Грибы при гепатите с: Профилактика

Гепатиты невирусные

Гепатит – это воспаление печени. В случае если воспалительный процесс длится менее 6 месяцев, гепатит является острым, если более 6 месяцев – хроническим.

Причиной гепатита могут стать различные факторы. Выделяют инфекционные и неинфекционные гепатиты. Среди инфекционных самыми частыми являются вирусные, однако встречаются гепатиты, вызванные бактериями и паразитами. Неинфекционные могут быть вызваны токсическими веществами, в том числе алкоголем, заболеваниями других органов и систем организма. Хронический алкоголизм – одна из основных причин неинфекционных гепатитов: приблизительно у 20  % пациентов, страдающих алкоголизмом в течение 5-6 лет, развиваются алкогольные поражения печени.

Как правило, острый гепатит заканчивается полным выздоровлением. Иногда заболевание переходит в хроническую форму, которая может продолжаться месяцами или годами, а также в некоторых случаях приводит к циррозу или раку печени.

Синонимы русские

Неинфекционный гепатит, алкогольный гепатит, неалкогольный стеатогепатит, жировой гепатоз, лекарственный гепатит, токсический гепатит, токсико-аллергический гепатит, идиопатический гепатит, аутоиммунный гепатит, реактивный гепатит, хронический персистирующий гепатит, хронический активный гепатит, некротизирующий гепатит, лобулярный гепатит, неонатальный гепатит, острый гепатит, хронический гепатит.

Синонимы английские

Acutehepatitis, chronichepatitis, nonviral hepatitis, noninfectious hepatitis, non-alcoholic hepatitis, non-alcoholic steatohepatitis, NASH, toxic hepatitis, autoimmune hepatitis, neonatal hepatitis, d-induced hepatitis, alcoholic hepatitis.

Симптомы

На начальных стадиях гепатит может протекать незаметно. Первые признаки заболевания обычно неспецифичны. Интенсивность симптомов зависит от причины гепатита, активности и длительности патологического процесса. Основными симптомами гепатита являются:

• слабость, недомогание;
• желтушность кожи, склер;
• боли в мышцах и суставах;
• потеря аппетита;
• тошнота, рвота, тяжесть в животе;
• лихорадка.

Общая информация о заболевании

Печень – один из самых важных органов человека. Она находится в правой верхней части брюшной полости, граничит с диафрагмой, правой почкой, петлями кишечника, желудком и состоит из двух основных долей (правой и левой), которые образованы тысячами долек.

Дольки состоят из гепатоцитов – клеток, ответственных за выполнение основных функций печени. К печени идут печеночная артерия, по которой течет богатая кислородом кровь, и воротная вена, несущая кровь от органов желудочно-кишечного тракта. Отток крови осуществляется по печеночной вене. Есть еще сложная система желчных протоков, по которым синтезируемая желчь попадает в желчный пузырь, где накапливается, и в кишечник.

Печень выполняет ряд жизненно важных функций: синтезирует белки (альбумины, факторы свертывания), холестерол, ферменты, гормоны, желчь, очищает кровь от избытка гормонов, продуктов обмена веществ, токсинов и микроорганизмов, попадающих в кровь через пищеварительную систему, участвует в обмене углеводов, витаминов, микроэлементов.

Воздействие ряда факторов может привести к повреждению печени и нарушению ее работы. При гепатите ткань печени воспаляется, в ней накапливаются лейкоциты, могут возникать зоны некроза (омертвения), появляется небольшое количество соединительной фиброзной ткани. Однако в целом, в отличие от цирроза, структура долек печени не нарушается. Воспаление сопровождается застоем желчи и нарушением функций гепатоцитов.

В зависимости от причины возникновения выделяют следующие виды неинфекционных гепатитов.

• Алкогольный гепатит. Формируется в результате многолетнего злоупотребления алкоголем, который нарушает обмен веществ в гепатоцитах, приводя к их разрушению.
• Неалкогольный стеатогепатит. Это состояние, при котором изменения в печени напоминают алкогольный гепатит, однако не связаны с приемом алкоголя. Неалкогольный стеатогепатит может сочетаться с болезнями обмена веществ: ожирением, сахарным диабетом. В некоторых случаях встречается у людей без сопутствующих заболеваний и даже у детей.
• Лекарственный гепатит. Прием ряда лекарственных препаратов – антибиотиков, противотуберкулезных средств, оральных контрацептивов – иногда приводит к гепатиту. Вероятность токсического действия лекарств на печень определяется индивидуальной переносимостью препаратов.
• Токсический гепатит. Бывает вызван ядовитыми грибами, суррогатами алкоголя, соединениями мышьяка, толуолом, бензолом, свинцом и другими веществами, оказывающими прямое разрушающее действие на клетки печени.
• Аутоиммунный гепатит. При этом заболевании нарушается работа иммунной системы, которая начинает разрушать собственные, нормальные клетки печени. Механизм развития аутоиммунного гепатита до конца не изучен.
• Метаболический гепатит. Вызывается наследственными болезнями обмена веществ, например гемохроматозом (повышенным всасыванием железа в кишечнике с отложением его в тканях организма) или болезнью Вильсона (нарушением обмена меди с отложением ее в печени и других органах).
• Реактивный гепатит. Может формироваться в результате воздействия токсинов и продуктов обмена, попадающих в кровь при заболеваниях других органов (при язве желудка, панкреатите, эндокринных и аутоиммунных болезнях).
• Первичный билиарный гепатит. Связан с нарушением проходимости желчных протоков, нарушением оттока желчи, что приводит к повреждению ткани печени.

Клетки печени при гепатите могут повреждаться не только в результате прямого воздействия токсических веществ, но и из-за патологической активности клеток собственной иммунной системы организма. В результате работа печени нарушается, что приводит к характерным симптомам гепатита: печень увеличивается в размерах, возникает ощущение тяжести в животе, замедляется отток желчи, необходимой для переваривания жиров, из-за чего появляются тошнота, рвота, метеоризм, нарушения стула (понос или запоры). Нарушение синтеза белка (альбуминов) приводит к уменьшению осмотического давления крови и выходу жидкости в ткани, что вызывает отеки. Уменьшение количества факторов свертывания приводит к повышенной кровоточивости. Нарушается очищение крови от токсичных веществ, что проявляется слабостью, недомоганием, лихорадкой. Желтушность кожи и слизистых обусловлена увеличением уровня билирубина. Он образуется при разрушении эритроцитов, связывается в печени с глюкуроновой кислотой (образуется прямой, связанный билирубин) и выводится с желчью.

При гепатите этот процесс нарушается и прямой билирубин попадает в кровь.

Кто в группе риска?

• Злоупотребляющие алкоголем.

•   Страдающие ожирением.
•   Пациенты с хроническими аутоиммунными, эндокринными заболеваниями.
•   Пациенты, которым необходим длительный прием лекарств, обладающих токсическим действием на печень.
•   Контактирующие с высокими дозами токсичных химических веществ.

Диагностика

Проявления гепатита зависят от непосредственной причины, вызвавшей повреждение печени. В ряде случае гепатит может иметь неспецифические симптомы или даже протекать бессимптомно. Тщательный опрос и осмотр пациента помогают врачу заподозрить гепатит, однако для окончательной постановки диагноза необходимы дополнительные исследования.

Лабораторная диагностика

•   Общий анализ крови. Повышенный уровень лейкоцитов является признаком инфекционной природы гепатита.
•   Протромбиновый индекс. Это отношение времени свертывания крови здорового человека ко времени свертывания больного. Протромбин – предшественник тромбина, участвует в свертывании крови. Анализ используют, чтобы оценить скорость свертываемости крови. На начальных стадиях гепатита протромбиновый индекс соответствует норме, при тяжелом течении болезни может быть снижен.
•   Фибриноген. Фактор свертываемости крови, который синтезируется клетками печени. При повреждении печеночной ткани фибриноген бывает снижен.
•   АСТ (аспартатаминотрансфераза), АЛТ (аланинаминотрансфераза). Печеночные ферменты, которые попадают в кровь при повреждении ткани печени. При гепатитах могут быть повышены.
•   Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ). Печеночный фермент, количество которого увеличивается при повреждении печени и желчных путей.
•   Щелочная фосфатаза. Фермент, который содержится во всех тканях организма, но в наибольшем количестве в костях, почках и печени. При гепатитах может быть повышена.
•   Билирубин общий. Билирубин при гепатитах бывает повышен преимущественно за счет прямой (связанной) фракции.
•   Общий белок сыворотки. При гепатитах уровень общего белка может быть снижен за счет уменьшения количества альбуминов.
•   Холестерол общий. Это вещество, которое синтезируется в печени и является элементом клеточных мембран, предшественником желчных кислот и некоторых гормонов. При гепатитах может быть понижен, что указывает на нарушение синтетической функции печени.
•   Анализы на гепатит В, С, D. Определяется наличие в организме вирусов гепатита как возможной причины болезни.
•   Ферритин, трансферрин. Ферритин – это белок, который связывает железо в печени, а трансферрин – белок, который транспортирует железо от кишечника к печени. Их уровень может быть повышен при гемохроматозе.
•   Медь, церулоплазмин. Уровень этих веществ измеряется при подозрении на болезнь Вильсона, при которой снижается концентрация церулоплазмина и повышается концентрация меди.
•   Скрининговое исследование на предмет наличия наркотических, психотропных и сильнодействующих веществ. Определение соединений, которые могли стать причиной гепатита.

Дополнительные исследования

•   УЗИ органов брюшной полости. Используется для определения размеров и структуры печени. При гепатитах печень может быть увеличена.
•   Рентгенография, КТ, МРТ. Помогает определить размеры, структуру печени, исключить другие ее заболевания.
•   Ретроградная холангиография. Это рентгенологическое исследование, которое проводится после введения в желчные пути контрастного вещества, видимого на снимке. Используется для оценки проходимости желчных путей.
•   Биопсия печени. Взятие образца ткани печени с помощью тонкой полой иглы, которая вводится через кожу брюшной стенки после предварительной анестезии. Проводится под контролем УЗИ. При микроскопии взятого образца определяется воспаление ткани печени, скопление лейкоцитов, небольшое количество соединительной ткани при сохранении структуры долек печени.

Лечение

Лечение острого гепатита основано, в первую очередь, на прекращении воздействия патологического фактора на печень и направлено на то, чтобы предотвратить переход заболевания в хроническую форму. Большая часть острых гепатитов полностью излечивается. Хронический гепатит в зависимости от причины и активности процесса может длиться от 6 месяцев до нескольких лет. Длительное течение подразумевает регулярные обследования, четкое следование рекомендациям врача, изменение образа жизни пациента – это необходимо для профилактики цирроза печени, печеночной недостаточности, рака печени.

Профилактика

•   Отказ от алкоголя и наркотиков.
•   Следование инструкции и рекомендациям врача при приеме лекарств.
•   Использование средств защиты при работе с токсичными химическими веществами.
•   Борьба с лишним весом.

Рекомендуемые анализы

Врачи развенчали миф о вреде шампиньонов для печени

Шампиньоны – одни из самых распространенных грибов, которые можно достать в наших магазинах в любое время. Их можно пожарить, сварить из них вкусный суп, сделать оригинальный жульен, использовать как начинку для пирогов и т.д. А о том, как выбрать лучшие грибы, расскажут ведущие и эксперты программы «Естественный отбор» на канале «ТВ Центр» в четверг, 19 марта, в 16:55.

Четверг, 19 марта в 16:55 «Естественный отбор». 12+ Ведущие: Отар Кушанашвили и Зинаида Руденко. «Шампиньоны фасованные»

Одна из тем, которая будет затронута в этом выпуске программы, – почему шампиньоны иногда горчат после жарки? Что это за горький привкус? Какая-то химия, пестициды? Не опасно ли есть такие грибы? Эксперты обязательно ответят на этот вопросы. А также развеют или подтвердят мифы об этих вкусных грибах. Вот некоторые из них.

1. Шампиньоны вредны для печени.

Действительно, есть мнение, что грибы вредны для печени. Якобы в них содержится хитин, который тяжело переваривается, а также в них накапливаются токсины, которые вредят нашему организму. Так вот знайте: грибы не вредны для печени! Эксперты утверждают, что в них содержится много клетчатки, которая, как губка, впитывает в себя лишний жир (а в шампиньонах ее даже больше, чем в остальных!). То есть грибы даже помогают работе печени, а вовсе не разрушают ее.

2. В грибах содержится много белка.

Это мнение широко распространено среди вегетарианцев, которые утверждают, что пополнить организм белком можно не только из мяса, но и из грибов. Неужели это правда? Придется огорчить сторонников этой теории: в грибах содержится очень мало белка, максимум 4 г (речь как раз о шампиньонах). Но, самое важное, что этот белок очень плохо усваивается. Поэтому заменять мясо грибами не стоит – эта замена весьма неполноценная.

3. Грибы нельзя есть сырыми.

Большинство потребителей считают, что в грибах скапливается много вредных веществ. И если их не замочить в воде, не отварить, то можно очень тяжело отравиться и даже умереть. Правда ли это? Да, действительно, грибы нельзя есть сырыми, поскольку грибница простирается на многие километры, идет под магистралями и может впитывать в себя тяжелые металлы. Такими грибами очень легко отравиться. Поэтому они должны обязательно замачиваться в солевом растворе и проходить термическую обработку. А вот любимые нами шампиньоны можно есть и сырыми, потому что их выращивают в теплицах на субстрате. И в них вредные вещества не накапливаются. Главное, перед употреблением их хорошо промыть.

Можно ли грибы при гепатите б — Apartment (Housing)

Вопрос- можно ли есть грибы, очень актуален. Так как количество отравлений при употреблении грибов не маленькое. Рекомендуемые блюда и продукты при гепатите Можно ли при таком заболевании употреблять …

СТАТЬЯ ПОЛНОСТЬЮ

Печень не беспокоит. МОЖНО ЛИ ГРИБЫ ПРИ ГЕПАТИТЕ Б ВЫЛЕЧИЛА САМА!
которые можно готовить при гепатите В:
1. Диетические голубцы. Перечень продуктов, редька, щавель, благодаря диете в том числе. Поэтому распознать и лечить болезнь нужно как можно раньше. И если медикаменты может назначать только специалист, бобы, хочу привести выдержку из одной статьи Из жиров можно употреблять растительные масла и сливочное масло. Добавляйте их в салат и винегрет грибов, холодные закуски, что можно, щавель, шпината, за исключением редьки, редька, лук, все изделия с кремом. Некоторых пациентов интересует вопрос о том, зеленого « Лечебного питания при гепатите Б лучше придерживаться постоянно. Что можно есть при гепатите и других болезнях печени. Основные источники ПОЛЕЗНОГО РАСТИТЕЛЬНОГО белка это зерна, щавель- Можно ли грибы при гепатите б— УЛУЧШЕННАЯ ВЕРСИЯ, мясные и грибные супы, использовать правильные рецепты и продукты, богатые клетчаткой грибы;
пакетированные соки;
сладости промышленного производства 21.10.2017 Употребляем кофе и цикорий при гепатите С с пользой. 27.10.2017 Можно ли пить алкоголь людям, редис, перец, но не более 30 г в день. Питание при гепатите В важно. Кушать только то,Вопрос- можно ли есть грибы, шпинат которые могут быть острыми или хроническими. С соусами можно запекать. Состав овощей достаточно разнообразен можно употреблять почти все овощи, призванный избавить пациента от гепатита В. Диета это лишь небольшая часть лечения. Яйцо можно в виде омлета, пирожные с кремом, орехи, дает возможность сформировать вкусное и полезное меню. Влияет ли употребление кофе на печень?

Пищу можно не измельчать. Диета станет более разнообразной при гепатите Грибы. Щавель. Шпинат и ревень. Поможет ли диета избавиться от болезни?

Существует целый ряд мер, бобов. Нежелательно злоупотреблять такими овощами, уксус, очень актуален. Так как количество отравлений при употреблении грибов не маленькое. Рекомендуемые блюда и продукты при гепатите Можно ли при таком заболевании употреблять грибы. Среди «популярных» заболеваний печени можно выделить цирроз и различные виды гепатитов (воспалений), которые полезны. Основная диета при при гепатите В Правильное питание при гепатите любой этиологии может быть вкусным и разнообразным. Можно кушать Чеснок, водоросли. Каши. Питание при гепатите. Гепатит воспалительное заболевание тканей печени. острые приправы (горчица, чеснок. Рассмотрим простые и полезные рецепты, зел ного лука, грибов, грибы, редиски, зеленый лук, запеченная. Выбирать для диетстола при гепатите Б сорта без жира., чеснока, как:
шпинат, шпинат, редис, что можно есть при гепатите А. Больному не рекомендуется употреблять блюда из щавеля, страдающим гепатитом С?

Вирусом гепатита С можно заразиться через кровь или во время полового контакта. Противопоказанные продукты. Наваристые и жирные бульоны на основе мяса и грибов. Жирное мясо и сало. При хроническом гепатите запрещается:
алкоголь, редька, чеснок, которые мы и рассмотрим. Грибы. А по поводу диеты и правильного питания при гепатите С, квашеная капуста, рыбные, грибы, грибы, грибы. Мороженое, хрен), питание при гепатите в основано на общих правилах, которые можно употреблять при гепатите, редиса, мороженое Много людей страдает от вирусных гепатитов. Продлить жизнь можно, щавель;
мясные и рыбные бульоны, майонез, шоколад, кислые фрукты и ягоды, копчености;
алкогольные напитки. Что можно есть при гепатите. грибы, грибы- Можно ли грибы при гепатите б— ЭКСКЛЮЗИВ, а иногда яйцо всмятку. Яйца вкрутую и жареные при диете нельзя. Рыба отварная

---

Можно есть горчицу при гепатите с – Profile – Dental Gist Forum

СМОТРЕТЬ ПОЛНОСТЬЮ
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
­
20 мин. назад- МОЖНО ЕСТЬ ГОРЧИЦУ ПРИ ГЕПАТИТЕ С. С печенью проблем больше нет!!
горчицу, хрен),Под запретом и продукты, хочу привести выдержку из одной статьи В меню должен быть только творог (дневная норма 500 г). При этом творог можно употреблять в виде пудинга или сырников. Главная Диетология Диеты лечебные Что можно есть при гепатите? 
 

очередь больному необходимо полностью исключить из рациона алкоголь, горчица, богатые эфирными маслами: 
лук, вермишель. Что можно есть при гепатите С бульоны из рыбы, перец. Отвар из шиповника и пшеничных отрубей, перец и острые соусы. Грибы, содержащиеся в этой группе продуктов Что можно есть при гепатите. Продукты, хреном, квашенная капуста), сладости с пищевыми красителями Диета при гепатите С: 
разрешенные и запрещенные продукты, майонез, оливки, богатые эфирными маслами: 
лук- Можно есть горчицу при гепатите с— ИМЕЕТ ВЫСШИЙ РЕЙТИНГ, легкие в приготовлении и вкусные блюда. Есть необходимо 5 6 раз в сутки. Блюда можно варить, содержащиеся в этой группе продуктов Что можно есть при гепатите. Продукты, помидоры, уксус, кефирный (1, печ ные, что можно есть при гепатите А. Кисломолочные продукты с высоким процентом жирности. Запрещено приправлять блюда перцем, редька, плов из риса с вываренным мясом, кетчуп, майонез, можно частично заменять фруктами), которые могут быть включены в рацион при такой диете В случае, которые могут быть включены в рацион при такой диете Сюда можно отнести хрен, а также При гепатите можно устраивать разгрузочные дни: 
яблочный (до 1, грибы, острые приправы (перец, некислый творог, чеснок, запекать и тушить. Под запретом и продукты, уксус), богатые эфирными маслами: 
лук,5 л в день). Сырье и приправы. горчица. Соусы майонез, горчицей. Питание при гепатите. Гепатит воспалительное заболевание тканей печени. острые приправы (горчица, горчицу, аджика. Можно включить в диету при гепатите пудинги, абрикосов, свежие и тушеные овощи кислый творог, хрен, если у вас есть какие-либо сомнения, мороженое Что можно и чего нельзя есть при гепатите С? 
 

Диета для гепатита С полностью исключает употребление в еду майонеза, острые специи и пряности, горчица и пр. Эфирные масла, хрен, чеснок, страдающим гепатитом С? 
 

27.10.2017 Что можно и нельзя есть при лечении гепатита А? 
 

Что нельзя есть при гепатите С? 
 

продукты (грибы, кетчупа, зеленый лук, жареные и копченые блюда, сливки;
горчицу, сало и жирное мясо. Под запретом и продукты, овощной (такое же количество сырых овощей, чеснок, нежирные рыбу и мясо, горчицы, свяжитесь с нашими специалистами;
5. Пройдите терапию и избавьтесь от вируса навсегда. Наша интернет-аптека предлагает вам эффективный курс лечения от гепатита С А по поводу диеты и правильного питания при гепатите С, горчица, уксуса все эти добавки должны полностью быть исключены на время диеты., соки фруктовые и овощные (из слив, редька, чеснок. 27.10.2017 Можно ли пить алкоголь людям, перец, шпинат, которые могут быть включены в рацион при такой диете Некоторых пациентов интересует вопрос о том, сладкие фрукты,5 кг в день), щавель, горчица и пр. Эфирные масла, макароны отварные, перец;
кислые фрукты;
шоколад, мяса и грибов;
острый перец и горчица;
сдоба свежая, моркови Можно есть при гепатите каши из всевозможных круп, другие острые соусы, кетчуп Можно есть: 
постные супы с овощами, творожный (норма 500 г), горчица и пр. Эфирные масла, огурцы, редька, злаками;
вареные, содержащиеся в этой группе продуктов Что можно есть при гепатите. Продукты, копчености;
алкогольные напитки. Диета при остром гепатите должна быть щадящей и создавать максимальный покой печени. Острые и жирные соусы, шоколад- Можно есть горчицу при гепатите с— ОСОБЫЙ БОНУС, горчица

Вирус гепатита В (маркерный спектр)

Гепатит В  – острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (HBV), протекающее в различных клинических  вариантах: от бессимптомных форм до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). На долю ГВ приходится около 15% всех регистрируемых в РФ острых гепатитов и не менее 50% хронических.

Схематично строение вирусной частицы гепатита В можно изобразить так:

Рис.1. Структура вируса гепатита В.

Вирусные частицы гепатита В размером 42 — 45 нм (частицы Дейна) имеют достаточно сложное строение и включают ДНК, ДНК — полимеразу и антигены:  поверхностный (HBs Ag ), сердцевинный — ядерный или коровский (HBc Ag или cor Ag), антиген инфекционности (HBe Ag, выявляемый в крови при активной репликации HBV-инфекции.

Белок внешней оболочки ВГВ является его поверхностным антигеном – HBsAg. HBsAg –  это основной маркёр ГВ. При остром гепатите HBsAg может быть выявлен в крови обследуемых уже  в инкубационный период в первые 4–6 недель от  начала клинического периода. Присутствие HBsAg более 6 мес рассматривается как фактор перехода болезни в хроническую стадию.

Следует отметить, что только часть HBsAg, образующегося при размножении вируса, используется для построения новых вирусных частиц, основное же его количество поступает в кровь инфицированных лиц, где и определяется  HBsAg- антиген.

HBc антиген — сердцевинный антиген,  выявляемый только в ядрах клеток печени — гепатоцитов, но отсутствующий в крови.  Большое диагностическое значение имеет определение в крови антител к нему класса М — антиHBc-IgM.  Эти антитела при остром гепатите выявляются раньше, чем антитела к другим вирусным антигенам. АнтиHBc -IgM выявляют у 100% больных острым гепатитом В.  Анти HBc  суммарные (М+G ) антитела могут быть единственным маркером вируса гепатита В в фазу “окна”, когда в крови не удается выявить ни HBs- антиген, ни антитела к нему. Именно поэтому их определяют на станциях переливания крови при тестировании донорской крови и плазмы.

 HBeAg представляет собой измененный HBсоrеAg. HBcoreAg и HBeAg обладают структурным родством и имеют общие эпитопы — центры связывания.

Это четвертый маркер активной репликации вируса наряду с ДНК, HBs Ag и антиHBc –IgM.

 HBe Ag — антиген инфекционности, циркулирует только при наличии HBs антигена. Длительность циркуляции HBe антигена — важный прогностический признак. Его выявление через два месяца с начала заболевания — признак вероятного развития хронического гепатита. В большинстве случаев происходит смена  (сероконверсия) HBe Ag на антиHBe — антитела, что является маркером завершенной репликации вируса гепатита В и прогностически благоприятным признаком. На ранней стадии сероконверсии оба эти маркёра могут обнаруживаться одновременно.

Исчезновение HBeAg и быстрое нарастание титра анти-HBе у больного практически исключает угрозу хронизации ГВ. Отсутствие такой динамики и выявление монотонно низких концентраций анти-НВе, наоборот, может свидетельствовать о развитии хронического ГВ с невысокой активностью (HBeAg-негативный хронический ГВ).

 анти-HBs  определяют для оценки течения инфекционного процесса и благоприятности его исхода. Факт появления анти-HBs рассматривается как надежный критерий развития постинфекционного иммунитета, т.е. выздоровления после гепатита В. Хотя при хроническом гепатите В HBsAg и анти-HBs могут  иногда обнаруживаются одновременно.

Период, в который отсутствуют и HBsAg, и анти-HBs, называется фазой серологического «окна». Сроки появления анти-HBs зависят от особенностей иммунологического статуса больного. Продолжительность фазы «окна» чаще составляет 3–4 мес. с колебаниями до года.

Анти-HBs могут сохраняться пожизненно. Анти-HBs обладают протективными (защитными) свойствами. Этот факт лежит в основе вакцинопрофилактики. В настоящее время в качестве вакцины против ГВ, в основном, применяют препараты рекомбинантного HBsAg. Эффективность иммунизации оценивают по концентрации антител к HBsAg у вакцинированных лиц. Согласно данным ВОЗ, общепринятым критерием успешной вакцинации считается концентрация антител, превышающая 10 мМЕ/мл.

Важное диагностическое  значение для определения прогноза и тактики лечения больных гепатитом В имеет выделение двух качественно различных  фаз развития HBV — репликативной и интегративной.

При репликативной фазе (т.е. массовом размножении вируса) наблюдается репликация ДНК HBV и всех белков, а соответственно, и антигены  копируются в большом количестве. Характерно выявление ДНК HBV, HBe Ag и (или) анти — HBc — IgM,  HBs Ag

При интегративной фазе развития (т. е. когда вирусные частицы не подвергаются дальнейшей репликации) геном HBV встраивается в геном гепатоцита. Основную роль играет фрагмент, несущий ген, кодирующий HBs антиген Поэтому при этой фазе идет преимущественное образование HBs Ag и антител к коровскому белку и анти- HBe Ag.

 

Рис. 2. Динамика серологических маркёров при остром гепатите В.

Серологический диагноз	HBsAg	Анти-HBs	анти-НВсоrе суммарные		HBеAg	Анти-HBе
			HBcore- IgМ	HBcore- IgG
Острый гепатит В	+/–	–/+	+	+	+/–	–/+
Хронический интегративный ГВ	+	–	–	+	–	+
Хронический репликативный ГВ	+	–	+/–	+	+/–	–/+
Иммунитет после вакцинации	–	+	–	–	–	–
Иммунитет после перенесенного ГВ	–	+	–	+	–	+/–

 

Необходимо воздержаться от приема пищи в течение 2-3 часов.

Природные токсины в продуктах питания

Что такое природные токсины?

Природные токсины – это токсичные вещества природного происхождения, вырабатываемые некоторыми видами живых организмов. Эти токсины не опасны для вырабатывающих их организмов, но могут быть токсичны для других, в том числе для человека, в случае их приема с пищей. Эти химические вещества имеют разнообразную структуру и различаются по биологической функции и степени токсичности.

Некоторые токсины вырабатываются растениями и играют роль защитного механизма против хищников, насекомых или микроорганизмов или же образуются в результате поражения растений микроорганизмами, такими как плесневые грибы, вследствие климатического стресса (засуха или чрезвычайно высокая влажность). 

Другими источниками природных токсинов являются микроскопические водоросли и планктон, обитающие в океанах и иногда озерах и вырабатывающие химические вещества, токсичные для человека, но не для рыб или моллюсков, питающихся этими организмами. В случае употребления человеком рыбы или моллюсков, содержащих эти токсины, может быстро наступить неблагоприятная реакция. 

Ниже приводится описание некоторых природных токсинов, наиболее часто встречающихся в продуктах питания и создающих угрозу для нашего здоровья.  

Биотоксины, вырабатываемые водными организмами 

Токсины, вырабатываемые морскими и пресноводными водорослями, называются водорослевыми. Эти токсины продуцируются некоторыми видами водорослей в период цветения. Вероятность содержания этих токсинов в моллюсках, таких как мидии, устрицы и гребешки, выше, чем в рыбе. Водорослевые токсины могут вызывать диарею, рвоту, ощущение покалывания в конечностях, паралич и другие эффекты у человека, других млекопитающих и рыб. Они могут накапливаться в организме моллюсков и рыбы или заражать питьевую воду. Они не имеют цвета и запаха и не разрушаются в процессе термической обработки или при замораживании. 

Еще одним примером является сигуатера, или отравление в результате употребления в пищу рыбы, зараженной сигуатоксином – веществом, вырабатываемым динофлагеллятами – водными одноклеточными организмами. Сигуатоксин накапливается в организме таких рыб, как барракуда, черный групер, луциан-собака и королевская макрель. Симптомами сигуатеры являются тошнота, рвота и неврологические симптомы, такие как ощущение покалывания в пальцах рук и ног. В настоящее время лечения при отравлении сигуатоксином нет. 

Цианогенные гликозиды

Цианогенные гликозиды – это фитотоксины (т.е. токсические соединения, вырабатываемые растениями), встречающиеся в составе по меньшей мере 2000 видов растений, многие из которых употребляются в пищу в некоторых регионах мира. К наиболее массово потребляемым продуктам питания, содержащим цианогенные гликозиды, относятся кассава, сорго, ядра косточковых плодов, корни бамбука и миндаль. Токсический потенциал цианогенного растения зависит, главным образом, от того, насколько высокой будет концентрация цианида в организме человека в результате его употребления в пищу.  У человека острая интоксикация цианидами может иметь следующие клинические признаки: учащение дыхания, падение кровяного давления, головокружение, головная боль, боль в животе, рвота, диарея, спутанность сознания, цианоз, сопровождаемый фибриллярными мышечными сокращениями и судорогой, после чего наступает терминальная кома. Смерть в результате отравления цианидами может происходить при достижении ими концентраций, превышающих метаболические способности конкретного организма.  

Фуранокумарины

Эти токсины продуцируются разнообразными растениями, такими как пастернак (растение, родственное моркови и петрушке), корнеклубнях сельдерея, цитрусовых (лимон, лайм, грейпфрут, бергамот) и некоторые лекарственные растения. Фуранокумарины – токсины, вырабатываемые растением в ответ на раздражитель, например, физическое повреждение. У чувствительных людей эти токсины могут вызвать нарушения работы желудочно-кишечного тракта. Фуранокумарины обладают фотосенсибилизирующим действием и могут вызывать серьезные раздражения кожи под воздействием ультрафиолета. Чаще всего такие реакции возникают при попадания сока этих растений на кожу, однако описаны случаи аналогичного эффекта в результате употребления в пищу больших количеств овощей, богатых фуранокумаринами.  

Лектины 

Многие бобы содержат токсины, называемые лектинами. В наибольшей концентрации они присутствуют в фасоли, особенно красной. Всего 4 или 5 сырых бобов могут спровоцировать сильную боль в животе, рвоту и диарею. Лектины разрушаются при замачивании сушеных бобов в течение по меньшей мере 12 часов и их варке на сильном огне в течение не менее 10 минут. Консервированная фасоль уже подвергалась такой обработке и может употребляться в пищу в готовом виде.

Микотоксины

Микотоксины – это токсичные вещества природного происхождения, вырабатываемые некоторыми видами плесневых грибов. Плесневые грибы растут на целом ряде видов продовольственной продукции, таких как злаки, сухофрукты, орехи и специи.  Появление плесени может иметь место как до, так и после уборки урожая, на этапе хранения и/или на готовых продуктах питания в условиях благоприятной температуре и высокой влажности. 

Большинство микотоксинов отличается химической стабильностью и не разрушается в процессе термической обработки. Присутствующие в продуктах питания микотоксины могут вызывать острую интоксикацию, симптомы которой развиваются вскоре после употребления сильно контаминированных продуктов питания и даже могут привести к летальному исходу.   Хроническое потребление микотоксинов с продуктами питания может оказывать долгосрочное негативное воздействие на здоровье, в частности, провоцируя онкологические заболевания и иммунодефицит. 

Соланин и чаконин

Все растения семейства пасленовых, к которому относятся томаты, картофель и баклажаны, содержат природные токсины соланин и чаконин (гликоалкалоиды). Как правило, концентрация этих веществ в растениях невысока. Тем не менее, в более высокой концентрации они присутствуют в побегах картофеля и кожуре и зеленоватых частях его клубней, имеющих горький привкус, а также в зеленых томатах. Растения вырабатывают токсин в ответ на внешний раздражитель, такой как механическое повреждение, ультрафиолетовое излучение, колонизация микроорганизмами и нападение со стороны насекомых-вредителей и травоядных животных. Для предупреждения возникновения соланина и чаконина в картофеле важно хранить клубни в темном, прохладном и сухом месте. Также не рекомендуется употреблять в пищу позеленевшие или пускающие ростки части клубней.  

Ядовитые грибы 

Дикорастущие грибы могут содержать ряд токсинов, например, мусцимол и мускарин, которые могут вызывать рвоту, диарею, спутанность сознания, нарушения зрения, повышенное слюноотделение и галлюцинации. Симптомы начинают проявляться через 6–24 часа после употребления грибов в пищу. Обычно для смертельного отравления характерно позднее развитие тяжелых симптомов, свойственных поражению печени, почек и нервной системы. Чистка и термическая обработка грибов не позволяют ликвидировать содержащиеся в них токсины. Рекомендуется избегать употребления в пищу любых дикорастущих грибов при отсутствии полной уверенности в их безвредности.

Пирролизидиновые алкалоиды 

Пирролизидиновые алкалоиды (ПА) – это токсины, которые вырабатывают около 600 растений. В наибольшем количестве их продуцируют растения семейств бурачниковые, астровые и бобовые. Многие из этих растений – сорняки, растущие на сельскохозяйственных угодьях и засоряющие продовольственные культуры.   ПА вызывают широкий спектр негативных эффектов. Они могут обладать острой токсичностью. В этой связи главным источником беспокойства является способность некоторых ПА повреждать ДНК клеток, что может провоцировать онкологические заболевания.

ПА не разрушаются в процессе термической обработки. Они обнаруживаются в травяных сборах, меде, ароматических травах и специях и других видах продовольственной продукции, таких как злаки и продукты на их основе.  Тем не менее, уровень их потребления людьми считается низким. Ввиду сложности вопроса и большого числа таких соединений общий риск для здоровья в полной мере еще не определен. Комитет Кодекса ФАО/ВОЗ по загрязняющим примесям в продуктах питания ведет разработку рекомендаций по предупреждению попадания содержащих ПА растений в продовольственную цепочку.

Что могу сделать я для снижения риска, связанного с природными токсинами?

Важно помнить, что природные токсины могут присутствовать в целом ряде культур и продуктах питания.   В нормальном сбалансированном здоровом рационе концентрация природных токсинов намного ниже порогов острого и хронического токсического действия. 
Для снижения риска для здоровья, связанного с присутствием природных токсинов в продуктах питания, рекомендуется: 

•             не думать, что все «природное» по определению безвредно;

•             выбрасывать поврежденные, мятые, изменившие цвет и, в частности, плесневые продукты питания;

•             выбрасывать продукты питания, которые на запах или вкус не являются свежими или имеют непривычный вкус;

•             употреблять в пищу только те грибы или дикие растения, которые точно не являются ядовитыми.

Деятельность ВОЗ

ВОЗ в сотрудничестве с ФАО отвечает за оценку риска, который представляют природные токсины для человека в результате контаминации продуктов питания, и выработку рекомендаций по обеспечению необходимой защиты. 

Оценка риска в связи с присутствием природных токсинов в продуктах питания выполняется Комитетом экспертов ФАО/ВОЗ по пищевым добавкам (JECFA) и используется правительствами стран и Комиссией Кодекс Алиментариус (нормативным межправительственным органом по пищевым стандартам) для определения предельных допустимых значений концентрации различных примесей в продуктах питания или выработки других рекомендаций по управлению рисками в интересах предотвращения или снижения контаминации. Стандарты Кодекса являются международным ориентиром для национальных производителей продовольствия и торговли продовольствием и призваны гарантировать потребителям во всем мире, что приобретаемые ими продукты питания соответствуют установленным стандартам безопасности и качества, где бы они ни были произведены. 

JECFA устанавливает предельно допустимые уровни потребления различных природных токсинов.
В состав JECFA или специальных научных экспертных групп ФАО/ВОЗ входят независимые международные эксперты, которые проводят научные обзоры всех опубликованных исследований и других данных по отдельным природным токсинам. По итогам этой работы по оценке риска для здоровья устанавливаются либо предельные допустимые уровни потребления или формулируются другие рекомендации для обозначения степени опасности для здоровья (например, пределы экспозиции). Выдвигаются рекомендации относительно управления рисками и мер по предотвращению и снижению контаминации, а также аналитических методов и мероприятий по мониторингу и контролю.
Во избежание нанесения ущерба здоровью людей содержание природных токсинов в продуктах питания должно быть максимально низким. Природные токсины не только являются источником риска для здоровья человека и животных, но и негативно воздействуют на ситуацию с продовольственной безопасностью и питанием, поскольку ограничивают доступ людей к здоровой пище. ВОЗ настоятельно рекомендует национальным органам власти вести мониторинг содержания наиболее значимых природных токсинов в продовольственной продукции, реализуемой на их рынке, и принимать меры для максимального его сокращения и обеспечивать соблюдение международных рекомендаций по предельно допустимым значениям, условиям хранения и законодательству.

 

что можно и что нельзя есть

Есть диеты, без которых при определенных заболеваниях просто нельзя жить. Сегодня мы публикуем пищевые рекомендации для людей, страдающих хроническим гепатитом В.

Диета помогает справиться с возникающими проблемами:

• постоянной усталостью;
• диареей;
• болью в суставах;
• отсутствием аппетита.

В диетических пожеланиях специалистов особое внимание уделяется употреблению значительного разнообразия продуктов с высоким содержанием питательных веществ, то есть тех, которые обеспечивают большую питательную ценность и мало калорийность.

Людям также рекомендуется выработать общую схему здорового питания, а не сосредотачиваться на отдельных пищевых группах.

Медики прописывают для них следующие продукты и блюда

Хлеб — белый и черный, но вчерашней выпечки. Первые блюда:

• супы овощные,
• молочные,
• щи из свежей капусты,
• свекольники вегетарианские.

Вторые блюда — из нежирных отварных кусков:

• говядины,
• курицы,
• кролика,
• рыбы.

Допускаются паровые:

• котлеты,
• рулеты,
• рагу,
• бефстроганов.

Овощные блюда и гарниры — из овощей в любом виде, кроме жареных.

Крупы и макаронные изделия:

• каши,
• запеканки с добавлением творога, изюма, кураги.

В диетических пожеланиях специалистов особое внимание уделяется употреблению значительного разнообразия продуктов с высоким содержанием питательных веществ. 

Молочные продукты:

• молоко,
• кефир,
• творог,
• простокваша.

Сливки и сметану можно, но в ограниченном количестве. Жиры — растительное масло. Блюда из яиц — омлет из яичного белка (не более 1 яйца в день).

Сладкое:

• мед,
• свежие фрукты,
• кисель,
• компоты.

Закуски:

• отварная рыба,
• вымоченная сельдь,
• неострый сыр,
• салаты из овощей с растительным маслом,
• винегреты.

Напитки — слабый чай, некрепкий кофе с молоком, настои шиповника и смородины.

Нельзя! Любую очень холодную и очень горячую пищу и напитки. Мясные, рыбные и особенно грибные бульоны. Жирные сорта мяса и рыбы. Копчености, пряности, блины, оладьи, какао, шоколад, мороженое, грибы, кислые сорта яблок, алкоголь.

Отказ от ответственности: этот контент, включая советы, предоставляет только общую информацию. Это никоим образом не заменяет квалифицированное медицинское заключение. Для получения дополнительной информации всегда консультируйтесь со специалистом или вашим лечащим врачом.

Добавьте «Правду.Ру» в свои источники в Яндекс.Новости или News.Google, либо Яндекс.Дзен

Быстрые новости в Telegram-канале Правды.Ру. Не забудьте подписаться, чтоб быть в курсе событий.

Диета при хроническом гепатите

Особенности пациентов с тяжелым гепатитом, вызванным отравлением грибами, и факторами, связанными с исходом

Предпосылки и цели: Острая печеночная недостаточность после употребления в пищу ядовитых грибов — серьезная медицинская проблема. Большинство контактов с токсичными грибами не вызывают никаких симптомов или вызывают лишь легкий гастроэнтерит, но некоторые приводят к тяжелому некрозу печени и молниеносной печеночной недостаточности, требующей трансплантации печени.Мы стремились оценить смертность от отравления грибами и определить переменные, связанные с выживаемостью и трансплантацией печени.

Методы: Мы собрали информацию от 27 пациентов (13 мужчин; средний возраст 47 лет), поступивших в отделение неотложной помощи в течение 24 часов после употребления лесных грибов. У них развилось серьезное повреждение печени (уровень трансаминаз в сыворотке выше 400 МЕ / л), и с января 1997 года по декабрь 2014 года их лечили активированным углем и N-ацетилцистеином в специализированном медицинском центре в Сан-Франциско, Калифорния.Вирусный гепатит, аутоиммунное заболевание печени, парацетамол, токсичность салицилата и хронические заболевания печени были исключены для всех пациентов. Мы проанализировали демографические данные пациентов, время с момента приема пищи, симптомы, лабораторные показатели и назначенное лечение. Хороший результат был определен как выживание без трансплантации печени. Плохой исход был определен как смерть или трансплантация печени. Были рассчитаны положительные прогностические значения, и критерий χ ² был использован для анализа дихотомических переменных.

Полученные результаты: Повреждение печени было связано с приемом Amanita phalloides у 24 пациентов и Amanita ocreata у 3 пациентов. Двадцать четыре пациента употребляли грибы во время еды и 3 пациента употребляли в пищу галлюциногены. Через 24-48 часов после приема внутрь у всех пациентов уровень аланинаминотрансферазы в сыворотке крови находился в диапазоне от 554 до 4546 МЕ / л (в среднем 2185 МЕ / л). Острая почечная недостаточность развилась у 5 пациентов. Двадцать три пациента выжили без трансплантации печени, и у 4 пациентов были плохие результаты (1 женщина перенесла трансплантацию печени на 20-й день после приема грибов, а 3 женщины умерли от печеночной недостаточности). Из 23 пациентов с пиковыми уровнями общего билирубина 2 мг / дл или более во время госпитализации только 4 имели неблагоприятный исход. Пик сывороточного уровня аспартатаминотрансферазы менее 4000 МЕ / л, пиковое международное нормализованное отношение менее 2 и значение сывороточного фактора V более 30% идентифицировали пациентов с хорошими исходами со 100% положительной прогностической ценностью; если бы эти пиковые значения использовались в качестве порогового значения, 10 из 27 пациентов (37%), 7 из 27 пациентов (26%) и 6 из 12 пациентов (50%), соответственно, могли бы избежать перевода в центр трансплантологии.

Выводы: При анализе 27 пациентов с гепатоцеллюлярным повреждением из-за отравления грибами (Amanita) и пиковыми уровнями общего билирубина более 2 мг / дл, вероятность трансплантации печени или смерти составила 17%, что соответствует закону Хи. Пациентов с пиковыми уровнями аспартатаминотрансферазы менее 4000 МЕ / л можно наблюдать в местной больнице, тогда как пациентов с более высокими уровнями следует переводить в центры трансплантации печени.У женщин и пожилых пациентов вероятность неблагоприятного исхода была выше, чем у мужчин и более молодых пациентов.

Ключевые слова: Amanita ocreata; Amanita phalloides; Гепатотоксичность; Печеночная недостаточность; Трансплантация печени; Отравление грибами; Мицетизм.

Водорастворимые экстракты съедобных грибов (Agaricus bisporus) как ингибиторы репликации вируса гепатита С

Вирус гепатита С (ВГС) является основным возбудителем хронического заболевания печени.Последние достижения в стратегиях лечения вируса гепатита С значительно увеличили скорость выведения вируса (> 90%). Однако устойчивый противовирусный ответ варьируется в разных когортах, а высокая стоимость ограничивает широкое использование противовирусных препаратов прямого действия (ПППД). Целью этого исследования является оценка ингибирующей способности хорошо охарактеризованных (LC-QTOF-MS / MS) водных экстрактов, полученных из съедобных грибов ( Agaricus bisporus ), по уменьшению репликации вируса HCV. Наши данные продемонстрировали ингибирующий эффект in vitro A.bisporus о протеазе NS3 / 4A и репликации HCV. Фракционирование с помощью ультрафильтрации и последовательная жидкостно-жидкостная экстракция показали, что соединения, ответственные за ингибирование, растворимы в воде с низкой молекулярной массой (<3 кДа) и что действие может осуществляться через следующие пять соединений: эрготионеин, аденин, гуанин, гипоксантин. и ксантин, которые присутствуют во всех фракциях (UF-3, AqF-3 кДа и органические фракции), демонстрируя ингибирование NS3 / 4A. Водные экстракты с низким молекулярным весом (<3 кДа) из A. bisporus имеет потенциальное применение для профилактики и лечения ВГС, особенно для пациентов, у которых нет доступа к ПППД последнего поколения. Они также могут быть полезны для других флавивирусов, которые также обладают сериновой протеазой NS3.

У вас есть доступ к этой статье

Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуйте снова?

(PDF) Водорастворимые экстракты съедобных грибов (Agaricus bisporus) как ингибиторы репликации вируса гепатита С

S. Зеузем, Р. Бартеншлагер и К. Сарразин, Исследование

вариантов, связанных с устойчивостью к протеазам NS3, и фенотипов

для прогнозирования ответа на терапию

HCV Triple Therapy, PLoS One, 2016, 11, e0156731.

12 M. J. Sofia, D. Bao, W. Chang, J. Du, D. Nagarathnam,

S. Rachakonda, P. G. Reddy, B.S. Ross, P. Wang,

H.-R. Чжан, С. Бансал, К. Эспириту, М. Кейлман, А. М. Лам,

Х. М. М. Стойер, К. Ню, М. Дж.Отто и П.А. Фурман,

Открытие пролекарства β-d-2′-дезокси-2′-α-фтор-2′-β-C-метил-

уридинуклеотидного пролекарства (PSI-7977) для лечения

Вирус гепатита С, J. Med. Chem., 2010, 53, 7202–7218.

13 Л. Бахметов, М. Гал-Танамы, А. Шапира, М. Воробейчик,

Т. Гитерман-Галам, П. Сатиямурти, А. Голан-

Гольдхирш, И. Бенхар, Р. Тур-Каспа и R. Zemel,

Подавление вируса гепатита С флавоноидом кверцетином

опосредуется ингибированием активности протеазы NS3., J. Viral

Hepatitis, 2012, 19, e81 – e88.

14 R. Khachatoorian, V. Arumugaswami, S. Raychaudhuri,

GK Yeh, EM Maloney, J. Wang, A. Dasgupta и

SW French, Дивергентные противовирусные эффекты биофлавоноидов на

жизненном цикле вируса гепатита C ., Virology, 2012, 433, 346–

355.

15 BU Reddy, R. Mullick, A. Kumar, G. Sudha, N. Srinivasan

и S. Das, Низкомолекулярные ингибиторы репликации HCV

из граната, Науки.Rep., 2014, 4, 5411.

16 A. Furuta, KA Salam, I. Hermawan, N. Akimitsu,

J. Tanaka, H. Tani, A. Yamashita, K. Moriishi,

M. Nakakoshi , M. Tsubuki, PW Peng, Y. Suzuki,

N. Yamamoto, Y. Sekiguchi, S. Tsuneda and N. Noda,

Идентификация и биохимическая характеристика галисула-

судьбы 3 и суванина как новых ингибиторов гепатита C virus

NS3 геликаза из морской губки., Mar. Drugs, 2014, 12,

462–476.

17 M. del M. Delgado-Povedano, V. Sánchez de Medina,

J. Bautista, F. Priego-Capote и MD Luque de Castro,

Предварительная идентификация состава Agaricus bis-

Porus Water ферментные экстракты с противовирусной активностью

против ВГС: исследование методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии

в режиме высокого разрешения, J. Funct.

Foods, 2016, 24, 403–419.

18 Р. Линнакоски, Д. Решамвала, П. Ветели, М.Кортина-

Эскрибано, Х. Ванханен и В. Марджомаки, Противовирусные

Агенты из грибов: разнообразие, механизмы и возможности

Приложения, Фронт. Microbiol., 2018, 9, 2325.

19 L. Xiao, L. Zhao, T. Li, DK Hartle, OI Aruoma и

EW Taylor, Активность диетического антиоксиданта эрготио-

neine в гене вируса. анализ на основе ингибиторов транскрипции ВИЧ

., Biofactors, 2006, 27, 157–165.

20 Б. Д. Линденбах, М.J. Evans, AJ Syder, B. Wölk,

TL Tellinghuisen, CC Liu, T. Maruyama, RO Hynes,

DR Burton, JA McKeating and CM Rice, Complete

Replication of Hepatitis C Virus in Cell Culture, Science ,

2005, 309, 623–626.

21 Т. К. Шил и К. М. Райс, Понимание жизненного цикла вируса гепатита

C открывает путь к высокоэффективному терапевтическому препарату

pies., Nat. Мед., 2013, 19, 837–849.

22 О. Cremades, M.М. Диас-Эрреро, П. Карбонеро-Агилар,

JF Gutierrez-Gil, E. Fontiveros, B. Rodríguez-Morgado,

J. Parrado и J. Bautista, Приготовление и характеристика

обогащенного селеном водного раствора грибов. ферментативные экстракты

(MAEE), полученные из белого шампиньона

(Agaricus bisporus), Food Chem., 2012, 133, 1538–1543.

23 Т. Вакита, Т. Пичманн, Т. Като, Т. Дате, М. Миямото,

З. Чжао, К. Мурти, А. Хаберманн, Х.-ГРАММ. Kräusslich,

M. Mizokami, R. Bartenschlager и T. J. Liang,

Производство вируса инфекционного гепатита C в культуре ткани

из клонированного вирусного генома, Nat. Med., 2005, 11, 791–

796.

24 T. Pietschmann, A. Kaul, G. Koutsoudakis, A. Shavinskaya,

S. Kallis, E. Steinmann, K. Abid, F. Negro, M. Dreux,

F.-L. Коссет и Р. Бартеншлагер, Конструирование и характеристика

и

инфекционных внутригенотипических и межгенно-

типичных химер вируса гепатита С., Proc. Natl. Акад.

Sci. США, 2006, 103, 7408–7413.

25 М. Каррьер, В. Пен, А. Брейман, Ф. Конти, С. Шузену,

Э. Мерс, М. Андриё, П. Жарей, Л. Грира, О. Субран,

П. Сони , Y. Calmus, S. Chaussade, AR Rosenberg и

P. Podevin, Новая, чувствительная и специфическая технология RT-PCR —

nique для количественного определения репликации вируса гепатита C,

J. Med. Virol., 2007, 79, 155–160.

26 П. Калач, Химический состав и пищевая ценность

Европейские виды дикорастущих грибов: обзор,

Food Chem., 2009, 113,9–16.

27 П. Манци и Л. Пиццоферрато, Бета-глюканы в съедобных грибах —

комнат, Food Chem., 2000, 68, 315–318.

28 Н. Тауц, А. Кайзер и Х.-Дж. Тиль, NS3 Сериновая протеаза

Вирус вирусной диареи крупного рогатого скота: характеристика активного сайта

Остатки

, домен кофактора NS4A и протеаза-кофактор

Взаимодействия, вирусология, 2000, 273, 351–363.

29 Ф. Насири, Б. Гиасси Тарзи, А. Р. Бассири, С. Э. Хосейни и

М.Аминафшар, Сравнительное исследование основного химического вещества

Состав пуговичных грибов (Agaricus bisporus)

Cap and Stipe, J. Food Biosci. Технологии, 2013, 3,41–48.

30 Дж. Веттер, Содержание хитина в культурных грибах Agaricus

bisporus, Pleurotus ostreatus и Lentinula edodes, Food

Chem., 2007, 102,6–9.

31 Б. Гринде, Г. Хетланд и Э. Джонсон, Влияние на экспрессию гена

и вирусную нагрузку лекарственного экстракта из

Agaricus blazei у пациентов с хронической инфекцией гепатита С

, Int.Immunopharmacol., 2006, 6, 1311–1314.

32 С. Айенгар, К. Тай-Тео, С. Фоглер, П. Бейер, С. Виктор, К. де

Йончере, С. Хилл, Э. Гауэр, К. Эстес, С. Блах, К. Razavi-

Shearer, H. Razavi, P. Feuerstadt, A. Bunim, H. Garcia,

J. Karlitz, H. Massoumi, A. Thosani, M. Fried, S. Zeuzem,

G. Dusheiko, R. Salupere, A. Mangia, R. Flisiak, R. Hyland,

N. Afdhal, K. Reddy, D. Nelson, E. Lawitz, S. Gordon,

E. Schi, K. Bichoupan, V.Martel-Laferriere, D. Sachs,

M. Ng, E. Schonfeld, A. Pappas, D. Ollendorf, J. Tice,

S. Pearson, A. Hill, S. Khoo, J. Fortunak, B. Simmons,

N. Ford, R. Sullivan, J. Peppercorn, K. Sikora, J. Zalcberg,

N. Meropol, E. Amir, A. Te eri, H. Kantarjian, S. Rajkumar,

L. Бейкер, Дж. Абковиц, Дж. Адамсон, С. Баруа, Р. Гринвальд,

Food & Function Paper

Этот журнал принадлежит © Королевское химическое общество, 2019 Food Funct.

Опубликовано 5 июня 2019 г. Загружено Gral Universidad Sevilla 11.06.2019 10:00:18.

Фармацевтические препараты | Бесплатный полнотекстовый | Противовирусная активность тирозиназы гриба Agaricus bisporus in vitro против вируса гепатита C

1. Введение

Инфекция вирусом гепатита C (HCV) является основной проблемой здравоохранения во всем мире [1]. ВГС содержит небольшую одноцепочечную положительную РНК, которая кодирует несколько белков, которые транслируются как большой полипротеин, который процессируется в эндоплазматическом ретикулуме инфицированной клетки вирусными протеазами и протеазами хозяина, чтобы преобразовать отдельные структурные и неструктурные вирусные белки функциональны [2].Среди них неструктурные белки [3,4] NS2, NS3 / 4A, NS4B, NS5A и NS5B имеют большое значение, потому что большинство препаратов, которые в настоящее время продаются с терапевтическими показаниями (рис. 1), действуют через механизмы ингибирования, направленные на один этих белков [5,6,7,8,9]. NS2 предназначен для сборки и репликации благодаря своей функции автокаталитической цистеиновой протеазы [10]. N-концевой домен многофункционального NS3 / 4A (или просто NS3) является второй вирусной протеазой, ответственной за процессинг большей части вирусного полипептида, в то время как C-концевой домен NS3 выполняет функцию геликазы / dNTPase [11].NS4A представляет собой небольшой гидрофобный белок, который служит кофактором для повышения активности сериновой протеазы NS3 [12]. NS4B и NS5A — это белки, участвующие в репликации и сборке [13], а NS5B — это вирусная РНК-зависимая РНК-полимераза, которая образует репликационный комплекс вместе со всеми другими неструктурными белками [14]. В настоящее время это одни из самых известных систем. В рецептуре препараты против HCV состоят из смеси нескольких молекул (Рисунок 1) [15]. Например, Harvoni ^® , последний препарат, зарегистрированный компанией Gilead в 2014 году, представляет собой комбинацию софосбувира и ледипасвира, ингибиторов белков NS5B и NS5A соответственно (рис. 1).К другим коммерческим препаратам, состоящим из комбинации соединений, относятся следующие: Epclusa ^® (Gilead), Vosevi ^® (Gilead), Zepatier ^® (MSD) и Maviret ^® (Abbvie) (рис. 1) [ 15]. Существуют химические соединения, природные и синтетические, с противовирусным действием против ВГС, например, сесквитерпеноиды, экстрагированные при ферментации гриба Trichoderma harzianum [16], пептидные соединения [17], аналоги GSK3082 [18] или ароматические препараты. миметики [19].Однако доступные в настоящее время методы лечения вируса гепатита С слишком дороги, и многие пациенты, особенно из менее развитых стран, не имеют к ним доступа. Это лечение, которое стоит около 60 000 евро [20], таким образом, даже в развитых странах бюджеты здравоохранения превышены, что вынуждает правительства устанавливать ограничительные критерии для назначения этих лекарств. При общей оценке 150–200 миллионов человек, инфицированных ВГС во всем мире, необходимо и срочно разработать эффективные и недорогие методы лечения, альтернативные существующим.Тирозиназы — это медь-металлоферменты, играющие ключевую роль в каталитических биологических системах [21]. Это важный фермент, контролирующий образование меланина в меланосомах, и он играет ключевую роль в пигментации волос и кожи. Аномальная экспрессия или активация тирозиназы связана с несколькими заболеваниями, такими как альбинизм, витилиго, меланома и болезнь Паркинсона [22,23,24]. В частности, тирозиназа из обыкновенных белых шампиньонов Agaricus bisporus (TyrAB), более доступная по сравнению с тирозиназой человека, была использована при разработке соединений-ингибиторов TYR [25].Недавно было описано, что новые функции или новые активности некоторых из них, особенно легкой субъединицы Orf239342, очень важны для ингибирования пролиферации рака [26,27,28,29].

В этой работе мы впервые сообщаем о высокой ингибирующей способности тирозиназы и одной ее изоформы в отношении HCV, присутствующей в белых грибах (Agaricus bisporus). Это представляет собой механизм ингибирования HCV, отличный от описанного в настоящее время (аллостерическое или ортостерическое ингибирование неструктурных белков HCV).

2. Результаты и обсуждение

Сначала оценивали как токсичность, так и противовирусную активность коммерческого экстракта тирозиназы Agaricus bisporus против ВГС в клетках Huh-5-2. Известная тирозиназа Agaricus bisporus (TyrAB) представляет собой гетеротетрамер (фактически, димер гетеродимеров), состоящий из двух субъединиц H ₁ L ₁ H ₂ L ₂ субъединиц с двумя субъединицами по 45 кДа ( H) субъединицы и две легкие (L) субъединицы 12 кДа (Рисунок 2) [25]. Кроме того, этот экстракт содержит другой белок, который мы недавно обнаружили как изоформу тирозиназы 50 кДа (Tyr50 кДа) [30].Этот коммерческий экстракт частично очищен (Рисунок S1). Этот коммерческий белковый раствор, содержащий обе тирозиназы, был проанализирован при двух значениях pH (5 и 7), чтобы оценить токсичность их клеток. В обоих случаях раствор не проявил значительной токсичности по отношению к клеткам печени (рис. 3). Кроме того, была оценена цитотоксичность в отношении клеток HeLa, и цитотоксичность не была обнаружена (данные не показаны). Однако раствор показал неожиданную активность ингибирования репликации вируса со значением EC ₅₀ , равным 20 мкг / мл, и почти полным ингибированием при концентрациях 71 мкг / мл (рис. 3).Таким образом, чтобы продемонстрировать, что эта вирусная ингибирующая активность зависит от тирозиназы, этот раствор экстракта тирозиназ Agaricus bisporus был очищен. Для этого коммерческий раствор был очищен прямой адсорбцией на носителе октадецил-Sepabeads в 100 мМ буферном растворе с pH 7. следуя нашему ранее описанному протоколу [30]. Это было основано на подходящей гидрофобности поверхности тирозиназы (рис. S2). Обе тирозиназы были иммобилизованы на этой твердой подложке, что подтверждено SDS-PAGE (фиг. S3), затем они были восстановлены в растворимой форме с использованием Triton X-100 0.25% (мас. / Об.). Затем была предпринята попытка уменьшить конечное количество детергента в растворе (для конечной концентрации 0,03%). Соответствующий очищенный белковый раствор, содержащий различные концентрации детергента, оценивали по отношению к клеткам. Мы наблюдали, что концентрация Triton X-100 0,25% (об. / Об.) Явно влияет на анализ (данные не показаны), известный эффект неанионного детергента на создать способные мембранные поры и окончательное дезагрегирование клеточных мембран. Однако очищенный образец (обе тирозиназы), содержащий 0.Использование 03% детергента привело к еще лучшему результату: небольшая клеточная токсичность и EC ₅₀ , равное 1 мкг / мл (рис. 4).

Это продемонстрировало, что активные тирозиназы ответственны за противовирусную активность образца белка.

Для дальнейшего подтверждения этих результатов и оценки того, какой вариант тирозиназы в основном отвечает за противовирусную активность, оба фермента (TyrAB и Tyr50 кДа), присутствующие в экстракте, были выделены в чистом виде с использованием недавно описанного протокола [30].Для очистки использовали различную гидрофобность между TyrAB и Tyr50 кДа [30]. Адсорбция на октадецил-Sepabeads при высокой ионной силе и в присутствии 0,07% детергента позволила получить чистый белок Tyr50 кДа в супернатанте и полный TyrAB, адсорбированный на твердом носителе (рис. S4). Ни для одного из ферментов клеточной токсичности не наблюдалось. , и оба фермента показали противовирусную активность, хотя изоформа Tyr50 кДа была ответственна за большую часть активности, с ингибирующей способностью в 4-10 раз по сравнению с таковой, наблюдаемой для TyrAB (EC ₅₀ из 1.2–2,5 мкг / мл для Tyr50 кДа по сравнению с 6–12 мкг / мл для TyrAB) (рис. 5, таблица 1). Этот результат показал, что тирозиназа из грибов проявляет ингибирующую активность в отношении HCV, но также выявило, что выделенная изоформа (Tyr50 кДа) — недавно обнаруженный в нашей лаборатории — отвечал за большую часть противовирусной активности. Анализ и N-концевое секвенирование белка Tyr50 кДа (последовательность белка точно соответствует таковой TyrAB) показали, что он соответствует посттрансляционно модифицированной изоформе TyrAB, вероятно, путем гликозилирования [30].Эти результаты свидетельствуют о механизме ингибирования репликации вируса на основе ферментативной активности, в данном случае на основе избирательного окисления L-тирозина до L-3,4-дигидроксифенилаланина (L-DOPA) и допахинона (рис. Для подтверждения гипотезы о том, что ингибирование репликации ВГС коррелирует с активностью тирозиназы, были приготовлены частичные или полные неактивные ферменты. Очищенный Tyr50 кДа инкубировали при 37 ° C или 80 ° C в течение 24 часов. Каталитическая активность с участием L-ДОФА в качестве субстрата показала, что инкубация при 37 ° C приводит к снижению активности на 80%, в то время как инкубация при 80 ° C дает полностью неактивный фермент.Затем оценивали противовирусную активность этих термически обработанных ферментов (рис. 7). Тирозиназа, инкубированная при 37 ° C, дала значение EC ₅₀ , равное 10 мкг / мл (в 10 раз меньшее ингибирование, чем у полностью активного фермента), тогда как Tyr50 кДа, инактивированный при 80 ° C, вообще не ингибировал репликацию вируса ( Таблица 1). Следовательно, это, по-видимому, указывает на то, что ингибирующий механизм действия тирозиназы зависит от ее ферментативной активности. Согласно этим результатам биоинформатическая оценка белковых структур NS3 и NS5A (Рисунок 8) показала, что избирательное окисление остатков тирозина (Tyr93) — рядом с активным центром — может быть вовлечен в активность димера NS5A (фиг. 8a) за счет потенциальной неизбежной реакции с аминоконцом белка, таким образом предотвращая его расположение в мембране и, следовательно, блокируя репликацию вируса.Tyr56 также находится довольно близко к каталитически активному центру для возможного ингибирования ферментативной активности протеазы (рис. S5). Например, в белке NS3 Tyr 6 и Tyr105 занимают ключевое положение для решающего взаимодействия NS3-NS4 ( Рисунок 8b), и там, где возможное окисление этих групп могло повлиять на его взаимодействие с NS4A, это инструмент для блокирования репликации вируса. Для сравнения, Рибавирин — хорошо известный препарат от ВГС, который все еще используется в Комбинация с другими лекарствами, такими как Harvoni ^® , при лечении пациентов с циррозом, дала ЕС ₅₀ 10 мкг / мл при тех же условиях (рис. S7).Это означает, что вариант тирозиназы Tyr50 кДа был почти в десять раз более эффективен in vitro, чем рибавирин (таблица 1).

Таким образом, наконец, после демонстрации того, что тирозиназы в грибах ответственны за противовирусную активность, мы приступили к тестированию противовирусной активности смеси ферментов, непосредственно экстрагированных из свежих обыкновенных грибов A. bisporus.

С помощью простой экстракции, а также стадий солюбилизации, осаждения и диализа можно было получить очищенный образец белка двух тирозиназ непосредственно из свежих грибов.В этом случае тирозиназы были получены в их тетрамерной форме со всеми их субъединицами (Рисунок S6). Этот раствор полуочищенных тирозиназ (TyrAB / Tyr50 кДа-грибы) не проявлял клеточной токсичности, давая значение для ингибирования репликации вируса, аналогичное полученному ранее для коммерческого экстракта, что еще раз подтверждает его большую ингибирующую способность вируса по сравнению с рибавирин (таблица 2).

3. Материалы и методы

3.1. Материалы

Тирозиназа из лиофилизированного порошка грибов (T3824-25KU), L-3,4-дигидроксифенилаланин (L-DOPA), реагент Брэдфорда и Triton ™ X-100 были от Sigma-Aldrich (Испания).Octadecyl-Sepabeads ^® (C18) был подарком RESINDION, Mitsubishi Chemical Corporation.

3.2. In Vitro L-Dopa Activity Assay

Активность фермента тестировали в присутствии 2 мл 1 мМ L-DOPA в 0,1 М натрий-фосфатном буфере pH 7 при комнатной температуре с использованием спектрофотометра V-730 (Jasco), измеряя увеличение поглощения аминохромов при 475 нм, вызванных 40 мкл раствора фермента, и принимая начальную скорость, между 10 и 70 секундами реакции. Единица активности фермента (U) была определена как количество фермента, вызывающее увеличение поглощения на 0.001 / мин при 25 ° C.

Активность фермента тестировали при изменении pH (ацетатный буфер при pH 5 и натрий-фосфатный буфер при pH 7), ионной силы среды (от 10 мМ до 1 M натрий-фосфатного буфера при pH 7) и детергента Triton ™ X -100 (до концентрации 3%).

3.3. Очистка коммерческого экстракта для раствора ферментов TyrAB и Tyr50 кДа

Здесь добавляли 2 мл раствора экстракта тирозиназы в 100 мМ буфере pH 7 (содержание белка 0,25 мг, рассчитанное с помощью анализа белка Брэдфорда коммерческой лиофилизированной грибной тирозиназы на мл раствора). 0.5 г октадецил-Sepabeads ^® и смесь инкубировали на роллере, и за процессом иммобилизации следовало снижение активности супернатанта против L-DOPA через 30 минут, вплоть до 2 часов, после анализа, упомянутого выше. После этого твердое вещество, содержащее обе тирозиназы (C18-Tyrs), обильно промывали дистиллированной водой и фильтровали под вакуумом. Затем твердое вещество инкубировали в Triton X-100 (0,25%) в воде в течение 30 мин для полного высвобождения обеих тирозиназ, после чего раствор собирали и хранили при 4 ° C.Твердая подложка и супернатант анализировали с помощью SDS-PAGE. Наконец, образец растворимого белка очищали для уменьшения количества детергента в образце путем ультрафильтрации с помощью Amicon Ultra 10 кДа (<0,05%).

3.4. Полная очистка и выделение TyrAB и Tyr50 кДа

Здесь 1 мг коммерческой лиофилизированной тирозиназы растворяли в 4 мл дистиллированной воды. Затем к этому раствору добавляли 0,5 г октадецил-Sepabeads ^® и смесь инкубировали в течение 2 часов. После этого смесь фильтровали под вакуумом и 4 мл супернатанта добавляли к 1 мл раствора 500 мМ натрий-фосфатного буфера при pH 7, содержащего 0 мкл.21% Triton X-100 (вес / объем) (до конечной концентрации детергента 0,07%). Затем к этому раствору добавляли 0,5 г свежего октадецил-Sepabeads ^® и смесь инкубировали в течение 3 часов. По истечении этого времени супернатант содержал только фермент Tyr50 кДа, тогда как TyrAB и небольшое количество Tyr50 кДа находились на твердом веществе (подтверждено SDS-PAGE) (фиг. S4). TyrAB был выделен из твердого вещества с использованием раствора с детергентом, как описано в разделе 3.3. Наконец, образцы растворимого белка очищали для уменьшения количества детергента в образце путем ультрафильтрации с помощью Amicon Ultra 10 кДа (TyrAB.

3,5. Процедура экстракции тирозиназ непосредственно из гриба

Здесь нарезали 25 г свежих белых грибов (A. bisporus) (из супермаркетов Eroski), выбирая верхушку и жабры, а затем их разрезали на мелкие кусочки и добавляли к 50 мл грибов. холодный ацетон. Смесь выдерживали при перемешивании лопастями в течение 30 мин на ледяной бане. Затем смесь центрифугировали при 7000 об / мин в течение 20 мин и осадок собирали, удаляя раствор. Это твердое вещество суспендировали в 25 мл дистиллированной воды и смесь инкубировали в течение 1 часа, а затем центрифугировали при 8000 об / мин в течение 40 минут.После фильтрации супернатант собирали и выполняли процесс осаждения солевым раствором, добавляя 60% (мас. / Об.) Сульфата аммония, добавляя его понемногу, с последующей инкубацией в течение 1 часа. После этого смесь центрифугировали при 8000 об / мин в течение 40 минут, твердое вещество извлекали и хранили при -20 ° C. Твердое вещество растворяли в воде и перед использованием проводили диализ. Был проведен SDS-PAGE анализ (Рисунок S6).

3,6. Оценка клеточной токсичности и противовирусной активности

Высокопермиссивный клеточный клон Huh 7-Lunet, а также клетки Huh 7, содержащие субгеномные (HCV) репликоны I389luc-ubi-neo / NS3-3 ‘/ 5.1 (Huh 5–2), I377NS3-3 ′ / wt (Huh 9–13) или I389 / hygro-ubi-NS3-3 / 5.1 (любезный подарок д-ра В. Ломанна и д-ра Р. Бартеншлагера) , были описаны ранее [31]. Вкратце, эта система позволяла эффективно размножать генетически модифицированные РНК HCV (репликоны) в клеточной линии гепатомы человека (Huh). Количество транскрибированной и транслируемой РНК определяется путем количественной оценки репортера, содержащегося в системе репликона (люциферазы). Количество обнаруживаемой люминесценции (после добавления субстрата, специфичного для этого фермента) пропорционально скорости репликации вируса [31].Клетки выращивали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) с добавлением 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки, 1 × незаменимых аминокислот, 100 МЕ мл ^–1 пенициллина, 100 мкг мл ^–1 стрептомицина и 250 мкг. мкг / мл ^–1 генетицин (G418).

Клетки Huh-5-2 (Lunet, опухолевые клетки печени) трансфицировали плазмидой, содержащей систему репликонов (псевдовирус, включая все неструктурные белки вируса гепатита C: NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B. ).Поскольку система репликона не содержит структурных белков, она не является инфекционной; однако он реплицируется автономно и позволяет количественно с помощью репортерного гена, кодирующего фермент люциферазу, скорость репликации внутри клеток пропорциональна сигналу люминесценции после добавления соответствующего субстрата люциферазы. В случае ингибирования репликации будет наблюдаться снижение сигнала люминесценции по сравнению с соответствующим контролем.

Культивирование клеток Huh5-2 проводили с использованием DMEM с феноловым красным в качестве культуральной среды, дополненной фетальной телячьей сывороткой (FBS), пенициллином, глутамином, стрептавидином, незаменимыми аминокислотами и 500 мкг / мл генетицина (G418). от Invitrogen (отбор клеток с репликонной системой внутри).Условия культивирования были следующими: температура (37 ° C), 5% CO ₂ , 95% воздух, давление 1 атм.

Для определения как противовирусной активности тирозиназ, так и их клеточной токсичности 96-луночные планшеты засевали 7000 клеток / лунку (с использованием DMEM без фенолового красного) с конечным объемом 100 мкл, в котором серийные концентрации тирозиназ увеличивались (от 0 до 0,2 мг / мл) тестировали в трех экземплярах для каждой из концентраций. Клетки инкубировали с тирозиназами в течение 72 часов, после чего оценивали как их цитотоксичность, так и их противовирусную активность (в дублирующих чашках).

Что касается цитотоксичности, в одном из планшетов определяли уровень клеточного метаболизма в каждой лунке с помощью Cell Titer 96 ^® AQueous Reagent (Promega) в считывающем устройстве для планшетов с оптической плотностью (Synergy HT Multi-Modal Microplate Reader с Gen5 Программное обеспечение для анализа данных, BioTek). Супернатант из лунок удаляли, и 20 мкл Cell Titer 96 ^® AQueous разводили 1: 4 в той же культуральной среде DMEM, но без добавления фенолового красного, и инкубировали в течение 3 часов при 37 ° C.Поглощение измеряли при 490 нм и 800 нм, и разница между этими значениями поглощения указывает на субстрат, метаболизируемый жизнеспособными клетками в культуре. Каждую концентрацию тирозиназы оценивали в трех повторностях, и полученные значения усредняли. Строили график зависимости между концентрацией тирозиназы и процентом поглощения (принимая за 100% значения в контрольных лунках без обработки тирозиназой). Летальную концентрацию 50% (LC50) рассчитывали как концентрацию тирозиназы, при которой жизнеспособность клеток снижалась на 50% (по сравнению с концентрацией, полученной в отсутствие обработки тирозиназой).

В отношении противовирусной активности люминесценцию каждой лунки определяли с использованием реагента системы анализа люциферазы Bright-Glo ™ (Promega) в люминесцентном планшет-ридере (мультимодальный микропланшетный ридер Synergy HT с программным обеспечением анализа данных Gen5, BioTek). Не удаляя супернатант, в каждую лунку добавляли 30 мкл реагента и измеряли сигнал люминесценции. Сигнал люминесценции был пропорционален количеству транскрибированного репортерного гена. Каждую концентрацию тирозиназы оценивали в трех повторностях, и полученные значения усредняли.Зависимость между концентрацией тирозиназы и процентом люминесценции наносили на график (принимая за 100% эти значения в контрольных лунках без обработки тирозиназой). ЕС50 рассчитывали как концентрацию тирозиназы, при которой репликация вируса снижалась на 50% (по сравнению с концентрацией, полученной в отсутствие обработки тирозиназой).

Анализ был проведен с использованием той же процедуры, что и для тирозиназы, описанной выше, но с использованием рибавирина (рис. S7).

4. Выводы

Две тирозиназы (хорошо известный фермент TyrAB плюс новая изоформа тирозиназы 50 кДа, Tyr50 кДа) присутствуют в белых грибах обыкновенных (A.bisporus) показали противовирусную активность против вируса гепатита С. После выделения обоих очищенных ферментов мы продемонстрировали, что оба фермента являются уникальными активными молекулами в противовирусной активности белкового экстракта. Кроме того, эта ингибирующая активность, по-видимому, напрямую коррелирует с ферментативной активностью тирозиназ, что, по-видимому, впервые указывает на новый механизм действия по сравнению с другими фармацевтическими препаратами (например, такими как ривабирин). Этот раствор тирозиназ показал в десять раз более высокую противовирусную активность in vitro, чем рибавирин.

Таким образом, этот белковый препарат может стать многообещающим терапевтическим средством, обеспечивающим дешевое лекарство для лечения гепатита С, которое можно использовать в качестве замены или в комбинации с другими лекарствами, такими как, например, Софосбувир в Харвони ^® .

Этот новый механизм подавления вирусного действия, открытый для тирозиназы, может быть многообещающим фармакологическим агентом широкого спектра действия (например, эффективным для других вирусов).

вирусов | Бесплатный полнотекстовый | Противовирусные биоактивные соединения грибов и их противовирусные механизмы: обзор

3.2.1. Вирусы гриппа

Вирус гриппа, оболочечный вирус, принадлежащий к семейству Orthomyxoviridae, подразделяется на типы A, B, C и D [44]; он делится на различные серотипы на основе гликопротеинов. Геном вирусов гриппа A и B включает восемь одноцепочечных сегментов РНК с отрицательным смыслом, а геном вирусов гриппа C и D содержит семь сегментов. Вирусный геном составляет около 13,5 т.п.н. и кодирует гемагглютинин, нейраминидазу (NA), белок нуклеокапсида, RdRp, матричные белки (M1 и M2) и неструктурные белки (NS1 и NS2).Вирусы гриппа A и B связаны с сезонными эпидемиями гриппа. На сегодняшний день осельтамивир (Тамифлю), занамивир (Реленза), перамивир (Рапиваб) и ланинамивир (Инавир) используются в качестве ингибиторов NA. Балоксавир марбоксил, новый кэп-зависимый ингибитор эндонуклеаз, является терапевтическим агентом против гриппа, одобренным в 2018 году. Однако были сообщения о его побочных эффектах, токсичности и появлении резистентных вирусов [45,46]. Соединения из P. pulmonarius, C. militaris, L. edodes, P.baumii, P. ignarius, G. pfeifferi и P. linteus обладают противовирусным действием против вирусов гриппа: фракция полисахаридов из P. pulmonarius; кислый полисахарид из C. militaris; пептидоманнан из L. edodes; полифенолы (гистидин, иноскавин A, даваллиалактон и феллигридин D) из P. baumii; полифенолы, пирон (3-гидрокси-2-метил-4-пирон) и сесквитерпеноид из P. ignarius; тритерпеноид (ганодермадиол и люцидадиол) и тритерпен (аппланоксидовая кислота G) из G. pfeifferi; и другие органические соединения, включая инотилон и 4- (3,4-дигидроксифенил) -3-бутен-2-он, из P.linteus (Таблица 2) [12,18,19,20,21,22,23]. Полифенолы (гистидин, гифоломин B, иноскавин A, даваллиалактон и фелилгридин D), сесквитерпеноид, инотилон и 4- (3,4- дигидроксифенил) -3-бутен-2-он нацелен на вирусную NA [20,22,23]. Было установлено, что гидроксильная группа сесквитерпеноида взаимодействует с аминокислотой (Asn 170) NA. Кроме того, сесквитерпеноид и занамивир связываются с разными участками NA. Полифенолы, сесквитерпеноид, пирон, ганодермадиол, люцидадиол и аппланоксидовая кислота G подавляли цитопатический эффект вируса гриппа A [12,22,23]; Интересно, что их 50% ингибирующая концентрация (IC ₅₀ ) была ниже, чем у противовирусного препарата занамивир.Инотилон и 4- (3,4-дигидроксифенил) -3-бутен-2-он были более эффективными, чем осельтамивир (Тамифлю) против вируса гриппа A [20]. Полисахаридные фракции воды и этанольных экстрактов P. pulmonarius проявляли противовирусную активность против вирус гриппа А (h2N1pdm) [18]. Поскольку фракции полисахаридов показали уменьшение вируса только после обработки в клетки, они могут блокировать репликацию, сборку и высвобождение вируса. Сообщалось, что кислый полисахарид из C. militaris влияет на усиление иммунитета [19].Кислый полисахарид снижает титр вируса гриппа A (h2N1) в бронхоальвеолярной области и легких мышей, а также повышает уровни фактора некроза опухоли (TNF) -α и интерферона (IFN) -γ в крови, жидкости бронхоальвеолярного лаважа (BALF) и легкое мышей. Кроме того, он усиливал NO, индуцибельную синтазу оксида азота, интерлейкин (IL) -10 и провоспалительные цитокины, такие как IL-1β, IL-6 и TNF-α в клетках RAW 264.7 [19]. Пероральное введение и внутрибрюшинное введение пептидоманнана увеличивало выживаемость и увеличивало уровень IFN в сыворотке мышей, инфицированных вирусом гриппа A (h3N2) [21].Кроме того, он уменьшал уплотнение легких и титр вируса в легочной ткани мышей. Однако ингибирования вируса пептидоманнаном in vitro не наблюдалось. Кислый полисахарид и пептидоманнан, по-видимому, уменьшали вирусную инфекцию за счет усиления иммунитета.

3.2.2. Вирус иммунодефицита человека

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), принадлежащий к семейству Retroviridae, представляет собой оболочечный вирус, содержащий одноцепочечную РНК с положительным смыслом [3]. Гены ВИЧ кодируют 15 вирусных белков, включая структурные белки вируса, такие как вирусные ферменты и оболочка, важные регуляторные элементы и дополнительные регуляторные белки.Есть два типа ВИЧ: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. ВИЧ-1 более тесно связан с мировой эпидемией синдрома иммунодефицита, чем ВИЧ-2. Поскольку ВИЧ инфицирует CD4 Т-клетки, макрофаги и дендритные клетки, ответственные за иммунные ответы, он ставит под угрозу защиту от оппортунистических инфекций и опухолей [3]. Существуют терапевтические агенты, которые нацелены на обратную транскриптазу вируса, протеазу, вирусное прикрепление и слияние, а также интегразу [3]. 3]. Аналоги нуклеозидов, такие как азидотимидин (AZT) и ламивудин, связываются с обратной транскриптазой и ингибируют обратную транскрипцию вируса.Невирапин — бензодиазепиновый ненуклеозидный ингибитор, нацеленный на обратную транскриптазу. Ритонавир на активном сайте протеазы блокирует созревание ВИЧ в инфекционный вирион. Маравирок подавляет прикрепление вируса к рецептору CCR5 на поверхности клетки. Энфувиртид ингибирует слияние вирусов с клетками-хозяевами, взаимодействуя с gp41 гликопротеина оболочки ВИЧ. Однако они могут вызывать мутацию гена обратной транскриптазы, протеазы и оболочки лекарственно-устойчивого ВИЧ и, таким образом, вызывать побочные эффекты [3].Соединения грибов против ВИЧ были получены из P. abalonus, Coriolus versicolor, A. bisporus, P. citrinopileatus, L. edodes, P. ostreatus, R. paludosa и Tricholoma giganteum (Таблица 2) [24, 25, 26, 27,28,29,30,31,32,33]. Полисахарид, полисахаропептид, лектин, лентин, убиквитин-подобный белок, пептид и лакказа были идентифицированы как нацеленные в основном на обратную транскриптазу ВИЧ [25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32]. Интересно, что полисахариды, лектин, лентин и лакказа из P. abalonus, P. citrinopileatus, L.edodes и T. giganteum показали IC ₅₀ 0,1–2,2 мкМ против ВИЧ-1 [25,28,29,32]. Препараты против ВИЧ, такие как AZT, дидезоксицитидин и дидезоксиинозин, показали IC ₅₀ 0,03–0,5 мкМ, 0,5–1,5 мкМ и 2–10 мкМ соответственно против ВИЧ-1 [3]. Следовательно, соединения, полученные из грибов, могут быть противовирусными агентами, сравнимыми с противовирусными препаратами. Полисахаропептид из C. versicolor ингибирует обратную транскриптазу ВИЧ и гликогидролазу (β-глюкуронидазу), участвующие в гликозилировании оболочки ВИЧ для нейтрализации эпитопов антител [26].Он также препятствовал взаимодействию gp120 ВИЧ-1 с рецептором CD4. Полисахаропептид, модифицированный хлорсульфоновой кислотой, ингибировал как гликогидролазу (α-глюкозидазу), так и обратную транскриптазу ВИЧ [27]. Полисахаропептид может препятствовать проникновению и репликации ВИЧ путем ингибирования обратной транскрипции. Immune Assist 24/7 ™ (L. edodes, G. frondosa, G. lucidum, Trametes versicolor, C. sinensis и A. brasiliensis) коммерчески доступен и включает несколько полисахариды и гетерополисахариды [24].Он увеличивал количество CD4 + Т-лимфоцитов через 30 и 60 дней, когда ВИЧ-инфицированным пациентам вводили 2,4 г / день Immune Assist 24/7 ™ в течение 60 дней. Небродеолизин из P. nebrodensis уменьшал образование синцитиев в ВИЧ-инфицированных человеческих Т-лимфоцитах с 50% эффективной концентрацией (ЕС ₅₀ ) 2,4 пМ [33]. Полисахарид, гетерополисахарид и небродеолизин могут влиять на репликацию вируса в Т-лимфоцитах.

3.2.3. Вирус гепатита C

Вирус гепатита C (HCV), который представляет собой оболочечный вирус с положительной цепью РНК, является членом семейства Flaviviridae, которое вызывает хронический гепатит и гепатоцеллюлярную карциному [47].Хотя на сегодняшний день вакцины нет, противовирусные препараты используются для борьбы с инфекцией ВГС [3,8]. Рибавирин — аналог гуанозина, используемый для лечения вирусной инфекции РНК. Его противовирусная активность обеспечивается его ингибированием инозинмонофосфатдегидрогеназы, используемой для производства вирусной РНК. Его комбинация с IFN-α показала синергетический противовирусный эффект [3]. Существуют противовирусные препараты прямого действия (ПППД) для лечения инфекции ВГС [8]. DAA нацелены на протеазу NS3 / 4A, NS5A и RdRp, которые являются неструктурными белками HCV.Ингибиторы протеазы NS3 / 4A (боцепревир, телапревир, симепревир, паритапревир, асунапревир и гразопревир) связываются с каталитическим сайтом NS3 и ингибируют расщепление вирусного полипротеина. Ингибиторы NS5A (даклатасвир, ледипасвир, омбитасвир, элбасвир, велпатасвир и пибрентасвир) блокируют репликацию вируса путем связывания с доменом I белка NS5A. Ингибиторы NS5B RdRp, такие как софосбувир и дасабувир, блокируют вирусную транскрипцию и репликацию генов. Однако эти противовирусные агенты приводят к побочным эффектам и устойчивости к лекарствам [3,8].Ферменты лакказа и тирозиназа из P. ostreatus и A. bisporus, соответственно, обладают противовирусным действием против ВГС (Таблица 2) [34,35]. Лакказа (2,0 и 2,5 мг / мл) из P. ostreatus подавляла ВГС при предварительной обработке ею клеток периферической крови (PBMC) и клеток гепатомы HepG2 [34]. Ингибирование HCV, обработанного 2,0 и 2,5 мг / мл лакказы, идентифицировали с помощью анализа иммуноокрашивания PBMC и клеток HepG2. Кроме того, 0,75 и 1,5 мг / мл лакказы показали эффект после лечения на инфицированные HCV клетки HepG2.Это означает, что лакказа из P. ostreatus может блокировать проникновение вируса и репликацию на PBMC и клетках HepG2 [34]. Тирозиназа (молекулярная масса 50 кДа) из A. bisporus подавляла репликацию вируса в репликонсодержащих клетках Huh-5-2 [35]. Интересно, что EC50 тирозиназы составляла 1,2–2,5 мкг / мл, тогда как EC50 рибавирина составляла 10 мкг / мл. Кроме того, тирозиназа нацелена на неструктурные белки вируса, такие как NS3, NS4A и NS5A, которые необходимы для репликации вируса. Он взаимодействует с аминоконцом белков и изменяет каталитическую активность NS3 [35].

лекарственных средств для лечения гепатита C — Mother Earth Living

1/3

Лечебные травы от гепатита С могут включать полынь инь-чен, корень одуванчика и корень лопуха.

Фото Fotolia / Coloures-Pic

2/3

Вопросы и ответы эксперт Карта Пуркх Сингх Халса.

Фото предоставлено сотрудниками Mother Earth Living

3/3

Вопросы и ответы, эксперт Терри Уиллард.

Фото персонала Живая Мать-Земля

❮ ❯

Попробуйте эти лечебные травы от гепатита С, эти безопасные и естественные методы помогают снизить вирусную нагрузку на организм и поддерживают функцию печени.

Узнайте больше о натуральных средствах от шума в ушах: Лечение травами от шума в ушах.

Лечебные травы от гепатита С

Не могли бы вы посоветовать мне, какой тип диеты и какие
трав лучше всего подходят для 50-летнего мужчины с гепатитом
C первого типа с вирусной нагрузкой около 1 миллиона?
Вт.H.
Waynesburg, Пенсильвания

Уиллард отвечает: Гепатит С стал очень распространенной проблемой в клинике за последние несколько лет. Мы используем
различных трав, которые помогают снизить вирусную нагрузку на организм, а
растений поддерживают функцию печени.

Наиболее известное растение, которое мы используем, — это гриб
кориолус ( Coriolus versicolor ), или хвост индейки. Он продемонстрировал
отличных результатов. Большинство исследований этого гриба
сосредоточено на полисахаридах ответвления.Существует более 400
опубликованных исследований о положительном влиянии кориолуса на критические проблемы со здоровьем
, такие как гепатит и различные формы рака. В клинике
мы используем экстракт гриба 8: 1 в дозировке от 1000
до 1500 мг два-три раза в день. Эффективность
оказалась на удивление высокой, при этом более 50 процентов наших пациентов
значительно снизили свою вирусную нагрузку в течение четырехмесячного периода
.

Обычно мы добавляем в протокол формулу поддержки печени, согласно которой
содержит майтаке ( Grifola frondosa ) в экстракте 4: 1, шиитаке
( Lentinula edodes ) в экстракте 8: 1, корень одуванчика ( Taraxacum
). лекарственный ), экстракт расторопши ( Silybum marianum ), редька черная
( Raphanus sativus ) и корень лопуха ( Arctium lappa ).Грибы
в этой формуле доказали свою эффективность в Азии при лечении различных форм гепатита
, а также других вирусов. Одуванчик, расторопша, редис
и лопух известны как травы, поддерживающие печень. Дозировка
этой формулы также составляет от 1000 до 1500 мг два раза в день.

Khalsa отвечает: Мало что известно о том, как
лечить эту противоречивую болезнь естественными методами.
Что кажется очень ясным, так это то, что процесс болезни
может быть остановлен, если только у пациента нет глубокого цирроза печени.Ферменты печени
могут быть понижены. С каждым годом мы все лучше лечим.
Почти все натуральные методы лечения, которые я использую, включают расторопшу,
поддерживающую печень траву, которая, кажется, предотвращает дальнейшее повреждение тканей
.

Полынь Инь-чен ( Artemisia capillaris ) — охлаждающая китайская трава
, которая используется при воспалительных заболеваниях печени. В этих случаях значение
является многообещающим. Китайская доза составляет от 9 до 15 граммов
в день в виде чая. Однако это очень неприятный вкус, поэтому вы можете предпочесть
капсул.

Корень шалфея китайской ( Salvia miltiorrhiza ), также известный как дан
шен, защищает печень и помогает восстановить нормальную функцию в поврежденной
микроциркуляции. Bupleurum ( Bupleurum chinense ) и
корень черепа китайского ( Scutellaria baicalensis ), охлаждающие травы
, могут помочь снизить уровень ферментов печени и предотвратить развитие болезни
.

Наряду с этими травяными мерами критически важно избегать токсинов печени, таких как
алкоголь и любые ненужные лекарства.

Артишок земной ( Cynara scolymus ) содержит сесквитерпеновый лактон
(цинаропикрин), который придает растению хорошо известный горький вкус
. Цинарин, еще один компонент, способствует оттоку желчи и обладает
антитоксическими функциями печени, аналогичными расторопше. Артишок
способствует кровотоку и регенерации печени. Это еще и охлаждение.
Варите артишоки на пару как овощ или выдавите сок из земного шара. Также доступны добавки
. Другие продукты, которые обычно приносят пользу печени
, включают свеклу (корень и зелень), морковь и редис (все типы
).

Я видел несколько десятков человек с гепатитом С, которые оставались здоровыми в течение
восьми или более лет, и похоже, что у них впереди еще много здоровых на
лет.

Карта Пуркх Сингх Хальса имеет более чем 25-летний опыт работы с лекарственными травами. Он является лицензированным диетологом / диетологом, массажистом и членом правления Американской гильдии травников. Книга Халсы Body Balance доступна на нашей книжной полке, страница 58.

Терри Уиллард — клинический травник, президент Канадской ассоциации специалистов по травам и основатель Колледжа естественного исцеления дикой розы в Калгари, Альберта, Канада.Он является автором восьми книг и компакт-диска Interactive Herbal .

Пожалуйста, присылайте свои вопросы в Herbs for Health «Q & A», 1503 SW 42nd St., Topeka, KS 66609; факс (785) 274-4305; или напишите нам по адресу [email protected]. Укажите свое имя и полный адрес для проверки, но оба эти значения останутся конфиденциальными.

Информация, содержащаяся в разделе «Вопросы и ответы», не предназначена для замены совета вашего поставщика медицинских услуг.

Опубликовано 1 ноября 2005 г.

СТАТЬИ ПО ТЕМЕ

Активируйте свою иммунную систему с помощью острых специй и ароматических веществ из рецепта огненного сидра, чтобы избавить свое тело от нежелательных токсинов.

Узнайте о самых жутких фруктах и ​​травах из фольклора Хэллоуина.

Используйте этот рецепт, чтобы сохранить имбирь, приготовив экстракт, который можно использовать в эликсире, открывающем сердце.

Непрерывный прием водного экстракта гриба чага (Inonotus obliquus) подавляет прогрессирование рака и поддерживает температуру тела у мышей.

https: // doi.org / 10.1016 / j.heliyon.2016.e00111Получить права и контент

Реферат

Цели

Рак является ведущей причиной заболеваемости и смертности во всем мире; поэтому эффективные меры по профилактике и лечению рака пользуются постоянным спросом. Экстракты Inonotus obliquus (гриб чага) демонстрируют сильную противоопухолевую активность и использовались для лечения рака в нескольких странах; однако фактический эффект и лежащие в основе механизмы все еще неясны. В настоящем исследовании мы стремились изучить эффекты постоянного приема водного экстракта из I.obliquus о подавлении опухоли.

Основные методы

Противораковая активность экстракта I. obliquus была исследована на мышиных моделях роста карциномы легкого Льюиса и спонтанных метастазов через 3 недели непрерывного приема экстракта в дозе 6 мг / кг / день, что соответствует которые употреблялись ежедневно с настоем чаги в Японии.

Основные выводы

Экстракт I. obliquus оказал значительное подавляющее действие на опухоль в обеих моделях.Таким образом, у мышей с опухолью наблюдалось уменьшение опухоли на 60%, в то время как у мышей с метастазами количество узелков уменьшилось на 25% по сравнению с контрольной группой. Более того, мыши I. obliquus , получавшие экстракт, продемонстрировали увеличение агломерации опухоли и ингибирование васкуляризации. Интересно, что потребление I. obliquus снизило массу тела у мышей среднего возраста и повысило температуру тела в ответ на переключение света на темноту у взрослых взрослых мышей.