена ​​наличием кзкДНК ВГВ и интегрированной ДНК ВГВ. Фигура была создана с помощью BioRender.com.

Сокращения : кзкДНК, ковалентно замкнутая кольцевая ДНК; HBsAg, поверхностный антиген гепатита В; HDV, вирус гепатита D; hNTCP, котранспортирующий полипептид таурохлората натрия человека; L-HDAg, большой антиген гепатита D; NAP, полимеры нуклеиновых кислот; РНКи, РНК-интерференционные соединения.

Параметры ответа на лечение при гепатите Delta

Целью противовирусного лечения вирусного гепатита является предотвращение печеночных осложнений, таких как цирроз печени, печеночная декомпенсация, развитие ГЦК и смерть, связанная с поражением печени. Суррогатные маркеры для прогнозирования улучшения клинического исхода и, следовательно, определения ответа на лечение все еще остаются предметом дискуссий для ИБС. При моноинфекции ВГВ длительное подавление ДНК ВГВ связано с уменьшением риска развития осложнений со стороны печени. 13 Аналогичным образом, подавление репликации РНК ВГС у пациентов, хронически инфицированных ВГС, приводит к улучшению общей выживаемости. 14 При ИБС снижение уровня РНК HDV во время лечения IFN-α было связано с улучшением клинического исхода, даже если не удавалось добиться отсутствия РНК HDV. 10,11 Таким образом, группа экспертов недавно предложила снижение РНК HDV на ≥2 log в конце лечения в качестве суррогатного параметра эффективности лечения ИБС. 15 Однако РНК HDV обычно колеблется с течением времени, что создает неопределенность в отношении окончательности этой конечной точки.Несколько вторичных конечных точек, таких как ранний вирусологический ответ, биохимический ответ (нормализация АЛТ в конце лечения/во время наблюдения), гистологическая оценка и изменения HBsAg, являются дополнительными параметрами, которые следует оценивать во время лечения. В идеале конечной точкой конечного противовирусного лечения должна быть потеря HBsAg, что соответствует функциональному излечению при хронической инфекции ВГВ, а также приводит к неспособности к сборке, высвобождению и передаче HDV. Для достижения элиминации HBsAg важно учитывать, что как кзкДНК, так и интегрированная ДНК HBV могут быть источником HBsAg (рис. 1), и поэтому должны быть устранены либо противовирусной, либо иммуномодулирующей терапией.Поскольку конечная точка элиминации HBsAg до сих пор достигается очень редко, отрицательная РНК HDV через 24 недели после прекращения противовирусного лечения была предложена в качестве конечной точки ограниченных стратегий лечения. 16

Терапевтические агенты

На рисунке 1 показаны различные терапевтические подходы к лечению ИБС. Помимо альфа-интерферона, давно известного агента, проиллюстрированы новые вещества и способ их действия. В таблице 1 представлен обзор противовирусных соединений, изучаемых в настоящее время в клинических испытаниях.

Таблица 1 Новые препараты для противовирусного лечения хронической инфекции HDV

Интерферон альфа

С 1980 г. альфа-интерферон, а позднее пегилированный IFN-α стали использовать для лечения ИБС не по прямому назначению. В двух крупнейших проспективных клинических исследованиях уровень вирусного ответа колеблется от 25 до 30% без какой-либо явной дополнительной пользы от сопутствующего лечения аналогами нуклеотидов. 7,8 Показатели вирусологического ответа еще больше снижаются, поскольку поздние рецидивы возникают у 50% пациентов с отрицательной РНК HDV в конце лечения. 9 Тем не менее, курс противовирусного лечения может оказаться целесообразным, поскольку, согласно данным нескольких опубликованных исследований, супрессия или снижение уровня РНК HDV вследствие лечения ПЕГ-ИФН-α связана с улучшением долгосрочных клинических результатов. 10,11,17

Положительные долгосрочные эффекты следует сопоставлять с побочными эффектами, такими как гриппоподобные симптомы, анемия и тромбоцитопения или психические расстройства, которые часто возникают во время лечения. Кроме того, лечение противопоказано больным с далеко зашедшим хроническим заболеванием печени, что исключает многих больных ИБС, остро нуждающихся в противовирусном лечении.

Продолжительность лечения в большинстве исследований составляла один год, а продление до 96 недель не привело к улучшению показателей вирусологического ответа у большинства пациентов. 8 Таким образом, международные руководства рекомендуют продолжительность лечения ПЕГ-ИФН-α 48 недель. 13 Можно обсудить продление продолжительности лечения, если у пациентов наблюдается снижение HBsAg, предполагая потерю HBsAg во время длительного лечения. Однако потеря HBsAg произошла только у <10% пациентов во время крупных клинических испытаний и, следовательно, остается редким событием. 7,8 Отсутствие РНК HDV на 24-й неделе лечения было связано с отсутствием РНК HDV через 24 недели после окончания лечения и могло быть использовано в качестве параметра для тактики лечения. 18

Булевиртиде

Связывание HBsAg с котранспортирующим полипептидом таурохлората натрия (NTCP) имеет решающее значение для проникновения HBV/HDV в гепатоциты. 19 Булевиртид (ранее Myrcludex B) представляет собой небольшой пептид, блокирующий взаимодействие домена preS1 HBsAg с NTCP.Следовательно, инфекция de novo бывших неинфицированных гепатоцитов запрещена, и со временем реколонизация печени неинфицированными клетками может в конечном итоге привести к элиминации HDV.

В первую фазу исследования IIa были включены 24 пациента, которые были рандомизированы в равной степени для получения (I) монотерапии булевиртидом 2 мг (ежедневно) в течение 24 недель с последующим назначением ПЕГ-ИФН-α 180 мкг (еженедельно) в течение 48 недель или (II) комбинация булевиртида 2 мг (ежедневно) и ПЕГ-ИФН-α 180 мкг (еженедельно) в течение 24 недель с последующей монотерапией ПЕГ-ИФН-α (еженедельно) в течение 24 недель или (III) только ПЕГ-ИФН-α в течение 48 недель.Уровень РНК HDV значительно снизился во всех группах лечения на 24-й неделе. Монотерапия булевиртидом была связана со снижением уровня РНК HDV у всех пациентов, а два пациента стали отрицательными по HDV на 24-й неделе. Интересно, что комбинация с ПЕГ-ИФН-α увеличивала количество РНК HDV негативные пациенты на 24-й неделе, так как у пяти пациентов группы лечения II была обнаружена негативная РНК HDV. Кроме того, количественное снижение РНК HDV было более выраженным в группе комбинированного лечения. Ни один из пациентов не достиг первичной конечной точки >0.5-кратное логарифмическое снижение уровня HBsAg на 12-й неделе лечения. 20

В следующем исследовании фазы IIb по подбору дозы 120 пациентов получали либо булевиртид 2 мг, 5 мг или 10 мг в комбинации с тенофовиром ежедневно, либо только тенофовир ежедневно в течение 24 недель. 21 Первичная конечная точка (снижение уровня РНК HDV >2log в конце лечения) была достигнута у 46, 47 и 77 % пациентов при повышении дозы булевиртида по сравнению с 3 % в группе монотерапии TDF (только один пациент).Более чем у 40% пациентов, принимавших булевиртид, была достигнута нормализация АЛТ, но дозозависимый эффект не был обнаружен, поскольку 43, 50 и 40% пациентов, получавших булевиртид в дозах 2 мг, 5 мг и 10 мг, достигли этой вторичной конечной точки соответственно. Влияние на уровни HBsAg не было выявлено ни в одной из групп лечения, а рецидив РНК HDV после окончания лечения возникал у большинства пациентов. В целом лечение булевиртидом переносилось хорошо: наблюдались местные реакции в месте инъекции, легкая и преходящая нейтропения, тромбоцитопения и эозинофилия.Повышение уровня желчных солей не приводило к клиническим симптомам.

В дополнительном многоцентровом исследовании фазы IIb оценивалась продолжительность лечения булевиртидом в различных дозах отдельно или в комбинации с ПЕГ-ИФН-α. 22 60 пациентов были рандомизированы для получения (I) ПЕГ-ИФН-α 180 мкг, (II) булевиртид 2 мг плюс ПЕГ-ИФН-α 180 мкг, (III) булевиртид 5 мг плюс ПЕГ-ИФН-α 180 мкг или (IV) булевиртид 2 мг в течение 48 недель. Медиана снижения уровня РНК HDV в конце лечения была выше в группах комбинированной терапии по сравнению с монотерапией ПЕГ-ИФН-α или булевиртидом в дозе 2 мг.Тем не менее уровни РНК HDV и АЛТ показали линейное снижение в группе монотерапии булевиртидом во время лечения. Как и в предыдущем исследовании фазы II, прекращение лечения булевиртидом вызывало рецидив РНК HDV более чем у 2/3 пациентов. Интересно, что 53,3% и 26,7% пациентов, получавших 2 мг булевиртида плюс ПЕГ-ИФН-α или булевиртид 5 мг плюс ПЕГ-ИФН-α, оставались отрицательными по РНК HDV через 24 недели после окончания лечения соответственно. Реакция HBsAg, определяемая как снижение ≥1 log10 или отрицательный результат через 24 недели после окончания лечения, была обнаружена у 46.7% пациентов получали булевиртид 2 мг плюс ПЕГ-ИФН-α и 20% получали булевиртид 5 мг плюс ПЕГ-ИФН-α. Ни один из пациентов, получавших монотерапию булевиртидом или ПЕГ-ИФН-α, не достиг этой конечной точки. В расширенном исследовании этого исследования пациенты получали высокие дозы булевиртида (10 мг) либо в комбинации с ПЕГ-ИФН-α, либо с тенофовиром. Первичная конечная точка отсутствия РНК HDV через 24 недели после окончания лечения была достигнута у 6,7% пациентов, получавших 10 мг булевиртида плюс ПЕГ-ИФН-α, и у 33.3% пациентов получали комбинацию с тенофовиром. 23 Ни один из пациентов, получавших булевиртид плюс тенофовир, не достиг снижения или отсутствия HBsAg, в то время как один пациент (6,7%) из группы, получавшей булевиртид 10 мг плюс ПЕГ-ИФН-α, оставался HBsAg-отрицательным через 24 недели после окончания лечения.

В целом, булевиртид продемонстрировал дозозависимый противовирусный эффект в отношении снижения уровня РНК HDV в исследованиях монотерапии. В комбинации с ПЕГ-ИФН-α дозозависимый эффект на снижение РНК HDV и HBsAg был обратным: влияние на HBsAg оказалось более выраженным в группах, получавших более низкие дозы булевиртида в комбинации с ПЕГ-ИФН-α.Причины такого наблюдения пока не ясны. Однако булевиртид и интерферон проявляют синергический противовирусный эффект при лечении ИБС.

Результаты исследований фазы II, ограниченные терапевтические возможности для лечения ИБС и ее статус орфанного заболевания, наконец, привели к условному одобрению булевиртида EMA (Европейское медицинское агентство) в июле 2020 года. Хотя исследования фазы III все еще В настоящее время пациенты с ИБС, положительной РНК HDV и компенсированным заболеванием печени теперь могут лечиться булевиртидом 2 мг в качестве монотерапии в Европейском союзе.Продолжительность лечения до настоящего времени не определена. Согласно одобрению EMA, лечение следует продолжать до тех пор, пока у пациентов наблюдается улучшение. 24 Некоторые практические опыты показали постоянный биохимический и вирусологический ответ у пациентов при длительном введении. Однако данных о длительном лечении все еще мало. 25

Лонафарниб

Фарнезилирование большого антигена HD является обязательным для сборки вириона HDV. 26 Ингибиторы клеточного фарнезилирования нарушают сборку вируса и, следовательно, уменьшают высвобождение функциональных вирионов HDV.Ингибитор фарнезилтрансферазы лонафарниб изучался в исследованиях фазы I и II, и в настоящее время продолжаются исследования фазы III. 27,28 Лонафарниб был протестирован в качестве монотерапии, в комбинации с ритонавиром (для повышения уровня лонафарниба за счет ингибирования цитохрома Р450 3А4, преобладающего медиатора метаболизма лонафарниба) и с ПЕГ-ИФН-α. Результаты пилотного исследования (исследование LOWR HDV-1) показали, что более высокие дозы лонафарниба были связаны с более сильным снижением РНК HDV.Однако с увеличением доз побочные эффекты, в основном побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта, такие как диарея и тошнота, также увеличивались. Комбинация с ритонавиром позволяла использовать более низкие дозы лонафарниба, что приводило к лучшим вирусологическим эффектам с меньшей частотой нежелательных явлений, и аналогичный эффект наблюдался в комбинации с ПЕГ-ИФН-α. 28 Оптимальный режим лечения был изучен в последующем исследовании LOWR HDV-2. 29 Пятьдесят пять пациентов с компенсированным заболеванием печени были включены и рандомизированы для получения высоких (≥75 мг), средних (50 мг) или низких (25 мг) доз лонафарниба два раза в день (2 раза в день) в комбинации с ритонавиром или в виде тройная терапия в сочетании с ПЕГ-ИФН-α в течение 6 мес.В группе лечения высокими дозами наблюдалась высокая частота побочных эффектов со стороны желудочно-кишечного тракта. Первичная конечная точка >2 log снижения РНК HDV или отрицательной РНК HDV в конце лечения была достигнута у 6 из 12 пациентов (50%) в группе лечения пероральной комбинацией 50 мг лонафарниба 2 раза в день плюс ритонавир, в то время как пациенты получали 25 мг показали более низкие показатели ответа. Тройная терапия в сочетании с ПЕГ-ИФН-α позволила достичь наилучших показателей ответа, и у 8 из 9 пациентов в конце лечения наблюдалось снижение уровня РНК HDV более чем на 2 log.В исследовании с повышением дозы максимальная доза лонафарниба 100 мг два раза в день в сочетании с ритонавиром переносилась двумя третями пациентов (10/15). В конце 24-недельного лечения у одного пациента была обнаружена отрицательная РНК HDV, а у одного пациента уровни РНК HDV были ниже нижнего предела обнаружения. Ферменты печени нормализовались у половины больных. 30 В дополнительном исследовании оценивалась доза лонафарниба один раз в сутки в сочетании с ритонавиром. После 24 недель лечения лонафарнибом в дозе 50, 75 или 100 мг, усиленным ритонавиром, у шести из 21 пациента уровень РНК HDV был ниже 250 МЕ/мл. 31 У некоторых пациентов наблюдались вирусные и биохимические вспышки после лечения, которые были связаны с будущим отсутствием РНК HDV, нормализацией ферментов печени и, в некоторых случаях, подавлением ДНК HBV. Механизм этих ответов после прекращения лечения лонафарнибом неясен, но предполагается иммунологический механизм. Выраженные побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта при высоких дозах, в основном тошнота, диарея, анорексия и потеря веса, значительно уменьшаются при дозах 50 или 100 мг в сутки.

В целом, имеющиеся исследования показывают, что лечение лонафарнибом приводит к снижению уровня РНК HDV и нормализации ферментов печени у пациентов с инфекцией HDV. Бустирование ритонавиром позволяет снизить дозу лонафарниба, чтобы уменьшить побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта при сохранении противовирусной эффективности. На сегодняшний день комбинация с ПЕГ-ИФН-α обеспечивает наилучшие показатели ответа, но результаты более крупных клинических испытаний все еще отсутствуют. Начато клиническое исследование III фазы. Кроме того, лонафарниб также оценивается в комбинации с пегилированным интерфероном лямбда (см. ниже).

Пегилированный интерферон лямбда

Пегилированный интерферон лямбда (ПЕГ-ИФН-лямбда) относится к интерферонам III типа, которые стимулируют клеточно-опосредованные иммунные ответы при вирусных инфекциях. ПЕГ-ИФН-лямбда связывается с рецепторами ИФН III типа, что приводит к активации сигнального пути Jak-STAT, подобно комплексам ИФН-альфа. Рецепторы интерферона III типа в основном экспрессируются в гепатоцитах и ​​в меньшей степени в клетках кроветворной и центральной нервной систем. Таким образом, типичные побочные эффекты лечения IFN-α не ожидаются при лечении ПЕГ-IFN-лямбда. 32 ПЭГ-ИФН-лямбда уже изучался у пациентов с моноинфекцией хронического гепатита В и С. Лечение ПЕГ-ИФН-лямбда ассоциировалось с улучшенной или аналогичной скоростью вирусологического ответа с меньшим количеством внепеченочных нежелательных явлений, чем с ИФН-α. Тем не менее, во время лечения наблюдались вспышки АЛТ и билирубина. 33,34

В исследовании II фазы по оценке безопасности, переносимости и эффективности ПЭГ-ИФН-лямбда при ИБС 33 пациента были рандомизированы для получения 120 мкг или 180 мкг подкожно в течение 48 недель с последующим 24-недельным периодом наблюдения.В конце лечения первичная конечная точка снижения РНК HDV > 2 log или отрицательный результат РНК HDV встречалась чаще у пациентов, получавших ПЕГ-ИФН-лямбда в дозе 180 мкг, чем 120 мкг (7/14 по сравнению с 4/19). Пять из 14 пациентов (36%), получавших ПЕГ-ИФН-лямбда 180 мкг, оставались отрицательными по РНК HDV после 24 недель наблюдения. Побочных явлений было меньше, чем при лечении ПЕГ-ИФН-α, но все же у некоторых пациентов наблюдались гипербилирубинемия, повышение активности печеночных ферментов и гриппоподобные симптомы. 35 Другое исследование, в котором изучалось применение ПЭГ-ИФН-лямбда в комбинации с лонафарнибом в течение 24 недель, показало отсутствие РНК HDV или уровень РНК HDV ниже нижнего предела количественного определения у 11 из 22 пациентов (50%) в конце лечения.При последующем наблюдении рецидив возник у шести пациентов, в результате чего у 23% пациентов вирусологический ответ сохранялся через 24 недели после окончания лечения. 36

Полимеры нуклеиновых кислот

Полимеры нуклеиновой кислоты (NAP) ингибируют сборку и высвобождение вирусных частиц, покрытых HBsAg, и поэтому рассматриваются как дополнительный противовирусный подход для лечения инфекции HDV. 37 REP 2139 — это первый NAP, который изучался в клинических испытаниях, посвященных лечению HDV.

В первом клиническом исследовании, включавшем 12 пациентов, 500 мг REP 2139 вводили внутривенно один раз в неделю в течение 15 недель, затем в течение 15 недель 250 мг REP 2139 в комбинации с ПЕГ-ИФН-α, а затем ПЕГ-ИФН-α монотерапия в течение 33 недель. 38 У восьми пациентов наблюдалось снижение уровня HBsAg во время монотерапии REP 2139, а у 6 пациентов к концу лечения HBsAg был отрицательным. РНК HDV была значительно снижена во время терапии, а РНК HDV была отрицательной у 75% пациентов (9/12) в конце лечения.После наблюдения в течение 1 года семь и пять пациентов были отрицательными по РНК HDV и HBsAg соответственно. К концу 1 года наблюдения у пяти пациентов развились анти-HBs. Нежелательные явления были отмечены у всех пациентов, у большинства из них отмечались нейтропения и тромбоцитопения, а также лихорадка, озноб и периферическая гиперемия. Кроме того, сообщалось о бессимптомном и преходящем повышении активности печеночных ферментов. Планируются исследования по изучению различных режимов дозирования.

РНК-интерференция

Соединения РНК-интерференции

(РНКи) представляют собой короткие молекулы РНК, нацеленные на транскрипты вирусной РНК.JNJ-3989 подавляет все транскрипты, происходящие из кзкДНК HBV и встроенной вирусной ДНК. 39 Таким образом, siRNAs должны приводить к снижению уровня HBsAg. Это также может повлиять на инфекцию HDV. До сих пор в клинические испытания были включены только пациенты с моноинфекцией HBV. В исследовании фазы IIa 40 пациентов ежемесячно получали JNJ-3989 в различных дозах (подкожно) в сочетании с пероральным аналогом нуклеотида в течение трех месяцев. Уровни HBsAg быстро снижались во время лечения, и у 39/40 пациентов уровень ≥1.0 log снижения HBsAg по сравнению с исходным уровнем. У 22 пациентов (22/39, 56%) наблюдалось устойчивое снижение уровня HBsAg через 9 месяцев после введения последней дозы РНК-интерференции. Побочные явления в основном были реакцией в месте инъекции. В целом, краткосрочное лечение РНК-интерференционной терапией, JNJ-3989, привело к устойчивой супрессии поверхностного антигена гепатита В у пациентов с хроническим гепатитом В, получающих лечение аналогами нуклеотидов. 40

В настоящее время продолжается исследование фазы II для оценки безопасности и эффективности JNJ-3989 у пациентов, инфицированных HBV и коинфицированных HDV.

Заключение

С разработкой ингибиторов проникновения вирусов, ингибиторов фарнезилирования, блокаторов образования вирусных частиц и лямбда-интерферона новые многообещающие варианты лечения становятся доступными для пациентов с ИБС. Ингибитор проникновения булевиртид получил условное одобрение EMA в этом году и изменит текущую область противовирусного лечения ИБС. Однако продолжительность лечения до сих пор не определена, и возможно длительное лечение или даже бессрочное лечение, особенно у пациентов с прогрессирующим хроническим заболеванием печени.Поскольку долгосрочное лечение в настоящее время исследуется в продолжающемся исследовании фазы III, результаты этого исследования ожидаются с нетерпением. Данные исследований фазы II свидетельствуют о синергическом эффекте комбинации булевиртида с ПЕГ-ИФН-α, но оптимальная доза булевиртида для этой концепции должна быть определена. Самое главное, что поддерживаемый вирусологический ответ был достижим с помощью комбинированной терапии, которая предлагает потенциал для ограниченного противовирусного лечения. Аналогичные стратегии в настоящее время исследуются для других соединений либо в комбинации с ПЕГ-ИФН-α, либо с ПЕГ-ИФН-лямбда.

Конечной целью терапии ИБС является элиминация HBsAg, что также означает функциональное излечение хронического ВГВ. До сих пор самые высокие скорости потери HBsAg наблюдались для полимеров нуклеиновых кислот. Однако на сегодняшний день очень немногие пациенты с ИБС получали лечение полимерами нуклеиновых кислот, и очевидно, что необходимы дополнительные данные.

Важно отметить, что все соединения изучались только у пациентов с компенсированным заболеванием печени. Поскольку у пациентов с ИБС наблюдается высокая частота поздних стадий заболевания печени, включая значительную группу пациентов с декомпенсированным циррозом печени, возможности лечения для этих пациентов остаются ограниченными.Таким образом, необходимы дальнейшие исследования с участием этой группы пациентов.

Наконец, необходимо изучить стратегии лечения, направленные на достижение элиминации HBsAg, не только при хроническом HBV, но и при хронической инфекции HDV.

Раскрытие информации

MC получил персональные вознаграждения от AbbVie, Gilead Sciences, GSK, Janssen-Cilag, MSD Sharp & Dohme, Novartis, Spring Bank Pharmaceuticals, Swedish Orphan Biovitrum AB (SOBI). Авторы сообщают об отсутствии других конфликтов интересов в этой работе.

Ссылки

1. Hughes SA, Wedemeyer H, Harrison PM. Вирус гепатита дельта. Ланцет . 2011;378(9785):73–85. дои: 10.1016/S0140-6736(10)61931-9

2. Stockdale AJ, Kreuels B, Henrion MYR, et al. Глобальная распространенность вирусной инфекции гепатита D: систематический обзор и метаанализ. Дж Гепатол . 2020;73(3):523–532. doi:10.1016/j.jhep.2020.04.008

3. Alfaiate D, Clément S, Gomes D, Goossens N, Negro F. Хронический гепатит D и гепатоцеллюлярная карцинома: систематический обзор и метаанализ обсервационных исследований. Дж Гепатол . 2020;73(3):533–539. doi:10.1016/j.jhep.2020.02.030

4. Miao Z, Zhang S, Ou X, et al. Оценка глобальной распространенности, прогрессирования заболевания и клинических исходов инфекции, вызванной вирусом гепатита дельта. J Заразить Dis . 2020; 221(10):1677–1687. дои: 10.1093/infdis/jiz633

5. Fattovich G, Giustina G, Christensen E, et al. Влияние инфекции, вызванной вирусом гепатита дельта, на заболеваемость и смертность при компенсированном циррозе печени типа B. Европейское согласованное действие по вирусному гепатиту (Eurohep). Гут . 2000;46(3):420–426. дои: 10.1136/кишка.46.3.420

6. Fattovich G, Boscaro S, Noventa F, et al. Влияние инфекции вируса гепатита дельта на прогрессирование цирроза при хроническом гепатите типа B. J Infect Dis . 1987;155(5):931–935. doi: 10.1093/infdis/155.5.931

7. Wedemeyer H, Yurdaydin C, Dalekos GN, et al. Пегинтерферон плюс адефовир по сравнению с одним препаратом при гепатите дельта. N Английский J Med . 2011;364(4):322–331. дои: 10.1056/NEJMoa0

6

8.Ведемейер Х., Юрдайдин С., Хардтке С. и др. Пегинтерферон альфа-2а плюс тенофовира дизопроксила фумарат при гепатите D (HIDIT-II): рандомизированное плацебо-контролируемое исследование фазы 2. Ланцет Infect Dis . 2019;19(3):275–286. дои: 10.1016/S1473-3099(18)30663-7

9. Heidrich B, Yurdaydin C, Kabaçam G, et al. Поздний рецидив РНК HDV после терапии пегинтерфероном альфа хронического гепатита дельта. Гепатология . 2014;60(1):87–97. doi:10.1002/hep.27102

10. Wranke A, Serrano BC, Heidrich B, et al.Противовирусное лечение и осложнения со стороны печени при гепатите дельта. Гепатология . 2017;65(2):414–425. doi:10.1002/hep.28876

11. Юрдайдин С., Кескин О., Калкан С. и др. Продолжительность лечения интерфероном больных хроническим дельта-гепатитом и его влияние на естественное течение заболевания. J Заразить Dis . 2018;217(8):1184–1192. дои: 10.1093/infdis/jix656

12. Kamal H, Westman G, Falconer K, et al. Долгосрочное исследование инфекции вируса гепатита дельта в центрах вторичной помощи: влияние виремии на исходы, связанные с печенью. Гепатология . 2020;72(4):1177–1190. doi:10.1002/hep.31214

13. Лампертико П., Агарвал К., Берг Т. и соавт. Руководство по клинической практике EASL 2017 по ведению инфекции, вызванной вирусом гепатита В. Дж Гепатол . 2017;67(2):370–398. doi:10.1016/j.jhep.2017.03.021

14. van der Meer AJ, Wedemeyer H, Feld JJ, et al. Ожидаемая продолжительность жизни у пациентов с хронической инфекцией ВГС и циррозом печени по сравнению с общей популяцией. ДЖАМА . 2014;312(18):1927–1928.дои: 10.1001/jama.2014.12627

15. Юрдайдин С., Аббас З., Бути М. и др. Лечение хронического гепатита дельта: необходимость суррогатных маркеров эффективности лечения. Дж Гепатол . 2019;70(5):1008–1015. doi:10.1016/j.jhep.2018.12.022

16. Cornberg M, Lok AS-F, Terrault NA, Zoulim F. Руководство по дизайну и конечным точкам клинических испытаний при хроническом гепатите B – отчет с конференции EASL-AASLD по конечным точкам лечения HBV 2019 г. (‡). Дж Гепатол . 2020;72(3):539–557.doi:10.1016/j.jhep.2019.11.003

17. Heidrich B, Serrano BC, Idilman R, et al. HBeAg-положительный гепатит дельта: вирусологические модели и клинические отдаленные результаты. Печень Инт . 2012;32(9):1415–1425. doi:10.1111/j.1478-3231.2012.02831.x

18. Keskin O, Wedemeyer H, Tüzün A, et al. Связь между уровнем РНК вируса гепатита D на 24-й неделе терапии пегилированным интерфероном и исходом. Клин Гастроэнтерол Гепатол . 2015;13(13):2342. doi:10.1016/j.cgh.2015.05.029

19. Ni Y, Lempp FA, Mehrle S, et al. Вирусы гепатита B и D используют котранспортирующий полипептид таурохолата натрия для видоспецифического проникновения в гепатоциты. Гастроэнтерология . 2014;146(4):1070–1083. doi:10.1053/j.gastro.2013.12.024

20. Богомолов П., Александров А., Воронкова Н. и соавт. Лечение хронического гепатита D ингибитором проникновения миркладекс B: первые результаты исследования фазы Ib/IIa. Дж Гепатол . 2016;65(3):490–498. дои: 10.1016/j.jhep.2016.04.016

21. Ведемейер Х., Богомолов П., Бланк А. и др. Окончательные результаты многоцентрового открытого клинического исследования фазы 2b по оценке безопасности и эффективности миркладекса В в комбинации с тенофовиром у пациентов с хронической коинфекцией ВГВ/ВГД. Дж Гепатол . 2018;68:S3. дои: 10.1016/S0168-8278(18)30224-1

22. Wedemeyer H, Schöneweis K, Богомолов PO, et al. GS-13-окончательные результаты многоцентрового открытого клинического исследования фазы 2 (MYR203) по оценке безопасности и эффективности миркладекса В в сочетании с ПЭГ-интерфероном альфа 2а у пациентов с хронической коинфекцией ВГВ/ВГД. Дж Гепатол . 2019;70(1):e81. doi:10.1016/s0618-8278(19)30141-0

23. Wedemeyer H, Schöneweis K, Богомолов PO, et al. 48 недель высокой дозы (10 мг) булевиртида в качестве монотерапии или с пегинтерфероном альфа-2а у пациентов с хронической коинфекцией ВГВ/ВГД. Дж Гепатол . 2020;73:S52–S53. doi: 10.1016/S0168-8278(20)30651-6

24. Европейское агентство по лекарственным средствам. Доступно по адресу: https://www.ema.europa.eu/en/medicines/human/EPAR/hepcludex. По состоянию на 23 февраля 2021 г.

25.Логлио А., Ференси П., Хольцманн Х. и др. Монотерапия миркладексом при компенсированном циррозе с дельта-гепатитом: безопасность и эффективность после двух лет лечения в реальных условиях. Гепатология . 2020; 72:131А–1159А.

26. Гленн Дж.С., Уотсон Дж.А., Хавел С.М., Уайт Дж.М. Идентификация сайта пренилирования в большом антигене дельта-вируса. Наука . 1992;256(5061):1331–1333. doi:10.1126/наука.1598578

27. Koh C, Canini L, Dahari H, et al. Ингибирование перорального пренилирования лонафарнибом при хронической инфекции гепатита D: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы 2А для подтверждения концепции. Ланцет Infect Dis . 2015;15(10):1167–1174. дои: 10.1016/S1473-3099(15)00074-2

28. Юрдайдин С., Кескин О., Калкан С. и др. Оптимизация лечения лонафарнибом для лечения хронического дельта-гепатита: исследование LOWR HDV-1. Гепатология . 2018;67(4):1224–1236. doi:10.1002/hep.29658

29. Юрдайдин С., Калкан С., Каракая Ф. и соавт. Субанализ исследования LOWR HDV-2 показывает высокую частоту ответа на лонафарниб у пациентов с низкой вирусной нагрузкой. Дж Гепатол .2018;68:S89. дои: 10.1016/S0168-8278(18)30397-0

30. Wedemeyer H, Port K, Deterding K, et al. Исследование фазы 2 повышения дозы лонафарниба в сочетании с ритонавиром у пациентов с хроническим гепатитом D: окончательные результаты исследования лонафарниба в сочетании с ритонавиром в исследовании HDV-4 (LOWR HDV-4). Дж Гепатол . 2017;66(1):S24. дои: 10.1016/S0168-8278(17)30310-0

31. Koh C, Surana P, Han T, et al. Исследование фазы 2, изучающее однократную ежедневную дозировку лонафарниба, усиленного ритонавиром, для лечения хронического дельта-гепатита — конец исследования, результаты исследования LOWR HDV-3. Дж Гепатол . 2017;66(1):S101–S102. дои: 10.1016/S0168-8278(17)30464-6

32. Lazear HM, Schoggins JW, Diamond MS. Общие и различные функции интерферонов типа I и типа III. Иммунитет . 2019;50(4):907–923. doi:10.1016/j.immuni.2019.03.025

33. Chan HLY, Ahn SH, Chang -T-T, et al. Пегинтерферон лямбда для лечения HBeAg-положительного хронического гепатита В: рандомизированное исследование фазы 2b (ЛИРА-В). Дж Гепатол . 2016;64(5):1011–1019. дои: 10.1016/j.jhep.2015.12.018

34. Muir AJ, Arora S, Everson G, et al. Рандомизированное исследование фазы 2b пегинтерферона лямбда-1а для лечения хронической инфекции ВГС. Дж Гепатол . 2014;61(6):1238–1246. doi:10.1016/j.jhep.2014.07.022

35. Эцион О., Хамид С.С., Лурье Ю. и др. PS-052-конец исследования, результаты исследования LIMT HDV: стойкий вирусологический ответ 36% через 24 недели после монотерапии пегилированным интерфероном лямбда у пациентов с хронической инфекцией, вызванной вирусом гепатита дельта. Дж Гепатол . 2019;70(1):e32. doi: 10.1016/S0618-8278(19)30058-1

36. Koh C, Da BL, Surana P, et al. Исследование фазы 2 лонафарниба, ритонавира и пегинтерферона лямбда в течение 24 недель: промежуточные результаты окончания лечения в исследовании LIFT HDV. ААСЛД . 2020. Последняя аннотация L08

37. Vaillant A. Полимеры нуклеиновых кислот: противовирусная активность широкого спектра, противовирусные механизмы и оптимизация для лечения инфекции гепатита В и гепатита D. Противовирусный рез . 2016; 133:32–40. doi:10.1016/j.антивирус.2016.07.004

38. Базине М., Пантеа В., Чеботареску В. и соавт. Безопасность и эффективность REP 2139 и пегилированного интерферона альфа-2а у ранее не получавших лечения пациентов с коинфекцией хронического вируса гепатита В и вируса гепатита D (REP 301 и REP 301-LTF): нерандомизированное, открытое исследование, фаза 2 пробный. Ланцет Гастроэнтерол Гепатол . 2017;2(12):877–889. дои: 10.1016/S2468-1253(17)30288-1

39. Смолдерс Э.Дж., Бургер Д.М., Фельд Дж.Дж., Кисер Дж.Дж.Обзорная статья: клиническая фармакология современных и исследуемых методов лечения вируса гепатита В. Aliment Pharmacol Ther . 2020;51(2):231–243. дои: 10.1111/кв.15581

40. Gane E, Locarnini S, Lim TH, et al. Кратковременное лечение РНК-интерференционной терапией, JNJ-3989, приводит к устойчивому подавлению поверхностного антигена гепатита В у пациентов с хроническим гепатитом В, получающих лечение аналогами нуклеоз(т)идов. Дж Гепатол . 2020;73:S20. doi: 10.1016/S0168-8278(20)30597-3

На конференции ILC 2021 объявлено о достижениях в области новых препаратов для лечения гепатита В и гепатита D

Для немедленного выпуска

Пресс-релиз

О достижениях в области новых препаратов для лечения гепатита В и гепатита D объявлено по телефону ILC 2021

, четверг, 24 июня 2021 г. (Женева, Швейцария) – Сегодня на Международном конгрессе печени 2021 ведущие исследователи в области гепатологии объявили о важных новых разработках в области исследований гепатита.Сюда входят новые данные о противовирусных препаратах для лечения гепатита B и гепатита D, а также о применении инфузионной химиотерапии с ингибиторами P-1 для лечения рака печени.

Другие объявления включали обзор влияния пандемии COVID-19 на усилия по ликвидации гепатита С в США и некоторые обнадеживающие данные испытаний нового устройства для диализа печени для лечения острой и хронической печеночной недостаточности (ACLF).

«Ученые и активисты уже давно утверждают, что если мы действительно собираемся ликвидировать гепатит B, то нам потребуется функциональное лекарство», — сказал Филип Ньюсом , генеральный секретарь EASL, профессор экспериментальной гепатологии и директор Центра изучения печени. Исследования в Бирмингемском университете в Великобритании.«Результаты испытания терапевтического препарата РНК-интерференции VIR-2218 являются обнадеживающим примером того, что излечение возможно раньше, чем позже, с потенциальными реальными последствиями для 300 миллионов человек, живущих с этим заболеванием».

Каждый год 30 миллионов человек заражаются гепатитом В, и, по оценкам, 884 000 человек ежегодно умирают от этого заболевания и связанных с ним осложнений, таких как рак печени.

Сегодняшняя официальная пресс-конференция посвящена пяти исследованиям, посвященным лечению гепатита и острой хронической печеночной недостаточности, выбранным из более чем 1500 тезисов, представленных на конференции ILC 2021.

Влияние COVID-19 на элиминацию гепатита (ВГС) в США

По состоянию на 2019 г. Соединенные Штаты (США) не смогли достичь целей ВОЗ по элиминации из-за роста заболеваемости и препятствий для лечения. В 2020 году пандемия COVID-19 привела к сбоям в оказании услуг по лечению ВГС во всем мире: лечение было начато на 25 % меньше пациентов, чем в 2019 году. 90 005

Исследователи обновили ранее проверенную модель Маркова для оценки заболеваемости и смертности, связанных с ВГС, в США.Были разработаны три сценария, чтобы зафиксировать возможные результаты восстановления ВГС после пандемии. К ним относятся: 1) длительные перерывы в лечении; 2) вернуться к прогнозам лечения до COVID-19; 3) Достичь целей ВОЗ за счет усиления лечения и снижения вреда.

Сара Блах из Фонда CDA в США сообщила, что с 2014 по 2019 год около 1,2 миллиона пациентов прошли лечение от ВГС, что привело к снижению случаев гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК) на > 50% и снижению заболеваемости гепатитом С в печени > на 65%. связанных смертей (LRD) в 2019 г. по сравнению с 2014 г.В смоделированных сценариях от 780 000 до 2,3 миллиона пациентов (всего) будут начаты лечение в период с 2021 по 2030 год. Цели ВОЗ (сценарий 3) могут быть достигнуты в США путем лечения не менее 240 000 пациентов в год и расширения доступа к программам снижения вреда. По сравнению со сценарием 1 сценарии 2 и 3 могут предотвратить 19 400 LRD и 9 500 случаев HCC и 33 200 LRD и 24 900 случаев HCC соответственно.

Резюме: Моделирование восстановления элиминации ВГС после пандемии COVID-19 в США: Пути восстановления прогресса (LBP-2814)

Терапевтический противовирусный препарат РНК-интерференции  VIR-2218 показывает многообещающие результаты у участников с хронической инфекцией гепатита В

VIR-2218 представляет собой исследуемую конъюгированную с GalNAc малую интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (миРНК), разрабатываемую для функционального лечения хронической вирусной инфекции гепатита В (ХГВ).VIR-2218 был создан с использованием Enhanced Stabilization Chemistry Plus, который сохраняет эффективность in vivo при одновременном снижении побочных эффектов. VIR-2218 нацелен на консервативную область гена X и предназначен для подавления всех основных транскриптов HBV, как из кзкДНК, так и из интегрированной ДНК, во всех 10 генотипах HBV в виде одной siRNA.

Эд Гейн из Оклендского университета в Новой Зеландии сообщил о том, что две дозы VIR-2218 по 20–200 мг, принимаемые с интервалом в 4 недели, хорошо переносились участниками ХГВ.Значительное снижение HBsAg наблюдалось как у участников с HBeAg-, так и у HBeAg+ при всех уровнях доз, что позволяет предположить, что VIR-2218 может замалчивать транскрипты как из кзкДНК, так и из интегрированной ДНК. Противовирусная активность VIR-2218, продемонстрированная в этом исследовании, поддерживает дальнейшую разработку в составе комбинированных схем, направленных на функциональное излечение.

Резюме: Безопасность и противовирусная активность VIR-2218, X-направленного РНКи-терапевтического средства, у участников с хроническим гепатитом В: результаты наблюдения на 48-й неделе (OA-44)
Сеанс: пятница, 25 июня, 14: 00–15:30 по центральноевропейскому времени

Обнадеживающие промежуточные данные исследования III фазы монотерапии противовирусным препаратом Булевирид у пациентов с хроническим гепатитом дельта

Булевиртид (BLV) является первым в своем классе ингибитором проникновения для лечения хронической инфекции вируса гепатита D (HDV).BLV показал выраженный вирусологический и биохимический ответ (снижение уровня РНК HDV и АЛТ) в двух исследованиях фазы 2 (MYR202/MYR203). В этом исследовании представлены обнадеживающие данные предварительно определенного 24-недельного промежуточного анализа исследования фазы 3 MYR301 у пациентов с коинфекцией ВГВ/ВГД, получающих монотерапию BLV в дозе 2 мг/сут или 10 мг/сут, по сравнению с наблюдением без противовирусного лечения (всего 150 пациентов).

Хайнер Ведемейер из Ганноверской медицинской больницы в Германии отметил, что после 24 недель исследования
это испытание фазы 3 подтверждает, что монотерапия BLV безопасна и хорошо переносится пациентами с компенсированным гепатитом дельта.24 недели лечения BLV были связаны со значительным снижением уровня РНК HDV и улучшением биохимической активности заболевания. Он пришел к выводу, что эти результаты еще раз подтверждают условное одобрение BLV.

Резюме: Монотерапия булевиртидом в низких и высоких дозах у пациентов с хроническим гепатитом дельта: промежуточные данные за 24 недели исследования 3 фазы MYR301 (LBP-2730)

Инфузионная химиотерапия в сочетании с синтилимабом может помочь в лечении рака печени
Это исследование было направлено на изучение эффективности и безопасности инфузионной химиотерапии в печеночной артерии в сочетании с синтилимабом (ингибитором PD-1) при местнораспространенной, потенциально операбельной ГЦК.Всего было включено 30 пациентов со средним возрастом 50,5 лет (от 34 до 70 лет), 93,3% мужчин и 96,7% инфицированных ВГВ. Средний цикл лечения составил 2 года.

Оценка опухоли проводилась каждые 6-8 недель. Пациенты с уменьшением опухоли и подходящие для резекции R0 были направлены на гепатэктомию, затем продолжена монотерапия синтилимабом максимум до 16 курсов. Первичной конечной точкой была выживаемость без прогрессирования (ВБП) в соответствии с RECIST 1.1, определяемая как время от первого дня лечения до прогрессирования заболевания, послеоперационного рецидива или смерти

Ли Сюй из Онкологического центра Университета Сунь Ятсена в Китае пояснил, что по состоянию на апрель 2021 года 29 пациентов регулярно обследовались со средним временем наблюдения 17.1 месяц (диапазон: 6,5–25,6). Медианы ВБП и ОВ не были достигнуты, а 12-месячные показатели ВБП и ОВ составили 57,6% (95% ДИ 41,9–79,2) и 82,3% (95% ДИ 69,4–97,1) соответственно. ORR и DCR составили 44,8% (13/29) и 75,9% (22/29). У 19 (65,5%) пациентов выполнена гепатэктомия с 3 патологическими полными ответами (пПО). Еще 2 пациентам с глубоким ответом была проведена радикальная абляция, а у 1 пациента была подтверждена pCR с помощью пункционной биопсии. 14 пациентов остаются без опухолей до сих пор. Большинство НЯ, связанных с лечением (TRAE), были 1-2 степени, наиболее частыми НЯ были лихорадка (10%), сыпь (10%) и зуд (10%).Только у 1 пациента развилась обратимая иммунозависимая дисфункция печени 4 степени. Других TRAE или SAE 3-5 степени не наблюдалось.

Инфузионная химиотерапия печеночной артерии в сочетании с ингибитором THE PD-1 показала высокую степень конверсии и хороший профиль безопасности. Комбинированная стратегия может рассматриваться как оптимальный выбор лечения, дающий шанс на излечение при местно-распространенной и потенциально операбельной ГЦК.

Резюме: Инфузионная химиотерапия в печеночную артерию в сочетании с ингибитором PD-1 в качестве конверсионной терапии при местнораспространенной, потенциально операбельной гепатоцеллюлярной карциноме: исследование фазы II (OA-2679) 
Сеанс: пятница, 25 июня, 14: 00-15:30

Новое устройство для диализа печени показывает обнадеживающие предварительные результаты в лечении острой и хронической печеночной недостаточности (ACLF)

Лечение острой хронической печеночной недостаточности (ОХПН) является неудовлетворенной потребностью.В настоящее время стандарт медицинской помощи (SOC) включает лечение инфекций антибиотиками и поддержку отдельных органов, диализ при почечной недостаточности и прессорные препараты при низком кровяном давлении. В настоящее время существует очень мало вариантов модификации болезни; стероиды могут играть роль в некоторых заболеваниях печени, но большая часть пациентов не реагируют на стероиды, а стероиды сопряжены с неотъемлемым риском новых инфекций. Трансплантация печени является вариантом, но недоступна в Великобритании для многих из этих пациентов.

Это рандомизированное исследование проверяет гипотезу о том, что DIALIVE, новое устройство для диализа печени, значительно улучшит прогноз пациентов с ACLF. Первичной конечной точкой была безопасность; производительность устройства; клинические и патофизиологические эффекты. DIALIVE принципиально заменяет дисфункциональный альбумин и удаляет патогены и молекулярные структуры, связанные с повреждением.

32 пациента с алкогольным циррозом печени из группы ACLF были рандомизированы либо в группу DIALIVE, либо в группу SOC. Для оценки состояния пациента требовалось минимум 3 сеанса DIALIVE (максимум 5).Исследование проводилось у пациентов, которые поступили в отделения интенсивной терапии с острым обострением хронического заболевания печени, которое быстро прогрессировало до тяжелого дополнительного ухудшения функции печени и отказа других важных органов, таких как почки, мозг и легкие. .

Banwari Agarwal из Королевской бесплатной больницы в Великобритании отметил, что, хотя число исследованных пациентов относительно невелико, данные на данный момент указывают на очень сильный сигнал, свидетельствующий о том, что пациенты, получавшие Dialive, имели значительно больше шансов выздороветь от этого острая вспышка и возвращение к предболезненным уровням функции печени и других органов.DIALIVE безопасен и значительно увеличивает долю пациентов, разрешивших ACLF, при одновременном сокращении времени до разрешения. Данные оправдывают начало клинических испытаний поздней фазы.

Агарвал добавил, что основные преимущества Dialive были двоякими: а) он относительно прост в сборке и использует преимущества оборудования, уже используемого в отделениях интенсивной терапии, и б) он воздействует на два важных патобиологических механизма, которые, как известно, вызывают острое снижение функции печени. и связанная с этим недостаточность других органов, а именно повреждение собственного альбумина пациента и развитие интенсивной системной воспалительной реакции.

Резюме: Многоцентровое рандомизированное контролируемое исследование для оценки безопасности и эффективности устройства для диализа печени DIALIVE у пациентов с острой хронической печеночной недостаточностью (ОХПН) в сравнении со стандартным лечением (СОП).  (ОА- 1997 )

Сессия: Четверг, 24 июня, 16:00–17:30 CET.

 

Дополнительная информация

Регистрация СМИ: Аккредитованные СМИ могут подать заявку на бесплатную регистрацию здесь:

Программа для прессы: Официальную программу для прессы можно найти здесь:

Все официальные пресс-конференции ILC 2021 будут транслироваться в прямом эфире на Zoom для зарегистрированных СМИ.

Политика эмбарго: Обратите внимание, что в этой редакции Политика эмбарго ILC2021 изменилась — представителей СМИ просят ознакомиться с новой политикой.

Контактное лицо:

Майкл Кесслер
Майкл Кесслер СМИ
EASL по связям со СМИ
Эл. почта: [email protected]
Моб.

О Международном конгрессе печени™

Этот ежегодный конгресс является флагманским мероприятием EASL, привлекающим научных и медицинских экспертов со всего мира, чтобы узнать о последних исследованиях печени и обменяться клиническим опытом.Присутствующие специалисты представляют, делятся, обсуждают и делают выводы о последних достижениях науки и исследований в области гепатологии, работая над улучшением лечения и лечения заболеваний печени в клинической практике. В этом году конгресс проводится полностью в цифровом формате из-за глобальной ситуации в области здравоохранения.

О Европейская ассоциация по изучению печени (EASL)

С момента своего основания в 1966 году эта некоммерческая организация выросла до более чем 4500 членов со всего мира, включая многих ведущих гепатологов в Европе и за ее пределами.EASL является ведущей ассоциацией печени в Европе, которая превратилась в крупную европейскую ассоциацию с международным влиянием и впечатляющим послужным списком в продвижении исследований заболеваний печени, поддержке более широкого образования и продвижении изменений в европейской политике в отношении печени.

пациентов с гепатитом С, вылеченных с помощью противовирусных препаратов, с меньшей вероятностью будут госпитализированы, нуждаются в неотложной помощи для печени, других проблемах, связанных со здоровьем

Newswise — ДЕТРОЙТ (18 февраля 2022 г.) — Исследователи системы здравоохранения Генри Форда в рамках национального сотрудничества по гепатиту С сообщают, что пациенты с хроническим гепатитом С, получающие противовирусные препараты прямого действия, с меньшей вероятностью будут госпитализированы или обратиться за неотложной помощью при проблемах со здоровьем, связанных с печенью и другими заболеваниями.

Исследование, опубликованное онлайн в Clinical Infectious Diseases, подчеркивает необычайный эффект этих новых противовирусных препаратов, которые, как было показано, вылечивают гепатит С у 98 процентов пациентов, которые их принимают. Говорят, что пациенты выздоравливают, когда вирус больше не обнаруживается в их крови.

«Результаты нашего исследования показывают, что лечение гепатита С не только избавляет от вируса, но и улучшает общее состояние здоровья пациентов», — сказал Стюарт Гордон, доктор медицинских наук, директор отдела гепатологии Генри Форда и руководитель исследования. автор.«Это согласуется с нашими более ранними исследованиями, которые показали, что эффективное лечение гепатита С также снижает риск развития у пациентов других заболеваний, таких как диабет, заболевания почек, инсульт и сердечные приступы».

Согласно федеральным данным, по крайней мере 2,4 миллиона человек живут с гепатитом С в Соединенных Штатах, и большинство из них не знают, что у них есть этот вирус. В результате они подвержены риску опасного для жизни заболевания печени и рака. Показатели новых случаев рака печени увеличились на 38 процентов с 2003 по 2012 год.

Исследование под руководством Генри Форда проводилось в сотрудничестве с исследователями из Geisinger Health System, Kaiser Permanente на Гавайях и в Орегоне и Центров по контролю и профилактике заболеваний. Они включают когортное исследование хронического гепатита, в ходе которого собирались и анализировались данные, полученные из четырех систем здравоохранения, для оценки воздействия гепатита С и В на население США.

Считается, что это обсервационное исследование является первым, в котором изучалось использование медицинских услуг с участием пациентов с гепатитом С с прогрессирующим заболеванием печени и без него, получавших противовирусные препараты прямого действия или ПППД.

Исследователи проанализировали данные 6 100 пациентов, половину из которых лечили ПППД, а половину — нет.

Противовирусные препараты принимаются перорально один раз в день в течение восьми-двенадцати недель. Побочные эффекты незначительны, если таковые имеются. Лекарства останавливают размножение вируса гепатита С в организме и могут предотвратить долгосрочные осложнения, такие как повреждение печени.

Основные результаты исследования:

  • Пациенты, получавшие ПППД, имели более низкие показатели госпитализации и более короткое пребывание в больнице по поводу проблем со здоровьем, связанных и не связанных с печенью, по сравнению с теми, кто не получал ПППД.
  • Пациенты, получавшие ПППД, реже обращались в отделение неотложной помощи по поводу заболеваний печени по сравнению с теми, кто не получал ПППД.

Исследователи не оценили потенциальную экономию затрат в рамках исследования.

Тем не менее, доктор Гордон сказал, что предполагаемая экономия средств будет существенной. По его словам, у людей, излечившихся от гепатита С, снижается заболеваемость хроническими заболеваниями, связанными с этим заболеванием.

«Эти противовирусные препараты дают ощутимые последующие преимущества, — сказал он.«Если вы излечитесь от вируса, ваше общее состояние здоровья улучшится, и у вас будет меньше шансов быть госпитализированным из-за какого-либо другого заболевания».

Однократный всеобщий скрининг на гепатит С рекомендуется всем взрослым в возрасте 18 лет и старше, включая беременных женщин, во время каждой беременности. Регулярное тестирование на гепатит С рекомендуется людям с постоянными факторами риска, такими как употребление наркотиков с помощью игл, на диализе и людям, родившимся между 1945 и 1965 годами.

В прошлом году штат Мичиган снял ограничения, препятствовавшие доступу некоторых людей к противовирусному лечению.«Учитывая замечательную эффективность и преимущества этих ПППД, все больные гепатитом С должны лечиться и лечиться в ближайшее время», — сказал д-р Гордон.

0 Учебные подчеркивания Мощный эффект антивирусных противовирем на общее состояние здоровья пациента — Science

в системе здравоохранения Генри Форда, как часть национального гепатита С. сообщают, что пациенты с хроническим гепатитом С, которых лечат противовирусными препаратами прямого действия, с меньшей вероятностью будут госпитализированы или обратятся за неотложной помощью по поводу проблем со здоровьем, связанных и не связанных с печенью.

Исследование, опубликованное онлайн в журнале Clinical Infectious Diseases , подчеркивает исключительный эффект этих новых противовирусных препаратов, которые, как было показано, излечивают гепатит С у 98 процентов пациентов, которые их принимают. Говорят, что пациенты выздоравливают, когда вирус больше не обнаруживается в их крови.

«Результаты нашего исследования показывают, что лечение гепатита С не только избавляет от вируса, но и улучшает общее состояние здоровья пациентов», — сказал Стюарт Гордон, доктор медицинских наук, директор отдела гепатологии Генри Форда и ведущий автор исследования. .«Это согласуется с нашими более ранними исследованиями, которые показали, что эффективное лечение гепатита С также снижает риск развития у пациентов других заболеваний, таких как диабет, заболевания почек, инсульт и сердечные приступы».

Согласно федеральным данным, по крайней мере 2,4 миллиона человек живут с гепатитом С в Соединенных Штатах, и большинство из них не знают, что у них есть этот вирус. В результате они подвержены риску опасного для жизни заболевания печени и рака. Показатели новых случаев рака печени увеличились на 38 процентов с 2003 по 2012 год.

Исследование под руководством Генри Форда проводилось в сотрудничестве с исследователями из Geisinger Health System, Kaiser Permanente на Гавайях и в Орегоне и Центров по контролю и профилактике заболеваний. Они включают когортное исследование хронического гепатита, в ходе которого собирались и анализировались данные, полученные из четырех систем здравоохранения, для оценки воздействия гепатита С и В на население США.

Считается, что это обсервационное исследование является первым, в котором изучалось использование медицинских услуг с участием пациентов с гепатитом С с прогрессирующим заболеванием печени и без него, получавших противовирусные препараты прямого действия, или ПППД.

Исследователи проанализировали данные 6100 пациентов, половина из которых принимала ПППД, а другая половина — нет.

Противовирусные препараты принимаются перорально один раз в день в течение восьми-двенадцати недель. Побочные эффекты незначительны, если таковые имеются. Лекарства останавливают размножение вируса гепатита С в организме и могут предотвратить долгосрочные осложнения, такие как повреждение печени.

Основные результаты исследования:

  • Пациенты, получавшие ПППД, имели более низкие показатели госпитализации и более короткое пребывание в больнице по поводу проблем со здоровьем, связанных и не связанных с печенью, по сравнению с теми, кто не получал ПППД.
  • Пациенты, получавшие ПППД, реже обращались в отделение неотложной помощи по поводу заболеваний печени по сравнению с теми, кто не получал ПППД.

Исследователи не оценили потенциальную экономию затрат в рамках исследования.

Тем не менее, д-р Гордон сказал, что предполагаемая экономия средств будет существенной. По его словам, у людей, излечившихся от гепатита С, снижается заболеваемость хроническими заболеваниями, связанными с этим заболеванием.

«Эти противовирусные препараты дают ощутимые последующие преимущества», — сказал он.«Если вы излечитесь от вируса, ваше общее состояние здоровья улучшится, и у вас будет меньше шансов быть госпитализированным из-за какого-либо другого заболевания».

Однократный всеобщий скрининг на гепатит С рекомендуется всем взрослым в возрасте 18 лет и старше, включая беременных женщин, во время каждой беременности. Регулярное тестирование на гепатит С рекомендуется людям с постоянными факторами риска, такими как употребление наркотиков с помощью игл, на диализе, а также лицам, родившимся между 1945 и 1965 годами.

В прошлом году штат Мичиган снял ограничения, препятствовавшие доступу некоторых людей к противовирусному лечению.«Учитывая замечательную эффективность и преимущества этих ПППД, все больные гепатитом С должны лечиться и лечиться в ближайшее время», — сказал доктор Гордон.

Источник истории:

Материалы предоставлены Система здравоохранения Генри Форда . Примечание. Содержимое можно редактировать по стилю и длине.

Одобрено первое лекарство от гепатита D

изображение: В течение 25 лет исследований Стефан Урбан и его команда разработали Hepcludex, первое лекарство от гепатита D. посмотреть больше 

Кредит: Университетская клиника Гейдельберга

То, что началось как фундаментальное исследование 25 лет назад, теперь привело к успешно одобренному препарату: блокатору проникновения булевиртид (торговая марка Hepcludex, ранее известный как Myrcludex B), совместно разработанный исследователями из Гейдельбергской университетской больницы (UKHD) и медицинского факультета. Гейдельберга, DZIF и других партнеров, в настоящее время одобрена Европейской комиссией.Hepcludex является первым в своем классе ингибитором проникновения для лечения гепатита D и предотвращает проникновение вирусов гепатита D и B (HDV/HBV) в клетки печени. Разработка этого нового препарата дает новую надежду примерно 25 миллионам человек в мире, страдающим инфекцией гепатита D, поскольку до настоящего времени не было другого одобренного препарата для лечения этого инфекционного заболевания. Инфекции, вызванные вирусом гепатита D, представляют собой особенно тяжелую форму вирусного гепатита, поскольку они возникают только как коинфекции с HBV и приводят к ускоренному прогрессированию цирроза печени и рака печени.На сегодняшний день трансплантация печени была единственным шансом на выживание для многих пациентов.

«Мы очень рады этому успеху, который основан на десятилетиях вирусологических исследований в Гейдельберге», — отмечает профессор Ханс-Георг Кройслих, представитель Центра исследований инфекционных заболеваний при UKHD и председатель Немецкого центра исследований инфекций ( ДЗИФ). «Этот препарат был разработан в тесном сотрудничестве между партнерами в области науки, общественными спонсорами и биотехнологической компанией и поэтому является воплощением успешного преобразования лабораторных результатов в клиническое применение.»

Как «сломанный ключ» защищает клетки печени

Механизм действия Hepcludex основан на принципе «ключ-замок»: вирусы гепатита B и D размножаются исключительно в печени, поскольку для этого им требуется переносчик желчных кислот NTCP, который присутствует только в клетках печени. Они используют этот переносчик как «замок» (вирусный рецептор), через который они проникают в клетку. Hepcludex блокирует этот замок, действуя как сломанный ключ, застрявший в замке. Однако Гепклюдекс работает и после того, как произошло заражение и вирус уже проник в клетку, почему так? «Вирус постоянно должен заражать здоровые клетки печени, чтобы сохраняться, поскольку инфицированные либо умирают, либо уничтожаются иммунной системой», — говорит профессор.Стефан Урбан. В течение 25 лет исследований Урбан и его команда разработали Hepcludex и с момента его назначения профессором DZIF в 2014 году сосредоточились на разработке препарата. «Очевидно, что клетки печени очень быстро делятся, когда печень инфицирована. Затем препарат защищает новые, регенерированные клетки печени от инфекции, в то время как инфицированные клетки уничтожаются», — объясняет Стефан Урбан. Несколько клинических испытаний фазы I и II показали, что люди хорошо переносят агент и что он эффективно предотвращает репликацию вирусов гепатита B и D.В настоящее время проводится испытание фазы III, среди прочего исследующее долгосрочные эффекты Hepcludex.

Первоначально исследование финансировалось Федеральным министерством образования и исследований Германии (BMBF), которое выделило 2,4 миллиона евро на доклиническую разработку в рамках программы финансирования «Инновационные методы лечения». С 2014 года Немецкий центр исследований инфекций (DZIF), основанный в 2012 году, присоединился и финансирует, среди прочего, профессуру Штефана Урбана на медицинском факультете Гейдельберга.

Они искали рецептор и нашли наркотик!

Когда молекулярный биолог Стефан Урбан начал свои исследования в небольшой лаборатории, он не имел в виду разработку лекарства от гепатита D — он изначально интересовался другим вирусом и искал сайт, используемый вирусами гепатита В проникать в клетки печени. Многие исследователи со всего мира участвовали в этой миссии, которую Урбан назвал «Святым Граалем исследований гепатита», поскольку гепатит В очень широко распространен.Это стало отправной точкой их кропотливой работы: сначала им нужно было найти способ размножения вируса в клеточных культурах, чтобы можно было изучить процесс его репликации. Второй шаг включал определение правильного рецептора из большого числа кандидатов. «Мы использовали части последовательности вирусной оболочки для создания белковых фрагментов, имитирующих часть естественной вирусной оболочки, которые мы добавили к неинфицированным клеткам печени, чтобы посмотреть, сможем ли мы ингибировать проникновение вируса», — говорит Урбан. В конце концов они сделали открытие:

Вирус использовал переносчик солей желчных кислот, рецептор NTCP (NTCP: полипептид, ко-транспортирующий таурохолат натрия), чтобы проникнуть в клетку подобно безбилетному пассажиру.Вирионы, то есть инфекционные вирусные частицы вне клетки-хозяина, не могут проникнуть в клетку, когда этот транспортер заблокирован этими синтетически полученными фрагментами белка. Блокирования только некоторых рецепторов достаточно, чтобы предотвратить проникновение вирионов. «Наши клинические исследования показывают, что Hepcludex эффективен в очень низких концентрациях, так что переносчики солей желчных кислот могут продолжать работать в клетке», — резюмирует Урбан.

Заражение гепатитом D происходит только как коинфекция HBV, поскольку вирус D не может образовывать собственную вирусную оболочку.Вместо этого, подобно паразиту паразита, он использует части вируса B для проникновения в клетку печени. Существуют эффективные, но не излечивающие методы лечения гепатита В, и с помощью этого небольшого фрагмента белка Урбан и его команда создали первое в мире эффективное лекарство от гепатита D. Впоследствии Европейское агентство по лекарственным средствам (EMA) предоставило Hepcludex право на участие в программе PRIME. PRIME — сокращение от «Priority Medicines» — было запущено EMA для усиления поддержки разработки лекарств, направленных на неудовлетворенные медицинские потребности.28 мая 2020 года EMA рекомендовало Hepcludex для одобрения, и теперь Европейская комиссия одобрила его для назначения в Европе.

Исследование гепатита – основное направление в Гейдельберге

История успеха Heidelberg продолжается после одобрения Hepcludex для лечения гепатита D. Несколько лет назад в том же институте был сделан решающий вклад в разработку лекарств против гепатита C. Используя информацию, полученную о молекулярных характеристиках гепатита С и цикле репликации, проф.Ральф Бартеншлагер, директор Департамента инфекционных заболеваний UKHD, молекулярной вирусологии, выявил сайты, на которые можно было бы ориентироваться при разработке противовирусных препаратов. Он сопровождал и поддерживал исследования Стефана Урбана в течение многих лет: «Вирусный гепатит в его различных формах представляет собой огромную глобальную проблему для общественного здравоохранения», — говорит Бартеншлагер. Он поздравляет команду Штефана Урбана с успехом, а также дает пищу для размышлений относительно финансирования исследований в Германии. «Хотелось бы более последовательного и долгосрочного государственного финансирования проектов, переходящих от фундаментальных исследований к разработке клинических приложений, чтобы в будущем перспективные проекты больше не терпели фиаско на этапе поиска спонсоров.По его мнению, положительным примером является Трансрегиональный исследовательский центр (TRR) 179 «Детерминанты и динамика элиминации и персистенции вирусной инфекции гепатита» в Медицинском центре Гейдельберга, который он возглавляет. Он финансируется Германским исследовательским центром. Фонд (DFG) и в настоящее время находится во втором периоде финансирования примерно на 13 миллионов евро.Это укрепляет Heidelberg как исследовательский центр гепатита.DZIF также был основан с конкретной целью перевода противоинфекционных агентов в клиническое применение.

От скамейки до кровати

В Германии относительно мало людей, страдающих гепатитом D. Одной из причин этого является то, что многие люди вакцинированы против гепатита В, благодаря чему они также защищены от гепатита D. «По оценкам Института Роберта Коха, около 240 000 человек в Германии страдают хронической инфекцией ВГВ. Мы ожидаем, что примерно 2,5 процента из этих людей коинфицированы HDV, что соответствует примерно 6000 человек», — говорит Стефан Урбан.«Однако у нас нет точных цифр, так как многие люди с инфекцией ВГВ не проходили дополнительное тестирование на гепатит D». Профессор Ута Мерле, исполняющая обязанности медицинского директора Клиники гастроэнтерологии, инфекционных заболеваний и отравлений UKHD, лечила нескольких пациентов с гепатитом D в рамках клинических испытаний и подчеркивает значение нового агента: «Хронические инфекции гепатита D особенно агрессивны и трудно поддается лечению У пациентов с хроническим гепатитом D часто развивается реструктуризация печени вплоть до цирроза печени в течение пяти-десяти лет после заражения.Такое тяжелое течение наблюдается у 70–90% инфицированных HDV, в том числе у молодых людей. На стадии цирроза печени и его осложнений пересадка печени — единственный вариант лечения», — резюмирует она. Эта тяжелейшая форма гепатита особенно распространена в Африке, Южной Америке, Монголии, России и Восточной Европе, и многие не подозревают об их инфекции из-за отсутствия методов тестирования, по этой причине препарат был одобрен в России и странах бывшего СССР под торговой маркой Myrcludex в конце 2019 года.

Медицинский факультет Гейдельберга и французское государственное научно-исследовательское учреждение INSERM (Национальный институт здравоохранения и медицинских исследований) предоставили лицензию на Hepcludex независимой биотехнологической компании MYR Pharmaceuticals GmbH. Участие Франции стало результатом предыдущего сотрудничества между исследователями Urban и INSERM, на основе которого был создан основной патент для дальнейшего развития Hepcludex в кампусе Гейдельберга. Потенциальные выгоды от лицензии получают ответственные учреждения (Гейдельбергский университет, INSERM, DZIF), разработчик Стефан Урбан, другие исследователи в больнице, участвующие в разработке, а также отделение молекулярной вирусологии.

Поскольку вирусы гепатита В также используют переносчик солей желчных кислот NTCP для проникновения в клетки, Hepcludex также является эффективным средством лечения гепатита B. Между тем, агент также был протестирован в сочетании с иммуномодулятором интерфероном альфа (IFN?), который одобрен для гепатита B, с очень успешными результатами. «После 48 недель лечения вирусная нагрузка значительно снизилась, и у некоторых пациентов постоянно исчезали все вирусные маркеры», — говорит Стефан Урбан. Тем не менее, поскольку уже существует установленное лечение гепатита В, предпосылки для ускоренного одобрения моноинфекции ВГВ не были выполнены, поэтому Hepcludex может первоначально использоваться только для пациентов, особенно тяжело пораженных двойными инфекциями.«В будущем будет очень интересно изучить, может ли комбинация Hepcludex и иммуномодулятора также вылечить пациентов с гепатитом B, которые не инфицированы HDV», — говорит Стефан Урбан.

###

О ДЗИФ

В Немецком центре исследований инфекций (DZIF) около 500 ученых из 35 учреждений по всей Германии совместно изучают новые подходы к профилактике, диагностике и лечению инфекционных заболеваний. DZIF является одним из шести немецких центров исследований в области здравоохранения (DZG), которые были основаны Федеральным министерством исследований и образования для борьбы с наиболее распространенными заболеваниями.Дополнительную информацию можно найти на сайте http://www.dzif.de.

Литература

H. Wedemeyer et al. (2019), Окончательные результаты многоцентрового открытого клинического исследования фазы 2 (MYR203) по оценке безопасности и эффективности миркладекса В в сочетании с ПЭГ-интерфероном альфа 2а у пациентов с хронической коинфекцией ВГВ/ВГД. Дж. Гепатол 2019;70:e81. дои: 10.1016/S0618-8278(19)30141-0

Богомолов П. и др. (2016), Лечение хронического гепатита D ингибитором проникновения миркладекс B: первые результаты исследования фазы Ib/IIa.Дж. Гепатол, 265(3):490-8. doi: 10.1016/j.jhep.2016.04.016

Ф. А. Лемпп, С. Урбан (2017), Вирус гепатита Дельта: стратегия репликации и предстоящие терапевтические возможности для забытого человеческого патогена. Вирусы, 9(7):172. дои: 10.3390/v

72



.
Leave a Reply

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.

2022 © Все права защищены.