Противовоспалительная мазь для ран: Ранозаживляющие и антибактериальные средства купить по низкой цене в Москве в интернет аптеке

Содержание

ВоскоПран с мазью Левомеколь — противовоспалительная раневая повязка, 5×7,5 см

Противовоспалительная раневая повязка ВоскоПран, пропитанная мазью Левомеколь, представляет собой полиамидную сетку на текстильной основе, пропитанную  воском, с нанесенной мазью Левомеколь. Эта мазь легко попадает вглубь тканей, не повреждая биологические мембраны, противодействует развитию многих болезнетворных микроорганизмов в ране и стимулирует процессы регенерации клеток. Воск же, при контакте с раной, способствует ее активному заживлению, в том числе, эпителизации и очищению раневой поверхности.

Повязка оказывает на раневую поверхность комплексное действие, способствующее быстрому и полному ее заживлению. В начальной фазе, эта повязка способствует запуску физиологических механизмов очистки, при грануляции – стимулированию ангиогенеза и заполнения коллагеновыми волокнами дефекта, при эпителизации – ускорению клеточного деления

Раневая повязка ВоскоПран с мазью Левомеколь применяется для лечения и заживления инфицированных и гнойных ран, трофических язв, пролежней, опрелостей, термических, химических и радиационных ожогов, гнойно-воспалительных заболеваний кожи и обморожений.

При наложении на тело, эта повязка обеспечивает нормальный газообмен в поврежденных тканях, эффективно отводит от раны образующийся экссудат, препятствует высыханию раны и ее возможному инфицированию.  Повязка не прилипает к раневой поверхности и хорошо моделируется на ней, что позволяет надежно защитить рану от нежелательных внешних воздействий и облегчает процесс перевязки. Повязка имеет хорошие впитывающие свойства.

Использование противовоспалительной повязки ВоскоПран с Левомеколем способствует естественному заживлению раны, без образования рубцов и шрамов.

Показания к применению:

первая медицинская помощь при травмах и ожогах

— терапия гранулирующих ран, включая лечение вяло гранулирующих ран

Противопоказания к применению: индивидуальная непереносимость материалов повязки (особенно продуктов пчеловодства)

Инструкция по применению: повязку ВоскоПран необходимо накладывать так, чтобы она полностью накрывала поврежденную поверхность и выступала за ее края на 0,5 см. Через несколько минут после наложения, необходимо снять второй защитный слой. Если воспалительные очаги отсутствуют, повязку можно оставить до полного заживления.

Состав ВоскоПрана:

— пчелиный воск (до 97%)

— витамин Е

— прополис

Условия хранения: раневая повязка ВоскоПран отпускается в аптеке без рецепта, срок годности повязок – 3 года при соблюдении условий хранения, заявленных производителем.

Ознакомиться с видеообзором повязки: https://youtu.be/YMEaItccDVY

Показать все вариации повязок ВоскоПран

Лекарства Для лечения ран и язв: цены в аптеках Минска

Нет препаратов

Бепантен

Байер Консьюмер Кэр Германия

Рекреол

Гриндекс Латвия

Аекол

Технолог Украина

Вулнузан

Софарма Болгария

Декспантен

Фармтехнология Беларусь

Декспантенол

Фармтехнология Беларусь

Декспантенол е

Фармтехнология Беларусь

Диавитол

Ферейн Беларусь

Календулы мазь

БЗМП Беларусь

Контрактубекс

Мерц Германия

Метилурацил

БЗМП Беларусь

Пантенол

Микрофарм Украина

Пантенол

Шовен Анкерфарм Германия

Пантенол аэро

Фортива мед Беларусь

Пантестин-дарница

Дарница Украина

Репарэф-1

Белмедпрепараты Беларусь

Репарэф-2

Белмедпрепараты Беларусь

Солкосерил

Меда Фарма Германия

Ранозаживляющие средства — цены в аптеках Украины

Агрофирма «Ян» ДП 2

Артериум Корпорация 1

Байер Консьюмер Кер АГ 2

Борщаговский ХФЗ, НПЦ, ПАО 3

Виола, ФФ, ЧАО 8

Витамины, ПАО 2

Вишфа Житомирская фарм. фабрика, ДКП, ООО 3

Гриндекс, АО 4

Дарница, ФФ, ЧАО 4

Др. Герхард Манн, Хем.-фарм. Фабрик ГмбХ для «Бауш Хелс, ООО», Германия/Украина 1

Здоровье, ФК, ООО 10

Лекхим (группа фарм. компаний) 2

Лубныфарм, АО 5

МЕДА Фарма ГмбХ енд Ко. КГ 2

Микрофарм, ООО 2

Мультиспрей, ООО 2

Стада Арцнаймиттель АГ 1

Стома, АО 1

Тева Фармацевтикал Индастриз Лтд 1

Фармак, АО 3

Фармацеутише Фабрик Монтавит ГмбХ 1

Фармацеутише Фабрик Монтавит ГмбХ, Австрия 1

Фитофарм, ЧАО 4

Химфармзавод «Червона зірка», ПАТ 2

ЭЗМП ИБОНХ НАН Украины, ГП, Украина 1

Эйм, НПФК, ООО 2

Юнифарма, ООО (Тернофарм) 4

цинковая мазь отзывы при дерматите

цинковая мазь отзывы при дерматите

Тэги: крем от дерматита Норильске, где купить цинковая мазь отзывы при дерматите, крем при обострении атопического дерматита.

цинковая мазь отзывы при дерматите

увлажняющий крем при атопическом дерматите, крем от дерматита Новошахтинске, лекарство от атопического дерматита у взрослых, мазь от дерматита глаз, где в Нальчике купить лекарство от дерматита

крем от дерматита Прокопьевске

мазь от дерматита глаз Противовоспалительная мазь Паста цинковая — отзывы. Рекомендуют 100%. Цинковая паста и мазь стали моей находкой после рождения ребенка. До этого я знала о существовании цинковой пасты, как то мужу прописывали при дерматите, но у него он был настолько сильный, что цинковая паста, тем. Здравствуйте! Цинковая мазь очень помогла моему ребенку (4 годика) при устранении пятен атопического дерматита. Атопический дерматит появился у ребенка приблизительно 2 года назад, наиболее ярко он проявлялся на запястье. Цинковая мазь от прыщей. Инструкция, применение, состав /+ фото избавления от прыщей за 2 дня. Кожа у меня не идеальная и никогда такой не была. С этим я усиленно борюсь, стремлюсь к совершенству, получается с переменным успехом. Сейчас справляюсь. Оказывает подсушивающее, адсорбирующее, вяжущее и дезинфицирующее действие. Уменьшает экссудацию и мокнутие, что снимает местные явления воспаления и Цинковая мазь (Zinc ointment): 8 отзывов врачей, 32 отзыва пациентов. Цены на цинковая мазь в аптеках Москвы. мазь для наружного применения. Прекрасное средство для лечения дерматитов, разной этиологии (экзематозных высыпаниях, аллергических дерматитах, угревой болезни). Цена очень. Цинковая мазь или паста — инструкция по применению, аналоги, отзывы и формы выпуска (10% и 25% для наружного применения) лекарственного препарата для лечения прыщей, дерматита и опрелостей у взрослых, детей и при беременности. В данной статье можно ознакомиться с инструкцией по применению. Цинковая мазь при дерматите (диатезе, экземе). Диатез или дерматит – это аллергическая реакция, которая часто проявляется. Мнения. Несколько отзывов от принимавших цинковую мазь людей: У второго ребенка на попе образовался пеленочный дерматит. Меняли регулярно подгузник, по итогу перестали. 1.Цинковая паста(не мазь)+стрептоцид ленимент растворимый 5%(это мазь).В пропорции 1:1 смешиваете и мажете утром и вечером 3дня 2.После. атопический дерматит не лечится, вас кто-то обманул. Он или проходит сам с возрастом или нет. Dashuny. В отзывах цинковая мазь при дерматите выступает эффективным и безопасным средством. Особенно часто ее применяют молодые мамы для лечения малышей. Они указывают на то, что мазь подсушивает и снимает воспаление и опрелости. Для этой цели средство применяют для профилактики, в складочки под. Наверное сейчас диагноз дерматит многим знаком. Эта мазь отлично смягчает кожу при дерматитах. Корки становятся мягкими и через. МаринаКогда мне врач сказала купить цинковую мазь, я вздохнула, что опять придется раскошеливаться. А в аптеке испытала шок, что она стоила 17 руб!!! 7 марта 2013 21:46. где в Нальчике купить лекарство от дерматита где в Усть-Илимске купить лекарство от дерматита где в Подольске купить лекарство от дерматита

крем при дерматите отзывы крем от дерматита Прокопьевске где в Саранске купить лекарство от дерматита крем от дерматита Норильске крем при обострении атопического дерматита увлажняющий крем при атопическом дерматите крем от дерматита Новошахтинске лекарство от атопического дерматита у взрослых

Покупала Медовый Спас ребенку. Нам прописали специальную диету и несколько видов таблеток. Я решила таблетки заменить этим кремом. Не пожалела. С детства мой диагноз поливалентная аллергия. Это значит, что насморк, сыпь и чих — мои круглогодичные спутники. Недавно попробовала Медовый Спас и очень удивилась — смогла отказаться от антигистаминных таблеток. Медовый спас от дерматита не имеет аналогов. Это уникальное средство создано на основе растительных и животных экстрактов, которые способствуют быстрому купированию клинических проявлений болезни и восстановлению дермы, не вызывая привыкания и возникновения других побочных эффектов. Дерматит – одно из самых распространенных заболеваний кожи человека, поражает в основном кожные покровы рук и лица, имеет многочисленные виды и неприятные симптомы. Для борьбы с недугом у взрослых людей фармакологический рынок предлагает большое разнообразие мазей от дерматита, которые. Мази, кремы и гели – все о местном лечении дерматита. Дерматитом называют воспаление кожи – органа, расположенного в теле человека наиболее поверхностно и питаемого обширной сетью сосудов. Когда целостность кожного покрова не нарушена и он имеет кислую pH, он хорошо выполняет барьерную функцию и не. Мази при дерматите у взрослых. Обзор гормональных и негормональных средств. Как их применять и сколько они стоят?. 3 Как использовать мазь при дерматите? 4 Негормональные мази от дерматита. 4.1 Эплан. 4.2 Бепантен. Мазь от дерматита. Для лечения дерматита врачи часто назначают препараты в виде мази или крема. Мазь является достаточно действенной при лечении разных типов дерматита. Очень информативная статья. Теперь знаю что и куда мазать. А то иногда лежит в аптечке и не знаю иногда, что эффективнее. Виды дерматита. Одним из основных критериев выбора мази против дерматита становится вид воспалительного поражения кожи. В основе классификации заболеваний лежат причины возникновения, локализация высыпаний и покраснений. Патология развивается на фоне. Неинфекционное заболевание кожи, вызванное внешними и внутренними факторами, называется дерматит. Инструкции, цены, показания и противопоказания на лечебные и профилактические мази и кремы. Что выбрать: мазь или крем? Гормональные препараты: механизм действия, список мазей и кремов, В каких случаях стоит применять. Крема и мази при дерматите: какие выбрать? Комбинированные, негормональные, гормональные средства. Редактор статьи. Выбираем наиболее эффективную мазь от дерматита на коже для взрослых. Дерматит – это кожное заболевание воспалительного характера, возникающее. Кожа стала менее разраженной, зуд теперь не беспокоит, мажем на ночь , чтобы спать спокойно. Ответить. Лариса. Кремы и мази от дерматита для детей и взрослых, гормональные и негормональные. Обновление: Октябрь 2019. На сегодняшний день аллергические реакции у детей и взрослых начинают приобретать, что называется, масштабы эпидемии, еще 100 лет назад население практически не сталкивалось с такими.

цинковая мазь отзывы при дерматите

где в Саранске купить лекарство от дерматита

Первое применение крема гарантирует устранение зуда в течение нескольких часов. Сыпь и шелушение с пораженных участков кожи можно убрать в течение 3-5 суток. Реальные отзывы о средстве Медовый Спас от атопического дерматита подтверждают, что данный недуг с его помощью полностью лечится за 3 недели. Атопический дерматит у грудничка. Лечить или ждать, когда перерастёт? Как ухаживать за кожей? Использовать ли гормональные мази?. Но сейчас я хочу немного рассказать об атопическом дерматите, как это было у моей Дочки. Рассказ длинный, так как лечили мы его на протяжении года. Лечение — еще более строгая диета мне, антигистаминные ребенку, гормональная мазь. Читать далее . Посоветуйте какой нибудь крем или мазь для увлажнения кожи. У сына атопический дерматит и после включения отопления,у него очень сохнет кожа. Мустелла для атопиков уже почему то не. Атопический дерматит — доброго дня, уважаемые форумчаночки. П.С. знаю, что лечение через монитор не назначается. но лечить надо здесь и сейчас. знаю. есть кремы, есть мази. есть эмульсии. Действующее вещество может быть и одно, а консистенция разная!!!! Для увлажнения лучше всего именно эмульсия. Мамы малышей как и у кого вылечили атопический дерматит, мы были на консультации в детском дермат. центре на Июльской у дерматолога. атопический дерматит не лечится, вас кто-то обманул. Он или проходит сам с возрастом или нет. Dashuny. пролечились тело стало чистым только после крема. Реально ли победить. МОЙ МАЛЫШ. Рождение, уход, воспитание. О детях и не только. Форумы Нижнего Новгорода. Дорогие мамы, поделитесь опытом, у кого у деток был или есть атопический дерматит. Как вы справляетесь или, может быть,победили с эту напасть? Темы, что в поиске нашла, прочитала, но там,. Отзывы: мазь безопасна и достаточно часто используется для лечения повреждений на коже у детей (ссадинах, порезах и т.д.). Эплан одинаково хорош, как для инфицированных ран, так и для избавления от дерматита. Сейчас ребенку 2,2 года, дерматит все равно присутствует, но сейчас уже очень не значительно, только на икрах ножек и давно уже не мокнет. у моего ребенка был АД. лечили почти два месяца. лечение обязательно. всем спасибо за отзывы. мы должны были пойти на дневной стационар на вилонова, но сильно. моему ребенку почти 2 года. дерматолог поставила диагноз атопический дерматит, назначила мазь Тридерм. знаю, что это гормональный препарат, поэтому побаиваюсь лечить им ребенка. кому знакома ситуация с заболеванием. Крик души просто. У дочери, ей 2,5 года, атопический дерматит. Ездили в октябре на 2 недели на море, вернулись почти чистые, только. Пожалуйста, подскажите, что я делаю не так? Прогресс минимален. Как вы лечите атопический дерматит? Может посоветуете нормального врача. Адрес сообщения. цинковая мазь отзывы при дерматите. где в Усть-Илимске купить лекарство от дерматита.

Воскопран — ООО «МЕДИНГОФ»

Вид Показания Форма выпуска

ВоскоПран® без мази

Cетчатая повязка с пропиткой пчелиным воском

Пчелиный воск обладает бактерицидным, противовоспалительным и ранозаживляющим свойствами, хорошо смягчает кожу, предотвращает ее обезвоживание, образуя полупроницаемую пленку.

Раны без признаков инфекции, гранулирующие раны.

7,5x10cм №30

Воскопран® с мазью Левомеколь

Противовоспалительная мазевая повязка

Левомеколь® – комбинированный препарат, в составе которого присутствуют антибиотик хлорамфеникол и иммуностимулирующее средство метилурацил, что обеспечивает противовоспалительное и антимикробное действие повязки. Благодаря полиэтиленгликолевой основе мази, ВоскоПран обладает длительным сорбционным действием. Повязка хорошо моделируется на любых участках тела.

Гнойные раны, трофические язвы, пролежни, диабетическая стопа, гнойно-воспалительные кожные заболевания, фурункулы, ожоги I-III (В) степени, ссадины, рваные раны, дерматиты.

5х7,5см №5
7,5×10см №30
10×10см №10
10×10см №30
10×25см №10
10×200см №1

ВоскоПран® с мазью на основе гидроксиметилхиноксалиндиоксида (Диоксидина® 5% *)

Антимикробная мазевая повязка

Гидроксиметилхиноксалиндиоксид (Диоксидин ®) является антибактериальным препаратом широкого спектра действия: обладает высокой антимикробной активностью не только в отношении аэробных грамположительных и грамотрицательных, но и анаэробных микроорганизмов. Полиэтиленгликолевая основа мази обеспечивает длительный сорбционный эффект. Повязка хорошо моделируется на любых участках тела.

 

*Товарный знак ДИОКСИДИН® защищен свидетельствами №68427, №458132, правообладателем которых является ОАО «Валента Фарм»

Раны с признаками инфекции, гнойные раны, трофические язвы, пролежни, диабетическая стопа, раны от длительного сдавливания «краш-синдром», гангрены, гнойно-воспалительные кожные заболевания, фурункулы, флегмоны, ожоги I-III (В) степени, рваные раны, укусы животных и насекомых, огнестрельные раны, дерматиты.

5х7,5cм №5
10×10см №10
10х10см №30

ВоскоПран® с мазью метилурациловой (10%)

Мазевая повязка, стимулирующая заживление

Метилурациловая мазь стимулирует процессы клеточной регенерации, ускоряет заживление раны, оказывает противовоспалительное действие, повышает местный иммунитет. Повязка хорошо моделируется на любых участках тела.

Вялогранулирующие раны, раны на стадии заживления.

5х7,5cм №5
10×10см №10
10х10см №30
10×25см №10
10×100см №1

ВоскоПран® с мазью Повидон-Йод

Бактерицидная мазевая повязка

Повидон-Йод обладает широким спектром противомикробного действия, эффективен в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий, грибков, вирусов и некоторых простейших. Благодаря тому, что йод находится в связанном с повидоном состоянии, обеспечивается его постепенное высвобождение и глубокое проникновение в ткани. Полиэтиленгликолевая основа мази обеспечивает длительное сорбционное действие. Повязка хорошо моделируется на любых участках тела.

Острые и хронические раны с признаками инфекции, ожоги II-III (B) степени, огнестрельные и посттравматические раны, укусы животных и насекомых, бактериальные и грибковые заболевания кожи, дерматиты, обморожения, глубокие и обширные ссадины. Повязка ПЕРВОЙ ПОМОЩИ – для укладок Экстренной Медицины, аптечек для дома, дачи, путешест

Гепариновая инструкция по применению, цена в аптеках Украины, аналоги, состав, показания | Hepariniointment мазь компании «ООО «ДКП «Фармацевтическая фабрика»»

фармакодинамика. Гепариновая мазь — антикоагулянт прямого действия, оказывает противовоспалительное и местное обезболивающее действие, предотвращает образование тромбов, способствует рассасыванию образовавшихся тромбов.

Фармакокинетика. Не определяли.

профилактика и лечение тромбофлебита поверхностных вен; постинъекционный и постинфузионный флебит, трофические язвы голени, слоновость, поверхностный перифлебит, лимфангиит; наружный геморрой, воспаление геморроидальных узлов после родов; поверхностный мастит; локализованные инфильтраты и отеки, травмы и ушибы без нарушения целостности кожных покровов (в том числе мышечной ткани, сухожилий, суставов).

препарат применяют у взрослых местно.

При тромбофлебите поверхностных вен конечностей мазь нанести на зону поражения тонким слоем (из расчета 0,5–1 г (2–4 см мази) на участок диаметром 3–5 см) и осторожно втирать в кожу 2–3 раза в сутки в течение 3–7 сут до исчезновения признаков воспаления. Возможность проведения длительного курса лечения определяет врач.

При тромбозе геморроидальных вен мазь следует нанести на салфетку из ткани, которую непосредственно накладывают на геморроидальные узлы, и зафиксировать повязкой (возможно применение тампона с нанесенной на него мазью, который следует ввести в задний проход) 2–3 раза в сутки до исчезновения признаков воспаления, в среднем 3–14 сут. Возможность длительного применения определяет врач индивидуально.

гиперчувствительность к любому из компонентов препарата. Язвенно-некротические процессы, травматическое нарушение целостности кожных покровов, открытые инфицированные раны, геморрагический диатез, пурпура, тромбоцитопения, гемофилия, склонность к кровотечениям.

покраснение, кожная сыпь, крапивница, ангионевротический отек, геморрагии, иногда возможно возникновение небольших пустул, пузырьков или пузырей. Возможно местное раздражающее действие, проявляющееся в виде жжения, зуда или незначительного отека кожи. Наличие в составе препарата метилпарагидроксибензоата (Е218) может вызвать аллергические реакции (возможно, замедленного типа), при нанесении на обширные участки кожи возможны системные аллергические реакции, гиперемия.

при длительном применении мази на обширных участках и одновременном применении пероральных лекарственных средств, влияющих на свертывающую систему крови и/или кроветворение, следует контролировать время свертывания и протромбиновое время. В случае необходимости длительного курса лечения и нанесения на обширные участки поражения у женщин в возрасте ≥65 лет рекомендуется проведение аналогичного контроля.

Не следует наносить на открытые раны при наличии гнойных процессов. Применение мази не рекомендуется при глубоком венозном тромбозе.

Препарат не следует назначать при кровотечениях, наносить на слизистые оболочки, инфицированные участки кожи, внутрь глаза и на участки вокруг глаз, на язвы и волдыри. В случае нарушения свертывания крови не рекомендуется наносить на обширные участки кожи.

При тромбоцитопении и повышенной склонности к кровотечениям препарат применять под контролем врача.

Применение в период беременности или кормления грудью. Не применять в период беременности и кормления грудью.

Дети. Не использовать.

Способность влиять на скорость реакции при управлении транспортными средствами или работе с другими механизмами. Не влияет.

действие мази усиливают антикоагулянты, ацетилсалициловая кислота и другие НПВП. Эффективность мази снижают препараты наперстянки, тетрациклины, никотин, антигистаминные препараты. Применение гепарина может обусловливать удлинение протромбинового времени у больных, принимающих пероральные антикоагулянты. Не рекомендован прием препарата сочетанно с лекарственными средствами для местного применения, например с лекарственными средствами, содержащими тетрациклин, гидрокортизон, салициловую кислоту, с антикоагулянтами.

вследствие низкого уровня всасывания гепариновой мази ее передозировка невозможна.

при температуре 8–20 °С в недоступном для детей месте.

Гепариновая мазь в качестве действующего вещества содержит антикоагулянт прямого действия гепарин. Данное лекарственное средство применяется топически для терапии и профилактики венозного тромбоза различного генеза, включая постинъекционный флебит, перифлебит и геморрой.

Гепарин при местном применении оказывает антикоагулянтное, противовоспалительное и обезболивающее действие. Исходя из этих свойств, Гепариновая мазь может применяться также в лечении мастита, травм и ушибов, слоновости, трофических язв и лимфангиита.

Гепариновая мазь: нестареющая классика

Гепарин относится к группе полисахаридов гликозаминогликанов, его химическая структура характеризуется чередованием дисахаридов гексуроновой кислоты и гексозамина. При этом гепарин является высокосульфатированной молекулой, и благодаря этому свойству обладает очень высоким отрицательным зарядом, который позволяет ему связываться с широким спектром положительно заряженных молекул. Средняя молекулярная масса находится в пределах 14–18 кДа (Page С., 2013).

2016 г. ― это год 100-летнего юбилея с момента открытия гепарина студентом Джеем Маклином (Jay McLean), работавшим под руководством Уильяма Хауэлла (William Howell). Свое название гепарин получил в 1918 г. (Rák K., 1998). Оно было дано этому веществу двумя учеными ― Эметтом Холтом (Emmett Holt) и Уильямом Хауэллом (William Howell) (Ong C.S. et al., 2019). Уже в 40-х годах ХХ в. началось широкое клиническое применение гепарина. Именно внедрение гепарина в клиническую практику позволило совершить прорыв в кардио-пульмональной хирургии, лечении ТЭЛА (тромбоэмболии легочных артерий), ведении больных с ХПН (хронической почечной недостаточностью) и тяжелыми отравлениями, а именно сделало возможным проведение гемодиализа (Messmore H.L. еt al., 2004).

Гепарин применяется в качестве антикоагулянта более 80 лет. Несмотря на его широкое применение, точный механизм антикоагулянтной активности гепарина не был выяснен до 1960-х годов, а специфическая полисахаридная последовательность в молекуле гепарина, ответственная за антикоагулянтный эффект, была определена только в 1980-е годы (Page С., 2013). В дальнейшем было выявлено, что только часть молекулы гепарина обладает высоким сродством к антитромбину и обеспечивает антикоагулянтное действие, и синтезированы низкомолекулярные производные гепарина (Messmore H.L. еt al., 2004).

Гепариновая мазь: чем обусловлены противовоспалительные свойства

В настоящее время имеются весомые доказательства того, что гепарин также проявляет противовоспалительную активность, подтвержденную в исследованиях как in vitro, так и in vivo. Важно, что во многих случаях противовоспалительное действие гепарина не зависит от его антикоагулянтной активности ― ведутся поиски лекарственных средств на основе гепарина, обладающих его противовоспалительными свойствами, но не проявляющих антикоагулянтного эффекта. Гепарин проявляет противовоспалительную активность посредством различных механизмов, включая нейтрализацию катионных медиаторов, ингибирование молекул адгезии и гепараназы, угнетение миграции лейкоцитов в периферические ткани (Page С., 2013).

Так, тучные клетки содержат множество гранул с медиаторами воспаления. Также было установлено, что в тучных клетках содержатся гранулы с гепарином. В дальнейшем было зафиксировано, что многие белки, участвующие в каскаде воспалительных реакций, имеют в своей структуре гепаринсвязывающие домены, и гепарин способен ингибировать действие этих белков. Таким образом, эндогенный гепарин может играть важную роль в контроле локального воспалительного ответа, а не только в системе свертывания. Имеются убедительные доказательства возможности клинического применения этих свойств гепарина. Однако применение самого гепарина в качестве противовоспалительного лекарственного средства в настоящее время ограничено антикоагулянтной активностью молекулы. В то же время в исследованиях продемонстрировано, что при применении гепарина в виде ингаляций даже в высоких дозах антикоагулянтного действия не отмечено (Page С., 2013).

Гепарин может ингибировать активацию ряда воспалительных клеток. Этот эффект частично объясняется связыванием и нейтрализацией медиаторов воспаления и ферментов, высвобождаемых во время воспалительного ответа. Также было установлено, что некоторые ферменты и цитотоксические медиаторы, высвобождаемые из этих клеток, участвующие в каскаде реакций воспалительного ответа и последующем повреждении и ремоделировании ткани, также ингибируются гепарином, включая эластазу, катепсин G, эозинофилы пероксидазы, эозинофильный катионный белок, некоторые хемо- и цитокины.

Факторы роста, в том числе основной фактор роста фибробластов и трансформирующий фактор роста бета-1, участвуют в регуляции пролиферации гладких мышц (особенность ремоделирования тканей наблюдается при таких заболеваниях, как БА, атеросклероз и коронарный стеноз) и связываются гепарином (тем самым угнетается пролиферация гладкомышечных клеток). Гепарин ингибирует пролиферацию клеток гладких мышц сосудов, и этот эффект не зависит от его антикоагулянтного действия.

Также известно, что гепарин ингибирует дегрануляцию тучных клеток человека в ответ на различные раздражители и, следовательно, ингибирует высвобождение гистамина. Цитотоксическое действие TNF-α-активированных эозинофилов на эндотелиальные клетки также заметно ингибируется гепарином, как и гомотипическая агрегация и хемотаксис эозинофилов в ответ на фактор комплемента C5a, еще один медиатор воспаления. Кроме того, нефракционированный гепарин ингибирует индуцированную липополисахаридами активацию эндотелиальных клеток (Page С., 2013).

Было установлено, что гепарин связывается с поверхностью нейтрофилов и может ингибировать их дегрануляцию, агрегацию, продукцию супероксидных анионов, активность лизосомальных ферментов и способность нейтрофилов активировать тромбоциты.

Важным компонентом воспалительного ответа являются адгезия (прилипание) воспалительных клеток к эндотелию сосудов и их последующий диапедез (перемещение) в ткани. Таким образом, гепарин ингибирует все стадии миграции провоспалительных клеток в ткани и лейкоцитарно-эндотелиальную адгезию как in vitro, так и in vivo.

В исследованиях был продемонстрирован потенциал гепарина в лечении муковисцидоза, БА и ХОБЛ. У пациентов с аллергическим ринитом после воздействия аллергена местное применение гепарина снижает уровень эозинофилов на слизистой оболочке носа (Page С., 2013).

В настоящее время изучается возможность применения гепарина в терапии онкологических заболеваний. Анализ исследований применения гепарина у больных раком указывает на улучшение показателя выживаемости. Считается, что ингибирование активности гепараназы, P- и L-селектина и тканевого фактора роста гепарином могут способствовать угнетению ангиогенеза и метастазирования (Page С., 2013).

Гепариновая мазь: применение при поверхностном венозном тромбозе

Поверхностный венозный тромбоз (ПВТ) является распространенным заболеванием и фактором риска тромбоэмболических осложнений. В этом отношении важно своевременное обращение пациента за медицинской помощью, установление диагноза и подбор лечения с целью снижения значительных осложнений (de Almeida M.J. еt al., 2019). У 6–40% пациентов ПВТ может сочетаться с тромбозом глубоких вен. Среди его осложнений следует отметить тромбоэмболию легочной артерии (ТЭЛА), которая отмечается в 22–46% случаев ПВТ. При этом в 20–33% случаев ТЭЛА мелких ветвей может иметь бессимптомное течение или маскироваться другими заболеваниями.

ПВТ характеризуется образованием тромбов в поверхностных венах с частичным вовлечением или окклюзией просвета и воспалительной реакцией по ходу вены. Визуально определяется покрасневший, теплый на ощупь тяж по ходу вены. Пациенты жалуются на боль, также наблюдается отек окружающих зону тромбофлебита тканей. Клинический диагноз, как правило, прост, но необходимы дополнительные тесты и обследования для подтверждения распространения тромбоза и возможных тромбоэмболических осложнений (de Almeida M.J. еt al., 2019).

Факторами риска развития ПВТ являются варикозная болезнь, иммобилизация, травма, послеоперационные состояния, период беременности, послеродовой период, злокачественные новообразования, некоторые аутоиммунные заболевания, применение оральных контрацептивов или заместительная гормональная терапия, пожилой возраст, ожирение и ранее перенесенный тромбофлебит.

По данным исследований, местное лечение прямыми антикоагулянтами (гепарином) и НПВП является эффективным в уменьшении выраженности симптомов ПВТ и предупреждении дальнейшего распространения тромбоза (Nisio M.D., 2018).

Местное применение препаратов гепарина обеспечивает не только уменьшение выраженности боли и отека, но и местной воспалительной реакции (de Almeida M.J. еt al., 2019).

Место

Гепариновой мази в терапии геморроя

Другим распространенным заболеванием, при котором эффективна Гепариновая мазь, является геморрой. Геморрой считается одним из самых частых неинфекционных заболеваний среди населения. Его истинная распространенность неясна ввиду того, что значительная часть больных не обращаются за медицинской помощью и прибегают к самолечению. В 1990 г., по данным эпидемиологического исследования в США, распространенность геморроя составила 4,4%. В то же время в результате исследования, проведенного в Южной Корее, выявили, что распространенность геморроя — 14,4%. А согласно проведенному в Австрии исследованию распространенность геморроя в этой стране составила 38,8%. Считается, что 25% британцев и до 75% граждан США отмечали симптомы геморроя по крайней мере 1 раз в жизни (Lohsiriwat V., 2015).

Клинически геморрой характеризуется безболезненным ректальным кровотечением при дефекации с или без выпадения слизистой оболочки прямой кишки. Факторами риска геморроя являются период беременности, пожилой возраст, запоры и многие другие, включая сидячий образ жизни, регулярное поднятие тяжестей (из-за повышения внутрибрюшного давления) и наследственность. Как правило, геморрой можно разделить на два типа: внутренний и наружный (Lohsiriwat V., 2015). В результате клинических исследований было установлено, что большая часть симптомов геморроя поддается консервативному лечению (Hall J.F., 2013). Наиболее частым осложнением наружного геморроя является тромбоз геморроидальных узлов. При этом пациенты отмечают увеличение геморроидальных узлов, их болезненность, зуд, дискомфорт в анальной области. Местная терапия гепарином уже многие годы считается неотъемлемым компонентом консервативного лечения геморроя (Ogawa P., de Figueiredo J.C., 1966). Именно применение Гепариновой мази является патогенетически обусловленым в случае тромбоза геморроидальных узлов.

Другие потенциальные возможности применения гепарина, входящего в состав

Гепариновой мази

В последние годы установлено, что гепарин может способствовать восстановлению тканей и ингибировать воспаление у пациентов с ожогами.

В одном из исследований приняли участие 100 пациентов в возрасте младше 15 лет с ожогами 2-й степени и площадью ожога 5–45%. Они были разделены на 2 группы по 50 человек: пациенты 1-й из группы получали дополнительно местную терапию гепарином, 2-я группа являлась контрольной и получала стандартное лечение. В ходе исследования было установлено, что пациентам, которым дополнительно назначили наружно гепарин, требовались более низкие дозы обезболивающих средств, а также применение гепарина позволило сократить курс антибиотикотерапии и уменьшить количество перевязок. В группе гепарина только 4 пациентам (8%) потребовалось проведение пересадки кожи, а в группе контроля ― 10 (20%). Летальный исход в группе контроля составил 5%, тогда как в группе гепарина ― 0. Также применение гепарина позволило сократить длительность пребывания пациентов в стационаре. Таким образом, местное применение гепарина в течение 5–7 дней у пациентов с ожогами значительно ускорило заживление и улучшило состояние больных. Кроме того, местная гепаринотерапия позволила уменьшить экономические затраты (за счет сокращения длительности лечения в стационаре и уменьшения потребности больных в операциях по пересадке кожи) (Venkatachalapathy T.S., 2014).

Гепариновая мазь: заключение

Гепариновая мазь широко применяется врачами различных специальностей: хирургами, проктологами, травматологами и врачами общей практики. Применяется она и в спортивной медицине при различных травмах. Это эффективное и доступное лекарственное средство. Имеется многолетний опыт применения гепарина, входящего в состав мази для профилактики (Gjöres J.E., 1965) и лечения тромбофлебита (Deak Z., 1965; Balogh P., 1965). В настоящее время изучается возможность топического применения препаратов гепарина в лечении ожогов.

Обезболивание или чрезмерное образование рубцов?

Воспалительный процесс оказывает прямое влияние на нормальное и ненормальное заживление ран. Образование гипертрофических рубцов — это аберрантная форма заживления ран и свидетельствует об усилении функции фибробластов и избыточном накоплении внеклеточного матрикса во время заживления ран. Два цитокина — трансформирующий фактор роста (TGF-) и простагландин E2 (PGE2) — являются липидными медиаторами воспаления, связанного с заживлением ран. Избыточная продукция TGF- и подавление PGE2 обнаруживаются при чрезмерном рубцевании ран по сравнению с нормальным заживлением ран.Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) или их селективные ингибиторы циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2) часто используются в качестве обезболивающих. Однако как НПВС, так и ингибиторы ЦОГ-2 подавляют выработку PGE2, что может усугубить чрезмерное образование рубцов, особенно при использовании на более поздней стадии пролиферации. Следовательно, необходим баланс между цитокинами и лекарствами в патогенезе заживления ран. Этот отчет представляет собой обзор литературы, относящейся к заживлению ран, и сосредоточен на TGF- и PGE2.

1. Введение

Простагландин (PG) E2 (PGE2), синтезируемый из арахидоновой кислоты циклооксигеназами (COX) и синтазами (PGES), действует как медиатор воспаления и модулятор фибробластов [1]. Высвобождение PGE2 из кожной ткани после токсических раздражителей вызывает местный отек и гипералгезию [2]. PGE2 является липидным медиатором воспаления при таких заболеваниях, как ревматоидный артрит и остеоартрит, а также участвует в воспалении кожи. Обычно сообщается, что нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) или их селективные ингибиторы циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2) ингибируют выработку PGE2 и действуют как эффективные обезболивающие, поскольку они способны успешно уменьшать воспаление [3, 4].Кроме того, НПВП относительно недороги, легко доступны и знакомы; их часто назначают и используют в послеоперационном периоде для купирования боли [5]. Однако влияние НПВП или ингибиторов ЦОГ-2 на заживление ран является весьма спорным, поскольку теоретически противовоспалительное средство, такое как один из ингибиторов ЦОГ-2, может оказывать негативное влияние на заживление ран.

Воспалительный процесс оказывает прямое влияние на нормальное и ненормальное заживление ран. Клинический опыт показывает, что образование гипертрофических рубцов — это аберрантная форма заживления ран [6], включающая преувеличенную функцию фибробластов и избыточное накопление внеклеточного матрикса (ВКМ) во время заживления ран [7].

Хотя лучшее понимание механизма заживления ран можно предположить из увеличенного числа экспериментов in vitro или in vivo , будет разработан лучший алгоритм лечения для поддержания регулируемой и управляемой воспалительной реакции, что приведет к эффективное и нормальное заживление ран [8–10], большинство данных in vitro , полученных из фибробластов, культивируемых из келоидных поражений, представляют только терминальную стадию этого заболевания, а модели in vivo на животных могут не отражать реальное состояние у людей.

2. Процесс заживления ран и воспаления кожи

По сравнению с дрозофилой аналогичный фактор транскрипции регулирует формирование и поддержание эпидермального барьера у мышей. Эти данные позволяют предположить, что механизмы заживления ран сохраняются силами эволюции в течение 700 миллионов лет [11]. Секрет заживления ран может быть скрыт в различиях между кожей плода и взрослого человека и в том, почему раны плода заживают без рубца in utero [12].

Как показано на Рисунке 1, на коже плода образуется очень мало рубцов, что приводит к почти идеальному восстановлению кожи плода после травмы. Следовательно, понимание клеточных и молекулярных процессов во время заживления ран имеет решающее значение для выяснения патогенеза гипертрофических рубцов и разработки более эффективных методов лечения (рис. 2). Известный процесс нормального заживления ран включает в себя 3 перекрывающиеся фазы: воспаление, разрастание и ремоделирование. Начальная воспалительная фаза начинается во время ранения, когда активация каскада коагуляции вызывает высвобождение цитокинов, которые стимулируют хемотаксис нейтрофилов и макрофагов в рану, чтобы начать раннюю обработку раны.Это будет продолжаться в течение 2–3 дней, а затем фаза пролиферации, обозначенная обилием фибробластов и накоплением внеклеточного матрикса, исчезает и длится 3–6 недель. Последующее окончательное ремоделирование или зрелая фаза может занять 6–9 месяцев. Обильный ЕСМ затем разрушается, и незрелый коллаген III типа ранней раны модифицируется в зрелый коллаген I типа [13].



3. Патогенез чрезмерного рубцевания

Несмотря на то, что гипертрофические рубцы или келоидные образования рассматриваются как разные патогистологические данные (рисунки 3 и 4), они все же имеют некоторые общие характеристики, в том числе повышенное функция фибробластов, чрезмерное накопление ECM и обычная начальная воспалительная фаза.Предполагается, что келоидные фибробласты (KF) фенотипически отличаются от фибробластов гипертрофических рубцов, потому что пациенты с келоидным диатезом не всегда образуют аномальные рубцы [13]. Либо неоднозначное начало воспалительного сигнала воспалительной фазы, распространяющееся на пролиферативный процесс, либо нарушение соответствующей деградации и апоптоза может способствовать патогенезу чрезмерного рубцевания.



Считается, что многие местные факторы увеличивают вероятность чрезмерного рубцевания [14, 15].Гипертрофический рубец часто возникает из-за раны, которая была закрыта с большим натяжением, с грубым обращением, недостаточным гемостазом и обработкой раны, а также с материалом с сильной реакцией на инородное тело и без достаточного питания. Эти факторы, включая трансформирующий фактор роста- (TGF-) и PG, будут впоследствии рассмотрены в моделях in vitro и in vivo .

4. Исследования in vitro

Гипертрофические рубцы и келоиды представляют собой нерегулируемую реакцию на кожные повреждения, что приводит к чрезмерному отложению коллагена.Множество экспериментов [16-25] с участием кератиноцитов, фибробластов, миофибробластов и нейтрофилов были разработаны для тестирования предполагаемых важных факторов, таких как TGF-1 [16], матриксные металлопротеиназы (MMP) [17] и оксид азота (NO). [18], и определить, включен ли гипертрофический процесс или как аберрантный апоптоз выключен в процессе заживления. Почти все эти исследования были сосредоточены на аберрантных фазах пролиферации и ремоделирования. Основная причина не ясна, но возможная причина заключается в том, что аберрантная экспрессия медиаторов заживления раны проявляется во время фаз пролиферации и ремоделирования (см. Ниже).Однако аберрантный процесс заживления ран может произойти на гораздо более ранней стадии. Например, дисрегулируемые взаимодействия цитокинов эпидермального происхождения (интерлюкин 1: IL-1 и фактор некроза опухоли: TNF-) и дермальных воспалительных / ангиогенных медиаторов в начале воспалительной фазы способствовали чрезмерному рубцеванию ран [26].

TGF-семейство является ключевым фактором фиброза, поскольку оно участвует во многих фиброзных заболеваниях [20, 27]. Повышенная регуляция или сверхэкспрессия TGF- в келоидных кератиноцитах [19] и KF [18, 20, 21] приводит к чрезмерному фиброзу и увеличению рубцевания ран.Несколько протоколов лечения, включая импульсный лазер на красителе с импульсной лампой (PDL) [28], экзогенный PGE1 [29], PGE2 [1], антагонист NO [18] и антагонист TGF [30], могут улучшить келоидный фиброз, который является опосредовано ингибированием продукции TGF- в ране.

По сравнению с общепринятой ролью TGF- в заживлении ран, роль PGE2 часто упускается из виду, хотя данные показывают, что повышенный уровень PGE2 является индикатором прогрессирования воспаления в различных типах клеток и различных воспалительных заболеваний [31 –36].Кроме того, более низкий уровень PG в ткани кожи плода может указывать на менее тяжелую воспалительную реакцию, которая приводит к небольшому образованию рубцов после заживления ран [12, 37].

PGE2, как было показано, снижает пролиферацию фибробластов, ингибирует синтез коллагена и увеличивает экспрессию MMP. KF продуцировал меньше PGE2, чем контрольные фибробласты [35]. Более того, антифибротический эффект PGE2 во время образования келоидов был запрещен и мог быть восстановлен добавлением экзогенного PGE2 [1].Повышенный синтез коллагена в KF может быть связан со снижением продукции PGE2 и цАМФ.

Механическое сдавливание раны может вызвать чрезмерное рубцевание и повлиять на высвобождение PGE2 и экспрессию коллагеназ. Базальные уровни PGE2 в гипертрофических ожоговых рубцах были значительно ниже, чем в нормотрофических ожоговых рубцах [18]. Наилучшая профилактика и контроль гипертрофии, особенно в ожоговых рубцах, достигается с помощью эластокомпрессии, а компрессия вызывает значительное увеличение высвобождения PGE2 как в стадии ремиссии, так и в активной стадии, что предполагает роль PGE2 в процессе ремиссии, вызванной гипертрофией. прессотерапией [38].

Другой возможной проблемой является дефект апоптоза и роста при чрезмерном рубцевании, который препятствует исчезновению как фибробластов, так и миофибробластов в конце заживления [23]. PGs, промотор пролиферации стволовых клеток или клеток-предшественников и регенерации тканей, положительно воздействующий на каскады апоптоза, могут предотвратить чрезмерное рубцевание [39]. Таблица 1 суммирует различные выражения TGF- и PGE2 в нормальном и аберрантном процессе заживления ран.


Нормальный процесс заживления Чрезмерное рубцевание

Фазы 1 * 2 3 1 2 3
TGF-beta ↑↑ ↑↑
PGE2 ↑↓
Чистый эффект дебридован ограничен зрелый неизвестно чрезмерно задержано

* 1 для воспалительной фазы, 2 для фазы пролиферации и 3 для фазы ремоделирования.

Кроме того, PGE2, PGE1 и его аналог могут увеличивать активность коллагеназы, которая ниже в супернатантах из культуры гипертрофированных рубцовых фибробластов [40]. PGE1 может играть роль в предотвращении гипертрофических рубцов за счет увеличения активности коллагеназы I типа [29]. Однако до сих пор существуют некоторые разногласия относительно влияния PG на процесс заживления ран. Сообщалось, что траниласт, противоаллергический препарат, ингибирующий высвобождение таких веществ, как гистамин и простагландины, из тучных клеток, подавляет синтез коллагена фибробластами, происходящими из келоидных тканей [22].Также считается, что он подавляет синтез коллагена фибробластами посредством ингибирования продукции TGF- и PGE2 и пролиферации клеток фибробластами посредством ингибирования продукции IL-1 воспалительными клетками, такими как макрофаги [41]. Более низкие уровни PG после траниласта, по-видимому, не приводили к чрезмерному рубцеванию в этой ситуации.

5. Исследования in vivo

Для тестирования анти- воспалительный ответ TGF- и других медиаторов воспаления.Однако исследование на животных конкретной фазы процесса заживления ран практически невозможно.

Повышенный уровень эндогенного TGF- у животных препятствует заживлению ран и вызывает чрезмерное рубцевание. Повышенный уровень TGF- и замедленное заживление ран у трансгенных мышей со сверхэкспрессией TGF-1 были связаны с глубоким воспалением на всех этапах заживления ран и не приносили пользы при заживлении ран [45]. Инъекция антитела к TGF- крысе продемонстрировала, что ингибирование TGF- снижает образование рубцов при заживлении ран у взрослых [37].Местное применение синтетического антагониста TGF ускоряет реэпителизацию ожоговых ран свиней. Он также уменьшал сокращение ран и рубцевание при стандартных ожогах кожи свиней, иссечениях кожи свиней и ран после удаления кожи кроликов [47, 49].

Первоначальный воспалительный ответ с повышенным содержанием PGE2 может быть эффективно блокирован лекарствами или даже диетическим жиром на животных моделях. Вызванный токсином воспалительный ответ, характеризующийся ранней экссудативной фазой, сопровождается продукцией PGE2, а поздняя пролиферативная фаза, связанная с индукцией COX-2, эффективно подавляется ингибиторами COX-2 у крыс [43].Изменение потребления жиров с пищей может подавлять лихорадку за счет снижения высвобождения PG, вероятно, в головном мозге, но не влияет на местные или афферентные сигналы, участвующие в возникновении лихорадки [50].

Механический стресс в пролиферативной фазе был необходим для воспроизведения гипертрофического рубца на мышиной модели гипертрофического рубца. Считается, что механическая нагрузка на ранней стадии пролиферативной фазы заживления ран вызывает гипертрофические рубцы за счет ингибирования клеточного апоптоза [46].Однако животное, у которого не образуется келоидный рост, как у человека, не может быть идеальной моделью для исследования.

6. Различные методы лечения

Как сообщалось в упомянутых выше исследованиях, было предложено много методов лечения чрезмерного рубцевания, но полной и удовлетворительной ремиссии достичь не удалось. Методы лечения включают хирургическое иссечение, облучение, инъекции кортикостероидов, криотерапию, лазерную вапоризацию, местный 5-фторурацил [51], инъекцию блеомицина [52], бумажную ленту для снятия напряжения рубца [53], терапию одеждой под давлением [54], силиконовый гель. защитное покрытие [55] и кратковременное использование озонированного масла [56, 57].Поскольку нам до сих пор не хватает глубокого понимания основного механизма, ответственного за чрезмерное воспаление и рубцевание, ни один метод не показал абсолютного, полного излечения. В настоящее время мультимодальный подход к контролю рубцевания показал значительные преимущества [56–58]. Наиболее эффективный из протоколов уменьшения рубцов, вероятно, предполагает политерапевтическую стратегию ведения. Дальнейшее исследование роли воспаления в рубцевании имеет первостепенное значение для разработки улучшенных средств, уменьшающих рубцы.Существует потребность в крупных контролируемых испытаниях с использованием политерапевтической стратегии, сочетающей существующие и новые агенты, чтобы обеспечить стандартизированную доказательную оценку эффективности [9].

Растущее число новых терапевтических агентов, таких как антагонисты TGF [47, 49], экзогенный PGE2 [1] и терапия стволовыми клетками [59], в настоящее время находится в стадии разработки, чему способствуют новые предварительные результаты как на животных моделях, так и на людях. исследования. Алгоритмы лечения гипертрофических рубцов / келоидов, доступные в настоящее время, вероятно, будут значительно улучшены в будущем благодаря высококачественным клиническим испытаниям.

7. Модели исследования

Подробная количественная модель процесса заживления ран, включая реэпителизацию, эпидермальную дифференциацию, миграцию клеток, пролиферацию, воспалительную реакцию, дермальное закрытие, распределение матрикса и ремоделирование кожи, может быть использована в качестве диагностическая платформа для стандартизации оценки прогрессирования заживления ран, а также инструмент для скрининга потенциальных методов лечения [60].

С развитием биомолекулярных методов, инструменты высокопроизводительного исследования делают возможным исследование воспалительного каскада в геномном или протеомном масштабе [61], а биохимическая модель или так называемое исследование воспаления поможет понять общую картину заживления. процесс после травмы.

С другой стороны, для клинических исследований требуется более идеальная модель in vivo , отличная от модели на животных. Группа пациентов, страдающих чрезмерным рубцеванием после кесарева сечения, кажется хорошей моделью, поскольку это наиболее частая и распространенная хирургическая процедура у женщин репродуктивного возраста. Кроме того, у этих женщин есть возможность удалить гипертрофический рубец или келоидное поражение, поскольку многие снова беременеют и назначают плановое повторное кесарево сечение.Следовательно, полезный метод лечения для предотвращения рецидива гипертрофического рубца после удаления рубца необходим и заслуживает исследования. Фактически, есть некоторые сообщения об уменьшении образования рубцов после улучшения хирургических методов [62, 63].

8. Заключение

Лучшее понимание патогенеза заживления ран в конечном итоге будет способствовать прогрессу в лечении чрезмерного рубцевания. Возникнет ли чрезмерное рубцевание или нет, можно решить в тот момент, когда возникает первая воспалительная реакция, когда рана образуется.ПГЕ могут играть роль в предотвращении чрезмерного рубцевания. Тщательное изучение и понимание воспалительного каскада поможет нам справиться с множеством заболеваний, включая гипертрофические рубцы и келоид.

Заявление о конфликте интересов

Всем авторам нечего раскрывать. Все авторы не имеют коммерческого или финансового интереса в продуктах или компаниях, описанных в этой статье.

Благодарности

Эта работа была частично поддержана грантами Тайбэйской больницы для ветеранов (V99-C1-085), Совместной исследовательской программой TVGH-NTUH (96VN-008, 97VN-012, 98VN-015), Национальным научным советом (NSC 96-2314-B-010-018 -MY3), Больница общего профиля Йи-Дзен (99-01) и Университетская система больниц общего профиля для ветеранов Тайваньской совместной исследовательской программы (VGHUST99-G4), Тайвань.W.-H. Су, М.-Х. Ченг, В.-Л. Ли внес равный вклад в эту статью. Это исследование также поддержано грантом больницы Yee-Zen General Hospital (99-01).

Влияние местных противовоспалительных препаратов на заживление ран роговицы и лимба

Цель: Изучить влияние местного лечения стероидными или нестероидными противовоспалительными препаратами (НПВП) на заживление ран роговичных и лимбальных разрезов с использованием гистологических критериев.

Параметр: Медицинский центр Университета Лойола, Мэйвуд, Иллинойс, США.

Методы: Для исследования использовали 18 глаз 9 кошек. На всех правых глазах был сделан височно-лимбальный разрез, а на левом глазу — чистый разрез роговицы. Все глаза обрабатывали офлоксацином 0.3% в послеоперационном периоде в течение 3 дней. Животные были поровну разделены на 3 группы. Группа 1 получала местные стероидные капли (1% преднизолона ацетат) в течение максимум 7 дней; Группа 2 получала местные НПВП в каплях (0,5% кеторолака трометамина) в течение максимум 7 дней; Группа 3 не получала дополнительного лечения. Одно животное из каждой группы было умерщвлено и глаз энуклеирован через 3, 7 или 28 дней после операции. Глаза обрабатывали для окрашивания гематоксилин-эозином и актином гладких мышц, а срезы роговицы оценивали вслепую офтальмологом.

Полученные результаты: Через три и 7 дней после операции (1) лимбальный разрез продемонстрировал более заметное заживление ран, чем прозрачный разрез роговицы, обработанный аналогичным образом, и (2) обработанные стероидами роговицы имели меньшее заживление ран, чем необработанные или обработанные НПВП роговицы. На 28-й день раны на всех глазах почти полностью зажили.

Выводы: Лимбальные разрезы заживают быстрее, чем прозрачные разрезы роговицы.Стероиды, но не НПВП, препятствуют заживлению ран. Хирургия катаракты с использованием лимбальных разрезов и послеоперационных местных НПВП может привести к более быстрому заживлению ран и снизить риск связанных послеоперационных осложнений.

Местное противовоспалительное действие пальмитолеиновой кислоты улучшает заживление ран

Abstract

В этом исследовании изучалось влияние пальмитолеиновой кислоты на различные фазы процесса заживления.Макроскопические анализы были выполнены на ранах у крыс с обработкой пальмитолеиновой кислотой или без нее, и результаты показали, что пальмитолеиновая кислота непосредственно ускоряет закрытие раны. Местное лечение ран пальмитолеиновой кислотой привело к получению меньших ран, чем те, которые наблюдались в контрольной группе. Противовоспалительная активность пальмитолеиновой кислоты может быть причиной заживления, особенно на стадиях образования и ремоделирования грануляционной ткани. Модифицированные пальмитолеиновой кислотой профили TNF-α, IL-1β, IL-6, CINC-2α / β, MIP-3α и VEGF-α на участке раны через 24, 48, 120, 216 и 288 часов после ранения.Анализы, оценивающие миграцию нейтрофилов и образование экссудата в стерильных воспалительных воздушных мешочках, показали, что пальмитолеиновая кислота обладает сильной противовоспалительной активностью, ингибируя LPS-индуцированное высвобождение TNF-α (73,14%, p≤0,05), IL-1β (66,19%, p ≤0,001), IL-6 (75,19%, p≤0,001), MIP-3α (70,38%, p≤0,05) и l-селектин (16%, p≤0,05). Пальмитолеиновая кислота также ингибировала LPS-стимулированную миграцию нейтрофилов. Мы пришли к выводу, что пальмитолеиновая кислота ускоряет заживление ран за счет противовоспалительного действия.

Образец цитирования: Weimann E, Silva MBB, Murata GM, Bortolon JR, Dermargos A, Curi R, et al.(2018) Местное противовоспалительное действие пальмитолеиновой кислоты улучшает заживление ран. PLoS ONE 13 (10): e0205338. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0205338

Редактор: Мирослав Блюменберг, NYU Langone Medical Center, США

Поступила: 13 февраля 2018 г .; Одобрена: 24 сентября 2018 г .; Опубликован: 11 октября 2018 г.

Авторские права: © 2018 Weimann et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все файлы с рисунками доступны в базе данных Figshare (https://figshare.com/articles/Wound_healing/7015022).

Финансирование: Это исследование было поддержано бразильскими агентствами по финансированию исследований FAPESP (Фонд исследований Сан-Паулу, № 14 / 03947-1 и № 11 / 15360-7) и CNPq (Национальный совет по научному и технологическому развитию (№ 307769). / 2014-3). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Пальмитолеиновая кислота, жирная кислота, содержащаяся в большом количестве в растительных маслах орехов макадамии, фундука и облепихи, содержится в коже человека, особенно в молодой коже, и ее содержание с возрастом уменьшается. Высокая устойчивость к окислению масла макадамии, которое используется в косметике, делает его особенно подходящим для жирных кремов и других фармацевтических составов [1]; однако мало что известно о механизмах его действия и влиянии его компонентов на заживление ран.Недавние исследования показали, что пальмитолеиновая кислота полезна при лечении заболеваний, связанных с гиперпигментацией кожи [2], фиброзом [3], и в качестве адъюванта в составах для лечения вторичных инфекций, вызванных грамположительными бактериями [4, 5, 6].

Заживление кожных ран включает несколько компонентов, таких как тромбоциты, резидентные клетки (кератиноциты, фибробласты, эндотелиальные клетки и нервные клетки), лейкоциты (макрофаги, нейтрофилы и лимфоциты), липидные медиаторы, такие как простаноиды (простагландины, тромбоксаны и простациклины), белковые медиаторы. (белки острой фазы, цитокины и факторы роста), а также активные формы кислорода и азота [7].Процесс заживления включает согласованные фазы (воспаление, образование новой ткани и ремоделирование ткани) и может регулироваться жирными кислотами [8–12].

Поскольку пальмитолеиновая кислота может влиять на функции иммунных клеток, а цитокины и факторы роста участвуют в процессе заживления ран и фиброзе, мы исследовали влияние пальмитолеиновой кислоты на различных фазах процесса заживления у крыс. На основании анализов in vivo мы выполнили кинетический макроскопический анализ закрытия раны и скорости закрытия, и мы определили локальные концентрации TNF-α, IL-1β, IL-6, CINC-2α / β, MIP-3α, l -селектин и VEGF-α в ране на разных этапах и времени (0, 4, 24 и 48 часов; 5, 9 и 12 дней) процесса заживления.Воспалительная фаза заживления ран включает сосудистые и клеточные события и лучше всего характеризуется притоком нейтрофилов. Эти фагоциты регулируют начальную фазу процесса заживления и организуют последующие фазы. Чтобы исследовать влияние пальмитолеиновой кислоты на воспалительную фазу процесса заживления in vivo , мы проанализировали приток нейтрофилов в воздушные мешочки и цитокины, присутствующие в экссудате крыс, получавших или не получавших провоспалительный стимулятор (ЛПС). и / или пальмитолеиновая кислота.

Материалы и методы

Животные

Исследовали

взрослых крыс-самцов линии Вистар массой 180 ± 20 г. Крысы были получены из Института биомедицинских наук (ICB) Университета Сан-Паулу (USP), Сан-Паулу, Бразилия. Крыс содержали при 23 ° C в индивидуальных клетках и при цикле свет-темнота продолжительностью 12:12 часов, и им давали ad libitum доступ к обычному корму и воде. Экспериментальная процедура была одобрена Комитетом по уходу за животными Университета Крузейру-ду-Сул и проводилась в соответствии с Руководством по этическому поведению при уходе и использовании животных в исследованиях.После окончания экспериментов крыс умерщвляли смещением шейки матки под наркозом в соответствии с протоколом, одобренным Комитетом по этике.

Индукция и измерение размера раны

Как подробно описано ранее нашей группой [12], животных сначала анестезировали кетамином (60 мг / кг) и ксилазином (10 мг / кг), после чего хирургическим путем удалили кусок кожи размером 10 мм. спинной отдел каждой крысы. После операции рану местно обрабатывали 100 мкл пальмитолеиновой кислоты (100 мкМ) или таким же объемом стерильного физиологического раствора с фосфатным буфером (раствор PBS, pH = 7.4). Крыс содержали в индивидуальных клетках под согревающей лампой и наблюдали, пока они полностью не оправились от анестезии. Крысы были разделены на две группы: контрольные (обработанные PBS) крысы и крысы, обработанные пальмитолеиновой кислотой (100 мкМ). Пальмитолеиновая кислота или PBS вводили один раз в день. Исходя из времени процесса заживления у крыс и предыдущих экспериментов нашей группы [10, 12], 15-й день был конечной точкой этого эксперимента.

Для оценки закрытия раны раны ежедневно фотографировали камерой Nikon D7000 18–105 мм с тем же фокусным расстоянием, диафрагмой объектива и временем экспозиции.Фотографии были оцифрованы, а площадь раны измерена с использованием программного обеспечения ImageJ (Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд, США). Контролировали общую площадь травмы и скорость заживления. Закрытие раны определяли как уменьшение площади раны, и результаты выражали в процентах (%) от первоначальной площади раны [12].

Анализ воздушного мешка, сбор и обработка экссудата

Как подробно описано ранее Farsky et al. (1997) [13] и наша группа [10], воздушные мешочки из кожи крысы были изготовлены в спинной области животных для анализа миграции нейтрофилов и измерения цитокинов.Первоначально 20 мл отфильтрованного стерильного воздуха (0,22 мкм) вводили подкожно в спину анестезированных крыс. Через семь дней дополнительно вводили 10 мл стерильного воздуха, а на 8-й день 1 мл раствора пальмитолеиновой кислоты (100 мкМ) в стерильном PBS вводили в пакет под анестезией и в асептических условиях. Животные отрицательного контроля получали 1 мл стерильного PBS, а положительные контроли получали 1 мл стерильного PBS плюс воспалительный стимул LPS (5 мкг / мл) тем же путем.Через четыре часа после обработки пальмитолеиновой кислотой внутрибрюшинную полость промывали 10 мл стерильного PBS и собирали воспалительный экссудат. Суспензию центрифугировали при 500 g в течение 10 минут при -4 ° C. Затем подсчитывали нейтрофилы с помощью камеры Нойбауэра. Мы также измерили уровни цитокинов в супернатанте с помощью ELISA с использованием набора DuoSet (Quantikine DuoSet, R&D Systems, Миннеаполис, Миннесота, США) [10].

Уровни цитокинов в ранах

Ткани раны, удаленные через 0, 4, 24, 48, 120, 216 и 288 часов после операции, немедленно замораживали (-80 ° C) до гомогенизации с использованием PBS плюс ингибиторы протеаз (0.5 M PMSF и 25 IU мл (–1 апротинина). Ткань (100 мг) гомогенизировали в гомогенизаторе Polytron PT 3100 (Kinematica, Люцерн, Швейцария). Уровни TNF-α, IL-1β, CINC-2α / β, MIP-3, IL-6 и VEGF-α оценивали с помощью ELISA (Quantikine DuoSet, R&D Systems, Миннеаполис, Миннесота, США). Концентрации были нормированы на количество белка в образцах, которое определяли с помощью классического метода Брэдфорда.

Статистический анализ

Статистический анализ выполняли путем сравнения контрольных групп с группами, обработанными пальмитолеиновой кислотой.Группы сравнивали с использованием ANOVA и апостериорного теста множественных сравнений Стьюдента-Ньюмана-Кеулса и теста Даннета (InStat; GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США). Уровень значимости был установлен на уровне p <0,05.

Результаты

Фотографические записи были созданы ежедневно для анализа макроскопического закрытия раны, общей площади повреждения и скорости заживления у контрольных крыс (рис. 1A) и крыс, получавших пальмитолеиновую кислоту (рис. 1B). Как показано на фиг. 1C, пальмитолеиновая кислота непосредственно ускоряет закрытие раны.Объединение кривых, представляющих площадь закрытия раны, наблюдаемую в течение 12 дней, продемонстрировало, что обработка раны пальмитолеиновой кислотой уменьшала площадь раны по сравнению с группой, не получавшей лечения (рис. 1D).

Рис. 1. Скорость закрытия раны.

Макроскопическое закрытие ран у контрольных крыс (A) и крыс, которым ежедневно вводили пальмитолеиновую кислоту (B). Репрезентативные фотографии и значения площади раны, записанные за 12-дневный период. (C) Скорость закрытия раны (мм 2 / день) и (D) отношения интегрированной области закрытия раны с или без пальмитолеиновой обработки.Значения выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего для не менее 10 животных на группу. * p≤0,05 по сравнению с контролем, на что указывает дисперсионный анализ (ANOVA) и апостериорный тест Тьюки.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0205338.g001

Воспалительная фаза заживления ран характеризуется повышенным притоком нейтрофилов. Эта фаза наступает в первые часы после травмы. Чтобы исследовать влияние пальмитолеиновой кислоты на воспалительную фазу процесса заживления ран in vivo , мы проанализировали приток нейтрофилов в воздушные мешочки и белки в экссудате крыс, получавших или не леченных пальмитолеиновой кислотой.Число нейтрофилов, которые мигрировали в воздушные мешочки, определяли через четыре часа после инъекции пальмитолеиновой кислоты. LPS, характерный компонент стенок грамотрицательных бактериальных клеток, который активирует движение нейтрофилов к инфицированным областям, индуцировал значительный приток нейтрофилов в мешочки. Наши результаты показали, что пальмитолеиновая кислота сильно ингибирует LPS-стимулированную миграцию нейтрофилов (рис. 2).

Рис. 2. Миграция нейтрофилов.

Поступление нейтрофилов в воздушные мешочки после инъекции пальмитолеиновой кислоты (100 мМ).ЛПС (5 мкг / мл) использовали в качестве положительного контроля. Значения представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего для восьми животных в группе. ** p <0,01 для сравнения между обработками жирными кислотами и контролем, как указано.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0205338.g002

Нейтрофилы регулируют процесс заживления ран и организуют фазу воспаления, мигрируя в очаг воспаления; фагоцитозирование клеточного дебриса и микроорганизмов; высвобождение провоспалительных цитокинов, хемокинов и ангиогенных факторов роста; и производство активных форм кислорода.Эти события тесно коррелированы и в некоторых случаях зависят от передачи сигналов, инициированной цитокинами (TNF-α, IL-1β и CINC-2α / β) и факторами роста (VEGF-α). Как показано на фиг. 3, у животных, получавших пальмитолеиновую кислоту, наблюдалось заметное снижение индуцированного LPS воспаления. Пальмитолеиновая кислота обладала сильной противовоспалительной активностью, подавляя вызванное ЛПС высвобождение TNF-α (73,14%, p≤0,05), IL-1β (66,19%, p≤0,001), IL-6 (75,19%, p≤0,001). ), MIP-3α (70,38%, p≤0,05) и l-селектин (16%, p≤0,05). Выпуск VEGF не был изменен (данные не показаны).Пальмитолеиновая кислота обладала сильным противовоспалительным действием. Концентрация l-селектина на участке раны была значительно ниже после обработки пальмитолеиновой кислотой по сравнению с контрольной группой (рис. 4).

Рис. 3. Высвобождение цитокинов из воздушного мешочка.

Высвобождение цитокинов в воздушные мешочки после инъекции пальмитолеиновой кислоты (100 мМ). ЛПС (5 мкг / мл) использовали в качестве положительного контроля. Значения представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего для восьми животных в группе. * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001 для сравнения между обработками жирными кислотами и контролем, как показано ANOVA и тестом Даннета.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0205338.g003

Рис. 4. Концентрация цитокинов в ране.

Кинетические профили концентраций цитокинов у контрольных (PBS) и обработанных крыс (PALM), измеренные до (0), 4 часа (4), 24 часа (24), 48 часов (48), 72 часа (72) и 120 часов (120) после индукции раны. Значения представлены как среднее значение ± стандартная ошибка не менее 8 животных в группе.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0205338.g004

Обсуждение

Жирные кислоты могут регулировать процесс регенерации тканей, что поднимает несколько важных моментов. Например, чтобы оптимизировать терапевтические вмешательства, предварительные знания о влиянии лекарственного средства на хронологию поражения необходимы для получения максимальной пользы от лечения. Основываясь на настоящем анализе, мы намерены продолжить изучение жирных кислот и выбрать идеальное вмешательство, чтобы максимизировать преобладающее событие на каждой фазе процесса заживления. Например, введение бустеров для миграции нейтрофилов было бы бессмысленным, если бы хронология поражения указывала на преобладание эпителизации.Точно так же введение стимуляторов миграции кератиноцитов не повлияет на начальную фазу повреждения.

Для разработки новых терапевтических агентов важно выяснить механизмы, посредством которых определенные жирные кислоты действуют для восстановления тканей. Хотя многие исследования были сосредоточены на жирных кислотах и ​​их функциях в иммунных клетках [14–20], несколько исследований касались местного воздействия жирных кислот на передачу сигналов в процессе заживления. Большинство исследований касалось местного лечения ран с применением олеиновой и линолевой кислоты или жирных кислот.

В последние годы наша группа сосредоточилась на выяснении функций различных жирных кислот в процессе заживления [10–12] и клеток, участвующих в восстановлении тканей, таких как нейтрофилы [14, 16–18], макрофаги [20] и фибробласты [19, 21].

Многообещающие исследования продемонстрировали множественные функции жирных кислот в эпидермисе в дополнение к их основным функциям в качестве источника энергии, хранения и липидного бислоя мембран [22–24]. Жирные кислоты играют важную роль в формировании барьера проницаемости, который способствует подкислению рогового слоя, способствуя его структурной целостности и барьерной функции [25].Эти кислоты также служат строительными блоками для сложных липидов кожного сала, вырабатываемых сальными железами [26]. Липиды кожного сала придают поверхности кожи самодезинфицирующую способность, и за это свойство отвечают свободные жирные кислоты [26]. Исследования Cardoso et al. (2004, 2011) [8, 9] и Pereira et al. (2008) [10] продемонстрировали, что местная обработка ран олеиновой и линолевой кислотами ускоряет механизмы восстановления тканей из-за способности этих жирных кислот модулировать воспаление. Обработка олеиновой и линолевой кислотами увеличивала количество нейтрофилов в ране и уменьшала толщину некротического слоя [10].Инкубация нейтрофилов с олеиновой и линолевой кислотами дозозависимо увеличивала высвобождение IL-1β и VEGF-α. Эти эффекты олеиновой и линолевой кислот важны в ситуациях дисфункции нейтрофилов и незаживающих ран, таких как диабет [10]. Кроме того, маслянистые, влажные повязки, характерные для применения жирных кислот, служат защитными барьерами от микроорганизмов, предотвращают обезвоживание тканей и поддерживают снижение температуры тела во время замены кожи при заживлении травм [27].Аутолиз, естественное разрушение омертвевшей ткани под действием ферментов, таких как кислотные гидролазы, предпочтителен при лечении ран влажными повязками. Другие преимущества сохранения гидратации ран включают стимуляцию эпителизации, образование грануляционной ткани и ангиогенез [28].

Биоактивные соединения, такие как жирные кислоты, проявляют защитный эффект против вызванного стрессом старения кожи и в условиях, которые могут привести к развитию старения, таких как УФ-А и УФ-В облучение клеток и образование матрикса. металлопротеиназы [29].Добавление изомеров пальмитолеиновой кислоты проявляло антибактериальную активность и бактерицидные свойства [5, 6].

В этом исследовании мы обнаружили, что пальмитолеиновая кислота обладает противовоспалительным действием, уменьшая воспаление. Жирные кислоты местного применения успешно используются для лечения открытых травм у людей с инфекцией или без нее, особенно в Латинской Америке [27].

Диабет и ожирение являются примерами состояний, которые способствуют возникновению хронических ран во всем мире. Многие экономически эффективные технологии заживления ран недавно стали предметом исследований из-за возросшего спроса [30, 31].Наши результаты показывают, что пальмитолеиновая кислота непосредственно ускоряет закрытие раны. Фактором, ответственным за это заживление, может быть противовоспалительное действие пальмитолеиновой кислоты; тем не менее, важно отметить, что основные механизмы, лежащие в основе вызванных пальмитолеиновой кислотой изменений в закрытии раны, остаются неизвестными и выходят за рамки этого исследования.

Список литературы

  1. 1. Колухова И., Сиглер К., Шрайберова О., Масак Дж., Жезанка Т. Новые подходы на основе дрожжей в производстве пальмитолеиновой кислоты.Биоресур Технол. 2015; 192: 726–34. pmid: 26101962
  2. 2. Юн WJ, Kim MJ, Moon HJ, Kim GO, Lee NH, Hyun CG. Влияние пальмитолеиновой кислоты на экспрессию меланогенного белка в мышиной меланоме b16. J Oleo Sci 59: 315–319, 2010. pmid: 20484837
  3. 3. Фишер К.Л., Дрейк Д.Р., Доусон Д.В., Бланшетт Д.Р., Брогден К.А., Вертц П.В. Антибактериальная активность сфингоидных оснований и жирных кислот в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий. Антимикробные агенты Chemother 56: 1157–1161, 2012.pmid: 22155833
  4. 4. Wille JJ, Kydonieus A. Изомер пальмитолеиновой кислоты (C16: 1delta6) в кожном сале человека эффективен против грамположительных бактерий. Skin Pharmacol Appl Skin Physiol. 2003. 16: 176–187. pmid: 12677098
  5. 5. Gao ZL, Gu XH, Cheng FT, Jiang FH Облепиха может быть многообещающим лекарством для профилактики и лечения фиброза печени. Влияние облепихи на фиброз печени: клиническое исследование. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2003; 9: 1615–1617. pmid: 12854177
  6. 6.Akamatsu H, Oguchi M, Nishijima S, Asada Y, Takahashi M, Ushijima T., Niwa Y. Ингибирование образования свободных радикалов нейтрофилами человека посредством синергических эффектов метронидазола с пальмитолеиновой кислотой: возможный механизм действия метронидазола при розацеа и прыщи. Arch Dermatol Res. 1990; 282: 449–454. pmid: 2150301
  7. 7. Гуртнер Г.К., Вернер С., Баррандон И., Лонгакер М.Т. Ремонт и регенерация ран. Природа. 2008; 453: 314–321. pmid: 18480812
  8. 8.Кардосо С.Р., Соуза М.А., Ферро Е.А., Фаворето С.-младший, Пена Д.Д. Влияние местного применения незаменимых жирных кислот n-3 и n-6 и заменителей n-9 на заживление кожных ран. Регенерация заживления ран. 2004. 12: 235–243. pmid: 15086775
  9. 9. Кардосо С.Р., Фаворето С.-младший, Оливейра Л.Л., Ванцим Дж.О., Барбан Г.Б., Ферраз Д.Б., Сильва Дж. С.. Модуляция олеиновой кислоты иммунного ответа при заживлении ран: новый подход к восстановлению кожи. Иммунобиология. 2011; 216: 409–415. pmid: 20655616
  10. 10.Перейра Л.М., Хатанака Е., Мартинс Е.Ф., Оливейра Ф., Либерти Е.А., Фарски С.Х., Кури Р., Пифон-Кури Т.С. Влияние олеиновой и линолевой кислот на воспалительную фазу заживления ран у крыс. Cell Biochem Funct. 2008. 26: 197–204. pmid: 17918246
  11. 11. Rodrigues HG, Vinolo MA, Magdalon J, Fujiwara H, Cavalcanti DM, Farsky SH, Calder PC, Hatanaka E, Curi R. Диетическая свободная олеиновая и линолевая кислоты усиливают функцию нейтрофилов и модулируют воспалительную реакцию у крыс. Липиды.2010. 45: 809–819. pmid: 20730605
  12. 12. Rodrigues HG, Vinolo MA, Magdalon J, Vitzel K, Nachbar RT, Pessoa AF, dos Santos MF, Hatanaka E, Calder PC, Curi R. Пероральное введение олеиновой или линолевой кислоты ускоряет воспалительную фазу заживления ран. J Invest Dermatol. 2012; 132: 208–215. pmid: 21881592
  13. 13. Фарски С.Х., Уолбер Дж., Коста-Круз М., Кьюри Ю., Тейшейра К.Ф., Карри Ю. Лейкоцитарный ответ, вызванный сырым ядом Bothrops jararaca: исследования in vivo и in vitro.Токсикон 1997; 35: 185–193. pmid: 75
  14. 14. Hatanaka E, Levada-Pires AC, Pithon-Curi TC, Curi R. Систематическое исследование продукции ROS, индуцированной олеиновой, линолевой и гамма-линоленовой кислотами в нейтрофилах человека и крысы. Free Radic Biol Med. 2006; 41: 1124–1132. pmid: 16962937
  15. 15. Мартинс де Лима Т., Горджао Р., Хатанака Е., Кьюри-Боавентура М.Ф., Портиоли Сильва Е.П., Прокопио Дж., Кури Р. Механизмы, с помощью которых жирные кислоты регулируют функцию лейкоцитов. Clin Sci. 2007. 113 (2): 65–77.pmid: 17555405
  16. 16. Виноло М.А., Хатанака Э., Ламбертуччи Р.Х., Ньюсхолм П., Кури Р. Влияние короткоцепочечных жирных кислот на эффекторные механизмы нейтрофилов. Cell Biochem Funct. 2009; 27: 48–55. pmid: 1

    72
  17. 17. Vinolo MA, Rodrigues HG, Hatanaka E, Hebeda CB, Farsky SH, Curi R. Короткоцепочечные жирные кислоты стимулируют миграцию нейтрофилов к участкам воспаления. Clin Sci. 2009. 117: 331–338. pmid: 19335337
  18. 18. Виноло М.А., Родригес Х.Г., Хатанака Э., Сато Ф.Т., Сампайо С.К., Кури Р.Подавляющее действие короткоцепочечных жирных кислот на продукцию провоспалительных медиаторов нейтрофилами. J Nutr Biochem. 2011; 22: 849–855. pmid: 21167700
  19. 19. Magdalon J, Hatanaka E, Romanatto T, Rodrigues HG, Kuwabara WM, Scaife C, Newsholme P, Curi R. Протеомный анализ функциональных эффектов жирных кислот в фибробластах NIH 3T3. Lipids Health Dis. 2011 24; 10: 218. pmid: 22114894
  20. 20. Магдалон Дж., Виноло М.А., Родригес Х.Г., Пашоаль В.А., Торрес Р.П., Манчини-Филхо Дж., Колдер П.С., Хатанака Э., Кури Р.Пероральное введение олеиновой или линолевой кислот модулирует выработку медиаторов воспаления макрофагами крысы. Липиды. 2012; 47: 803–812. pmid: 22695743
  21. 21. Hatanaka E, Dermargos A, Hirata AE, Vinolo MA, Carpinelli AR, Newsholme P, Armelin HA, Curi R. Олеиновая, линолевая и линоленовая кислоты увеличивают продукцию ros фибробластами за счет активации НАДФН-оксидазы. PLoS One. 2013 8 апреля; 8 (4): e58626. pmid: 23579616
  22. 22. Ruthig DJ, Meckling-Gill KA. И (n-3), и (n-6) жирные кислоты стимулируют заживление ран в линии эпителиальных клеток кишечника крыс, IEC-6.J Nutr. 1999; 129: 1791–1798. pmid: 10498749
  23. 23. Calder PC. n-3 жирные кислоты, воспаление и иммунитет — значение для послеоперационных и тяжелобольных пациентов. Липиды. 2004; 39: 1147–1161. pmid: 15736910
  24. 24. Calder PC. Длинноцепочечные жирные кислоты n-3 и воспаление: потенциальное применение у хирургических пациентов и пациентов с травмами. Бразильский журнал медико-биологических исследований, 2003 г .; 36: 433–446.
  25. 25. Зибо В.А., Миллер С.С., Чо Ю. Метаболизм полиненасыщенных жирных кислот кожными эпидермальными ферментами: образование противовоспалительных и антипролиферативных метаболитов.Am J Clin Nutr 71: 361S – 6S, 2000. pmid: 10617998
  26. 26. Накацудзи Т., Као М.К., Чжан Л., Зубулис С.К., Галло Р.Л., Хуанг С.М. Жирные кислоты, не содержащие кожного сала, усиливают врожденную иммунную защиту себоцитов человека за счет усиления экспрессии бета-дефенсина-2. J Invest Dermatol. 2010; 130: 985–994. pmid: 20032992
  27. 27. Пипер Б., Калири М.Х. Нетрадиционный уход за ранами: обзор доказательств использования сахара, папайи / папаина и жирных кислот. J Wound Ostomy Continence Nurs.2003; 30: 175–183. pmid: 12851592
  28. 28. Свенсьё Т., Помахак Б., Яо Ф., Слама Дж., Эрикссон Э. Ускоренное заживление полнослойных кожных ран во влажной среде. Plast Reconstr Surg. 2000; 106: 602–614. pmid: 10987467
  29. 29. Мария Дж, Ингрид Ž. Влияние биологически активных соединений на старение и компоненты секреторных фенотипов, ассоциированных со старением, in vitro. Food Funct. 2017; 8: 2394–2418. pmid: 28665427
  30. 30. Гвак Джэ Ха, Сон Со Ён.Определение тенденций в патентах на заживление ран для успешных инвестиционных стратегий PLoS One. 2017; 12 (3): e0174203. pmid: 28306732
  31. 31. Лима MHM, Карицилли А.М., Абреу Л.Л., Араужо Е.П., Пелегринелли Ф.Ф., Тирон АСР, Цукумо Д.М., Пессоа АФМ, душ Сантос М.Ф., де Мораес М.А., Карвалейра Дж.Б.С., Веллозу Л.А., Саад MJA. Местный инсулин ускоряет заживление ран при диабете за счет усиления путей AKT и ERK: двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое испытание. PLoS One. 2012; 7 (5): e36974.pmid: 22662132

Исследование ранозаживляющего и противовоспалительного действия Sol

Введение

Рана — это разрыв целостности эпителия кожи, возникающий в результате физических или химических повреждений или микробных инфекций. 1 На основании физиологии заживления ран можно разделить на острые и хронические. Острые раны — это повреждения тканей, которые заживают в результате упорядоченной последовательности физиологических событий, что приводит к устойчивому восстановлению анатомической и функциональной целостности, как правило, менее чем за 8 недель.В ране такого типа наиболее важным возбудителем является золотистый стафилококк . 2 С другой стороны, хронические раны — это раны, которые не прошли упорядоченный и своевременный процесс для обеспечения анатомической и функциональной целостности даже через 3 месяца. 3,4

Травяные сборы и продукты из них считаются важным и основным источником современной медицины во всем мире. 5 Доказано, что многие растения обладают значительными лечебными свойствами. 6 В Эфиопии лекарственные травы используются для лечения кожных заболеваний, в том числе ран, и они очень распространены в стране. 7

Achyranthes aspera L. (рис. 1), который принадлежит к семейству Amaranthaceae , встречается в тропической Азии, Африке, Австралии и Америке и повсеместно растет как трава пустыря. Используется как народная медицина. Различные исследователи исследовали A. aspera как in vitro, так и in vivo на предмет различной биологической активности; например, он используется в местной системе медицины из-за его эменагогических, противоартритических, противозачаточных, слабительных, экболических, абортивных, противоглистных, афродизиакальных, противовирусных, гипотензивных, антикоагулянтных, мочегонных, иммуностимулирующих, антигиперлипидемических, антиоксидантных и противоопухолевых свойств. 8 Кроме того, неочищенные фракции и фракции растворителя A. aspera были исследованы на их противомикробную активность с использованием различных систем растворителей как для клинически изолированных, так и для лабораторных скрининговых микроорганизмов. 9–13

Рис. 1 Achyranthes aspera с места сбора (захвачено 20.04.2019).

Несмотря на множество заявлений и исследований in vitro с поддерживающими результатами в отношении заживления ран и противовоспалительной активности, не проводилось исследований по заживлению ран и противовоспалительной активности фракций растворителей A.aspera на животных моделях. Таким образом, настоящее исследование было проведено для изучения ранозаживляющей и противовоспалительной активности фракций.

Материалы и методы

Химические вещества, лекарства и реагенты

Химические вещества, лекарства и реагенты, использованные в исследовании, включают: дистиллированную воду, хлороформ, этилацетат и хлорид ртути (Bulex Laboratory, Индия), нитрофуразоновую мазь 0,2%, кетамин (NEON Laboratories, Индия), серную кислоту, н-бутанол, метанол, гексан (LobaChemie, Индия), шерстяной жир, твердый парафин, белый мягкий парафин, цетостеариловый спирт, индометацин (Кадила, Эфиопия), Твин 80 (Uni-Chem, Индия), диэтиловый эфир (BDH Laboratory Supplies, Англия) и каррагинан. (Sigma Aldrich, Германия), уксусный ангидрид (Lot A13 / 45/67 / A), безводный аммиак и хлорид железа (Sisco Research Laboratories, Индия), йодид калия (Caliber Engineering, Индия), физиологический раствор (Addis Pharmaceutical Factory, Эфиопия ).Используемые химические вещества и реагенты были оценены аналитически.

Экспериментальные животные

Использовали

здоровых взрослых крыс-альбиносов Wistar обоего пола (в возрасте 6–8 недель) массой 200–250 г, полученных из животноводческого помещения Эфиопского института общественного здравоохранения, Аддис-Абеба. Их содержали в чистых полипропиленовых клетках с кружевными стальными крышами в стандартных условиях (25 ± 2 ° C, относительная влажность 55 ± 5% и 12-часовой световой и темный циклы), со свободным доступом к стандартным лабораторным гранулам и чистой питьевой воде. libitum .Крыс акклиматизировали к лабораторным условиям за одну неделю до начала экспериментов. Все процедуры и методы, использованные в этом эксперименте, были выполнены в соответствии с рекомендациями Национального института здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных. 14

Растительный материал

Свежие листья Achyranthes aspera , обычно называемые «Telenje» на амхарском языке и «Maxxannee» на афан-оромо, были собраны в их естественной среде обитания в районе Дебре Табор, Южный Гондар, Северо-Западная Эфиопия.Растение было идентифицировано и подтверждено систематиком по травам доктором Гетачью Аддисом, а образец ваучера GDBT / 002/19 был депонирован в гербарии Эфиопского института общественного здравоохранения.

Высушенные на воздухе и измельченные в порошок листья A. aspera сначала обезжиривали путем мацерации в н-гексане в течение 72 часов при комнатной температуре с периодическим встряхиванием с последующей фильтрацией. Остатки растворителя удаляли из остатка выдержкой на открытом воздухе. Для извлечения растительного материала использовалась техника экстракции холодной мацерацией.1,07 кг порошка мацерировали в колбе, содержащей 80% метанола (1: 6 мас. / Об.) В течение 72 часов. Затем экстракт фильтровали, используя фильтровальную бумагу Whatman (№ 1), и выжимки повторно мацерировали во второй и третий раз, добавляя свежий растворитель. Фильтраты из трех партий 80% метанола объединяли и концентрировали в роторном испарителе при температуре 40 ° C. Оставшийся растворитель удаляли с помощью лиофилизатора. После удаления растворителя был получен черный липкий остаток массой 123,51 г, что дало процентный выход 11.54%. 80% -ный метанольный экстракт подвергали последовательному фракционированию с использованием ранее упомянутых способов 15 с растворителями разной полярности (хлороформ, н-бутанол и вода). 16 Затем 123 грамма сырого экстракта суспендировали в делительной воронке в 180 мл дистиллированной воды. Добавляли такой же объем хлороформа и хорошо перемешивали. Затем смеси давали возможность образовать отчетливый слой, и фракцию хлороформа отделяли путем элюирования нижнего слоя. Это повторилось трижды.Затем водный остаток аналогичным образом смешивали с равным объемом н-бутанола и разделяли. Фракции хлороформа и н-бутанола концентрировали на роторном испарителе и сушили в сушильном шкафу при 40 ° C. Водную фракцию лиофилизировали. Процентный выход высушенных фракций составил 48,3 г (39,11%), 35,21 г (28,5%) и 38,43 г (31,1%) водного раствора, н-бутанола и хлороформа, соответственно. Затем фракции хранили в герметичных контейнерах при -4 ° C до начала фактического эксперимента. 17 Все фракции были восстановлены в 2% твине 80 в концентрации, подходящей для проведения различных экспериментов.

Простые мази и лечебные мази из водных фракций, н-бутанола и хлороформа были приготовлены, как описано в Британской фармакопее . Итак, 2009 год. 2,5 г твердого парафина и 2,5 г цетостеарилового спирта растопили в химическом стакане, чтобы приготовить 50 г простой мази; 2,5 г шерстяного жира и 42,5 г белого мягкого парафина плавили в другом химическом стакане (таблица 1).Затем содержимое двух стаканов смешивали и перемешивали до охлаждения. 5% мас. И 10% мас. Мази каждой фракции были приготовлены путем включения 2,5 г и 5 г водной фракции, н-бутанола и хлороформа каждой в простую мазевую основу 47,5 г и 45 г соответственно, чтобы получить по 50 г лечебной мази каждой фракции.

Таблица 1 Основная и восстановленная формула, используемая для приготовления простой мази

Тесты на острую оральную и кожную токсичность

Тест на острую оральную токсичность для фракций растворителей листьев A.aspera был выполнен, как описано в Руководстве Организации экономического сотрудничества и развития (ОЭСР) 425; «Тест на предельное значение 2000 мг / кг». 18 Четыре самки крыс-альбиносов линии Wistar в возрасте 6–8 недель были случайным образом выбраны и использовались для теста. Крыс не кормили в течение ночи перед введением фракций и через 1-2 часа после введения фракций. Во-первых, было проведено прицельное исследование для определения начальной дозы, в котором одной самке крысы для каждой фракции вводили 2000 мг / кг соответствующей фракции в виде разовой дозы с использованием перорального желудочного зонда.Поскольку в течение 24 часов смерти не наблюдали, для каждой фракции использовали дополнительных четырех крыс, которым вводили ту же дозу фракций. За крысами наблюдали непрерывно в течение 4 часов с 30-минутными интервалами, а затем в течение 14 дней подряд с интервалом в 24 часа для выявления общих признаков и симптомов токсичности, таких как изменения кожи и шерсти, глаз и слизистых оболочек, соматомоторная активность и поведенческий образец, слюноотделение и диарея, потеря веса, тремор и судороги, летаргия и паралич, потребление пищи и воды и смертность.Острая кожная токсичность также определялась в соответствии с рекомендациями OECD. 19 Три крысы-самки с нормальной текстурой кожи для каждой фракции были случайным образом выбраны и помещены индивидуально в клетку и акклиматизированы к лабораторным условиям в течение недели перед тестом. Затем крыс анестезировали с помощью интраперитонеальной (i.p) инъекции кетамина 50 мг / кг и примерно 10% шерсти на поверхности тела сбривали с дорсальной области туловища за 24 часа до исследования. Предельную тестовую дозу 2000 мг / кг 10% мас. / Мас. Композиций фракции растворителя наносили равномерно на выбритую область в течение 24 часов.В течение периода воздействия крыс содержали индивидуально. В конце периода воздействия остаточное тестируемое вещество удаляли, и за крысами ежедневно наблюдали на предмет развития каких-либо неблагоприятных кожных реакций в течение 14 дней. Эритема и отек оценивались и классифицировались по шкале OECD404 (2002).

Группировка и дозирование животных

Для модели иссеченной раны животные были случайным образом разделены на восемь групп по шесть крыс в группе следующим образом: первая группа обрабатывалась простой мазью.Вторую группу лечили нитрофуразоновой 0,2% мазью. Третья и четвертая группы лечились 5 и 10% мазями водной фракции соответственно. Пятая и шестая группы лечились 5 и 10% мазями н-бутанольной фракции соответственно, а седьмая и восьмая группы лечили 5 и 10% мазями хлороформной фракции листьев A.aspera соответственно. Для модели разрезанной раны животные были случайным образом разделены на девять групп по 6 крыс в группе с тем же группированием и дозировкой, что и в модели разрезанной раны, за исключением необработанной группы.Для оценки противовоспалительной активности на двух моделях крыс случайным образом разделили на одиннадцать групп по шесть крыс в каждой группе. Первые две группы служили отрицательным (2% Твин 80 в дозе 10 мл / кг) и положительным (индометацин 10 мг / кг) контролями для обеих моделей. Первые три опытные группы (3-5) получали три разные дозы (100, 200 и 400 мг / кг) водной фракции. Три другие тестовые группы (6–8) получали фракцию н-бутанола в дозах 100, 200 и 400 мг / кг, в то время как остальные три тестовые группы (9–11) получали фракцию хлороформа в тех же трех дозах.Фракции и порошок индометацина растворяли в 2% твине 80 для приготовления суспензии. Дозы (100, 200 и 400 мг / кг) были выбраны на основании результатов перорального предельного теста.

Модели для заживления ран

Модель для иссеченных ран

Крыс анестезировали внутрибрюшинным введением кетамина 50 мг / кг. 20 Удален мех в дорторакальной области. Круглая метка размером 314 мм 2 , как описано Nagar, 21 , была подготовлена ​​с использованием перманентного маркера, и полная толщина была вырезана с помощью острых стерилизованных ножниц и считалась днем ​​0.Начиная с первого дня, то есть через 24 часа после создания области раны, крыс лечили и наносили мази, как описано выше. Все мази наносили один раз в день на область раны до полного заживления. За крысами наблюдали на предмет закрытия ран, и измерения проводили каждые два дня после ранения с использованием прозрачной бумаги и перманентного маркера. Затем для каждой крысы была рассчитана площадь трассировки путем измерения диаметра с помощью миллиметровой линейки. Процент сокращения раны оценивали, как описано в предыдущем исследовании: 22

, где n = количество дней, т.е. 2-й, 4-й, 6-й, 8-й, 10-й, 12-й, 14-й, 16-й, 18-й и 20-й (день, когда рана во фракционно обработанных группах, включая стандартную, полностью зажила).

За конечную точку полной эпителизации принимали количество дней, необходимое для того, чтобы остатки омертвевшей ткани упали с поверхности раны, за исключением оставшейся сырой раны, и дни, необходимые для этого, считали периодом эпителизации. 23,24

Разрез раны Модель

Крыс подвергали анестезии и удаляли их шерсть, как описано для модели иссеченной раны. Был сделан линейно-паравертебральный разрез длиной 3 см на всю толщину кожи по обе стороны от позвоночника на расстоянии 1 см от средней линии.Удаленную кожу держали вместе и сшивали хромовым кетгутом (2/0 метрических — 1/2 круга) с изогнутой иглой с интервалом в 1 см, 20 , которую принимали за день 0. Начиная с первого дня мази применяли. применяется, как описано в разделе «Группирование и дозирование животных». Мази применялись местно один раз в день в течение 9 дней. Швы сняты на восьмой день после ранения. 25 Затем была измерена прочность на разрыв 26 на десятый день, чтобы определить степень заживления с использованием метода непрерывного постоянного потока воды: 25,27

Прочность на разрыв в процентах фракций

Предел прочности на разрыв в процентах от условного

Предел прочности на разрыв простой мази в процентах

, где SO = простая мазь, а LU = необработанная. 28

Определение противовоспалительной активности

Отек лапы, индуцированный каррагинаном

Метод, описанный Ayal 29 , был использован с незначительной модификацией для изучения влияния фракций растворителей 80% метанольного экстракта листьев A. aspera на острое воспаление. Крысы голодали в течение ночи со свободным доступом к воде до начала эксперимента. Базальный объем, т.е. вытеснение воды левой задней лапой каждой крысы, определяли с использованием калиброванного плетизмометра и случайным образом распределяли по соответствующим группам перед введением вещества, как описано в разделе «Группирование и дозирование животных».Затем крыс вводили тестируемые вещества через желудочный зонд. После 1 часа введения в тесте воспаление вызывали в левой задней лапе путем инъекции 0,05 мл свежеприготовленной 1% суспензии каррагинана в физиологическом растворе в подподошвенную поверхность левой задней лапы. Изменение объема лапы после инъекции измеряли через 1, 2, 3 и 4 часа после индукции каррагенаном с помощью плетизмометра. 28

PEC = отек лапы отрицательного контроля и ПЭТ = отек лапы опытных групп, включая стандарт.

Гранулема, индуцированная хлопковыми пеллетами

Метод, ранее использовавшийся Afsar et al. 30 , был использован для оценки транссудативных и пролиферативных компонентов хронического воспаления. Самцов крыс-альбиносов Wistar (200–250 г) не кормили в течение ночи со свободным доступом к воде до начала эксперимента. Контрольная, стандартная и опытная группы крыс получали 2% твин 80, индометацин и фракции, соответственно, как указано в разделе «Группирование и дозирование животных».

Ватные шарики массой 10 ± 1 мг стерилизовали в автоклаве в течение 30 мин при 120 ° C и давлении 15 фунтов.Через двадцать минут после обработки стандартным лекарственным средством и фракциями крыс анестезировали гидрохлоридом кетамина (50 мг / кг, внутрибрюшинно) и в асептических условиях проделывали подкожный туннель с помощью затупленных щипцов с обеих сторон ранее выбритой области паха каждой крысы. Затем две стерилизованные ватные шарики весом 10 ± 1 мг каждая были имплантированы с двух сторон в подкожный туннель и сшиты хромовым кетгутом (круг 2/0 метрических 1/2). Лечение 2% Tween 80, индометацином и фракциями продолжалось в общей сложности семь дней подряд (стр.п., 1 раз в сутки). На 8 день крыс умерщвляли под эфирным наркозом, и гранулы, окруженные тканью гранулемы, осторожно вырезали и освобождали от посторонней ткани. Влажную массу хлопка измеряли сразу после удаления, а затем сушили до постоянного веса при 60 ° C в течение 24 часов и определяли чистый сухой вес, то есть после вычитания веса ватных шариков.

Мера образования экссудата = Непосредственная влажная масса гранул — Постоянная сухая масса гранул

Мера образования ткани гранулемы = Постоянный сухой вес — Начальный вес ватного шарика

Количество экссудата (мг), образование грануляционной ткани (мг), процент ингибирования образования экссудата и гранулемной ткани рассчитывали по формуле, описанной ниже. 31

Фитохимический скрининг фракций растворителя

Предварительный фитохимический скрининг вторичных метаболитов водной, н-бутанольной и хлороформной фракций 80% метанольного экстракта листьев A. aspera проводили с использованием стандартных тестов. 32,33

Тест на сапонины

К 0,25 г каждой фракции (AF, BF и CF) добавляли 5 мл дистиллированной воды. Затем раствор энергично встряхивали и наблюдали наличие устойчивой устойчивой пены.Образование устойчивой пены, которая держалась около получаса, указывало на присутствие сапонинов.

Тест на терпеноиды

К 0,25 г каждой фракции добавляли 2 мл хлороформа. Затем осторожно добавляли 3 мл концентрированной серной кислоты для образования слоя. Красновато-коричневый цвет поверхности раздела указывает на присутствие терпеноидов.

Тест на танины

Около 0,25 г каждой фракции кипятили в 10 мл воды в пробирке и затем фильтровали через фильтровальную бумагу (Whatman No.1). К фильтрату добавляли несколько капель 0,1% хлорида железа. Коричневато-зеленый или сине-черный осадок указывал на присутствие дубильных веществ.

Тест на флавоноиды

Около 10 мл этилацетата добавляли к 0,2 г каждой фракции и нагревали на водяной бане в течение 3 минут. Смесь охлаждали и фильтровали. Затем отбирали около 4 мл фильтрата и встряхивали с 1 мл разбавленного раствора аммиака. Слоям давали возможность разделиться, и желтый цвет в слое аммиака указывал на присутствие флавоноидов.

Тест на сердечные гликозиды

К 0,25 г каждой фракции, разбавленной 5 мл воды, добавляли 2 мл ледяной уксусной кислоты, содержащей одну каплю раствора хлорида железа. Под ним был нанесен 1 мл концентрированной серной кислоты. Коричневое кольцо на границе раздела указывает на присутствие дезоксисахара, характерного для карденолидов.

Тест на стероиды

Два мл уксусного ангидрида добавляли к 0,25 г каждой фракции с 2 мл серной кислоты. Изменение цвета с фиолетового на синий или зеленый в некоторых образцах указывало на присутствие стероидов.

Тест на алкалоиды

Несколько капель свежеприготовленного реактива Майера добавляли к 0,5 г каждой фракции. Образование крема считалось положительным на присутствие алкалоидов.

Анализ данных

Данные были проанализированы с помощью SPSS версии 20.0 для Windows. Экспериментальные результаты были выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM), и тесты статистической значимости были выполнены с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки для множественных сравнений для сравнения результатов между группами; p-значения <0.05 считались статистически значимыми. Затем проанализированные данные были представлены в виде таблиц и рисунков.

Результаты

Тест на острую оральную и кожную токсичность

Результаты испытаний на острую оральную и кожную токсичность фракций (AF, BF и CF) 80% экстракта листьев метанола A. aspera показывают, что фракции растворителя не показали серьезных изменений поведения, кожных токсических эффектов или смертности в течение 24 дней. часов или в течение следующих 14 дней. Согласно «Тесту на предельные значения» директивы ОЭСР 425, 18 пероральная ЛД 50 фракций растворителей у крыс превышала 2000 мг / кг.

Оценка активности заживления ран

Крысы, получавшие мази хлороформной и н-бутанольной фракций, показали заживление ран на модели иссеченной раны. Процент сокращения ран у крыс, получавших 10% -ную мазь хлороформной фракции, был значительным (p <0,01) в большинстве дней после ранения по сравнению с отрицательным контролем (Таблица 2 и Рисунок 2) и уменьшенным периодом эпителизации. (Таблица 3). Сокращение раны в группе, обработанной мазью фракции хлороформа 10% мас. / Мас., Было сравнимо с таковым в группе положительного контроля (NF 0.2%) в большинстве дней после ранения. На 8-й день они составили 44,96% и 47,59%; 97,85 и 98,17% на 16 день; 99,37 и 99,56% на 18-е сутки; 99,92 и 99,95% на 20-й день для мазей 10 мас.% CF и 0,2% NF соответственно. С другой стороны, крысы, получавшие 5% мас. И 10% мас. / Мас. Мази из водных и н-бутанольных фракций, показали статистически незначительную активность заживления ран по сравнению с отрицательным контролем до четвертого дня. Кроме того, все мази фракции 5% мас. / Мас. Показали статистически незначимое сокращение раны до шестого дня.Наблюдалась значительная разница в сокращениях ран между крысами, получавшими мази трех фракций. Однако мазь CF с 5% массой вызвала значительное заживление ран на восьмой день и выявила значительную разницу в сокращении ран по сравнению с 5% массой AF и простыми мазями (p <0,01) на 16, 18 и 20 дни. сокращение группы, получавшей 10% мазь CF, показало значительную активность заживления ран по сравнению с 5% и 10% AF и BF на четырнадцатый день.Таким образом, CF является наиболее активной фракцией, о чем свидетельствует более высокий процент сокращения раны и сокращенный период эпителизации (Рисунок 2, Таблицы 2 и 4).

Таблица 2 Влияние фракций растворителя 80% -ного экстракта листьев метанола из A. aspera на процент сокращения ран у крыс

Таблица 3 Влияние местного применения фракций растворителей 80% -ного экстракта листьев метанола A.aspera о периоде эпителизации (количество дней) после создания ран у крыс

Таблица 4 Влияние мазей фракции растворителей, содержащих 80% -ный метанольный экстракт листьев A. aspera , на прочность на разрыв у крыс

Рисунок 2 Иссеченная рана у крыс, обработанных мазями фракции растворителей из листьев A.aspera у крыс.

В модели разрезанной раны группы, получавшие 5% и 10% мази трех фракций, показали значительное (p <0,01) увеличение прочности на разрыв по сравнению с контрольными группами (простая мазь лечится и не лечится). Предел прочности на разрыв был значительно увеличен мазями CF 0,2% и 10% масс. По сравнению с мазями AF, BF и CF с 5% масс. (P <0,01). Прочность на разрыв, зарегистрированная в группе, обработанной 10% -ной фракцией н-бутанола, была статистически значимой по сравнению с группой, обработанной 5% -ной водной фракцией (Таблица 4) (p 0.01).

Противовоспалительная активность

Субподошвенная инъекция 0,05 мл 1% каррагинана в левую заднюю лапу крысы вызвала постепенное увеличение толщины лапы, которое достигло максимального значения через 2 часа после индукции 2% Tween 80 (отрицательный контроль) (таблица 5). Все испытанные дозы фракции хлороформа показали значительное ингибирование отека лапы, начиная с 1 часа, и эффект продолжался до 4 часов после индукции по сравнению с 2% Tween 80 (p <0,01). Максимальный противовоспалительный эффект (% ингибирования) в дозах 100, 200 и 400 мг / кг CF наблюдался через 4 часа после индукции с соответствующими значениями 31.85%, 51,25% и 52,5% в зависимости от дозы (R 2 = 0,891). Сравнение доз CF с другими фракциями также показало значительные различия. Например, как средняя, ​​так и самая высокая дозы CF показали значительно иной эффект по сравнению с 100 мг AF (p <0,01) через 1, 2, 3 и 4 часа. Дозы AF 200 и 400 мг / кг показали статистически значимое ингибирование отека лапы через 2 и 1 час после индукции по сравнению с 2% Tween 80, соответственно (p <0.01). Эффект от обоих уровней доз затем значительно сохранялся через 3 и 4 часа после индукции по сравнению с 2% Tween 80 и 100 мг / кг AF (p <0,01). Однако AF 100 мг / кг не продемонстрировал значительного ингибирования отека лапы по сравнению с 2% Tween 80 в течение всего периода наблюдения, за исключением 4 часов после индукции. Максимальный процент ингибирования всеми испытанными дозами AF наблюдался через 4 часа после индукции с соответствующими значениями 22,50%, 45,00% и 45,83% в зависимости от дозы (R 2 = 0.881). Сравнение доз BF также показало значительный противовоспалительный эффект. Следовательно, как средние, так и самые высокие дозы BF показали статистически разные эффекты по сравнению с AF 100 мг / кг через 3 часа и 1 час после индукции (p <0,01), соответственно, и эффекты сохранялись до 4 часов после индукции.

Таблица 5 Противовоспалительное действие фракций растворителя экстракта листьев 80% метанола из A. aspera на индуцированный каррагинаном отек лапы у крыс

Значительное ингибирование отека лапы произошло с 10 мг / кг индометацина с первых t часов до четвертого часа после инъекции каррагинана по сравнению с 2% Tween 80 (p <0.01). Более того, не наблюдалось различий в начале и продолжительности действия для всех испытанных доз CF и 200, 400 мг / кг BF, поскольку все они показали значительное ингибирование отека лапы с первого часа до четвертого часа после индукции (p <0,01 ). Тем не менее, на протяжении всего наблюдения и 200, и 400 мг / кг CF показали сопоставимый противовоспалительный эффект с 10 мг / кг индометацина. CF была наиболее активной фракцией, о чем свидетельствует более высокий процент ингибирования отека (%) значений всех испытанных доз CF на протяжении периода наблюдения по сравнению с эквивалентными дозами BF и AF (Таблица 5).Максимальное процентное ингибирование во всех испытанных дозах BF также наблюдалось через 4 часа после индукции с соответствующими значениями 39,16%, 42,50% и 45,0% в зависимости от дозы (R 2 = 0,997).

Фракция хлороформа (CF) и фракция н-бутанола (BF) при всех испытанных дозах значительно подавляли образование воспалительного экссудата и массы гранулемы (p <0,01) по сравнению с 2% Tween 80. Сравнение доз CF с другими дозами группы показали значительно разные эффекты при дозе 400 мг по сравнению с 100 и 200 мг / кг AF и BF (p <0.01) при подавлении экссудата и гранулемы. Фракция хлороформа также показала статистически значимую противовоспалительную активность даже при самых низких и средних дозах по сравнению с 100 и 200 мг / кг AF (p <0,01) при ингибировании как экссудата, так и гранулемы). Кроме того, было обнаружено, что противовоспалительный эффект CF возрастает в зависимости от дозы (R 2 = 1 для ингибирования экссудата; R 2 = 0,994 для ингибирования гранулемы). Максимальный процент ингибирования образования экссудата и гранулемы был отмечен 400 мг / кг CF (37.50 и 52,81%) соответственно по сравнению со всеми другими дозами CF, BF и AF.

Фракция н-бутанола показала сравнимые эффекты при всех испытанных дозах в ингибировании образования экссудата и гранулем, вызванного ватными шариками. Межгрупповые сравнения доз BF выявили статистически значимое различное ингибирование образования экссудата и гранулемы при дозах 400 мг и 100 мг / кг AF, BF и CF (p <0,01). Кроме того, было установлено, что противовоспалительный эффект BF увеличивается в зависимости от дозы (R 2 = 0.988 для подавления экссудата; R 2 = 0,981 для ингибирования гранулемы).

Только средняя и самая высокая дозы водной фракции (AF) значительно ингибировали образование как воспалительного экссудата, так и массы гранулемы по сравнению с 2% Tween 80 (p <0,01). Дозозависимая активность наблюдалась также при AF (R 2 = 0,972 для ингибирования экссудата; R 2 = 0,993 для ингибирования гранулемы). Однако самая низкая доза AF не показала значительного ингибирования образования экссудата.

Стандартный препарат, 10 мг / кг индометацина, значительно подавлял образование как экссудатов, так и гранулемы (39,31 и 53,10%), соответственно, по сравнению с 2% Твин 80. Статистически значимая разница была отмечена, когда все дозы трех фракций сравнивали с 2% Tween 80 с точки зрения ингибирования гранулемы (p <0,01). Прием 400 мг / кг как CF, так и BF показал сопоставимое ингибирование образования экссудата со стандартным лекарственным средством. Но фракция хлороформа была наиболее активной фракцией в ингибировании образования экссудата и массы гранулемы, о чем свидетельствует более высокий процент ингибирования (Таблица 6).

Таблица 6 Влияние фракций растворителя 80% -ного экстракта листьев метанола из A. aspera на гранулемы, вызванные хлопковыми пеллетами, у крыс

Обсуждение

Было доказано, что лечебные травы полезны при лечении ран. Лекарственные растения способствуют быстрому заживлению ран с минимальной болью, дискомфортом и рубцами для пациента. 34 Составы мазей из лекарственных растений могут способствовать заживлению ран. 35 Это усиленное сокращение раны мазями с неочищенным экстрактом может быть связано со способностью экстрактов растений способствовать пролиферации эпителиальных клеток. 36

Мази, приготовленные из фракций растворителей, имели различную активность заживления ран в модели иссеченной раны. У крыс, получавших мазь хлороформной фракции, наблюдалась быстрая скорость сокращения и уменьшение периода эпителизации. Результаты этого исследования по ранозаживляющей активности CF и n-BF 80% метанольного экстракта листьев A.aspera показала значительно увеличенную скорость сокращения раны в большинстве дней после раны (p <0,01) и уменьшение периода эпителизации (p <0,01). Это может быть связано с вторичными метаболитами (таблица 7). 37,38 Вторичные метаболиты могут способствовать заживлению ран либо индивидуально, либо за счет их дополнительных эффектов. 39 Танины ускоряют заживление ран за счет улучшения регенерации и организации новой ткани благодаря своим вяжущим и антиоксидантным свойствам. 29,39 Флавоноиды уменьшают перекисное окисление липидов, предотвращая или замедляя наступление некроза клеток и улучшая кровоснабжение, а также обладают вяжущими и антимикробными свойствами. 27,40

Таблица 7 Предварительный фитохимический скрининг фракций растворителя 80% метанольного экстракта листьев A. aspera

В процессе заживления ран чаще всего возникает инфекция от S.aureus и анаэробные бактерии могут продлить воспалительную фазу раны и, таким образом, привести к неудаче заживления раны. 2,41 Исследование in vitro формы хлороформа и метанола экстрактов корней и побегов A. aspera показало значительную активность против видов Klebsiella , что может подтвердить результаты текущего исследования. 11 Было также показано, что танины, обнаруженные в хлороформном экстракте A. aspera , подавляют рост бактерий. 42

Тритерпиноидные сапонины вызывают разрушение мембран бактериальных клеток. 43 Следовательно, увеличенное сокращение раны и уменьшенный период эпителизации в группах, получавших CF и n-BF, сравнивали с группами, получавшими AF и SO (простую мазь). Флавоноиды также могут способствовать заживлению ран благодаря своей вяжущей и антибактериальной активности. Ндхлала сообщил, что флавоноиды, рутин, хлорогеновая кислота и генистеин, обнаруженные в A. aspera , обладают противомикробным действием, которое может способствовать заживлению ран. 12

В группе, получавшей SO, наблюдался продолжительный период реструктуризации эпителия и закрытия ран.Но фракции растворителя 80% -ного экстракта листьев метанола A. aspera и 0,2% обработанных NF раны были чистыми со здоровыми тканями. Это может быть связано с наличием микроорганизмов и их метаболитов в группе, получавшей SO, которые ингибируют сокращение раны и ослабляют активность заживления ран.

Повышенная прочность на разрыв может быть связана с синтезом коллагена, созреванием, ангиогенезом и стабилизацией волокон. 44 Таким образом, фракции могут играть роль в синтезе, созревании и стабилизации коллагена.Следовательно, антиоксидантные и противомикробные свойства фитохимических веществ, обнаруженные во фракциях, могут ускорить процесс заживления ран. Например, флавоноиды являются мощными антиоксидантами и поглотителями свободных радикалов, которые предотвращают окислительное повреждение клеток. 45,46 Характер гидроксилирования и алкоксилирования флавоноидов играет важную роль в определении их активности как антиоксидантов. 47

В предыдущем исследовании сообщалось, что богатый сапонином n-BF всего растения A.aspera продемонстрировала значительное ингибирование провоспалительных клеток и улучшение окислительного стресса, возможно, из-за прямого антиоксидантного эффекта сапонина в сочетании с улучшением защиты организма, опосредованной естественными антиоксидантными ферментами. 48

Настоящее исследование in vivo показало, что фракции растворителей 80% метанольного экстракта листьев A. aspera обладают противовоспалительной активностью на модели индуцированного каррагинаном отека лапы у крыс. Доза 100 мг / кг AF не показала значительной противовоспалительной активности через 1, 2 и 3 часа после инъекции каррагинана, но процент ингибирования воспаления был максимальным через 4 часа после того, как воспаление было вызвано.Все тестовые дозы фракции хлороформа продемонстрировали значительную противовоспалительную активность во все моменты времени при различных процентах ингибирования (p <0,01), но самый высокий процент подавления отека наблюдался при дозе 400 мг / кг (52,50%) через 4 часа после индукции ( р <0,01). Это соответствует противовоспалительной активности in vitro хлороформной фракции листьев A. aspera . 49 Более низкие дозы 100 мг / кг AF и BF также проявляют подавление отека, но не способны достичь значительного уровня.Это может быть связано с недостаточной концентрацией активного компонента в более низкой дозе фракций. Наблюдаемое подавление отека было заметным в более поздней фазе воспаления, что было аналогично эффекту нестероидных противовоспалительных препаратов, таких как индометацин, что указывает на то, что противоотечная активность, возможно, опосредуется путем ингибирования фермента циклооксигеназы. 50

Противовоспалительное действие фракций, возможно, связано с активностью вторичных метаболитов.Флавоноиды значительно подавляют ряд медиаторов воспаления и препятствуют синтезу простагландинов. 51 Achyranthes aspera также содержит алкалоиды и проявляет противовоспалительную активность. 52 Алкалоиды предотвращают воспаление, блокируя метаболический путь арахидоновой кислоты. Об этом свидетельствует антиоксидантное и антиканцерогенное действие фракций алкалоидов листьев A. aspera . 53 Это могло быть возможной причиной самого высокого процентного ингибирования воспаления хлороформной фракцией в модели индуцированного каррагенаном отека задней лапы.

В модели гранулемы, вызванной ватным шариком, все испытанные дозы фракций растворителей 80% метанольного экстракта листьев A. aspera показали статистически значимое ингибирование образования как экссудата, так и гранулемы. В этой модели все испытанные дозы CF также показали значительное ингибирование образования гранулемы. Значительный ингибирующий эффект A. aspera на образование экссудатов (p <0,01) (таблица 6) подтверждает результаты модели острой фазы, вызванной каррагинаном, т.е. оба результата усиливают эффективность CF в ингибировании экссудативного и пролиферативного компонентов. воспаления.С другой стороны, статистически значимое ингибирование образования гранулемы (p <0,01) объясняет эффективность этой фракции в ингибировании пролиферативной фазы воспаления, о чем свидетельствует самый высокий процент ингибирования гранулемы (52,81%).

Общий порядок эффективности ингибирования экссудативной фазы острого воспаления, о чем свидетельствует процентное ингибирование каррагинан-индуцированного отека лапы крысы в ​​острой модели и клеточный ответ пролиферативной фазы воспаления, что подтверждается процентным содержанием экссудата и ингибирование гранулемы в хронической модели оказалось CF> BF> AF.Следовательно, количество фитохимических веществ в CF может быть самым высоким и наиболее эффективным для подавления острой и хронической фаз воспаления.

В заключение, все три фракции обладают ранозаживляющей и противовоспалительной активностью, из которых фракция хлороформа была наиболее активной. Также было замечено, что присутствовали биологически активные компоненты, которые могли отвечать за активность. Однако для подтверждения настоящих выводов требуется дальнейшее расследование.

Раскрытие информации

Авторы сообщили об отсутствии конфликта интересов в этой работе.

Список литературы

1. Фарахпур М.Р., Хабиби М. Оценка ранозаживляющей активности спиртового экстракта цейлонской корицы у мышей. Вет Мед (Прага) . 2012. 57 (1): 53–57. DOI: 10.17221 / 4972-VETMED

2. Боулер П.Г., Дэвис Б.Дж. Микробиология инфицированных и незараженных язв ног. Инт Дж Дерматол . 1999. 38 (8): 573–578. DOI: 10.1046 / j.1365-4362.1999.00738.x

3. Bowler PG. Патофизиология ран, инфекции и варианты лечения. Энн Мед . 2002. 34 (6): 419–427. DOI: 10.1080 / 078538

1012360

4. Лазарус Г.С., Купер Д.М., Найтон Д.Р. и др. Определения и рекомендации по оценке ран и оценке заживления спины. Дерматол Арки . 1994; 130: 489–493. DOI: 10.1001 / archderm.1994.016

093015

5. Гарг П., Сардана С. Фармакологические и терапевтические эффекты ocimum sanctum. Eur J Pharm Med Res . 2016; 3 (8): 637–640.

6. Mittal S, Dixit PK. Международный журнал комплексных фармацевтических натуральных средств для заживления ран: литературный обзор. Инт Дж. Компр Фарм . 2013; 04 (03): 1–6.

7. Теклехайманот Т., Гидай М., Медхин Г., Меконнен Ю. Знание и использование лекарственных растений людьми вокруг монастыря Дебре Либанос в Эфиопии. Дж. Этнофармакол . 2006; 13.

8. Дей А. Обзорная статья Achyranthes aspera L: фитохимические и фармакологические аспекты. Int J Pharm Sci Rev Res . 2011; 9 (2): 72–82.

9. Бегум РУ. Антимикробные свойства некоторых избранных лекарственных растений. Анк Научная Жизнь .2002; XXI (4): 230–239.

10. Джебашри Х.С., Кингсли С.Дж., Сатиш Е.С., Деваприя Д. Противомикробная активность нескольких лекарственных растений против клинически изолированных кариесогенных патогенов человека — исследование in vitro. Int Sch Res Netw . 2011; 2011: 6.

11. Каур М., Такур Й., Рана Р. Антимикробные свойства Achyranthes aspera. Анк Научная Жизнь . 2005. 24 (4): 168–173.

12. Ndhlala AR, Ghebrehiwot HM, Ncube B, et al. Антимикробная, глистогонная активность и характеристика функциональных фенольных кислот Achyranthes aspera Linn.: лекарственное растение, используемое для лечения ран и стригущего лишая в Восточной Африке. Фронт Pharmacol . 2015; 6 (ноя): 1–8. DOI: 10.3389 / fphar.2015.00274

13. Рао Д.С., Пенматса Т., Кумар А.К., Редди М.Н., Гаутам Н.С. Антибактериальная активность водных экстрактов индийских жевательных палочек на зубном налете: исследование in vitro. Дж Фарм . 2018; 6 (Приложение 1): s140–5.

14. Национальный ачадамский совет. Комитет по обновлению Руководства по уходу и использованию лабораторных животных.Руководство по уходу и использованию лабораторных животных . 8-е изд. Вашингтон, округ Колумбия: Национальная ачадампийская пресса; 2011: 248.

15. Калайванан Ч., Чандрасекаран М., Венкатесалу В. Скрининг отобранных лекарственных растений на антидерматофитную активность in vitro. J Mycol Med . 2013. 23 (4): 247–254. DOI: 10.1016 / j.mycmed.2013.09.004

16. Саркер С., Латиф З., Грей А.И. 2005. Nat Products Isolation Springer Sci Business Media . 2005; 2005.

17. Фентахун С., Маконнен Э., Авас Т., Гидай М.Противомалярийная активность сырых экстрактов и фракций растворителей листьев Strychnos mitis in vivo у мышей, инфицированных Plasmodium berghei. BMC Complement Altern Med . 2017; 1–12. DOI: 10.1186 / s12906-016-1529-7

18. Руководство OECD по тестированию химических веществ. 2008.

19. Руководство OECD 404 по тестированию химических веществ: острое раздражение кожи / коррозия, 2002 г. Принято: 2017. Руководство OECD 402 по тестированию химических веществ. Острая токсичность для окружающей среды: процедура с фиксированной дозой; 2017 г.Доступно по адресу: http://www.oecd.org/termsandconditions/. По состоянию на 23 апреля 2021 г.

20. Тхакур Р., Джайн Н., Патхак Р., Сандху СС. Практики изучения заживления ран растений. Доказательная дополнительная и альтернативная медицина: eCAM . 2011; 2011. DOI: 10.1155 / 2011/438056

21. Нагар Х.К., Шривастава А.К., Шривастава Р., Курми М.Л., Чандель Х.С., Ранават М.С. Фармакологическое исследование ранозаживляющей активности Cestrum nocturnum (L.). Мазь в Wistar Albino Rats J Pharm .2016; 2016: 8.

22. Shivhare Y, Singour PK, Patil UK, Pawar RS. Ранозаживляющий потенциал метанольного экстракта Trichosanthes dioica Roxb (плоды) у крыс. Дж. Этнофармакол . 2010. 127 (3): 614–619. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.12.015

23. Лю Х, Лин С., Сяо Д., Чжэн Х, Гу И, Го С. Оценка потенциала заживления ран Resina draconis (Dracaena cochinchinensis) на животных моделях Оценка потенциала заживления ран Resina Draconis (Dracaena cochinchinensis) в моделях на животных. Доказательное дополнение Альтернативная медицина . 2013; 2014; (май: 30. doi: 10.1152 / ajplegacy.1975.229.3.570

24. Павар Р.С., Чаурасия П.К., Раджак Х., Сингур П.К. Ранозаживляющая активность Sida cordifolia Linn. крыс . 2013. 45 (5): 474–479.

25. Ван Дж, Жуань Дж, Цай Й, Ло Кью, Сюй Х, Ву Й. Оценка in vitro и in vivo ранозаживляющих свойств Siegesbeckia pubescens. Дж. Этнофармакол . 2011. 134 (3): 1033–1038. DOI: 10.1016 / j.jep.2011.02.010

26.Иланго К., Читра В. Заживление ран и антиоксидантная активность мякоти плодов Limonia Acidissima Linn (Rutaceae) у крыс. Троп Дж. Фарм Рес . 2010; 9 (июнь): 223–230. DOI: 10.4314 / tjpr.v9i3.56281

27. Фикру А., Маконнен Э., Эгуале Т., Дебелла А., Аби Г. Оценка in vivo ранозаживляющей активности метанольного экстракта Achyranthes aspera L. J Ethnopharmacol . 2012. 143 (2): 469–474. DOI: 10.1016 / j.jep.2012.0

28. Mulisa E, Asres K, Engidawork E. Оценка заживления ран и противовоспалительной активности корневищ Rumex abyssinicus J.(Polygonaceae) у мышей. BMC Complement Altern Med . 2015; 15: 341. DOI: 10.1186 / s12906-015-0878-y

29. Айал Г., Белай А., Кахалив В. Оценка заживления ран и противовоспалительной активности листьев Calpurnia aurea (ait.) Benth (fabaceae) у мышей. Биохим Фармакол . 2019; 100151. DOI: 10.1016 / j.wndm.20

30. Афсар К., Раджеш Кумар Дж., Вену Гопал ПР. Оценка противовоспалительной активности листьев Artemisia vulgaris методом гранулемы хлопковых пеллет на крысах-альбиносах wistar. J Pharm Res . 2014; 1: 547.

31. Азиз Т.А., Маруф Б.Х., Ахмед З.А., Хуссейн С.А. Противовоспалительная активность силибинина на животных моделях хронического воспаления. Am J Pharmacol Sci . 2014; 2 (январь): 7–11.

32. Sasidharan S, Chen Y, Saravanan D, et al. Экстракция, выделение и характеристика биологически активных соединений из экстрактов растений Институт исследований в области молекулярной медицины (ИНФОРМ), Университет Саинс Малайзия, Минден 11800. African J Tradit Complement Altern Med .2011; 8: 1–10.

33. Ayoola GA, Coker HAB, Adesegun SA, et al. Фитохимический скрининг и антиоксидантная активность некоторых выбранных лекарственных растений, используемых для лечения малярии в Юго-Западной Нигерии. Троп Дж. Фарм Рес . 2008; 7 (сентябрь): 1019–1024.

34. Шульц Г.С., Сиббальд Р.Г., Фаланга В. и др. Подготовка раневого ложа: систематический подход к лечению ран. Рег. Представителя раны . 2003. 11 (2): 1–28. DOI: 10.1046 / j.1524-475X.11.s2.1.x

35. Zeng Q, Xie H, Song H, et al.Ранозаживляющая активность экстракта Abrus cantoniensis in vivo. Доказательное дополнение Альтернативная медицина . 2016; 2016: 7. DOI: 10.1155 / 2016/6568528

36. Гебрехивот М., Асрес К., Бисрат Д., Мазумдер А., Линдеманн П., Букар Ф. Оценка способности заживления ран Commiphora guidottii Chiov. BMC Complement Altern Med . 2015; 15 (1): 1–11. DOI: 10.1186 / s12906-015-0813-2

37. Кришнавени А., Тхакур С.Р. Фармакогностические и предварительные фитохимические исследования ахирантеса. Анк Научная Жизнь . 2006; XXVI (1-2): 1-5.

38. Меконнен А., Сидамо Т., Асрес К., Энгидаворк Э. Активность заживления ран in vivo и фитохимический скрининг неочищенного экстракта и различных фракций листьев каланхоэ петитианского A. Rich (Crassulaceae) у мышей. Дж. Этнофармакол . 2013. 145 (2): 638–646. DOI: 10.1016 / j.jep.2012.12.002

39. Агьяре С., Бемпа С.Б., Боакье Ю.Д., Аянде П.Г., Адарква-йадом М., Менсах КБ. Оценка противомикробного и ранозаживляющего потенциала Justicia flava и Lannea welwitschii. Доказательное дополнение Альтернативная медицина . 2013; 2013: 1–10. DOI: 10.1155 / 2013/632927

40. Талукдер Ф.З., Хан К.А., Уддин Р., Джахан Н., Алам А. Улавливание свободных радикалов и антигипергликемическая активность экстракта Achyranthes aspera in vitro у мышей с аллоксан-индуцированным диабетом. Лекарство Discov Therapeutics . 2012. 6 (6): 298–305.

41. Або А, Олугбуиро ДжАО, Фамакинде С.А. Противоинфекционные и ранозаживляющие свойства flabellaria paniculata. African J Biomed Res .2004. 7: 85–87.

42. Хан Т.Дж., Аббас Г., Ахмад Б. и др. Антибактериальная активность вакуумно-жидкостной хроматографии (ВЖХ) выделенных фракций хлороформных экстрактов семян ахирантеса аспера. Дж. Хим Соц Пакистан . 2012. 34 (3): 589–592.

43. Нетала В.Р., Гош С.Б., Боббу П., Анита Д., Тартт В. Тритерпеноидные сапонины: обзор биосинтеза, применения и механизма их действия. Int J Pharm Pharm Sci . 2015; 7 (1): 24–28.

44. Мурти К., Кумар У.Улучшение заживления ран корнями Ficus racemosa L. у крыс-альбиносов. Азиатский Пак Дж. Троп Биомед . 2012. 2 (4): 276–280. DOI: 10.1016 / S2221-1691 (12) 60022-7

45. Арун М., Сатиш С., Анима П. Оценка заживления ран, антиоксидантной и противомикробной эффективности Jasminum auriculatum Vahl. Leaves Avicenna J Phytomedicine . 2016; 6 (3): 295–304.

46. Raut BK. Изучение антиоксидантной активности, содержания минералов и общего витамина С в стебле, листьях и колосе соцветий Ahyranthes aspera var. Porphyrostachya Int J Phytopharm . 2013. 4 (4): 241–244.

47. Шарма В., Чаудхари У, Сингх Р., Джанмеда П. Оценка количественной и антиоксидантной активности корней и соцветий Achyranthes aspera. Азиатская фармацевтическая компания J . 2014; 8 (1): 1–7. DOI: 10.4103 / 0973-8398.134085

48. Котаваде П.С., Булани В.Д., Нагмоти Д.М., Дешпанде П.С., Гавали Н.Б., Джувекар А.Р. Терапевтический эффект богатой сапонином фракции Achyranthes aspera Linn. на индуцированный адъювантом артрит у крыс Sprague-Dawley. Aoutoimune Dis . 2015; 2015: 8.

49. Худа Ф., Икбал З., Хан А., Шах Й., Ахмад Л. Оценка противовоспалительной активности отдельных лекарственных растений Хайбер-Пахтунхва, Пакистан. Пак Дж. Фарм. Sci . 2014; 27 (июль): 365–368.

50. Берк А., Смит Э., Фитцджеральд Г.А. Обезболивающее — жаропонижающие средства, фармакотерапия козы. Goodman Gilman’s Pharmacolo Basis Therapeutics . 2006: 671–715.

51. Совемимо А., Онакоя М., Фагейинбо М.С., Фадоджу Т.Исследования противовоспалительных и антиноцицептивных свойств листьев Blepharis maderaspatensis. Бразильский J Pharmacogn . 2013. 23 (5): 830–835. DOI: 10.1590 / S0102-695X2013000500016

52. Гоял Б.Р., Махаджан С.Г., Гоял РК, Мехта А.А., Аптека LMC. Благотворное действие Achyranthes apsera Linn. в индуцированной толуол-ди-изоцианатом профессиональной астме у крыс. Фармакология . 2007; 2: 54.

53. Тахилиани П., Кар А. Achyranthes aspera повышает уровень гормонов щитовидной железы и снижает перекисное окисление липидов в печени у самцов крыс. Дж. Этнофармакол . 2000. 71 (3): 527–532. DOI: 10.1016 / S0378-8741 (00) 00170-7

Противомикробный и противовоспалительный потенциал экстракта Angelica dahurica и Rheum officinale ускоряет заживление ран, инфицированных Staphylococcus aureus

Приготовление ARE

Экстракты A. dahurica и R. officinale получали, как описано ранее 15 . Китайские лекарственные порошки A. dahurica и R.officinale были приобретены у Hou-Chuia Biopharm Co., Ltd., город Тайнань, Тайвань. Первоначально 50 г каждого порошка отдельно добавляли к 400 мл 70% этанола, и смесь нагревали при 70 ° C в течение 24 часов. После экстракции отвар центрифугировали при 10000 × г в течение 15 минут и супернатанты концентрировали при пониженном давлении для удаления всего этанола. Экстракты A. dahurica и R. officinale автоклавировали, смешивали вместе в равных объемах и обозначили как ARE.

Количественный анализ активных компонентов в ARE

Количественный анализ возможных активных компонентов в ARE, алоэ-эмодине, хризофаноле, эмодине, физсионе, реине и псоралене был предоставлен Herbiotek Co., Ltd., Нью-Тайбэй, Тайвань. . Перед анализом 20 миллилитров ARE фильтровали через мембраны 0,22 мкм. Система ВЭЖХ Waters (Милфорд, Массачусетс, США) включала насосную систему Waters 600, матричный фотодиодный детектор Waters 2996, автосамплер Waters 717 plus и колоночную печь Sugai U-620 (Вакаяма, Япония).Колонка с обращенной фазой Cosmosil 5C18-MS-II (5 мкм, 4,6 мм × 250 мм, Nacalai Tesque, Япония), оснащенная защитной колонкой LiChrospher RP-18 с концевой крышкой (5 мкм, 4,0 мм × 10 мм, Merck, Германия). используется как стационарная фаза. Градиентное элюирование состояло из 10 мМ фосфатного буфера, ацетонитрила и воды. Скорость потока составляла 1 мл / мин, а температура колонки поддерживалась на уровне 35 ° C. УФ 246 нм использовали для обнаружения псоралена (изомер фуранокумарина) со временем удерживания 14,5 мин. УФ 270 нм использовали для обнаружения алоэ-эмодина, реина, эмодина, хризофанола и физсиона со временем удерживания 89.1, 94,1, 107,4, 114,9 и 118,1 мин соответственно. Данные представлены в виде концентрации (мкг / мл) каждого компонента в ARE.

Тест на чувствительность к противомикробным препаратам

Тест диффузии диска был проведен в соответствии со стандартом CLSI для проверки антимикробного эффекта ARE. Метод использовался в соответствии с нашим предыдущим исследованием 15 . S. aureus ATCC 29213 (Центр сбора и исследования биоресурсов, BCRC, Синьчжу, Тайвань) культивировали в триптическом соевом бульоне (Becton, Dickinson and Company, США) при 37 ° C до достижения логарифмической фазы, а мутность регулировали с помощью бульон до достижения 0.5 Стандарт МакФарланда (приблизительно 10 8 КОЕ / мл). Автоклавированные диски из фильтровальной бумаги диаметром 6 мм (Advantec Grade Number 1) пропитывали 10 мкл ARE (приблизительно 11,02 ± 0,22 мкг / диск твердого экстракта) и сушили при комнатной температуре. Посевные материалы (~ 10 7 клеток) наносили на агар Мюллера-Хинтона (Becton, Dickinson and Company, США), а затем диски помещали на агар. Диски, содержащие дистиллированную воду, использовали в качестве отрицательного контроля (бланк). Результаты выражали как среднее значение ± стандартная ошибка (стандартная ошибка) диаметров (мм) зоны ингибирования, измеренных после инкубации в течение ночи.

Животные

Тридцать здоровых взрослых крыс-самцов Sprague Dawley (возраст: 8-10 недель, вес: 300-350 г) были приобретены в Национальном центре лабораторных животных (Тайбэй, Тайвань). Крыс содержали в стандартных клетках в помещении с контролируемой влажностью и температурой (55% ± 15%; 22 ° C ± 1 ° C) с 12-часовым циклом свет-темнота и получали стандартные количества пищи и воды. Этот протокол исследования был одобрен Комитетом по уходу и использованию животных Университета Цзы Чи (IACUC №: 104084).Все эксперименты проводились в соответствии с соответствующими руководящими принципами и правилами IACUC.

Модель эксцизионной раны с бактериальной инфекцией

Крыс анестезировали путем введения ингаляционного изофлурана. Когда крысы находились под наркозом, в правую бедренную артерию вставляли полиэтиленовый катетер (РЕ-50) для сбора образцов крови; впоследствии на спине каждой крысы создавали иссеченную кожную рану на всю толщину (площадь: 20 × 10 мм 2 , глубина: 2 мм).После создания раны 10 8 колониеобразующих единиц (КОЕ) S. aureus были инокулированы в область раны, и рана была покрыта кусочком стерильной марли размером 20 × 10 мм 2 на 24 часа. h для создания модели раневой инфекции. После завершения операции крыс по отдельности помещали в метаболические клетки (Shingshieying Instruments, Hualien, Taiwan) на 48 часов, и ректальный зонд вводили в прямую кишку крыс для непрерывной регистрации температуры тела (BT) с использованием температуры прибор для мониторинга и записи (MV2000, Yokogawa Electric Corporation, Токио, Япония).После 48 часов регистрации и отбора проб БТ крыс помещали индивидуально в стандартные клетки.

Обработка раны и измерение

Крыс случайным образом разделили на три группы: NS (контрольная группа, обработанная физиологическим раствором), ARE (обработанная ARE) и BO (обработанная мазью с биомицином). Через 24 часа после инфицирования кусочки марли удаляли, а раны осторожно очищали стерильными тампонами NS. Примерно 0,2 мл NS, ARE и BO (CBC Biotechnological & Pharmaceutical Co., Ltd. New Taipei City, Тайвань) наносили местно на раны, и на раны накладывали новые стерильные кусочки марли и перевязки. Процедуры применялись один раз в день в течение 7 дней. Фотографии ран делали с помощью цифровой камеры (Nikon D70, Токио, Япония) один раз за день до лечения, а площадь раны регистрировали с помощью программного обеспечения ImageJ (Национальный институт здравоохранения, США). Процент остаточной площади раны после заживления рассчитывали по следующей формуле: T N / T 0 × 100%.В формуле T 0 представляет начальную площадь раны на следующий день после инфицирования, а T N представляет собой остаточную площадь раны на N день после лечения.

Общее количество бактерий на участке раны

Кусочки марли (20 × 10 мм 2 ), удаленные из ран, переносили в пробирки Эппендорфа, содержащие 1 мл NS. Образцы были серийно разбавлены и разложены на чашках с трипсиновым соевым агаром (TSA).Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов. Подсчитывали общее количество колоний на чашках с TSA. Общее количество бактерий (ОКБ) на участке раны выражалось в КОЕ / мл.

Анализ крови

Образцы крови (0,8 мл) были взяты из бедренной артерии до ранения (до) и через 12, 24, 30, 36, 42 и 48 часов после инфицирования (p12, p24, p30, p36, стр. 42 и 48). Количество лейкоцитов (WBC) в образцах крови измеряли с помощью гематологического анализатора Urit 2900 Vet Plus (Diamond Diagnostics Inc., Массачусетс, США). Затем образцы крови центрифугировали при 700 × g в течение 10 мин при 4 ° C. Образцы плазмы были получены для измерения уровня TNF-α с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа (R&D System, Миннеаполис, Миннесота, США). Анализ выполняли в соответствии с инструкциями производителя, и полученные растворы анализировали путем измерения значений оптической плотности при 450 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов Dynex MRX II (Chantilly, VA, USA).

Гистологическое исследование области раны

Биопсии кожи из участков ран были получены на 3, 5 и 7 дни.Образцы фиксировали 4% забуференным формальдегидом в течение 24 часов, заливали парафином после дегидратации и очищали с помощью серии этанола до ксилола. Парафиновые блоки разрезали на срезы ткани 3 мкм и помещали на предметные стекла для окрашивания. Предметные стекла образцов окрашивали гематоксилином и эозином (H&E) для общей морфологии, тогда как окрашивание трихромом по Массону (MT) использовали для наблюдения за волокнами коллагена. Иммуногистохимия (ИГХ) выполнялась с использованием антител к TGF-β1, CD31 и VEGF.Срезы тканей депарафинизировали, регидратировали, обрабатывали пероксидазным реагентом в течение 20 минут при комнатной температуре, кипятили в цитратном буфере (pH 6,0) в течение 30 минут и блокировали с использованием раствора ImmunoBlock в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем срезы тканей инкубировали с антителами (разведение 1: 200; BioWorld Inc., Визалия, Калифорния, США) в течение 4 ч при 37 ° C. Срезы обрабатывали с помощью кроличьего зонда с маркировкой пероксидазой хрена (HRP) (Toson Co., Ltd., Hsinchu, Тайвань) в течение 30 мин при комнатной температуре, окрашивали 3,3′-диаминобензидиновым коричневым (разведение 1:50; Toson ) и контрастировали гематоксилином.После обезвоживания срезы на предметных стеклах закрывали покровными стеклами, и результаты исследовали под микроскопом. Количественное определение ИГХ оценивали с помощью программного обеспечения ImageJ (Национальный институт здравоохранения, США).

Статистический анализ

Статистический анализ выполняли с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим методом Шеффе с программным обеспечением IBM SPSS версии 22 (SPSS Inc., IBM, Чикаго, Иллинойс, США). Все данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего; P значения меньше 0.05 считались статистически значимыми.

Статья — JDDonline — Журнал лекарственных средств в дерматологии

октябрь 2011 г. | Том 10 | Выпуск 10 | Оригинальная статья | 1168 | © Октябрь 2011 г.,


Jennifer Ragi MD,

a Amy Pappert MD, a Babar Rao MD, a Дафна Хавкин-Френкель, доктор философии, b Sandy Milgraum MD a

, отделение Дерматология, Университетская медицина и стоматология Медицинская школа Роберта Вуда Джонсона, Нью-Джерси, Сомерсет, штат Нью-Джерси, b Отделение патологии растений и биологии, Университет Рутгерса, Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси,

Abstract

Справочная информация: Заживление ран — это динамичный и сложный процесс, на который влияет гидратация тканей, наличие бактерий, воспаление и другие переменные.Орегано обладает мощными антибактериальными, противогрибковыми, антиоксидантными и противовоспалительными свойствами. Исследования использования мази орегано для заживления ран отсутствуют.
Цель: Определить эффективность 3% мази с экстрактом душицы при заживлении ран.
Методы: Было проведено рандомизированное, двойное слепое, контролируемое петролатумом рандомизированное двойное слепое исследование, инициированное исследователем, для определения воздействия мази с орегано на заживление ран. В исследование были включены и рандомизированы 40 пациентов, перенесших хирургическое удаление.Культуры были получены на 12-й день, а шрамы были оценены с помощью инструмента для оценки шрамов у пациентов и наблюдателей на 12, 45 и 90 дни.
Результаты: В группе мази душицы 19 процентов культур оказались положительными на Staphlococcus aureus по сравнению с 41 процент в петролатумной группе. У одного пациента в группе мази орегано развился целлюлит по сравнению с тремя пациентами в группе вазелина. Группа орегано показала статистически значимое улучшение по сравнению с вазелином по цвету рубцов, пигментации и податливости.
Заключение: Мазь с экстрактом орегано уменьшала бактериальное заражение и последующее инфицирование послеоперационных ран и имела эквивалентный общий вид рубцов по сравнению с вазелином.

J Drugs Dermatol. 2011; 10 (10): 1168-1172.

ВВЕДЕНИЕ

Заживление кожных ран — это динамичный и сложный процесс, на который влияют несколько факторов, в том числе: местная кожная среда.Одним из важных факторов заживления эпидермальных ран является наличие бактерий, потому что чрезмерный рост бактерий на поврежденной коже может замедлить заживление. 1, 2 Местные мази с антибиотиками часто используются в протоколах послеоперационного ухода за хирургическими ранами / биопсией. 3 Однако мази с антибиотиками для местного применения являются обычными сенсибилизаторами, ведущими к развитию аллергического контактного дерматита, что ограничивает их использование для заживления ран. 3,4 Часто используются мази, содержащие бацитрацин, неомицин и полимиксин в различных комбинациях. используется для ран.И бацитрацин, и неомицин входят в десятку наиболее распространенных аллергенов, выявленных Североамериканской группой по контактному дерматиту. 5,6

Увлажнение кожи — еще одна важная переменная, которая может влиять на лечение раны. Исследования показали, что поддержание гидратации тканей с помощью мазей и окклюзионных повязок увеличивает миграцию эпителия и усиливает реэпителизацию кожи. 7-9 Чистый вазелин, который является увлажняющим и гипоаллергенным продуктом, является еще одним часто используемым местным средством для лечения ран, хотя ему не хватает антимикробных свойств.Исследования показали, что мази с антибиотиками для местного применения уменьшают бактериальную инфекцию и улучшают заживление ран по сравнению с вазелином или перевязкой, 10-13 , в то время как другие исследования показали равную частоту инфицирования между вазелином и мазь с антибиотиком для местного применения. 14-16 В настоящее время не существует единого стандартного местного средства, используемого для заживления ран, и существует потребность в новых эффективных местных средствах для заживления ран.

Растущая распространенность устойчивости к антибиотикам подчеркивает необходимость в новых классах антибиотиков. 17-20 Кроме того, многочисленные исследования документально подтвердили антимикробные свойства различных экстрактов растений. Орегано — это уникальная пряная трава, поскольку она, по-видимому, обладает одним из самых мощных антибактериальных свойств наряду с противогрибковыми, антиоксидантными и противовоспалительными свойствами. 21 Многие исследования in vitro и in vivo показали, что орегано (Origanum vulgare) обладает антимикробной активностью против Staphlococcus aureus (S. aureus ), включая устойчивый к метициллину S. aureus (MRSA), Streptococcus haemolyticus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhi; и противогрибковые свойства против Aspergillus niger и Aspergillus flavus. 21-26 Это исследование было проведено с водорастворимой фракцией растения душицы, полученной после дистилляции эфирного масла, 27 , потому что компонент эфирного масла может вызывать раздражение при местном применении. 28-32 Согласно

Улучшение длительного заживления ран с помощью местного крема, содержащего липополисахарид, полученный из Pantoea agglomerans

Abstract

Предпосылки / цель: По сообщениям, ранозаживляющий эффект липополисахарида (ЛПС) является результатом его способности вызывать удаление инородных тел, противовоспалительная функция и функция восстановления тканей. Мы сообщили об улучшении состояния пациентов с длительным заживлением ран после кожного введения крема для местного применения, содержащего ЛПС, полученный из Pantoea agglomerans, которая является симбиотической бактерией, присутствующей в пшенице и подтвержденной как безопасная.Пациенты и методы. Крем для местного применения с LPS был применен к четырем пациентам, у которых наблюдалось затяжное заживление ран после их информированного согласия. Рану оценивали на основании изменения приблизительного объема раны, рассчитанного по ширине, длине и глубине раны. Результаты. Случай 1. У 76-летнего мужчины после эндоваскулярного лазерного лечения варикозного расширения вен правой нижней конечности развилась инфекция в месте пункции, и его рана затянулась. Рана обрабатывалась аппликацией гентамицина, содержащего ЛПС, и уменьшилась в течение двух недель.Случай 2. У мужчины 72 лет развилась раневая инфекция, через неделю после эндоваскулярного лазерного лечения варикозного расширения вен левой нижней конечности у него был гнойный дренаж. Рану закрыли через месяц аппликацией гентамицина, содержащего ЛПС. Случай 3. У 67-летней женщины с длительным заживлением раны развилась инфекция в правой паховой области после хирургического лечения острого расслоения аорты, и произошло полное расслоение раны. Через неделю после тампонирования марлевой салфеткой LPS рана уменьшилась и была временно зашита.Рана была полностью закрыта через две недели применением гентамицина, содержащего ЛПС. Случай 4: 86-летняя женщина с длительным заживлением раны прикована к постели после инфаркта головного мозга, у нее развиваются пролежни в области крестца. Язва исчезла через четыре месяца при применении ЛПС-содержащего сахара и повидон-йода два раза в день. Ни у одного из этих пациентов не было побочных эффектов от применения ЛПС. Заключение: при диабете одной из причин длительного заживления ран является низкая врожденная иммунная функция, такая как фагоцитарная активность макрофагов.Ожидается, что ЛПС будет способствовать заживлению за счет улучшения врожденного иммунитета, и его положительный эффект ускорения заживления ран был четко продемонстрирован в настоящих случаях. Местное применение ЛПС клинически эффективно для заживления ран и считается потенциально новым методом лечения.

Затяжное заживление ран как послеоперационное осложнение и замедленное заживление пролежней у лежачих пациентов часто вызваны различными факторами, такими как недоедание и снижение местного кровотока (1).Считается, что для ускорения заживления ран используются различные методы, такие как правильное питание, аминокислоты для синтеза коллагена (2), трансплантат кожи и слизистой оболочки, а также перевязка из искусственного биоматериала (3).

Было отмечено, что пероральное введение ЛПС (липополисахарида), который представляет собой гликолипид, присутствующий во внеклеточной мембране грамотрицательных бактерий, способствует фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов и излечивает рак, который метастазировал в легкие через Toll-подобный рецептор. 4 (TLR4) (4).Это может быть связано со способностью ЛПС нормализовать иммунитет, вызывать удаление инородных тел, противовоспалительную функцию и функцию восстановления тканей (5). Кроме того, сообщалось, что в процессе заживления ран экспрессия TLR4 индуцировалась в кератиноцитах, а LPS способствовал заживлению (6). ЛПС имеет различную структуру в зависимости от бактериальных штаммов. Для исследования его стимулирующего воздействия на заживление ран в клинических условиях следует использовать ЛПС с унифицированной структурой. Способствующий заживлению ран эффект ЛПС изучался у пациентов с длительным заживлением ран при применении ЛПС-содержащих мазь, полученная из Pantoea agglomerans , поскольку у нас есть история употребления ее в пищу, безопасность перорального и кожного введения была подтверждена, и ее структура известна.

Рисунок 1.

На этом снимке показано затяжное заживление раны в течение месяца.

Пациенты и методы

После получения письменного информированного согласия было начато кожное нанесение неразбавленного бульона для ферментации пшеницы (Институт прикладных технологий врожденного иммунитета) в кремы для местного применения, смешанные в соотношении 3% (3 мкг / мл), на четырех пациентах. пациенты с длительным заживлением ран. Рану оценивали на основе приблизительного изменения объема, рассчитанного по ширине, длине и глубине раны.

Рисунок 2.

Посредством покрытия йодом с непрерывным LPS аномальная грануляция исчезла, и произошло заживление ран.

Результаты

Случай 1. Пациент был 76-летним мужчиной, у которого развилась инфекция в месте прокола (1,5 × 2 см × 0,5 см, объем 1,5 см 3 ) после эндоваскулярного лазерного лечения варикозное расширение вен правой нижней конечности, которое не показало улучшения после месяца местного применения гентамицина (рис. 1). Это состояние раны считалось затяжным заживлением ран.Затем рана обрабатывалась аппликацией гентамицина, содержащего ЛПС, и уменьшалась за две недели (1 × 1,5 × 0,5 см, объем 0,75 см 3 ). Однако наблюдалась аномальная грануляция, и лечение было перешли на покрытие йодом с непрерывным нанесением ЛПС. Впоследствии аномальная грануляция исчезла (0,8 × 1,2 × 0,3 см, объем 0,29 см 3 ), а через две дополнительные недели последовала эпителизация (рис. 2).

Рисунок 3.

Эта рана затянулась после хирургического лечения острого расслоения аорты.

Случай 2. Пациент, 72-летний мужчина, у которого развилась раневая инфекция, через неделю после эндоваскулярного лазерного лечения варикозного расширения вен левой нижней конечности у него был гнойный дренаж. Поскольку в течение месяца никаких изменений не наблюдалось, считалось, что у пациента длительное заживление ран. Затем рану орошали через день и наносили гентамицин-содержащий ЛПС. В начале лечения размер раны составлял 0,5 × 1 × 2 см, а ее объем составлял 1 см 3 .Через две недели некротизированные ткани исчезли и началась регенерация тканей, при этом ее глубина уменьшилась до 0,5 см (объем 0,25 см 3 ), после чего через месяц произошло закрытие раны.

Случай 3. Пациентка, 67-летняя женщина, у которой развилась раневая инфекция в правой паховой области после хирургического лечения острого расслоения аорты. Рана показали полное расхождение, и часть искусственного кровеносного сосуда была обнажена (примерно через месяц после операции).Тогда это считалось длительным заживлением ран. Размер раны 4 × 5 × 2 см, объем 40 см 3 (рис. 3). В течение двух недель орошение ран производили через день и накладывали марлевую салфетку, содержащую ЛПС. Рана уменьшилась до 1,5 × 1,5 × 1 см при объеме примерно 2,25 см3. Рану временно зашили. Однако часть раны расслоилась, которая уменьшилась до размера точечного отверстия после 10 дней применения гентамицина, содержащего ЛПС. Полное закрытие наблюдалось через две недели (рис. 4).

Рисунок 4.

Заживление ран производилось применением гентамицина, содержащего ЛПС.

Случай 4. Пациентка была прикована к постели после инфаркта головного мозга и у нее развились пролежни в крестцовой области. Рана показала образование кармана (6 × 7 × 2 см, объем 84 см 3 , рис. 5), и заживление раны казалось трудным. Таким образом, это считалось длительным заживлением ран, и мазь с сахарной пастой ISODINE®, содержащая ЛПС (сахар и повидон-йод) применялась дважды в день.Карманная рана исчезла через две недели (3 × 41,5 см, объем 18 см 3 ), а пролежня исчезла еще через два месяца (рис. 6).

Рисунок 5.

На этой ране видны пролежни с образованием карманов.

Рисунок 6.

Пролежня исчезла после нанесения на мазь Isodine Sugar Paste Ointment с LPS.

Ни в одном из этих случаев не сообщалось о явных побочных эффектах, вызванных применением LPS.

Обсуждение

ЛПС обычно считается воспалительным веществом, которое вызывает системное воспаление и предположительно вызывает эндотоксиновый шок при внутривенном введении.Однако, как сообщается, введение ЛПС через слизистую оболочку различные эффекты от его воспалительного действия. Например, пероральный прием ЛПС индуцирует синтез антибактериального пептида путем активации клеток Панета в тонком кишечнике через Toll-подобный рецептор 4 (TLR-4) в слизистой оболочке тонкого кишечника для поддержания иммунной функции (7). Известно, что ЛПС, полученный из грамотрицательных бактерий, способствует восстановлению слизистой оболочки дыхательных путей и заболеваниям легких, если он присутствует в небольших количествах (8).Кроме того, известно, что экспрессия TLR-4 увеличивается на ранней стадии процесса заживления ран, а LPS явно способствует выздоровлению во время процесса заживления ран.

Рисунок 7.

На этом графике показано приблизительное изменение объема в случаях 1 и 2.

Рисунок 8.

На этом графике показано приблизительное изменение объема в случаях 3 и 4.

В процессе заживления раны макрофаги типа M1 играют роль в ранней воспалительной фазе для удаления инородных тел. Макрофаги M2-типа способствуют заживлению ран за счет подавления воспаления за счет продукции IL-10, пролиферации фибробластов за счет продукции фактора роста фибробластов и усиления ангиогенеза за счет продукции фактора роста эндотелия сосудов.Между тем макрофаги переключаются с типа M1 на тип M2 в процессе восстановления тканей. В ранах, связанных с патологическими состояниями, такими как диабет, подавляется фагоцитарная активность макрофагов, что считается одной из причин длительного заживления ран.

В настоящем отчете три из четырех случаев связаны с инфекциями хирургических ран и один — с пролежнями. Во всех этих случаях приблизительный объем раны не изменился во время первоначального лечения в течение примерно одного месяца.Однако приблизительный объем уменьшился после добавления ЛПС к лечению и в конечном итоге исчез (Рисунок 7).

Учитывая характеристики макрофагов, описанные выше, во всех четырех случаях макрофаги, по-видимому, сохранили фенотип M1, но добавление LPS увеличивало количество макрофагов типа M2, способствуя заживлению ран.

Случаи 1 и 2 включали раневую инфекцию в результате чрескожных операций, и амбулаторного лечения было достаточно для лечения ран. Кроме того, в случае 3 была раневая инфекция после хирургического лечения расслоения аорты.Часть искусственного кровеносного сосуда, использованного в операции, была обнажена, и потребовалось стационарное лечение. Однако пациент категорически отказался от госпитализации; поэтому мы добавили в мазь ЛПС в дополнение к орошению ран, которое можно проводить в амбулаторных условиях.

В случае 4 была обнаружена пролежня с образованием большого кармана, что обычно указывает на операцию по пересадке кожи. Однако пациент хорошо ел и имел хороший статус питания, что способствовало заживлению ран и, в свою очередь, усиливало действие ЛПС.

Leave a Reply

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

2021 © Все права защищены.