Средства для заживления ран народные средства: Как лечить раны народными средствами

Содержание

Как лечить раны народными средствами

При глубоких ранах повреждаются не только кожа с подкожной клетчаткой, но и мышцы, кости, нервы, сухожилия, связки и иногда крупные кровеносные сосуды. Сами по себе раны опасны при кровотечении из крупного сосуда, ранении внутреннего органа или особо сильных болях, вызывающих шок. В остальных случаях главная опасность ран в том, что они служат входными воротами для микроорганизмов — возбудителей инфекционных осложнений (раневая инфекция), а иногда и опаснейших общих заболеваний (столбняк и бешенство).

В нашем организме имеются миллионы лимфатических узлов — скоплений клеток, окруженных соединительной тканью и мышечными волокнами. В этих узлах образуются особые клетки — лимфоциты. Они способны «заглатывать» и «переваривать» инородные тела. Количество лимфоцитов (белых кровяных телец) в крови увеличивается во время пищеварения, после больших физических нагрузок, при повышении температуры тела и при разных инфекционных заболеваниях. Если в организм попало инородное тело, лимфоциты обволакивают его выделяемыми ими ферментами для нейтрализации и растворения. Эти вещества воздействуют на окружающие инородное тело (занозы и т. п ) ткани, несколько разжижая их. Вещество разжиженных тканей представляет собой гной. Появление гноя вокруг раны указывает на присутствие в ране чего-то такого, от чего организм хочет избавиться. Большое скопление гноя приводит к абсцессу. Рубцеванию раны и заполнению ее здоровыми клетками способствуют листья дуба мужского, капусты, листья яблони, листья большого подорожника, жженый чеснок, жженый ячмень в смеси с воском и розовым маслом, цветы боярышника и трава полевого хвоща, кислое молоко.

По многим признакам к ранам близки вывихи и переломы.

Рецепты

* К свежей ране рекомендуется прикладывать сочной стороной кору ясеня. Менять кору нужно 2-3 раза в день.

* К гнойным ранам следует прикладывать свежие или распаренные листья земляники, меняя их не реже, чемчерез 3 ч.

* При лечении ран и свищей помоыюг компрессы из отвара травы кирказона: 2 ст. л. травы на 1 стакан воды, варить 10 мин. Менять компрессы следует через каждые 3 ч.

* При лечении незаживающих ран рекомендуется приклтдывать к больным местам, особенно с «диким мясом», повязку с истолченными листьями подорожника, меняя ее каждые 2 ч.

* При лечении незаживающих ран следует принимать свежий сок тысячелистника с медом (по вкусу) по 3 ч. л. в день.

* На раны рекомендуется накладывать повязку с измельченными свежими листьями клена остролистного, меняя ее каждые 2 ч.

* Хорошим средством при гнойных ранах является компресс из отвара листьев лопуха или листья лопуха, отваренные в молоке. Компресс или повязку нужно менять через 2 ч.

* На рану рекомендуется накладывать на 2 ч. компресс из отвара коры ивы козьей. Залить 1 стаканом кипятка 20 г коры и кипятить на малом огне 15-20 мин.

* Раны рекомендуется смазывать мазью: 15 г нарезанных листьев или незрелых плодов грецкого ореха кипятить в 100 мл воды 30 мин. на малом огне, затем залить 10 г подсолнечного масла и выдержать 7-10 суток, потом подогревать на кипящей водяной бане в течение трех часов, процедить, кипятить еще 30 мин. и добавить 15 г желтого воска.

* К кровоточащим ранам рекомендуется прикладывать повязки с толченой корой молодых веток или толчеными ягодами калины, предварительно ошпарив кору для дезинфекции, и менять каждые 3 ч.

* К ранам полезно прикладывать верхнюю (желтую) пленку коры сосны и менять ее через 3 ч.

* В Древней Руси повязкой, пропитанной отваром или настоем из цветов или плодов шиповника, заживляли раны и предотвращали гангрену.

* Для заживления ран и ссадин хорошо помогает мазь из свежих листьев зверобоя: взять поровну зверобой и шалфей, растереть со свежим свиным салом (нутряным) и процедить через марлю. Хранить в закупоренной банке. Мазь можно готовить другим способом: 1 часть спиртовой настойки зверобоя растереть с 4 частями сливочного масла. Повязки с мазью следует менять через 4 ч.

* Инфицированные раны и трофические язвы под влиянием настоя чайного гриба полностью очищаются от омертвевших тканей и гнойных налетов.

* Для заживления ран и порезов: разрезать кусочек листа алоэ и приложить разрезом к ране. Через 5-6 ч., рана начнет затягиваться

* Одним из лучших средств при ранах и порезах считаются компрессы из настойки крапивы. Для приготовления настойки набить бутылку почти доверху листьями свежей крапивы, залить спиртом, заткнуть пробкой и настоять на солнце 2 недели. Перед наложением компресса рану нужно промыть. Компрессы следует менять через 3 ч.

* Одним из лучших средств для лечения ран и порезов, созданным русскими знахарями за много столетий, считается мазь следующего состава: взять 100 г растительного масла, 8. г желтого воска, 5 г белого воска, 20 г мелкого порошка сосновой смолы (канифоли), 1 г мелкого порошка ладана и 1 ст. л. несоленого свежего сливочного масла, положить все это в кастрюлю, кипятить 10 мин. , все время помешивая и снимая сверху всю пену, и затем перелить в стеклянную банку. Мазь нужно наносить тонким слоем на марлю или тряпочку и прикладывать к ране или порезу Эта мазь излечивает любые раны и порезы, даже очень старые. Повязки следует менять через 4 ч.

* Для лечения ран: нужно взять 1 ст. л. козьего или овечьего жира и 1/2 ст. л. соли, добавить 1 ст. л. хорошо измельченного старого лука и все это- растереть. Набрав необходимое количество мази в соответствии с размерами раны (например, для большой раны нужна порция мази размером с грецкий орех), положить эту мазь в рану и вокруг нее, наложить повязку и держать 24 ч. При первом применении этого средства больной почувствует довольно сильную боль, потому что лекарство будет «въедаться» в рану и вытягивать из нее грязь. После второго или третьего раза боль уменьшится, а на четвертый и пятый раз и вовсе прекратится. Как правило, к этому времени рана уже заживает. Средство также весьма действенно при богюжах, струпьях, парше и т п.

* При различных ранах, кожных язвах, ит. п.: смешать немного нутряного свиного сала и немного пшеничной муки, поджарить это на сковороде, после чегодобавитьмолоко-и кипятитьдо пастообразного состояния. Намазав толстый слой этой мази на чистую тряпку, приложить ее к больному месту и держать повязку в течение 10 ч. После 3-4 перевязок больной почувствует улучшение.

* Вскипятить 2 части оливкового масла и 1 часть чистого пчелиного воска на небольшом огне, остудить и переложить в банку. Повязки из этой мази нужно накладывать на раны 2 раза в день, промыв их предварительно перекисью водорода.

* При флегмонах, долго не заживающих язвах и ранах рекомендуется 2 раза в день делать примочки из отвара листьев эвкалипта. Залить 1 стаканом крутого кипятка 30 г измельченных сухих листьев, кипятить при постоянном помешивании 30 мин., остудить и процедить.

* На раны рекомендуется 2 раза в день накладывать повязку, смоченную в свежем соке лука.

* Для свертывания крови в ранах: приложить нагретый камень из реки или компресс из жженого мха со старых каченных или глиняньи стен.

* Ванны из полыни холодной, соды и винной закваски залечивают старые раны и отеки.

* Старые гноящиеся, кровоточащие, опухающие раны излечивает зола астрагала, смешанная с кобыльим или ослиным молоком. Повязки с золой следует накладывать 2 раза в день.

* К гноящимся ранам рекомендуется 2 раза в день прикладывать листья сирени.

* Настрогать корешки клевера, сварить их в воде и этим отваром смачивать рану 4 раза в день.

* Раны рекомендуется 4 раза в день обрабатывать соком подорожника.

* Старьк раны заживают, если прикладывать к ним траву ияан-дамарья или траву адамова голова (адамов корень) 2 раза в день.

* Рост мышц на ранах стимулируют олово и сердолик.

* Отличным дезинфицирующим и кровоочистительнаT средством при гноящихся ранах является сок полыни.

* Народный целитель Ю. В. Тарасов рекомендует для заживления ран и порезов на руке, растяжений сухожилий, улучшения кровообращения повязать вокруг запястья красную шерстяную нитку.

* Гнойные и инфицированные раны лечат компрессами из 30%-го раствора меда в дистиллированной или кипяченой воде при 32 «С (3 раза в день). Если нет возможности приготовить раствор, раны можно просто смязать медом и наложить сверху легкую стерильную повязку.

* Для извлечения занозы следует густо смазать смояойили дегтем кожу в области занозы. Можно обмотать палец или руку в области занозы пропитанной дегтем тряпкой. Через 15-20 мин. после наложения тряпки или смазывания дегтем конец занозы выйдет наружу настолько, что его можно будет захватить щипчиками и вытащить всю занозу, какой бы величины она ни была. Это средство оказывается весьма действенным даже тогда, когда занозе уже больше двух дней, а сама она является щепкой гнилого дерева.

* При незаживающих язвах, свищах, ожогах промыть рану известковой водой: 1 ст. л. негашеной извести растворить в 1 л воды; и затем наложить повязку с мазью: смешать 100 г еловой живицы, 100 г свиного нутряного сала и 50 г пчелиного воска, перекипятить и остудить. Повязки накладывать 2 раза в день.

* Если изранена и воспалена кожа на лице, нужно 1-2 раза в день накладывать на нее мох, взятый с камней, омываемых проточной водой.

* Очень хорошим антисептиком является жабий яд, выделяющийся из околоушных желез жабы. При нагноении на колене и опухоли русские знахари советовали содрать кожу с жабы и закрыть ею больное место Утверждают, что через несколько дней рана затянется и отеки спадутОднако раны можно лечить, не убивая жаб: достаточно потереть рану спинкой жабы или лягушки, чтобы инфекция была нейтрализована.

* Если гноится палец руки около ногтя, нужно очистить от ножки и семечек стручок жгучего перца, наполнить его крепкой водкой и поместить в него больной палец так, чтобы внутри оставалось немного водки. После этого следует палец перевязать и оставить повязку до тех пор, пока можно терпеть боль (желательно продержаться в течение ночи). Опухоль быстро пройдет, и боль утихнет.

* При порезах: приготовить по обычной схеме настой зверобоя, выпарить до 1/2 первоначального объема, смешать с оливковым или подсолнечным маслом в пропорции 1:1, выдержать не менее 24 ч. и смазать им порезанное место. Настой можно долго хранить в холодном месте.

* Раны хорошо заживают, если их 1 раз в день промывать отваром: варить в 1 л воды 3 побега живокости (окопника), пока вода наполовину не испарится, и процедить.

* К ранам и больным местам прикладывают вату, смоченную в настойке аира.

* Взять порошок алоэ на кончик ножа, опустить в стакан и залить горячей водой — хорошо излечиваются старые раны, глубокие нарывы с большим количеством гноя. Для заживления ран их посыпают порошком алоэ и перевязывают бинтом 1 раз в день.

* Экстракт арники применяется для обмывания ран, для примочек. компрессов. Цвет арники собирают в конце июня и начале июля и настаивают на воде или спирте. Через 3-4 дня экстракт годен к употреблению.

* Кору каперсов колючих прикладывают к злокачественным и загрязненным ранам.

* Календула используется и в качестве заживляющего средства. Для этого нужно собрать цветы в банку и выставить их на солнце. Через 9 дней содержимое банки следует процедить и отжать сок. Сначала сок бывает мутный, но после отстоя он становится прозрачном, и на поверхности образуется беловато-желтое клейкое вещество, Которое хорошо залечивает раны.

* Раны смазывают составом, содержащим 80 г пчелиного меда, 20 г рыбьего жира и 2 г ксероформа. Мазь накладывают на очищенную рану в виде повязки.

* Залить 1 стаканом кипящей воды 1 ст. л. сухой травы сушенины болотной, настоять 30 мин., процедить и добавить 1 ст. л. меда. Можно использовать наружно для промывания ран и язв, а также внутрь по 1-2 ст. л. за 30 мин до еды при язве желудка.

* Залить 0,5 л воды 50 г листьев эвкалипта, варить в течение 3-4 мин. , процедить и добавить 2 ст. л. меда. Применять в виде примочек и ванночек для лечения ран.

* Для заживления ран к ним прикладывают самую верхнюю (тоненькую) кору сосны, смочив ее предварительно водой или слюной больного.

* При лечении ран и контузий нужно подержать листья свежей травы спорыша на больном месте и затем закопать их в сырую землю.

* Рута излечивает застарелые раны и язвы, если ее прикладывать к больным местам вместе с топленым маслом и медом.

* Труха источенного червями дерева, особенно дерева с вяжущими свойствами, например, некоторых видов деревьев с колючками, заживляет раны. К трухе добавляют равное количество аниса с вином, сжигают и растирают полученное вещество в порошок. Этим порошком посыпают язвы при герпесе для устранения болезни.

* При лечении гнойных воспалительных процессов — ран, ожогов, трофических язв: используют в виде орошении, промываний и влажных повязок настойку из плодов софоры японской: свежесобранные зрелые бобы промывают кипяченой водой, разрезают на кусочки и заливают в стеклянной посуде 56%-м спиртом в соотношении 1:1 (сухие — 1:2) и настаивают, постоянно взбалтывая, 10 дней. Потом отжимают, отстаивают, фильтруют через вату Таким же образом готовят настойку из бутонов, только заливают их 70%-м спиртом в соотношении 1:5.

* Раны, а также осложнения после них, язвы, ожоги, воспаления и нагноения можно орошать отварами или смазывать соками тысячелистника, полыни горькой, сушеницы топяной, подорожника, пижмы, маргаритки, всеми видами лапчатки. Однако не сосредоточивайте внимание на каком-то одном составе — у каждого человека своя трава.

Скажем, женщинам больше подходит полынь и душица. Кстати, по-гречески полынь называется Артемиссией — по имени богини охоты и покровительницы женщин Артемиды. Ну а мужчинам, как мы уже говорили,-больше подходит Ахиллея — тысячелистник.

Как быстро заживить раны и ссадины

К сожалению, всем нам свойственно получать раны и травмы. В особенности данная проблема актуальна для спортсменов, людей, занимающих определенные профессии, ну и конечно же для детей с подростками, особенно сейчас, когда на улицах теплеет и появляется возможность катания на велосипедах, самокатах и пр. технике. При этом, к получению травм в большинстве случаев приводит несоблюдение осторожности и правил безопасности.

В данной статье мы рассмотрим с вами способы и лучшие средства для быстрого заживления ран и травм.

Первая помощь при получении травмы/раны:

При получении раны, если ее осторожно обработать сразу, и после правильно лечить, то ее заживление произойдет в короткие сроки. При этом касаться раны нельзя, но нужно постараться устранить из нее грязь и все мертвые ткани.

Конечно же обратиться к врачу будет нужно, и, в особенности, если получены глубокие раны. В таких случаях правильнее будет, если врач сам окажет первую помощь и при необходимости произведет наложение швов, объяснив как их самостоятельно обрабатывать.

В случаях, когда обращение к врачу не предвидится, необходимо вокруг раны обработать кожу любым антисептиком, который будет в наличии: йод, зеленка и пр., и поверх наложить повязку, которую следует заменить перевязкой спустя 2 часа, выполненной по всем правилам.

Для того, чтобы процесс заживления был правильным и быстрым, рану нужно правильно лечить, используя бинты, и необходимые инструменты — пинцет и ножницы, обработанные спиртом, а также препараты и растворы антисептиков, которые способствуют заживлению раны.

Осуществлять перевязку необходимо 1-2 раза в день; при этом влажные и сухие раны обрабатываются с помощью различных средств.

Для промывки раны применяют перекись водорода, раствор фурацилина, или же любые другие растворы антисептиков на основе воды.

В случаях, когда рана воспалена, следует незамедлительно обратиться к врачу или же поэтапно продолжать самостоятельно лечение, применяя специальные средства для заживления ран.

Такие препараты не содержат токсичных компонентов, они стимулируют процессы образования коллагена и регенерации клеток, а также способны в клетки доставлять глюкозу и кислород.

При влажной ране, вместо мази должно использоваться средство по консистенции напоминающее желе, оно не останавливает процесс заживления, в отличие от мази, которая образует пленку, не позволяющую выделяться жидкости с повреждённой поверхности.

А уже когда рана постепенно становится сухой, желеобразное средство заменяют мазью. При этом выбирая средства, правильнее брать препараты одной группы, но только в различных лекарственных формах.

В период перехода в сухую фазу ране требуется защитная пленка, которая позволит ей лучше заживать, не подвергаясь раздражителям внешней среды – в этот период можно уже не использовать повязки.

Но, если еще пока отказаться от повязок не получается, тогда накладывать их можно спустя 2-3 часа после обработки раны мазью, и уже после постепенно это время немного увеличивать. Это позволит заживать тканям значительно быстрее.

Для быстрого заживления ран выбранные вами средства могут быть как аптечными, так и народными, но все же в сложных случаях их должен назначать врач.

Ранозаживляющие средства в аптеках сети «Солнечное Здоровье»:

Для быстрого заживления ран из аптечных средств обычно используются препараты с провитаминами или витаминами:

К примеру, декспантенол — провитамин В5 или ретинола ацетат.

Так как перечисленные средства выпускаются в виде кремов, мазей или лосьонов — не в желеобразной форме, они не применяются для обработки влажных ран.

Средства с метилурацилом для заживления ран наделены противовоспалительным действием и способствуют клеточному иммунитету, от этого раны быстро заживают. Вот только этими средствами обрабатывать можно лишь сухие раны, так как в форме желе они не выпускаются.

Универсальное средство ЭПЛАН применяется для лечения язв, ожогов, дерматитов и лучевых поражений, оно наделено высокими регенерирующими свойствами и хорошо заживляет раны.

Данный препарат уничтожает микробы и способствует высокой активности фагоцитов, поэтому этим средством свежие раны обрабатывать можно, но все же наносить его на кровоточащие раны нельзя, так как собой он представляет антикоагулянт, поэтому может привести к снижению свёртываемости крови.

Препарат ЭПЛАН быстро избавляет раны от инфекции и при этом он не мешает поступлению в них кислорода. Стоит отметить, что в его составе нет гормонов, токсинов и антибиотиков. Его выпускают в форме линимента, раствора и крема.

Препарат СОЛКОСЕРИЛ произведен на основе экстракта крови молочных телят – он также способен помочь в быстром заживлении ран. Средство выпускается в форме желе и мази. Его аналог АКТОВЕГИН — оба средства отлично подходят для быстрого заживления различных ран.

Применять препараты, выпускаемые в виде желе, можно на начальных этапах, а уже во время гранулирования раны требуются средства, представленные в виде мази.

Благодаря защите раны СОЛКОСЕРИЛОМ, в нее не проникают микробы, а также ускоряются процессы метаболизма и регенерации. При его использовании запускается даже обезболивающий эффект. Средство следует использовать 2-3 раза в день, это максимально приблизит заживление раны без каких-либо осложнений.

Быстрое заживление ран с помощью народных средств:

Обычно народные средства в случаях с травмами и ранами также активно используются, как и аптечные, в особенности если их рекомендует врач, или же в случаях с несерьезными травмами.

В случаях с долго незаживающими ранами для быстрого их заживления можно сделать мазь из чистотела и лопуха.

Для ее приготовления берутся измельченные корни лопуха (30 г) и чистотела (20 г), затем смесь заливается подсолнечным маслом 100 мл. , и кипятится 15 минут на малом огне, после чего процеживается и остывшим средством смазываются больные места несколько раз в день, а уже спустя неделю обычно раны заживают.

Следующий рецепт домашнего бальзама для лечения ран с использованием скипидара, можжевелового дегтя (по 100 г), розового масла (1 ст. л) и желтков.

* 2 свежих желтка растираются в масле, затем в массу добавляется постепенно по 1 ч. л очищенный скипидар, при этом нужно постоянно помешивать, чтобы не свернулась смесь.

Далее туда же добавляется деготь и все тщательно перемешивается. Готовым бальзамом поливают аккуратно раны, используя чайную ложку.

* Своими целебными свойствами славится и прополис.

Домашняя мазь для лечения ран может быть также с его использованием.

Жировая основа для лечебного средства может быть выбрана любая — сливочное или растительное масло, свиной или рыбий жир (5 частей), в кастрюльке следует довести до кипения и добавить прополис в измельченном виде (1 часть).

Далее продолжаем в течение получаса варку при 80°С, постоянно помешивая, после чего процеживаем отвар с помощью марли, остужаем и начинаем использовать. В холодильнике готовую мазь можно хранить целый год.

Для заживления ран, также хорошо помогают и компрессы, смоченные в настойке крапивных листьев.

Берутся свежие листья и укладываются практически до верха неплотно в 0,5 литровую емкость (банка или бутылка), затем заливаются 70% спиртом и настаиваются неделю на солнце. После готовая настойка процеживается и перед наложением повязки ею промываются раны.

В составе крапивы много веществ, которые обладают
обезболивающими и лечебными свойствами, поэтому ее сок в свежем виде используют для лечения ран.

Аналогичными свойствами наделен и тысячелистник: он уничтожает микробы, способствует свёртыванию крови, избавляет от боли и снимает воспаление. Соком тысячелистника также можно заливать раны и прикладывать к ним повязку со свежей травой, измельчённой в кашицу.

ВАЖНО:

Процесс заживления ран значительно ускоряется, если помимо местного воздействия человек правильно питает свой организм.

Очень важно, чтобы в ежедневном рационе присутствовало много витаминов и натурального нежирного белка: рыбы и мяса, свежих кисломолочных продуктов, овощей и фруктов.

Поэтому для хорошего результата всегда должны быть предприняты комплексные действия.

Аптечная сеть «Солнечное Здоровье» желает вам и вашим близким крепкого здоровья!

Будем рады, если наша статья поможет вам полезной информацией и вы воспользуетесь при необходимости описанными действиями и средствами, представленными в аптеках сети «Солнечное Здоровье» по лучшей цене в городе.

Лечение незаживающих ран народными средствами.

Главная / Лечение / Незаживающая рана

Недавно я узнала ужасную историю: женщина вылечила язву на ноге, потом язва появилась снова и снова ее вылечили. Так продолжалось несколько раз. В последний раз женщина ногу попарила, случилась гангрена, врачи ничем не смогли помочь. Летального исхода могло не быть, если бы женщина знала, что у нее диабет.

При незаживающих ранах, главное, лечить первичную болезнь. Для этого следует пройти медосмотр!

Причины появления и диета.

Язвы появляются от недостаточного питания (плохой трофики) клеток кожи.

Сначала в результате плохого кровообращения появляется отек, кожа в проблемном месте становится блестящей, потом воспаляется, чувствуются зуд, жжение, боль и тяжесть в мышцах.

При таких условиях поводом для возникновения язвы может послужить самая небольшая ранка и при попадании патогенных микроорганизмов начинается процесс гниения – так образуется незаживающая рана (трофическая язва).

Основные причины плохого кровообращения.

  • Системные заболевания:
    • атеросклероз,
    • сахарный диабет (имеется много народных способов снижения уровня сахара в крови),
    • гипертония,
    • хроническая артериальная недостаточность,
    • хроническая венозная недостаточность,
    • ишемическая болезнь сердца.
  • Травмирующее влияние окружающей среды (ожоги, отморожения).

Одной из причин того, что рана долго не заживает, является повышенное количество холестерина в сосудах (атеросклероз). Здоровое питание, народные средства помогут избавиться от этого холестерина.

Гипертония усложняет процесс заживления язв. Снижать артериальное давление можно с помощью таблеток, но они все вредны для здоровья. Существуют продукты, которые понижают давление; травы, отварами и настойками которых можно лечить гипертонию.

Главные заповеди лечения незаживающих ран.

  1. Пройти тщательный медосмотр, чтобы узнать причину появления раны,
  2. лечить первичную болезнь.
  3. Не парить ноги с ранами, раствор в лечебных ванночках должен быть не выше температуры тела.
  4. Сделать свое питание более здоровым.

Повышенная температура ванночек способствует быстрому распространению инфекции, что может спровоцировать гангрену.

Более здоровым и разнообразным свой рацион можно сделать за счет продуктов растительного происхождения и рыбы. А вот жиры, жареное, сладкое, пищу быстрого приготовления следует ограничивать.

Овощи, фрукты, ягоды разжижают кровь, обогащают организм витаминами, отчего трофика мягких тканей улучшается. Хорошо очищает кровь даже копеечная морковь, если кушать ее в сыром виде.

Народное лечение незаживающих ран.

  • Сначала раны следует обработать перекисью водорода или фурацилином,
  • стерильной салфеткой убрать гной и омертвевшие ткани.
  • Потом промыть болячки лечебной настойкой.
  • Дальше наложить повязку с антисептической ранозаживляющей мазью и менять ее не реже, чем раз у день.

Лечебные настойки делаются как обычно: 2 столовых ложки сырья (березовые почки, или календула, или тысячелистник, или зверобой, или расторопша пятнистая, или сбор этих трав) залить стаканом водки, поставить в темное место на 3 недели, процедить.


Мазь из желтка с йодом. Эта мазь помогает даже при долго незаживающих ранах. Свежее куриное яйцо вымыть с мылом и высушить полотенцем. Дальше отделить желток в чистую посуду и добавить чайную ложечку 5% йода, размешать.

Мазь наносить непосредственно на рану таким образом, чтобы не попала на здоровую кожу, сверху прикрыть чистой хлопчатобумажной тканью и прибинтовать. Целлофан в компрессе не использовать!


Мазь из лука с солью. На 1 столовую ложку внутреннего свиного сала нужно добавить столько же измельченного лука и половину столовой ложки соли, тщательно перемешать и положить на рану, сверху прикрепив повязкой, сначала будет сильно болеть, но потом боль утихнет.


Мазь из прополиса с растительным маслом. 15-20 грамм измельченного прополиса поместить в стеклянную банку и залить половиной стакана оливкового масла, продержать банку 1 час на кипящей водяной бане, огонь выключить.

Когда содержимое банки остынет, процедить и смазывать полученной мазью незаживающие раны.


Мазь из сока каланхоэ и березового дегтя. Смешать в равных количествах сок каланхоэ и березовый деготь, нанести на поврежденное место, сверху наложить марлевую повязку.


Масло от жарки лука, готовится проще простого: пожарить мелко порезанный лук до золотистого цвета и процедить, когда остынет.


Мазь из прополиса. 200 грамм свежего сливочного масла или нутряного свиного сала разогреть в эмалированной кастрюле.

Когда содержимое кастрюльки закипит, рассыпать измельченный прополис по всей поверхности жира, закрыть крышкой и томить на медленном огне минут 10, периодически помешивая, чтобы прополис там лучше растворился, потом следует масло процедить и остудить.


Компресс из солевого раствора. Растворить 1 столовую ложку с верхом соли в стакане горячей воды, хорошо смочить в ней марлевую салфетку, слегка отжать и приложить к язве, сверху положить сухую салфетку и прибинтовать.


Мазь из почек осины. 2 чайные ложки высушенных и растертых в порошок почек осины растереть с 100 грамм свежего сливочного масла, повязки с такой мазью прикладывать к ранам раз в день.


Мазь из листьев грецкого ореха. Полулитровую банку заполнить на половину измельченными листьями грецкого ореха и вылить туда пол стакана подсолнечного масла. Настаивать в темном месте неделю, потом прокипятить 2,5 часа на водяной бане. После остывания процедить, добавить растопленный кусочек пчелиного воска, размером половины спичечного коробка, тщательно размешать.


Средство не совсем народное. Намазать на поврежденное место ихтиоловую мазь, посыпать толченым стрептоцидом, сверху наложить чистую повязку.


Мазь из желтка. Этот рецепт я услышала в поезде. Смешать в стеклянной баночке по чайной ложке медицинского спирта, топленого свиного здора, майского меда, третью часть чайной ложки питьевой соды и желток свежего куриного яйца. Отдельно растопить столовую ложку пчелиного воска (только не доводить до кипения) и добавить содержимое стеклянной баночки, все тщательно размешать.


Начало страницы.

Лечение пролежней разной степени в домашних условиях — клиника «Добробут»

Пролежни у лежачих больных: стадии развития и лечение

Лежачие больные требуют пристального внимания и со стороны медицинских работников, и со стороны родственников. И после купирования острой фазы основного заболевания и стабилизации общего самочувствия больного может настать момент, когда придется бороться с пролежнями. Как лечить и чем обрабатывать пролежни, должен оповестить лечащий врач, который даст рекомендации и по профилактике появления таких патологических очагов. Но тот, кто ухаживает за лежачим больным, должен знать и выполнять определенные манипуляции.

Общие принципы лечения пролежней у лежачих больных

Рассматриваемая патология может протекать в разных стадиях. Заметить предвестники формирования пролежня можно и без дополнительного обследования – кожа в проблемных местах становится тонкой, излишне сухой, начинает шелушиться и приобретать синевато-сизый оттенок. Уход за пролежнями у пожилых людей, впрочем, как и у молодых, должен осуществляться регулярно и с соблюдением рекомендаций специалистов:

  1. Обеспечить грамотное положение больного. Если пролежни только начинают образовываться, то поможет специальный противопролежневый резиновый круг, который предотвращает образование патологических очагов на ягодицах и копчике. Можно использовать и матрас для профилактики пролежней у лежачих больных, что целесообразно при полной неподвижности человека, когда он не может даже приподняться на руках, оторвать голову и плечи от подушки, повернуться на бок.
  2. Применять народные средства на первой стадии патологического процесса. Обработка пролежней кремами и мазями на основе облепихового масла, протирание очагов камфорным спиртом каждые 2-3 часа будут вполне эффективными. Важно помнить, что все средства наносятся легкими круговыми движениями.
  3. Вторая стадия пролежней, которая характеризуется уже начавшимся язвенно-некротическим процессом, подразумевает применение лекарственных препаратов. Первейшее средство против пролежней – дезинфицирующие препараты, например, Хлоргексидин. Этим антисептическим раствором нужно промывать раны несколько раз в день, желательно после каждого мочеиспускания или опорожнения кишечника. После такой первичной обработки рана смазывается Солкосерилом или Левомеколем. Не лишнем будет и периодическое накладывание гидрогелевых повязок – это ответ на вопрос о том, что делать, если появились пролежни на ягодицах.
  4. Третья и четвертая стадия пролежней – это некроз мягких тканей, поэтому без помощи врача-хирурга не обойтись. В принципе, лечение пролежней разной степени должно сопровождаться консультациями с лечащим врачом, потому что некроз – слишком серьезная проблема. Какие мероприятия проводят в этом случае:
    • частая санация патологического очага, которая заключается в промывании Хлоргексидином;
    • избавление от уже некротизированных тканей в ране – это делается специальными хирургическими инструментами;
    • применение ранозаживляющих и абсорбирующих повязок.

Только после полного удаления из раны некротических масс и гноя можно будет начинать применение специфических лекарственных препаратов.

Лечение рассматриваемой патологии всегда длительное, и иногда приходится проводить медицинские манипуляции ежедневно на протяжении многих лет. Но зная, как выглядят пролежни на копчике в самом начале своего формирования, можно будет предотвратить их дальнейшее развитие, когда некроз достигает просто ужасающих объемов.

Что можно предпринять для предупреждения развития пролежней

Существует ряд правил ухода за лежачими больными, при соблюдении которых получится избежать формирования язвенных образований в определенных местах. Образование пролежней начальной стадии можно предотвратить, выполняя следующие рекомендации специалистов:

  • один раз в 2 часа нужно менять положение больного – переворачивать его со спины на левый или правый бок и наоборот, приподнимать верхнюю часть туловища или нижние конечности, если это разрешено врачом;
  • использовать специальные матрасы, которые наполнены либо мелкими полипропиленовыми шариками, либо воздухом – это обеспечивает равномерное распределение нагрузки на тело больного;
  • при непроизвольном мочеиспускании или опорожнении кишечника нужно часто менять простыни и подгузники – каловые массы и моча повышают риск развития пролежней в разы;
  • один раз в 10-14 дней (не реже, но можно чаще) все тело больного нужно обтирать влажной губкой, по возможности с использованием мыла.

Нужно понимать, что только регулярный осмотр лежачего больного и своевременное обнаружение первичных признаков формирования пролежней дадут возможность избежать прогрессирования некротических процессов в мягких тканях. Официальной медицине известны случаи, когда у пациентов, находящихся в лежачем положении годами и десятилетиями, не было пролежней. И это результат качественного и грамотного ухода. К сожалению, имеются и другие подтвержденные факты, когда язвенное поражение кожных покровов диагностируется и после 1-2 месяцев лежачего положения.

Подробно о том, чем лечить пролежни на пятках у больных, в каких случаях будут эффективны народные средства и когда необходима помощь хирурга, можно узнать на сайте https://www.dobrobut.com/ .

лечение ног при диабете народными средствами

лечение ног при диабете народными средствами

Ускорение восстановления затрагивает все системы, необходимые для нормальной жизнедеятельности. В первую очередь под действием препарата снижается выработка желудочного сока, снижается тяжесть в животе, снижается потребность в пище, что способствует общему оздоровлению. Человек не переедает, поэтому не нуждается в коррекции питания. Дополнительно снижается тяга к сладкому.

цена таблеток от диабета 2 типа, жардинс таблетки от сахарного диабета цена
Где в Петропавловске-Камчатском купить Гликирон
гликирон лекарство
профилактика диабета памятка
импортные лекарства от диабета

Лечение диабетической стопы народными средствами максимально эффективно, когда оно сочетается с ношением правильно подобранной обуви. Нередко человеку удается значительно улучшить состояние конечностей, избавится от язв и мозолей, а неудобная или некачественная обувь приводит к образованию новых изъязвлений всего за несколько часов. Кликните по картинке ниже, чтобы узнать подробнее о стельках для ног при диабете и заказать их с доставкой на дом или по почте. Преимущества использования стелек для диабетической стопы: уменьшение болезненных ощущений при ходьбе Диабет — одно из самых распространенных заболеваний в мире, а синдром диабетической стопы — тяжелое осложнение, которое развивается из-за изменения нервов, сосудов, кожи и мягких тканей, костей и суставов. Оно проявляется в виде гнойно-некротических процессов, язв и костно-суставных поражений. Диабетическая стопа — основная причина ампутаций нижних конечностей у больных сахарным диабетом! Народные методы лечения могут вызвать лишь чувство иллюзии лечения диабетической стопы, но при этом не влияют на основные механизмы развития болезни. При гнойных поражениях, применение местных средств лишь усиливает прогрессирование инфекционного процесса. Неотложные состояния при диабетической стопе!. Диабетическая остеоартропатия. При диабете нередко развивается остеопороз с поражением костей и суставов стопы. У пациентов с диабетической стопой нередко происходят безболезненные вывихи и спонтанные переломы, которые нередко замечают только после перфорации кожи костным отломком. Лечение диабетической стопы нередко начинают уже на далеко зашедших стадиях болезни, а ведь это тяжелое осложнение сахарного диабета при своевременном начале лечения вполне можно обратить вспять. Но для этого следует вовремя обратиться к опытным врачам, таким, какие трудятся в центре Д.В. Матвеева. Наши специалисты способны распознать заболевание на ранней стадии и не позволить ему прогрессировать. Как диабет влияет на ноги? Люди, страдающие сахарным диабетом, из-за длительных периодов высокого уровня сахара в крови подвержены развитию разных проблем с ногами. Основные из них это диабетическая невропатия и болезни периферических сосудов, которые имеют опасные последствия для здоровья. При диабете на ногах часто появляются волдыри или ранки, которые легко инфицируются и долго не заживают. Они образуются, потому что из-за снижения чувствительности человек может. При отсутствии должного контроля гликемии и лечения на начальной стадии диабетической стопы болезнь быстро прогрессирует. Признаки диабетической невропатии зависят от того, какие нервы поражены. Какие народные средства помогают при диабетической стопе? Оставьте комментарий / Диабет. Синдром диабетической стопы проявляется болями в ногах, снижением чувствительности стоп, отечностью, сухостью кожи, повышенной или пониженной температурой стопы, частым травмированием ступней, долгим процессом заживления повреждений, изменением цвета и формы ногтей, грибковым поражением, трофическими язвами, деформацией костей стопы, мозолями. При диабете ванны с этим веществом снижают потребность организма в инсулиновых инъекциях. Чтобы приготовить ванночку, необходимо 2 ч. л. купороса растворить в 5–6 литрах теплой воды. Диабетическая стопа — это тяжёлое осложнение сахарного диабета в виде инфекции, язв или разрушения глубоких тканей, которое возникает в связи с нарушением макроструктуры стопы и микроциркуляции крови, по причине разрушения нервных окончаний и нервных волокон. Вовремя начатое лечение заболевания может предотвратить образование гангрены и последующей ампутации конечности. Как лечить трофическую язву при диабете? Статьи. Диагностика. Заболевания. Лечение. Симптомы. Основные формы трофической язвы. Трофические язвы (длительно не заживающие раны) – наиболее частая форма синдрома диабетической стопы. Пациент с диабетом может порезаться при подстригании ногтей на ногах, и не почувствовать боли, может не ощутить посторонний предмет в обуви (камень, осколок стекла, забытый носок, случайно упавшие в ботинок монеты), может наступить на канцелярскую кнопку, лежащую на полу, и не почувствовать этого. К сожалению, все эти примеры – абсолютно реальны при сахарном диабете. Препараты при Диабете. Препараты при нарушении функции щитовидной железы. Бальзамы, настойки, эликсиры. Монотерапия (лечение только одним препаратом) редко приносит пользу, с какой бы выраженностью не проявлялась любая ситуация с нарушенным кровообращением. Это ещё одна причина обратиться к врачу – специалист назначит комплексное лечение: с нейропротекторами, поливитаминными комплексами, антиоксидантами, другими средствами, поддерживающими и сосудистую сеть, и множество метаболических процессов. Препараты для улучшения кровообращения у детей и подростков. Средства для кровообращения при шейном остеохондрозе. Оперативное лечение. Народные средства. Длительность лечения трофической язвы и когда ожидать улучшения. Возможные последствия и осложнения трофических язв. Трофические язвы при сахарном диабете развиваются из-за резкого и длительного повышения глюкозы крови. Высокий сахар крови повреждает мелкие сосуды и нервные волокна, чувствительность стопы нарушается, пациент не замечает мелких ран, которые долго не заживают и переходят в язвы. Трофические язвы возникают при сужении или полной закупорке лимфатических капилляров.

Где в Петропавловске-Камчатском купить Гликирон лечение ног при диабете народными средствами

цена таблеток от диабета 2 типа жардинс таблетки от сахарного диабета цена Где в Петропавловске-Камчатском купить Гликирон гликирон лекарство профилактика диабета памятка импортные лекарства от диабета лучшие таблетки от диабета 2 типа список лекарства от диабета 2 группы

худею от таблеток от диабета какие таблетки нужно пить при сахарном диабете

лечение ног при диабете народными средствами гликирон лекарство

лучшие таблетки от диабета 2 типа список
лекарства от диабета 2 группы
худею от таблеток от диабета
какие таблетки нужно пить при сахарном диабете
эффективные таблетки от диабета 2
Где в Сургуте купить Гликирон

Компоненты, входящие в состав лекарственного препарата от диабета Гликирон, позволяют стабилизировать уровень сахара в крови без дополнительного приема таблеток и проведения инъекций. На сегодняшний день компания-производитель не только работает с клиентами по всей стране, но и является активным участником фармацевтического рынка. Бренд предоставляет выгодные условия для развития бизнеса и предлагает только качественную продукцию. Для компании важно поддерживать отношения с покупателями и работать только добросовестно. Фото оригинального средства можно посмотреть на официальном сайте. Препарат способствует уменьшению токсинов и шлаков, избавляет человека от вредных отходов внутри стенок желудка, а также сосудов. В результате повышается общий тонус организма, иммунная защита, нормализуется кровообращение, активизируются обменные процессы.

Мясников назвал самые опасные народные средства

https://ria.ru/20200922/zdorove-1577617681.html

Мясников назвал самые опасные народные средства

Мясников назвал самые опасные народные средства — РИА Новости, 22.09.2020

Мясников назвал самые опасные народные средства

РИА Новости, 22.09.2020

2020-09-22T18:06

2020-09-22T18:06

2020-09-22T18:54

общество

здоровье

александр мясников (врач)

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdnn21.img.ria.ru/images/131995/85/1319958540_46:0:1954:1073_1920x0_80_0_0_88a860266fc298a73ac760c3a56636a0.jpg

МОСКВА, 22 сен — РИА Новости. Врач и телеведущий Александр Мясников в эфире телеканала «Россия 1″ рассказал об опасных последствиях использования народных средств для лечения.Медик отметил антисептические свойства марганцовки, но добавил, что неправильное применение этого средства — например, на слизистых оболочках — чрезвычайно опасно.Перекись водорода идеально подходит для промывки ран. Но врач подчеркивает, что препарат можно использовать исключительно для наружного применения, а если полоскать им горло, промывать слизистые или пить перекись, то это может привести к тяжелым последствиям для организма.Медик призвал отказаться от использования этих традиционных средств, предпочтя им современные асептики. Ингаляции картофельным паром могут вызвать ожоги слизистой. Польза подобного способа лечения также вызвала сомнение у Мясникова.»Помогает? Ну, наверное, нет. Но приятно», — отметил врач.Особенно осторожно медик призвал относиться к лечению травами. Для их правильного применения необходимы глубокие знания и специальная подготовка. Неправильно собранное и высушенное растение может оказаться смертельно опасным.Также Мясников призвал с осторожностью пользоваться медицинскими банками. Врач рассказал историю из собственной практики, когда он, будучи студентом и медбратом, устанавливал банки и случайно уронил горящую вату на спину пациента.

https://ria.ru/20200905/traditsii-1576807766.html

https://ria.ru/20200914/bolezni-1577216937.html

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2020

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

https://cdnn21.img.ria.ru/images/131995/85/1319958540_285:0:1716:1073_1920x0_80_0_0_7518efef9e4540114a4c83bf99c5e746.jpg

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

общество, здоровье, александр мясников (врач)

МОСКВА, 22 сен — РИА Новости. Врач и телеведущий Александр Мясников в эфире телеканала «Россия 1» рассказал об опасных последствиях использования народных средств для лечения.

Медик отметил антисептические свойства марганцовки, но добавил, что неправильное применение этого средства — например, на слизистых оболочках — чрезвычайно опасно.

«Сколько ожогов марганцовкой, сколько выжженных глаз», — указал Мясников.

Перекись водорода идеально подходит для промывки ран. Но врач подчеркивает, что препарат можно использовать исключительно для наружного применения, а если полоскать им горло, промывать слизистые или пить перекись, то это может привести к тяжелым последствиям для организма.

Медик призвал отказаться от использования этих традиционных средств, предпочтя им современные асептики.

5 сентября 2020, 03:08

Названы вредные для здоровья традиции россиян

Ингаляции картофельным паром могут вызвать ожоги слизистой. Польза подобного способа лечения также вызвала сомнение у Мясникова.

«Помогает? Ну, наверное, нет. Но приятно», — отметил врач.

Особенно осторожно медик призвал относиться к лечению травами. Для их правильного применения необходимы глубокие знания и специальная подготовка. Неправильно собранное и высушенное растение может оказаться смертельно опасным.

Также Мясников призвал с осторожностью пользоваться медицинскими банками. Врач рассказал историю из собственной практики, когда он, будучи студентом и медбратом, устанавливал банки и случайно уронил горящую вату на спину пациента.

14 сентября 2020, 15:29

Мясников назвал неочевидные симптомы опасных болезней

Как вылечить пролежни народными средствами

Первый признак образования пролежней – покраснения на коже локального характера.  Самое главное не пропустить этот тревожный сигнал иначе поверхностное поражение будет проникать глубже в ткани до самой кости, а результатом будет образование глубоких язв, высокая температура и общее ухудшение состояния больного.

Лучшее средство  профилактики -это использование противпролежневого матраца и кровати. Матрац устроен таким образом, что оказывает стимулирующее влияние на кровообращение, нечто, похожее на массаж.

Народный вариант противпролежневого матраца является перина, набитая свежим сухим сеном. 

 Необходимо так же уделить особое внимание уходу за кожей. Белье должно быть сухим и чистым. Ранки должны тщательно дезинфицироваться. Настоятельно рекомендуется как можно чаще менять положение лежачего человека, используя кровать с подъемным механизмом.


 Предлагаем вам подборку народные рецептов  для лечения пролежней на первых стадиях. Можно использовать их только по рекомендациям лечащего врача. Особенно глубокие язвы лечатся оперативным путем в стационаре.


Например, для лечения пролежней из пчелиных сот делают мазь. Для этого нужно закипятить и охладить до теплого состояния рафинированное подсолнечное масло, добавить в него 2 ст. ложки топленого свиного жира, 100 грамм воска от пчелиных сот и 10 грамм живицы сосны. Все это перетирается до однородного состояния и хранится в холодильнике.Перед применением небольшую часть мази размягчают на водяной бане, а затем накладывают на очищенную рану 

Еще один рецепт лечения пролежней медом: смешайте протертый на терке картофель и мед в равных пропорциях. Далее компресс накладывают на ночь, а не на сутки. Такой способ снимет отек и уменьшает болевые ощущения.

Для удаления гноя из раны  рекомендуют использовать прополис, смешанный с рафинированным маслом в соотношении 1 к 2. Это средство хорошо чистит раны и способствует заживлению.

Лук – хорошее антимикробное и противовоспалительное средство. Чтобы вылечить пролежни луком, нужно пару средних луковиц мелко порезать и обжарить в небольшом количестве рафинированного масла до светло-коричневого цвета. Луковое масло процедить и растереть с топленным пчелиным воском. Смесь держат в холодильнике. Перед применением греют и пользуются им для лечения неглубоких повреждений, не страдающих от гнойных выделений.

Для очищения язв можно использовать листья алоэ и каланхоэ. Для этого их измельчают и прикладывают к ранам в качестве компресса на несколько часов.

Камфора хорошо снимает воспаление и зуд, уничтожает вредные бактерии на коже.Его используют для массажа лежачего больного, растирая им спину, лопатки и область поясницы. Его можно использовать если нет глубоких язв, иначе можно спровоцировать сильный химический ожог.

Уход за ранами с помощью традиционной, дополнительной и альтернативной медицины

Реферат

Уход за ранами постоянно развивается вместе с достижениями медицины. Поиск идеального перевязочного материала продолжается, поскольку специалисты по уходу за ранами сталкиваются с рядом проблем. В связи с появлением микроорганизмов с множественной устойчивостью и уменьшением количества новых антибиотиков специалисты по уходу за ранами пересмотрели древние методы лечения, используя традиционную и альтернативную медицину в лечении ран.Отношение людей к традиционной медицине также изменилось, и это очень обнадеживает. Концепция влажного заживления ран была хорошо принята, и традиционная медицина также использовала этот метод, чтобы ускорить процесс заживления. Было задокументировано несколько исследований по лечению ран с использованием травяной и традиционной медицины с разных континентов. Мед широко используется в практике ухода за ранами и дает прекрасные результаты. Недавние научные данные и клинические испытания, проведенные с использованием традиционной и альтернативной медицины в лечении ран, открывают большие надежды на будущее.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Альтернативная медицина, дополнительная медицина, традиционная медицина, заживление ран, лечение ран

ВВЕДЕНИЕ

Традиционная медицина (также известная как медицина коренных народов или народная медицина) включает в себя знания, которые до этого накапливались поколениями в различных обществах. эпоха современной медицины. Практики, известные как традиционная медицина, включают травяные, аюрведические, сиддха, унани, иранские, исламские, вьетнамские, китайские, иглоукалывание, мути, ифа, африканские и другие псевдомедицинские знания и практики по всему миру.

Он может включать в себя формализованные аспекты народной медицины, то есть давние лекарства, передаваемые и применяемые непрофессионалами.

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) определяет традиционную медицину как «оздоровительные практики, подходы, знания и убеждения, включающие лекарства на растительной, животной и минеральной основе, духовную терапию, мануальные техники и упражнения, применяемые по отдельности или в комбинации для лечения, диагностики и предотвращать болезни или поддерживать хорошее самочувствие »[1].

В некоторых странах Азии и Африки до 80% населения полагается на традиционную медицину для удовлетворения своих первичных медико-санитарных потребностей.Традиционную медицину, принятую вне ее традиционной культуры, часто называют дополнительной и альтернативной медициной (САМ).

Альтернативная медицина — это любая лечебная практика, «не относящаяся к сфере традиционной медицины». Он может быть основан на исторических или культурных традициях, а не на научных данных. Термины «дополнительная медицина» или «альтернативная медицина» в некоторых странах взаимозаменяемы с традиционной медициной. Они относятся к широкому кругу практик здравоохранения, которые не являются частью собственных традиций этой страны и не интегрированы в доминирующую систему здравоохранения.

Рана может быть определена как нарушение целостности эпителиальной выстилки кожи или слизистой оболочки. Травма, вызванная хирургическим вмешательством или несчастным случаем, приводит к разрушению тканей, разрушению кровеносных сосудов и экстравазации компонентов крови и гипоксии. Заживление ран — это сложный процесс, состоящий из трех фаз: воспалительная фаза, фаза пролиферации и фаза созревания.

Заживление ран является результатом взаимодействия цитокинов, факторов роста, крови и клеточных элементов, а также внеклеточного матрикса.Цитокины способствуют заживлению различными путями, такими как стимуляция выработки компонентов базальной мембраны, предотвращение обезвоживания, усиление воспаления и образование грануляционной ткани.

Раны можно разделить на острые и хронические в зависимости от их этиологии. Острые раны чаще всего возникают в результате несчастных случаев, например травм или ожогов. Острые раны обычно заживают в короткие сроки при правильном лечении. При заживлении ран всегда уместно добиться быстрого и полного заживления ран, поскольку образующаяся рубцовая ткань будет более удовлетворительной.Следовательно, цель каждого практикующего врача, лечащего раны, должна заключаться в скорейшем заживлении ран. Хронические раны заживают дольше или даже рецидивируют из-за основной патологии. Следовательно, в первую очередь следует определить и лечить основную проблему. При лечении хронических ран важно отметить, что биопленки играют важную роль в предотвращении заживления ран. Эти биопленки содержат различные микроорганизмы, которые замедляют процесс заживления ран. В связи с ростом устойчивости к антибиотикам все более популярными становятся альтернативные / традиционные лекарства для борьбы с этими микроорганизмами с множественной устойчивостью.Пациентам с хроническими ранами требуется длительная перевязка, что может стать серьезным финансовым бременем для системы здравоохранения. С появлением альтернативных и традиционных средств ухода за ранами финансовое бремя может быть значительно снижено. Концепция влажного заживления ран получила широкое признание, и многие практикующие врачи применяют этот метод [2]. В настоящее время коммерчески доступно несколько традиционных продуктов для ухода за ранами, включающих концепцию влажного заживления ран.

В целом важность и эффективность традиционной и дополнительной медицины возросли. Почти четыре миллиарда человек во всем мире используют растения в качестве лекарств, поскольку ничто другое не является доступным или доступным по цене [3]. Возраст пациентов, использующих альтернативную медицину, как правило, составляет от 30 до 49 лет [4]. Как правило, женщины чаще используют КАМ, чем мужчины. [5–7]

РАСТИТЕЛЬНЫЕ ЭКСТРАКТЫ И ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ УХОДА ЗА РАН

Травяные лекарства включают травы, травяные материалы, травяные препараты и готовые растительные продукты, содержащие активный ингредиент, части растения или другие растительные материалы или их комбинации.До появления современной медицины люди на всех континентах использовали лекарства растительного происхождения с доисторических времен.

Древние египетские лекарства 1000 г. до н.э., как известно, использовали чеснок, опиум, касторовое масло, кориандр, мяту, индиго и другие травы в медицине, а Ветхий Завет также упоминает использование и выращивание трав, включая мандрагору, вику, тмин, пшеницу и т. ячмень и рожь. В Индии аюрведическая медицина использовала многие травы, такие как куркума, возможно, еще в 1900 году до нашей эры.[8]

В первой китайской книге по травам, Shennong Bencao Jing, составленной во времена династии Хань, но датируемой гораздо более ранней датой, возможно, 2700 г. до н.э., перечислено 365 лекарственных растений и их применение, включая ма-Хуанг, куст, который ввел препарат эфедрин в современную медицину. Последующие поколения дополнили Шэннун Бенцао Цзин, как в Яосин Лун (Трактат о природе лекарственных трав), трактате династии Тан 7-го века по фитотерапии. Ряд традиций стал доминировать в практике фитотерапии в конце 20-го века: «классическая» система фитотерапии основана на греческих и римских источниках, системах сиддхов и аюрведической медицины из различных стран Южной Азии, китайской фитотерапии. , Традиционная африканская медицина, медицина унани-тибб, шаманская медицина и медицина коренных американцев.

Алоэ вера

Алоэ вера — это кактусоподобное растение, которое легко растет в жарких и засушливых условиях. Гель алоэ вера получают из слизистой части центра листа. Он используется на протяжении многих веков и является основным ингредиентом различных коммерческих продуктов для ухода за кожей и ранами. Его можно использовать перорально и местно для лечения широкого спектра заболеваний, связанных со здоровьем. Гель алоэ вера содержит витамины A, B, C, E, ферменты, полисахариды, аминокислоты, сахара и минералы.

При лечении острых и хронических ран в нескольких отчетах с использованием алоэ вера были продемонстрированы различные результаты. [9–13] Таким образом, можно сделать вывод, что, хотя есть подтверждающие доказательства того, что алоэ вера может улучшить скорость заживления ран, более крупные рандомизированные Для подтверждения этого необходимы контрольные испытания.

Традиционная китайская медицина

Традиционная китайская медицина (ТКМ) относится к широкому спектру медицинских практик, разделяющих общие теоретические концепции, которые были разработаны в Китае и основаны на более чем 2000-летней традиции, включая различные формы фитотерапии, иглоукалывание, массаж, упражнения (цигун) и диетотерапия.Хотя эти методы считаются альтернативной медициной в западном мире, они являются общей частью медицинского обслуживания во всей Восточной Азии, на них приходится примерно 40% всей медицинской помощи, оказываемой в Китае.

Несколько исследований, проведенных в Китае с использованием традиционной китайской медицины, продемонстрировали положительный результат лечения острых и хронических ран. Следовательно, ТКМ имеет большой потенциал для широкого использования в традиционном уходе за ранами. [14–16]

Различные лечебные травы в уходе за ранами

Использование лекарственных трав в лечении ран было очень обнадеживающим, и несколько исследователей по всему миру сделали это. начали публиковать свои результаты.резюмирует использование различных лекарственных трав при уходе за ранами.

Таблица 1

Различные лечебные травы в лечении ран

Роль меда в лечении ран

Мед представляет собой комбинацию различных сахаров, образующих высоковязкий сладкий раствор, который получают из нектара цветов или выделений других растений. Медоносная пчела (Apis mellifera) отвечает за эту смесь сахаров в дополнение к различным другим ферментам, которые происходят от пчел.

Использование меда для лечения ран насчитывает много веков. Мед использовался для лечения ран, ожогов, катаракты, кожных язв и диареи. [31,32] Лечебные свойства меда описаны в Библии, Коране и Торе. [33,34] Первые документы Священного Писания. египтяне использовали мед для лечения ран в 2000 году до нашей эры. [31] Египтяне использовали мед в качестве косметического крема, а также для бальзамирования умерших. В аюрведической медицине мед описывается как нектар жизни.Он широко используется для лечения различных заболеваний. [32] В начале 20-го века в различных отчетах было задокументировано использование меда при ожогах и подтверждены преимущества использования этого природного средства для лечения ран. [35,36] Однако с появлением антибиотиков и других хирургических процедур на смену меду пришла западная медицина. употребление меда. [37] Из-за широкого использования антибиотиков развилась резистентность к различным антибиотикам, и в них присутствует множество мультирезистентных микроорганизмов. По мере уменьшения количества новых антибиотиков возникновение альтернативной или традиционной медицины возродилось.Таким образом, возобновился интерес к использованию меда для лечения ран.

Состав и свойства меда

Мед содержит примерно 40% фруктозы, 30% глюкозы, 5% сахарозы и 20% воды. Он также содержит несколько аминокислот, антиоксиданты, витамины, минералы, глюкозооксидазу, которая производит перекись водорода, и глюконовую кислоту, которая придает меду кислый pH 3,2-4,5. [38] Поскольку Clostridium botulinum способна выжить в меде, существует риск ботулизма или гангрены.[39] Следовательно, рекомендуется стерилизовать мед с использованием гамма-излучения в дозе 25-50 кГр. [40]

Мед обладает уникальным свойством увлажнять раны благодаря своей очень вязкой природе. [41] Из-за гиперосмолярности меда он способен поглощать экссудаты из раны и обеспечивать заживление раны во влажной среде. Мед обладает антибактериальными, противовоспалительными и противогрибковыми свойствами. [42–46] Согласно исследованиям на животных и людях, мед увеличивает сокращение и эпителизацию ран.[47,48] Меду присуща способность увеличивать образование грануляционной ткани, стимулировать рост ткани и уменьшать отек, воспаление и синтез коллагена. [41] Мед способен уменьшить частоту послеоперационных спаек во внутрибрюшных тканях. [49] Мед может дезодорировать рану, а также уменьшать боль. [41]

Антибактериальные свойства обусловлены сложным взаимодействием различных компонентов меда, а именно перекиси водорода, метилгиоксаля и пчелиного дефенсина-1.[50,51] Из недавнего исследования Kwakman и др. был сделан вывод, что бактерицидная активность меда очень сложна и варьируется для отдельных видов бактерий. [50] Концентрация меда также влияет на антибактериальную активность; чем выше концентрация меда, тем сильнее его антибактериальное действие. [52]

Интересно, что разные источники меда обладают разной бактерицидной активностью. Следовательно, совершенно необходимо определить точный спектр антибактериальной активности различных источников меда.[50] Основными сортами меда медицинского назначения, одобренными для клинического применения, являются Manuka и Revamil®. Мед манука, который производится из куста манука (Leptospermum scoparium), происходит из Новой Зеландии и Австралии и был широко протестирован во всем мире. Однако почти на каждом субконтиненте есть индивидуальные источники меда и сообщается об успешных результатах лечения ран.

ТЕКУЩИЕ НАУЧНЫЕ ДАННЫЕ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ МЕДА ДЛЯ ЗАРАБОТКИ РАН

Было проведено множество клинических испытаний для проверки эффективности меда при лечении ран.В центре внимания этой статьи будут испытания на людях. Всего было проведено 20 клинических испытаний на острых и хронических ранах.

В отношении острых ран в общей сложности было проведено 15 клинических испытаний с использованием меда. Острые раны можно подразделить на острые ожоговые раны и острые раны, не вызванные ожогами.

Острые ожоговые раны

Всего было проведено 11 клинических испытаний острых ожоговых ран.

Субраманьям и др. . провели два испытания (n = 154) на неглубоких ожоговых ранах.В обоих исследованиях контрольная группа использовала сульфадиазин серебра (SSD), и обработанные медом раны имели лучшую скорость заживления. [53,54] Gupta et al . провели исследование (n = 108) на поверхностных и частичных ожоговых ранах, сравнивая мед с SSD. Они также отметили лучшую скорость заживления в группе меда (18,1 против 32,6 дней). [55] Шесть исследований (n = 1326) были проведены на ожоговых ранах частичной толщины. Пять из шести испытаний были проведены одним и тем же исследователем. Во всех шести испытаниях, проведенных на ожоговых ранах частичной толщины, мед показал лучшие лечебные свойства.[56–61] Субрахманьям и др. . провели два испытания смешанных частичных и полнослойных ожоговых ран. В первом исследовании (n = 50) они сравнивали медовую повязку с тангенциальным иссечением и пересадкой кожи. Группа пересадки кожи показала лучшие образцы заживления по сравнению с группой, получавшей мед (18,4 против 32 дней). [62] Во втором исследовании мед сравнивали с SSD у 100 пациентов с менее чем 40% общей площадью поверхности тела (TBSA) ожогов. Скорость заживления была лучше в группе, получавшей мед (15.4 против 17,2 дня). [63] Из этих отобранных клинических испытаний, кажется, существует тенденция в пользу меда для лечения поверхностных и частичных ожоговых ран, но убедительных доказательств нет. При лечении ожоговых ран на всю толщину мед, похоже, не улучшает заживление, поскольку было проведено только два исследования. Следовательно, необходимы дополнительные клинические испытания, чтобы подтвердить доказательства использования меда при ожоговых ранах поверхностной и частичной толщины.

Острые безожоговые раны

Было проведено четыре клинических испытания острых безожоговых ран.

Два исследования были проведены на хирургических ранах, образовавшихся в результате частичного или полного отрыва ногтя. В первом исследовании ( n = 51) Маршал и др. . не удалось сообщить о лучших показателях заживления с медом по сравнению с йодом (33,4 против 25,4 дней). [64] Во втором исследовании ( n = 100) McIntosh et al . также не достигли лучших показателей заживления с медом по сравнению с парафиновой марлевой повязкой (40,3 дней по сравнению с 39,98 дней) [65]. Было проведено только одно испытание ( n = 87) на рваных или неглубоких ссадинах в 2006 году Ingle и др. .В этом исследовании авторы сравнили мед и гидрогелевую повязку на ссадинах от 10 до 100 см 2 . Не было разницы в скорости заживления (16,48 дней против 16,88 дней) [66]. Из этих отобранных клинических испытаний недостаточно доказательств, подтверждающих использование меда при острых ранах, таких как ссадины, порезы или отрывы ногтей на пальцах ног. Испытание ( n = 75) было проведено Фаррой и др. . на донорских участках трансплантата кожи с использованием медового гидрогеля и простого гидрогеля.Группа медового гидрогеля показала лучшие показатели заживления на 10-й и 15-й дни [67].

В отношении хронических ран в общей сложности было проведено пять клинических испытаний с использованием меда. Два испытания были проведены для хронических язв ног. [68,69] Оба эти испытания не оказали значительного влияния меда на заживление язвы через 12 недель. Джулл и др. . провели исследование ( n = 368) хронических язв ног, сравнивая мед и обычную помощь. Время до полного заживления составляло 12 недель. Только 55,6% обработанных медом ран зажили за 12 недель по сравнению с 49.7% для контрольной группы. [68] Gethin и др. . провела другое исследование ( n = 108) хронических язв ног, сравнивая мед и гидрогель. Группа, принимавшая мед, не показала лучших показателей заживления (44,4% против 33,3%). [69] Weheida и др. . провела исследование на пролежнях I или II степени. Группа меда имела лучшие показатели заживления по сравнению с контрольной группой (8,20 против 9,93 дней) [70]. Но веских доказательств не хватает, поскольку необходимы дополнительные клинические исследования. Аль Вайли провел исследование ( n = 50) инфицированных послеоперационных ран.Инфицированные раны после кесарева сечения или гистерэктомии были протестированы с медом и повидон-йодом с 70% этанолом. Результаты были в пользу группы меда (84,6% против 50%). [71] Субрахманьям и др. . провели исследование ( n = 30) на пациентах с гангреной Фурнье. Мед сравнивали с повязкой EUSOL, и скорость заживления ран значительно улучшилась в группе меда (18,5 дней против 26,5 дней) [72]. Основываясь на этих ограниченных исследованиях, нельзя делать вывод о полезной роли меда при хронических ранах.Тем не менее, рекомендуется проведение более крупных рандомизированных клинических испытаний для дальнейшего подтверждения полезности меда.

Из этого обзора ясно, что традиционная медицина из экстрактов растений и цветов может использоваться для лечения ран в определенных условиях. Из-за растущей стоимости медицинского обслуживания, особенно лечения ран, экономически выгодно использовать традиционную медицину для лечения ран. Однако необходимы крупные рандомизированные клинические испытания, чтобы получить более конкретные доказательства, подтверждающие использование народной медицины в лечении ран.Но это не отменяет обещаний о том, что традиционная медицина пригодна для лечения ран в будущем.

Уход за ранами с помощью традиционной, дополнительной и альтернативной медицины

Реферат

Уход за ранами постоянно развивается вместе с достижениями медицины. Поиск идеального перевязочного материала продолжается, поскольку специалисты по уходу за ранами сталкиваются с рядом проблем. В связи с появлением микроорганизмов с множественной устойчивостью и уменьшением количества новых антибиотиков специалисты по уходу за ранами пересмотрели древние методы лечения, используя традиционную и альтернативную медицину в лечении ран.Отношение людей к традиционной медицине также изменилось, и это очень обнадеживает. Концепция влажного заживления ран была хорошо принята, и традиционная медицина также использовала этот метод, чтобы ускорить процесс заживления. Было задокументировано несколько исследований по лечению ран с использованием травяной и традиционной медицины с разных континентов. Мед широко используется в практике ухода за ранами и дает прекрасные результаты. Недавние научные данные и клинические испытания, проведенные с использованием традиционной и альтернативной медицины в лечении ран, открывают большие надежды на будущее.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Альтернативная медицина, дополнительная медицина, традиционная медицина, заживление ран, лечение ран

ВВЕДЕНИЕ

Традиционная медицина (также известная как медицина коренных народов или народная медицина) включает в себя знания, которые до этого накапливались поколениями в различных обществах. эпоха современной медицины. Практики, известные как традиционная медицина, включают травяные, аюрведические, сиддха, унани, иранские, исламские, вьетнамские, китайские, иглоукалывание, мути, ифа, африканские и другие псевдомедицинские знания и практики по всему миру.

Он может включать в себя формализованные аспекты народной медицины, то есть давние лекарства, передаваемые и применяемые непрофессионалами.

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) определяет традиционную медицину как «оздоровительные практики, подходы, знания и убеждения, включающие лекарства на растительной, животной и минеральной основе, духовную терапию, мануальные техники и упражнения, применяемые по отдельности или в комбинации для лечения, диагностики и предотвращать болезни или поддерживать хорошее самочувствие »[1].

В некоторых странах Азии и Африки до 80% населения полагается на традиционную медицину для удовлетворения своих первичных медико-санитарных потребностей.Традиционную медицину, принятую вне ее традиционной культуры, часто называют дополнительной и альтернативной медициной (САМ).

Альтернативная медицина — это любая лечебная практика, «не относящаяся к сфере традиционной медицины». Он может быть основан на исторических или культурных традициях, а не на научных данных. Термины «дополнительная медицина» или «альтернативная медицина» в некоторых странах взаимозаменяемы с традиционной медициной. Они относятся к широкому кругу практик здравоохранения, которые не являются частью собственных традиций этой страны и не интегрированы в доминирующую систему здравоохранения.

Рана может быть определена как нарушение целостности эпителиальной выстилки кожи или слизистой оболочки. Травма, вызванная хирургическим вмешательством или несчастным случаем, приводит к разрушению тканей, разрушению кровеносных сосудов и экстравазации компонентов крови и гипоксии. Заживление ран — это сложный процесс, состоящий из трех фаз: воспалительная фаза, фаза пролиферации и фаза созревания.

Заживление ран является результатом взаимодействия цитокинов, факторов роста, крови и клеточных элементов, а также внеклеточного матрикса.Цитокины способствуют заживлению различными путями, такими как стимуляция выработки компонентов базальной мембраны, предотвращение обезвоживания, усиление воспаления и образование грануляционной ткани.

Раны можно разделить на острые и хронические в зависимости от их этиологии. Острые раны чаще всего возникают в результате несчастных случаев, например травм или ожогов. Острые раны обычно заживают в короткие сроки при правильном лечении. При заживлении ран всегда уместно добиться быстрого и полного заживления ран, поскольку образующаяся рубцовая ткань будет более удовлетворительной.Следовательно, цель каждого практикующего врача, лечащего раны, должна заключаться в скорейшем заживлении ран. Хронические раны заживают дольше или даже рецидивируют из-за основной патологии. Следовательно, в первую очередь следует определить и лечить основную проблему. При лечении хронических ран важно отметить, что биопленки играют важную роль в предотвращении заживления ран. Эти биопленки содержат различные микроорганизмы, которые замедляют процесс заживления ран. В связи с ростом устойчивости к антибиотикам все более популярными становятся альтернативные / традиционные лекарства для борьбы с этими микроорганизмами с множественной устойчивостью.Пациентам с хроническими ранами требуется длительная перевязка, что может стать серьезным финансовым бременем для системы здравоохранения. С появлением альтернативных и традиционных средств ухода за ранами финансовое бремя может быть значительно снижено. Концепция влажного заживления ран получила широкое признание, и многие практикующие врачи применяют этот метод [2]. В настоящее время коммерчески доступно несколько традиционных продуктов для ухода за ранами, включающих концепцию влажного заживления ран.

В целом важность и эффективность традиционной и дополнительной медицины возросли. Почти четыре миллиарда человек во всем мире используют растения в качестве лекарств, поскольку ничто другое не является доступным или доступным по цене [3]. Возраст пациентов, использующих альтернативную медицину, как правило, составляет от 30 до 49 лет [4]. Как правило, женщины чаще используют КАМ, чем мужчины. [5–7]

РАСТИТЕЛЬНЫЕ ЭКСТРАКТЫ И ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ УХОДА ЗА РАН

Травяные лекарства включают травы, травяные материалы, травяные препараты и готовые растительные продукты, содержащие активный ингредиент, части растения или другие растительные материалы или их комбинации.До появления современной медицины люди на всех континентах использовали лекарства растительного происхождения с доисторических времен.

Древние египетские лекарства 1000 г. до н.э., как известно, использовали чеснок, опиум, касторовое масло, кориандр, мяту, индиго и другие травы в медицине, а Ветхий Завет также упоминает использование и выращивание трав, включая мандрагору, вику, тмин, пшеницу и т. ячмень и рожь. В Индии аюрведическая медицина использовала многие травы, такие как куркума, возможно, еще в 1900 году до нашей эры.[8]

В первой китайской книге по травам, Shennong Bencao Jing, составленной во времена династии Хань, но датируемой гораздо более ранней датой, возможно, 2700 г. до н.э., перечислено 365 лекарственных растений и их применение, включая ма-Хуанг, куст, который ввел препарат эфедрин в современную медицину. Последующие поколения дополнили Шэннун Бенцао Цзин, как в Яосин Лун (Трактат о природе лекарственных трав), трактате династии Тан 7-го века по фитотерапии. Ряд традиций стал доминировать в практике фитотерапии в конце 20-го века: «классическая» система фитотерапии основана на греческих и римских источниках, системах сиддхов и аюрведической медицины из различных стран Южной Азии, китайской фитотерапии. , Традиционная африканская медицина, медицина унани-тибб, шаманская медицина и медицина коренных американцев.

Алоэ вера

Алоэ вера — это кактусоподобное растение, которое легко растет в жарких и засушливых условиях. Гель алоэ вера получают из слизистой части центра листа. Он используется на протяжении многих веков и является основным ингредиентом различных коммерческих продуктов для ухода за кожей и ранами. Его можно использовать перорально и местно для лечения широкого спектра заболеваний, связанных со здоровьем. Гель алоэ вера содержит витамины A, B, C, E, ферменты, полисахариды, аминокислоты, сахара и минералы.

При лечении острых и хронических ран в нескольких отчетах с использованием алоэ вера были продемонстрированы различные результаты. [9–13] Таким образом, можно сделать вывод, что, хотя есть подтверждающие доказательства того, что алоэ вера может улучшить скорость заживления ран, более крупные рандомизированные Для подтверждения этого необходимы контрольные испытания.

Традиционная китайская медицина

Традиционная китайская медицина (ТКМ) относится к широкому спектру медицинских практик, разделяющих общие теоретические концепции, которые были разработаны в Китае и основаны на более чем 2000-летней традиции, включая различные формы фитотерапии, иглоукалывание, массаж, упражнения (цигун) и диетотерапия.Хотя эти методы считаются альтернативной медициной в западном мире, они являются общей частью медицинского обслуживания во всей Восточной Азии, на них приходится примерно 40% всей медицинской помощи, оказываемой в Китае.

Несколько исследований, проведенных в Китае с использованием традиционной китайской медицины, продемонстрировали положительный результат лечения острых и хронических ран. Следовательно, ТКМ имеет большой потенциал для широкого использования в традиционном уходе за ранами. [14–16]

Различные лечебные травы в уходе за ранами

Использование лекарственных трав в лечении ран было очень обнадеживающим, и несколько исследователей по всему миру сделали это. начали публиковать свои результаты.резюмирует использование различных лекарственных трав при уходе за ранами.

Таблица 1

Различные лечебные травы в лечении ран

Роль меда в лечении ран

Мед представляет собой комбинацию различных сахаров, образующих высоковязкий сладкий раствор, который получают из нектара цветов или выделений других растений. Медоносная пчела (Apis mellifera) отвечает за эту смесь сахаров в дополнение к различным другим ферментам, которые происходят от пчел.

Использование меда для лечения ран насчитывает много веков. Мед использовался для лечения ран, ожогов, катаракты, кожных язв и диареи. [31,32] Лечебные свойства меда описаны в Библии, Коране и Торе. [33,34] Первые документы Священного Писания. египтяне использовали мед для лечения ран в 2000 году до нашей эры. [31] Египтяне использовали мед в качестве косметического крема, а также для бальзамирования умерших. В аюрведической медицине мед описывается как нектар жизни.Он широко используется для лечения различных заболеваний. [32] В начале 20-го века в различных отчетах было задокументировано использование меда при ожогах и подтверждены преимущества использования этого природного средства для лечения ран. [35,36] Однако с появлением антибиотиков и других хирургических процедур на смену меду пришла западная медицина. употребление меда. [37] Из-за широкого использования антибиотиков развилась резистентность к различным антибиотикам, и в них присутствует множество мультирезистентных микроорганизмов. По мере уменьшения количества новых антибиотиков возникновение альтернативной или традиционной медицины возродилось.Таким образом, возобновился интерес к использованию меда для лечения ран.

Состав и свойства меда

Мед содержит примерно 40% фруктозы, 30% глюкозы, 5% сахарозы и 20% воды. Он также содержит несколько аминокислот, антиоксиданты, витамины, минералы, глюкозооксидазу, которая производит перекись водорода, и глюконовую кислоту, которая придает меду кислый pH 3,2-4,5. [38] Поскольку Clostridium botulinum способна выжить в меде, существует риск ботулизма или гангрены.[39] Следовательно, рекомендуется стерилизовать мед с использованием гамма-излучения в дозе 25-50 кГр. [40]

Мед обладает уникальным свойством увлажнять раны благодаря своей очень вязкой природе. [41] Из-за гиперосмолярности меда он способен поглощать экссудаты из раны и обеспечивать заживление раны во влажной среде. Мед обладает антибактериальными, противовоспалительными и противогрибковыми свойствами. [42–46] Согласно исследованиям на животных и людях, мед увеличивает сокращение и эпителизацию ран.[47,48] Меду присуща способность увеличивать образование грануляционной ткани, стимулировать рост ткани и уменьшать отек, воспаление и синтез коллагена. [41] Мед способен уменьшить частоту послеоперационных спаек во внутрибрюшных тканях. [49] Мед может дезодорировать рану, а также уменьшать боль. [41]

Антибактериальные свойства обусловлены сложным взаимодействием различных компонентов меда, а именно перекиси водорода, метилгиоксаля и пчелиного дефенсина-1.[50,51] Из недавнего исследования Kwakman и др. был сделан вывод, что бактерицидная активность меда очень сложна и варьируется для отдельных видов бактерий. [50] Концентрация меда также влияет на антибактериальную активность; чем выше концентрация меда, тем сильнее его антибактериальное действие. [52]

Интересно, что разные источники меда обладают разной бактерицидной активностью. Следовательно, совершенно необходимо определить точный спектр антибактериальной активности различных источников меда.[50] Основными сортами меда медицинского назначения, одобренными для клинического применения, являются Manuka и Revamil®. Мед манука, который производится из куста манука (Leptospermum scoparium), происходит из Новой Зеландии и Австралии и был широко протестирован во всем мире. Однако почти на каждом субконтиненте есть индивидуальные источники меда и сообщается об успешных результатах лечения ран.

ТЕКУЩИЕ НАУЧНЫЕ ДАННЫЕ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ МЕДА ДЛЯ ЗАРАБОТКИ РАН

Было проведено множество клинических испытаний для проверки эффективности меда при лечении ран.В центре внимания этой статьи будут испытания на людях. Всего было проведено 20 клинических испытаний на острых и хронических ранах.

В отношении острых ран в общей сложности было проведено 15 клинических испытаний с использованием меда. Острые раны можно подразделить на острые ожоговые раны и острые раны, не вызванные ожогами.

Острые ожоговые раны

Всего было проведено 11 клинических испытаний острых ожоговых ран.

Субраманьям и др. . провели два испытания (n = 154) на неглубоких ожоговых ранах.В обоих исследованиях контрольная группа использовала сульфадиазин серебра (SSD), и обработанные медом раны имели лучшую скорость заживления. [53,54] Gupta et al . провели исследование (n = 108) на поверхностных и частичных ожоговых ранах, сравнивая мед с SSD. Они также отметили лучшую скорость заживления в группе меда (18,1 против 32,6 дней). [55] Шесть исследований (n = 1326) были проведены на ожоговых ранах частичной толщины. Пять из шести испытаний были проведены одним и тем же исследователем. Во всех шести испытаниях, проведенных на ожоговых ранах частичной толщины, мед показал лучшие лечебные свойства.[56–61] Субрахманьям и др. . провели два испытания смешанных частичных и полнослойных ожоговых ран. В первом исследовании (n = 50) они сравнивали медовую повязку с тангенциальным иссечением и пересадкой кожи. Группа пересадки кожи показала лучшие образцы заживления по сравнению с группой, получавшей мед (18,4 против 32 дней). [62] Во втором исследовании мед сравнивали с SSD у 100 пациентов с менее чем 40% общей площадью поверхности тела (TBSA) ожогов. Скорость заживления была лучше в группе, получавшей мед (15.4 против 17,2 дня). [63] Из этих отобранных клинических испытаний, кажется, существует тенденция в пользу меда для лечения поверхностных и частичных ожоговых ран, но убедительных доказательств нет. При лечении ожоговых ран на всю толщину мед, похоже, не улучшает заживление, поскольку было проведено только два исследования. Следовательно, необходимы дополнительные клинические испытания, чтобы подтвердить доказательства использования меда при ожоговых ранах поверхностной и частичной толщины.

Острые безожоговые раны

Было проведено четыре клинических испытания острых безожоговых ран.

Два исследования были проведены на хирургических ранах, образовавшихся в результате частичного или полного отрыва ногтя. В первом исследовании ( n = 51) Маршал и др. . не удалось сообщить о лучших показателях заживления с медом по сравнению с йодом (33,4 против 25,4 дней). [64] Во втором исследовании ( n = 100) McIntosh et al . также не достигли лучших показателей заживления с медом по сравнению с парафиновой марлевой повязкой (40,3 дней по сравнению с 39,98 дней) [65]. Было проведено только одно испытание ( n = 87) на рваных или неглубоких ссадинах в 2006 году Ingle и др. .В этом исследовании авторы сравнили мед и гидрогелевую повязку на ссадинах от 10 до 100 см 2 . Не было разницы в скорости заживления (16,48 дней против 16,88 дней) [66]. Из этих отобранных клинических испытаний недостаточно доказательств, подтверждающих использование меда при острых ранах, таких как ссадины, порезы или отрывы ногтей на пальцах ног. Испытание ( n = 75) было проведено Фаррой и др. . на донорских участках трансплантата кожи с использованием медового гидрогеля и простого гидрогеля.Группа медового гидрогеля показала лучшие показатели заживления на 10-й и 15-й дни [67].

В отношении хронических ран в общей сложности было проведено пять клинических испытаний с использованием меда. Два испытания были проведены для хронических язв ног. [68,69] Оба эти испытания не оказали значительного влияния меда на заживление язвы через 12 недель. Джулл и др. . провели исследование ( n = 368) хронических язв ног, сравнивая мед и обычную помощь. Время до полного заживления составляло 12 недель. Только 55,6% обработанных медом ран зажили за 12 недель по сравнению с 49.7% для контрольной группы. [68] Gethin и др. . провела другое исследование ( n = 108) хронических язв ног, сравнивая мед и гидрогель. Группа, принимавшая мед, не показала лучших показателей заживления (44,4% против 33,3%). [69] Weheida и др. . провела исследование на пролежнях I или II степени. Группа меда имела лучшие показатели заживления по сравнению с контрольной группой (8,20 против 9,93 дней) [70]. Но веских доказательств не хватает, поскольку необходимы дополнительные клинические исследования. Аль Вайли провел исследование ( n = 50) инфицированных послеоперационных ран.Инфицированные раны после кесарева сечения или гистерэктомии были протестированы с медом и повидон-йодом с 70% этанолом. Результаты были в пользу группы меда (84,6% против 50%). [71] Субрахманьям и др. . провели исследование ( n = 30) на пациентах с гангреной Фурнье. Мед сравнивали с повязкой EUSOL, и скорость заживления ран значительно улучшилась в группе меда (18,5 дней против 26,5 дней) [72]. Основываясь на этих ограниченных исследованиях, нельзя делать вывод о полезной роли меда при хронических ранах.Тем не менее, рекомендуется проведение более крупных рандомизированных клинических испытаний для дальнейшего подтверждения полезности меда.

Из этого обзора ясно, что традиционная медицина из экстрактов растений и цветов может использоваться для лечения ран в определенных условиях. Из-за растущей стоимости медицинского обслуживания, особенно лечения ран, экономически выгодно использовать традиционную медицину для лечения ран. Однако необходимы крупные рандомизированные клинические испытания, чтобы получить более конкретные доказательства, подтверждающие использование народной медицины в лечении ран.Но это не отменяет обещаний о том, что традиционная медицина пригодна для лечения ран в будущем.

A Биомеханическое, гистологическое, биохимическое и молекулярное исследование

Ethiop J Health Sci. 2018 ноя; 28 (6): 759–770.

, 1 , 2 , 3 , 4 , 1 , 2 и 1

Сушма Котиан

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных медицинских наук, Кастурб Колледж Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Кумар Бхат

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Сридхара Пай

3 Кафедра фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал , Карнатака, Индия

Джаякришна Наяк

4 Аюрведический колледж Шри Дхармастхалы Манджунатешвара, Удьявара, Удупи, Индия

Анне Соуза

1 Кафедра анатомии, Академия наук Манипала, Центр базовых медицинских наук Манипала, Центр медицинских наук Манипала Высшее образование, Манипал, Карнатака, Индия

Картик Гуришети

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Дивья Падма

1 Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

3 Кафедра фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

4 Аюрведический колледж Шри Дхармастхалы Манджунатешвара, Удьявара, Удупи, Индия

Автор, ответственный за переписку.

Финансирование:

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют, что эта рукопись была одобрена всеми авторами в ее форме и что конкурирующих интересов нет.

Поступила 02.06.2018; Принято 28 июня 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки

Традиционные лечебные системы, такие как Аюрведа и индийская народная медицина, эффективно использовали мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra и Nerium indicum для лечения ран.Известный результат приема этих лекарств — более быстрое заживление. Однако механизм действия на тканевом уровне, биохимические и молекулярные механизмы заживления недостаточно изучены и задокументированы. Таким образом, настоящее исследование было разработано для изучения эффективности этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинациях на иссеченных ранах у крыс линии Вистар.

Методы

Через два разных интервала (например, 8-й и 16-й день) биомеханические, гистологические и иммуногистохимические (ИГХ) параметры оценивали на участке раны.IHC сосредоточился на скорости воспалительного процесса, оценивая уровень цитокина, IL1β и ремоделирование ткани, изучая активность миофибробластов.

Результаты

Быстрая эпителизация, лучшее ремоделирование, благоприятные воспалительные изменения и адекватная активность миофибробластов на участке раны наблюдались во всех обработанных группах по сравнению с контролем.

Заключение

Таким образом, данное исследование полезно для изучения механизма действия этих традиционных лекарств и предоставления ценных научных данных.

Ключевые слова: Заживление ран, мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra, Nerium indicum

Введение

Каждая живая ткань реагирует на травму. Разрушение тканей, оперативное или травматическое, вызывает набор приоритетов в каждом организме. Они включают прекращение кровотечения, предотвращение инфицирования и восстановление целостности и функции тканей. Этот процесс восстановления тканей называется заживлением ран. Заживление ран проходит в три основных этапа: воспалительная фаза, при которой вырабатываются цитокины, факторы роста и другие медиаторы воспаления (1).

Следующая фаза заживления — это фаза пролиферации, в которой задействуются такие клетки, как фибробласты и эндотелиальные клетки. Последняя фаза включает производство и реорганизацию внеклеточного матрикса, ведущую к восстановлению и регенерации тканей (1).

Раны поражают людей с доисторических времен, и лечение заживления ран — это искусство, старое, как человечество (2). Исследования лекарств, полезных для заживления ран, — быстро развивающаяся область биомедицинских наук.Достижения в этой области позволили производить различные молекулы, связанные с процессом заживления ран. Однако современные тенденции в лечении ран направлены только на предотвращение воспаления и роста микробов в месте повреждения (2).

Несмотря на то, что были найдены новые методы, способствующие процессу заживления ран, уход за ранами нашел утешение в корнях медицины и включает некоторые традиционные методы лечения, использовавшиеся много веков назад. Аюрведа и народные лечебные системы включают в себя множество таких сущностей, которые традиционно ускоряют заживление.Целители жаждут традиционных лекарств из-за их высокой степени приемлемости и реальной переносимости (3).

Мед, топленое масло и лекарственные растения, такие как Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI), являются немногими из избранных традиционных лекарств, известных своим заживляющим действием в Аюрведе и народной медицине. Эффективность заживления, наблюдаемая в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, показывает многообещающие результаты, хотя научных доказательств их защиты мало.Несколько исследований продемонстрировали роль индивидуального применения меда (4) или топленого масла (5) в лечении ран.

GG — растение, имеющее лекарственное значение. Будучи травянистым многолетним бобовым, GG обычно населяет Южную Европу и некоторые части Азии, такие как Индия. Это старейшая и широко используемая трава с первобытных времен в году по Аюрведе . Он используется как лекарство, а также как ароматизатор, маскирующий неприятный вкус других лекарственных препаратов. Они также использовались египетской, китайской, греческой, индийской и римской цивилизациями в различных лекарственных препаратах.Ранозаживляющая, противовоспалительная, противоязвенная и регенеративная активность GG также подтверждена исследованиями (6). NI — еще одно растение, используемое в народной медицине для лечения ран. Это уроженец Средиземноморья, часто выращиваемый как декоративный кустарник в садах по всему миру. NI считается одним из самых ядовитых садовых растений, ядовитых во всех своих частях. Хотя это растение ядовито, оно известно своими полезными свойствами в народной медицине. NI обладает множеством лечебных свойств. Он служит вяжущим, глистогонным, афродизиаком, едким, желудочным, жаропонижающим, мочегонным, рвотным, отхаркивающим, кардиотоническим, противораковым препаратом и т. Д.Он используется при лечении астмы, почечных и пузырьковых камней, хронических проблем с желудком и кожей, укусов змей, болей в суставах, проказы, рака, язв и т. Д. (7).

Наш ранее опубликованный отчет о заживлении ран после разрезов с использованием этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинации предоставил ценные данные об изменениях микросреды в области раны, тем самым доказав эффективность этих лекарств (8). Однако влияние этих традиционных лекарств на скорость закрытия и эпителизации иссеченных ран редко обсуждается.Кроме того, подтверждающие количественные данные о воспалительных реакциях на травму и роли миофибробластов в поддержании гомеостаза кожи в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, редко доступны. Кроме того, влияние этих препаратов на экспрессию цитокинов также не исследовалось.

Таким образом, это исследование было разработано для научной оценки клеточных механизмов заживления ран этими лекарственными препаратами, то есть медом, топленым маслом и двумя лекарственными растениями — Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI).Это было сделано по отдельности и в комбинации в модели иссеченной раны, чтобы предоставить количественные доказательства того же. Это исследование может также дать понимание фактического процесса исцеления, механизмы которого в противном случае остаются неуловимыми.

Материалы и методы

Закупка и подготовка материалов для испытаний : Необработанный мед в сыром виде, коровье топленое масло и корни GG были закуплены в аюрведической аптеке Шри Дхармастхала Манджунатхешвара (SDM), Удьявара, Удупи.Листья NI были собраны в декабре в его естественной среде обитания в Удупи и были идентифицированы и подтверждены доктором К. Гопалом Кришной Бхатом, профессором ботаники (Rtd), Колледж Пурнапраджна, Удупи, Карнатака, Индия. Ваучерный образец хранился в отделении фармакогнозии Манипальского колледжа фармацевтических наук, Манипал.

Приготовление водного экстракта GG и NI : корни GG и листья NI сушили в тени в течение семи дней, а затем измельчали.Водную экстракцию проводили методом горячей мацерации (9).

Экспериментальные животные : Здоровые взрослые крысы-альбиносы Wistar любого пола весом 150–200 г, содержавшиеся в стандартных условиях окружающей среды по температуре и влажности (25 ± 0,5 ° C) и 12-часовому циклу свет / темнота, использовали в эксперименте. учиться. Животные находились на стандартной пеллетной диете и воде до libitum . Экспериментальное исследование было проведено в центральном помещении для животных Медицинского колледжа Кастурба, Манипал, Индия, после получения одобрения Институционального комитета по этике животных (см.№: IAEC / KMC / 49/2013).

Модель раны и группы лечения : Крыс Wistar использовали для иссечения ран. Животные были разделены на семь групп (по 6 животных в каждой группе): контроль (необработанные), мед, топленое масло, GG, NI, мед + топленое масло (H + G), комбинация всех исследуемых материалов (Tot).

Создание раны : Крыс анестезировали кетамином перед нанесением иссеченных ран. Шерсть на спине животного была выбрита, и область создаваемой раны была очерчена на спине животного метиленовым синим с использованием круглого трафарета из нержавеющей стали.Полную толщину иссеченной раны 2,5 см шириной (круглая площадь = 4,90 см, 2 ) и глубиной 0,2 см создавали вдоль отметок с помощью зубчатых щипцов, хирургического лезвия и заостренных ножниц. Вся рана осталась открытой.

План лечения : На открытые раны (покрывающие всю область раны и прилегающую область) местно наносили референтную дозу исследуемых материалов, т.е. 500 мг один раз в день. Были созданы два подкласса животных по семь групп в каждой, и за ними наблюдали, чтобы изучить природу заживления в течение 8 и 16 дней соответственно.

Биомеханический анализ

Период эпителизации : Количество дней, необходимое для выпадения остатков мертвой ткани (струпа) без остаточной сырой раны, рассматривалось как время, необходимое для эпителизации.

Измерение скорости закрытия / заживления раны : Площадь раны измеряли через день после первого дня ранения с помощью перманентного маркера и тонкой бумаги. Записанные следы ран были отсканированы, и площадь была измерена с помощью программного обеспечения анализатора изображений — Image J.Для расчета процента закрытия раны использовалась стандартизованная формула (10).

Кроме того, изображения раны с фиксированным расстоянием и увеличением снимались через день до 16 дня, а скорость закрытия раны сравнивалась с различными группами исследования. Во время плана лечения кожную ткань иссеченной раны собирали на 8-й и 16-й день для гистологического, биохимического и молекулярного исследований.

Гистологическая оценка : образцы кожи были обработаны для получения парафиновых срезов.После получения срезов (толщиной 5 мкм) образца слайды окрашивали гематоксилином и эозином (H и E) для определения скорости заживления ран и эпителизации и их количественного определения. Также было выявлено наличие кожных придатков, таких как волосяные фолликулы. Кроме того, специальное пятно, то есть трихром Массона, использовалось для оценки области заживления и сосудов, воспалительных реакций, состава и распределения волокон и ремоделирования тканей. Затем слайды были проанализированы и задокументированы с использованием микроскопических изображений с помощью ImagePro Premier 9.1 (Media Cybernetics, Роквилл, США).

Иммуногистохимия (ИГХ) : фиксированные формалином срезы ткани (толщиной 5 мкм) прикрепляли к предметным стеклам, предварительно обработанным поли-L-лизином (Sigma-Aldrich). Срезы депарафинизировали ксилолом и регидратировали в этаноле (от 100 до 50%). Извлечение антигена осуществляли путем нагревания срезов в буфере Трис-ЭДТА (0,01 М, pH 6,0) в течение 30 минут. Затем слайды обрабатывали 0,3% (об. / Об.) H3O2 в воде в течение пяти минут, чтобы минимизировать активность эндогенной пероксидазы.Затем срезы промывали TBS с 0,025% Triton X-100 и затем блокировали 10% нормальной козьей сывороткой (HIMEDIA, Индия) и 1% BSA в TBS в течение одного часа при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в течение 12 часов при 4 ° C с антителом против IL1 бета (ab9722, Abcam, Великобритания, разведение 1: 1000) или антителом против альфа-актина гладких мышц (ab5694, Abcam, Великобритания, разведение 1: 100). разбавлен в TBS с 1% BSA. После промывания TBS с 0,025% тритоном срезы инкубировали с конъюгированным с пероксидазой хрена вторичным козьим антителом против кролика (ab6721, Abcam, Великобритания, разведения 1: 1000) в течение одного часа при комнатной температуре.После этого проводили промывание в TBS и инкубацию с субстратом пероксидазы ImPACT NovaRED (HRP) (SK-4805, Vector Laboratories, США) в соответствии с инструкциями производителя. Затем предметные стекла контрастировали гематоксилином (Vector-Haematoxylin QS, H-3404, Vector Laboratories, США), обезвоживали, очищали и помещали в монтажную среду Vecta Mount (H-5000, Vector Laboratories, США). Затем слайды были проанализированы и задокументированы с помощью микроскопа Olympus (BX43), камеры Q-Imaging и ImagePro Premier 9.1 программное обеспечение (Media Cybernetics, Роквилл, США). Подсчет проводился вручную на фиксированной площади при 40-кратном увеличении, а затем рассчитывалось отношение количества клеток / мм2 грануляционной ткани. Во избежание путаницы в программе использовались цветные маркеры. Затем значения выражали в виде среднего ± SEM.

Статистический анализ : Результаты выражали как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM). Данные анализировали с помощью программного обеспечения Graph Pad Prism (Microsoft, Сан-Диего, Калифорния, США).Для сравнения между контрольной и обработанной группами использовали однофакторный дисперсионный анализ с последующим posthoc-тестом Даннета. Значение P ≤0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Биомеханический анализ

Период эпителизации : На лучшее заживление указывало раннее закрытие области раны во всех обработанных группах. Кроме того, скорость эпителизации также была выше во всех обработанных группах. Об этом свидетельствует быстрое увядание струпа на ране по сравнению с контролем в среднем на восьмой день заживления.Среди обработанных групп GG и Tot показали лучшие результаты с самым ранним увяданием ткани струпа в среднем на седьмой день заживления.

Измерение скорости закрытия / заживления ран : Лучшее сокращение раны также наблюдалось в обработанных группах (,). Значительное увеличение скорости сокращения раны постоянно отмечалось у животных, получавших Tot во все дни, то есть со 2-го по 16-й день и H + G с 6-го по 16-й день, соответственно, по сравнению с контролем.Далее на 10-й день все группы лечения показали значительное выздоровление. Кроме того, NI значительно увеличил сокращение раны по сравнению с контролем на шестой день, тогда как топленое масло на восьмой день. Таким образом, модель иссечения оценивала созревание рубца и сокращение раны, что побудило нас показать эффективность этих традиционных лекарственных препаратов на очищенных ранах.

Таблица 1

Влияние местного применения исследуемых материалов на скорость закрытия раны в модели иссеченной раны

9 6 6 2 2 94114 2 94,52 ± 0,52 0,25 §
Экспериментальные
группы
Модель иссеченной раны (% сокращения раны в днях) (Среднее ± SEM)

2 4 6 8 10 12 14 16
Контроль.90 ± 3,77 21,77 ± 7,01 22,98 ± 6,65 35,37 ± 5,11 55,49 ± 8,47 79,33 ± 2,65 87,19 ± 1,69 87,87 ± 0,59 87,87 ± 0,59 9049 23,43 ± 3,78 36,89 ± 3,78 44,31 ± 9,62 74,90 ± 5,3 § 85,05 ± 3,14 87,78 ± 2,18 90,58 ± 1,84
2,95 32.91 ± 5,85 64,68 ± 2,78 § 74,92 ± 2,05 § 86,55 ± 1,58 * 88,90 ± 0,75 91,04 ± 2,06
9 H 3,2 29,68 ± 3,68 46,58 ± 1,97 * 63,01 ± 3,13 § 78,71 ± 1,84 § 88,75 ± 2,06 § 92,19 ± 0,8509 92,19 ± 0,8506 §
GG 16.67 ± 3,57 24,13 ± 1,91 35,29 ± 3,97 51,81 ± 3,64 79,46 ± 1,35 § 86,19 ± 0,49 90,35 ± 0,95 92,22 ± 1,41 92,22 ± 1,41 2,52 20,54 ± 2,34 42,96 ± 8,38 * 41,44 ± 7,58 76,26 ± 2,83 § 82,54 ± 1,12 85,95 ± 1,28 90,29 ± 2,78 § 41.49 ± 2,67 § 52,02 ± 3,86 § 68,48 ± 4,79 § 82,09 ± 0,84 § 91,19 ± 0,94 §

Лучшее и быстрое заживление во всех обработанных группах модели удаления по сравнению с контролем

Гистологический анализ

Скорость заживления ран : Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.На это указывает ранняя эпителизация и закрытие раны соединительнотканным матриксом уже на 8-й день заживления (). К 16 дню эпителизация была завершена во всех обработанных группах. Лучшее ремоделирование тканей также наблюдалось во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны, в отличие от контроля. Интересно, что группы, получавшие мед, H + G, GG и Tot, также показали рост волосяных фолликулов в месте раны ().

Рисунок 2а: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E) на 8-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.

Рисунок 2b: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E), на 16-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех группах лечения по сравнению с контролем.Honey, GG и Tot также показали рост волосяных фолликулов (желтая стрелка). * указывает на заживление на месте раны.

Рисунок 2c: Графическое представление скорости эпителизации, количественно определенной гистологически во всех обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

Рис. 2d: Типичное изображение, показывающее разграничение между нормальной и заживающей кожей (желтая пунктирная линия). Неоэпителизацию измеряли от точки разграничения.

Эпителизация : Наблюдалась быстрая эпителизация, которая была статистически значимой во всех обработанных группах по сравнению с контролем на 8-й день заживления ран, как количественно с помощью программного обеспечения анализатора изображений (& d). Неоэпителизацию измеряли от точки границы между нормальной и заживающей кожей. Среди всех обработанных групп мед (H), Glycyrrhiza glabra, (GG) и H + G показали лучшую эпителизацию и закрытие ран по сравнению с другими группами.

Расположение в дерме : Повышенная васкуляризация наблюдалась во всех обработанных группах, в отличие от контроля к 8-му дню. Об этом свидетельствовали заполненные кровью вакуолизированные пространства (окрашенные в красный цвет) в области заживающей дермы. Также наблюдалось усиление набора клеток соединительной ткани по сравнению с контролем (). К 16 дню лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны.Повышенное отложение коллагена и регулярная перестройка наблюдались на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Это было подтверждено переплетением коллагеновых волокон (окрашено в зеленый цвет). Присутствие волосяных фолликулов в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, дополнительно подтвердило полное заживление и регенерацию кожи ().

Рисунок 3a: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 8-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют повышенную васкуляризацию во всех обработанных группах в отличие от контроля (* указывает место заживления).

Рисунок 3b: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 16-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют усиленное отложение и перестройку коллагена на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Волосяные фолликулы также наблюдались в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot (указано стрелкой).

Иммуногистохимический метод пероксидазы хрена (IHC-HRP)

Воспаление в области раны путем оценки экспрессии интерлейкинов (ИЛ1-бета) : ИЛ1-бета в ткани раны является индикатором воспалительной реакции, обычно выражаемой моноцитами , макрофаги и эпителиальные клетки.Оценка активности IL1 бета в заживляющих ранах показала, что все обработанные группы показали значительную воспалительную активность и лучшее заживление ().

Рисунок 4a: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4b: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4c: Графическое представление количества клеток, показывающих воспалительные реакции (экспрессия IL1-бета) на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

На 8 день уровень активности IL1-бета был значительно выше в группах, получавших H + G, GG, NI и Tot. Мед хотя и показал немного более высокую воспалительную активность, но не был статистически значимым. Топленое масло показало более низкую воспалительную активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали значительно сниженную экспрессию IL1-бета по сравнению с контролем. Это указывало на снижение воспалительной активности и, таким образом, лучшее заживление ран во всех обработанных группах в отличие от контроля (& c).

Активность миофибробластов и гладкомышечных клеток сосудов : SMA-положительные миофибробласты наблюдались в грануляционной ткани заживающей кожи. Реактивность SMA также была высокой в ​​клетках гладких мышц сосудов, что указывало на повышенную васкуляризацию ().

Фигура 5a: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Фигура 5b: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 5c: Графическое представление количества клеток, показывающее активность миофибробластов на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем.* p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

К 8 дню активность SMA-положительных клеток становилась все более высокой в ​​группах, получавших G, GG и NI, как в грануляционной ткани, так и вокруг прорастающих кровеносных сосудов по сравнению с контролем. Результаты были статистически значимыми. Tot также показал большую активность SMA-положительных клеток по сравнению с контролем. Однако это открытие не было статистически значимым. Группы, обработанные H и H + G, показали относительно более низкую активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали относительно меньшее количество SMA-положительной клеточной активности по сравнению с контролем, что указывает на лучшее ремоделирование и заживление. Тот хотя и показал более низкую экспрессию; однако это не было статистически значимым (& c).

Обсуждение

В последние годы считается, что полимолекулярная традиционная медицина имеет больше терапевтических преимуществ, чем аллопатическая медицина на основе одной молекулы при лечении ран. Это связано с тем, что эти препараты не только обладают противовоспалительным и антимикробным действием, но также обладают регенерирующим и омолаживающим действием (11).

Натуральные лекарства, такие как мед, топленое масло и два растительных экстракта, т. Е. GG и NI, известны своими способностями заживления ран в Аюрведе, и Народной медицине. Кроме того, их способность к заживлению ран по отдельности и в комбинации была научно подтверждена нашими предыдущими гистологическими и биомеханическими данными на моделях разрезов ран (8). Однако точные клеточные, биохимические и молекулярные механизмы исцеления редко исследуются. Таким образом, это исследование является попыткой дать представление о биомеханических, клеточных, биохимических и молекулярных условиях заживления с использованием иссеченных ран.

Эпителизация и скорость закрытия ран : Эпителизация является основным элементом заживления ран и определяет степень его достижения. Рану нельзя считать зажившей, если нет реэпителизации.

Польза этих традиционных лекарств, по отдельности и в комбинации, на лучшую эпителизацию во всех пролеченных группах была документально подтверждена нашим предыдущим исследованием (8). В этом исследовании скорость эпителизации была лучше во всех обработанных группах по сравнению с контрольной, как показали биомеханические и гистологические данные даже на модели иссеченной раны.Биомеханические данные показали более высокую скорость реэпителизации в таких группах, как GG и Tot, тогда как гистологически H, GG и H + G показали лучшие результаты.

Ранее было показано, что нарушение этого барьера приводит к инфицированию раны, и неспособность поддерживать этот барьер может серьезно замедлить процесс заживления ран (12). Следовательно, более быстрая эпителизация с помощью этих природных лекарств, как было замечено в настоящем исследовании, является ключом к успешному заживлению ран, поскольку эти эпителиальные клетки создают барьер между внешней средой и микроокружением раны.

Расположение в дерме : Нормальная кожа представляет собой корзинообразный узор переплетения, который невозможно полностью воспроизвести при ремоделировании рубца. Однако ремоделирование раны имеет важное значение и тесно связано с большим увеличением прочности на разрыв раны (13).

В данном исследовании лучшее отложение коллагена наблюдалось на участке раны во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Расположение коллагена было организовано и горизонтально переплетено в группах, получавших лечение.Это отличалось от косого и рыхлого расположения волокон коллагена в контрольной группе. Волосяные фолликулы также наблюдались на месте раны в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, что дополнительно подтверждает омолаживающий эффект этих групп на ремоделирование ран. Эти результаты совпадают с нашим ранее опубликованным отчетом о заживлении ран после разрезов (8).

Воспаление в области раны — путем оценки экспрессии интерлейкинов (IL1β) : Воспалительная фаза считается обязательной в процессе заживления, поскольку в ней задействованы лейкоциты, которые производят факторы роста и удаляют остатки раны.Некоторые медиаторы воспаления активируются в процессе заживления, например, IL-1 (14).

IL-1 является основным провоспалительным «тревожным» цитокином, главным образом полученным из макрофагов. Он способствует инфильтрации клеток, воспалению и восстановлению тканей в месте повреждения. Из 11 членов семейства лигандов IL-1, IL-1α и IL-1β являются двумя основными агонистическими молекулами. Напротив, антагонист рецептора IL-1 (IL-1Ra) является физиологическим ингибитором IL-1. По сравнению с IL-1β, IL-1α выражен меньше (15).Поэтому в данном исследовании он не рассматривается.

Процесс заживления ран включает сложную взаимосвязь между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами (16). Следовательно, можно предположить, что активность IL1 α и β обязательна на ранних стадиях заживления, способствуя воспалительной активности. Затем следует передача сигнала IL-1Ra, который снижает воспалительную активность и, таким образом, становится критически важным для нормального заживления ран. Результаты этого исследования еще раз подтверждают этот факт.

Мед, как известно, стимулирует выработку цитокинов, которые помогают заживлению ран (17). Однако, когда действие меда на провоспалительные цитокины ранее было изучено в хронических инфицированных венозных язвах ног, концентрация IL-1 не изменилась (16). В этом исследовании раны, обработанные медом, показали оптимальную провоспалительную активность на 8-й день заживления. Однако к концу 16 дня была выражена лучшая противовоспалительная активность, о чем свидетельствовали более низкие уровни IL1β. Это говорит о том, что мед может способствовать только необходимому количеству воспалительной активности, которая необходима на ранних этапах заживления.Позже он играет роль противовоспалительного средства, способствующего более быстрому заживлению ран.

Гхи также демонстрирует отличные свойства заживления ран благодаря своей антимикробной, иммуностимулирующей и антиоксидантной активности (4,8,18). Однако его прямое влияние на активность IL1 в ране менее изучено. В этом исследовании наблюдались лучшие противовоспалительные реакции ран, обработанных топленым маслом, по сравнению с контролем. К 8 дню заживления активность IL-1β была значительно ниже, что указывает на ранние воспалительные реакции.Сочетание меда и топленого масла продемонстрировало как провоспалительное, так и противовоспалительное действие, что привело к лучшему заживлению.

GG (солодка) доказала свою эффективность при острых и хронических воспалительных состояниях, таких как ревматоидный артрит. Это стало возможным за счет снижения активности IL1β (19). Однако о противовоспалительных свойствах GG при заживлении ран уделялось меньше внимания. В этом исследовании раны, обработанные GG, показали более высокий уровень IL1β на 8-й день, который значительно снизился к 16-му дню.Это указывает на то, что GG может регулировать экспрессию IL1β и проявляет как провоспалительную, так и противовоспалительную активность, которая необходима для заживления. Однако в этом случае провоспалительные реакции были продолжительными, что свидетельствует о продолжающемся привлечении клеток для ускорения заживления ран. Аналогичные наблюдения были сделаны в группах, получавших NI и Tot. Это может указывать на альтернативный режим более быстрого заживления, который требует дальнейшего изучения.

Таким образом, в этом исследовании была предпринята попытка объяснить влияние традиционных лекарств на активность передачи сигналов IL-1 при заживлении ран.Он показал, что эти традиционные лекарства обладают как про, так и противовоспалительной активностью в значительных количествах, что приводит к лучшему заживлению, которое может включать в себя различные методы процесса заживления, которые широко не исследованы.

Роль миофибробластов в заживлении ран : Повреждение тканей активирует фибробласты и превращает их в миофибробласты. Эти клетки создают длительные сокращения и активно продуцируют белки внеклеточного матрикса (ЕСМ), способствующие закрытию раны.И фибробласты, и миофибробласты играют решающую роль в заживлении ран. Однако эти клетки проявляют двойное действие в процессе заживления ран. Соответствующее количество генерирования силы и отложения матрицы является преимуществом для заживления, в то время как чрезмерное производство прочности и матрицы приводит к рубцеванию тканей и нарушению функции восстановленных тканей (20).

В исследовании, проведенном Haryanto et al., Ранняя активность миофибробластов наблюдалась в группах, получавших индонезийский мед по сравнению с гидроколлоидной повязкой i.е., на 3-й день. Мед, таким образом, ускорял образование грануляционной ткани больше, чем гидроколлоидная повязка. На 7 день активность миофибробластов достигла пика и была одинаковой во всех группах, а затем постепенно снижалась к 11 и 14 дням (21). Аналогичные наблюдения были сделаны Накадзимой и др. (22).

В этом исследовании мед и H + G не показали какой-либо значительной разницы в активности миофибробластов по сравнению с контролем на 8-й день. Однако на 16-й день активность миофибробластов значительно снизилась в этих группах по сравнению с контролем.

Лучшее закрытие ран также наблюдалось ранее в ранах, обработанных только топленым маслом и составами на основе топленого масла (4,8,18). Это объяснялось большей активностью миофибробластов. Однако прямое влияние топленого масла на активность миофибробластов менее обсуждается в доступной литературе. В этом исследовании раны, обработанные топленым маслом, показали значительно более высокую активность миофибробластов на 8-й день. На 16-й день их активность была значительно снижена. Это еще раз подтверждает роль топленого масла в раннем закрытии ран без образования рубцов.

GG также зарекомендовал себя как мощное средство для заживления ран благодаря своей противовоспалительной и регенеративной активности (6,8). Его положительное пролиферативное влияние на дермальные фибробласты также обсуждалось ранее (23). Эффект глицирризина на фиброз кожи, вызванный блеомицином (BLM), был изучен ранее. Здесь было обнаружено, что глицирризин облегчает фиброз кожи за счет значительного снижения содержания коллагена и количества миофибробластов (24). В этом исследовании раны, обработанные GG, показали оптимальную активность миофибробластов, что способствовало лучшему заживлению.Это еще раз подтверждает тот факт, что GG твердо контролирует активность миофибробластов при заживлении ран. Он увеличивает активность миофибробластов на ранних этапах заживления, вызывая сокращение и закрытие раны. В конце фазы заживления GG снижает активность миофибробластов, тем самым уменьшая чрезмерное отложение коллагена и тем самым предотвращая фиброз и образование рубцов.

Биомеханические данные в нашем предыдущем исследовании показали повышенную прочность на разрыв ран в группах, получавших NI, что указывает на большую прочность на разрыв (8).В этом исследовании NI продемонстрировал существенное влияние на активность миофибробластов, т.е. значительно увеличил активность миофибробластов на 8-й день, которая значительно снизилась на 16-й день. Это помогло улучшить заживление ран. Это еще раз подтверждает биомеханические данные, представленные в нашем предыдущем исследовании. Хотя Tot показал увеличение активности миофибробластов на 8-й день и снижение на 16-й день. Это открытие, однако, не было статистически значимым. Результаты были лучше только биологически.Таким образом, это исследование было сосредоточено на роли этих традиционных лекарств в полезной активности миофибробластов при заживлении ран, что ранее не обсуждалось.

Таким образом, это исследование сделало попытку дать представление о биомеханических и клеточных механизмах заживления ран. Испытательные материалы, использованные по отдельности и в комбинации, были полезны в исцелении своим уникальным способом. Требуется дальнейшая оценка, чтобы понять роль этих традиционных лекарств в лечении сложных с медицинской точки зрения ран.

Ссылки

1. Хант Т., Берк Дж., Барбул А., Гимбл М. Заживление ран. Наука. 1999; 284: 1775. [PubMed] [Google Scholar] 2. Робсон М.С., Стид Д.Л., Франц М.Г. Заживление ран: биологические особенности и подходы к максимальному увеличению траекторий заживления. Curr Probl Surg. 2001. 38 (2): 65–140. [PubMed] [Google Scholar] 3. Jagetia GC, Baliga MS, Venkatesh P, Ulloor JN. Влияние корневища имбиря (Zingiber officinale Rosc.) На выживаемость, глутатион и перекисное окисление липидов у мышей после воздействия гамма-излучения на все тело.Radiat Res. 2003; 160: 584–592. [PubMed] [Google Scholar] 4. Molan PC. Доказательства использования меда в качестве перевязочного материала. Int J Раны нижних конечностей. 2006; 5: 40–54. [PubMed] [Google Scholar] 5. Прасад V, Дорле АК. Оценка ранозаживляющей активности состава на основе топленого масла. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 38–47. [PubMed] [Google Scholar] 6. Олуми М.М., Дерахшанфар А., Никпур А. Лечебный потенциал экстракта корня солодки на кожных ранах у крыс. J Vet Res. 2007; 62: 147. [Google Scholar] 7.Чайтанья С.К., Сарвани М., Срилакшми С., Ашаджьоти В. Заживляющие травы — обзор. Int J Pharm Technol. 2010; 2: 603–624. [Google Scholar] 8. Kotian SR, Pai KSR, Nayak JK, Bangera H, Prasad K, Bhat KMR. Биомеханические, биохимические и гистологические доказательства ранозаживляющих свойств традиционных индийских лекарств. Int J Pharm Pharm Sci. 2015; 7 (11): 163–171. [Google Scholar] 9. Учебник по фармацевтике Дэвиса Х. Бентли. 6-е издание. Лондон: Баллиер, Тиндалл и Ко; 1956. С. 272–230. [Google Scholar] 10.Lundeberg TCM, Eriksson SV, Malm M. Электрическая стимуляция нервов улучшает заживление диабетических язв. Ann Plastic Surg. 1992; 29: 328–331. [PubMed] [Google Scholar] 11. Датта Х.С., Митра С.К., Патвардхан Б. Ранозаживляющая активность форм местного применения на основе аюрведы. Evid Based Complement Alternat Med. 2011; 2011: 134378. DOI: 10.1093 / ecam / nep015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Пастар И.П., Стоядинович О., Инь Н.К., Рамирес Х., Нусбаум А.Г., Савая А., Патель С.Б. и др. Эпителизация в заживлении ран: всесторонний обзор.Adv Уход за раной. 2014. 3 (7): 445–464. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Монако JL, Лоуренс WT. Острое заживление ран. Обзор. Clin Plastic Surg. 2003; 30: 1–12. [PubMed] [Google Scholar] 14. Graves DT, Nooh N, Gillen T., Davey M, Patel S, Cottrell D, Amar S. IL-1 играет решающую роль в оральном, но не кожном заживлении ран. J Immunol. 2001. 167: 5316–5320. [PubMed] [Google Scholar] 15. Карми Ю., Воронов Э., Дотан С. и др. Роль ИЛ-1, полученного из макрофагов, в индукции и поддержании ангиогенеза 1.J Immunol. 2009. 183: 4705–4714. [PubMed] [Google Scholar] 16. Ян С.К., Госс С., Алькантара С. и др. Влияние медицинского меда на провоспалительные цитокины при хронических инфицированных венозных язвах ног. Pak J Pharm Sci. 2015; 28 (3): 973–981. [Google Scholar] 17. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П., Блэр С., Партон Дж., Тонкс А. Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами. Цитокин. 2003. 21: 242–247. [PubMed] [Google Scholar] 18. Фулзеле С.В., Бхурчанди П.М., Канодже В.М., Джоши С.Б., Дорле А.К. Иммуностимулирующая активность Ashthamangal Ghrita у крыс.Ind J Pharmacol. 2002; 34: 194–197. [Google Scholar] 19. Ким К.Р., Чон С.К., Пак К.К., Чхве Дж. Х., Чон Пак Дж. Хай, Лим СС, Чунг В.Й. Противовоспалительные эффекты солодки и экстрактов жареной солодки на вызванное TPA острое воспаление и коллаген-индуцированный артрит у мышей. J Biomed Biotechnol. 2010; 2010: 709378. DOI: 10.1155 / 2010/709378. Epub 2010 17 марта [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Ли Б., Ван JHC. Фибробласты и миофибробласты в заживлении ран: создание и измерение силы.J Жизнеспособность тканей. 2011; 20 (4): 108. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Харьянто, Урай Т., Мукаи К., Суриади, Сугама Дж., Накатани Т. Эффективность индонезийского меда на ускорение заживления кожных ран: экспериментальное исследование на мышах. Раны. 2012. 24 (4): 110–119. [PubMed] [Google Scholar] 22. Накадзима Ю., Накано Ю., Фувано С. и др. Влияние трех типов японского меда на толстую рану у мышей. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 504537. DOI: 10.1155 / 2013/504537.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Котиан С. Р., Падма Д., Мадукар Р., Бхат КМР. Влияние природных лекарств на дермальные фибробласты при заживлении ран: исследование In-Vitro . Adv Sci Lett. 2017; 23 (3): 1949–1956. [Google Scholar] 24. Ямасита Т., Асано Ю., Танигучи Т. и др. Глицирризин улучшает фиброз, васкулопатию и воспаление на животных моделях системного склероза. J Invest Dermatol. 2017; 137 (3): 631. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

A Биомеханическое, гистологическое, биохимическое и молекулярное исследование

Ethiop J Health Sci.2018 ноя; 28 (6): 759–770.

, 1 , 2 , 3 , 4 , 1 , 2 и 1

Сушма Котиан

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных медицинских наук, Кастурб Колледж Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Кумар Бхат

2 Кафедра анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Sreedhara Pai

3 Депт.Фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Джаякришна Наяк

4 Шри Дхармастхала Манджунатешвара Аюрведический колледж, Удьявара, Удупи,

, Индия Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Картик Гуришети

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Дивья Падма

1 Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

3 Кафедра фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

4 Аюрведический колледж Шри Дхармастхалы Манджунатешвара, Удьявара, Удупи, Индия

Автор, ответственный за переписку.

Финансирование:

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют, что эта рукопись была одобрена всеми авторами в ее форме и что конкурирующих интересов нет.

Поступила 02.06.2018; Принято 28 июня 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки

Традиционные лечебные системы, такие как Аюрведа и индийская народная медицина, эффективно использовали мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra и Nerium indicum для лечения ран.Известный результат приема этих лекарств — более быстрое заживление. Однако механизм действия на тканевом уровне, биохимические и молекулярные механизмы заживления недостаточно изучены и задокументированы. Таким образом, настоящее исследование было разработано для изучения эффективности этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинациях на иссеченных ранах у крыс линии Вистар.

Методы

Через два разных интервала (например, 8-й и 16-й день) биомеханические, гистологические и иммуногистохимические (ИГХ) параметры оценивали на участке раны.IHC сосредоточился на скорости воспалительного процесса, оценивая уровень цитокина, IL1β и ремоделирование ткани, изучая активность миофибробластов.

Результаты

Быстрая эпителизация, лучшее ремоделирование, благоприятные воспалительные изменения и адекватная активность миофибробластов на участке раны наблюдались во всех обработанных группах по сравнению с контролем.

Заключение

Таким образом, данное исследование полезно для изучения механизма действия этих традиционных лекарств и предоставления ценных научных данных.

Ключевые слова: Заживление ран, мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra, Nerium indicum

Введение

Каждая живая ткань реагирует на травму. Разрушение тканей, оперативное или травматическое, вызывает набор приоритетов в каждом организме. Они включают прекращение кровотечения, предотвращение инфицирования и восстановление целостности и функции тканей. Этот процесс восстановления тканей называется заживлением ран. Заживление ран проходит в три основных этапа: воспалительная фаза, при которой вырабатываются цитокины, факторы роста и другие медиаторы воспаления (1).

Следующая фаза заживления — это фаза пролиферации, в которой задействуются такие клетки, как фибробласты и эндотелиальные клетки. Последняя фаза включает производство и реорганизацию внеклеточного матрикса, ведущую к восстановлению и регенерации тканей (1).

Раны поражают людей с доисторических времен, и лечение заживления ран — это искусство, старое, как человечество (2). Исследования лекарств, полезных для заживления ран, — быстро развивающаяся область биомедицинских наук.Достижения в этой области позволили производить различные молекулы, связанные с процессом заживления ран. Однако современные тенденции в лечении ран направлены только на предотвращение воспаления и роста микробов в месте повреждения (2).

Несмотря на то, что были найдены новые методы, способствующие процессу заживления ран, уход за ранами нашел утешение в корнях медицины и включает некоторые традиционные методы лечения, использовавшиеся много веков назад. Аюрведа и народные лечебные системы включают в себя множество таких сущностей, которые традиционно ускоряют заживление.Целители жаждут традиционных лекарств из-за их высокой степени приемлемости и реальной переносимости (3).

Мед, топленое масло и лекарственные растения, такие как Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI), являются немногими из избранных традиционных лекарств, известных своим заживляющим действием в Аюрведе и народной медицине. Эффективность заживления, наблюдаемая в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, показывает многообещающие результаты, хотя научных доказательств их защиты мало.Несколько исследований продемонстрировали роль индивидуального применения меда (4) или топленого масла (5) в лечении ран.

GG — растение, имеющее лекарственное значение. Будучи травянистым многолетним бобовым, GG обычно населяет Южную Европу и некоторые части Азии, такие как Индия. Это старейшая и широко используемая трава с первобытных времен в году по Аюрведе . Он используется как лекарство, а также как ароматизатор, маскирующий неприятный вкус других лекарственных препаратов. Они также использовались египетской, китайской, греческой, индийской и римской цивилизациями в различных лекарственных препаратах.Ранозаживляющая, противовоспалительная, противоязвенная и регенеративная активность GG также подтверждена исследованиями (6). NI — еще одно растение, используемое в народной медицине для лечения ран. Это уроженец Средиземноморья, часто выращиваемый как декоративный кустарник в садах по всему миру. NI считается одним из самых ядовитых садовых растений, ядовитых во всех своих частях. Хотя это растение ядовито, оно известно своими полезными свойствами в народной медицине. NI обладает множеством лечебных свойств. Он служит вяжущим, глистогонным, афродизиаком, едким, желудочным, жаропонижающим, мочегонным, рвотным, отхаркивающим, кардиотоническим, противораковым препаратом и т. Д.Он используется при лечении астмы, почечных и пузырьковых камней, хронических проблем с желудком и кожей, укусов змей, болей в суставах, проказы, рака, язв и т. Д. (7).

Наш ранее опубликованный отчет о заживлении ран после разрезов с использованием этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинации предоставил ценные данные об изменениях микросреды в области раны, тем самым доказав эффективность этих лекарств (8). Однако влияние этих традиционных лекарств на скорость закрытия и эпителизации иссеченных ран редко обсуждается.Кроме того, подтверждающие количественные данные о воспалительных реакциях на травму и роли миофибробластов в поддержании гомеостаза кожи в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, редко доступны. Кроме того, влияние этих препаратов на экспрессию цитокинов также не исследовалось.

Таким образом, это исследование было разработано для научной оценки клеточных механизмов заживления ран этими лекарственными препаратами, то есть медом, топленым маслом и двумя лекарственными растениями — Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI).Это было сделано по отдельности и в комбинации в модели иссеченной раны, чтобы предоставить количественные доказательства того же. Это исследование может также дать понимание фактического процесса исцеления, механизмы которого в противном случае остаются неуловимыми.

Материалы и методы

Закупка и подготовка материалов для испытаний : Необработанный мед в сыром виде, коровье топленое масло и корни GG были закуплены в аюрведической аптеке Шри Дхармастхала Манджунатхешвара (SDM), Удьявара, Удупи.Листья NI были собраны в декабре в его естественной среде обитания в Удупи и были идентифицированы и подтверждены доктором К. Гопалом Кришной Бхатом, профессором ботаники (Rtd), Колледж Пурнапраджна, Удупи, Карнатака, Индия. Ваучерный образец хранился в отделении фармакогнозии Манипальского колледжа фармацевтических наук, Манипал.

Приготовление водного экстракта GG и NI : корни GG и листья NI сушили в тени в течение семи дней, а затем измельчали.Водную экстракцию проводили методом горячей мацерации (9).

Экспериментальные животные : Здоровые взрослые крысы-альбиносы Wistar любого пола весом 150–200 г, содержавшиеся в стандартных условиях окружающей среды по температуре и влажности (25 ± 0,5 ° C) и 12-часовому циклу свет / темнота, использовали в эксперименте. учиться. Животные находились на стандартной пеллетной диете и воде до libitum . Экспериментальное исследование было проведено в центральном помещении для животных Медицинского колледжа Кастурба, Манипал, Индия, после получения одобрения Институционального комитета по этике животных (см.№: IAEC / KMC / 49/2013).

Модель раны и группы лечения : Крыс Wistar использовали для иссечения ран. Животные были разделены на семь групп (по 6 животных в каждой группе): контроль (необработанные), мед, топленое масло, GG, NI, мед + топленое масло (H + G), комбинация всех исследуемых материалов (Tot).

Создание раны : Крыс анестезировали кетамином перед нанесением иссеченных ран. Шерсть на спине животного была выбрита, и область создаваемой раны была очерчена на спине животного метиленовым синим с использованием круглого трафарета из нержавеющей стали.Полную толщину иссеченной раны 2,5 см шириной (круглая площадь = 4,90 см, 2 ) и глубиной 0,2 см создавали вдоль отметок с помощью зубчатых щипцов, хирургического лезвия и заостренных ножниц. Вся рана осталась открытой.

План лечения : На открытые раны (покрывающие всю область раны и прилегающую область) местно наносили референтную дозу исследуемых материалов, т.е. 500 мг один раз в день. Были созданы два подкласса животных по семь групп в каждой, и за ними наблюдали, чтобы изучить природу заживления в течение 8 и 16 дней соответственно.

Биомеханический анализ

Период эпителизации : Количество дней, необходимое для выпадения остатков мертвой ткани (струпа) без остаточной сырой раны, рассматривалось как время, необходимое для эпителизации.

Измерение скорости закрытия / заживления раны : Площадь раны измеряли через день после первого дня ранения с помощью перманентного маркера и тонкой бумаги. Записанные следы ран были отсканированы, и площадь была измерена с помощью программного обеспечения анализатора изображений — Image J.Для расчета процента закрытия раны использовалась стандартизованная формула (10).

Кроме того, изображения раны с фиксированным расстоянием и увеличением снимались через день до 16 дня, а скорость закрытия раны сравнивалась с различными группами исследования. Во время плана лечения кожную ткань иссеченной раны собирали на 8-й и 16-й день для гистологического, биохимического и молекулярного исследований.

Гистологическая оценка : образцы кожи были обработаны для получения парафиновых срезов.После получения срезов (толщиной 5 мкм) образца слайды окрашивали гематоксилином и эозином (H и E) для определения скорости заживления ран и эпителизации и их количественного определения. Также было выявлено наличие кожных придатков, таких как волосяные фолликулы. Кроме того, специальное пятно, то есть трихром Массона, использовалось для оценки области заживления и сосудов, воспалительных реакций, состава и распределения волокон и ремоделирования тканей. Затем слайды были проанализированы и задокументированы с использованием микроскопических изображений с помощью ImagePro Premier 9.1 (Media Cybernetics, Роквилл, США).

Иммуногистохимия (ИГХ) : фиксированные формалином срезы ткани (толщиной 5 мкм) прикрепляли к предметным стеклам, предварительно обработанным поли-L-лизином (Sigma-Aldrich). Срезы депарафинизировали ксилолом и регидратировали в этаноле (от 100 до 50%). Извлечение антигена осуществляли путем нагревания срезов в буфере Трис-ЭДТА (0,01 М, pH 6,0) в течение 30 минут. Затем слайды обрабатывали 0,3% (об. / Об.) H3O2 в воде в течение пяти минут, чтобы минимизировать активность эндогенной пероксидазы.Затем срезы промывали TBS с 0,025% Triton X-100 и затем блокировали 10% нормальной козьей сывороткой (HIMEDIA, Индия) и 1% BSA в TBS в течение одного часа при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в течение 12 часов при 4 ° C с антителом против IL1 бета (ab9722, Abcam, Великобритания, разведение 1: 1000) или антителом против альфа-актина гладких мышц (ab5694, Abcam, Великобритания, разведение 1: 100). разбавлен в TBS с 1% BSA. После промывания TBS с 0,025% тритоном срезы инкубировали с конъюгированным с пероксидазой хрена вторичным козьим антителом против кролика (ab6721, Abcam, Великобритания, разведения 1: 1000) в течение одного часа при комнатной температуре.После этого проводили промывание в TBS и инкубацию с субстратом пероксидазы ImPACT NovaRED (HRP) (SK-4805, Vector Laboratories, США) в соответствии с инструкциями производителя. Затем предметные стекла контрастировали гематоксилином (Vector-Haematoxylin QS, H-3404, Vector Laboratories, США), обезвоживали, очищали и помещали в монтажную среду Vecta Mount (H-5000, Vector Laboratories, США). Затем слайды были проанализированы и задокументированы с помощью микроскопа Olympus (BX43), камеры Q-Imaging и ImagePro Premier 9.1 программное обеспечение (Media Cybernetics, Роквилл, США). Подсчет проводился вручную на фиксированной площади при 40-кратном увеличении, а затем рассчитывалось отношение количества клеток / мм2 грануляционной ткани. Во избежание путаницы в программе использовались цветные маркеры. Затем значения выражали в виде среднего ± SEM.

Статистический анализ : Результаты выражали как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM). Данные анализировали с помощью программного обеспечения Graph Pad Prism (Microsoft, Сан-Диего, Калифорния, США).Для сравнения между контрольной и обработанной группами использовали однофакторный дисперсионный анализ с последующим posthoc-тестом Даннета. Значение P ≤0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Биомеханический анализ

Период эпителизации : На лучшее заживление указывало раннее закрытие области раны во всех обработанных группах. Кроме того, скорость эпителизации также была выше во всех обработанных группах. Об этом свидетельствует быстрое увядание струпа на ране по сравнению с контролем в среднем на восьмой день заживления.Среди обработанных групп GG и Tot показали лучшие результаты с самым ранним увяданием ткани струпа в среднем на седьмой день заживления.

Измерение скорости закрытия / заживления ран : Лучшее сокращение раны также наблюдалось в обработанных группах (,). Значительное увеличение скорости сокращения раны постоянно отмечалось у животных, получавших Tot во все дни, то есть со 2-го по 16-й день и H + G с 6-го по 16-й день, соответственно, по сравнению с контролем.Далее на 10-й день все группы лечения показали значительное выздоровление. Кроме того, NI значительно увеличил сокращение раны по сравнению с контролем на шестой день, тогда как топленое масло на восьмой день. Таким образом, модель иссечения оценивала созревание рубца и сокращение раны, что побудило нас показать эффективность этих традиционных лекарственных препаратов на очищенных ранах.

Таблица 1

Влияние местного применения исследуемых материалов на скорость закрытия раны в модели иссеченной раны

9 6 6 2 2 94114 2 94,52 ± 0,52 0,25 §
Экспериментальные
группы
Модель иссеченной раны (% сокращения раны в днях) (Среднее ± SEM)

2 4 6 8 10 12 14 16
Контроль.90 ± 3,77 21,77 ± 7,01 22,98 ± 6,65 35,37 ± 5,11 55,49 ± 8,47 79,33 ± 2,65 87,19 ± 1,69 87,87 ± 0,59 87,87 ± 0,59 9049 23,43 ± 3,78 36,89 ± 3,78 44,31 ± 9,62 74,90 ± 5,3 § 85,05 ± 3,14 87,78 ± 2,18 90,58 ± 1,84
2,95 32.91 ± 5,85 64,68 ± 2,78 § 74,92 ± 2,05 § 86,55 ± 1,58 * 88,90 ± 0,75 91,04 ± 2,06
9 H 3,2 29,68 ± 3,68 46,58 ± 1,97 * 63,01 ± 3,13 § 78,71 ± 1,84 § 88,75 ± 2,06 § 92,19 ± 0,8509 92,19 ± 0,8506 §
GG 16.67 ± 3,57 24,13 ± 1,91 35,29 ± 3,97 51,81 ± 3,64 79,46 ± 1,35 § 86,19 ± 0,49 90,35 ± 0,95 92,22 ± 1,41 92,22 ± 1,41 2,52 20,54 ± 2,34 42,96 ± 8,38 * 41,44 ± 7,58 76,26 ± 2,83 § 82,54 ± 1,12 85,95 ± 1,28 90,29 ± 2,78 § 41.49 ± 2,67 § 52,02 ± 3,86 § 68,48 ± 4,79 § 82,09 ± 0,84 § 91,19 ± 0,94 §

Лучшее и быстрое заживление во всех обработанных группах модели удаления по сравнению с контролем

Гистологический анализ

Скорость заживления ран : Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.На это указывает ранняя эпителизация и закрытие раны соединительнотканным матриксом уже на 8-й день заживления (). К 16 дню эпителизация была завершена во всех обработанных группах. Лучшее ремоделирование тканей также наблюдалось во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны, в отличие от контроля. Интересно, что группы, получавшие мед, H + G, GG и Tot, также показали рост волосяных фолликулов в месте раны ().

Рисунок 2а: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E) на 8-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.

Рисунок 2b: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E), на 16-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех группах лечения по сравнению с контролем.Honey, GG и Tot также показали рост волосяных фолликулов (желтая стрелка). * указывает на заживление на месте раны.

Рисунок 2c: Графическое представление скорости эпителизации, количественно определенной гистологически во всех обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

Рис. 2d: Типичное изображение, показывающее разграничение между нормальной и заживающей кожей (желтая пунктирная линия). Неоэпителизацию измеряли от точки разграничения.

Эпителизация : Наблюдалась быстрая эпителизация, которая была статистически значимой во всех обработанных группах по сравнению с контролем на 8-й день заживления ран, как количественно с помощью программного обеспечения анализатора изображений (& d). Неоэпителизацию измеряли от точки границы между нормальной и заживающей кожей. Среди всех обработанных групп мед (H), Glycyrrhiza glabra, (GG) и H + G показали лучшую эпителизацию и закрытие ран по сравнению с другими группами.

Расположение в дерме : Повышенная васкуляризация наблюдалась во всех обработанных группах, в отличие от контроля к 8-му дню. Об этом свидетельствовали заполненные кровью вакуолизированные пространства (окрашенные в красный цвет) в области заживающей дермы. Также наблюдалось усиление набора клеток соединительной ткани по сравнению с контролем (). К 16 дню лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны.Повышенное отложение коллагена и регулярная перестройка наблюдались на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Это было подтверждено переплетением коллагеновых волокон (окрашено в зеленый цвет). Присутствие волосяных фолликулов в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, дополнительно подтвердило полное заживление и регенерацию кожи ().

Рисунок 3a: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 8-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют повышенную васкуляризацию во всех обработанных группах в отличие от контроля (* указывает место заживления).

Рисунок 3b: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 16-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют усиленное отложение и перестройку коллагена на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Волосяные фолликулы также наблюдались в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot (указано стрелкой).

Иммуногистохимический метод пероксидазы хрена (IHC-HRP)

Воспаление в области раны путем оценки экспрессии интерлейкинов (ИЛ1-бета) : ИЛ1-бета в ткани раны является индикатором воспалительной реакции, обычно выражаемой моноцитами , макрофаги и эпителиальные клетки.Оценка активности IL1 бета в заживляющих ранах показала, что все обработанные группы показали значительную воспалительную активность и лучшее заживление ().

Рисунок 4a: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4b: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4c: Графическое представление количества клеток, показывающих воспалительные реакции (экспрессия IL1-бета) на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

На 8 день уровень активности IL1-бета был значительно выше в группах, получавших H + G, GG, NI и Tot. Мед хотя и показал немного более высокую воспалительную активность, но не был статистически значимым. Топленое масло показало более низкую воспалительную активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали значительно сниженную экспрессию IL1-бета по сравнению с контролем. Это указывало на снижение воспалительной активности и, таким образом, лучшее заживление ран во всех обработанных группах в отличие от контроля (& c).

Активность миофибробластов и гладкомышечных клеток сосудов : SMA-положительные миофибробласты наблюдались в грануляционной ткани заживающей кожи. Реактивность SMA также была высокой в ​​клетках гладких мышц сосудов, что указывало на повышенную васкуляризацию ().

Фигура 5a: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Фигура 5b: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 5c: Графическое представление количества клеток, показывающее активность миофибробластов на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем.* p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

К 8 дню активность SMA-положительных клеток становилась все более высокой в ​​группах, получавших G, GG и NI, как в грануляционной ткани, так и вокруг прорастающих кровеносных сосудов по сравнению с контролем. Результаты были статистически значимыми. Tot также показал большую активность SMA-положительных клеток по сравнению с контролем. Однако это открытие не было статистически значимым. Группы, обработанные H и H + G, показали относительно более низкую активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали относительно меньшее количество SMA-положительной клеточной активности по сравнению с контролем, что указывает на лучшее ремоделирование и заживление. Тот хотя и показал более низкую экспрессию; однако это не было статистически значимым (& c).

Обсуждение

В последние годы считается, что полимолекулярная традиционная медицина имеет больше терапевтических преимуществ, чем аллопатическая медицина на основе одной молекулы при лечении ран. Это связано с тем, что эти препараты не только обладают противовоспалительным и антимикробным действием, но также обладают регенерирующим и омолаживающим действием (11).

Натуральные лекарства, такие как мед, топленое масло и два растительных экстракта, т. Е. GG и NI, известны своими способностями заживления ран в Аюрведе, и Народной медицине. Кроме того, их способность к заживлению ран по отдельности и в комбинации была научно подтверждена нашими предыдущими гистологическими и биомеханическими данными на моделях разрезов ран (8). Однако точные клеточные, биохимические и молекулярные механизмы исцеления редко исследуются. Таким образом, это исследование является попыткой дать представление о биомеханических, клеточных, биохимических и молекулярных условиях заживления с использованием иссеченных ран.

Эпителизация и скорость закрытия ран : Эпителизация является основным элементом заживления ран и определяет степень его достижения. Рану нельзя считать зажившей, если нет реэпителизации.

Польза этих традиционных лекарств, по отдельности и в комбинации, на лучшую эпителизацию во всех пролеченных группах была документально подтверждена нашим предыдущим исследованием (8). В этом исследовании скорость эпителизации была лучше во всех обработанных группах по сравнению с контрольной, как показали биомеханические и гистологические данные даже на модели иссеченной раны.Биомеханические данные показали более высокую скорость реэпителизации в таких группах, как GG и Tot, тогда как гистологически H, GG и H + G показали лучшие результаты.

Ранее было показано, что нарушение этого барьера приводит к инфицированию раны, и неспособность поддерживать этот барьер может серьезно замедлить процесс заживления ран (12). Следовательно, более быстрая эпителизация с помощью этих природных лекарств, как было замечено в настоящем исследовании, является ключом к успешному заживлению ран, поскольку эти эпителиальные клетки создают барьер между внешней средой и микроокружением раны.

Расположение в дерме : Нормальная кожа представляет собой корзинообразный узор переплетения, который невозможно полностью воспроизвести при ремоделировании рубца. Однако ремоделирование раны имеет важное значение и тесно связано с большим увеличением прочности на разрыв раны (13).

В данном исследовании лучшее отложение коллагена наблюдалось на участке раны во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Расположение коллагена было организовано и горизонтально переплетено в группах, получавших лечение.Это отличалось от косого и рыхлого расположения волокон коллагена в контрольной группе. Волосяные фолликулы также наблюдались на месте раны в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, что дополнительно подтверждает омолаживающий эффект этих групп на ремоделирование ран. Эти результаты совпадают с нашим ранее опубликованным отчетом о заживлении ран после разрезов (8).

Воспаление в области раны — путем оценки экспрессии интерлейкинов (IL1β) : Воспалительная фаза считается обязательной в процессе заживления, поскольку в ней задействованы лейкоциты, которые производят факторы роста и удаляют остатки раны.Некоторые медиаторы воспаления активируются в процессе заживления, например, IL-1 (14).

IL-1 является основным провоспалительным «тревожным» цитокином, главным образом полученным из макрофагов. Он способствует инфильтрации клеток, воспалению и восстановлению тканей в месте повреждения. Из 11 членов семейства лигандов IL-1, IL-1α и IL-1β являются двумя основными агонистическими молекулами. Напротив, антагонист рецептора IL-1 (IL-1Ra) является физиологическим ингибитором IL-1. По сравнению с IL-1β, IL-1α выражен меньше (15).Поэтому в данном исследовании он не рассматривается.

Процесс заживления ран включает сложную взаимосвязь между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами (16). Следовательно, можно предположить, что активность IL1 α и β обязательна на ранних стадиях заживления, способствуя воспалительной активности. Затем следует передача сигнала IL-1Ra, который снижает воспалительную активность и, таким образом, становится критически важным для нормального заживления ран. Результаты этого исследования еще раз подтверждают этот факт.

Мед, как известно, стимулирует выработку цитокинов, которые помогают заживлению ран (17). Однако, когда действие меда на провоспалительные цитокины ранее было изучено в хронических инфицированных венозных язвах ног, концентрация IL-1 не изменилась (16). В этом исследовании раны, обработанные медом, показали оптимальную провоспалительную активность на 8-й день заживления. Однако к концу 16 дня была выражена лучшая противовоспалительная активность, о чем свидетельствовали более низкие уровни IL1β. Это говорит о том, что мед может способствовать только необходимому количеству воспалительной активности, которая необходима на ранних этапах заживления.Позже он играет роль противовоспалительного средства, способствующего более быстрому заживлению ран.

Гхи также демонстрирует отличные свойства заживления ран благодаря своей антимикробной, иммуностимулирующей и антиоксидантной активности (4,8,18). Однако его прямое влияние на активность IL1 в ране менее изучено. В этом исследовании наблюдались лучшие противовоспалительные реакции ран, обработанных топленым маслом, по сравнению с контролем. К 8 дню заживления активность IL-1β была значительно ниже, что указывает на ранние воспалительные реакции.Сочетание меда и топленого масла продемонстрировало как провоспалительное, так и противовоспалительное действие, что привело к лучшему заживлению.

GG (солодка) доказала свою эффективность при острых и хронических воспалительных состояниях, таких как ревматоидный артрит. Это стало возможным за счет снижения активности IL1β (19). Однако о противовоспалительных свойствах GG при заживлении ран уделялось меньше внимания. В этом исследовании раны, обработанные GG, показали более высокий уровень IL1β на 8-й день, который значительно снизился к 16-му дню.Это указывает на то, что GG может регулировать экспрессию IL1β и проявляет как провоспалительную, так и противовоспалительную активность, которая необходима для заживления. Однако в этом случае провоспалительные реакции были продолжительными, что свидетельствует о продолжающемся привлечении клеток для ускорения заживления ран. Аналогичные наблюдения были сделаны в группах, получавших NI и Tot. Это может указывать на альтернативный режим более быстрого заживления, который требует дальнейшего изучения.

Таким образом, в этом исследовании была предпринята попытка объяснить влияние традиционных лекарств на активность передачи сигналов IL-1 при заживлении ран.Он показал, что эти традиционные лекарства обладают как про, так и противовоспалительной активностью в значительных количествах, что приводит к лучшему заживлению, которое может включать в себя различные методы процесса заживления, которые широко не исследованы.

Роль миофибробластов в заживлении ран : Повреждение тканей активирует фибробласты и превращает их в миофибробласты. Эти клетки создают длительные сокращения и активно продуцируют белки внеклеточного матрикса (ЕСМ), способствующие закрытию раны.И фибробласты, и миофибробласты играют решающую роль в заживлении ран. Однако эти клетки проявляют двойное действие в процессе заживления ран. Соответствующее количество генерирования силы и отложения матрицы является преимуществом для заживления, в то время как чрезмерное производство прочности и матрицы приводит к рубцеванию тканей и нарушению функции восстановленных тканей (20).

В исследовании, проведенном Haryanto et al., Ранняя активность миофибробластов наблюдалась в группах, получавших индонезийский мед по сравнению с гидроколлоидной повязкой i.е., на 3-й день. Мед, таким образом, ускорял образование грануляционной ткани больше, чем гидроколлоидная повязка. На 7 день активность миофибробластов достигла пика и была одинаковой во всех группах, а затем постепенно снижалась к 11 и 14 дням (21). Аналогичные наблюдения были сделаны Накадзимой и др. (22).

В этом исследовании мед и H + G не показали какой-либо значительной разницы в активности миофибробластов по сравнению с контролем на 8-й день. Однако на 16-й день активность миофибробластов значительно снизилась в этих группах по сравнению с контролем.

Лучшее закрытие ран также наблюдалось ранее в ранах, обработанных только топленым маслом и составами на основе топленого масла (4,8,18). Это объяснялось большей активностью миофибробластов. Однако прямое влияние топленого масла на активность миофибробластов менее обсуждается в доступной литературе. В этом исследовании раны, обработанные топленым маслом, показали значительно более высокую активность миофибробластов на 8-й день. На 16-й день их активность была значительно снижена. Это еще раз подтверждает роль топленого масла в раннем закрытии ран без образования рубцов.

GG также зарекомендовал себя как мощное средство для заживления ран благодаря своей противовоспалительной и регенеративной активности (6,8). Его положительное пролиферативное влияние на дермальные фибробласты также обсуждалось ранее (23). Эффект глицирризина на фиброз кожи, вызванный блеомицином (BLM), был изучен ранее. Здесь было обнаружено, что глицирризин облегчает фиброз кожи за счет значительного снижения содержания коллагена и количества миофибробластов (24). В этом исследовании раны, обработанные GG, показали оптимальную активность миофибробластов, что способствовало лучшему заживлению.Это еще раз подтверждает тот факт, что GG твердо контролирует активность миофибробластов при заживлении ран. Он увеличивает активность миофибробластов на ранних этапах заживления, вызывая сокращение и закрытие раны. В конце фазы заживления GG снижает активность миофибробластов, тем самым уменьшая чрезмерное отложение коллагена и тем самым предотвращая фиброз и образование рубцов.

Биомеханические данные в нашем предыдущем исследовании показали повышенную прочность на разрыв ран в группах, получавших NI, что указывает на большую прочность на разрыв (8).В этом исследовании NI продемонстрировал существенное влияние на активность миофибробластов, т.е. значительно увеличил активность миофибробластов на 8-й день, которая значительно снизилась на 16-й день. Это помогло улучшить заживление ран. Это еще раз подтверждает биомеханические данные, представленные в нашем предыдущем исследовании. Хотя Tot показал увеличение активности миофибробластов на 8-й день и снижение на 16-й день. Это открытие, однако, не было статистически значимым. Результаты были лучше только биологически.Таким образом, это исследование было сосредоточено на роли этих традиционных лекарств в полезной активности миофибробластов при заживлении ран, что ранее не обсуждалось.

Таким образом, это исследование сделало попытку дать представление о биомеханических и клеточных механизмах заживления ран. Испытательные материалы, использованные по отдельности и в комбинации, были полезны в исцелении своим уникальным способом. Требуется дальнейшая оценка, чтобы понять роль этих традиционных лекарств в лечении сложных с медицинской точки зрения ран.

Ссылки

1. Хант Т., Берк Дж., Барбул А., Гимбл М. Заживление ран. Наука. 1999; 284: 1775. [PubMed] [Google Scholar] 2. Робсон М.С., Стид Д.Л., Франц М.Г. Заживление ран: биологические особенности и подходы к максимальному увеличению траекторий заживления. Curr Probl Surg. 2001. 38 (2): 65–140. [PubMed] [Google Scholar] 3. Jagetia GC, Baliga MS, Venkatesh P, Ulloor JN. Влияние корневища имбиря (Zingiber officinale Rosc.) На выживаемость, глутатион и перекисное окисление липидов у мышей после воздействия гамма-излучения на все тело.Radiat Res. 2003; 160: 584–592. [PubMed] [Google Scholar] 4. Molan PC. Доказательства использования меда в качестве перевязочного материала. Int J Раны нижних конечностей. 2006; 5: 40–54. [PubMed] [Google Scholar] 5. Прасад V, Дорле АК. Оценка ранозаживляющей активности состава на основе топленого масла. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 38–47. [PubMed] [Google Scholar] 6. Олуми М.М., Дерахшанфар А., Никпур А. Лечебный потенциал экстракта корня солодки на кожных ранах у крыс. J Vet Res. 2007; 62: 147. [Google Scholar] 7.Чайтанья С.К., Сарвани М., Срилакшми С., Ашаджьоти В. Заживляющие травы — обзор. Int J Pharm Technol. 2010; 2: 603–624. [Google Scholar] 8. Kotian SR, Pai KSR, Nayak JK, Bangera H, Prasad K, Bhat KMR. Биомеханические, биохимические и гистологические доказательства ранозаживляющих свойств традиционных индийских лекарств. Int J Pharm Pharm Sci. 2015; 7 (11): 163–171. [Google Scholar] 9. Учебник по фармацевтике Дэвиса Х. Бентли. 6-е издание. Лондон: Баллиер, Тиндалл и Ко; 1956. С. 272–230. [Google Scholar] 10.Lundeberg TCM, Eriksson SV, Malm M. Электрическая стимуляция нервов улучшает заживление диабетических язв. Ann Plastic Surg. 1992; 29: 328–331. [PubMed] [Google Scholar] 11. Датта Х.С., Митра С.К., Патвардхан Б. Ранозаживляющая активность форм местного применения на основе аюрведы. Evid Based Complement Alternat Med. 2011; 2011: 134378. DOI: 10.1093 / ecam / nep015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Пастар И.П., Стоядинович О., Инь Н.К., Рамирес Х., Нусбаум А.Г., Савая А., Патель С.Б. и др. Эпителизация в заживлении ран: всесторонний обзор.Adv Уход за раной. 2014. 3 (7): 445–464. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Монако JL, Лоуренс WT. Острое заживление ран. Обзор. Clin Plastic Surg. 2003; 30: 1–12. [PubMed] [Google Scholar] 14. Graves DT, Nooh N, Gillen T., Davey M, Patel S, Cottrell D, Amar S. IL-1 играет решающую роль в оральном, но не кожном заживлении ран. J Immunol. 2001. 167: 5316–5320. [PubMed] [Google Scholar] 15. Карми Ю., Воронов Э., Дотан С. и др. Роль ИЛ-1, полученного из макрофагов, в индукции и поддержании ангиогенеза 1.J Immunol. 2009. 183: 4705–4714. [PubMed] [Google Scholar] 16. Ян С.К., Госс С., Алькантара С. и др. Влияние медицинского меда на провоспалительные цитокины при хронических инфицированных венозных язвах ног. Pak J Pharm Sci. 2015; 28 (3): 973–981. [Google Scholar] 17. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П., Блэр С., Партон Дж., Тонкс А. Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами. Цитокин. 2003. 21: 242–247. [PubMed] [Google Scholar] 18. Фулзеле С.В., Бхурчанди П.М., Канодже В.М., Джоши С.Б., Дорле А.К. Иммуностимулирующая активность Ashthamangal Ghrita у крыс.Ind J Pharmacol. 2002; 34: 194–197. [Google Scholar] 19. Ким К.Р., Чон С.К., Пак К.К., Чхве Дж. Х., Чон Пак Дж. Хай, Лим СС, Чунг В.Й. Противовоспалительные эффекты солодки и экстрактов жареной солодки на вызванное TPA острое воспаление и коллаген-индуцированный артрит у мышей. J Biomed Biotechnol. 2010; 2010: 709378. DOI: 10.1155 / 2010/709378. Epub 2010 17 марта [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Ли Б., Ван JHC. Фибробласты и миофибробласты в заживлении ран: создание и измерение силы.J Жизнеспособность тканей. 2011; 20 (4): 108. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Харьянто, Урай Т., Мукаи К., Суриади, Сугама Дж., Накатани Т. Эффективность индонезийского меда на ускорение заживления кожных ран: экспериментальное исследование на мышах. Раны. 2012. 24 (4): 110–119. [PubMed] [Google Scholar] 22. Накадзима Ю., Накано Ю., Фувано С. и др. Влияние трех типов японского меда на толстую рану у мышей. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 504537. DOI: 10.1155 / 2013/504537.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Котиан С. Р., Падма Д., Мадукар Р., Бхат КМР. Влияние природных лекарств на дермальные фибробласты при заживлении ран: исследование In-Vitro . Adv Sci Lett. 2017; 23 (3): 1949–1956. [Google Scholar] 24. Ямасита Т., Асано Ю., Танигучи Т. и др. Глицирризин улучшает фиброз, васкулопатию и воспаление на животных моделях системного склероза. J Invest Dermatol. 2017; 137 (3): 631. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

A Биомеханическое, гистологическое, биохимическое и молекулярное исследование

Ethiop J Health Sci.2018 ноя; 28 (6): 759–770.

, 1 , 2 , 3 , 4 , 1 , 2 и 1

Сушма Котиан

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных медицинских наук, Кастурб Колледж Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Кумар Бхат

2 Кафедра анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Sreedhara Pai

3 Депт.Фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Джаякришна Наяк

4 Шри Дхармастхала Манджунатешвара Аюрведический колледж, Удьявара, Удупи,

, Индия Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Картик Гуришети

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Дивья Падма

1 Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

3 Кафедра фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

4 Аюрведический колледж Шри Дхармастхалы Манджунатешвара, Удьявара, Удупи, Индия

Автор, ответственный за переписку.

Финансирование:

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют, что эта рукопись была одобрена всеми авторами в ее форме и что конкурирующих интересов нет.

Поступила 02.06.2018; Принято 28 июня 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки

Традиционные лечебные системы, такие как Аюрведа и индийская народная медицина, эффективно использовали мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra и Nerium indicum для лечения ран.Известный результат приема этих лекарств — более быстрое заживление. Однако механизм действия на тканевом уровне, биохимические и молекулярные механизмы заживления недостаточно изучены и задокументированы. Таким образом, настоящее исследование было разработано для изучения эффективности этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинациях на иссеченных ранах у крыс линии Вистар.

Методы

Через два разных интервала (например, 8-й и 16-й день) биомеханические, гистологические и иммуногистохимические (ИГХ) параметры оценивали на участке раны.IHC сосредоточился на скорости воспалительного процесса, оценивая уровень цитокина, IL1β и ремоделирование ткани, изучая активность миофибробластов.

Результаты

Быстрая эпителизация, лучшее ремоделирование, благоприятные воспалительные изменения и адекватная активность миофибробластов на участке раны наблюдались во всех обработанных группах по сравнению с контролем.

Заключение

Таким образом, данное исследование полезно для изучения механизма действия этих традиционных лекарств и предоставления ценных научных данных.

Ключевые слова: Заживление ран, мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra, Nerium indicum

Введение

Каждая живая ткань реагирует на травму. Разрушение тканей, оперативное или травматическое, вызывает набор приоритетов в каждом организме. Они включают прекращение кровотечения, предотвращение инфицирования и восстановление целостности и функции тканей. Этот процесс восстановления тканей называется заживлением ран. Заживление ран проходит в три основных этапа: воспалительная фаза, при которой вырабатываются цитокины, факторы роста и другие медиаторы воспаления (1).

Следующая фаза заживления — это фаза пролиферации, в которой задействуются такие клетки, как фибробласты и эндотелиальные клетки. Последняя фаза включает производство и реорганизацию внеклеточного матрикса, ведущую к восстановлению и регенерации тканей (1).

Раны поражают людей с доисторических времен, и лечение заживления ран — это искусство, старое, как человечество (2). Исследования лекарств, полезных для заживления ран, — быстро развивающаяся область биомедицинских наук.Достижения в этой области позволили производить различные молекулы, связанные с процессом заживления ран. Однако современные тенденции в лечении ран направлены только на предотвращение воспаления и роста микробов в месте повреждения (2).

Несмотря на то, что были найдены новые методы, способствующие процессу заживления ран, уход за ранами нашел утешение в корнях медицины и включает некоторые традиционные методы лечения, использовавшиеся много веков назад. Аюрведа и народные лечебные системы включают в себя множество таких сущностей, которые традиционно ускоряют заживление.Целители жаждут традиционных лекарств из-за их высокой степени приемлемости и реальной переносимости (3).

Мед, топленое масло и лекарственные растения, такие как Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI), являются немногими из избранных традиционных лекарств, известных своим заживляющим действием в Аюрведе и народной медицине. Эффективность заживления, наблюдаемая в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, показывает многообещающие результаты, хотя научных доказательств их защиты мало.Несколько исследований продемонстрировали роль индивидуального применения меда (4) или топленого масла (5) в лечении ран.

GG — растение, имеющее лекарственное значение. Будучи травянистым многолетним бобовым, GG обычно населяет Южную Европу и некоторые части Азии, такие как Индия. Это старейшая и широко используемая трава с первобытных времен в году по Аюрведе . Он используется как лекарство, а также как ароматизатор, маскирующий неприятный вкус других лекарственных препаратов. Они также использовались египетской, китайской, греческой, индийской и римской цивилизациями в различных лекарственных препаратах.Ранозаживляющая, противовоспалительная, противоязвенная и регенеративная активность GG также подтверждена исследованиями (6). NI — еще одно растение, используемое в народной медицине для лечения ран. Это уроженец Средиземноморья, часто выращиваемый как декоративный кустарник в садах по всему миру. NI считается одним из самых ядовитых садовых растений, ядовитых во всех своих частях. Хотя это растение ядовито, оно известно своими полезными свойствами в народной медицине. NI обладает множеством лечебных свойств. Он служит вяжущим, глистогонным, афродизиаком, едким, желудочным, жаропонижающим, мочегонным, рвотным, отхаркивающим, кардиотоническим, противораковым препаратом и т. Д.Он используется при лечении астмы, почечных и пузырьковых камней, хронических проблем с желудком и кожей, укусов змей, болей в суставах, проказы, рака, язв и т. Д. (7).

Наш ранее опубликованный отчет о заживлении ран после разрезов с использованием этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинации предоставил ценные данные об изменениях микросреды в области раны, тем самым доказав эффективность этих лекарств (8). Однако влияние этих традиционных лекарств на скорость закрытия и эпителизации иссеченных ран редко обсуждается.Кроме того, подтверждающие количественные данные о воспалительных реакциях на травму и роли миофибробластов в поддержании гомеостаза кожи в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, редко доступны. Кроме того, влияние этих препаратов на экспрессию цитокинов также не исследовалось.

Таким образом, это исследование было разработано для научной оценки клеточных механизмов заживления ран этими лекарственными препаратами, то есть медом, топленым маслом и двумя лекарственными растениями — Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI).Это было сделано по отдельности и в комбинации в модели иссеченной раны, чтобы предоставить количественные доказательства того же. Это исследование может также дать понимание фактического процесса исцеления, механизмы которого в противном случае остаются неуловимыми.

Материалы и методы

Закупка и подготовка материалов для испытаний : Необработанный мед в сыром виде, коровье топленое масло и корни GG были закуплены в аюрведической аптеке Шри Дхармастхала Манджунатхешвара (SDM), Удьявара, Удупи.Листья NI были собраны в декабре в его естественной среде обитания в Удупи и были идентифицированы и подтверждены доктором К. Гопалом Кришной Бхатом, профессором ботаники (Rtd), Колледж Пурнапраджна, Удупи, Карнатака, Индия. Ваучерный образец хранился в отделении фармакогнозии Манипальского колледжа фармацевтических наук, Манипал.

Приготовление водного экстракта GG и NI : корни GG и листья NI сушили в тени в течение семи дней, а затем измельчали.Водную экстракцию проводили методом горячей мацерации (9).

Экспериментальные животные : Здоровые взрослые крысы-альбиносы Wistar любого пола весом 150–200 г, содержавшиеся в стандартных условиях окружающей среды по температуре и влажности (25 ± 0,5 ° C) и 12-часовому циклу свет / темнота, использовали в эксперименте. учиться. Животные находились на стандартной пеллетной диете и воде до libitum . Экспериментальное исследование было проведено в центральном помещении для животных Медицинского колледжа Кастурба, Манипал, Индия, после получения одобрения Институционального комитета по этике животных (см.№: IAEC / KMC / 49/2013).

Модель раны и группы лечения : Крыс Wistar использовали для иссечения ран. Животные были разделены на семь групп (по 6 животных в каждой группе): контроль (необработанные), мед, топленое масло, GG, NI, мед + топленое масло (H + G), комбинация всех исследуемых материалов (Tot).

Создание раны : Крыс анестезировали кетамином перед нанесением иссеченных ран. Шерсть на спине животного была выбрита, и область создаваемой раны была очерчена на спине животного метиленовым синим с использованием круглого трафарета из нержавеющей стали.Полную толщину иссеченной раны 2,5 см шириной (круглая площадь = 4,90 см, 2 ) и глубиной 0,2 см создавали вдоль отметок с помощью зубчатых щипцов, хирургического лезвия и заостренных ножниц. Вся рана осталась открытой.

План лечения : На открытые раны (покрывающие всю область раны и прилегающую область) местно наносили референтную дозу исследуемых материалов, т.е. 500 мг один раз в день. Были созданы два подкласса животных по семь групп в каждой, и за ними наблюдали, чтобы изучить природу заживления в течение 8 и 16 дней соответственно.

Биомеханический анализ

Период эпителизации : Количество дней, необходимое для выпадения остатков мертвой ткани (струпа) без остаточной сырой раны, рассматривалось как время, необходимое для эпителизации.

Измерение скорости закрытия / заживления раны : Площадь раны измеряли через день после первого дня ранения с помощью перманентного маркера и тонкой бумаги. Записанные следы ран были отсканированы, и площадь была измерена с помощью программного обеспечения анализатора изображений — Image J.Для расчета процента закрытия раны использовалась стандартизованная формула (10).

Кроме того, изображения раны с фиксированным расстоянием и увеличением снимались через день до 16 дня, а скорость закрытия раны сравнивалась с различными группами исследования. Во время плана лечения кожную ткань иссеченной раны собирали на 8-й и 16-й день для гистологического, биохимического и молекулярного исследований.

Гистологическая оценка : образцы кожи были обработаны для получения парафиновых срезов.После получения срезов (толщиной 5 мкм) образца слайды окрашивали гематоксилином и эозином (H и E) для определения скорости заживления ран и эпителизации и их количественного определения. Также было выявлено наличие кожных придатков, таких как волосяные фолликулы. Кроме того, специальное пятно, то есть трихром Массона, использовалось для оценки области заживления и сосудов, воспалительных реакций, состава и распределения волокон и ремоделирования тканей. Затем слайды были проанализированы и задокументированы с использованием микроскопических изображений с помощью ImagePro Premier 9.1 (Media Cybernetics, Роквилл, США).

Иммуногистохимия (ИГХ) : фиксированные формалином срезы ткани (толщиной 5 мкм) прикрепляли к предметным стеклам, предварительно обработанным поли-L-лизином (Sigma-Aldrich). Срезы депарафинизировали ксилолом и регидратировали в этаноле (от 100 до 50%). Извлечение антигена осуществляли путем нагревания срезов в буфере Трис-ЭДТА (0,01 М, pH 6,0) в течение 30 минут. Затем слайды обрабатывали 0,3% (об. / Об.) H3O2 в воде в течение пяти минут, чтобы минимизировать активность эндогенной пероксидазы.Затем срезы промывали TBS с 0,025% Triton X-100 и затем блокировали 10% нормальной козьей сывороткой (HIMEDIA, Индия) и 1% BSA в TBS в течение одного часа при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в течение 12 часов при 4 ° C с антителом против IL1 бета (ab9722, Abcam, Великобритания, разведение 1: 1000) или антителом против альфа-актина гладких мышц (ab5694, Abcam, Великобритания, разведение 1: 100). разбавлен в TBS с 1% BSA. После промывания TBS с 0,025% тритоном срезы инкубировали с конъюгированным с пероксидазой хрена вторичным козьим антителом против кролика (ab6721, Abcam, Великобритания, разведения 1: 1000) в течение одного часа при комнатной температуре.После этого проводили промывание в TBS и инкубацию с субстратом пероксидазы ImPACT NovaRED (HRP) (SK-4805, Vector Laboratories, США) в соответствии с инструкциями производителя. Затем предметные стекла контрастировали гематоксилином (Vector-Haematoxylin QS, H-3404, Vector Laboratories, США), обезвоживали, очищали и помещали в монтажную среду Vecta Mount (H-5000, Vector Laboratories, США). Затем слайды были проанализированы и задокументированы с помощью микроскопа Olympus (BX43), камеры Q-Imaging и ImagePro Premier 9.1 программное обеспечение (Media Cybernetics, Роквилл, США). Подсчет проводился вручную на фиксированной площади при 40-кратном увеличении, а затем рассчитывалось отношение количества клеток / мм2 грануляционной ткани. Во избежание путаницы в программе использовались цветные маркеры. Затем значения выражали в виде среднего ± SEM.

Статистический анализ : Результаты выражали как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM). Данные анализировали с помощью программного обеспечения Graph Pad Prism (Microsoft, Сан-Диего, Калифорния, США).Для сравнения между контрольной и обработанной группами использовали однофакторный дисперсионный анализ с последующим posthoc-тестом Даннета. Значение P ≤0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Биомеханический анализ

Период эпителизации : На лучшее заживление указывало раннее закрытие области раны во всех обработанных группах. Кроме того, скорость эпителизации также была выше во всех обработанных группах. Об этом свидетельствует быстрое увядание струпа на ране по сравнению с контролем в среднем на восьмой день заживления.Среди обработанных групп GG и Tot показали лучшие результаты с самым ранним увяданием ткани струпа в среднем на седьмой день заживления.

Измерение скорости закрытия / заживления ран : Лучшее сокращение раны также наблюдалось в обработанных группах (,). Значительное увеличение скорости сокращения раны постоянно отмечалось у животных, получавших Tot во все дни, то есть со 2-го по 16-й день и H + G с 6-го по 16-й день, соответственно, по сравнению с контролем.Далее на 10-й день все группы лечения показали значительное выздоровление. Кроме того, NI значительно увеличил сокращение раны по сравнению с контролем на шестой день, тогда как топленое масло на восьмой день. Таким образом, модель иссечения оценивала созревание рубца и сокращение раны, что побудило нас показать эффективность этих традиционных лекарственных препаратов на очищенных ранах.

Таблица 1

Влияние местного применения исследуемых материалов на скорость закрытия раны в модели иссеченной раны

9 6 6 2 2 94114 2 94,52 ± 0,52 0,25 §
Экспериментальные
группы
Модель иссеченной раны (% сокращения раны в днях) (Среднее ± SEM)

2 4 6 8 10 12 14 16
Контроль.90 ± 3,77 21,77 ± 7,01 22,98 ± 6,65 35,37 ± 5,11 55,49 ± 8,47 79,33 ± 2,65 87,19 ± 1,69 87,87 ± 0,59 87,87 ± 0,59 9049 23,43 ± 3,78 36,89 ± 3,78 44,31 ± 9,62 74,90 ± 5,3 § 85,05 ± 3,14 87,78 ± 2,18 90,58 ± 1,84
2,95 32.91 ± 5,85 64,68 ± 2,78 § 74,92 ± 2,05 § 86,55 ± 1,58 * 88,90 ± 0,75 91,04 ± 2,06
9 H 3,2 29,68 ± 3,68 46,58 ± 1,97 * 63,01 ± 3,13 § 78,71 ± 1,84 § 88,75 ± 2,06 § 92,19 ± 0,8509 92,19 ± 0,8506 §
GG 16.67 ± 3,57 24,13 ± 1,91 35,29 ± 3,97 51,81 ± 3,64 79,46 ± 1,35 § 86,19 ± 0,49 90,35 ± 0,95 92,22 ± 1,41 92,22 ± 1,41 2,52 20,54 ± 2,34 42,96 ± 8,38 * 41,44 ± 7,58 76,26 ± 2,83 § 82,54 ± 1,12 85,95 ± 1,28 90,29 ± 2,78 § 41.49 ± 2,67 § 52,02 ± 3,86 § 68,48 ± 4,79 § 82,09 ± 0,84 § 91,19 ± 0,94 §

Лучшее и быстрое заживление во всех обработанных группах модели удаления по сравнению с контролем

Гистологический анализ

Скорость заживления ран : Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.На это указывает ранняя эпителизация и закрытие раны соединительнотканным матриксом уже на 8-й день заживления (). К 16 дню эпителизация была завершена во всех обработанных группах. Лучшее ремоделирование тканей также наблюдалось во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны, в отличие от контроля. Интересно, что группы, получавшие мед, H + G, GG и Tot, также показали рост волосяных фолликулов в месте раны ().

Рисунок 2а: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E) на 8-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.

Рисунок 2b: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E), на 16-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех группах лечения по сравнению с контролем.Honey, GG и Tot также показали рост волосяных фолликулов (желтая стрелка). * указывает на заживление на месте раны.

Рисунок 2c: Графическое представление скорости эпителизации, количественно определенной гистологически во всех обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

Рис. 2d: Типичное изображение, показывающее разграничение между нормальной и заживающей кожей (желтая пунктирная линия). Неоэпителизацию измеряли от точки разграничения.

Эпителизация : Наблюдалась быстрая эпителизация, которая была статистически значимой во всех обработанных группах по сравнению с контролем на 8-й день заживления ран, как количественно с помощью программного обеспечения анализатора изображений (& d). Неоэпителизацию измеряли от точки границы между нормальной и заживающей кожей. Среди всех обработанных групп мед (H), Glycyrrhiza glabra, (GG) и H + G показали лучшую эпителизацию и закрытие ран по сравнению с другими группами.

Расположение в дерме : Повышенная васкуляризация наблюдалась во всех обработанных группах, в отличие от контроля к 8-му дню. Об этом свидетельствовали заполненные кровью вакуолизированные пространства (окрашенные в красный цвет) в области заживающей дермы. Также наблюдалось усиление набора клеток соединительной ткани по сравнению с контролем (). К 16 дню лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны.Повышенное отложение коллагена и регулярная перестройка наблюдались на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Это было подтверждено переплетением коллагеновых волокон (окрашено в зеленый цвет). Присутствие волосяных фолликулов в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, дополнительно подтвердило полное заживление и регенерацию кожи ().

Рисунок 3a: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 8-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют повышенную васкуляризацию во всех обработанных группах в отличие от контроля (* указывает место заживления).

Рисунок 3b: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 16-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют усиленное отложение и перестройку коллагена на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Волосяные фолликулы также наблюдались в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot (указано стрелкой).

Иммуногистохимический метод пероксидазы хрена (IHC-HRP)

Воспаление в области раны путем оценки экспрессии интерлейкинов (ИЛ1-бета) : ИЛ1-бета в ткани раны является индикатором воспалительной реакции, обычно выражаемой моноцитами , макрофаги и эпителиальные клетки.Оценка активности IL1 бета в заживляющих ранах показала, что все обработанные группы показали значительную воспалительную активность и лучшее заживление ().

Рисунок 4a: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4b: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4c: Графическое представление количества клеток, показывающих воспалительные реакции (экспрессия IL1-бета) на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

На 8 день уровень активности IL1-бета был значительно выше в группах, получавших H + G, GG, NI и Tot. Мед хотя и показал немного более высокую воспалительную активность, но не был статистически значимым. Топленое масло показало более низкую воспалительную активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали значительно сниженную экспрессию IL1-бета по сравнению с контролем. Это указывало на снижение воспалительной активности и, таким образом, лучшее заживление ран во всех обработанных группах в отличие от контроля (& c).

Активность миофибробластов и гладкомышечных клеток сосудов : SMA-положительные миофибробласты наблюдались в грануляционной ткани заживающей кожи. Реактивность SMA также была высокой в ​​клетках гладких мышц сосудов, что указывало на повышенную васкуляризацию ().

Фигура 5a: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Фигура 5b: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 5c: Графическое представление количества клеток, показывающее активность миофибробластов на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем.* p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

К 8 дню активность SMA-положительных клеток становилась все более высокой в ​​группах, получавших G, GG и NI, как в грануляционной ткани, так и вокруг прорастающих кровеносных сосудов по сравнению с контролем. Результаты были статистически значимыми. Tot также показал большую активность SMA-положительных клеток по сравнению с контролем. Однако это открытие не было статистически значимым. Группы, обработанные H и H + G, показали относительно более низкую активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали относительно меньшее количество SMA-положительной клеточной активности по сравнению с контролем, что указывает на лучшее ремоделирование и заживление. Тот хотя и показал более низкую экспрессию; однако это не было статистически значимым (& c).

Обсуждение

В последние годы считается, что полимолекулярная традиционная медицина имеет больше терапевтических преимуществ, чем аллопатическая медицина на основе одной молекулы при лечении ран. Это связано с тем, что эти препараты не только обладают противовоспалительным и антимикробным действием, но также обладают регенерирующим и омолаживающим действием (11).

Натуральные лекарства, такие как мед, топленое масло и два растительных экстракта, т. Е. GG и NI, известны своими способностями заживления ран в Аюрведе, и Народной медицине. Кроме того, их способность к заживлению ран по отдельности и в комбинации была научно подтверждена нашими предыдущими гистологическими и биомеханическими данными на моделях разрезов ран (8). Однако точные клеточные, биохимические и молекулярные механизмы исцеления редко исследуются. Таким образом, это исследование является попыткой дать представление о биомеханических, клеточных, биохимических и молекулярных условиях заживления с использованием иссеченных ран.

Эпителизация и скорость закрытия ран : Эпителизация является основным элементом заживления ран и определяет степень его достижения. Рану нельзя считать зажившей, если нет реэпителизации.

Польза этих традиционных лекарств, по отдельности и в комбинации, на лучшую эпителизацию во всех пролеченных группах была документально подтверждена нашим предыдущим исследованием (8). В этом исследовании скорость эпителизации была лучше во всех обработанных группах по сравнению с контрольной, как показали биомеханические и гистологические данные даже на модели иссеченной раны.Биомеханические данные показали более высокую скорость реэпителизации в таких группах, как GG и Tot, тогда как гистологически H, GG и H + G показали лучшие результаты.

Ранее было показано, что нарушение этого барьера приводит к инфицированию раны, и неспособность поддерживать этот барьер может серьезно замедлить процесс заживления ран (12). Следовательно, более быстрая эпителизация с помощью этих природных лекарств, как было замечено в настоящем исследовании, является ключом к успешному заживлению ран, поскольку эти эпителиальные клетки создают барьер между внешней средой и микроокружением раны.

Расположение в дерме : Нормальная кожа представляет собой корзинообразный узор переплетения, который невозможно полностью воспроизвести при ремоделировании рубца. Однако ремоделирование раны имеет важное значение и тесно связано с большим увеличением прочности на разрыв раны (13).

В данном исследовании лучшее отложение коллагена наблюдалось на участке раны во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Расположение коллагена было организовано и горизонтально переплетено в группах, получавших лечение.Это отличалось от косого и рыхлого расположения волокон коллагена в контрольной группе. Волосяные фолликулы также наблюдались на месте раны в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, что дополнительно подтверждает омолаживающий эффект этих групп на ремоделирование ран. Эти результаты совпадают с нашим ранее опубликованным отчетом о заживлении ран после разрезов (8).

Воспаление в области раны — путем оценки экспрессии интерлейкинов (IL1β) : Воспалительная фаза считается обязательной в процессе заживления, поскольку в ней задействованы лейкоциты, которые производят факторы роста и удаляют остатки раны.Некоторые медиаторы воспаления активируются в процессе заживления, например, IL-1 (14).

IL-1 является основным провоспалительным «тревожным» цитокином, главным образом полученным из макрофагов. Он способствует инфильтрации клеток, воспалению и восстановлению тканей в месте повреждения. Из 11 членов семейства лигандов IL-1, IL-1α и IL-1β являются двумя основными агонистическими молекулами. Напротив, антагонист рецептора IL-1 (IL-1Ra) является физиологическим ингибитором IL-1. По сравнению с IL-1β, IL-1α выражен меньше (15).Поэтому в данном исследовании он не рассматривается.

Процесс заживления ран включает сложную взаимосвязь между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами (16). Следовательно, можно предположить, что активность IL1 α и β обязательна на ранних стадиях заживления, способствуя воспалительной активности. Затем следует передача сигнала IL-1Ra, который снижает воспалительную активность и, таким образом, становится критически важным для нормального заживления ран. Результаты этого исследования еще раз подтверждают этот факт.

Мед, как известно, стимулирует выработку цитокинов, которые помогают заживлению ран (17). Однако, когда действие меда на провоспалительные цитокины ранее было изучено в хронических инфицированных венозных язвах ног, концентрация IL-1 не изменилась (16). В этом исследовании раны, обработанные медом, показали оптимальную провоспалительную активность на 8-й день заживления. Однако к концу 16 дня была выражена лучшая противовоспалительная активность, о чем свидетельствовали более низкие уровни IL1β. Это говорит о том, что мед может способствовать только необходимому количеству воспалительной активности, которая необходима на ранних этапах заживления.Позже он играет роль противовоспалительного средства, способствующего более быстрому заживлению ран.

Гхи также демонстрирует отличные свойства заживления ран благодаря своей антимикробной, иммуностимулирующей и антиоксидантной активности (4,8,18). Однако его прямое влияние на активность IL1 в ране менее изучено. В этом исследовании наблюдались лучшие противовоспалительные реакции ран, обработанных топленым маслом, по сравнению с контролем. К 8 дню заживления активность IL-1β была значительно ниже, что указывает на ранние воспалительные реакции.Сочетание меда и топленого масла продемонстрировало как провоспалительное, так и противовоспалительное действие, что привело к лучшему заживлению.

GG (солодка) доказала свою эффективность при острых и хронических воспалительных состояниях, таких как ревматоидный артрит. Это стало возможным за счет снижения активности IL1β (19). Однако о противовоспалительных свойствах GG при заживлении ран уделялось меньше внимания. В этом исследовании раны, обработанные GG, показали более высокий уровень IL1β на 8-й день, который значительно снизился к 16-му дню.Это указывает на то, что GG может регулировать экспрессию IL1β и проявляет как провоспалительную, так и противовоспалительную активность, которая необходима для заживления. Однако в этом случае провоспалительные реакции были продолжительными, что свидетельствует о продолжающемся привлечении клеток для ускорения заживления ран. Аналогичные наблюдения были сделаны в группах, получавших NI и Tot. Это может указывать на альтернативный режим более быстрого заживления, который требует дальнейшего изучения.

Таким образом, в этом исследовании была предпринята попытка объяснить влияние традиционных лекарств на активность передачи сигналов IL-1 при заживлении ран.Он показал, что эти традиционные лекарства обладают как про, так и противовоспалительной активностью в значительных количествах, что приводит к лучшему заживлению, которое может включать в себя различные методы процесса заживления, которые широко не исследованы.

Роль миофибробластов в заживлении ран : Повреждение тканей активирует фибробласты и превращает их в миофибробласты. Эти клетки создают длительные сокращения и активно продуцируют белки внеклеточного матрикса (ЕСМ), способствующие закрытию раны.И фибробласты, и миофибробласты играют решающую роль в заживлении ран. Однако эти клетки проявляют двойное действие в процессе заживления ран. Соответствующее количество генерирования силы и отложения матрицы является преимуществом для заживления, в то время как чрезмерное производство прочности и матрицы приводит к рубцеванию тканей и нарушению функции восстановленных тканей (20).

В исследовании, проведенном Haryanto et al., Ранняя активность миофибробластов наблюдалась в группах, получавших индонезийский мед по сравнению с гидроколлоидной повязкой i.е., на 3-й день. Мед, таким образом, ускорял образование грануляционной ткани больше, чем гидроколлоидная повязка. На 7 день активность миофибробластов достигла пика и была одинаковой во всех группах, а затем постепенно снижалась к 11 и 14 дням (21). Аналогичные наблюдения были сделаны Накадзимой и др. (22).

В этом исследовании мед и H + G не показали какой-либо значительной разницы в активности миофибробластов по сравнению с контролем на 8-й день. Однако на 16-й день активность миофибробластов значительно снизилась в этих группах по сравнению с контролем.

Лучшее закрытие ран также наблюдалось ранее в ранах, обработанных только топленым маслом и составами на основе топленого масла (4,8,18). Это объяснялось большей активностью миофибробластов. Однако прямое влияние топленого масла на активность миофибробластов менее обсуждается в доступной литературе. В этом исследовании раны, обработанные топленым маслом, показали значительно более высокую активность миофибробластов на 8-й день. На 16-й день их активность была значительно снижена. Это еще раз подтверждает роль топленого масла в раннем закрытии ран без образования рубцов.

GG также зарекомендовал себя как мощное средство для заживления ран благодаря своей противовоспалительной и регенеративной активности (6,8). Его положительное пролиферативное влияние на дермальные фибробласты также обсуждалось ранее (23). Эффект глицирризина на фиброз кожи, вызванный блеомицином (BLM), был изучен ранее. Здесь было обнаружено, что глицирризин облегчает фиброз кожи за счет значительного снижения содержания коллагена и количества миофибробластов (24). В этом исследовании раны, обработанные GG, показали оптимальную активность миофибробластов, что способствовало лучшему заживлению.Это еще раз подтверждает тот факт, что GG твердо контролирует активность миофибробластов при заживлении ран. Он увеличивает активность миофибробластов на ранних этапах заживления, вызывая сокращение и закрытие раны. В конце фазы заживления GG снижает активность миофибробластов, тем самым уменьшая чрезмерное отложение коллагена и тем самым предотвращая фиброз и образование рубцов.

Биомеханические данные в нашем предыдущем исследовании показали повышенную прочность на разрыв ран в группах, получавших NI, что указывает на большую прочность на разрыв (8).В этом исследовании NI продемонстрировал существенное влияние на активность миофибробластов, т.е. значительно увеличил активность миофибробластов на 8-й день, которая значительно снизилась на 16-й день. Это помогло улучшить заживление ран. Это еще раз подтверждает биомеханические данные, представленные в нашем предыдущем исследовании. Хотя Tot показал увеличение активности миофибробластов на 8-й день и снижение на 16-й день. Это открытие, однако, не было статистически значимым. Результаты были лучше только биологически.Таким образом, это исследование было сосредоточено на роли этих традиционных лекарств в полезной активности миофибробластов при заживлении ран, что ранее не обсуждалось.

Таким образом, это исследование сделало попытку дать представление о биомеханических и клеточных механизмах заживления ран. Испытательные материалы, использованные по отдельности и в комбинации, были полезны в исцелении своим уникальным способом. Требуется дальнейшая оценка, чтобы понять роль этих традиционных лекарств в лечении сложных с медицинской точки зрения ран.

Ссылки

1. Хант Т., Берк Дж., Барбул А., Гимбл М. Заживление ран. Наука. 1999; 284: 1775. [PubMed] [Google Scholar] 2. Робсон М.С., Стид Д.Л., Франц М.Г. Заживление ран: биологические особенности и подходы к максимальному увеличению траекторий заживления. Curr Probl Surg. 2001. 38 (2): 65–140. [PubMed] [Google Scholar] 3. Jagetia GC, Baliga MS, Venkatesh P, Ulloor JN. Влияние корневища имбиря (Zingiber officinale Rosc.) На выживаемость, глутатион и перекисное окисление липидов у мышей после воздействия гамма-излучения на все тело.Radiat Res. 2003; 160: 584–592. [PubMed] [Google Scholar] 4. Molan PC. Доказательства использования меда в качестве перевязочного материала. Int J Раны нижних конечностей. 2006; 5: 40–54. [PubMed] [Google Scholar] 5. Прасад V, Дорле АК. Оценка ранозаживляющей активности состава на основе топленого масла. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 38–47. [PubMed] [Google Scholar] 6. Олуми М.М., Дерахшанфар А., Никпур А. Лечебный потенциал экстракта корня солодки на кожных ранах у крыс. J Vet Res. 2007; 62: 147. [Google Scholar] 7.Чайтанья С.К., Сарвани М., Срилакшми С., Ашаджьоти В. Заживляющие травы — обзор. Int J Pharm Technol. 2010; 2: 603–624. [Google Scholar] 8. Kotian SR, Pai KSR, Nayak JK, Bangera H, Prasad K, Bhat KMR. Биомеханические, биохимические и гистологические доказательства ранозаживляющих свойств традиционных индийских лекарств. Int J Pharm Pharm Sci. 2015; 7 (11): 163–171. [Google Scholar] 9. Учебник по фармацевтике Дэвиса Х. Бентли. 6-е издание. Лондон: Баллиер, Тиндалл и Ко; 1956. С. 272–230. [Google Scholar] 10.Lundeberg TCM, Eriksson SV, Malm M. Электрическая стимуляция нервов улучшает заживление диабетических язв. Ann Plastic Surg. 1992; 29: 328–331. [PubMed] [Google Scholar] 11. Датта Х.С., Митра С.К., Патвардхан Б. Ранозаживляющая активность форм местного применения на основе аюрведы. Evid Based Complement Alternat Med. 2011; 2011: 134378. DOI: 10.1093 / ecam / nep015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Пастар И.П., Стоядинович О., Инь Н.К., Рамирес Х., Нусбаум А.Г., Савая А., Патель С.Б. и др. Эпителизация в заживлении ран: всесторонний обзор.Adv Уход за раной. 2014. 3 (7): 445–464. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Монако JL, Лоуренс WT. Острое заживление ран. Обзор. Clin Plastic Surg. 2003; 30: 1–12. [PubMed] [Google Scholar] 14. Graves DT, Nooh N, Gillen T., Davey M, Patel S, Cottrell D, Amar S. IL-1 играет решающую роль в оральном, но не кожном заживлении ран. J Immunol. 2001. 167: 5316–5320. [PubMed] [Google Scholar] 15. Карми Ю., Воронов Э., Дотан С. и др. Роль ИЛ-1, полученного из макрофагов, в индукции и поддержании ангиогенеза 1.J Immunol. 2009. 183: 4705–4714. [PubMed] [Google Scholar] 16. Ян С.К., Госс С., Алькантара С. и др. Влияние медицинского меда на провоспалительные цитокины при хронических инфицированных венозных язвах ног. Pak J Pharm Sci. 2015; 28 (3): 973–981. [Google Scholar] 17. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П., Блэр С., Партон Дж., Тонкс А. Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами. Цитокин. 2003. 21: 242–247. [PubMed] [Google Scholar] 18. Фулзеле С.В., Бхурчанди П.М., Канодже В.М., Джоши С.Б., Дорле А.К. Иммуностимулирующая активность Ashthamangal Ghrita у крыс.Ind J Pharmacol. 2002; 34: 194–197. [Google Scholar] 19. Ким К.Р., Чон С.К., Пак К.К., Чхве Дж. Х., Чон Пак Дж. Хай, Лим СС, Чунг В.Й. Противовоспалительные эффекты солодки и экстрактов жареной солодки на вызванное TPA острое воспаление и коллаген-индуцированный артрит у мышей. J Biomed Biotechnol. 2010; 2010: 709378. DOI: 10.1155 / 2010/709378. Epub 2010 17 марта [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Ли Б., Ван JHC. Фибробласты и миофибробласты в заживлении ран: создание и измерение силы.J Жизнеспособность тканей. 2011; 20 (4): 108. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Харьянто, Урай Т., Мукаи К., Суриади, Сугама Дж., Накатани Т. Эффективность индонезийского меда на ускорение заживления кожных ран: экспериментальное исследование на мышах. Раны. 2012. 24 (4): 110–119. [PubMed] [Google Scholar] 22. Накадзима Ю., Накано Ю., Фувано С. и др. Влияние трех типов японского меда на толстую рану у мышей. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 504537. DOI: 10.1155 / 2013/504537.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Котиан С. Р., Падма Д., Мадукар Р., Бхат КМР. Влияние природных лекарств на дермальные фибробласты при заживлении ран: исследование In-Vitro . Adv Sci Lett. 2017; 23 (3): 1949–1956. [Google Scholar] 24. Ямасита Т., Асано Ю., Танигучи Т. и др. Глицирризин улучшает фиброз, васкулопатию и воспаление на животных моделях системного склероза. J Invest Dermatol. 2017; 137 (3): 631. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

A Биомеханическое, гистологическое, биохимическое и молекулярное исследование

Ethiop J Health Sci.2018 ноя; 28 (6): 759–770.

, 1 , 2 , 3 , 4 , 1 , 2 и 1

Сушма Котиан

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных медицинских наук, Кастурб Колледж Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Кумар Бхат

2 Кафедра анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Sreedhara Pai

3 Депт.Фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Джаякришна Наяк

4 Шри Дхармастхала Манджунатешвара Аюрведический колледж, Удьявара, Удупи,

, Индия Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Картик Гуришети

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Дивья Падма

1 Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

3 Кафедра фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

4 Аюрведический колледж Шри Дхармастхалы Манджунатешвара, Удьявара, Удупи, Индия

Автор, ответственный за переписку.

Финансирование:

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют, что эта рукопись была одобрена всеми авторами в ее форме и что конкурирующих интересов нет.

Поступила 02.06.2018; Принято 28 июня 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки

Традиционные лечебные системы, такие как Аюрведа и индийская народная медицина, эффективно использовали мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra и Nerium indicum для лечения ран.Известный результат приема этих лекарств — более быстрое заживление. Однако механизм действия на тканевом уровне, биохимические и молекулярные механизмы заживления недостаточно изучены и задокументированы. Таким образом, настоящее исследование было разработано для изучения эффективности этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинациях на иссеченных ранах у крыс линии Вистар.

Методы

Через два разных интервала (например, 8-й и 16-й день) биомеханические, гистологические и иммуногистохимические (ИГХ) параметры оценивали на участке раны.IHC сосредоточился на скорости воспалительного процесса, оценивая уровень цитокина, IL1β и ремоделирование ткани, изучая активность миофибробластов.

Результаты

Быстрая эпителизация, лучшее ремоделирование, благоприятные воспалительные изменения и адекватная активность миофибробластов на участке раны наблюдались во всех обработанных группах по сравнению с контролем.

Заключение

Таким образом, данное исследование полезно для изучения механизма действия этих традиционных лекарств и предоставления ценных научных данных.

Ключевые слова: Заживление ран, мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra, Nerium indicum

Введение

Каждая живая ткань реагирует на травму. Разрушение тканей, оперативное или травматическое, вызывает набор приоритетов в каждом организме. Они включают прекращение кровотечения, предотвращение инфицирования и восстановление целостности и функции тканей. Этот процесс восстановления тканей называется заживлением ран. Заживление ран проходит в три основных этапа: воспалительная фаза, при которой вырабатываются цитокины, факторы роста и другие медиаторы воспаления (1).

Следующая фаза заживления — это фаза пролиферации, в которой задействуются такие клетки, как фибробласты и эндотелиальные клетки. Последняя фаза включает производство и реорганизацию внеклеточного матрикса, ведущую к восстановлению и регенерации тканей (1).

Раны поражают людей с доисторических времен, и лечение заживления ран — это искусство, старое, как человечество (2). Исследования лекарств, полезных для заживления ран, — быстро развивающаяся область биомедицинских наук.Достижения в этой области позволили производить различные молекулы, связанные с процессом заживления ран. Однако современные тенденции в лечении ран направлены только на предотвращение воспаления и роста микробов в месте повреждения (2).

Несмотря на то, что были найдены новые методы, способствующие процессу заживления ран, уход за ранами нашел утешение в корнях медицины и включает некоторые традиционные методы лечения, использовавшиеся много веков назад. Аюрведа и народные лечебные системы включают в себя множество таких сущностей, которые традиционно ускоряют заживление.Целители жаждут традиционных лекарств из-за их высокой степени приемлемости и реальной переносимости (3).

Мед, топленое масло и лекарственные растения, такие как Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI), являются немногими из избранных традиционных лекарств, известных своим заживляющим действием в Аюрведе и народной медицине. Эффективность заживления, наблюдаемая в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, показывает многообещающие результаты, хотя научных доказательств их защиты мало.Несколько исследований продемонстрировали роль индивидуального применения меда (4) или топленого масла (5) в лечении ран.

GG — растение, имеющее лекарственное значение. Будучи травянистым многолетним бобовым, GG обычно населяет Южную Европу и некоторые части Азии, такие как Индия. Это старейшая и широко используемая трава с первобытных времен в году по Аюрведе . Он используется как лекарство, а также как ароматизатор, маскирующий неприятный вкус других лекарственных препаратов. Они также использовались египетской, китайской, греческой, индийской и римской цивилизациями в различных лекарственных препаратах.Ранозаживляющая, противовоспалительная, противоязвенная и регенеративная активность GG также подтверждена исследованиями (6). NI — еще одно растение, используемое в народной медицине для лечения ран. Это уроженец Средиземноморья, часто выращиваемый как декоративный кустарник в садах по всему миру. NI считается одним из самых ядовитых садовых растений, ядовитых во всех своих частях. Хотя это растение ядовито, оно известно своими полезными свойствами в народной медицине. NI обладает множеством лечебных свойств. Он служит вяжущим, глистогонным, афродизиаком, едким, желудочным, жаропонижающим, мочегонным, рвотным, отхаркивающим, кардиотоническим, противораковым препаратом и т. Д.Он используется при лечении астмы, почечных и пузырьковых камней, хронических проблем с желудком и кожей, укусов змей, болей в суставах, проказы, рака, язв и т. Д. (7).

Наш ранее опубликованный отчет о заживлении ран после разрезов с использованием этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинации предоставил ценные данные об изменениях микросреды в области раны, тем самым доказав эффективность этих лекарств (8). Однако влияние этих традиционных лекарств на скорость закрытия и эпителизации иссеченных ран редко обсуждается.Кроме того, подтверждающие количественные данные о воспалительных реакциях на травму и роли миофибробластов в поддержании гомеостаза кожи в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, редко доступны. Кроме того, влияние этих препаратов на экспрессию цитокинов также не исследовалось.

Таким образом, это исследование было разработано для научной оценки клеточных механизмов заживления ран этими лекарственными препаратами, то есть медом, топленым маслом и двумя лекарственными растениями — Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI).Это было сделано по отдельности и в комбинации в модели иссеченной раны, чтобы предоставить количественные доказательства того же. Это исследование может также дать понимание фактического процесса исцеления, механизмы которого в противном случае остаются неуловимыми.

Материалы и методы

Закупка и подготовка материалов для испытаний : Необработанный мед в сыром виде, коровье топленое масло и корни GG были закуплены в аюрведической аптеке Шри Дхармастхала Манджунатхешвара (SDM), Удьявара, Удупи.Листья NI были собраны в декабре в его естественной среде обитания в Удупи и были идентифицированы и подтверждены доктором К. Гопалом Кришной Бхатом, профессором ботаники (Rtd), Колледж Пурнапраджна, Удупи, Карнатака, Индия. Ваучерный образец хранился в отделении фармакогнозии Манипальского колледжа фармацевтических наук, Манипал.

Приготовление водного экстракта GG и NI : корни GG и листья NI сушили в тени в течение семи дней, а затем измельчали.Водную экстракцию проводили методом горячей мацерации (9).

Экспериментальные животные : Здоровые взрослые крысы-альбиносы Wistar любого пола весом 150–200 г, содержавшиеся в стандартных условиях окружающей среды по температуре и влажности (25 ± 0,5 ° C) и 12-часовому циклу свет / темнота, использовали в эксперименте. учиться. Животные находились на стандартной пеллетной диете и воде до libitum . Экспериментальное исследование было проведено в центральном помещении для животных Медицинского колледжа Кастурба, Манипал, Индия, после получения одобрения Институционального комитета по этике животных (см.№: IAEC / KMC / 49/2013).

Модель раны и группы лечения : Крыс Wistar использовали для иссечения ран. Животные были разделены на семь групп (по 6 животных в каждой группе): контроль (необработанные), мед, топленое масло, GG, NI, мед + топленое масло (H + G), комбинация всех исследуемых материалов (Tot).

Создание раны : Крыс анестезировали кетамином перед нанесением иссеченных ран. Шерсть на спине животного была выбрита, и область создаваемой раны была очерчена на спине животного метиленовым синим с использованием круглого трафарета из нержавеющей стали.Полную толщину иссеченной раны 2,5 см шириной (круглая площадь = 4,90 см, 2 ) и глубиной 0,2 см создавали вдоль отметок с помощью зубчатых щипцов, хирургического лезвия и заостренных ножниц. Вся рана осталась открытой.

План лечения : На открытые раны (покрывающие всю область раны и прилегающую область) местно наносили референтную дозу исследуемых материалов, т.е. 500 мг один раз в день. Были созданы два подкласса животных по семь групп в каждой, и за ними наблюдали, чтобы изучить природу заживления в течение 8 и 16 дней соответственно.

Биомеханический анализ

Период эпителизации : Количество дней, необходимое для выпадения остатков мертвой ткани (струпа) без остаточной сырой раны, рассматривалось как время, необходимое для эпителизации.

Измерение скорости закрытия / заживления раны : Площадь раны измеряли через день после первого дня ранения с помощью перманентного маркера и тонкой бумаги. Записанные следы ран были отсканированы, и площадь была измерена с помощью программного обеспечения анализатора изображений — Image J.Для расчета процента закрытия раны использовалась стандартизованная формула (10).

Кроме того, изображения раны с фиксированным расстоянием и увеличением снимались через день до 16 дня, а скорость закрытия раны сравнивалась с различными группами исследования. Во время плана лечения кожную ткань иссеченной раны собирали на 8-й и 16-й день для гистологического, биохимического и молекулярного исследований.

Гистологическая оценка : образцы кожи были обработаны для получения парафиновых срезов.После получения срезов (толщиной 5 мкм) образца слайды окрашивали гематоксилином и эозином (H и E) для определения скорости заживления ран и эпителизации и их количественного определения. Также было выявлено наличие кожных придатков, таких как волосяные фолликулы. Кроме того, специальное пятно, то есть трихром Массона, использовалось для оценки области заживления и сосудов, воспалительных реакций, состава и распределения волокон и ремоделирования тканей. Затем слайды были проанализированы и задокументированы с использованием микроскопических изображений с помощью ImagePro Premier 9.1 (Media Cybernetics, Роквилл, США).

Иммуногистохимия (ИГХ) : фиксированные формалином срезы ткани (толщиной 5 мкм) прикрепляли к предметным стеклам, предварительно обработанным поли-L-лизином (Sigma-Aldrich). Срезы депарафинизировали ксилолом и регидратировали в этаноле (от 100 до 50%). Извлечение антигена осуществляли путем нагревания срезов в буфере Трис-ЭДТА (0,01 М, pH 6,0) в течение 30 минут. Затем слайды обрабатывали 0,3% (об. / Об.) H3O2 в воде в течение пяти минут, чтобы минимизировать активность эндогенной пероксидазы.Затем срезы промывали TBS с 0,025% Triton X-100 и затем блокировали 10% нормальной козьей сывороткой (HIMEDIA, Индия) и 1% BSA в TBS в течение одного часа при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в течение 12 часов при 4 ° C с антителом против IL1 бета (ab9722, Abcam, Великобритания, разведение 1: 1000) или антителом против альфа-актина гладких мышц (ab5694, Abcam, Великобритания, разведение 1: 100). разбавлен в TBS с 1% BSA. После промывания TBS с 0,025% тритоном срезы инкубировали с конъюгированным с пероксидазой хрена вторичным козьим антителом против кролика (ab6721, Abcam, Великобритания, разведения 1: 1000) в течение одного часа при комнатной температуре.После этого проводили промывание в TBS и инкубацию с субстратом пероксидазы ImPACT NovaRED (HRP) (SK-4805, Vector Laboratories, США) в соответствии с инструкциями производителя. Затем предметные стекла контрастировали гематоксилином (Vector-Haematoxylin QS, H-3404, Vector Laboratories, США), обезвоживали, очищали и помещали в монтажную среду Vecta Mount (H-5000, Vector Laboratories, США). Затем слайды были проанализированы и задокументированы с помощью микроскопа Olympus (BX43), камеры Q-Imaging и ImagePro Premier 9.1 программное обеспечение (Media Cybernetics, Роквилл, США). Подсчет проводился вручную на фиксированной площади при 40-кратном увеличении, а затем рассчитывалось отношение количества клеток / мм2 грануляционной ткани. Во избежание путаницы в программе использовались цветные маркеры. Затем значения выражали в виде среднего ± SEM.

Статистический анализ : Результаты выражали как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM). Данные анализировали с помощью программного обеспечения Graph Pad Prism (Microsoft, Сан-Диего, Калифорния, США).Для сравнения между контрольной и обработанной группами использовали однофакторный дисперсионный анализ с последующим posthoc-тестом Даннета. Значение P ≤0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Биомеханический анализ

Период эпителизации : На лучшее заживление указывало раннее закрытие области раны во всех обработанных группах. Кроме того, скорость эпителизации также была выше во всех обработанных группах. Об этом свидетельствует быстрое увядание струпа на ране по сравнению с контролем в среднем на восьмой день заживления.Среди обработанных групп GG и Tot показали лучшие результаты с самым ранним увяданием ткани струпа в среднем на седьмой день заживления.

Измерение скорости закрытия / заживления ран : Лучшее сокращение раны также наблюдалось в обработанных группах (,). Значительное увеличение скорости сокращения раны постоянно отмечалось у животных, получавших Tot во все дни, то есть со 2-го по 16-й день и H + G с 6-го по 16-й день, соответственно, по сравнению с контролем.Далее на 10-й день все группы лечения показали значительное выздоровление. Кроме того, NI значительно увеличил сокращение раны по сравнению с контролем на шестой день, тогда как топленое масло на восьмой день. Таким образом, модель иссечения оценивала созревание рубца и сокращение раны, что побудило нас показать эффективность этих традиционных лекарственных препаратов на очищенных ранах.

Таблица 1

Влияние местного применения исследуемых материалов на скорость закрытия раны в модели иссеченной раны

9 6 6 2 2 94114 2 94,52 ± 0,52 0,25 §
Экспериментальные
группы
Модель иссеченной раны (% сокращения раны в днях) (Среднее ± SEM)

2 4 6 8 10 12 14 16
Контроль.90 ± 3,77 21,77 ± 7,01 22,98 ± 6,65 35,37 ± 5,11 55,49 ± 8,47 79,33 ± 2,65 87,19 ± 1,69 87,87 ± 0,59 87,87 ± 0,59 9049 23,43 ± 3,78 36,89 ± 3,78 44,31 ± 9,62 74,90 ± 5,3 § 85,05 ± 3,14 87,78 ± 2,18 90,58 ± 1,84
2,95 32.91 ± 5,85 64,68 ± 2,78 § 74,92 ± 2,05 § 86,55 ± 1,58 * 88,90 ± 0,75 91,04 ± 2,06
9 H 3,2 29,68 ± 3,68 46,58 ± 1,97 * 63,01 ± 3,13 § 78,71 ± 1,84 § 88,75 ± 2,06 § 92,19 ± 0,8509 92,19 ± 0,8506 §
GG 16.67 ± 3,57 24,13 ± 1,91 35,29 ± 3,97 51,81 ± 3,64 79,46 ± 1,35 § 86,19 ± 0,49 90,35 ± 0,95 92,22 ± 1,41 92,22 ± 1,41 2,52 20,54 ± 2,34 42,96 ± 8,38 * 41,44 ± 7,58 76,26 ± 2,83 § 82,54 ± 1,12 85,95 ± 1,28 90,29 ± 2,78 § 41.49 ± 2,67 § 52,02 ± 3,86 § 68,48 ± 4,79 § 82,09 ± 0,84 § 91,19 ± 0,94 §

Лучшее и быстрое заживление во всех обработанных группах модели удаления по сравнению с контролем

Гистологический анализ

Скорость заживления ран : Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.На это указывает ранняя эпителизация и закрытие раны соединительнотканным матриксом уже на 8-й день заживления (). К 16 дню эпителизация была завершена во всех обработанных группах. Лучшее ремоделирование тканей также наблюдалось во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны, в отличие от контроля. Интересно, что группы, получавшие мед, H + G, GG и Tot, также показали рост волосяных фолликулов в месте раны ().

Рисунок 2а: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E) на 8-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.

Рисунок 2b: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E), на 16-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех группах лечения по сравнению с контролем.Honey, GG и Tot также показали рост волосяных фолликулов (желтая стрелка). * указывает на заживление на месте раны.

Рисунок 2c: Графическое представление скорости эпителизации, количественно определенной гистологически во всех обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

Рис. 2d: Типичное изображение, показывающее разграничение между нормальной и заживающей кожей (желтая пунктирная линия). Неоэпителизацию измеряли от точки разграничения.

Эпителизация : Наблюдалась быстрая эпителизация, которая была статистически значимой во всех обработанных группах по сравнению с контролем на 8-й день заживления ран, как количественно с помощью программного обеспечения анализатора изображений (& d). Неоэпителизацию измеряли от точки границы между нормальной и заживающей кожей. Среди всех обработанных групп мед (H), Glycyrrhiza glabra, (GG) и H + G показали лучшую эпителизацию и закрытие ран по сравнению с другими группами.

Расположение в дерме : Повышенная васкуляризация наблюдалась во всех обработанных группах, в отличие от контроля к 8-му дню. Об этом свидетельствовали заполненные кровью вакуолизированные пространства (окрашенные в красный цвет) в области заживающей дермы. Также наблюдалось усиление набора клеток соединительной ткани по сравнению с контролем (). К 16 дню лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны.Повышенное отложение коллагена и регулярная перестройка наблюдались на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Это было подтверждено переплетением коллагеновых волокон (окрашено в зеленый цвет). Присутствие волосяных фолликулов в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, дополнительно подтвердило полное заживление и регенерацию кожи ().

Рисунок 3a: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 8-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют повышенную васкуляризацию во всех обработанных группах в отличие от контроля (* указывает место заживления).

Рисунок 3b: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 16-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют усиленное отложение и перестройку коллагена на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Волосяные фолликулы также наблюдались в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot (указано стрелкой).

Иммуногистохимический метод пероксидазы хрена (IHC-HRP)

Воспаление в области раны путем оценки экспрессии интерлейкинов (ИЛ1-бета) : ИЛ1-бета в ткани раны является индикатором воспалительной реакции, обычно выражаемой моноцитами , макрофаги и эпителиальные клетки.Оценка активности IL1 бета в заживляющих ранах показала, что все обработанные группы показали значительную воспалительную активность и лучшее заживление ().

Рисунок 4a: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4b: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4c: Графическое представление количества клеток, показывающих воспалительные реакции (экспрессия IL1-бета) на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

На 8 день уровень активности IL1-бета был значительно выше в группах, получавших H + G, GG, NI и Tot. Мед хотя и показал немного более высокую воспалительную активность, но не был статистически значимым. Топленое масло показало более низкую воспалительную активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали значительно сниженную экспрессию IL1-бета по сравнению с контролем. Это указывало на снижение воспалительной активности и, таким образом, лучшее заживление ран во всех обработанных группах в отличие от контроля (& c).

Активность миофибробластов и гладкомышечных клеток сосудов : SMA-положительные миофибробласты наблюдались в грануляционной ткани заживающей кожи. Реактивность SMA также была высокой в ​​клетках гладких мышц сосудов, что указывало на повышенную васкуляризацию ().

Фигура 5a: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Фигура 5b: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 5c: Графическое представление количества клеток, показывающее активность миофибробластов на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем.* p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

К 8 дню активность SMA-положительных клеток становилась все более высокой в ​​группах, получавших G, GG и NI, как в грануляционной ткани, так и вокруг прорастающих кровеносных сосудов по сравнению с контролем. Результаты были статистически значимыми. Tot также показал большую активность SMA-положительных клеток по сравнению с контролем. Однако это открытие не было статистически значимым. Группы, обработанные H и H + G, показали относительно более низкую активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали относительно меньшее количество SMA-положительной клеточной активности по сравнению с контролем, что указывает на лучшее ремоделирование и заживление. Тот хотя и показал более низкую экспрессию; однако это не было статистически значимым (& c).

Обсуждение

В последние годы считается, что полимолекулярная традиционная медицина имеет больше терапевтических преимуществ, чем аллопатическая медицина на основе одной молекулы при лечении ран. Это связано с тем, что эти препараты не только обладают противовоспалительным и антимикробным действием, но также обладают регенерирующим и омолаживающим действием (11).

Натуральные лекарства, такие как мед, топленое масло и два растительных экстракта, т. Е. GG и NI, известны своими способностями заживления ран в Аюрведе, и Народной медицине. Кроме того, их способность к заживлению ран по отдельности и в комбинации была научно подтверждена нашими предыдущими гистологическими и биомеханическими данными на моделях разрезов ран (8). Однако точные клеточные, биохимические и молекулярные механизмы исцеления редко исследуются. Таким образом, это исследование является попыткой дать представление о биомеханических, клеточных, биохимических и молекулярных условиях заживления с использованием иссеченных ран.

Эпителизация и скорость закрытия ран : Эпителизация является основным элементом заживления ран и определяет степень его достижения. Рану нельзя считать зажившей, если нет реэпителизации.

Польза этих традиционных лекарств, по отдельности и в комбинации, на лучшую эпителизацию во всех пролеченных группах была документально подтверждена нашим предыдущим исследованием (8). В этом исследовании скорость эпителизации была лучше во всех обработанных группах по сравнению с контрольной, как показали биомеханические и гистологические данные даже на модели иссеченной раны.Биомеханические данные показали более высокую скорость реэпителизации в таких группах, как GG и Tot, тогда как гистологически H, GG и H + G показали лучшие результаты.

Ранее было показано, что нарушение этого барьера приводит к инфицированию раны, и неспособность поддерживать этот барьер может серьезно замедлить процесс заживления ран (12). Следовательно, более быстрая эпителизация с помощью этих природных лекарств, как было замечено в настоящем исследовании, является ключом к успешному заживлению ран, поскольку эти эпителиальные клетки создают барьер между внешней средой и микроокружением раны.

Расположение в дерме : Нормальная кожа представляет собой корзинообразный узор переплетения, который невозможно полностью воспроизвести при ремоделировании рубца. Однако ремоделирование раны имеет важное значение и тесно связано с большим увеличением прочности на разрыв раны (13).

В данном исследовании лучшее отложение коллагена наблюдалось на участке раны во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Расположение коллагена было организовано и горизонтально переплетено в группах, получавших лечение.Это отличалось от косого и рыхлого расположения волокон коллагена в контрольной группе. Волосяные фолликулы также наблюдались на месте раны в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, что дополнительно подтверждает омолаживающий эффект этих групп на ремоделирование ран. Эти результаты совпадают с нашим ранее опубликованным отчетом о заживлении ран после разрезов (8).

Воспаление в области раны — путем оценки экспрессии интерлейкинов (IL1β) : Воспалительная фаза считается обязательной в процессе заживления, поскольку в ней задействованы лейкоциты, которые производят факторы роста и удаляют остатки раны.Некоторые медиаторы воспаления активируются в процессе заживления, например, IL-1 (14).

IL-1 является основным провоспалительным «тревожным» цитокином, главным образом полученным из макрофагов. Он способствует инфильтрации клеток, воспалению и восстановлению тканей в месте повреждения. Из 11 членов семейства лигандов IL-1, IL-1α и IL-1β являются двумя основными агонистическими молекулами. Напротив, антагонист рецептора IL-1 (IL-1Ra) является физиологическим ингибитором IL-1. По сравнению с IL-1β, IL-1α выражен меньше (15).Поэтому в данном исследовании он не рассматривается.

Процесс заживления ран включает сложную взаимосвязь между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами (16). Следовательно, можно предположить, что активность IL1 α и β обязательна на ранних стадиях заживления, способствуя воспалительной активности. Затем следует передача сигнала IL-1Ra, который снижает воспалительную активность и, таким образом, становится критически важным для нормального заживления ран. Результаты этого исследования еще раз подтверждают этот факт.

Мед, как известно, стимулирует выработку цитокинов, которые помогают заживлению ран (17). Однако, когда действие меда на провоспалительные цитокины ранее было изучено в хронических инфицированных венозных язвах ног, концентрация IL-1 не изменилась (16). В этом исследовании раны, обработанные медом, показали оптимальную провоспалительную активность на 8-й день заживления. Однако к концу 16 дня была выражена лучшая противовоспалительная активность, о чем свидетельствовали более низкие уровни IL1β. Это говорит о том, что мед может способствовать только необходимому количеству воспалительной активности, которая необходима на ранних этапах заживления.Позже он играет роль противовоспалительного средства, способствующего более быстрому заживлению ран.

Гхи также демонстрирует отличные свойства заживления ран благодаря своей антимикробной, иммуностимулирующей и антиоксидантной активности (4,8,18). Однако его прямое влияние на активность IL1 в ране менее изучено. В этом исследовании наблюдались лучшие противовоспалительные реакции ран, обработанных топленым маслом, по сравнению с контролем. К 8 дню заживления активность IL-1β была значительно ниже, что указывает на ранние воспалительные реакции.Сочетание меда и топленого масла продемонстрировало как провоспалительное, так и противовоспалительное действие, что привело к лучшему заживлению.

GG (солодка) доказала свою эффективность при острых и хронических воспалительных состояниях, таких как ревматоидный артрит. Это стало возможным за счет снижения активности IL1β (19). Однако о противовоспалительных свойствах GG при заживлении ран уделялось меньше внимания. В этом исследовании раны, обработанные GG, показали более высокий уровень IL1β на 8-й день, который значительно снизился к 16-му дню.Это указывает на то, что GG может регулировать экспрессию IL1β и проявляет как провоспалительную, так и противовоспалительную активность, которая необходима для заживления. Однако в этом случае провоспалительные реакции были продолжительными, что свидетельствует о продолжающемся привлечении клеток для ускорения заживления ран. Аналогичные наблюдения были сделаны в группах, получавших NI и Tot. Это может указывать на альтернативный режим более быстрого заживления, который требует дальнейшего изучения.

Таким образом, в этом исследовании была предпринята попытка объяснить влияние традиционных лекарств на активность передачи сигналов IL-1 при заживлении ран.Он показал, что эти традиционные лекарства обладают как про, так и противовоспалительной активностью в значительных количествах, что приводит к лучшему заживлению, которое может включать в себя различные методы процесса заживления, которые широко не исследованы.

Роль миофибробластов в заживлении ран : Повреждение тканей активирует фибробласты и превращает их в миофибробласты. Эти клетки создают длительные сокращения и активно продуцируют белки внеклеточного матрикса (ЕСМ), способствующие закрытию раны.И фибробласты, и миофибробласты играют решающую роль в заживлении ран. Однако эти клетки проявляют двойное действие в процессе заживления ран. Соответствующее количество генерирования силы и отложения матрицы является преимуществом для заживления, в то время как чрезмерное производство прочности и матрицы приводит к рубцеванию тканей и нарушению функции восстановленных тканей (20).

В исследовании, проведенном Haryanto et al., Ранняя активность миофибробластов наблюдалась в группах, получавших индонезийский мед по сравнению с гидроколлоидной повязкой i.е., на 3-й день. Мед, таким образом, ускорял образование грануляционной ткани больше, чем гидроколлоидная повязка. На 7 день активность миофибробластов достигла пика и была одинаковой во всех группах, а затем постепенно снижалась к 11 и 14 дням (21). Аналогичные наблюдения были сделаны Накадзимой и др. (22).

В этом исследовании мед и H + G не показали какой-либо значительной разницы в активности миофибробластов по сравнению с контролем на 8-й день. Однако на 16-й день активность миофибробластов значительно снизилась в этих группах по сравнению с контролем.

Лучшее закрытие ран также наблюдалось ранее в ранах, обработанных только топленым маслом и составами на основе топленого масла (4,8,18). Это объяснялось большей активностью миофибробластов. Однако прямое влияние топленого масла на активность миофибробластов менее обсуждается в доступной литературе. В этом исследовании раны, обработанные топленым маслом, показали значительно более высокую активность миофибробластов на 8-й день. На 16-й день их активность была значительно снижена. Это еще раз подтверждает роль топленого масла в раннем закрытии ран без образования рубцов.

GG также зарекомендовал себя как мощное средство для заживления ран благодаря своей противовоспалительной и регенеративной активности (6,8). Его положительное пролиферативное влияние на дермальные фибробласты также обсуждалось ранее (23). Эффект глицирризина на фиброз кожи, вызванный блеомицином (BLM), был изучен ранее. Здесь было обнаружено, что глицирризин облегчает фиброз кожи за счет значительного снижения содержания коллагена и количества миофибробластов (24). В этом исследовании раны, обработанные GG, показали оптимальную активность миофибробластов, что способствовало лучшему заживлению.Это еще раз подтверждает тот факт, что GG твердо контролирует активность миофибробластов при заживлении ран. Он увеличивает активность миофибробластов на ранних этапах заживления, вызывая сокращение и закрытие раны. В конце фазы заживления GG снижает активность миофибробластов, тем самым уменьшая чрезмерное отложение коллагена и тем самым предотвращая фиброз и образование рубцов.

Биомеханические данные в нашем предыдущем исследовании показали повышенную прочность на разрыв ран в группах, получавших NI, что указывает на большую прочность на разрыв (8).В этом исследовании NI продемонстрировал существенное влияние на активность миофибробластов, т.е. значительно увеличил активность миофибробластов на 8-й день, которая значительно снизилась на 16-й день. Это помогло улучшить заживление ран. Это еще раз подтверждает биомеханические данные, представленные в нашем предыдущем исследовании. Хотя Tot показал увеличение активности миофибробластов на 8-й день и снижение на 16-й день. Это открытие, однако, не было статистически значимым. Результаты были лучше только биологически.Таким образом, это исследование было сосредоточено на роли этих традиционных лекарств в полезной активности миофибробластов при заживлении ран, что ранее не обсуждалось.

Таким образом, это исследование сделало попытку дать представление о биомеханических и клеточных механизмах заживления ран. Испытательные материалы, использованные по отдельности и в комбинации, были полезны в исцелении своим уникальным способом. Требуется дальнейшая оценка, чтобы понять роль этих традиционных лекарств в лечении сложных с медицинской точки зрения ран.

Ссылки

1. Хант Т., Берк Дж., Барбул А., Гимбл М. Заживление ран. Наука. 1999; 284: 1775. [PubMed] [Google Scholar] 2. Робсон М.С., Стид Д.Л., Франц М.Г. Заживление ран: биологические особенности и подходы к максимальному увеличению траекторий заживления. Curr Probl Surg. 2001. 38 (2): 65–140. [PubMed] [Google Scholar] 3. Jagetia GC, Baliga MS, Venkatesh P, Ulloor JN. Влияние корневища имбиря (Zingiber officinale Rosc.) На выживаемость, глутатион и перекисное окисление липидов у мышей после воздействия гамма-излучения на все тело.Radiat Res. 2003; 160: 584–592. [PubMed] [Google Scholar] 4. Molan PC. Доказательства использования меда в качестве перевязочного материала. Int J Раны нижних конечностей. 2006; 5: 40–54. [PubMed] [Google Scholar] 5. Прасад V, Дорле АК. Оценка ранозаживляющей активности состава на основе топленого масла. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 38–47. [PubMed] [Google Scholar] 6. Олуми М.М., Дерахшанфар А., Никпур А. Лечебный потенциал экстракта корня солодки на кожных ранах у крыс. J Vet Res. 2007; 62: 147. [Google Scholar] 7.Чайтанья С.К., Сарвани М., Срилакшми С., Ашаджьоти В. Заживляющие травы — обзор. Int J Pharm Technol. 2010; 2: 603–624. [Google Scholar] 8. Kotian SR, Pai KSR, Nayak JK, Bangera H, Prasad K, Bhat KMR. Биомеханические, биохимические и гистологические доказательства ранозаживляющих свойств традиционных индийских лекарств. Int J Pharm Pharm Sci. 2015; 7 (11): 163–171. [Google Scholar] 9. Учебник по фармацевтике Дэвиса Х. Бентли. 6-е издание. Лондон: Баллиер, Тиндалл и Ко; 1956. С. 272–230. [Google Scholar] 10.Lundeberg TCM, Eriksson SV, Malm M. Электрическая стимуляция нервов улучшает заживление диабетических язв. Ann Plastic Surg. 1992; 29: 328–331. [PubMed] [Google Scholar] 11. Датта Х.С., Митра С.К., Патвардхан Б. Ранозаживляющая активность форм местного применения на основе аюрведы. Evid Based Complement Alternat Med. 2011; 2011: 134378. DOI: 10.1093 / ecam / nep015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Пастар И.П., Стоядинович О., Инь Н.К., Рамирес Х., Нусбаум А.Г., Савая А., Патель С.Б. и др. Эпителизация в заживлении ран: всесторонний обзор.Adv Уход за раной. 2014. 3 (7): 445–464. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Монако JL, Лоуренс WT. Острое заживление ран. Обзор. Clin Plastic Surg. 2003; 30: 1–12. [PubMed] [Google Scholar] 14. Graves DT, Nooh N, Gillen T., Davey M, Patel S, Cottrell D, Amar S. IL-1 играет решающую роль в оральном, но не кожном заживлении ран. J Immunol. 2001. 167: 5316–5320. [PubMed] [Google Scholar] 15. Карми Ю., Воронов Э., Дотан С. и др. Роль ИЛ-1, полученного из макрофагов, в индукции и поддержании ангиогенеза 1.J Immunol. 2009. 183: 4705–4714. [PubMed] [Google Scholar] 16. Ян С.К., Госс С., Алькантара С. и др. Влияние медицинского меда на провоспалительные цитокины при хронических инфицированных венозных язвах ног. Pak J Pharm Sci. 2015; 28 (3): 973–981. [Google Scholar] 17. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П., Блэр С., Партон Дж., Тонкс А. Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами. Цитокин. 2003. 21: 242–247. [PubMed] [Google Scholar] 18. Фулзеле С.В., Бхурчанди П.М., Канодже В.М., Джоши С.Б., Дорле А.К. Иммуностимулирующая активность Ashthamangal Ghrita у крыс.Ind J Pharmacol. 2002; 34: 194–197. [Google Scholar] 19. Ким К.Р., Чон С.К., Пак К.К., Чхве Дж. Х., Чон Пак Дж. Хай, Лим СС, Чунг В.Й. Противовоспалительные эффекты солодки и экстрактов жареной солодки на вызванное TPA острое воспаление и коллаген-индуцированный артрит у мышей. J Biomed Biotechnol. 2010; 2010: 709378. DOI: 10.1155 / 2010/709378. Epub 2010 17 марта [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Ли Б., Ван JHC. Фибробласты и миофибробласты в заживлении ран: создание и измерение силы.J Жизнеспособность тканей. 2011; 20 (4): 108. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Харьянто, Урай Т., Мукаи К., Суриади, Сугама Дж., Накатани Т. Эффективность индонезийского меда на ускорение заживления кожных ран: экспериментальное исследование на мышах. Раны. 2012. 24 (4): 110–119. [PubMed] [Google Scholar] 22. Накадзима Ю., Накано Ю., Фувано С. и др. Влияние трех типов японского меда на толстую рану у мышей. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 504537. DOI: 10.1155 / 2013/504537.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Котиан С. Р., Падма Д., Мадукар Р., Бхат КМР. Влияние природных лекарств на дермальные фибробласты при заживлении ран: исследование In-Vitro . Adv Sci Lett. 2017; 23 (3): 1949–1956. [Google Scholar] 24. Ямасита Т., Асано Ю., Танигучи Т. и др. Глицирризин улучшает фиброз, васкулопатию и воспаление на животных моделях системного склероза. J Invest Dermatol. 2017; 137 (3): 631. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

A Биомеханическое, гистологическое, биохимическое и молекулярное исследование

Ethiop J Health Sci.2018 ноя; 28 (6): 759–770.

, 1 , 2 , 3 , 4 , 1 , 2 и 1

Сушма Котиан

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных медицинских наук, Кастурб Колледж Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Кумар Бхат

2 Кафедра анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Sreedhara Pai

3 Депт.Фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Джаякришна Наяк

4 Шри Дхармастхала Манджунатешвара Аюрведический колледж, Удьявара, Удупи,

, Индия Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

Картик Гуришети

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

Дивья Падма

1 Кафедра анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

1 Отделение анатомии, Центр фундаментальных наук, Медицинский колледж Кастурба, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

2 Dept.анатомии, Колледж медицинских наук RAK, Университет медицинских и медицинских наук RAK, Рас-Аль-Хайма, ОАЭ

3 Кафедра фармакологии, Колледж фармацевтических наук Манипал, Манипал, Академия высшего образования Манипала, Манипал, Карнатака, Индия

4 Аюрведический колледж Шри Дхармастхалы Манджунатешвара, Удьявара, Удупи, Индия

Автор, ответственный за переписку.

Финансирование:

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют, что эта рукопись была одобрена всеми авторами в ее форме и что конкурирующих интересов нет.

Поступила 02.06.2018; Принято 28 июня 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки

Традиционные лечебные системы, такие как Аюрведа и индийская народная медицина, эффективно использовали мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra и Nerium indicum для лечения ран.Известный результат приема этих лекарств — более быстрое заживление. Однако механизм действия на тканевом уровне, биохимические и молекулярные механизмы заживления недостаточно изучены и задокументированы. Таким образом, настоящее исследование было разработано для изучения эффективности этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинациях на иссеченных ранах у крыс линии Вистар.

Методы

Через два разных интервала (например, 8-й и 16-й день) биомеханические, гистологические и иммуногистохимические (ИГХ) параметры оценивали на участке раны.IHC сосредоточился на скорости воспалительного процесса, оценивая уровень цитокина, IL1β и ремоделирование ткани, изучая активность миофибробластов.

Результаты

Быстрая эпителизация, лучшее ремоделирование, благоприятные воспалительные изменения и адекватная активность миофибробластов на участке раны наблюдались во всех обработанных группах по сравнению с контролем.

Заключение

Таким образом, данное исследование полезно для изучения механизма действия этих традиционных лекарств и предоставления ценных научных данных.

Ключевые слова: Заживление ран, мед, топленое масло, Glycyrrhiza glabra, Nerium indicum

Введение

Каждая живая ткань реагирует на травму. Разрушение тканей, оперативное или травматическое, вызывает набор приоритетов в каждом организме. Они включают прекращение кровотечения, предотвращение инфицирования и восстановление целостности и функции тканей. Этот процесс восстановления тканей называется заживлением ран. Заживление ран проходит в три основных этапа: воспалительная фаза, при которой вырабатываются цитокины, факторы роста и другие медиаторы воспаления (1).

Следующая фаза заживления — это фаза пролиферации, в которой задействуются такие клетки, как фибробласты и эндотелиальные клетки. Последняя фаза включает производство и реорганизацию внеклеточного матрикса, ведущую к восстановлению и регенерации тканей (1).

Раны поражают людей с доисторических времен, и лечение заживления ран — это искусство, старое, как человечество (2). Исследования лекарств, полезных для заживления ран, — быстро развивающаяся область биомедицинских наук.Достижения в этой области позволили производить различные молекулы, связанные с процессом заживления ран. Однако современные тенденции в лечении ран направлены только на предотвращение воспаления и роста микробов в месте повреждения (2).

Несмотря на то, что были найдены новые методы, способствующие процессу заживления ран, уход за ранами нашел утешение в корнях медицины и включает некоторые традиционные методы лечения, использовавшиеся много веков назад. Аюрведа и народные лечебные системы включают в себя множество таких сущностей, которые традиционно ускоряют заживление.Целители жаждут традиционных лекарств из-за их высокой степени приемлемости и реальной переносимости (3).

Мед, топленое масло и лекарственные растения, такие как Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI), являются немногими из избранных традиционных лекарств, известных своим заживляющим действием в Аюрведе и народной медицине. Эффективность заживления, наблюдаемая в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, показывает многообещающие результаты, хотя научных доказательств их защиты мало.Несколько исследований продемонстрировали роль индивидуального применения меда (4) или топленого масла (5) в лечении ран.

GG — растение, имеющее лекарственное значение. Будучи травянистым многолетним бобовым, GG обычно населяет Южную Европу и некоторые части Азии, такие как Индия. Это старейшая и широко используемая трава с первобытных времен в году по Аюрведе . Он используется как лекарство, а также как ароматизатор, маскирующий неприятный вкус других лекарственных препаратов. Они также использовались египетской, китайской, греческой, индийской и римской цивилизациями в различных лекарственных препаратах.Ранозаживляющая, противовоспалительная, противоязвенная и регенеративная активность GG также подтверждена исследованиями (6). NI — еще одно растение, используемое в народной медицине для лечения ран. Это уроженец Средиземноморья, часто выращиваемый как декоративный кустарник в садах по всему миру. NI считается одним из самых ядовитых садовых растений, ядовитых во всех своих частях. Хотя это растение ядовито, оно известно своими полезными свойствами в народной медицине. NI обладает множеством лечебных свойств. Он служит вяжущим, глистогонным, афродизиаком, едким, желудочным, жаропонижающим, мочегонным, рвотным, отхаркивающим, кардиотоническим, противораковым препаратом и т. Д.Он используется при лечении астмы, почечных и пузырьковых камней, хронических проблем с желудком и кожей, укусов змей, болей в суставах, проказы, рака, язв и т. Д. (7).

Наш ранее опубликованный отчет о заживлении ран после разрезов с использованием этих традиционных лекарств по отдельности и в комбинации предоставил ценные данные об изменениях микросреды в области раны, тем самым доказав эффективность этих лекарств (8). Однако влияние этих традиционных лекарств на скорость закрытия и эпителизации иссеченных ран редко обсуждается.Кроме того, подтверждающие количественные данные о воспалительных реакциях на травму и роли миофибробластов в поддержании гомеостаза кожи в ранах, обработанных этими традиционными лекарствами, редко доступны. Кроме того, влияние этих препаратов на экспрессию цитокинов также не исследовалось.

Таким образом, это исследование было разработано для научной оценки клеточных механизмов заживления ран этими лекарственными препаратами, то есть медом, топленым маслом и двумя лекарственными растениями — Glycyrrhiza glabra (GG) и Nerium indicum (NI).Это было сделано по отдельности и в комбинации в модели иссеченной раны, чтобы предоставить количественные доказательства того же. Это исследование может также дать понимание фактического процесса исцеления, механизмы которого в противном случае остаются неуловимыми.

Материалы и методы

Закупка и подготовка материалов для испытаний : Необработанный мед в сыром виде, коровье топленое масло и корни GG были закуплены в аюрведической аптеке Шри Дхармастхала Манджунатхешвара (SDM), Удьявара, Удупи.Листья NI были собраны в декабре в его естественной среде обитания в Удупи и были идентифицированы и подтверждены доктором К. Гопалом Кришной Бхатом, профессором ботаники (Rtd), Колледж Пурнапраджна, Удупи, Карнатака, Индия. Ваучерный образец хранился в отделении фармакогнозии Манипальского колледжа фармацевтических наук, Манипал.

Приготовление водного экстракта GG и NI : корни GG и листья NI сушили в тени в течение семи дней, а затем измельчали.Водную экстракцию проводили методом горячей мацерации (9).

Экспериментальные животные : Здоровые взрослые крысы-альбиносы Wistar любого пола весом 150–200 г, содержавшиеся в стандартных условиях окружающей среды по температуре и влажности (25 ± 0,5 ° C) и 12-часовому циклу свет / темнота, использовали в эксперименте. учиться. Животные находились на стандартной пеллетной диете и воде до libitum . Экспериментальное исследование было проведено в центральном помещении для животных Медицинского колледжа Кастурба, Манипал, Индия, после получения одобрения Институционального комитета по этике животных (см.№: IAEC / KMC / 49/2013).

Модель раны и группы лечения : Крыс Wistar использовали для иссечения ран. Животные были разделены на семь групп (по 6 животных в каждой группе): контроль (необработанные), мед, топленое масло, GG, NI, мед + топленое масло (H + G), комбинация всех исследуемых материалов (Tot).

Создание раны : Крыс анестезировали кетамином перед нанесением иссеченных ран. Шерсть на спине животного была выбрита, и область создаваемой раны была очерчена на спине животного метиленовым синим с использованием круглого трафарета из нержавеющей стали.Полную толщину иссеченной раны 2,5 см шириной (круглая площадь = 4,90 см, 2 ) и глубиной 0,2 см создавали вдоль отметок с помощью зубчатых щипцов, хирургического лезвия и заостренных ножниц. Вся рана осталась открытой.

План лечения : На открытые раны (покрывающие всю область раны и прилегающую область) местно наносили референтную дозу исследуемых материалов, т.е. 500 мг один раз в день. Были созданы два подкласса животных по семь групп в каждой, и за ними наблюдали, чтобы изучить природу заживления в течение 8 и 16 дней соответственно.

Биомеханический анализ

Период эпителизации : Количество дней, необходимое для выпадения остатков мертвой ткани (струпа) без остаточной сырой раны, рассматривалось как время, необходимое для эпителизации.

Измерение скорости закрытия / заживления раны : Площадь раны измеряли через день после первого дня ранения с помощью перманентного маркера и тонкой бумаги. Записанные следы ран были отсканированы, и площадь была измерена с помощью программного обеспечения анализатора изображений — Image J.Для расчета процента закрытия раны использовалась стандартизованная формула (10).

Кроме того, изображения раны с фиксированным расстоянием и увеличением снимались через день до 16 дня, а скорость закрытия раны сравнивалась с различными группами исследования. Во время плана лечения кожную ткань иссеченной раны собирали на 8-й и 16-й день для гистологического, биохимического и молекулярного исследований.

Гистологическая оценка : образцы кожи были обработаны для получения парафиновых срезов.После получения срезов (толщиной 5 мкм) образца слайды окрашивали гематоксилином и эозином (H и E) для определения скорости заживления ран и эпителизации и их количественного определения. Также было выявлено наличие кожных придатков, таких как волосяные фолликулы. Кроме того, специальное пятно, то есть трихром Массона, использовалось для оценки области заживления и сосудов, воспалительных реакций, состава и распределения волокон и ремоделирования тканей. Затем слайды были проанализированы и задокументированы с использованием микроскопических изображений с помощью ImagePro Premier 9.1 (Media Cybernetics, Роквилл, США).

Иммуногистохимия (ИГХ) : фиксированные формалином срезы ткани (толщиной 5 мкм) прикрепляли к предметным стеклам, предварительно обработанным поли-L-лизином (Sigma-Aldrich). Срезы депарафинизировали ксилолом и регидратировали в этаноле (от 100 до 50%). Извлечение антигена осуществляли путем нагревания срезов в буфере Трис-ЭДТА (0,01 М, pH 6,0) в течение 30 минут. Затем слайды обрабатывали 0,3% (об. / Об.) H3O2 в воде в течение пяти минут, чтобы минимизировать активность эндогенной пероксидазы.Затем срезы промывали TBS с 0,025% Triton X-100 и затем блокировали 10% нормальной козьей сывороткой (HIMEDIA, Индия) и 1% BSA в TBS в течение одного часа при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в течение 12 часов при 4 ° C с антителом против IL1 бета (ab9722, Abcam, Великобритания, разведение 1: 1000) или антителом против альфа-актина гладких мышц (ab5694, Abcam, Великобритания, разведение 1: 100). разбавлен в TBS с 1% BSA. После промывания TBS с 0,025% тритоном срезы инкубировали с конъюгированным с пероксидазой хрена вторичным козьим антителом против кролика (ab6721, Abcam, Великобритания, разведения 1: 1000) в течение одного часа при комнатной температуре.После этого проводили промывание в TBS и инкубацию с субстратом пероксидазы ImPACT NovaRED (HRP) (SK-4805, Vector Laboratories, США) в соответствии с инструкциями производителя. Затем предметные стекла контрастировали гематоксилином (Vector-Haematoxylin QS, H-3404, Vector Laboratories, США), обезвоживали, очищали и помещали в монтажную среду Vecta Mount (H-5000, Vector Laboratories, США). Затем слайды были проанализированы и задокументированы с помощью микроскопа Olympus (BX43), камеры Q-Imaging и ImagePro Premier 9.1 программное обеспечение (Media Cybernetics, Роквилл, США). Подсчет проводился вручную на фиксированной площади при 40-кратном увеличении, а затем рассчитывалось отношение количества клеток / мм2 грануляционной ткани. Во избежание путаницы в программе использовались цветные маркеры. Затем значения выражали в виде среднего ± SEM.

Статистический анализ : Результаты выражали как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM). Данные анализировали с помощью программного обеспечения Graph Pad Prism (Microsoft, Сан-Диего, Калифорния, США).Для сравнения между контрольной и обработанной группами использовали однофакторный дисперсионный анализ с последующим posthoc-тестом Даннета. Значение P ≤0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Биомеханический анализ

Период эпителизации : На лучшее заживление указывало раннее закрытие области раны во всех обработанных группах. Кроме того, скорость эпителизации также была выше во всех обработанных группах. Об этом свидетельствует быстрое увядание струпа на ране по сравнению с контролем в среднем на восьмой день заживления.Среди обработанных групп GG и Tot показали лучшие результаты с самым ранним увяданием ткани струпа в среднем на седьмой день заживления.

Измерение скорости закрытия / заживления ран : Лучшее сокращение раны также наблюдалось в обработанных группах (,). Значительное увеличение скорости сокращения раны постоянно отмечалось у животных, получавших Tot во все дни, то есть со 2-го по 16-й день и H + G с 6-го по 16-й день, соответственно, по сравнению с контролем.Далее на 10-й день все группы лечения показали значительное выздоровление. Кроме того, NI значительно увеличил сокращение раны по сравнению с контролем на шестой день, тогда как топленое масло на восьмой день. Таким образом, модель иссечения оценивала созревание рубца и сокращение раны, что побудило нас показать эффективность этих традиционных лекарственных препаратов на очищенных ранах.

Таблица 1

Влияние местного применения исследуемых материалов на скорость закрытия раны в модели иссеченной раны

9 6 6 2 2 94114 2 94,52 ± 0,52 0,25 §
Экспериментальные
группы
Модель иссеченной раны (% сокращения раны в днях) (Среднее ± SEM)

2 4 6 8 10 12 14 16
Контроль.90 ± 3,77 21,77 ± 7,01 22,98 ± 6,65 35,37 ± 5,11 55,49 ± 8,47 79,33 ± 2,65 87,19 ± 1,69 87,87 ± 0,59 87,87 ± 0,59 9049 23,43 ± 3,78 36,89 ± 3,78 44,31 ± 9,62 74,90 ± 5,3 § 85,05 ± 3,14 87,78 ± 2,18 90,58 ± 1,84
2,95 32.91 ± 5,85 64,68 ± 2,78 § 74,92 ± 2,05 § 86,55 ± 1,58 * 88,90 ± 0,75 91,04 ± 2,06
9 H 3,2 29,68 ± 3,68 46,58 ± 1,97 * 63,01 ± 3,13 § 78,71 ± 1,84 § 88,75 ± 2,06 § 92,19 ± 0,8509 92,19 ± 0,8506 §
GG 16.67 ± 3,57 24,13 ± 1,91 35,29 ± 3,97 51,81 ± 3,64 79,46 ± 1,35 § 86,19 ± 0,49 90,35 ± 0,95 92,22 ± 1,41 92,22 ± 1,41 2,52 20,54 ± 2,34 42,96 ± 8,38 * 41,44 ± 7,58 76,26 ± 2,83 § 82,54 ± 1,12 85,95 ± 1,28 90,29 ± 2,78 § 41.49 ± 2,67 § 52,02 ± 3,86 § 68,48 ± 4,79 § 82,09 ± 0,84 § 91,19 ± 0,94 §

Лучшее и быстрое заживление во всех обработанных группах модели удаления по сравнению с контролем

Гистологический анализ

Скорость заживления ран : Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.На это указывает ранняя эпителизация и закрытие раны соединительнотканным матриксом уже на 8-й день заживления (). К 16 дню эпителизация была завершена во всех обработанных группах. Лучшее ремоделирование тканей также наблюдалось во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны, в отличие от контроля. Интересно, что группы, получавшие мед, H + G, GG и Tot, также показали рост волосяных фолликулов в месте раны ().

Рисунок 2а: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E) на 8-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Все обработанные группы показали лучшее заживление по сравнению с контролем.

Рисунок 2b: Срезы, окрашенные гематоксилином и эозином (H&E), на 16-й день лечения при 4-кратном увеличении, показывающие область заживления в месте иссечения. Лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех группах лечения по сравнению с контролем.Honey, GG и Tot также показали рост волосяных фолликулов (желтая стрелка). * указывает на заживление на месте раны.

Рисунок 2c: Графическое представление скорости эпителизации, количественно определенной гистологически во всех обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

Рис. 2d: Типичное изображение, показывающее разграничение между нормальной и заживающей кожей (желтая пунктирная линия). Неоэпителизацию измеряли от точки разграничения.

Эпителизация : Наблюдалась быстрая эпителизация, которая была статистически значимой во всех обработанных группах по сравнению с контролем на 8-й день заживления ран, как количественно с помощью программного обеспечения анализатора изображений (& d). Неоэпителизацию измеряли от точки границы между нормальной и заживающей кожей. Среди всех обработанных групп мед (H), Glycyrrhiza glabra, (GG) и H + G показали лучшую эпителизацию и закрытие ран по сравнению с другими группами.

Расположение в дерме : Повышенная васкуляризация наблюдалась во всех обработанных группах, в отличие от контроля к 8-му дню. Об этом свидетельствовали заполненные кровью вакуолизированные пространства (окрашенные в красный цвет) в области заживающей дермы. Также наблюдалось усиление набора клеток соединительной ткани по сравнению с контролем (). К 16 дню лучшее ремоделирование тканей наблюдалось во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Об этом свидетельствует равномерность распределения соединительнотканного матрикса в месте раны.Повышенное отложение коллагена и регулярная перестройка наблюдались на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Это было подтверждено переплетением коллагеновых волокон (окрашено в зеленый цвет). Присутствие волосяных фолликулов в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, дополнительно подтвердило полное заживление и регенерацию кожи ().

Рисунок 3a: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 8-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют повышенную васкуляризацию во всех обработанных группах в отличие от контроля (* указывает место заживления).

Рисунок 3b: Срезы, окрашенные трихромом Массона (МТ) на 16-й день лечения при 10-кратном увеличении, демонстрируют усиленное отложение и перестройку коллагена на участке раны во всех обработанных группах по сравнению с контролем. Волосяные фолликулы также наблюдались в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot (указано стрелкой).

Иммуногистохимический метод пероксидазы хрена (IHC-HRP)

Воспаление в области раны путем оценки экспрессии интерлейкинов (ИЛ1-бета) : ИЛ1-бета в ткани раны является индикатором воспалительной реакции, обычно выражаемой моноцитами , макрофаги и эпителиальные клетки.Оценка активности IL1 бета в заживляющих ранах показала, что все обработанные группы показали значительную воспалительную активность и лучшее заживление ().

Рисунок 4a: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4b: ИГХ-HRP окрашивание IL1 бета (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16-й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 4c: Графическое представление количества клеток, показывающих воспалительные реакции (экспрессия IL1-бета) на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем. * p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

На 8 день уровень активности IL1-бета был значительно выше в группах, получавших H + G, GG, NI и Tot. Мед хотя и показал немного более высокую воспалительную активность, но не был статистически значимым. Топленое масло показало более низкую воспалительную активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали значительно сниженную экспрессию IL1-бета по сравнению с контролем. Это указывало на снижение воспалительной активности и, таким образом, лучшее заживление ран во всех обработанных группах в отличие от контроля (& c).

Активность миофибробластов и гладкомышечных клеток сосудов : SMA-положительные миофибробласты наблюдались в грануляционной ткани заживающей кожи. Реактивность SMA также была высокой в ​​клетках гладких мышц сосудов, что указывало на повышенную васкуляризацию ().

Фигура 5a: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 8 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Фигура 5b: IHC-HRP окрашивание альфа-актина гладких мышц (окрашено в красный цвет) в грануляционной ткани заживающей кожи крысы на 16 -й день лечения при 40-кратном увеличении.

Рисунок 5c: Графическое представление количества клеток, показывающее активность миофибробластов на 8 и 16 день в обработанных группах по сравнению с контролем.* p <0,05 по сравнению с контролем, ** p <0,01 по сравнению с контролем, *** p <0,001 по сравнению с контролем.

К 8 дню активность SMA-положительных клеток становилась все более высокой в ​​группах, получавших G, GG и NI, как в грануляционной ткани, так и вокруг прорастающих кровеносных сосудов по сравнению с контролем. Результаты были статистически значимыми. Tot также показал большую активность SMA-положительных клеток по сравнению с контролем. Однако это открытие не было статистически значимым. Группы, обработанные H и H + G, показали относительно более низкую активность по сравнению с контролем (& c).

На 16 день все обработанные группы показали относительно меньшее количество SMA-положительной клеточной активности по сравнению с контролем, что указывает на лучшее ремоделирование и заживление. Тот хотя и показал более низкую экспрессию; однако это не было статистически значимым (& c).

Обсуждение

В последние годы считается, что полимолекулярная традиционная медицина имеет больше терапевтических преимуществ, чем аллопатическая медицина на основе одной молекулы при лечении ран. Это связано с тем, что эти препараты не только обладают противовоспалительным и антимикробным действием, но также обладают регенерирующим и омолаживающим действием (11).

Натуральные лекарства, такие как мед, топленое масло и два растительных экстракта, т. Е. GG и NI, известны своими способностями заживления ран в Аюрведе, и Народной медицине. Кроме того, их способность к заживлению ран по отдельности и в комбинации была научно подтверждена нашими предыдущими гистологическими и биомеханическими данными на моделях разрезов ран (8). Однако точные клеточные, биохимические и молекулярные механизмы исцеления редко исследуются. Таким образом, это исследование является попыткой дать представление о биомеханических, клеточных, биохимических и молекулярных условиях заживления с использованием иссеченных ран.

Эпителизация и скорость закрытия ран : Эпителизация является основным элементом заживления ран и определяет степень его достижения. Рану нельзя считать зажившей, если нет реэпителизации.

Польза этих традиционных лекарств, по отдельности и в комбинации, на лучшую эпителизацию во всех пролеченных группах была документально подтверждена нашим предыдущим исследованием (8). В этом исследовании скорость эпителизации была лучше во всех обработанных группах по сравнению с контрольной, как показали биомеханические и гистологические данные даже на модели иссеченной раны.Биомеханические данные показали более высокую скорость реэпителизации в таких группах, как GG и Tot, тогда как гистологически H, GG и H + G показали лучшие результаты.

Ранее было показано, что нарушение этого барьера приводит к инфицированию раны, и неспособность поддерживать этот барьер может серьезно замедлить процесс заживления ран (12). Следовательно, более быстрая эпителизация с помощью этих природных лекарств, как было замечено в настоящем исследовании, является ключом к успешному заживлению ран, поскольку эти эпителиальные клетки создают барьер между внешней средой и микроокружением раны.

Расположение в дерме : Нормальная кожа представляет собой корзинообразный узор переплетения, который невозможно полностью воспроизвести при ремоделировании рубца. Однако ремоделирование раны имеет важное значение и тесно связано с большим увеличением прочности на разрыв раны (13).

В данном исследовании лучшее отложение коллагена наблюдалось на участке раны во всех обработанных группах, в отличие от контроля. Расположение коллагена было организовано и горизонтально переплетено в группах, получавших лечение.Это отличалось от косого и рыхлого расположения волокон коллагена в контрольной группе. Волосяные фолликулы также наблюдались на месте раны в группах, получавших мед, H + G, GG и Tot, что дополнительно подтверждает омолаживающий эффект этих групп на ремоделирование ран. Эти результаты совпадают с нашим ранее опубликованным отчетом о заживлении ран после разрезов (8).

Воспаление в области раны — путем оценки экспрессии интерлейкинов (IL1β) : Воспалительная фаза считается обязательной в процессе заживления, поскольку в ней задействованы лейкоциты, которые производят факторы роста и удаляют остатки раны.Некоторые медиаторы воспаления активируются в процессе заживления, например, IL-1 (14).

IL-1 является основным провоспалительным «тревожным» цитокином, главным образом полученным из макрофагов. Он способствует инфильтрации клеток, воспалению и восстановлению тканей в месте повреждения. Из 11 членов семейства лигандов IL-1, IL-1α и IL-1β являются двумя основными агонистическими молекулами. Напротив, антагонист рецептора IL-1 (IL-1Ra) является физиологическим ингибитором IL-1. По сравнению с IL-1β, IL-1α выражен меньше (15).Поэтому в данном исследовании он не рассматривается.

Процесс заживления ран включает сложную взаимосвязь между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами (16). Следовательно, можно предположить, что активность IL1 α и β обязательна на ранних стадиях заживления, способствуя воспалительной активности. Затем следует передача сигнала IL-1Ra, который снижает воспалительную активность и, таким образом, становится критически важным для нормального заживления ран. Результаты этого исследования еще раз подтверждают этот факт.

Мед, как известно, стимулирует выработку цитокинов, которые помогают заживлению ран (17). Однако, когда действие меда на провоспалительные цитокины ранее было изучено в хронических инфицированных венозных язвах ног, концентрация IL-1 не изменилась (16). В этом исследовании раны, обработанные медом, показали оптимальную провоспалительную активность на 8-й день заживления. Однако к концу 16 дня была выражена лучшая противовоспалительная активность, о чем свидетельствовали более низкие уровни IL1β. Это говорит о том, что мед может способствовать только необходимому количеству воспалительной активности, которая необходима на ранних этапах заживления.Позже он играет роль противовоспалительного средства, способствующего более быстрому заживлению ран.

Гхи также демонстрирует отличные свойства заживления ран благодаря своей антимикробной, иммуностимулирующей и антиоксидантной активности (4,8,18). Однако его прямое влияние на активность IL1 в ране менее изучено. В этом исследовании наблюдались лучшие противовоспалительные реакции ран, обработанных топленым маслом, по сравнению с контролем. К 8 дню заживления активность IL-1β была значительно ниже, что указывает на ранние воспалительные реакции.Сочетание меда и топленого масла продемонстрировало как провоспалительное, так и противовоспалительное действие, что привело к лучшему заживлению.

GG (солодка) доказала свою эффективность при острых и хронических воспалительных состояниях, таких как ревматоидный артрит. Это стало возможным за счет снижения активности IL1β (19). Однако о противовоспалительных свойствах GG при заживлении ран уделялось меньше внимания. В этом исследовании раны, обработанные GG, показали более высокий уровень IL1β на 8-й день, который значительно снизился к 16-му дню.Это указывает на то, что GG может регулировать экспрессию IL1β и проявляет как провоспалительную, так и противовоспалительную активность, которая необходима для заживления. Однако в этом случае провоспалительные реакции были продолжительными, что свидетельствует о продолжающемся привлечении клеток для ускорения заживления ран. Аналогичные наблюдения были сделаны в группах, получавших NI и Tot. Это может указывать на альтернативный режим более быстрого заживления, который требует дальнейшего изучения.

Таким образом, в этом исследовании была предпринята попытка объяснить влияние традиционных лекарств на активность передачи сигналов IL-1 при заживлении ран.Он показал, что эти традиционные лекарства обладают как про, так и противовоспалительной активностью в значительных количествах, что приводит к лучшему заживлению, которое может включать в себя различные методы процесса заживления, которые широко не исследованы.

Роль миофибробластов в заживлении ран : Повреждение тканей активирует фибробласты и превращает их в миофибробласты. Эти клетки создают длительные сокращения и активно продуцируют белки внеклеточного матрикса (ЕСМ), способствующие закрытию раны.И фибробласты, и миофибробласты играют решающую роль в заживлении ран. Однако эти клетки проявляют двойное действие в процессе заживления ран. Соответствующее количество генерирования силы и отложения матрицы является преимуществом для заживления, в то время как чрезмерное производство прочности и матрицы приводит к рубцеванию тканей и нарушению функции восстановленных тканей (20).

В исследовании, проведенном Haryanto et al., Ранняя активность миофибробластов наблюдалась в группах, получавших индонезийский мед по сравнению с гидроколлоидной повязкой i.е., на 3-й день. Мед, таким образом, ускорял образование грануляционной ткани больше, чем гидроколлоидная повязка. На 7 день активность миофибробластов достигла пика и была одинаковой во всех группах, а затем постепенно снижалась к 11 и 14 дням (21). Аналогичные наблюдения были сделаны Накадзимой и др. (22).

В этом исследовании мед и H + G не показали какой-либо значительной разницы в активности миофибробластов по сравнению с контролем на 8-й день. Однако на 16-й день активность миофибробластов значительно снизилась в этих группах по сравнению с контролем.

Лучшее закрытие ран также наблюдалось ранее в ранах, обработанных только топленым маслом и составами на основе топленого масла (4,8,18). Это объяснялось большей активностью миофибробластов. Однако прямое влияние топленого масла на активность миофибробластов менее обсуждается в доступной литературе. В этом исследовании раны, обработанные топленым маслом, показали значительно более высокую активность миофибробластов на 8-й день. На 16-й день их активность была значительно снижена. Это еще раз подтверждает роль топленого масла в раннем закрытии ран без образования рубцов.

GG также зарекомендовал себя как мощное средство для заживления ран благодаря своей противовоспалительной и регенеративной активности (6,8). Его положительное пролиферативное влияние на дермальные фибробласты также обсуждалось ранее (23). Эффект глицирризина на фиброз кожи, вызванный блеомицином (BLM), был изучен ранее. Здесь было обнаружено, что глицирризин облегчает фиброз кожи за счет значительного снижения содержания коллагена и количества миофибробластов (24). В этом исследовании раны, обработанные GG, показали оптимальную активность миофибробластов, что способствовало лучшему заживлению.Это еще раз подтверждает тот факт, что GG твердо контролирует активность миофибробластов при заживлении ран. Он увеличивает активность миофибробластов на ранних этапах заживления, вызывая сокращение и закрытие раны. В конце фазы заживления GG снижает активность миофибробластов, тем самым уменьшая чрезмерное отложение коллагена и тем самым предотвращая фиброз и образование рубцов.

Биомеханические данные в нашем предыдущем исследовании показали повышенную прочность на разрыв ран в группах, получавших NI, что указывает на большую прочность на разрыв (8).В этом исследовании NI продемонстрировал существенное влияние на активность миофибробластов, т.е. значительно увеличил активность миофибробластов на 8-й день, которая значительно снизилась на 16-й день. Это помогло улучшить заживление ран. Это еще раз подтверждает биомеханические данные, представленные в нашем предыдущем исследовании. Хотя Tot показал увеличение активности миофибробластов на 8-й день и снижение на 16-й день. Это открытие, однако, не было статистически значимым. Результаты были лучше только биологически.Таким образом, это исследование было сосредоточено на роли этих традиционных лекарств в полезной активности миофибробластов при заживлении ран, что ранее не обсуждалось.

Таким образом, это исследование сделало попытку дать представление о биомеханических и клеточных механизмах заживления ран. Испытательные материалы, использованные по отдельности и в комбинации, были полезны в исцелении своим уникальным способом. Требуется дальнейшая оценка, чтобы понять роль этих традиционных лекарств в лечении сложных с медицинской точки зрения ран.

Ссылки

1. Хант Т., Берк Дж., Барбул А., Гимбл М. Заживление ран. Наука. 1999; 284: 1775. [PubMed] [Google Scholar] 2. Робсон М.С., Стид Д.Л., Франц М.Г. Заживление ран: биологические особенности и подходы к максимальному увеличению траекторий заживления. Curr Probl Surg. 2001. 38 (2): 65–140. [PubMed] [Google Scholar] 3. Jagetia GC, Baliga MS, Venkatesh P, Ulloor JN. Влияние корневища имбиря (Zingiber officinale Rosc.) На выживаемость, глутатион и перекисное окисление липидов у мышей после воздействия гамма-излучения на все тело.Radiat Res. 2003; 160: 584–592. [PubMed] [Google Scholar] 4. Molan PC. Доказательства использования меда в качестве перевязочного материала. Int J Раны нижних конечностей. 2006; 5: 40–54. [PubMed] [Google Scholar] 5. Прасад V, Дорле АК. Оценка ранозаживляющей активности состава на основе топленого масла. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 38–47. [PubMed] [Google Scholar] 6. Олуми М.М., Дерахшанфар А., Никпур А. Лечебный потенциал экстракта корня солодки на кожных ранах у крыс. J Vet Res. 2007; 62: 147. [Google Scholar] 7.Чайтанья С.К., Сарвани М., Срилакшми С., Ашаджьоти В. Заживляющие травы — обзор. Int J Pharm Technol. 2010; 2: 603–624. [Google Scholar] 8. Kotian SR, Pai KSR, Nayak JK, Bangera H, Prasad K, Bhat KMR. Биомеханические, биохимические и гистологические доказательства ранозаживляющих свойств традиционных индийских лекарств. Int J Pharm Pharm Sci. 2015; 7 (11): 163–171. [Google Scholar] 9. Учебник по фармацевтике Дэвиса Х. Бентли. 6-е издание. Лондон: Баллиер, Тиндалл и Ко; 1956. С. 272–230. [Google Scholar] 10.Lundeberg TCM, Eriksson SV, Malm M. Электрическая стимуляция нервов улучшает заживление диабетических язв. Ann Plastic Surg. 1992; 29: 328–331. [PubMed] [Google Scholar] 11. Датта Х.С., Митра С.К., Патвардхан Б. Ранозаживляющая активность форм местного применения на основе аюрведы. Evid Based Complement Alternat Med. 2011; 2011: 134378. DOI: 10.1093 / ecam / nep015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Пастар И.П., Стоядинович О., Инь Н.К., Рамирес Х., Нусбаум А.Г., Савая А., Патель С.Б. и др. Эпителизация в заживлении ран: всесторонний обзор.Adv Уход за раной. 2014. 3 (7): 445–464. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Монако JL, Лоуренс WT. Острое заживление ран. Обзор. Clin Plastic Surg. 2003; 30: 1–12. [PubMed] [Google Scholar] 14. Graves DT, Nooh N, Gillen T., Davey M, Patel S, Cottrell D, Amar S. IL-1 играет решающую роль в оральном, но не кожном заживлении ран. J Immunol. 2001. 167: 5316–5320. [PubMed] [Google Scholar] 15. Карми Ю., Воронов Э., Дотан С. и др. Роль ИЛ-1, полученного из макрофагов, в индукции и поддержании ангиогенеза 1.J Immunol. 2009. 183: 4705–4714. [PubMed] [Google Scholar] 16. Ян С.К., Госс С., Алькантара С. и др. Влияние медицинского меда на провоспалительные цитокины при хронических инфицированных венозных язвах ног. Pak J Pharm Sci. 2015; 28 (3): 973–981. [Google Scholar] 17. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П., Блэр С., Партон Дж., Тонкс А. Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами. Цитокин. 2003. 21: 242–247. [PubMed] [Google Scholar] 18. Фулзеле С.В., Бхурчанди П.М., Канодже В.М., Джоши С.Б., Дорле А.К. Иммуностимулирующая активность Ashthamangal Ghrita у крыс.Ind J Pharmacol. 2002; 34: 194–197. [Google Scholar] 19. Ким К.Р., Чон С.К., Пак К.К., Чхве Дж. Х., Чон Пак Дж. Хай, Лим СС, Чунг В.Й. Противовоспалительные эффекты солодки и экстрактов жареной солодки на вызванное TPA острое воспаление и коллаген-индуцированный артрит у мышей. J Biomed Biotechnol. 2010; 2010: 709378. DOI: 10.1155 / 2010/709378. Epub 2010 17 марта [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Ли Б., Ван JHC. Фибробласты и миофибробласты в заживлении ран: создание и измерение силы.J Жизнеспособность тканей. 2011; 20 (4): 108. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Харьянто, Урай Т., Мукаи К., Суриади, Сугама Дж., Накатани Т. Эффективность индонезийского меда на ускорение заживления кожных ран: экспериментальное исследование на мышах. Раны. 2012. 24 (4): 110–119. [PubMed] [Google Scholar] 22. Накадзима Ю., Накано Ю., Фувано С. и др. Влияние трех типов японского меда на толстую рану у мышей. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 504537. DOI: 10.1155 / 2013/504537.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Котиан С. Р., Падма Д., Мадукар Р., Бхат КМР. Влияние природных лекарств на дермальные фибробласты при заживлении ран: исследование In-Vitro . Adv Sci Lett. 2017; 23 (3): 1949–1956.
Leave a Reply

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *