Эви болезнь: Что такое энтеровирусная инфекция?

Содержание

Что такое энтеровирусная инфекция?

Энтеровирусные инфекции (ЭВИ) — группа острых заболеваний, вызываемых энтеровирусами, и характеризующиеся многообразием клинических проявлений от легких лихорадочных состояний до тяжелых менигоэнцефалитов, миокардитов.

Какими симптомами и признаками может проявляться энтеровирусная инфекция у детей и взрослых?

У разных людей энтеровирусная инфекция развивается по-разному и проявляется разными симптомами: у кого-то она может протекать почти незаметно или вызывать только симптомы похожие на обычную простуду, а у кого-то она может развиваться очень тяжело.

Первыми и единственными симптомами энтеровирусной инфекции могут быть: температура от 38,5°С до 40°С, которая сохраняется в течение нескольких дней, сильная слабость и озноб; головная боль, боли в мышцах и суставах; чуть позже (но не обязательно) могут появиться: боли в горле (ангина), тошнота и рвота; боли в животе; понос.

Как и от кого, здоровый человек может заразиться энтеровирусной инфекцией?

Здоровый ребенок или взрослый человек может заразиться энтеровирусной инфекцией от другого человека, который недавно был заражен и переболел этой болезнью. Вирус содержится в частичках слюны, слизи (из горла), а также в частичках кала заболевшего человека. Здоровые люди могут заразиться при общении с заболевшим человеком, при использовании общей посуды или полотенца, при употреблении в пищу воды или продуктов питания, на которые могли попасть слюна или частички кала зараженного человека. Дети могут заразиться от других детей во время игры.

Еще одним источником заражения энтеровирусной инфекцией могут быть плавательные бассейны и естественные водоемы, в которых энтеровирусы могут выживать в течение некоторого времени.

В какое время года можно заразиться энтеровирусной инфекцией?

Ежегодно в мире регистрируются сотни миллионов случаев заражения энтеровирусами.

Энтеровирусной инфекцией можно заразиться в любое время года, однако особенно часто случаи этой болезни регистрируется летом и в начале осени.

Сколько продолжается инкубационный период при энтеровирусной инфекции?

Инкубационный период при энтеровирусной инфекции составляет от 1 до 14 дней, чаще 5-7 дней.

Когда человек, заразившийся энтеровирусной инфекцией, сам становится заразным и сколько времени он остается заразным?

Человек, который заразился энтеровирусом, может стать заразным за несколько дней до появления первых симптомов болезни.

После начала болезни, вирус продолжает выделяться с частицами слизи из горла в течение 1-3 недель и частицами кала в течение 1-2 месяцев.

Как можно предотвратить заражение других членов семьи?

Если вы или ваш ребенок заболели энтеровирусной инфекцией и вы хотели бы защитить от заражения других членов семьи, постарайтесь соблюдать следующие правила: в течение всего периода болезни и еще в течение 3 недель после выздоровления, следите за тем, чтобы заболевший человек использовал отдельную посуду, полотенце и белье.

Старайтесь чаще мыть руки с мылом (особенно после контакта с заболевшим человеком и любыми предметами, на которых может быть его слюна или частицы кала) и настаивайте на том, чтобы сам заболевший человек чаще мыл руки.

Может ли энтеровирусная инфекция вызывать сыпь на коже?

Кроме описанной выше сыпи в виде сероватых пузырьков на руках и ногах, энтеровирусная инфекция может провоцировать появление более или менее обильной сыпи в виде красных пятен, которая может быть очень похожа на сыпь при кори или при краснухе.

Какие осложнения и последствия может вызвать энтеровирусная инфекция у детей и взрослых?

У подавляющего большинства взрослых и детей, которые заражаются энтеровирусной инфекцией, эта болезнь развивается совершенно не опасно и заканчивается полным выздоровлением в течение 5-10 дней. Тем не менее, у некоторых людей эта инфекция может спровоцировать серьезные осложнения со стороны сердца, нервной системы, легких и других внутренних органов и может привести к гибели.

Опасное развитие энтеровирусной инфекции более вероятно у детей раннего возраста (в том числе у грудничков) и у людей с ослабленной иммунной системой.

Профилактика: есть ли прививка против энтеровирусной инфекции?

Учитывая возможные пути передачи, меры личной профилактики должны заключаться в соблюдении правил личной гигиены, соблюдении питьевого режима (кипяченая вода, бутилированная вода), тщательной обработке фруктов, овощей с применением щетки и последующим ополаскиванием кипятком. Рекомендуется влажная уборка жилых помещений не реже 2 раз в день, проветривание помещений.

В целях раннего выявления заболевания необходимо наблюдение за детьми, бывшими в контакте с больными, с термометрией не реже 2 раз в день в течение 10 дней. Следует избегать посещения массовых мероприятий, мест с большим скоплением людей (общественный транспорт, кинотеатры и т.д.). Ни в коем случае не допускать посещение ребенком организованного детского коллектива (школа, детские дошкольные учреждения) с любыми проявлениями заболевания, так как это способствует его распространению и заражению окружающих.

Можно ли заболеть энтеровирусной инфекцией повторно?

После перенесенной энтеровирусной инфекции в организме человека, обычно, формируется сильный иммунитет, который защищает его от заражения этим же микробом еще раз.

Тем не менее, этот иммунитет может быть неэффективен против всех разновидностей энтеровирусной инфекции (выше мы уже говорили, что в настоящее время известны десятки ее вариантов). В связи с этим, если человек заразится новой разновидностью энтеровируса, у него снова могут появиться симптомы болезни.

Энтеровирусная инфекция — Симптомы, лечение

Энтеровирусная инфекция – это кишечное заболевание, которое провоцируют энтеровирусы. Установлено более 60 разновидностей возбудителей этой патологии. Их можно разделить на четыре основные группы. Чаще всего развитие заболевания вызывают вирусы Коксаки и полиомиелита.

Стоит отметить, что энтеровирусная инфекция крайне опасна. Вирусы устойчивы к воздействию внешней среды, длительное время не гибнут, даже находясь в почве или воде.

Заражение происходит через загрязненную воду или немытые и термически не обработанные продукты питания.

Последняя крупная вспышка подобного заболевания произошла в Китае несколько лет назад. Тогда пострадало более 15 тысяч детей, а 20 малышей погибли. Болезнь провоцировал опасный энтеровирус EV71. С током крови он разносится по всему организму человека и поражает все органы, в том числе легкие и мозг. Поэтому при постановке диагноза энтеровирусная инфекция, к лечению стоит отнестись очень внимательно.

Вероятные пути заражения

Возбудители инфекции в организм попадают воздушно-капельным путем, через зараженную воду, грязные продукты или при контакте с больным и предметами его обихода.

Огромную роль в профилактике этого заболевания играет соблюдение санитарно-гигиенических правил: мытье рук, термическая обработка продуктов и фильтрация питьевой воды.

Симптомы энтеровирусной инфекции

Длительность скрытого периода заболевания зависит от разных факторов. Большую роль играет тип возбудителя и состояние защитных функций человека.

По окончании инкубационного периода могут проявиться следующие симптомы:

повышение температуры тела;
боль в голове;
болезненные ощущения в живете;

тошнота;
рвота.

До попадания возбудителей инфекции в кровь, симптомы патологии могут быть выражены слабо или вовсе никак не проявляться. Но когда вирус разносится по организму, симптомы интоксикации становятся сильно выражены:

гипертермия достигает значений 39-40;
появляется сыпь на конечностях;
наблюдаются отеки рук и ног;
выступают язвы во рту.

Если человек игнорирует проявления заболевания и вовремя не начинает лечение патологии, энтеровирусная инфекция может стать причиной осложнений.

К ним относятся:

воспаление оболочек мозга;
энцефалит;
сильный отек легочной ткани.

Эти грозные заболевания нередко приводят к поражению оболочек мозга и провоцируют паралич или смерть человека. Особенно они опасны для детей дошкольного и младшего школьного возраста.

В последнее время среди детского населения наиболее часто врачи стали диагностировать малую энтеровирусную инфекцию. Симптомы этого заболевания выражены слабо и проявляются небольшим подъемом температуры тела, болью в суставах. Как правило, эти проявления заболевания уже через несколько дней проходят самостоятельно и не требуют специфического лечения.

Как ставится диагноз?

Поставить диагноз энтеровирусная инфекция человеку можно только по результатам анализов. На срок их выполнения врачи рекомендуют изолировать заболевшего, чтобы он не заразил других.

Так как инфекция легко передается, профилактическое обследование проводят всем контактным лицам. Любой случай заражения требует регистрации.

Лечение энтеровирусной инфекции

Специфической терапии заболевания не существует. В основном практикуется симптоматическое лечение. В острый период врачи прописывают больному пастельный режим, витаминотерапию, усиленное питание.

Если у заболевшего человека наблюдается рвота или понос, требуется прием большого количества жидкости, чтобы избежать обезвоживания. Так же рекомендованы препараты типа Регидрон, восстанавливающие водно-солевой баланс.

При наличии высокой температуры тела и сильной боли в голове, показан прием жаропонижающих и обезболивающих препаратов.

Антибактериальные препараты при вирусной инфекции используют только для профилактики вторичных инфекций бактериального характера.

Что касается диеты, то из рациона болеющего энтеровирусной инфекцией убирают продукты, вызывающие брожение и усиленную перистальтику. К ним относятся сладкие блюда, газировки, копченые колбасы, хлебобулочные изделия, свежие фрукты и овощи. Так же стоит исключить любые молочные продукты.

Все перечисленные правила касаются как взрослых, так и малолетних детей.

Как избежать заражения?

Избежать заражения кишечной инфекцией можно строго соблюдая правила гигиены. Обязательно тщательно мыть руки перед едой, а продукты питания подвергать термической обработке и тщательной чистке перед употреблением.

Одной из мер профилактики так же является употребление только чистой и качественной питьевой воды из проверенных и обустроенных источников.

Смотрите также:

Энтеровирусная инфекция у детей

Энтеровирусные инфекции включают в себя группу заболеваний. Их специфика такова, что после перенесенной инфекции образуется пожизненный иммунитет. Однако иммунитет будет только к тому типу вируса, разновидностью которого переболел ребенок. Поэтому энтеровирусной инфекцией ребенок может болеть несколько раз за свою жизнь. По этой же причине не существует вакцины от данного заболевания.

Болеют чаще всего дети в возрасте от 3 до 10 лет. У детей, находящихся на грудном вскармливании, в организме присутствует иммунитет, полученный от матери через грудное молоко, однако, этот иммунитет не стойкий и после прекращения грудного вскармливания быстро исчезает.

Вирус передается от больного ребенка или от ребенка, который является вирусоносителем. Вирусы хорошо сохраняются в воде и почве, при замораживании могут выживать на протяжении нескольких лет, устойчивы к действию дезинфицирующих средств, однако восприимчивы к действию высоких температур (при нагревании до 45ºС погибают через 45-60 секунд).

Пути передачи вируса:

— воздушно-капельный (при чихании и кашле с капельками слюны от больного ребенка к здоровому)

— фекально-оральный при не соблюдении правил личной гигиены

— через воду, при употреблении сырой (не кипяченой) воды

— возможно заражение детей через игрушки, если дети их берут в рот

Симптомы энтеровирусной инфекции

У энтеровирусных инфекций есть как схожие проявления, так и различные, в зависимости от вида. Попав в организм ребенка, вирусы мигрируют в лимфатические узлы, где они оседают и начинают размножаться. Инкубационный период у всех энтеровирусных инфекций одинаковый – от 1 до 10 дней (чаще 2-5 дней).

Заболевание начинается остро — с повышения температуры тела до 38-39º С. Температура чаще всего держится 3-5 дней, после чего снижается до нормальных цифр. Очень часто температура имеет волнообразное течение: 2-3 дня держится температура, после чего снижается и 2-3 дня находится на нормальных цифрах, затем снова поднимается на 1-2 дня и вновь нормализуется уже окончательно. При повышении температуры ребенок ощущает слабость, сонливость, может наблюдаться головная боль, тошнота, рвота. При снижении температуры тела все эти симптомы проходят, однако при повторном повышении могут вернуться. Также увеличиваются шейные и подчелюстные лимфоузлы, так как в них происходит размножение вирусов.

В зависимости от того, какие органы больше всего поражаются, выделяют несколько форм энтеровирусной инфекции. Энтеровирусы могут поражать: центральную и периферическую нервные системы, слизистую ротоглотки, слизистую глаз, кожу, мышцы, сердце, слизистую кишечника, печень, у мальчиков возможно поражение яичек.

Наиболее тяжелое последствие энтеровируса – это развитие серозного энтеровирусного менингита. Он может развиться у ребенка любого возраста и распознается по следующим признакам:

— головная боль разлитого характера, интенсивность которой нарастает с каждым часом;

— рвота без тошноты, после которой ребенок не ощущает облегчения;

— усиление боли и повторный эпизод рвоты может быть спровоцирован ярким светом или громким звуком;

— ребенок может быть заторможен или, наоборот, чрезвычайно возбужден;

— в тяжелых случаях развиваются судороги всех мышечных групп;

Окончательный диагноз менингита может поставить только доктор после проведения люмбальной пункции и изучения лабораторных показателей полученной спинномозговой жидкости.

Лечение энтеровирусной инфекции

Специфического лечения энтеровирусной инфекции не существует. Лечение проводят в домашних условиях, госпитализация показана при наличии поражения нервной системы, сердца, высокой температуры, которая долго не поддается снижению при использовании жаропонижающих средств. Ребенку показан постельный режим на весь период повышения температуры тела.

Питание должно быть легким, богатым белками. Необходимо достаточное количество жидкости: кипяченая вода, минеральная вода без газов, компоты, соки, морсы.

Лечение проводят симптоматически в зависимости от проявлений инфекции. В некоторых случаях (ангина, понос, конъюнктивит) проводят профилактику бактериальных осложнений.

Дети изолируются на весь период заболевания. В детском коллективе могут находиться после исчезновения всех симптомов заболевания.

Профилактика энтеровирусной инфекции

Для профилактики необходимо соблюдение правил личной гигиены: мыть руки после посещения туалета, прогулки на улице, пить только кипяченую воду или воду из заводской бутылки, недопустимо использование для питья ребенка воды из открытого источника (река, озеро).

Специфической вакцины против энтеровирусной инфекции не существует, так как в окружающей среде присутствует большое количество серотипов этих вирусов.

ВАЖНО при первых признаках заболевания обращаться к врачу, которые определит тактику лечения!

Энтеровирусная инфекция — Профилактика заболеваний и ЗОЖ — Бюджетное учреждение Ханты-Мансийского автономного округа — Югры

памятка для населения

Энтеровирусные инфекции — это группа острых инфекционных болезней, вызываемых кишечными вирусами (энтеровирусами), характеризующаяся лихорадкой и многообразными клиническими симптомами.

Энтеровирусы (их более 80 типов) довольно быстро погибают при температурах свыше 50°С (при 60°С — за 6-8 мин., при 100°С — мгновенно), быстро разрушаются под воздействием хлорсодержащих препаратов, ультрафиолетового облучения, при высушивании, кипячении. Тем не менее, при температуре 37°С вирусы могут сохранять жизнеспособность в течение 50-65 дней, длительно сохраняются в воде. В замороженном состоянии активность энтеровирусов сохраняется в течение многих лет, при хранении в обычном холодильнике (+4° — +6°С) — в течение нескольких недель, а при комнатной температуре — на протяжении нескольких дней. Они выдерживают многократное замораживание и оттаивание без потери активности. Резервуаром и источником инфекции является больной человек или инфицированный бессимптомный носитель вируса.

Наиболее интенсивное выделение возбудителя происходит в первые дни болезни. Доказана высокая контагиозность (заразность) энтеровирусов.

Вирус обнаруживают в крови, моче, носоглотке и фекалиях за несколько дней до появления клинических симптомов; инфицированные лица наиболее опасны для окружающих в ранние периоды инфекции, когда возбудитель выделяется из организма в наибольших концентрациях.

Инкубационный (скрытый) период энтеровирусной инфекции варьируется от 2 — х до 35 дней, в среднем — до 2 — х недель.

Источником инфекции является только человек. Инфекция передается воздушно-капельным (от больных), контактно-бытовым (от вирусоносителей), пищевым и водным путем. Заболевание распространено повсеместно. В странах умеренного климата характерна сезонность с повышением заболеваемости в конце лета и в начале осени. Заболевают преимущественно дети и лица молодого возраста. Заболевания наблюдаются в виде спорадических случаев, локальных вспышек (чаще в детских коллективах) и в виде крупных эпидемий, поражающих отдельные регионы и даже страны.

Факторами передачи инфекции служат вода, овощи, загрязненные энтеровирусами в результате применения необезвреженных сточных вод при их поливе. Также вирус может передаваться через грязные руки, игрушки и другие объекты внешней среды.

Человек, в организм которого проник энтеровирус, чаще становится носителем, или переносит заболевание в легкой форме. Около 85% случаев заболеваний протекает бессимптомно, в 12-14% диагностируются легкие формы заболевания, и только 1-3% имеют тяжелое течение. Особую опасность энтеровирусные инфекции представляют для лиц со сниженным иммунитетом.

Способность энтеровирусов воздействовать на многие органы человека вызывает большое разнообразие клинических форм инфекции. Могут поражаться практически все органы и ткани организма: нервная, сердечно-сосудистая и бронхолегочная системы, желудочно-кишечный тракт, а также почки, глаза, мышцы, кожа, слизистая полости рта, печень, эндокринные органы. Одним из наиболее серьезных и нередко регистрируемых форм энтеровирусной инфекции является серозный менингит, характеризующийся сильной головной болью, повышением температуры до 38-39°С, болями в затылочных мышцах, светобоязнью, рвотой.

Методы специфической профилактики (вакцинация) против энтеровирусных инфекций не разработаны. Однако одним из методов борьбы с энтеровирусными инфекциями является вакцинация против полиомиелита, так как вакцинный штамм вируса обладает подавляющим действием на энтеровирус. Поэтому следует обязательно прививаться в рамках национального календаря прививок, в который включена иммунизация против полиомиелита.

Меры неспецифической профилактики энтеровирусной инфекции: 5 простых правил профилактики кишечных инфекций:

для питья использовать только кипяченую или бутилированную воду;
мыть руки с мылом перед каждым приемом пищи и после каждого посещения туалета, строго соблюдать правила личной и общественной гигиены;
перед употреблением фруктов, овощей, их необходимо тщательно мыть с применением щетки и последующим ополаскиванием кипятком;
купаться только в официально разрешенных местах, при купании стараться не заглатывать воду;
не приобретать продукты у частных лиц, в неустановленных для торговли местах.

При первых признаках заболевания необходимо немедленно обращаться за медицинской помощью, не заниматься самолечением.

Летняя болезнь — энтеровирусная инфекция

14.06.2021

Лето — пора отпусков и отдыха, когда мы балуем себя и своих детей свежими овощами и фруктами, стремимся выехать на природу, к озёрам и рекам. Вот только радость от общения с природой может омрачить… энтеровирусная инфекция, риски заболеть которой возрастают в тёплые месяцы года. Что это за болезнь и как от неё защититься?

Энтеровирусная инфекция – инфекционное заболевание, вызываемое определённым видом кишечных вирусов. Энтеровирусы (ЭВИ) имеют много разновидностей и характеризуются многообразием клинической картины вызываемых ими заболеваний. Они могут поражать слизистые оболочки, мышцы, центральную нервную систему. Основными возбудителями являются вирусы Коксаки А, Коксаки В, ECHO, энтеровирусы 68-71 типов.

Специалисты напоминают, что источником энтеровирусной инфекции является больной человек или носитель инфекции без клинических проявлений.

Инфекция передается через воду и пищу, контактно-бытовым, воздушно-капельным путями. Факторами передачи могут быть недостаточно обработанные овощи, фрукты, зелень, игрушки, грязные руки, сырая вода и приготовленный из нее лед, а также другие объекты внешней среды, загрязненные энтеровирусами.

Важно знать, что энтеровирусы устойчивы во внешней среде: хорошо переносят низкие температуры (в условиях холодильника они сохраняются в течение нескольких недель), в водопроводной воде выживают до 18 дней, могут сохраняться на предметах обихода, продуктах питания (молоко, фрукты, овощи). Этиловый спирт (70% и более высокой концентрации) убивает энтеровирусы при экспозиции не менее 3-х часов. Энтеровирусы погибают под воздействием ультрафиолетового облучения, при высушивании и кипячении.

ЭВИ характеризуется разнообразием клинических форм и симптомов болезни (температура 39-40 С, головная и мышечная боль, сыпь, тошнота, рвота, герпетическая ангина, жидкий стул, конъюнктивит и др.).

В большинстве случаев заболевание проходит без осложнений, но возможны и тяжелые формы проявления болезни. Наиболее опасен серозный менингит, который сопровождается сильными головными болями, лихорадкой, рвотой.

ЭВИ отличается высокой контагиозностью с быстрым распространением заболевания. При отсутствии ранней изоляции больных в течение 2-3 недель может переболеть до 60 – 80% детского коллектива, поэтому в детских коллективах (школах, летних лагерях, детских садах и др.) особенно важно проведение профилактических мероприятий.

Запомните несколько простых правил личной гигиены, соблюдая которые вы значительно уменьшаете шансы встретиться с энтеровирусом:

Для питья используйте только кипяченую или бутилированную воду;
Мойте руки с мылом перед каждым приемом пищи и после каждого посещения туалета;
Обеспечьте индивидуальный набор посуды для каждого члена семьи, особенно для детей;
Перед употреблением овощей и фруктов (в том числе бананов, арбузов, дынь) их необходимо тщательно мыть с применением щетки и последующим ополаскиванием кипятком;
Употребляйте в пищу доброкачественные продукты, не приобретайте продукты питания у частных лиц, в неустановленных для торговли местах;
Купайтесь только в официально разрешенных местах, при купании старайтесь не заглатывать воду;
Чаще проветривайте комнаты, влажную уборку проводите с применением дезинфицирующих средств.

Если вам не удалось уберечься от заболевания, и у вас появились клинические проявления инфекционного заболевания (повышение температуры тела, головная боль, рвота и другое) – не занимайтесь самолечением, а обратитесь за квалифицированной медицинской помощью.

ЭНТЕРОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ (ЭВИ)

ЭНТЕРОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ (ЭВИ)

Энтеровирусные болезни — это острые инфекционные заболевания, вызываемые кишечными вирусами (энтеровирусами). Энтеровирусы представляют собой большую группу вирусов, число которых постоянно увеличивается в связи с тем, что постоянно открываются все новые и новые серотипы. Энтеровирусы обнаруживаются не только у человека, но и у животных.

Заражение может происходить несколькими путями. Вирусы попадают во внешнюю среду от больного или вирусоносителя. В окружающей среде вирусы могут сохраняться долго т. к. хорошо переносят неблагоприятное воздействие. Вирусы долго сохраняются в воде, почве, при замораживании могут выживать в течение нескольких лет. Вирусы восприимчивы к высоким температурам – при нагревании до 45 градусов погибают четырех 45-60 секунд.

Механизм передачи – воздушно-капельный, фекально-оральный при несоблюдении правил личной гигиены. Как правило, заражение чаще происходит через воду, через игрушки. Болеют чаще дети от 3 до 10 лет. Характерна сезонность — летне-осенний период.

Возбудитель проникает через слизистую оболочку верхних дыхательных путей или пищеварительного тракта. В месте внедрения он накапливается, размножается и клинически проявляется. Проникая в кровь он разносится по всему организму. Отсюда многообразие клинических проявлений.

Заболевание начинается остро с повышения температуры тела до 38-39°С. Температура чаще всего держится 3-5 дней, после чего снижается до нормальных цифр. Часто температура имеет волнообразное течение: 2-3 дня держится, после чего снижается на 2-3 дня, затем снова поднимается на 1-2 дня, после чего окончательно нормализуется. При повышении температуры отмечается слабость, сонливость, головная боль, увеличение лимфатических узлов.

В зависимости от того, какие органы больше всего поражаются, выделяют несколько форм энтеровирусной инфекции. При поражении ротоглотки развивается энтеровирусная ангина, при поражении глаз – коньюнктивит, при поражении мышц — миозит, при поражении кишечника — энтерит. Может развиваться миокардит, перикардит, гепатит, энцефалит, менингиты, орхит.

Наблюдается энтеровирусная инфекция с кожным проявлением в виде везикулярной сыпи на ладонях и стопах. Пузырьки через 5-6 дней сдуваются, не вскрываясь, на их месте образовывается участок пигментации (коричневая корочка), исчезающая через 4-5 дней.

Для постановки диагноза берут смывы из носа, зева или прямой кишки. Производится подращивание на клеточных культурах, после чего проводится ПЦР.

Специфического лечения энтеровирусной инфекции не существует. Лечение противовирусными препаратами, народными средствами, симптоматическое — жаропонижающие, обезболивающие, антисептики, адсорбенты. Молочно-растительная диета, постельный режим.

Профилактика: соблюдение правил личной гигиены, безопасный питьевой режим.

Энтеровирусная инфекция у детей: симптомы

Заболеть энтеровирусной инфекцией ребенок может очень легко. Вирусы стремительно распространяются воздушно-капельным путем от больного малыша к здоровому. После окончания инкубационного периода у инфицированного ребенка начинают проявляться специфические симптомы данной инфекции.

Врачи могут называть такие сыпные элементы также энтеровирусной экзантемой. Это состояние развивается у всех малышей, заболевших данной инфекцией. Степень выраженности симптомов при этом патологическом состоянии разная. Она во многом зависит от возраста ребенка, а также исходного состояния его здоровья и наличия у него сопутствующих заболеваний внутренних органов.

В большинстве случаев этот клинический признак возникает на 1-3 сутки с момента нормализации температуры тела. Локализация кожных высыпаний бывает самой разной. Сыпные элементы появляются на шее, спине, лице, ручках и ножках малыша. Проявляются такие высыпания как яркие красные пятнышки. Размер данных образований обычно составляет 2-4 мм.

Заметить данные высыпания могут родители и самостоятельно в домашних условиях. Для этого им следует внимательно осмотреть зев заболевшего ребенка с помощью обычной чайной ложки. Если родители выявили, что у малыша появились какие-то высыпания на слизистых оболочках, то его следует обязательно показать лечащему врачу. Медлить с этим нельзя, так как развитие заболевания, как правило, стремительное.

Некоторые клинические виды энтеровирусной экзантемы сопровождаются развитием множественных мелких пузырьков или волдырей на теле. Внутри таких высыпаний находится серозная или кровянистая жидкость. Она может вытекать из пузырьков при их травматизации. Привести к этому состоянию могут любые механические воздействия. После истечения жидкости на месте бывшего пузырька появляется кровоточащая язвочка.

Для заживления кожных покровов от сыпи и эпителизации поврежденных энтеровирусной инфекцией слизистых оболочек требуется достаточное время. Обычно они полностью восстанавливаются за 7-10 дней.

Сопутствующие симптомы

Специфические высыпания – не единственный клинический признак, который развивается при энтеровирусной инфекции. Это инфекционное заболевание сопровождается появлением у заболевшего ребенка целого комплекса неблагоприятных симптомов, которые существенно ухудшают его общее самочувствие. Нарастают данные проявления стремительно, в течение нескольких суток с момента окончания инкубационного периода. Нужно отметить, что груднички переносят энтеровирусную инфекцию несколько тяжелее, чем дети постарше.

Попав в детский организм и начав свое активное размножение, энтеровирусы приводят к развитию сильнейшего воспалительного процесса. Он проявляется появлением у ребенка интоксикационного синдрома. У заболевшего малыша стремительно нарастает температура тела. Значения ее могут быть разными и зависят от степени тяжести заболевания. Тяжелые формы болезни могут даже сопровождаться повышением температуры тела до 38.

Общее самочувствие болеющего ребенка существенно нарушается. У него нарастает тревожность, сонливость, снижается аппетит и появляются трудности с засыпанием. Малыши грудного возраста могут отказываться от грудных кормлений. Выраженный интоксикационный синдром сопровождается развитием головной боли и сильной слабости. Болеющий малыш старается больше времени проводить в своей кроватке, а игры с любимыми игрушками не доставляют ему в это время никакого удовольствия и радости.

Жидкий стул – также довольно часто встречаемый симптом при данной инфекции. Тяжелое течение болезни сопровождается частыми походами в туалет. Это приводит к усилению обезвоживания. Малыш может также испытывать болезненность в животике, которая не зависит от приемов пищи. Выраженность болевого синдрома бывает весьма интенсивной. -39 градусов.

У заболевшего малыша часто развивается рвота. Возникнуть она может не только после принятия пищи, но и также на фоне головной боли. Применение жаропонижающих средств существенно улучшает общее самочувствие ребенка и уменьшает чувство постоянной тошноты, которое развивается у заболевшего малыша.

Боли в мышцах могут развиться у ребенка уже на 2-3 сутки с момента развития заболевания. Преимущественная локализация такого болевого синдрома – ручки и ножки малыша, спина и верхняя половина туловища.

Отличия от других заболеваний

Для установления правильного диагноза врачи обязательно проводят дополнительные обследования. Они необходимы для исключения всех заболеваний, протекающих с развитием сходных симптомов. В проведении дифференциальной диагностики врачам помогают различные лабораторные анализы. Они позволяют выявлять также и степень тяжести функциональных нарушений, возникших в детском организме вследствие данного заболевания.

Энтеровирусная инфекция довольно часто напоминает грипп. Заболевшие малыши также чувствуют «разбитость», боли в мышцах, у них повышается температура тела. Важным отличием гриппа от энтеровирусной инфекции является сезонный характер и массовое распространение.

Герпетическая инфекция – также одна из патологий, которые могут протекать с развитием на коже у ребенка специфических кожных высыпаний. Герпес-вирусы обладают довольно большой избирательностью. «Любимая» их локализация – слизистые оболочки. Нужно отметить, что они также способны вызывать и повреждения на коже. Но это встречается у малышей достаточно редко.

Течение герпетической инфекции обычно длительное. Данное заболевание сопровождается сменой периодов полного благополучия и обострений, когда на слизистых оболочках и коже появляются специфические высыпания. Нужно отметить, что ремиссия бывает довольно длительной. К развитию высыпаний приводит выраженное снижение иммунитета.

Массовые вспышки герпетических инфекций, как правило, не встречается. Энтеровирусные инфекции, наоборот, развиваются чаще у деток в скученных коллективах. Энтеровирусы вызывают более яркие симптомы, чем вирусы герпеса. Это обуславливает основное отличие данных патологий. Энтеровирусная инфекция сопровождается более стремительным появлением неблагоприятных симптомов.

Отличить ветрянку от энтеровирусной инфекции можно, в основном, по совокупности симптомов. Ветряная оспа довольно редко проявляется у ребенка появлением болезненности в его животике. Нарушения стула для ветрянки также нехарактерны. Сыпные элементы при ветряной оспе обычно распространены на теле более интенсивно. Они могут покрывать практически все кожные покровы.

Коревая краснуха также может протекать с появлением на чистых кожных покровах ребенка различных высыпаний. Ее можно легко спутать с кожной сыпью, возникшей вследствие энтеровирусной инфекции. Помогает установить верный диагноз сбор анамнеза. Если у малыша дошкольного возраста отсутствуют прививки от кори, а высыпания на коже имеют генерализованный (распространенный) характер, то это, скорее всего говорит о том, что он болен корью.

Дифференциальная диагностика энтеровирусной инфекции также проводится с разными аллергиями. Аллергические заболевания, сопровождающиеся появлением на коже у малыша различных высыпаний, развиваются только при попадании аллергенов в детский организм. Такие патологии возникают у малышей, имеющих повышенную чувствительность к каким-то веществам или продуктам питания.

EVI-1 модулирует лейкемогенный потенциал и чувствительность к апоптозу при остром лимфобластном лейкозе человека

Mucenski ML, Taylor BA, Ihle JN, Hartley JW, Morse HC, Jenkins NA et al . Идентификация общего экотропного сайта интеграции вируса Evi-1 в ДНК миелоидных опухолей мышей AKXD. Mol Cell Biol 1988; 8 : 301–308.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Огава С., Курокава М., Танака Т., Митани К., Инадзава Дж., Хангаиси А. и др. .Структурно измененный белок Evi-1, образующийся при синдроме 3q21q26. Онкоген 1996; 13 : 183–191.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Судзукава К., Парганас Е., Гаджар А., Абэ Т., Такахаши С., Тани К. и др. . Идентификация области кластера контрольной точки 3 ‘гена рибофорина I в 3q21, связанного с активацией транскрипции гена EVI1 при остром миелогенном лейкозе с inv (3) (q21q26). Кровь 1994; 84 : 2681–2688.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Buonamici S, Li D, Chi Y, Zhao R, Wang X, Brace L и др. . EVI1 вызывает миелодиспластический синдром у мышей. J Clin Invest 2004; 114 : 713–719.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Джин Дж., Ямадзаки Ю., Такува М., Такахара Т., Канеко К., Кувата Т. и др. .Trib1 и Evi1 взаимодействуют с Hoxa и Meis1 в миелоидном лейкемогенезе. Кровь 2007; 109 : 3998–4005.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Barjesteh van Waalwijk van Doorn-Khosrovani S, Erpelinck C, van Putten WL, Valk PJ, van der Poel-van de Luytgaarde S, Hack R et al . Высокая экспрессия EVI1 предсказывает плохую выживаемость при остром миелоидном лейкозе: исследование 319 пациентов с AML de novo. Кровь 2003; 101 : 837–845.

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

Groschel S, Lugthart S, Schlenk RF, Valk PJ, Eiwen K, Goudswaard C et al . Высокая экспрессия EVI1 предсказывает исход у более молодых взрослых пациентов с острым миелоидным лейкозом и связана с отчетливыми цитогенетическими аномалиями. J Clin Oncol 2010; 28 : 2101–2107.

Артикул Google Scholar

Дагистани М., Марин Д., Хорашад Дж. С., Ван Л., Май П.С., Палиомпей С. и др. .Экспрессия онкогена EVI-1 позволяет прогнозировать выживаемость у пациентов с хронической фазой ХМЛ, резистентных к иматинибу, получавших ингибиторы тирозинкиназы второго поколения. Кровь 2010; 116 : 6014–6017.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Valk PJ, Verhaak RG, Beijen MA, Erpelinck CA, Barjesteh van Waalwijk van Doorn-Khosrovani S, Boer JM et al . Прогностически полезные профили экспрессии генов при остром миелоидном лейкозе. N Engl J Med 2004; 350 : 1617–1628.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Хираи Х. Фактор транскрипции Evi-1. Int J Biochem Cell Biol 1999; 31 : 1367–1371.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Wieser R. Онкоген и регулятор развития EVI1: экспрессия, биохимические свойства и биологические функции. Gene 2007; 396 : 346–357.

CAS Статья Google Scholar

Хойт П.Р., Бартоломью К., Дэвис А.Дж., Ютзи К., Геймер Л.В., Поттер С.С. и др. . Протоонкоген Evi1 необходим в середине беременности для развития нервной, сердечной и параксиальной мезенхимы. Mech Dev 1997; 65 : 55–70.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Гояма С., Ямамото Г., Симабе М., Сато Т., Итикава М., Огава С. и др. .Evi-1 является важным регулятором гемопоэтических стволовых клеток и трансформированных лейкозных клеток. стволовых клеток 2008; 3 : 207–220.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Yuasa H, Oike Y, Iwama A, Nishikata I, Sugiyama D, Perkins A et al . Онкогенный фактор транскрипции Evi1 регулирует пролиферацию гемопоэтических стволовых клеток посредством экспрессии GATA-2. EMBO J 2005; 24 : 1976–1987.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Gerhardt TM, Schmahl GE, Flotho C, Rath AV, Niemeyer CM. Экспрессия гена Evi-1 в гемопоэтических клетках детей с ювенильным миеломоноцитарным лейкозом и нормальных доноров. Br J Haematol 1997; 99 : 882–887.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Privitera E, Longoni D, Brambillasca F, Biondi A.Экспрессия гена EVI-1 в миелоидных клоногенных клетках ювенильного миеломоноцитарного лейкоза (JMML). Leukemia 1997; 11 : 2045–2048.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Delwel R, Funabiki T, Kreider BL, Morishita K, Ihle JN. Четыре из семи цинковых пальцев гена, трансформирующего миелоид Evi-1, необходимы для последовательного связывания с GA (C / T) AAGA (T / C) AAGATAA. Mol Cell Biol 1993; 13 : 4291–4300.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Perkins AS, Fishel R, Jenkins NA, Copeland NG. Evi-1, протоонкоген с цинковыми пальцами мыши, кодирует специфичный для последовательности ДНК-связывающий белок. Mol Cell Biol 1991; 11 : 2665–2674.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Идзуцу К., Курокава М., Имаи Й, Маки К., Митани К., Хираи Х.Корепрессор CtBP взаимодействует с Evi-1, подавляя передачу сигналов трансформирующего фактора роста бета. Кровь 2001; 97 : 2815–2822.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Курокава М., Митани К., Ирие К., Мацуяма Т., Такахаши Т., Чиба С. и др. . Онкопротеин Evi-1 подавляет передачу сигналов TGF-бета, ингибируя Smad3. Nature 1998; 394 : 92–96.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Cattaneo F, Nucifora G. EVI1 рекрутирует гистон-метилтрансферазу SUV39h2 для репрессии транскрипции. J Cell Biochem 2008; 105 : 344–352.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Спенсбергер Д., Делвел Р. Новое взаимодействие между протоонкогеном Evi1 и гистоновыми метилтрансферазами, SUV39h2 и G9a. FEBS Lett 2008; 582 : 2761–2767.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Vinatzer U, Taplick J, Seiser C, Fonatsch C, Wieser R. Связанные с лейкемией факторы транскрипции EVI-1 и MDS1 / EVI1 подавляют транскрипцию и взаимодействуют с гистондеацетилазой. Br J Haematol 2001; 114 : 566–573.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Goyama S, Nitta E, Yoshino T., Kako S, Watanabe-Okochi N, Shimabe M et al .EVI-1 взаимодействует с гистоновыми метилтрансферазами SUV39h2 и G9a для репрессии транскрипции и иммортализации костного мозга. Лейкемия 2010; 24 : 81–88.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Poppe B, Dastugue N, Vandesompele J, Cauwelier B, De Smet B, Yigit N et al . EVI1 последовательно экспрессируется в виде основного транскрипта в обычных и редких повторяющихся перестройках 3q26. Genes Chromosomes Cancer 2006; 45 : 349–356.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Де Веер А., Поппе Б., Каувелье Б., Ван Рой Н., Дастугу Н., Хагемейер А. и др. . Скрининг на EVI1: эктопическая экспрессия отсутствует у пациентов с острым лимфобластным лейкозом Т-клеток и клеточных линий. Cancer Genet Cytogenet 2006; 171 : 79–80.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Андерссон А., Ритц С., Линдгрен Д., Иден П., Лассен С., Хельдруп Дж. и др. .Классификация на основе микрочипов последовательной серии из 121 острых лейкозов у детей: прогноз лейкемического и генетического подтипа, а также статуса минимальной остаточной болезни. Лейкемия 2007; 21 : 1198–1203.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Cario G, Stanulla M, Fine BM, Teuffel O, Neuhoff NV, Schrauder A et al . Отчетливые профили экспрессии генов определяют молекулярную реакцию на лечение острого лимфобластного лейкоза у детей. Кровь 2005; 105 : 821–826.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Гуннарссон Р., Исакссон А., Мансури М., Горанссон Х., Янссон М., Кэхилл Н. и др. . Большие, но не малые изменения числа копий коррелируют с геномными аберрациями высокого риска и выживаемостью при хроническом лимфолейкозе: геномный скрининг с высоким разрешением впервые диагностированных пациентов. Лейкемия 2010; 24 : 211–215.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Ридт Т., Эбингер М., Салих Х.Р., Томюк Дж., Хандгретингер Р., Канц Л. и др. . Аберрантная экспрессия гена гомеобокса CDX2 при остром лимфобластном лейкозе у детей. Кровь 2009; 113 : 4049–4051.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Conter V, Bartram CR, Valsecchi MG, Schrauder A, Panzer-Grumayer R, Moricke A et al .Молекулярный ответ на лечение переопределяет все прогностические факторы у детей и подростков с В-клеточным предшественником острого лимфобластного лейкоза: результаты исследования AIEOP-BFM ALL 2000 у 3184 пациентов. Кровь 2010; 115 : 3206–3214.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Анастасов Н., Клиер М., Кох И., Ангермейер Д., Хофлер Х., Фенд Ф и др. . Эффективная доставка shRNA в клетки B- и T-лимфомы с использованием переноса, опосредованного лентивирусным вектором. J Hematop 2009; 2 : 9–19.

Артикул PubMed Google Scholar

Maetzig T, Brugman MH, Bartels S, Heinz N, Kustikova OS, Modlich U et al . Поликлональные колебания трансдуцированных лентивирусным вектором и размноженных гемопоэтических стволовых клеток мыши. Кровь 2011; 117 : 3053–3064.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Николетти I, Migliorati G, Pagliacci MC, Grignani F, Riccardi C.Быстрый и простой метод измерения апоптоза тимоцитов с помощью окрашивания йодидом пропидия и проточной цитометрии. J Immunol Methods 1991; 139 : 271–279.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Kunder S, Calzada-Wack J, Holzlwimmer G, Muller J, Kloss C, Howat W et al . Комплексная панель антител для иммуногистохимического анализа фиксированных формалином, залитых парафином гематопоэтических новообразований мышей: анализ мышиных специфических и человеческих антител, перекрестно реактивных с тканями мышей. Toxicol Pathol 2007; 35 : 366–375.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Barjesteh van Waalwijk van Doorn-Kh S, Erpelinck C, Löwenberg B, Delwal R. Низкая экспрессия генов MDS1-EVI1-like-1 (MEL1) и EVI1-like-1 (EL1) при остром миелоидном лейкозе с благоприятным риском. Exp Hematol 2003; 31 : 1066–1072.

Артикул Google Scholar

Vinatzer U, Mannhalter C, Mitterbauer M, Gruener H, Greinix H, Schmidt HH et al .Количественное сравнение экспрессии EVI1 и его предполагаемого антагониста MDS1 / EVI1 у пациентов с миелоидным лейкозом. Genes Chromosomes Cancer 2003; 36 : 80–89.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Srinivasula SM, Ashwell JD. IAP: что в названии? Mol Cell 2008; 30 : 123–135.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Zhang XD, Franco A, Myers K, Gray C, Nguyen T, Hersey P.Связь TNF-связанного рецептора индуцирующего апоптоз лиганда (TRAIL) и экспрессии белка, ингибирующего FLICE, с TRAIL-индуцированным апоптозом меланомы. Cancer Res 1999; 59 : 2747–2753.

CAS Google Scholar

Leverkus M, Neumann M, Mengling T., Rauch CT, Brocker EB, Krammer PH et al . Регулирование чувствительности к лиганду, индуцирующему апоптоз, связанному с фактором некроза опухоли, в первичных и трансформированных кератиноцитах человека. Cancer Res 2000; 60 : 553–559.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Eggert A, Grotzer MA, Zuzak TJ, Wiewrodt BR, Ho R, Ikegaki N et al . Устойчивость к апоптозу, индуцированному лигандом, индуцирующим апоптоз, связанным с фактором некроза опухоли (TRAIL), в клетках нейробластомы коррелирует с потерей экспрессии каспазы-8. Cancer Res 2001; 61 : 1314–1319.

CAS Google Scholar

Шульц Л.Д., Лион Б.Л., Бурзенски Л.М., Готт Б., Чен Х, Чалефф С. и др. . Развитие лимфоидных и миелоидных клеток человека у NOD / LtSz-scid IL2R-гамма-нулевых мышей, которым прививаются мобилизованные гемопоэтические стволовые клетки человека. J Immunol 2005; 174 : 6477–6489.

CAS Статья Google Scholar

McDermott SP, Eppert K, Lechman ER, Doedens M, Dick JE.Сравнение приживления пуповинной крови человека между линиями мышей с ослабленным иммунитетом. Кровь 2010; 116 : 193–200.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Нотта Ф, Дулатов С, Дик Дж. Приживление гемопоэтических стволовых клеток человека более эффективно у женщин-реципиентов NOD / SCID / IL-2Rgc-null. Кровь 2010; 115 : 3704–3707.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Рассел М., Список А, Гринберг П., Вудворд С., Глинсманн Б., Парганас Е и др. .Экспрессия EVI1 при миелодиспластических синдромах и других гематологических злокачественных новообразованиях без транслокаций 3q26. Кровь 1994; 84 : 1243–1248.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Arai S, Yoshimi A, Shimabe M, Ichikawa M, Nakagawa M, Imai Y и др. . Evi-1 является мишенью транскрипции онкобелков MLL в гемопоэтических стволовых клетках. Кровь 2010; 117 : 6304–6314.

Артикул PubMed Google Scholar

Modlich U, Schambach A, Brugman MH, Wicke DC, Knoess S, Li Z et al . Индукция лейкемии после вставки одного ретровирусного вектора в Evi1 или Prdm16. Лейкемия 2008; 22 : 1519–1528.

CAS Статья Google Scholar

Чиу П.П., Цзян Х., Дик Дж. Клетки, инициирующие лейкоз при Т-лимфобластном лейкозе человека, проявляют устойчивость к глюкокортикоидам. Кровь 2010; 116 : 5268–5279.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Крышка D. Гуманизированная модель для изучения лейкозных стволовых клеток. Методы Мол Биол 2009; 538 : 247–262.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Morisot S, Wayne AS, Bohana-Kashtan O, Kaplan IM, Gocke CD, Hildreth R et al .Высокие частоты лейкозных стволовых клеток в острой лимфобластной лейкемии с неблагоприятным исходом в детском возрасте. Лейкемия 2010; 24 : 1859–1866.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Meyer LH, Eckhoff SM, Queudeville M, Kraus JM, Giordan M, Stursberg J et al . У всех мышей NOD / SCID ранний рецидив идентифицируется по времени до лейкемии и характеризуется сигнатурой гена, включающей пути выживания. Cancer Cell 2011; 19 : 206–217.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Курокава М., Митани К., Ямагата Т., Такахаши Т., Идзуцу К., Огава С. и др. . Онкопротеин evi-1 ингибирует N-концевую киназу c-Jun и предотвращает вызванную стрессом гибель клеток. EMBO J 2000; 19 : 2958–2968.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Лю И, Чен Л., Ко Т.С., Филдс А.П., Томпсон Э.А.Evi1 представляет собой фактор выживания, который передает устойчивость к гибели клеток, опосредованной TGFbeta и таксолом, посредством PI3K / AKT. Онкоген 2006; 25 : 3565–3575.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Йошими А., Гояма С., Ватанабэ-Окочи Н., Йошики Ю., Нання Й, Нитта Е. и др. . Evi1 подавляет экспрессию PTEN и активирует PI3K / AKT / mTOR посредством взаимодействия с белками polycomb. Кровь 2011; 117 : 3617–3628.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Джазаэри А.А., Феррис Дж.С., Брайант Дж.Л., Далтон М.С., Датта А. Оценка EVI1 и EVI1 (Delta324) как потенциальных терапевтических мишеней при раке яичников. Gynecol Oncol 2010; 118 : 189–195.

CAS Статья Google Scholar

Роос В.П., Кайна Б.Гибель клеток, вызванная повреждением ДНК, в результате апоптоза. Trends Mol Med 2006; 12 : 440–450.

CAS Статья Google Scholar

Pradhan AK, Mohapatra AD, Nayak KB, Chakraborty S. Ацетилирование протоонкогена EVI1 отменяет связывание промотора Bcl-xL и вызывает апоптоз. PLoS One 2011; 6 : e25370.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Shackelford D, Kenific C, Blusztajn A, Waxman S, Ren R.Нацеленная деградация онкобелка AML1 / MDS1 / EVI1 триоксидом мышьяка. Cancer Res 2006; 66 : 11360–11369.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Раза А., Буонамичи С., Лисак Л., Тахир С., Ли Д., Имран М. и др. . Комбинация триоксида мышьяка и талидомида вызывает множественные гематологические ответы у пациентов с миелодиспластическими синдромами, особенно у пациентов с высокой экспрессией EVI1 до лечения. Leuk Res 2004; 28 : 791–803.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Zhang Y, Sicot G, Cui X, Vogel M, Wuertzer CA, Lezon-Geyda K et al . Нацеливание на ДНК-связывающий мотив белка EVI1 с помощью пирролимидазольного полиамида. Биохимия 2011; 50 : 10431–10441.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Социальная поддержка и ишемическая болезнь сердца: Epidemiologic Evi…: Психосоматическая медицина

Цель:

В данной статье рассматриваются теории социальной поддержки и данные о роли социальной поддержки в развитии и прогрессировании ишемической болезни сердца (ИБС).

Методы:

статей для первичного обзора социальной поддержки как фактора риска были идентифицированы с помощью MEDLINE (1966–2004) и PsychINFO (1872–2004). Обзоры библиографий также использовались для выявления соответствующих статей.

Результатов:

В целом, данные свидетельствуют о том, что низкая социальная поддержка создает риск от 1,5 до 2,0 как у здоровых групп населения, так и у пациентов с установленной ИБС. Однако способы концептуализации и измерения социальной поддержки существенно различаются. Кроме того, в нескольких исследованиях одновременно сравнивались разные типы поддержки.

Выводы:

Хотя низкий уровень поддержки связан с повышенным риском событий ИБС, неясно, какие типы поддержки больше всего связаны с клиническими исходами у здоровых людей и пациентов с ИБС.Достижение консенсуса в концептуализации и измерении социальной поддержки необходимо для изучения того, какие типы поддержки с наибольшей вероятностью будут связаны с неблагоприятными исходами ИБС. Также мало доказательств того, что улучшение низкой социальной поддержки снижает частоту случаев ИБС.

AMI = острый инфаркт миокарда;

ANS = вегетативная нервная система;

CHD = ишемическая болезнь сердца;

ENRICHD = Улучшение восстановления при ишемической болезни сердца;

HPA = надпочечник гипофиза гипоталамуса;

SES = социально-экономический статус;

SNS = симпатическая нервная система.

Потеря эпидермального Evi / Wls приводит к фенотипу, напоминающему псориазиформный дерматит | Журнал экспериментальной медицины

Клетки эпидермиса постоянно обновляются из стволовых клеток зародышевого листка. Хотя дифференцировка эпителиальных клеток была изучена очень подробно и роль передачи сигналов Wnt в этом процессе хорошо описана, вклад эпидермальной секреции Wnt в гомеостаз эпителиальных клеток остается плохо изученным.Чтобы проанализировать роль белков Wnt в этом процессе, мы создали условный нокаутный аллель рецептора груза Wnt Evi / Gpr177 / Wntless и изучили мышей, у которых отсутствовала экспрессия Evi в эпидермисе. Мы обнаружили, что мыши K14-Cre, Evi-LOF теряли волосы во время первого цикла волос, показывая красноватую кожу с нарушенной защитной функцией кожи. Профили экспрессии мутантной кожи и кожи дикого типа выявили повышенную регуляцию генов, связанных с воспалением. Кроме того, мы обнаружили, что экспрессия Evi в биоптатах кожи при псориазе подавляется, что позволяет предположить, что у Evi-дефицитных мышей развиваются кожные поражения, напоминающие псориаз человека.Инфильтрация иммунных клеток была обнаружена в коже Evi-LOF. Интересно, что наблюдалось зависимое от возраста истощение дендритных эпидермальных Т-клеток (DETC) и инфильтрация Т-клеток γδ ^low в мутантный эпидермис Evi. В совокупности описанный воспалительный фенотип кожи у Evi-дефицитных мышей выявил существенную роль секреции Wnt в поддержании нормального гомеостаза кожи за счет обеспечения сбалансированного эпидермально-дермального перекрестного взаимодействия, которое влияет на рекрутирование иммунных клеток и выживаемость DETC.

Воспалительное заболевание кожи — наиболее распространенное заболевание в дерматологии.Псориаз и атопический дерматит являются двумя основными хроническими состояниями воспалительных кожных заболеваний и возникают в результате неправильного взаимодействия между кожей и иммунной системой (Pittelkow, 2005). Воспаленная чешуйчатая кожа характеризуется гиперпролиферацией и измененной дифференцировкой кератиноцитов, а также повышенной инфильтрацией воспалительных клеток и образованием кровеносных сосудов (Lowes et al., 2007; Wagner et al., 2010). Помимо факторов окружающей среды, большой набор наследственных факторов, включая многие гены, связанные с иммунной системой, способствуют возникновению заболевания (Nestle et al., 2009). Некоторые изменения в генах, связанных с правильной функцией кожного барьера, такие как филаггрин, также были вовлечены (Proksch et al., 2008; Roberson and Bowcock, 2010). Недостаток физических, биохимических или иммунологических композиций делает возможным чрескожное проникновение химических веществ и микробов, что способствует воспалению. В исследованиях на мышах изучали влияние ключевых сигнальных путей на моделирование псориатической кожи, включая STAT3, AP-1, TGF-β, NF-κB и VEGF (Gudjonsson et al., 2007; Swindell et al., 2011). Эти генетические исследования дали представление о регуляции сложных воспалительных цепей, внесли свой вклад в раскрытие молекулярных и клеточных изменений, которые постоянно обнаруживаются в псориатических бляшках, и способствовали разработке новых терапевтических стратегий (Wagner et al., 2010).

Вклад передачи сигналов Wnt в патогенез хронических воспалительных кожных заболеваний не был подробно изучен.Генетическая связь между патологическими пороками развития кожи и компонентами пути передачи сигналов Wnt была описана для синдрома Гольца-Горлина (Grzeschik et al., 2007). Синдром Гольца-Горлина — это Х-сцепленное доминантное заболевание, вызванное мутациями в гене PORCN , который кодирует ацилтрансферазу Porcupine, компонент сигнального пути Wnt. Дикобраз необходим для пальмитоилирования белков Wnt в ER, что является необходимым этапом секреции Wnt. PORCN Мутации вызывают гипопластическую, гиперпигментированную кожу, а также деформации пальцев, глаз и зубов (Lombardi et al., 2011; Лю и др., 2012). Сходным образом, два недавних исследования сообщили об усилении регуляции Wnt5A и дифференциальной экспрессии других компонентов пути Wnt в псориатических бляшках человека (Gudjonsson et al., 2007; Reischl et al., 2007; Romanowska et al., 2009).

Настоящее исследование направлено на анализ роли регулируемой Evi секреции Wnt в эпидермисе. С этой целью мы условно удалили ген Evi в клетках плоского эпителия мышей.Отмена функции Evi привела к воспалению кожи с гиперплазией, нарушению барьерной функции и дифференцировке эпидермальных кератиноцитов, а также к гиперплазии сосудов. Мы наблюдали значительную дермальную инфильтрацию клеток врожденного иммунитета и рекрутирование Т-клеток. Интересно, что в мутантной коже Evi было выявлено значительное снижение количества дендритных эпидермальных Т-клеток (ДЭТК) с высокими уровнями Т-клеточного рецептора γδ. Истощение DETC началось постнатально, что свидетельствует о том, что кератиноциты, секретирующие Wnt, играют важную роль в выживании DETC в коже мышей.Более того, вторая популяция γδ ^low T-клеток вторглась в эпидермис Evi-LOF, предполагая, что модуляция популяций γδ T-клеток вносит вклад в наблюдаемую дисрегуляцию иммунных клеток. Кроме того, Evi-дефицитные кератиноциты показали повышенную активацию STAT3. В совокупности делеция Evi в кератиноцитах создавала профиль кожи, напоминающий хронические кожные воспалительные заболевания. Данные показывают, что неправильный контроль секреции Wnt приводит к серьезным аберрациям во время гомеостаза кожи.Мы наблюдали, что сниженная экспрессия Evi в биоптатах псориатической кожи человека усиливает значимость передачи сигналов Wnt при псориазе человека. Следовательно, Evi-дефицитные мыши могут представлять новую модель для изучения заболеваний, связанных с псориазиформным дерматитом.

Чтобы исследовать роль секреции Wnt во время развития органов, мы генерировали мышей Evi ^{floxed / floxed} путем гомологичной рекомбинации с удалением экзона 3 (рис.1, А – В). Глобальная делеция экспрессии Evi с использованием панделера (Evi ^{fl / fl}, Cre-делетер) привела к фенокопированию мышей с дефицитом Wnt3a в середине срока беременности, как также сообщалось ранее (рис. 1 D; Fu et al., 2009 г.). Затем проводили условную эпидермальную делецию Evi путем скрещивания мышей Evi ^{fl / fl} с мышами K14-Cre, которые пространственно направляют делецию Evi в клетки плоского эпителия. Экспрессия промотора K14 начинается во время эмбрионального развития (эмбриональный день 12 [E12]) и остается высокой как в волосистой, так и в безволосой коже (Huelsken and Birchmeier, 2001; Huelsken et al., 2001). K14-Cre экспрессируется в базальных эпителиальных клетках, а также в придатках кожи и имеет ограниченную экспрессию в других эпителиальных структурах, таких как тимус, пищевод и лесной желудок. Мыши Evi ^{fl / +}, K14-Cre ⁺ оказались фенотипически нормальными. Evi ^{fl / fl}, K14-Cre ⁺ (Evi-LOF) мыши родились с менделевской частотой и после рождения были неотличимы от своих однопометников дикого типа. На 6-й день постнатального развития детеныши Evi-LOF показали фенотип «красный нос» и сохранили заметно менее густой мех (рис.1 E). Кроме того, животные Evi-LOF демонстрировали фенотип задержки роста и оставались значительно меньше, пока не умерли в течение 10 недель (неопубликованные данные).

Мыши Evi-LOF начали терять волосы во время первого цикла роста волос (рис. 1 F). Кроме того, уши кажутся все более уродливыми (Fig. 1 G), это указывает на то, что эпидермальная секреция Wnt также влияет на формирование основного хряща. Кроме того, кожа стала раздраженной, шелушащейся и тонкой с открытыми кровеносными сосудами (рис.1 H), а глаза Evi-LOF выглядели опухшими (рис. 1 I). Основываясь на этих видимых изменениях кожи, мы провели обширное гистологическое сравнение кожи дикого типа и мутантной кожи. Во-первых, мы подтвердили удаление эпидермальной экспрессии Evi с помощью иммуногистохимии (рис. 1 J). Контрольные кератиноциты кожи заметно экспрессировали Evi нерегулярно. Аналогичным образом положительно окрашивались гладкомышечные клетки нижележащих кровеносных сосудов; тогда как белок Evi был слабо обнаружен в дермальных фибробластах, белок Evi не обнаруживался в эпидермисе Evi-LOF, что подтверждает его успешное истощение.

Окрашенные гематоксилином и эозином (H&E) участки кожи Evi-LOF выявили драматические изменения в структурах кожи, которые становились все более серьезными во время первого цикла роста волос на коже. В коже Evi-LOF развивалось меньшее количество волосяных фолликулов, которые дегенерировали до кистоподобных структур (Рис. 2 A). Выраженное образование чешуек было видно на коже молодых детенышей и сохранялось на протяжении всей жизни, что указывает на нарушение дифференцировки кератиноцитов.Эпидермис мутантной кожи оказался гиперпролиферативным, в отличие от тонкой дермы и гиподермы (рис. 2А). В нормальной коже пролиферирующие клетки обнаруживались в базальном слое эпидермиса и луковицах волосяных фолликулов. Распределение фосфо-h4-положительных клеток в коже мышей Evi-LOF показало повышенную долю пролиферирующих базальных клеток в Evi-LOF, тогда как количество пролиферирующих клеток в луковице было уменьшено (рис. 2, B и C). . Эти данные указывают на то, что эпидермис Evi-LOF обновлялся за счет быстро делящихся клеток базального слоя, а не за счет пролиферирующих стволовых клеток выпуклости.В совокупности кожа Evi-LOF проявлялась нарушением образования волосяных фолликулов, дегенерацией дермы и усиленной пролиферацией кератиноцитов.

Чтобы определить, присутствовали ли другие изменения в эпителиальных структурах у животных Evi-LOF, мы исследовали экспрессию маркеров эпидермальной дифференцировки, таких как лорикрин, кератин-5 (K5), K8, K14 и K16. Лорикрин экспрессировался во внешнем слое кератиноцитов у мышей Evi-LOF, но не так постоянно, как у контрольных мышей (рис.3 А). K5-, K8- и K14-, а также маркеры, экспрессируемые базальным слоем и волосяным фолликулом, были одинаково распределены в фолликулах мышей дикого типа и мышей Evi-LOF, тогда как они экспрессировались в нескольких слоях гиперпролиферативного эпидермиса у мышей. Мыши Evi-LOF (рис. 3 А). Интересно, что K16 был обогащен супрабазальными кератиноцитами Evi-LOF по сравнению с контролем дикого типа (фиг. 3, A и B). K16 является маркером дифференцированных кератиноцитов, который сильно индуцируется во время заживления ран (Leigh et al., 1995). Помимо обеспечения механической целостности, сети кератиновых филаментов также участвуют в клеточных функциях, таких как апоптоз и стрессовая реакция (Chamcheu et al., 2011). Поэтому мы спросили, регулируются ли дополнительные структурные компоненты по-разному, и выполнили анализ экспрессии с помощью последовательности РНК эпидермальных пластов. Мы обнаружили, что в общей сложности 1298 транскриптов дифференциально экспрессировались в эпидермисе Evi-LOF мышей P21 по сравнению с контрольными однопометниками. Анализ различных генов выявил следующие изменения в наборе кератинов: K1, K6a, K7, K16, K17, K24, K42 и K79 были активированы, тогда как экспрессия K2, K15, K32 и K77 была повышена. была понижена (рис.3 В). И K6, и K16 участвуют в регенерации ран, обеспечивая прочность и эластичность кожи (Leigh et al., 1995). K1 участвует в гиперкератозе и способствует утолщению рогового слоя. K17 способствует пролиферации кератиноцитов и росту опухолей, усиливая иммунный ответ в коже (Depianto et al., 2010). Мутация в кератине K2 остистого слоя связана с буллезной врожденной ихтиозиформной эритродермией (Akiyama et al., 2005). Экспрессия K15 подавляется в гиперпролиферативной коже, что способствует развитию псориаза и гипертрофических рубцов (Waseem et al., 1999). K77 и K32 участвуют в образовании волосяных волокон. Таким образом, анализ экспрессии кератина показывает, что потеря эпидермальной секреции Wnt приводит к дифференцированной регулируемой экспрессии нескольких белков кератина, которые участвуют в регенерации кожи и воспалении.

Более того, паттерн экспрессии ассоциированных с воспалением цитокинов изменен в коже Evi-LOF, что указывает на продолжающиеся воспалительные каскады (рис.3 С). Наиболее заметно то, что хемокины Cxcl1, Ccl2, Ccl6, Ccl20 и Ccl22 были активированы, Cxcl14 и Cc127a были подавлены, а экспрессия некоторых членов семейства IL1 и IL17f была увеличена, тогда как IL15, IL6f и IL34 были снижены. . Несколько членов семейства IL1 вовлечены в кожное воспаление. Родственные лиганды IL1 IL1f5, IL1f6, IL1f8 и IL1f9, которые активируются в коже Evi-LOF, связаны с кожными изменениями, подобными псориазу (Blumberg et al., 2007; Onoufriadis et al., 2011). Цитокины IL1f6, IL1f8 и IL1f9 активируют пути, ведущие к передаче сигналов NF-κB и MAPK, предполагая перекрестную связь этих путей и передачи сигналов Wnt в коже. Таким образом, эта цитокиновая сигнатура содержала гены, участвующие в рекрутировании лимфоцитов (члены семейства Cxc, члены семейства Ccl и IL17), активации (IL1), пролиферации и выживании (IL6, IL7 и IL15), и показывает, что эпидермальная потеря Evi коррелирует с с активированным иммунным и воспалительным ответом.

Воспаление стало движущей силой ангиогенеза.По этой причине мы проанализировали плотность сосудов в дерме кожи Evi-LOF и однопометников дикого типа. Количественная оценка окрашенных H и E срезов Evi-LOF выявила значительно больше кровеносных сосудов по сравнению с контролем (рис. 3, D и E). Аналогичные результаты были получены с CD31-меченными срезами кожи (неопубликованные данные), что указывает на то, что истощение секреции Wnt в эпидермисе вызвало ангиогенный ответ в коже Evi-LOF.

Ультраструктурный анализ выявил многослойность эпидермиса в коже Evi-LOF по сравнению с однослойным эпидермисом дикого типа.Кроме того, в Evi-LOF наблюдался спонгиоз как признак продолжающегося воспаления и нарушения гомеостаза жидкости, тогда как дерма была тонкой, но без патологических данных (рис. 3 F).

Основной важной функцией кожи является создание эффективного барьера, предотвращающего биологическое, химическое и физическое вторжение извне, а также удержание растворенных веществ изнутри и поддержание терморегуляции (Proksch et al., 2008). Правильная стратификация эпидермиса имеет решающее значение для развития и гомеостаза функции эпидермального барьера. Нарушение функции проницаемости кожи часто коррелирует с воспалением тканей. Поэтому мы выполнили анализ проникновения красителя с люциферином желтым и анализ трансэпидермальной потери воды (TEWL) для анализа барьерной функции (рис. 4, A и B). Оба анализа выявили значительное изменение барьерной функции кожи. У новорожденных мышей не наблюдалось изменений кожного барьера, тогда как у взрослых детенышей (> 6-й постнатальный день [P6]) развились дефекты барьера, которые приводили к проникновению красителя (рис.4 А). Сходным образом анализ TEWL выявил резкую потерю воды у взрослых мышей Evi-LOF (рис. 4 B). Таким образом, мы пришли к выводу, что эмбрионы мутантных мышей сформировали зрелый эпидермис. Однако прогрессирующее истощение функции Evi в эпидермисе детенышей изменяло проникновение через кожу. Кроме того, изменение барьера происходило параллельно с появлением первых признаков воспаления (фенотип красного носа, рис. 1 E). Данные показывают, что нарушение барьера связано со временем с началом воспаления кожи и начинается довольно рано в развитии болезни у мышей Evi-LOF.Измерения температуры поверхности тела мышей того же возраста выявили пониженную температуру у взрослых мышей Evi-LOF, что указывает на нарушение терморегуляции (рис. 4 C). У мутантных мышей также было обнаружено отсутствие поддержки жировой ткани, что наводит на мысль, что мыши могли уравновесить отсутствие терморегуляции гиперметаболическим ответом. Отсутствие задержки жидкости, терморегуляции и поддержания жировой ткани вызывает стресс у мутантных мышей и может привести к задержке роста и ранней летальности. Кроме того, анализ экспрессии эпидермальных пластов выявил выраженные изменения в транскрипции генов EDC (эпидермального комплекса дифференцировки) (de Guzman Strong et al., 2010; Рис. 4 E). В частности, большинство членов семейства LCE (10 из 16 генов) и SRPP (12 из 15 генов) регулируются по-разному, поддерживая измененную ороговение и барьерную функцию у мутантных мышей Evi. Более того, гены LCE3 также участвуют в восстановлении барьера и псориатических поражениях (Bergboer et al., 2011). В совокупности наши результаты показывают, что делеция секреторного фактора Wnt Evi в эпидермисе привела к сложному и тяжелому фенотипу, включая эритему, шелушение, измененную дифференцировку кератиноцитов и неоангиогенез, а также признаки воспаления и нарушения кожного барьера.

Наблюдаемые фенотипические характеристики сходны с воспаленной кожей. Поэтому мы дополнительно исследовали кожу и провели иммуногистохимический анализ провоспалительного маркера S100A9 / кальгранулина B (Nacken et al., 2003). Кальгранулин B высоко экспрессируется в нейтрофилах и считается потенциальным медиатором псориаза (Semprini et al., 2002). Дерма мышей Evi-LOF, управляемых K14, была заметно инфильтрована нейтрофилами, начиная с возраста P16 (рис.5, А и Б). Микроабсцессы Манро были распределены по коже мышей Evi-LOF, чего мы никогда не наблюдали у контрольных однопометников (рис. 5 A). Чтобы исключить, что нейтрофилы попадают в кожу в результате бактериальной инфекции, мышей перорально вводили антибиотик широкого спектра действия ципрофлоксацин в течение 7 дней и после этого анализировали (фиг. 5 C). Никаких различий в инфильтрации нейтрофилов между однопометниками с лечением антибиотиками или без него не наблюдалось, что указывает на то, что рекрутирование нейтрофилов не было результатом бактериальной инфекции.Кроме того, общий патофизиологический анализ мутантных мышей не выявил признаков микробной инфекции.

Анализ данных профилирования экспрессии эпидермиса мутантного и дикого типа показал, что хемокин Cxcl1 (log ₂ раз, 2,02; скорректированное [прил.] Значение p, 0,0006) и его рецептор Cxcr2 (log ₂ раз, 4,4 ; прил. p-значение, 9 × 10 ^-36) регулировались по-разному (рис. 3 C).Оба гена участвуют в мобилизации нейтрофилов и, вероятно, способствуют усилению инвазии нейтрофилов в кожу Evi-LOF. Мы также исследовали инфильтрацию других клеток врожденного иммунитета, таких как макрофаги (CD68) и тучные клетки (толуидин), в кожу Evi-LOF и в контрольной группе. Макрофаги, а также тучные клетки были более широко обнаружены в коже Evi-LOF, что указывает на то, что в патогенез Evi-LOF вовлечен спектр клеток врожденного иммунитета (рис. 5 D).

Evi контролирует секрецию как канонических, так и неканонических лигандов Wnt.Поэтому мы спросили, коррелирует ли воспаление кожи Evi-LOF с β-catenin или β-catenin-независимой передачей сигналов Wnt. Мыши с мутантом β-катенина ^{fl / fl} × K14 (β-cat-LOF) были жизнеспособными. Формирование волосяных фолликулов было нарушено у мутантов, и мыши β-cat-LOF теряли волосы во время первого цикла роста волос, как описано ранее (Huelsken et al., 2001), и демонстрировали гиперпролиферативный эпидермис; однако они не анализировались на воспалительный фенотип (Huelsken et al., 2001). Гистологическая количественная оценка рекрутирования нейтрофилов и количественная оценка экспрессии мРНК S100A9 показала усиленную инфильтрацию нейтрофилов, хотя и в меньшей степени, чем у мышей Evi-LOF (рис.5, E и F). Эти данные указывают на то, что каноническая передача сигналов Wnt в кератиноцитах вносит вклад в гомеостаз кожи и воспаление. Фенотип мутанта Evi-LOF дополнительно выявил уменьшение количества дермальных фибробластов (Chen et al., 2012), что может приводить к более тяжелому воспалительному фенотипу по сравнению с β-cat-LOF.

Затем мы спросили, влияет ли рекрутирование нейтрофилов у Evi-животных с избыточной функцией, предполагая, что Evi-GOF должен приводить к обратному эффекту, чем Evi-LOF.Ранее мы генерировали мышей с нокином ROSA26: Evi-YFP (Evi-GOF) (Augustin et al., 2012) и показали, что избыточная экспрессия Evi-YFP увеличивает активность репортера Wnt в культуре эмбриональных стволовых клеток. Эти эксперименты подтвердили, что сверхэкспрессированный белок Evi был функциональным и секретировал белки Wnt (Augustin et al., 2012). Мыши Evi-GOF были жизнеспособными, фертильными и не демонстрировали серьезных фенотипических изменений. Общая структура кожи мышей Evi-GOF была сопоставима с контрольной кожей, что указывает на то, что эктопическая экспрессия Evi может переноситься без серьезных патофизиологических последствий (рис.5 G). Эти находки подтверждают, что необходимы дополнительные параметры для чрезмерной активации передачи сигналов Wnt in vivo. Специфический иммунофлуоресцентный анализ YFP выявил выраженное мечение кератиноцитов, подтверждая, что белок Evi-YFP эктопически экспрессировался в коже (рис. 5 H). Поэтому мы спросили, проявляет ли Evi-GOF эффект в анализе острого регенеративного воспаления с 12- O -тетрадеканоилфорбол-13-ацетатом (TPA). TPA вызывает сильную активацию провоспалительных сигнальных молекул и приводит к инфильтрации дермы иммунными клетками и эпидермальной гиперплазии.Нейтрофилы представляют собой первые иммунные клетки, задействованные после индукции воспаления. Мы проанализировали дермальную инфильтрацию нейтрофилов в Evi-GOF и контролях дикого типа с течением времени. Образцы кожи собирали через 6, 24 и 48 ч после нанесения TPA. Сильная инфильтрация нейтрофилов наблюдалась через 6 и 24 часа лечения, тогда как инфильтрация исчезла через 48 часов (рис. 5, I и J). Однако нейтрофильная инфильтрация была значительно меньше в коже Evi-GOF. У мышей Evi-GOF и мышей дикого типа, получавших ацетон, не наблюдалось усиленной инфильтрации иммунных клеток.Наблюдаемое снижение инфильтрации кожных нейтрофилов у мышей Evi-GOF согласуется с фенотипом Evi-LOF, который характеризовался выраженным рекрутированием нейтрофилов. Обе линии экспериментальных подходов подтверждают важную роль Evi в перекрестном взаимодействии кожи и иммунных клеток и предполагают, что Evi выполняет функцию привратника в поддержании гомеостаза кожи.

Псориатические поражения кожи обычно инфильтрируются клетками врожденной, а также адаптивной иммунной системы (Sabat et al., 2007; Nestle et al., 2009). Окрашивание кожи новорожденных маркером пан-Т-клеток CD3 показало типичное мечение DETC в Evi-LOF и контрольной ткани, тогда как дополнительная дермальная и эпидермальная инфильтрация Т-клетками отсутствовала (рис. 6 A). DETC составляют субпопуляцию Т-клеток γδ TCR ⁺, которая обильно экспрессирует Т-клеточный рецептор γδ и специфически локализуется в эпидермисе кожи (Girardi, 2004). Они находятся в эпидермисе в течение всей жизни мыши и участвуют в защите хозяина и заживлении ран (Asarnow et al., 1988).

Окрашивание

CD3 кожи взрослого Evi-LOF выявило несколько меченых клеток, напоминающих морфологию DETC, и дополнительную меньшую и менее интенсивно окрашенную популяцию, что указывает на инфильтрацию различных субпопуляций клеток CD3 ⁺ (рис. 6 A). Чтобы проанализировать распределение Т-клеток у взрослых мышей Evi-LOF и однопометников дикого типа, мы сравнили популяцию CD3 ⁺ в коже и лимфатических тканях (рис.6 Б). Этот анализ на основе FACS подтвердил, что эпидермис и дерма Evi-LOF имели значительно увеличенную инфильтрацию Т-лимфоцитов, тогда как лимфатические узлы и селезенка не были затронуты. Результаты указывают на продолжающееся воспаление на основе Т-лимфоцитов в коже мышей Evi-LOF. Кроме того, популяция CD3 ⁺ мутантного тимуса была уменьшена, что предполагает изменения в развитии Т-клеток.

Интересно, что возрастное снижение DETC наблюдалось в коже Evi-LOF, тогда как у новорожденных мутантных детенышей популяции DETC не изменились (рис.6, В и Г). Таким образом, маловероятно, что отказ в генерации предшественника DETC в тимусе был причинно связан с отсутствием DETC в коже Evi-LOF. Вместо этого данные предполагали, что выживаемость DETC нарушалась в Evi-дефицитном эпидермисе.

Эпидермис Evi-LOF взрослых содержал вторую популяцию γδ Т-клеток с пониженными уровнями CD3 и γδ уровней рецепторов Т-клеток (CD3 ^низкий gdTCR ^низкий) по сравнению с DETC (CD3 ^{высокий}, γδ ^{высокий}; Рис.6, Г и Д). Анализы на основе FACS выявили отсутствие экспрессии Vγ3 TCR (система Гармана) в популяции CD3 ^low, γδ ^low, что указывает на то, что эти γδ Т-клетки не отражают характеристики DETC и, вероятно, представляют собой инфильтрованные дермальные или лимфоидные γδ Т-клетки. (Рис.6 F; Gray et al., 2011; Mabuchi et al., 2011).

Чтобы исключить потерю DETC в результате эмиграции DETC из эпидермиса, мы приготовили клеточные суспензии дермы, лимфатических узлов и селезенки и количественно определили DETC с помощью профилирования FACS (рис.7 А). Популяция DETC уменьшается в дерме и не изменяется в лимфоидных тканях, что указывает на то, что DETC не мигрировал в соседние ткани или лимфоидные органы. Эти данные подтверждают нашу концепцию, что выживание DETC нарушается в Wnt-дефицитном эпидермисе.

Затем мы спросили, является ли потеря DETC результатом нарушения пролиферации и активации. Поэтому мы пометили пролиферирующие клетки (29S) -29-дезокси-29-фтор-5-этинилуридином (EdU) и количественно определили EdU-содержащий DETC с помощью FACS.DETC, выделенный из суспензий эпидермальных, а также дермальных клеток мутантной кожи, выявил повышенное включение EdU, что указывает на усиленную пролиферацию клеток (фиг. 7 B). Кроме того, мы проанализировали статус активации DETC в эпидермальных ушных пластинах Evi-LOF и сравнили его с контрольными мышами (рис. 7 C). Как показано на рис. 7C, большинство DETC в контрольных ушах образуют дендритные шипы (> 2), типичные для DETC в состоянии покоя, и только 5% активируются. Однако мутанты Evi получили ~ 65% активированного DETC и <5% DETC в состоянии покоя, что указывает на то, что DETC в коже Evi-LOF вызывает сенсибилизированный эпидермальный стресс, активируется и начинает размножаться.Эти результаты отражают типичный фенотип стимулированного DETC. Следовательно, потеря DETC не является результатом отсутствия активации и пролиферации DETC, а скорее является результатом отсутствия сигналов поддержки. Сходным образом, β-catenin-K14-LOF мыши обнаруживают сниженную популяцию DETC, подтверждая роль передачи сигналов Wnt в поддержании DETC (Fig. 7 D).

Затем мы спросили, изменяются ли лиганды γδ Т-клеток в коже Evi-LOF. Skint1 экспрессируется в эпителиальных клетках тимуса и кожи.Он участвует в выборе компартмента DETC в тимусе (Boyden et al., 2008; Barbee et al., 2011). Однако его функция в коже до сих пор не ясна. Skint1 был активирован в эпидермисе Evi-LOF (log ₂ раз, 1,02; прил. P-значение, 0,0001), предполагая, что Skint1, экспрессируемый кератиноцитами, может вносить вклад в распределение γδ Т-клеток в мутантном эпидермисе. Более того, предыдущие сообщения показали, что IL15 способствует поддержанию Т-клеток γδ TCR ⁺ (Edelbaum et al., 1995).Соответственно, значительное снижение экспрессии IL15 наблюдалось в коже Evi-LOF по сравнению с контролем дикого типа (log ₂ раз, снижение -1,85; скорректированное значение p, 2,2 × 10 ^-5). Эти данные указывают на то, что передача сигналов Wnt участвует в экспрессии IL15 в коже, что играет важную роль для выживания DETC.

Промотор K14 также экспрессируется эпителиальными клетками тимуса (TEC) внутренней области мозгового вещества (McLelland et al., 2011). Поэтому мы спросили, влияет ли ограниченное истощение Evi в TEC на структуру и состав Т-клеток тимуса. Относительный вес тимуса у детенышей Evi-LOF (P4) был аналогичен по сравнению с контрольными мышами. Однако вес тимуса был значительно снижен у старых мутантных животных (P21 и P65), что указывает на регресс тимуса из-за усиленной атрофии (рис. 8 A). Окрашивание H&E срезов тимуса P4 и P28 не выявило различий в общей архитектуре тимуса между Evi-LOF и мышами дикого типа (рис.8 Б). Структуры коркового и мозгового вещества были четко разделены с сопоставимыми размерами у более молодых мышей. Тимус старых мышей (P90) имел заметные различия в архитектуре тимуса, приводящие к сокращению мозгового вещества у мутантных мышей (Рис. 8B). Общая клеточность тимуса P4 Evi-LOF thymi не изменилась (рис. 8 C). Однако клеточность тимуса в атрофическом тимусе старых мышей (P40) была снижена примерно на 50% (рис. 8 C). Анализ маркеров клеточной поверхности показал, что распределение набора тимоцитов (CD4 ^— CD8 ^— двойных отрицательных [DN], CD4 ⁺ одноположительных, CD8 ⁺ одноположительных и CD4 ⁺ CD8 ⁺ двойных положительных [DP] клеток) P4 Evi-LOF тими были неотличимы от контрольных однопометников (рис.8 D). Популяции тимоцитов тимуса P40 Evi-LOF были значительно изменены с увеличением DN и потерей тимоцитов DP и отражают распределение тимоцитов, аналогичное распределению тимоцитов при атрофии тимуса, вызванной эндотоксином (рис.8, D и E; Billard et al., 2011).

Кроме того, изменение распределения популяций лейкоцитов в крови, а также увеличение популяции активированных клеток CD4 в лимфатическом узле мутантов предполагают нарушение гомеостаза и активацию клеточного иммунитета (рис.8, E и F). Сообщалось об уменьшении компартмента В-клеток и увеличении компартмента гранулоцитов в костном мозге после воспаления. Наши данные предполагают, что фенотип крови отражает реципрокную продукцию В-клеток и гранулоцитов в костном мозге при воспалении (Cain et al., 2009). Измененные соотношения тимических αβ Т-клеток по сравнению с γδ Т-клетками, а также между CD4 и CD8 Т-клетками, выявили значительно сниженные соотношения у взрослых мышей, предполагая сдвиги в созревании Т-клеток (рис. 8 G). Данные демонстрируют, что изменение тимуса у взрослых мышей Evi-LOF также иммуномодулирующее действие на периферии.В совокупности у мышей Evi-LOF развиваются атрофия лимфоидных тканей и нарушение иммунного гомеостаза, что свидетельствует о дисфункции клеточного иммунитета и продолжающемся воспалении.

Дальнейшие анализы потомства Evi ^{fl / fl} × FoxN1-Cre (FoxN1-Evi-LOF) проводили для выяснения исходной причины воспаления кожи. Мыши FoxN1-Cre обычно используются в качестве драйвера Cre для эпителия тимуса. Экспрессия Cre направлена на предшественники TEC, а также на зрелые TEC.Более того, промотор FoxN1 активен в некоторых эпителиальных клетках кожи (Mecklenburg et al., 2001; Schlake, 2001; Gordon et al., 2007). Мыши FoxN1-Evi-LOF были жизнеспособными и имели немного менее густую шерсть, чем контрольные животные дикого типа, но не демонстрировали явных признаков воспаления. DETC были нормально распределены, и инфильтрация Т-клеток отсутствовала у мутантных мышей (фиг. 8 H). Следовательно, у мышей Evi ^{fl / fl}, FoxN1-Cre не развилось воспаление кожи, что подтверждает концепцию о том, что эпидермальное истощение Evi, но не аберрантное развитие Т-клеток, запускало воспалительные каскады.

В совокупности данные показывают, что истощение эпидермальной секреции Wnt приводит к воспалительному фенотипу, который усиливает рекрутирование Т-клеток, но ингибирует выживание DETC. Этот фенотип не коррелировал с тяжелыми дефектами развития тимуса или тимоцитов. Скорее, резкое снижение развития Т-клеток тимуса и потеря тимоцитов DP у старых мышей Evi-LOF (P40) отражали характерные изменения после атрофии тимуса в ответ на стресс (Billard et al., 2011). Сходным образом истощение DKK1 в TEC не влияет на частоту субпопуляций тимоцитов (Osada et al., 2010).

Удаление β-катенина вызывает отсутствие образования плакод во время эмбриогенеза и потерю волос в первом цикле волос, что позволяет предположить, что β-катенин-зависимая передача сигналов Wnt контролирует дифференцировку стволовых клеток в фолликулярные или эпидермальные клоны (Huelsken et al. , 2001; Акияма и др., 2005). Недавние исследования показали, что эктодермальная секреция Wnt необходима для инициации волосяных фолликулов и пролиферации дермальных фибробластов (Chen et al., 2012; Myung et al., 2013). Эктопическая экспрессия секретируемого канонического ингибитора сигналов Wnt DKK1 в эпидермальных клетках обнаруживает дефекты развития кожи (Andl et al., 2002). K14-управляемая потеря Apc приводит к замедленному и аберрантному морфогенезу волосяных фолликулов, а также к дегенерации тимуса (Kuraguchi et al., 2006). Однако ни одна из связанных с Wnt моделей мышей до сих пор не рассматривала влияние передачи сигналов Wnt на гомеостаз кожи в отношении воспаления.В настоящем исследовании ген Evi был условно истощен в клетках плоского эпителия. Отмена функции Evi у этих мышей приводила к воспалению кожи с гиперплазией, нарушению дифференцировки эпидермальных кератиноцитов и барьерной функции, гиперплазии сосудов и инфильтрации иммунных клеток. Наблюдалась значительная инфильтрация лейкоцитов, таких как нейтрофилы. Нейтрофилы являются эффекторными клетками врожденного иммунного ответа и играют важную роль во время повреждения тканей при остром заболевании, а также при хронических заболеваниях.Характерной чертой псориаза является заметная инфильтрация и образование микроабсцессов нейтрофилами (Schön et al., 2000). Экспрессия хемоаттрактантов вместе с соответствующими рецепторами нейтрофилами необходима для рекрутирования нейтрофилов в место воспаления (Sadik et al., 2011). Хемокин Cxcl1 и его рецептор CxcR1 играют важную роль в мобилизации нейтрофилов. Оба гена были значительно активированы в коже Evi-LOF. Кроме того, Cxcl1 является целевым геном STAT3, который также был активирован в коже Evi-LOF.Эти данные подтверждают наши предыдущие открытия функции Evi во время онкогенеза глиомы (Augustin et al., 2012), которые показали, что передача сигналов STAT3 действует ниже Evi. Более того, ранее было показано, что STAT3 играет важную роль в заживлении кожных ран, а также активируется при псориатических поражениях человека. Таким образом, у трансгенных мышей K5-STAT3 развивается псориазоподобный фенотип (Sano et al., 2005).

Наличие нарушения проницаемости кожи широко признано при воспалительных заболеваниях кожи, таких как атопический дерматит и псориаз (Proksch et al., 2008). Неясно, сопровождается ли нарушение барьера воспалением или воспаление приводит к изменению проницаемости. Определенный вывод о первоначальном вкладе измененной функции кожного барьера или воспаления в нашей модели мышей также затруднен, потому что дефект, по-видимому, возникает вместе с первыми признаками воспаления кожи. Однако изменение кожного барьера у мышей Evi-LOF предшествует началу активации адаптивной иммунной системы, поскольку инфильтрация Т-клеток в значительной степени наблюдается у молодых мышей, а не у детенышей.Дефекты кожного барьера ранее не были связаны с измененным сигнальным путем Wnt. Следовательно, мы полагаем, что этот Wnt-ассоциированный фенотип является интересным открытием и откроет новые вопросы для будущих исследований.

Модель, описанная в этом исследовании, устанавливает, что эпидермальные изменения секреции Wnt вызывают кожное воспаление. Современные концепции воспалительных заболеваний кожи постулируют важную функциональную роль Т-клеток в патогенезе заболевания (Lowes et al., 2007). В соответствии с этими сообщениями рекрутирование Т-клеток наблюдалось в коже Evi-LOF. В отличие от подавляющего большинства зрелых αβ Т-лимфоцитов, которые находятся во вторичных лимфоидных органах и рекрутируются при иммунном ответе, субпопуляции γδ Т-клеток преимущественно находятся в эпителии, таком как эпидермис, кишечник, легкие или мочеполовые пути. FACS-профилирование мутантного взрослого эпителия выявило две популяции γδ TCR ⁺, одну CD3 ^{высокую} γδ ^{высокую} и вторую субпопуляцию с CD3 ^низкую γδ ^низкую клеток.Предыдущие исследования, основанные на материале пациентов с псориазом, показали, что популяция γδ Т-клеток увеличивается в псориатических бляшках (Seung et al., 2007). Точно так же появление клеток CD3 ^low γδ ^low в IL23-индуцированном псориатическом дерматите предполагает общий механизм между этой мышиной моделью псориаза и кожей Evi-LOF (Mabuchi et al., 2011). Функциональное нарушение на эпителиальном интерфейсе может быть связано с повышением регуляции локальных субпопуляций γδ TCR. Тем не менее наблюдаемое истощение DETC (CD3 ^{высокий} γδ ^{высокий}), которое началось постнатально, предполагает, что кератиноциты, секретирующие Wnt, необходимы для выживания DETC в коже мыши.DETC играют важную роль в поддержании эпидермального барьера и ограничивают воспалительную инфильтрацию ткани, вызванную обычными αβ Т-клетками (Hayday and Tigelaar, 2003; Bonneville et al., 2010; Macleod and Havran, 2011). Было показано, что у мышей NOD с дефицитом DETC развивается спонтанный дерматит (Girardi, 2004), указывая тем самым, что отсутствие DETC у Evi-дефицитных мышей вносит вклад в наблюдаемую дисрегуляцию иммунных клеток. IL15 предпочтительно экспрессируется в нелимфоидных тканях и способствует росту DETC (Edelbaum et al., 1995). Более того, мыши IL15-LOF имели дефицит эпидермальных клеток DETC, что указывает на то, что IL15 необходим для выживания DETC в коже (De Creus et al., 2002). Подавление IL15 в коже Evi-LOF предполагает роль IL15 как ограничивающего фактора выживания DETC у мутантов Evi. Интересно, что другие субпопуляции γδ Т-клеток, кроме DETC, не зависят от IL15 (Sumaria et al., 2011).

Результаты этого исследования также показывают, что частичный дефицит Evi в ТЕС не способствует развитию аберрантных Т-клеток.Кроме того, фенотипический анализ образцов кожи мышей Evi ^{fl / fl} FoxN1-Cre (FoxN1-Evi-LOF) соответствовал этим результатам. Экспрессия FoxN1 ограничена эпителиальными клетками тимуса с самых ранних стадий органогенеза тимуса и субнаборами кератиноцитов в эпидермисе и волосяных фолликулах (Mecklenburg et al., 2001; Schlake, 2001; Gordon et al., 2007). Мыши FoxN1-Evi-LOF приводят к мозаичному истощению Evi в эпидермисе, что вызывает незначительное выпадение волос в мутантной коже.Напротив, FoxN1-Cre индуцировал более пенетрантное иссечение гена Evi в эпителии тимуса по сравнению с K14-Cre и, следовательно, более эффективный нокаут эпителия тимуса. Тем не менее у мышей FoxN1-Evi-LOF не развивалось воспаление кожи, сравнимое с таковым у K14-Evi-LOF, что подтверждает модель, согласно которой истощение Evi в кератиноцитах отвечает за инициирование фенотипа, подобного псориазиформному дерматиту.

В прошлом был достигнут большой прогресс в определении молекулярных поражений, которые связаны с предрасположенностью к хроническим воспалительным кожным заболеваниям, и, следовательно, также в разработке новых терапевтических методов.Учитывая гетерогенность фенотипов пациентов, целью будущего лечения будет снижение иммунного ответа и связанного с ним ангиогенеза, а также гиперплазии. Это исследование показывает, что истощение эпидермиса фактора секреции Wnt Evi неожиданно вызвало дефект кожного барьера, иммунную инфильтрацию и рост кожных кровеносных сосудов и кератиноцитов. Принимая во внимание, что хронические воспалительные кожные заболевания являются сложными многофакторными заболеваниями, которые помимо специфической для пациента гетерогенности также имеют много общих воспалительных генов, Evi-дефицитные мыши отражают сходство с кожным кожным воспалением человека и предполагают, что наши мутантные мыши могут представлять новую модель для заболевания, связанные с псориазиформным дерматитом.В будущих исследованиях по разработке новых терапевтических средств следует учитывать вклад передачи сигналов Wnt в иммунную модуляцию, связанную с заболеванием.

Вектор для нацеливания на локус Evi содержал сайты loxP, фланкирующие экзон 3 гена Evi . Сайты loxP включали FRT-фланкированную селекционную кассету pgk-neo, которую вырезали in vivo с использованием линии мышей, экспрессирующей флиппазу.Направляющую конструкцию вводили в эмбриональные стволовые клетки C57BL / 6, которые вводили в бластоцисты для получения химерных мышей. Три независимо нацеленных клона ES-клеток дали мутантных мышей. Генотипирование мышей проводили с помощью ПЦР и саузерн-блоттинга. Следующие праймеры были использованы для идентификации аллелей дикого типа и рекомбинантных аллелей с помощью ПЦР: прямой, 5′-AAGGAAACGAGATTGAGATGAGG-3 ‘; обратный, 5’-GTTTATTTTTCCTCTTACCACTCTG-3 ‘. Генерация мышей производилась Taconic Artemis.

Для саузерн-блот-анализа геномную ДНК расщепляли с помощью BamHI и Bmtl и зондировали фрагментами, которые амплифицировали со следующими праймерами: зонд 1, прямой 5′-TAGGAGAATATGAGTTGAAAAGAGG-3 ‘, обратный 5′-AGGTGTGCCCTTTGAGAAAAGATC-3′; и зонд 2, прямой 5’-AATTAGCCTGTCATCTAGATTGTG-3 ‘и обратный 5′-ACATTAAAGGCACAGATCTACAAGG-3’.ROSA26: Evi-YFP (Evi-GOF) были описаны ранее (Augustin et al., 2012). Вкратце, кДНК Evi была помечена на С-конце YFP и вставлена в локус ROSA26 путем гомологичной рекомбинации. Кассету β-geo, фланкированную loxP, интегрировали перед последовательностью Evi.

Floxed Evi (Evi ^{fl / fl}) мышей скрещивали с Cre-делетерными мышами (Schwenk et al., 1995) или кератиноцит-специфическим промотором кератина 14 (K14-Cre) для удаления экзона 3 и получения мышей Evi-LOF.Флоксированных мышей ROSA26 Evi-YFP скрещивали с делетером Cre для индукции экспрессии Evi-YFP. Флоксированных мышей с β-катенином (β-cat ^{fl / fl}) (Huelsken et al., 2001) скрещивали с K14-Cre. Evi ^{fl / fl} были скрещены с FoxN1-Cre (Soza-Ried et al., 2008). Evi ^{fl / fl}, ROSA26: Evi-YFP, Cre-драйверные мыши находились на фоне C57BL / 6 (> 10 обратных скрещиваний), а мыши с β-катенином ^{fl / fl} находились на смешанном фоне. Мышей содержали в индивидуально вентилируемых клетках в определенных условиях, свободных от патогенов.Животные имели свободный доступ к пище и воде, жили в 12-часовом цикле свет-темнота и использовались в указанном возрасте. В каждом эксперименте использовали мутантных и контрольных однопометников. Было протестировано не менее трех пометов. Пап-тесты были выполнены для определения видов бактерий на коже проанализированных колоний мышей. Некоторые мыши дали положительный результат на Staphylococcus xylosus , который является непатогенным комменсалом на коже мышей. Параллельно с этим эффективность антибиотика ципрофлоксацина была положительно протестирована против Staphylococcus , присутствующего в колонии мышей, и у нас не было доказательств инфекции устойчивыми штаммами.Таким образом, мышей перорально вводили ципрофлоксацин, чтобы исключить бактериальную инфекцию как причину воспаления.

Иммуногистохимические исследования были выполнены на залитых парафином и свежезамороженных срезах, как описано ранее (Augustin et al., 2012). Вкратце, получение антигена из парафиновых срезов выполняли путем обработки срезов в микроволновой печи в течение 10 минут в 10 мМ цитратном буфере, pH 6,0, или Трис-ЭДТА, pH 9.Свежезамороженные срезы фиксировали 4% параформальдегидом или метанолом. Срезы инкубировали в течение ночи при 4 ° C со следующими первичными антителами: Evi (C1, DKFZ), CD3 (Abcam), γδ Т-клетки (BD), CD31 (BD), CD68 (Santa Cruz Biotechnology, Inc.), S100A9. (Santa Cruz Biotechnology, Inc.), β-катенин (BD), лорикрин (Abcam), K14 (Abcam), K16 (Acris), Phospho-h4 (New England BioLabs) и P-STAT3 (Abcam). Все окрашивания проводились с усилением комплекса AB. Ядра контрастировали с использованием красителя Hoechst или гематоксилина.Для окрашивания листов эпидермиса уши кратковременно промывали 70% этанолом. Вентральную и дорсальную стороны каждого уха отделяли пинцетом и инкубировали с опущенным эпидермисом на 3,8% тиоцианате аммония в течение 15 минут при 37 ° C. Листы эпидермиса снимали, помещали на предметное стекло и иммуноокрашивали после фиксации 4% параформальдегидом. Отрицательные контрольные эксперименты включали пропуск первичного антитела. Анализы тканей проводились с биопсиями, взятыми по крайней мере из трех образцов каждого генотипа из независимых пометов.Окрашенные срезы визуализировали с помощью светлопольной или иммунофлуоресцентной микроскопии (Axiovert 200M с программным обеспечением Visitron; Carl Zeiss) при указанном увеличении. Обработка изображений производилась с помощью программы Photoshop CS4 (Adobe). Количественная оценка меченых клеток проводилась с помощью ImageJ (Национальные институты здравоохранения. Образцы кожи пациентов с псориатическим и невмешательством были взяты из Департамента дерматологии и венерологии Кельнского университета. Все образцы были проанализированы анонимно, как было одобрено местные институциональные советы по этике (AZ 188–8).

Тимиты, селезенки и лимфатические узлы мышей разного возраста были удалены хирургическим путем, разрезаны на мелкие кусочки и преобразованы в одноклеточную суспензию через клеточный фильтр с размером ячеек 70 мкм. Оставшиеся клетки промывали ледяным буфером для FACS (5% фетальная бычья сыворотка в PBS). Лимфоциты центрифугировали при 300 g в течение 5 мин и ресуспендировали в 0,5–2 мл буфера FACS. Клетки подсчитывали с помощью гемоцитометра.

Кожу спины ополоснули 70% спиртом, промыли PBS и поместили дермальной стороной вниз в раствор Dispase II (5 мг / мл стерильного фильтрата Dispase II (Roche) в Т-клеточной среде (10 мМ буфера Hepes, 1 мМ натрия частного, 10% FCS и 55 мкМ β-меркаптоэтанола в RPMI) при 37 ° C в течение 3 ч. На следующий день дерму механически отделили от эпидермиса. .25% трипсин / ЭДТА в DMEM (Invitrogen) в течение 15 мин. Дерму переваривали 0,2 мг / мл коллагеназы I, 0,25% трипсин / ЭДТА в DMEM в течение 1 ч при 37 ° C. Клетки выделяли путем энергичного встряхивания до тех пор, пока раствор не стал непрозрачным. Суспензию клеток фильтровали через сетчатый фильтр для клеток 70 мкм и добавляли среду Т-клеток. Клетки центрифугировали при 350, g, в течение 5 минут и ресуспендировали в буфере FACS.

Суспензии

клеток добавляли в буфер для FACS, содержащий разбавленные антитела, инкубировали в течение 30 мин при 4 ° C, промывали и ресуспендировали в буфере для FACS.Для фенотипирования клеток крови окрашивали 2 мкл цельной крови в 100 мкл общего объема и анализировали. Данные иммунофенотипа получали на FACS Canto II (BD) и анализировали с помощью программного обеспечения FlowJo (Tree Star; DKFZ Flow Cytometry Core Facility, Гейдельберг, Германия).

Окрашивание клеточной поверхности проводили с помощью моноклональных антител, непосредственно конъюгированных против мыши: анти-CD3 APC-eFluor780 (eBioscience), анти-CD45 APC (BD), анти-TCR-β-цепи FITC (BD), анти-γδ-TCR PE. (BD), анти-CD45R PCB (Invitrogen), анти-CD11b PE (Invitrogen), анти-Gr1 (BD), анти-CD4 FITC (BioLegend), анти-CD8a PE-Cy5 (BD), анти-CD44 Alexa Fluor 647 (BioLegend), анти-CD25 PE (BioLegend), анти-CD62L FITC (eBioscience) и анти-Vγ3 TCR FITC (BD).

Что должен знать каждый сотрудник правоохранительных органов о доказательствах ДНК

Сбор и сохранение доказательств

Исследователи и лабораторный персонал должны работать вместе, чтобы определить наиболее убедительные доказательства и установить приоритеты. Хотя эта брошюра не предназначена в качестве руководства по сбору ДНК-доказательств, каждый офицер должен знать о важных вопросах, связанных с идентификацией, сбором, транспортировкой и хранением ДНК-доказательств.Эти вопросы так же важны для первого офицера патрульной службы, как и для опытного детектива и специалиста на месте преступления. Биологический материал может содержать опасные патогены, такие как вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) и вирус гепатита В, которые могут вызывать потенциально смертельные заболевания. Учитывая деликатный характер доказательств ДНК, офицеры должны всегда связываться со своим лабораторным персоналом или техниками по сбору доказательств, когда возникают вопросы по сбору доказательств.

Загрязнение

Поскольку в качестве доказательства можно использовать очень маленькие образцы ДНК, необходимо уделять больше внимания вопросам загрязнения при выявлении, сборе и сохранении доказательств ДНК.Доказательства ДНК могут быть загрязнены, когда ДНК из другого источника смешивается с ДНК, имеющей отношение к делу. Это может произойти, когда кто-то чихает или кашляет над уликами, касается его / ее рта, носа или другой части лица и затем касается области, которая может содержать ДНК для тестирования. Поскольку новая технология ДНК, называемая «ПЦР», реплицирует или копирует ДНК в образце доказательства, введение загрязняющих веществ или другой непреднамеренной ДНК в образец доказательства может быть проблематичным. При копировании таких мельчайших образцов ДНК необходимо проявлять особую осторожность, чтобы предотвратить заражение.Если образец ДНК представлен на тестирование, процесс ПЦР будет копировать какая бы ДНК ни присутствовала в образце; он не может отличить ДНК подозреваемого от ДНК другого источника.

Во избежание заражения доказательств которые могут содержать ДНК, всегда принимайте следующие меры предосторожности:

Надеть перчатки. Часто меняйте их.
Используйте одноразовые инструменты или очистите их тщательно до и после обработки каждый образец.
Не прикасайтесь к тем местам, где вы верите ДНК может существовать.
Избегайте разговоров, чихания и кашля над доказательствами.
Не прикасайтесь к лицу, носу и рту при сборе и упаковке вещественных доказательств.
Тщательно просушите доказательства перед упаковка.
Положите улики в новые бумажные пакеты или конверты, а не в полиэтиленовые пакеты. Не надо используйте скобы.

Транспортировка и хранение

При транспортировке и хранении доказательств, которые могут содержать ДНК, важно хранить доказательства сухими и при комнатной температуре. После того, как доказательства были помещены в бумажные пакеты или конверты, они должны быть запечатаны, промаркированы и транспортированы таким образом, чтобы обеспечить надлежащую идентификацию того, где они были обнаружены, и надлежащую цепочку хранения. Никогда не помещайте доказательства, которые могут содержать ДНК, в пластиковые пакеты, потому что пластиковые пакеты будут удерживать опасную влагу.Прямой солнечный свет и более теплые условия также могут быть вредными для ДНК, поэтому избегайте хранения улик в местах, где может быть жарко, например в комнате или в полицейской машине без кондиционера. По вопросам длительного хранения обращайтесь в местную лабораторию.

Отборочные пробы

Как и в случае с отпечатками пальцев, для эффективного использования ДНК может потребоваться сбор и анализ образцов элиминации. Часто необходимо использовать пробы для исключения, чтобы определить, исходят ли доказательства от подозреваемого или от кого-то еще.Офицер должен заранее продумать время суда и возможные меры защиты, находясь на месте преступления. Например, в случае кражи со взломом в жилом доме, когда подозреваемый мог выпить стакан воды на месте преступления, полицейский должен определить подходящих людей, таких как члены семьи, для будущего тестирования элиминационной пробы. Эти образцы могут потребоваться для сравнения со слюной, обнаруженной на стекле, чтобы определить, является ли слюна ценным доказательством. В случаях убийства обязательно соберите ДНК жертвы у судебно-медицинского эксперта при вскрытии, даже если тело сильно разложилось.Это может помочь идентифицировать неизвестную жертву или отличить ДНК жертвы от другой ДНК, обнаруженной на месте преступления.

При расследовании случаев изнасилования может потребоваться собрать и проанализировать ДНК недавних партнеров жертвы, если таковые имеются, чтобы исключить их как потенциальных вкладчиков ДНК, предположительно принадлежащих преступнику. Если это необходимо, важно подойти к жертве с особой осторожностью и дать полное объяснение, почему делается запрос.По возможности следует заручиться помощью квалифицированного защитника интересов потерпевших.

Что должен знать каждый сотрудник правоохранительных органов о доказательствах ДНК
Сентябрь 1999 г.

USGS восстанавливает уволенного сотрудника по биобезопасности

Для немедленной публикации: среда, 14 апреля 2021 г.
Контактное лицо: Джефф Рух (510) 213-7028; Кирстен Стаде kstade @ peer.org

Ученый поднял тревогу о нарушениях биобезопасности лаборатории болезней дикой природы

Вашингтон, округ Колумбия — В результате резкого изменения ситуации Геологическая служба США «отменила» увольнение микробиолога, который заявил, что нарушения биобезопасности в его лабораториях по болезням диких животных представляют опасность для населения, а также ставят под угрозу как результаты исследований, так и субъектов, согласно к юридической документации, опубликованной сегодня отделом общественных служащих за экологическую ответственность (PEER). Отмена агентством произошла чуть более чем через месяц после того, как решение об удалении было окончательно принято, поскольку решение PEER об увольнении направлено на слушание в U.Судья по административным вопросам Совета по защите систем заслуг С.

Эвелин (Эви) Эмменеггер, микробиолог, руководила лабораторией сдерживания высочайшего уровня биобезопасности в Западном исследовательском центре рыболовства Геологической службы США в Сиэтле, проработав там более 28 лет и до недавнего времени добиваясь отличных результатов работы. Она подала жалобу на научную честность в отношении неспособности решить проблемы, которые привели к шестимесячному периоду, когда эта лаборатория сбрасывала загрязненные патогенами сточные воды в заболоченные земли, примыкающие к одному из самых популярных парков Сиэтла вокруг озера Вашингтон, среди прочего, связанных с этим проблем. .

После того, как Геологическая служба США отклонила ее жалобу на научную целостность, но признала, что «наука, произведенная в WFRC, могла быть подвергнута неблагоприятному воздействию», тот же руководитель, упомянутый в этой жалобе, начал процесс, который привел к предложенному удалению в январе 2020 года на основании предполагаемых упущений в научная статья, подготовленная для рецензируемой публикации. Более года Геологическая служба США не предпринимала никаких дальнейших действий, в результате чего г-жа Эмменеггер была приостановлена, пока агентство не приняло окончательное решение об удалении в прошлом месяце в марте 2021 года.

«Эви Эмменеггер — это хрестоматийный пример ответных мер в отношении разоблачителей, и мы очень рады, что она была восстановлена», — заявила главный юрисконсульт PEER Паула Динерштейн, руководитель юридической группы Эмменеггера, отметив, что агентство не представило никаких оснований для отмены. «Мы надеемся, что это ранний сигнал о том, что к осведомителям будут относиться по-другому в администрации Байдена».

PEER также возглавляет коалицию групп охраны природы, защиты животных и общественных интересов, требующих от Геологической службы США соблюдения принятых в научном сообществе стандартов для лабораторий по живым животным, включая независимую проверку соответствия стандартам биобезопасности и ухода за животными.Практически любое другое федеральное агентство, имеющее лаборатории для животных, включая CDC, FDA, EPA, USDA и NIH, проходят такую независимую аккредитацию.

«Несмотря на то, что Эви Эмменеггер была оправдана, сбои в области биобезопасности, для исправления которых она рискнула своей карьерой, все еще могут повториться завтра», — добавил директор Pacific PEER Джефф Рач, чья организация подает в суд на USGS с требованием обнародовать записи, документирующие текущие нарушения в области биобезопасности. «Мы надеемся, что новое руководство в USGS примет независимую аккредитацию своих лабораторий по болезням диких животных, чтобы предотвратить будущие выбросы вирусов и других патогенов.”

###

Прочитать досье USGS восстановление информатора

Посмотреть предлагаемое удаление и ответ

См. Усилия коалиции для аккредитации лабораторий по болезням дикой природы USGS

Просмотреть продолжающиеся нарушения биобезопасности USGS

Evi Parmpi, M.S. | Секция анализа биомедицинских изображений (SBIA)

Evi Parmpi, M.S.

Руководитель проекта B

Секция анализа биомедицинских изображений
Центр обработки и анализа биомедицинских изображений
Отделение радиологии
Медицинская школа Перельмана, Пенсильванский университет

Медицинские исследовательские лаборатории Ричардса, 7-й этаж,
3700 Гамильтон Уолк
Филадельфия, Пенсильвания, 19104
телефон: 215-746-4060
электронная почта: parmpip @ uphs.upenn.edu

Уровень образования

Финансы и бухгалтерский учет (Сертификационная программа), май 2012 г. — Школа Wharton, Пенсильванский университет
M.Sc. в области материаловедения, инженерия, август 2012 г. — Мэрилендский университет, Колледж-Парк, Мэриленд
B.Sc. по химии, ноябрь 1998 г. — Университет Аристотеля в Салониках, Греция

Краткая биография

Я являюсь менеджером проекта с 2013 года, и моя основная роль заключается в подаче предложений через PennERA, IRB, отчетах о проделанной работе NIH и управлении бюджетом после присуждения контрактов.

Публикации

« Интеграция и относительное значение биомаркеров для прогнозирования от MCI к прогрессированию AD: пространственные паттерны атрофии мозга, когнитивные показатели, генотип APOE и биомаркеры CSF », NeuroImage: Clinical 4 (2014) 164–173, 2014.

Христос Давацикос, Сьюзан М. Резник, Сяоин Ву, Параскеви Пармпи, Кристофер М. Кларк, «Индивидуальный диагноз пациентам с БА и ЛТБ с помощью высокоразмерной классификации паттернов МРТ», Neuroimage, 41 (4): 1220-1227. Epub 8 апреля 2008 г., июль 2008 г., PMCID: PMC2528893.

Параскеви Пармпи, П. Кофинас, «Биомиметическое распознавание глюкозы с использованием молекулярно импринтированных полимерных гидрогелей», Biomaterials, 25 (10), 1969-1973, май 2004.

Закрыть

Христос Давацикос, Ариджитт Бортакур, Фен Сюй, Сяоин Ву, Эви Пармпи, Мэтью Сохор, Б.Sc. и Кристофер М. Кларк, «Интеграция результатов МРТ атрофии и агрегации белков с биомаркерами патологии БА в спинномозговой жидкости у лиц с легкими когнитивными нарушениями», Международная конференция по болезни Альцгеймера, Чикаго, Иллинойс, 26–31 июля 2008 г.
Христос Даватзикос, Сьюзан М. Резник, Сяоин Ву, Параскеви Пармпи и Кристофер М. Кларк, «Индивидуальная диагностика болезни Альцгеймера и лобно-височной деменции с помощью высокоразмерной классификации паттернов МРТ», конференция по болезни Альцгеймера, июнь 2007 г.
Параскеви Пармпи и Питер Кофинас, «Молекулярно импринтированные полимерные гидрогели, демонстрирующие изомерное биораспознавание сахара», Труды весеннего собрания MRS, 4/2002, Сан-Франциско, Калифорния.

Закрыть

Хари Б. Сункара, Параскеви Пармпи; DU PONT DE NEMOURS & CO E I

Изобретатель (и): Хари Б. Сункара, Параскеви Пармпи

Заголовок: «Производство политриметиленэфиргликоля путем поликонденсации реагента, содержащего диол, состоящий из е.г. 1,3-пропандиол, в присутствии кислотного катализатора поликонденсации при определенной температуре »

Номер (а) патента: US2005283028-A1; WO2006009857-A1; US7074969-B2; EP1756028-A1; КР2007024607-А; CN1968916-A

Закрыть

EVI-Genoret: European Vision Institute EEIG

Функциональная геномика сетчатки при здоровье и болезнях

Несмотря на значительные клинические и терапевтические достижения в офтальмологии, количество людей, страдающих серьезными нарушениями зрения, растет.Этот парадокс отражает тот факт, что нам еще предстоит найти способы остановить и исправить повреждения, вызванные заболеваниями, поражающими сетчатку, такими как наследственная дегенерация сетчатки (IRD) и возрастная дегенерация желтого пятна (ARMD). Инвалидность особенно важна в обществе, в котором визуальная коммуникация постоянно растет; Около 90% всей информации, которую мы используем для взаимодействия с обществом, проходит через визуальную систему.

Цели и задачи

Целью EVI-GENORET является развитие нашего понимания фундаментальной молекулярной и клеточной биологии сетчатки, ее развития и того, как на нее влияют генетические мутации, факторы окружающей среды и возраст.

Для сбора и интеграции информации о функциях генов, полученных с помощью многочисленных имеющихся у человека, животных и in vitro моделей развития и дегенерации сетчатки.
Для стандартизации и анализа этой информации (базы данных и исследования экспрессии)
Для проверки информации (функциональные анализы и модели)
Для облегчения разработки геномной терапии, которая, очевидно, потенциально принесет пользу пациентам, но также подтвердит пути и цели идентифицированы с использованием описанных выше подходов.

Целью завершения программы было бы помочь интегрировать широкое и глубокое понимание функций и взаимодействий основных сетей клеток и генов, тем самым предлагая функциональные модели.

Ключевые вопросы и проблемы, возникающие при ответе на эти вопросы:

Получение информации о клинических условиях и моделях животных
Проанализируйте информацию: Функциональные геномные инструменты
Подтвердите информацию
Разработайте геномную терапию

Партнеры

Vaz1041

№	Имя участника	Страна
1	Европейский институт зрения	Бельгия
2	Проф.Сахель	Франция
3	Проф. Бхаттачарья	Великобритания
4	Проф. Зреннер	Германия
5	Доктор Банфи	Италия
7	Доктор Рёпманн	Нидерланды
8	Проф.van Veen	Швеция
9	Доктор Вескови	Италия
10	Профессор Ван Хейнинген	Великобритания
11	998 Доктор Уэ	Проф. Гал	Германия
13	Доктор Гримм	Швейцария
14	Др.Шолль / Проф. Хольц	Германия
15	Проф. Хамфрис	Ирландия
16	Г-жа Фассер	Швейцария
17

8 Др. 18 Д-р Туохи Ирландия 19 Проф. Чакраварти Великобритания 20 Др.Поч / Д-р Долле Франция 21 Д-р Тиам Франция 22 Д-р Аюсо Испания 23 23
1 Греция Камакари 24 Inserm-Transfert Франция.

Что такое энтеровирусная инфекция?

Энтеровирусная инфекция — Симптомы, лечение

Вероятные пути заражения

Симптомы энтеровирусной инфекции

Как ставится диагноз?

Лечение энтеровирусной инфекции

Как избежать заражения?

Смотрите также:

Энтеровирусная инфекция у детей

Энтеровирусная инфекция — Профилактика заболеваний и ЗОЖ — Бюджетное учреждение Ханты-Мансийского автономного округа — Югры

Летняя болезнь — энтеровирусная инфекция

ЭНТЕРОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ (ЭВИ)

Энтеровирусная инфекция у детей: симптомы

EVI-1 модулирует лейкемогенный потенциал и чувствительность к апоптозу при остром лимфобластном лейкозе человека

Социальная поддержка и ишемическая болезнь сердца: Epidemiologic Evi…: Психосоматическая медицина

Цель:

Методы:

Результатов:

Выводы:

Потеря эпидермального Evi / Wls приводит к фенотипу, напоминающему псориазиформный дерматит | Журнал экспериментальной медицины

Что должен знать каждый сотрудник правоохранительных органов о доказательствах ДНК

USGS восстанавливает уволенного сотрудника по биобезопасности

Ученый поднял тревогу о нарушениях биобезопасности лаборатории болезней дикой природы

Evi Parmpi, M.S. | Секция анализа биомедицинских изображений (SBIA)

Evi Parmpi, M.S.

Руководитель проекта B

Уровень образования

Краткая биография

Публикации

EVI-Genoret: European Vision Institute EEIG

Функциональная геномика сетчатки при здоровье и болезнях

Цели и задачи

Партнеры

Добавить комментарий Отменить ответ