Спазмолитик папаверин: Папаверин инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Papaverine таб. 40 мг: 10, 20 или 30 шт. (18543)

Содержание

JC, программа на 09.12.2020 — Институт химии СПбГУ

Уважаемые коллеги!

09.12.2020 будут представлены следующие доклады:

«Новые методы синтеза изохинолинов»

Изохинолиновое ядро является основой многих биологически активных веществ как природного, так и синтетического происхождения. К важнейшим из них относятся анестетик квинизокаин, антиретровирусный препарат саквинавир, спазмолитик папаверин. Будучи важным фармакофором изохинолин и его производные привлекают огромное внимание исследователей. До недавнего времени было известно лишь несколько основных подходов к получению его производных: реакции Бишлера-Наперальски, Пиктета-Шпенглера и Померанца-Фритча, которые требуют агрессивных реагентов и жёстких условий. В последние годы, благодаря активному развитию металлокатализа, появляются новые методы, дающие возможность получения разнообразных замещённых изохинолинов в мягких условиях, с хорошими выходами и высокой стереоселективностью.

Настоящий доклад посвящён обзору новых методов синтеза изохинолинов, разработанных в последние 10 лет.

«Редокс-медиаторы и их использование в составе химически регенеративных топливных элементов»

В настоящее время топливные элементы представлены в основном устройствами прямого действия — когда реагенты подаются в элемент напрямую. При этом требуется использование дорогостоящих катализаторов, что делает данные устройства труднодоступными. Вывод данных источников тока на крупные рынки требует нового подхода к их созданию. Одним из таких подходов является использование поступающего топлива не для электрохимической реакции, а для регенерации промежуточных веществ, называемых редокс-медиаторами. Знание особенностей химических превращений данных веществ важно для грамотного их использования в составе источников тока.

В данном докладе будут рассмотрены детали химических превращений нескольких редокс-медиаторов, статус разработок топливных элементов с их использованием, а также преимущества, связанные с использованием данных веществ.

«Зависимость и селективность от длины волны в фотохимических реакциях»

Понятия зависимости хода фотохимической реакции и её селективности от длины волны уже давно используются в общей терминологии исследователей, занимающихся органической фотохимией.

Варьирование длины волны возбуждения в подходящих реакционных условиях может служить ключевым инструментом для изменения фотореактивности исследуемой системы. При этом зависимость от длины волны возможно связать с изменением эффективности фотохимического процесса, но не его предназначения в смысле природы продуктов реакции.

В настоящем докладе будет представлена перспективная совокупность принципиальных случаев с широким набором примеров, в которых длина волны возбуждения играет ключевую роль именно в исходе фотохимического процесса, т.е. когда действует парадигма селективности от длины волны; сделана попытка однозначного определения обоих понятий на основе научной литературы по данной теме.

«Молекулярные машины и принципы их работы»

Молекулярными машинами называют системы, в которых какой-либо внешний стимул вызывает контролируемое перемещение одного молекулярного или субмолекулярного компонента по отношению к другому, что потенциально может приводить к совершению полезной работы. Такие структуры, широко распространённые в живых организмах, во второй половине XX века привлекли внимание исследователей, разработавших способы синтеза различных молекул, способных к выполнению роли искусственных молекулярных машин. В ходе анализа устройства биологических систем и новейших достижений синтетической химии были сформулированы и изучены движущие силы, позволяющие таким системам преодолевать тенденцию к неупорядоченному движению. Возможность потенциального использования искусственных молекулярных машин является одной из центральных тем современной науки о материалах.

В данном докладе будут рассмотрены общие физико-химические принципы построения и работы молекулярных машин, осложнения, с которыми сталкиваются исследователи при их разработке, и способы их решения. Также будут освещены перспективы их использования, в том числе и в составе сложных ансамблей, в производстве новых материалов и катализаторов.

«Углеродные квантовые точки: синтез, свойства и возможности применения»

Флуоресцентные углеродные наночастицы, также называемые углеродными квантовыми точками (УГТ) представляют собой новый класс углеродных наноматериалов и вызывают большой интерес исследователей в качестве потенциального конкурента обычным полупроводниковым квантовым точкам. Помимо сопоставимых оптических свойств, УГТ обладают такими преимуществами, как низкая токсичность, экологичность, низкая стоимость и простота получения. Более того, пассивация поверхности и функционализация УГТ позволяют контролировать их физико-химические свойства. С момента своего открытия углеродные квантовые точки нашли множество применений в областях химического зондирования, биосенсоринга, наномедицины, а также фото- и электрокатализа.

В данной работе будут рассмотрены передовые способы получения подобных материалов, а также обсуждены причины появления у них флуорисцирующих свойств и возможности их использования.

Приложения: Последние новости России и мира – Коммерсантъ Здравоохранение (74922)

К своему 50-летнему юбилею безрецептурный хит препарат но-шпа подошел с внушительными результатами: сегодня этот бренд входит в десятку самых востребованных в России лекарственных препаратов.

Нет спазма

Созданный еще в 60-х годах прошлого века, фармацевтический болеутоляющий препарат но-шпа до сих пор остается одним из самых известных и коммерчески успешных лекарств в мире.

В начале 1960-х годов наиболее популярным болеутоляющим лекарством считался папаверин. К этому времени этот спазмолитик был знаком фармакологам венгерского завода «Хиноин» уже около 100 лет.

В 1961 году ученые этого завода Золтан Мешарос и Петер Шентмиклоси, проводя с папаверином исследования и различные тесты, обнаружили вещество, намного превосходящее его по силе воздействия и продолжительности спазмолитического эффекта. Полученное соединение получило название дротаверин, оно впоследствии и стало основным компонентом нового миотропного спазмолитика широкого действия no-spa, что в переводе с латинского означает «нет спазма».

Действующим веществом препарата но-шпа является спазмолитик дротаверин, активно и эффективно действующий на гладкие мышцы. Этот препарат применяется для устранения или предотвращения спазмов гладких мышц различных органов — желудочно-кишечного тракта, желчевыводящих путей, мочеполовой системы, женских половых органов.

В отличие от многих обезболивающих препаратов, но-шпа воздействует именно на ферменты, влияющие на расслабление гладких мышц.

Тем самым спазм, являющийся причиной боли, снимается. Кроме того, исследованиями было доказано как быстродействие препарата — через 12 минут после приема, так и быстрое его выведение из организма: за 72 часа выводится практически полностью. При этом не менее важным показателем препарата является его безопасность. Клинически доказано, что частота побочных явлений при приеме но-шпы составляет менее 1% за период ее применения с 1964 года. Это один из лучших на сегодняшний день показателей среди лекарственных препаратов группы спазмолитиков.

Уже в 1962 году этот препарат был запатентован и сразу же появился на мировом рынке. В 1970 году ученые, открывшие дротаверин, получили государственную премию. С начала 1960-х но-шпа появилась в СССР.

После своего выхода на внешний рынок новое лекарство но-шпа стало настолько востребованным в Советском Союзе и в бывших странах соцлагеря, что его репутация сравнивалась только с репутацией аспирина в западных странах. В некоторые периоды препарат производился в форме таблеток или раствора во флаконах три смены в день семь дней в неделю.

В новой России но-шпа входит в десятку самых востребованных на нашем рынке лекарственных препаратов. И продажи растут по несколько процентов в год.

Аптечный киоск Европы

Открытие, состоявшееся именно на заводе «Хиноин», вряд ли можно назвать случайным, поскольку это фармацевтическое предприятие на тот момент было одним из авторитетнейших в мире и имело достаточно богатый опыт подобных исследований. Когда два доктора — Эмиль Вольф и Дердь Керести — основали в 1910 году свою фирму, они не подозревали, что их небольшая лаборатория по производству лекарств может вырасти до одного из лидеров мировой фарминдустрии. Через несколько лет товарищество «АЛКА Кемикал Фактори оф Др Керешти и Др Вольф кемикл энджиниэз энд Ко» было переименовано в «Хиноин»: предполагалось, что предприятие будет производить лекарство с содержанием хинина. Однако маленькую лабораторию ждала другая судьба. Всего через несколько лет «Хиноин» стал первой в стране фармацевтической компанией, которая начала использовать современный для того времени химический синтез.

Поэтому неудивительно, что вскоре продукция завода «Хиноин» стала известна во всем мире. Например, самый старый венгерский препарат новатропин, открытие которого пришлось на период между 1913 и 1916 годами, производился уже путем химического синтеза и был впоследствии зарегистрирован в США. До 1918 года в Венгрии была разработана первая фармацевтическая технология с использованием высокого давления, применяемая затем при производстве салициловой кислоты (действующее вещество аспирина). В 1928 году компанией «Хиноин» из поджелудочной железы свиньи был впервые произведен инсулин, наиболее важное действующее вещество препаратов для лечения сахарного диабета. Вплоть до 1940 года компания «Хиноин» занимала второе место среди крупнейших экспортеров Венгрии и экспортировала 65% своей продукции. Более того, в 1940 году компания вышла на мировой фармрынок с антибактериальным порошком ультрасептил, который был признан лучшим в своем виде препаратов, и этот порошок начал активно закупаться практически всеми странами, участвовавшими в войне, в том числе Германией, Великобританией, США и СССР, для своих армий. А после войны, начиная с 1950 года, венгерскую фармацевтическую промышленность можно было назвать аптечным киоском Европы, поскольку она снабжала фармацевтикой и агрохимией все страны Совета экономической взаимопомощи.

Успех венгерского предприятия «Хиноин» на мировом фармацевтическом рынке в 1960-1980-е годы можно назвать уникальным явлением.

Первые 40% акций венгерской компании «Хиноин» приобрела французская «Санофи», одна из крупнейших фармацевтических компаний на мировом рынке, в 1991 году в ходе первой фазы приватизации венгерского предприятия. Всего через несколько лет, продолжая свое развитие, компания «Санофи-Хиноин» стала номером один в Венгрии и первой среди стран Центральной и Восточной Европы, получившей международный сертификат качества ISO 9001. Сегодня фармацевтическая компания «Санофи» представлена более чем в 110 странах мира и насчитывает около 120 тыс. сотрудников.

Соответственно, купив венгерский завод, компания «Санофи» стала владельцем и патентованных лекарств, производимых компанией «Хиноин». А вместе с брендом но-шпа новый собственник получил и серьезный кусок российского рынка. По разным оценкам, продажа но-шпы в России (одного из самых популярных лекарств на российском рынке) приносит компании около 10% всех российских доходов.

Рекламотерапия

В случае с но-шпой ситуация сложилась таким образом, что перед маркетологами стоит задача доказать, что этот препарат хоть и существует уже 50 лет, в свои годы остается лучшим терапевтическим решением согласно показаниям в инструкции. Специалисты говорят, что сегодня на лекарственном рынке наступило время препаратов-специалистов и у но-шпы появились более специализированные конкуренты. На этом фоне важно понимать, что но-шпа — это и есть препарат-специалист.

Российский рынок лекарств — один из самых динамичных в мире. В докризисные годы он рос в среднем на 32% в год, в то время как динамика продаж в Европе была близка к нулевой, а в Японии — всего около 2-3%. Даже после кризиса, в 2011 году, фармрынок России занимал восьмое место среди крупнейших рынков лекарств по объемам потребления и третье место — по темпам роста.

Уникальность рынка с точки зрения рыночных перспектив для фармацевтики обусловлена в основном социальными факторами. Более 70% россиян уверены, что сами способны выбрать правильную таблетку. В том числе и безотказную безрецептурную но-шпу.

После разработки препарата но-шпа было произведено 200 млрд таблеток, что соответствует примерно 2 млрд упаковок. А если все проданные в мире таблетки но-шпа выложить в цепочку, то ею можно опоясать земной шар пять раз. И, похоже, сворачивать опоясывание планеты производитель пока не собирается: только за последние лет десять количество стран, в которых был зарегистрирован препарат под брендом но-шпа, достигло 50.

Константин Анохин

Первая помощь при почечной колике, ее симптомы и принципы лечения

Первая помощь при почечной колике

Почечные колики не являются самостоятельным заболеванием – это синдром, который указывает на развитие патологии в мочевых путях. Основное проявление синдрома – острая боль, которая нарушает покой человека, делая совершение простейших движений почти невозможным. Первая помощь при почечной колике заключается в том, чтобы максимально быстро устранить болевой синдром.

Возможные причины развития почечной колики

Приступ почечной колики может быть спровоцирован определенными патологическими состояниями, среди которых:

  • мочекаменная болезнь, которая протекает долго и с осложнениями;
  • нарушения процесса минерального обмена;
  • прогрессирование острого и обострение хронического пиелонефрита;
  • развитие нефроптоза;
  • прогрессирующий гидронефроз;
  • опухоли доброкачественного и/или злокачественного характера, расположенные в области ворот почек;
  • патологии, связанные с функционированием предстательной железы у мужчин.

Лечение почечной колики заключается в выяснении причины и проведении необходимых лечебных мероприятий при диагностированных заболеваниях.

Признаки развития почечной колики

Самый выраженный признак – острая боль в области поясницы. Даже при смене положения тела больной не чувствует облегчения, в некоторых случаях боль может становиться еще сильнее, приобретать пульсирующий характер. Врачи настаивают, что при почечной колике необходимо как можно быстрее обратиться за квалифицированной медицинской помощью – при интенсивном развитии синдрома у человека может случиться болевой шок.

Кроме болевого синдрома, рассматриваемый синдром может сопровождаться признаками общей интоксикации организма: озноб (сильное дрожание), тошнота, рвота, общая слабость, нарушение сознания.

При почечной колике также может возникнуть парез кишечника. Это происходит исключительно на рефлекторном уровне, проявляется трудностями в отхождении газов, запорами и сильным вздутием живота.

Почечная колика – первая помощь

Рассматриваемый синдром всегда требует срочного медицинского вмешательства. Причем вызывать специалиста нужно даже если симптомы почечной колики стали менее выражены или вовсе исчезли. Дело не только в том, что необходимо провести купирование почечной колики – врач должен провести обследование больного, выяснить истинную причину появления синдрома и при необходимости оказать экстренную медицинскую помощь.

Неотложная помощь при почечной колике заключается в соблюдении трех условий:

  1. Вызвать врача.
  2. Обеспечить больного теплом: его можно поместить в горячую ванну, но только в сидячем положении. Перед этим необходимо убедиться в том, что у него отсутствуют противопоказания к горячей ванне (сердечно-сосудистые заболевания в анамнезе, беременность), в противном случае можно использовать теплую грелку, которую прикладывают к больной стороне.
  3. Больному можно дать спазмолитики – например, Папаверин или Дротаверин – это будет способствовать расслаблению стенки мочеточника. Также можно принять комбинированые препараты с спазмолитическим действием.

Какие препараты назначить при симптомах характерных для почечной колики, может решить только врач. До точной диагностики почечной колики больному ни в коем случае нельзя давать обезболивающие препараты, так как причиной синдрома могут быть и другие грозные болезни, такие как прогрессирование острого аппендицита, кишечная непроходимость, закупорка желчного протока и другие. Обезболивающие средства в таком случае «смажут» клиническую картину, врачу будет проблематично установить истинную причину. Более подробно о почечной колике, что делать при ее появлении, можно узнать на нашем сайте: Добробут.ком.

Лечение почечной колики

Не существует единой схемы терапии, конкретные назначения врач сделает только после проведения полноценного обследования. Лечение почечной колики – это неотложная помощь для облегчения состояния больного. Если у пациента отмечается высокая температура тела, озноб и нарушение сознания, то пациент немедленно госпитализируется в стационар.

Если оказание первой помощи при почечной колике не дало результатов, больному будет проводиться лазерная уретеролитотрипсия, катетеризация (стентирование) мочеточника, пункционная нефростомия или другое оперативное лечение. Для этого больной помещается в стационарное хирургическое или урологическое отделение медицинского учреждения.

Лечение почечной колики при высокой температуре нельзя проводить в домашних условиях – скорее всего, рассматриваемый синдром свидетельствует о развитии острого пиелонефрита, требующего немедленной госпитализации. Любые тепловые процедуры категорически противопоказаны.

Когда необходима срочная госпитализация больного с почечной коликой:

  • прием обезболивающих лекарственных препаратов не уменьшает болевой синдром;
  • отсутствие мочи – это относится к тяжелому осложнению, которое означает закупоривание мочевых путей и может привести к смерти больного;
  • развилась почечная колика при беременности;
  • у человека есть только одна почка;
  • болевой синдром интенсивный и наблюдается с двух сторон.

Как лечить почечную колику, может определить только врач на основе анамнеза болезни пациента, его общего состояния и полученных при обследовании данных.

Связанные услуги:
Консультация уролога
Вызов скорой помощи

лечение и диагностика симптомов, причин в Москве

Екатерина Владимировна Великанова

29 Октября 2021

Инна Юрьевна, доктор с Большой буквы! Заботливо относится к пациентам, очень внимательный и грамотный специалист! Понятно и доступно разъясняет по обследованиям, лечению и по прогнозу заболевания. Назначенные обследования все нужные, ничего лишнего, а курс лечения эффективный!&nb…

Подробнее

Агаркова С. А.

15 Июня 2021

Выражаю сердечную  благодарность Валерии Александровне за внимательное, профессиональное и терпеливое отношение к пациентам. Общение с вами дает надежду на выздоровление и на то, что в нашей медицине есть настоящие специалисты своей профессии. Спасибо всему консультатив…

Подробнее

Курочкина Валентина Николаевна

4 Июня 2021

Инна Юрьевна грамотный специалист. Заметно, что хочет вылечить пациента от души. Грамотный подход к работе. Я благодарна ей, что поставила правильный диагноз и подобрала схему лечения.

Подробнее

Птицына Наталья николаевна

5 Марта 2021

Хочу выразить огромную благодарность гастроэнтерологу Чуйковой Ольге , это специалист высокого уровня, при назначении мне удаления опухоли в кишечнике,проверила всю информацию по моим обследованиям в клинике,даже за 2020 и 2019, назначила анализы , не только касаемо этой ситуации. ..

Подробнее

Антонович Иван

17 Марта 2020

Хочу выразить благодарность Лопатиной Елене Юрьевне за профессионализм.
Очень оперативно вылечила меня от билиарного сланжа ( ранее мучился с ним 4 месяца)

Подробнее

Фейзрахманоа Ильдар Фатехович

15 Ноября 2019

Огромная благодарность Лопатиной Е.Ю. за мое спасение и грамотное лечение ЖКТ, смогла быстро вылечить и избежать резекцию желудка. Операция не понадобилась! Большое спасибо и здоровья всем нам!
Супруги Ильдар Фейзрахманоа и Зулейха Андержанова

Подробнее

Наталья Викторовна

22 Мая 2019

Добрый день! 21. 05.2019 была на консультации у врача-гастроэнтеролога, к.м.н. Лопатиной Елены Юрьевны. Хочу выразить слова благодарности за такой высокий профессионализм. Очень грамотный и талантливый врач. Четко расписала схему лечения, все обьяснила. На все мои вопросы ответил…

Подробнее

Васильева Е

15 Мая 2019

Хочу выразить слова благодарности врачу-гастроэнтерологу Алешиной Т.В. за профессиональную работу и преданность профессии.Очень внимательный врач. Профессионал с огромным опытом работы!!

Подробнее

Спазмолитические лекарственные препараты (расслабляющие гладкие мышцы кровеносных сосудов, а также других внутренних органов) — Справочник лекарств

Спазмолитики – это группа лекарственных средств, способных купировать спазмы внутренних органов, и связанный с ними болевой синдром.

Внутренние органы, имеющие трубчатую структуру (сосуды, матка, бронхи, мочеточники и мочевой пузырь, кишечник, желчные протоки и др.) имеют в своём составе гладкомышечный матрикс – слой мышц, расположенных в стенке органа. В физиологических условиях эта гладкая мускулатура регулирует просвет органа и находится в постоянном тоническом сокращении.

Гладкая мускулатура является непроизвольной. Это означает что мы не можем управлять ей используя сознание, как например поперечнополосатой мускулатурой. Мы можем произвольно поднять или опустить руку, но не можем усилием воли расширить бронхи или остановить сокращения кишечника. Управляет гладкой мускулатурой автономная (вегетативная) нервная система. Автономная потому, что ее функционирование не зависит от нашей воли.

Нервные окончания автономной нервной системы не прилегают плотно к гладким мышцам, между ними и мышцей всегда есть зазор, называемый синапсом. При возбуждении вегетативного нерва, под действием его импульса, выделяется особое вещество, называемое медиатор ацетилхолин. Это вещество диффундирует (проникает) от нервного окончания к мышце и активирует ацетилхолиновый рецептор на мембране гладкомышечной клетки. При этом происходит ее сокращение. Это нормальный физиологический процесс.

В тех случаях, когда тонус вегетативной нервной системы повышается, например, при раздражении мочеточника шипами почечного камня, ацетилхолина вырабатывается больше, и сокращение гладких мышц становится чрезмерно сильным или хаотичным. Это приводит к болезненному ощущению – спазму.

Спазм — это тоническое, схваткообразное сокращение внутренних органов, имеющих гладкую мускулатуру и проявляющийся специфической болью. Спазм как правило возникает вследствие воспалительного повреждения внутренней, слизистой оболочки трубчатого органа.

Во время спастического сокращения органа, механически зажимаются чувствительные нервные окончания, и кровеносные сосуды, что ведет к нарушению кровообращения в органе и болевому синдрому. Болевой синдром, вызванный спазмом, называют колика.

Показания к применению

Назначают спазмолитики при болевом синдроме, вызванном спазмом внутренних органов, от слабовыраженных симптомов до различных видов колик (кишечной, почечной, печеночной). Некоторое спазмолитики назначают при бронхиальной астме, нарушении периферического кровообращения, при повышенном давлении и болезненных месячных.

Фармакологическое действие и его механизм

Препараты группы спазмолитики могут устранять спазм по двум механизмам. Первый механизм заключается в том, что лекарственный препарат соединяется с тем же рецептором на гладкой мышце что и медиатор ацетилхолин, но не активирует рецептор, а блокирует его, просто заняв посадочное место для ацетилхолина. Избыточное количество ацетилхолина не может взаимодействовать со своими рецепторами, и гладкая мышца расслабляется. Такое действие является нейротропным спазмолитическим эффектом. Нейротропным, потому что влияет на вегетативную нервную систему, делая ее активность не эффективной.

Второй механизм, по которому могут действовать спазмолитики, заключается в проникновении лекарственного вещества внутрь гладкомышечной клетки, которое изменяет ее сократительную физиологию и делает ее сокращение неэффективным. При этом разовьется спазмолитический эффект. Такой тип действия называют миотропным спазмолитическим эффектом от гр. myos мышца и thropos направленность действия.

Спазмолитики классифицируют в зависимости от механизма действия, указанного выше, поскольку с механизмом действия связаны хорошо прогнозируемые терапевтические и побочные эффекты.

Классификация спазмолитиков

  1. Миотропные спазмолитики
    • Папаверин
    • Дротаверин
    • Бендазол
    • Теофиллин
    • Мебеверин
  2. Нейротропные (антихолинергические) спазмолитики
    • Атропин
    • Отилония бромид
    • Прифиния бромид
    • Скополамина бутилбромид
    • Красавки экстракт

Основы терапии и особенности применения

Не все спазмолитики действуют одинаково на те или иные органы. Некоторые из них действуют преимущественно на гладкие мышцы в одних органах, и совсем, или почти совсем не действуют на гладкие мышцы других органов. Такая избирательность действия называется селективностью.

Например, атропин, экстракт красавки, папаверин и дротаверин, универсальные спазмолитики, бендазол действует преимущественно на сосуды, теофиллин преимущественно на бронхи, мебеверин и прифиния бромид преимущественно на органы желудочно-кишечного тракта. В зависимости от направленности действия спазмолитика, его назначают при той или иной патологии.

Нейротропные и миотропные спазмолитики несмотря на то, что и те, и другие снимают спазм внутренних органов, у них есть общие положительные и отрицательные стороны. Например, нейротропные спазмолитики вызывают сухость слизистых оболочек и могут вызывать запор. Миотропные спазмолитики лишены таких побочных эффектов, но они расширяют сосуды и снижают артериальное давление. Из-за этого их назначают с осторожностью лицам с пониженным давлением, или они им могут быть противопоказаны. Пациентам, получающим препараты от повышенного давления, возможно понадобится коррекция доз гипотензивных средств, при назначении миотропного спазмолитика. Нейротропные спазмолитики лишены таких недостатков.

Положительной чертой спазмолитиков является неспособность маскировать угрожающие симптомы в области брюшной полости, в отличие от анальгетиков. Это означает что, если есть серьезная патология брюшной полости, например, воспаление брюшины, применение спазмолитика не будет маскировать это состояние. Боль будет сохранятся, несмотря на применение спазмолитического средства. При этом необходимо срочно обратится за врачебной помощью.

В любом случае, препараты спазмолитической группы можно применять только после консультации с врачом, или если препарат безрецептурный, после консультации с фармацевтом.

Спазмолитики препараты

  1. Главная
  2. Лекарства
  3. Боль
  4. Спазмолитики

Все препараты (467)Анальгетики (77)Анестетики (39)Противовоспалительные средства (278)Спазмолитики (71)

Сортировка:

По популярностиПо названиюПо цене

Хиноин Завод Фармацевтических и Химических продуктов (Венгрия)

Рецептурный товар

от 467 p.

Рова Фармасьютикалз Лтд (Ирландия)

Рецептурный товар

от 1 189 p.

Дельфарм Реймс (Франция)

от 442 p.

Озон (Россия)

от 74 p.

Астеллас Фарма Текнолоджис Инк (США)

(10)

Рецептурный товар

от 2 737 p.

Балканфарма-Дупница АД (Болгария)

от 160 p.

Эгис (Венгрия)

Рецептурный товар

от 543 p.

Хиноин Завод Фармацевтических и Химических продуктов (Венгрия)

от 147 p.

Хиноин Завод Фармацевтических и Химических продуктов (Венгрия)

(9)

от 213 p.

Балканфарма-Дупница АД (Болгария)

от 337 p.

МФФ (Россия)

от 33 p.

Обновление Реневал ПФК (Россия)

Рецептурный товар

от 104 p.

Хиноин Завод Фармацевтических и Химических продуктов (Венгрия)

от 99 p.

Уралбиофарм ОАО (Россия)

от 30 p.

Шрея Лайф Саенсиз Пвт. Лтд. (Индия)

(1)

от 140 p.

Ranbaxy (Индия)

Рецептурный товар

от 489 p.

Рецептурный товар

от 37 p.

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

Чем больше общая сумма вашей покупки, тем ниже становится цена на каждый товар

спазмолитик — это… Что такое спазмолитик?

  • спазмолитик — спазмолитик …   Орфографический словарь-справочник

  • СПАЗМОЛИТИК — Spasmolytinum. Синонимы: адифенин, вагоспазмил, дифацил, тразентин. Свойства. Белый кристаллический порошок. Легко растворим в воде. Водные растворы постепенно гидролизуются. Форма выпуска. Выпускают в порошке и в таблетках по 0,1 и 0,25 г. Хран …   Отечественные ветеринарные препараты

  • спазмолитик — спазмол итик, а …   Русский орфографический словарь

  • Спазмолитик — Cпазмолитик (синоним: Антиспазмодик)  препарат, или лекарственные травы, подавляющие мышечный спазм. Спазм гладкой мышцы Один тип спазмолитиков, используемых для сокращения гладких мышц, особенно в трубчатых органах желудочно кишечного… …   Википедия

  • спазмолитик — а; м. Лекарственный препарат (применяется для снятия, уменьшения спазмов) …   Энциклопедический словарь

  • спазмолитик — а; м. Лекарственный препарат (применяется для снятия, уменьшения спазмов) …   Словарь многих выражений

  • Средство Спазмолитическое, Спазмолитик (Spasmolytic) — лекарственное вещество, которое уменьшает спазмы гладкой мускулатуры; примерами таких веществ являются аминофиллин и папаверин. Спазмолитики могут использоваться также в качестве бронхолитических средств для снятия спазмов бронхиальных мышц, для… …   Медицинские термины

  • СРЕДСТВО СПАЗМОЛИТИЧЕСКОЕ, СПАЗМОЛИТИК — (spasmolytic) лекарственное вещество, которое уменьшает спазмы гладкой мускулатуры; примерами таких веществ являются аминофиллин и папаверин. Спазмолитики могут использоваться также в качестве бронхолитических средств для снятия спазмов… …   Толковый словарь по медицине

  • Центр по химии лекарственных средств — ОАО «ЦХЛС ВНИХФИ» Тип Открытое акционерное общество Год основания 1920 Расположение …   Википедия

  • ОЧИЩЕНИЕ ОТ ШЛАКОВ И ТОКСИНОВ Диет Формула — Латинское название Day Cleanse, Night Cleanse Diet formula Фармакологические группы: БАДы — полифенольные соединения ›› БАДы — естественные метаболиты ›› БАДы — продукты растительного, животного или минерального происхождения ›› …   Словарь медицинских препаратов

  • Репозиционирование спазмолитического препарата Папаверин для лечения хронического миелолейкоза

  • 1.

    Rowley JD. Новая стойкая хромосомная аномалия при хроническом миелолейкозе, идентифицированная с помощью флюоресценции хинакрина и окрашивания по Гимзе. Природа. 1973; 243: 290–3.

    CAS PubMed Google ученый

  • 2.

    Nowell PC. Открытие филадельфийской хромосомы: личная перспектива. J Clin Invest. 2007; 117: 2033–5.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 3.

    Друкер Б.Дж. Ингибирование тирозинкиназы Bcr-Abl как терапевтическая стратегия при ХМЛ. Онкоген. 2002; 21: 8541–6.

    CAS PubMed Google ученый

  • 4.

    Луго Т.Г., Пендергаст А.М., Мюллер А.Дж., Витте О.Н. Активность тирозинкиназы и эффективность трансформации онкогенных продуктов Bcr-Abl. Наука.1990; 247: 1079–82.

    CAS PubMed Google ученый

  • 5.

    Cortez D, Reuther G, Pendergast AM. Тирозинкиназа Bcr-Abl активирует митогенные сигнальные пути и стимулирует фазовый переход G1-S в гемопоэтических клетках. Онкоген. 1997; 15: 2333–42.

    CAS PubMed Google ученый

  • 6.

    Capdeville R, Buchdunger E, Zimmermann J, Matter A. Glivec (STI571, Imatinib), рационально разработанный целевой противораковый препарат.Nat Rev Drug Discov. 2002; 1: 493–502.

    CAS PubMed Google ученый

  • 7.

    Попали П., Патнаик М. Роль новых ингибиторов тирозинкиназы при хроническом миелоидном лейкозе. Рак J. 2016; 1848: 3047–54.

    Google ученый

  • 8.

    Dervisis N, Klahn S. Терапевтические инновации: ингибиторы тирозинкиназы при раке. Vet Sci. 2016; 3: 4.

    PubMed Central Google ученый

  • 9.

    O’Hare T, Deininger MWN, Eide CA, Clackson T., Druker BJ. Нацеленность на сигнальный путь BCR – ABL при резистентной к терапии филадельфийской хромосомно-позитивной лейкемии. Clin Cancer Res. 2011; 17: 212–21.

    PubMed Google ученый

  • 10.

    Хасима Н., Аггарвал ББ. Мишени, связанные с раком, регулируются куркумином. IJBMB. 2012; 3: 328–51.

    CAS PubMed Google ученый

  • 11.

    Гупта С.К., Прасад С., Ким Дж. Х., Патчва С., Уэбб Л. Дж., Приядарсини И. К. и др. Мультитаргетирование куркумином, как показали исследования молекулярного взаимодействия. Nat Prod Rep. 2011; 28: 1937–55.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 12.

    Эшберн ТТ, Тор КБ. Репозиционирование лекарств: выявление и разработка новых способов использования существующих лекарств. Nat Rev Drug Discov. 2004; 3: 673–83.

    CAS PubMed Google ученый

  • 13.

    Hagel JM, Facchini PJ. Метаболизм бензилизохинолиновых алкалоидов — век открытий и дивный новый мир. Physiol растительной клетки. 2013; 54: 647–72.

    CAS PubMed Google ученый

  • 14.

    Лю Дж. К., Кулдвелл В. Т.. Внутриартериальные инфузии папаверина для лечения церебрального вазоспазма, вызванного аневризматическим субарахноидальным кровоизлиянием. Neurocrit Care. 2005; 2: 124–32.

    PubMed Google ученый

  • 15.

    Ким ЭД, Эль-Рашиди Р., Маквари К.Т. Гель для местного применения Папаверин для лечения эректильной дисфункции. J Urol. 1995; 153: 361–5.

    CAS PubMed Google ученый

  • 16.

    Миндеа С.А., Ян Б.П., Бендок Б.Р., Миллер Дж. У., Батьер Х. Х. Эндоваскулярные стратегии лечения церебрального вазоспазма. Нейрохирург Фокус. 2006; 21: 1–7.

    Google ученый

  • 17.

    Саджадиан С., Ватанхах М., Мадждзаде М., Кухсари С.М., Гахремани М.Х., Остад С.Н.Остановка клеточного цикла и апоптогенные свойства алкалоидов опия, носкапина и папаверина, на стволовые клетки рака молочной железы. Toxicol Mech Methods. 2015; 25: 388–95.

    CAS PubMed Google ученый

  • 18.

    Афзали М., Гаэли П., Ханави М., Парса М., Монтазери Х., Гахремани М.Х. и др. Алкалоиды опия, не вызывающие привыкания, избирательно вызывают апоптоз в раковых клетках по сравнению с нормальными клетками. Дару. 2015; 23:16.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 19.

    Ноль Х., Рор-Удилова Н., Гилле Л., Бибершульте В., Юрек Д., Мариан Б. и др. Убихинол и производное папаверина кароверин предотвращают экспрессию факторов, способствующих развитию опухоли, в раковых клетках аденомы и карциномы толстой кишки, вызванной пищевыми жирами. БиоФакторы. 2005. 25: 87–95.

    CAS PubMed Google ученый

  • 20.

    Rubis B, Kaczmarek M, Szymanowska N, Galezowska E, Czyrski A, Juskowiak B и др. Биологическая активность G-квадруплексного ДНК-связывающего лиганда, производного от папаверина, в клетках рака молочной железы.Инвестируйте в новые лекарства. 2009. 27: 289–96.

    CAS PubMed Google ученый

  • 21.

    Алугоджу П., Джанардханшетти С.С., Субараманян С., Периясами Л., Дьявайя М. Кверцетин защищает мутант дрожжей saccharomyces cerevisiae pep4 от окислительного и апоптотического стресса и продлевает хронологическую продолжительность жизни. Curr Microbiol. 2018; 75: 519–30.

    CAS PubMed Google ученый

  • 22.

    Wu J, Meng F, Kong LY, Peng Z, Ying Y, Bornmann WG и др. Связь между устойчивым к иматинибу лейкозом с отрицательной мутацией BCR – ABL и стойкой активацией киназы LYN. J Natl Cancer Inst. 2008; 100: 926–39.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 23.

    Парча П., Сарвагалла С., Мадхури Б., Паджанирадже С., Баскаран В., Кумар М.С. и др. Идентификация природных ингибиторов Bcr-Abl для лечения хронического миелоидного лейкоза.Chem Biol Drug Des. 2017; 90: 596–608.

    CAS PubMed Google ученый

  • 24.

    Sarvagalla S, Singh VK, Ke YY, Shiao HY, Lin WH, Hsieh HP и др. Идентификация эффективных лигандов, подобных фрагментам, из библиотеки HTS: виртуальный скрининг на основе структуры и исследования стыковки 2H- и 3H-пиразоло таутомеров для селективности Aurora киназы A. J. Comput Aided Mol Des. 2015; 29: 89–100.

    CAS PubMed Google ученый

  • 25.

    Chou TC. Исследования комбинаций лекарств и количественная оценка их синергизма с использованием метода Чоу-Талалай. Cancer Res. 2010; 70: 440–6.

    CAS PubMed Google ученый

  • 26.

    Galadari S, Rahman A, Pallichankandy S, Thayyullathil F. Молекулярные мишени и противораковый потенциал сангвинарина — бензофенантридинового алкалоида. Фитомедицина. 2017; 34: 143–53.

    CAS PubMed Google ученый

  • 27.

    Скрабалова Ю., Драстихова З., Новотный Ю. Морфин как потенциальный агент, вызывающий окислительный стресс. Mini Rev Org Chem. 2013; 10: 367–72.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 28.

    Rida PCG, Livecche D, Ogden A, Zhou J, Aneja R. Хроника носкапина: фармако-историческая биография семейства опиатных алкалоидов и его клинического применения. Med Res Rev.2015; 35: 1072–96.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 29.

    Chen Q, Kang J, Fu C. Независимость и ассоциации между апоптозом, аутофагией и некрозом. Сигнал Transduct Target Ther. 2018; 3:18.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 30.

    Фарруджа Г., Бальзан Р. Окислительный стресс и запрограммированная гибель клеток у дрожжей. Фасад Онкол. 2012; 2: 64.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 31.

    Parsons AB, Lopez A, Givoni IE, Williams DE, Gray CA, Porter J, et al.Изучение механизма действия биологически активных соединений путем химико-генетического профилирования дрожжей. Клетка. 2006; 126: 611–25.

    CAS PubMed Google ученый

  • 32.

    Reddi AR, Culotta VC. SOD1 объединяет сигналы кислорода и глюкозы для подавления дыхания. Клетка. 2013; 152: 224–35.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 33.

    Weids AJ, Grant CM.Пероксиредоксин Tsa1 дрожжей защищает от окислительного стресса, вызванного белковыми агрегатами. J Cell Sci. 2014; 127: 1327–35.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 34.

    Мартинс Д., Инглиш AM. Активность каталазы стимулируется h3O2 в богатой культуральной среде и необходима для устойчивости к h3O2 и адаптации дрожжей. Redox Biol. 2014; 2: 308–13.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 35.

    Перейра С., Чавес С., Алвес С., Салин Б., Камугран Н., Манон С. и др. Деградация митохондрий при апоптозе дрожжей, индуцированном уксусной кислотой: роль Pep4 и носителя ADP / ATP. Mol Microbiol. 2010. 76: 1398–410.

    CAS PubMed Google ученый

  • 36.

    Китагаки Х., Араки Ю., Фунато К., Шимои Х. Смерть дрожжей, вызванная этанолом, проявляет признаки апоптоза, опосредованного путем деления митохондрий. FEBS Lett. 2007; 581: 2935–42.

    CAS PubMed Google ученый

  • 37.

    Кармона-Гутьеррес Д., Айзенберг Т., Бюттнер С., Мейзингер С., Кремер Г., Мадео Ф. Апоптоз у дрожжей: триггеры, пути, подпрограммы. Смерть клетки отличается. 2010; 17: 763–73.

    CAS PubMed Google ученый

  • 38.

    Картер Б.З., Мак Д.Х., Шобер В.Д., Кабрейра-Хансен М., Беран М., Маккуин Т. и др. Регулирование экспрессии сурвивина посредством каскада Bcr – Abl / MAPK: нацеливание на сурвивин преодолевает устойчивость к иматинибу и увеличивает чувствительность к иматинибу в чувствительных к иматинибу клетках ХМЛ.Кровь. 2006; 107: 1555–63.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 39.

    Афар ДЕХ, Маклафлин Дж., Шерр С.Дж., Витте О.Н., Руссель М.Ф. Передача сигналов онкогенами ABL через циклин D1. Proc Natl Acad Sci USA. 1995; 92: 9540–4.

    CAS PubMed Google ученый

  • 40.

    Биби С., Арсланхан М.Д., Лангенфельд Ф., Жаннингрос С., Черни-Рейтерер С., Хадзиюсуфович Э. и др.Взаимодействие сигнальных путей STAT5 и AKT при хроническом миелолейкозе и мастоцитозе: возможные новые цели терапии. Haematologica. 2014; 99: 417–29.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 41.

    Mirabilii S, Ricciardi MR, Piedimonte M, Gianfelici V, Bianchi MP, Tafuri A. Биологические аспекты mTOR при лейкемии. Int J Mol Sci. 2018; 19: 1–20.

    Google ученый

  • 42.

    Гейер Р., Златева Т., Лакшмикуттямма А., Шеридан Д.П., Декото Дж. Ф. GNF-2, аллостерический ингибитор BCR-ABL, идентифицирует новый опосредованный миристоилированием механизм, регулирующий способность BCR-ABL активировать передачу сигналов HCK и IGF-1. Кровь. 2009; 114.

  • 43.

    Moon EY, Lerner A. Ингибиторы PDE4 активируют митохондриальный апоптотический путь в клетках хронического лимфоцитарного лейкоза, который регулируется протеинфосфатазой 2A. Кровь. 2003. 101: 4122–30.

    CAS PubMed Google ученый

  • Сравнительный анализ транскриптома с использованием мутанта папаверина с высоким содержанием папаверина Papaver somniferum раскрывает путь и нехарактерные этапы биосинтеза папаверина

    Цитата: Pathak S, Lakhwani D, Gupta P, Mishra Somniferum, Shifuk(2013) Сравнительный анализ транскриптома с использованием мутанта папаверина с высоким содержанием папаверина Papaver somniferum раскрывает путь и не охарактеризованные этапы биосинтеза папаверина. PLoS ONE 8 (5): e65622. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622

    Редактор: Тургай Унвер, Университет Джанкири Каратекин, Турция

    Поступила: 9 ноября 2012 г .; Одобрена: 26 апреля 2013 г .; Опубликован: 30 мая 2013 г.

    Авторские права: © 2013 Pathak et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Финансирование: Авторы благодарны Совету по научным и промышленным исследованиям, Нью-Дели, правительство Индии, за предоставление финансовой поддержки для выполнения этой работы в рамках сетевого проекта (NWP-08 и BSC0107). SP благодарит Совет по научным и промышленным исследованиям, Нью-Дели, правительство Индии, за получение стипендии для старшего научного сотрудника.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

    Введение

    Бензилизохинолиновые алкалоиды (БИА) образуют одну из самых больших и разнообразных групп алкалоидов, насчитывающую около 2500 членов. Опийный мак ( Papaver somniferum ) считается единственным источником нескольких ценных фармацевтически важных BIAs, включая наркотический анальгетик морфин, противокашлевый кодеин, потенциальный противораковый препарат носкапин, антимикробное средство сангвинарин и сосудорасширяющее средство папаверин.Папаверин, синтезируемый в небольших количествах в большинстве сортов опийного мака, также используется в качестве релаксанта гладких мышц [1], при эректильной дисфункции [2], лечении спазмов кишечника и мочевыводящих путей [3], мигренозных головных болей [4] и шизофрении. [5]. Все эти эффекты объясняются его ингибирующим действием на фосфодиэстеразы за счет повышения уровня цАМФ [5], [6].

    Биосинтез BIA начинается с конденсации двух производных L-тирозина, 4-гидроксифенилацетальдегида (4-HPAA) и дофамина, катализируемой норкоклауринсинтазой (NCS), которая дает (S) -норкоклаурин [7], [8].Последовательное метилирование и гидроксилирование множеством ферментов производят (S) -ретикулин [9] — [11]. (S) -ретикулин действует как центральный промежуточный продукт, который направляется в разные ветви для биосинтеза различных типов BIA. Из нескольких ветвей путь биосинтеза и ферменты, ведущие к morphinans, наиболее охарактеризованы, хотя многие промежуточные стадии и регуляторные механизмы все еще не охарактеризованы [12] — [17]. Недавно установленный путь биосинтеза морфина был реконструирован с использованием высокопроизводительного анализа, включающего методы секвенирования транскриптома и подавления генов [18].

    В отношении пути биосинтеза папаверина имеется очень ограниченная и противоречивая информация. Эксперименты с кормлением показали, что (S) -ретикулин и норориенталин, а также норретикулин являются возможными промежуточными продуктами метаболизма [19], [20]. Было предложено несколько возможных путей с использованием этих молекул в качестве промежуточных продуктов. Первый предложенный путь, NH-путь (с участием N-десметильных промежуточных соединений), для биосинтеза папаверина использует (S) -коклаурин с участием 3′-гидроксилазы и норретикулин-7-O-метилтрансферазу (N7OMT) [21].Второй предложенный путь, NCH 3 (с участием нескольких N-метилированных промежуточных продуктов), начинается с превращения (S) -ретикулина в (S) -лауданин, катализируемого ретикулин-7-O-метилтрансферазой (7OMT) [22]. В результате последующего 3′-O-метилирования, N-деметилирования и дегидрирования синтезируется папаверин [23]. Эти последующие стадии 3′-O-метилирования, N-деметилирования и дегидрирования важны для обоих путей получения папаверина. Недавно с помощью секвенирования транскриптома и вирус-индуцированного сайленсинга генов (VIGS) было высказано предположение, что для биосинтеза папаверина действуют промежуточные стадии обоих ранее описанных путей [24].В противоположность этому, та же группа сообщила, что основной путь к биосинтезу папаверина включает промежуточные соединения N-десметила и не проходит в основном через (S) -ретикулин [25]. Взятые вместе, эти исследования показывают, что биосинтез папаверина все еще остается спорным более чем через столетие после того, как этот путь был впервые предложен.

    Основное ограничение в понимании биосинтеза папаверина и других BIAs связано с ограниченной геномной информацией об этом растении. У разных растений две стратегии, одна для установления полного генома, а другая для генерации EST, были полезны для понимания путей и сетей, ведущих к биосинтезу первичных и вторичных метаболитов, а также поведения растений при различных стрессах.В настоящее время полное секвенирование генома мака не начато из-за большого размера генома (7,4 Гбит / с) [26]. Первоначально наборы данных EST использовались для открытия генов и в некоторой степени для выяснения пути биосинтеза алкалоидов [11], [17]. Использование технологий секвенирования следующего поколения (NGS) привело к установлению транскриптомов нескольких сортов мака с дифференциальным содержанием BIA и открытию ряда ранее не идентифицированных генов [25], [27]. Недавно, помимо пошаговой проверки [18], [28], особое внимание было уделено анализу мутантов для выяснения путей биосинтеза конкретных алкалоидов.Используя этот подход, метаболический блок у мутанта top1 (тебаин орипавин мак 1), который дефектен в 6-O-деметилировании тебаина и орипавина [29], помог идентифицировать гены, участвующие в биосинтезе тебаина [17]. Исследования также предполагают, что селективность мутантов позволяет исследовать целевые избыточные ответвления пути и может способствовать лучшему пониманию эффективного производства высокоценных соединений с использованием биотехнологических подходов [18].

    Здесь мы охарактеризовали pap1 (естественно отобранный мутант с высоким содержанием папаверина 1) опийного мака, который накапливает папаверин до 6% латекса с видимым фенотипом белого латекса по сравнению с нормальным сортом (BR086) с 0–0 .5% папаверина нормального розового латекса. Мы установили полный транскриптом pap1, и BR086 с использованием высокопроизводительной платформы 454 Genome Sequencer (GS) FLX с целью идентификации генов, участвующих в биосинтезе папаверина. Мы сообщаем о ряде дифференциально экспрессирующихся неидентифицированных транскриптов между pap1, и BR086. Используя эти данные, мы идентифицировали членов семейств генов метилтрансферазы (МТ) и дегидрогеназы. Экспрессия дифференциально экспрессируемых генов была подтверждена с помощью ПЦР в реальном времени.На основе идентифицированных генов мы предполагаем, что идентифицированные гены могут быть потенциальными кандидатами для выяснения биосинтеза папаверина у P. somniferum .

    Материалы и методы

    Растительный материал, конструирование библиотеки кДНК и секвенирование

    Ткань плодоножки (стебель, на 2 см ниже капсулы) prehook стадии мутанта pap1 и сорта BR086 сорта Papaver somniferum L. собраны с четырех растений, выращенных на опытном участке института.Замороженные ткани измельчали ​​до тонкого порошка в жидком азоте, и общую РНК экстрагировали с помощью набора Spectrum Plant Total RNA Kit (Sigma-Aldrich, США) и обрабатывали ДНКазой, свободной от РНКазы (Ambion, США), в соответствии с инструкциями производителя. Качество и количество общей РНК анализировали с помощью агарозного геля и спектрофотометрического анализа (ND-1000 Nanodrop, NanoDrop Technologies, США). Равное количество общей РНК из четырех различных препаратов было объединено и использовано для дальнейшей обработки для секвенирования транскриптома.Библиотеку двухцепочечной (ds) кДНК получали с использованием объединенной общей РНК и набора для синтеза двухцепочечной кДНК (Invitrogen, Carlsbad, CA) в соответствии с рекомендациями производителя. Количество, а также качество (ds) библиотеки кДНК проверяли на ДНК-чипе Agilent 2100 Bioanalyzer (Agilent Technologies Inc., Санта-Клара, Калифорния). Случайные фрагменты (ds) кДНК длиной около 250-800 п.н. были получены распылением и очищены с использованием спин-колонок для очистки QIAquick PCR (Qiagen, США). Библиотеки кДНК с лигированным адаптером (ds) получали с использованием фрагментов размером более 300 п.н. в соответствии с инструкциями производителя (Roche, США).(ds) фрагменты кДНК денатурировали для получения фрагментов одноцепочечной кДНК, которые амплифицировали с помощью эмульсионной ПЦР для дальнейшего секвенирования в соответствии с инструкциями производителя (Roche, США). Секвенирование библиотек кДНК выполняли на платформе секвенирования 454-GS FLX (454 Life Sciences, Roche, США) с использованием набора GS FLX Titanium.

    Сборка De novo и аннотация последовательности

    Чтения из библиотек pap1 и BR086 были обработаны и обрезаны для слабых сигналов с помощью программного обеспечения пиросеквенирования GS FLX для получения высококачественного (HQ) (≥99.5% точность одноосновных чтений) последовательностей. Считывания HQ были собраны с использованием Roche GS Assembler (версия 2.5.3) с перекрытием 40 пар оснований и 95% идентичностью для независимых библиотек, образующих контиги и синглтоны. Контиги и синглтоны обеих библиотек ( pap1, и BR086) были помечены и собраны вместе с целью количественной оценки дифференциальной экспрессии унигенов. Общие унигены, сформированные в разных библиотеках, были объединены и аннотированы с использованием автономной версии программы BLASTx для базы данных белков Nr (http: // www.ncbi.nlm.nih.gov; выпущен 23.06.2009), база данных белков арабидопсиса на информационном ресурсе Arabidopsis (TAIR; http://www.arabidopsis.org; версия Tair9) и база данных NCBI-CDD (база данных сохраняемых доменов) с сокращенным значением E от 10 −5 и извлечение только верхнего совпадения для каждой последовательности.

    Функциональная характеристика и определение биологических путей

    Чтобы назначить функцию каждому уникальному гену, был проведен анализ онтологии генов (GO) с использованием аннотации GO в онлайн-базе данных TAIR (http: // www.arabidopsis.org/), который классифицировал унигены по категориям клеточного компонента, молекулярной функции и биологического процесса. Идентификаторы TAIR всех унигенов (контигов и синглетонов) из pap1, и BR086 были получены из аннотации TAIR9. Каждая аннотированная последовательность может иметь более одного термина GO, либо назначенных в разных категориях GO, либо в одной и той же категории [30] . Чтобы получить обзор сетей генных путей, присвоение унигенов из комбинированного транскриптома метаболическим путям было картировано в соответствии с Киотской энциклопедией генов и геномов (KEGG) [31].Номера КО были присвоены уникальным последовательностям на основе поиска BLASTx в белковых базах данных с использованием порогового значения E 10 -5 . Результат анализа KEGG включает назначения KEGG ортологии (KO) и пути KEGG (http://www.genome.jp/kegg/), которые заполняются назначениями KO.

    Цифровое профилирование экспрессии генов

    Относительный уровень экспрессии генов для различных унигенов рассчитывали с использованием числа считываний на один униген в объединенной сборке транскриптома pap1, и BR086.Для этого контиги и синглтоны библиотек pap1, и BR086 были помечены, собраны вместе и аннотированы. Транскриптов на миллион (tpm) рассчитывали для каждого контига, сформированного для дальнейшего анализа. Значения относительной экспрессии унигенов в образцах pap1, и BR086 из комбинированной сборки вычисляли путем деления считывания 454 последовательностей на общее количество считываний 454 последовательностей в обоих образцах. Дифференциальную экспрессию генов рассчитывали, используя значение R и кратное изменение.Для расчета порогового значения R было сгенерировано 1000 наборов данных для каждой библиотеки в соответствии со случайным распределением Пуассона, как описано в [32]. Log 2 преобразованных значений для каждого унигена подвергали в МэВ (средство просмотра множественных экспериментов, инструмент Java для анализа геномных данных, версия 4.8.1). Значение R ≥8 и кратное изменение ≥2 для унигена рассматривалось как дифференциальное выражение. Иерархическая кластеризация (HCl) логарифмически преобразованных данных экспрессии была проведена с использованием Евклидовой матрицы расстояний и метода кластеризации среднего сцепления [33].

    ПЦР-анализ в реальном времени

    Экспрессия предполагаемых генов, участвующих в биосинтезе папаверина, была проанализирована с помощью qRT-PCR с использованием системы обнаружения PCR в реальном времени (ABI 7500, Applied Biosystems, США) и быстрой смеси SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems, Warrington, UK) для проверки секвенирования 454 данные. Каждая реакция ПЦР была настроена в общем объеме 20 мкл, содержащем 10 мкл мастер-микса Fast SYBR green, 10 нг образца кДНК, приготовленного с использованием набора для синтеза кДНК RevertAid H минус первой цепи (Fermantas, Life Sciences, Онтарио, Канада) и ген-специфичного праймеры (Таблица S1).Условия цикла ПЦР были следующими: 50 ° C в течение 2 минут, 95 ° C в течение 2 минут для начальной денатурации с последующими 40 циклами при 95 ° C в течение 15 секунд и 60 ° C в течение 60 секунд. Каждый раз наборы реакций также включали контроль без шаблона. В качестве эталонов мы использовали зонды, специфичные для актина. Данные qPCR анализировали методом ΔΔCT с использованием эталонного гена. Для каждого образца уровни мРНК генов-мишеней были нормализованы к уровню мРНК актина. Все эксперименты были повторены с использованием трех биологических повторов, и данные были проанализированы статистически (± стандартное отклонение).

    Оценка содержания алкалоидов

    Опиумный латекс из капсул из созревших растений pap1, и BR086 собирали и хранили в ДМСО для экстракции алкалоидов. Растворитель, содержащий экстрагированные алкалоиды, был восстановлен, и оценка различных алкалоидов была проведена путем разделения с использованием жидкостной хроматографии высокого давления по стандартному методу [34], [35]. Было рассчитано среднее содержание каждого алкалоида по крайней мере в трех образцах, и данные выражены как среднее +/- стандартное отклонение (S.Д.).

    Результаты и обсуждение

    Усиление биосинтеза папаверина у мутанта

    pap1

    Отчетливые фенотипы в отношении цвета свежего латекса наблюдались при прокалывании капсул мутанта pap1 по сравнению с BR086 у P.somnifera. В отличие от розового латекса, произведенного в BR086, pap1 выделял белый латекс (рис. 1a). Ранее Khanna и Shukla (1991) [36] изучали наследование содержания папаверина в отобранных линиях опийного мака и установили положительную корреляцию между белым свежим латексом как морфологическим маркером и высоким содержанием папаверина.Экссудация свежего белого латекса и содержание папаверина также были связаны с действием гена посредством скрещивания линии с высоким содержанием папаверина с линией BR086 и анализа шести последующих поколений [37]. Поскольку отобранный естественным образом мутант pap1 выделяет белый латекс при прокалывании, анализ основных морфинанов (тебаина, кодеина и морфина) и папаверина был проведен на мутанте pap1, и BR086 (рис. 1b). Никаких существенных различий в содержании тебаина, кодеина и морфина в латексе между pap1, и BR086 не наблюдалось.Однако содержание папаверина было более чем в 12 раз выше (6% высушенного латекса) в pap1 по сравнению с линией BR086 (0,48% латекса). Поскольку мутант pap1 накапливает значительно высокое содержание папаверина без изменений в накоплении у морфинанов, мы предположили, что это может служить хорошей моделью для изучения и выяснения пути биосинтеза папаверина.

    Рис. 1. Фенотип свежего латекса и удельное содержание алкалоидов в pap1 и BR086.

    Свежий латекс BR086 имеет коричневый или красный цвет, тогда как pap1 выделяется белым латексом (а). Содержание конкретных алкалоидов в латексе измеряли в pap1 и BR086 (b) с помощью жидкостной хроматографии высокого давления. *** обозначают значения, которые значительно отличаются от BR086.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g001

    Было высказано предположение, что ранние стадии биосинтеза BIA у P. somniferum происходят в клетках паренхимы, связанных с сосудистым пучком и окружающими латициферами у надземных растений. части.После синтеза алкалоиды накапливаются в пластификаторах капсулы [38]. Помимо капсулы, ткань ствола, расположенная в пределах 2–4 см от капсулы, также является богатым источником латекса, содержащего алкалоиды. Иммунолокализация ферментов биосинтеза алкалоидов и главного латексного белка (MLP) из этой области ствола предполагает, что полный механизм, участвующий в биосинтезе алкалоидов, находится в этой ткани [38]. Поэтому мы использовали ткань ствола ниже 2 см капсулы (ножки) для дальнейшего транскриптомного анализа.Другие исследования также использовали ту же ткань для проведения транскриптомного анализа различных сортов мака [29], [39].

    Секвенирование транскриптома и сборка последовательности

    библиотек кДНК из мРНК из ткани плодоножки pap1 и BR086 из P. somniferum секвенировали с использованием прогона на половину планшета для каждой на платформе 454-GS FLX Titanium. После первоначальной качественной фильтрации посредством обрезки последовательностей адаптера и удаления считываний короче 50 п.н., запуск секвенирования дал 770126 (238 МБ) и 763,579 (238 МБ) тегов экспрессированной последовательности высокого качества (HQ) для строк pap1, и BR086 соответственно (Таблица 1 ).Файлы исходных последовательностей SRR403064 ( pap1 ) и SRR403061 (BR086) были депонированы в NCBIs Short Read Archive под SRA049668. Приблизительно 90% полученных считываний были между 200 и 600 п.н. от обоих транскриптомов. Сборка ридов de novo привела к созданию 26 657 и 32 313 контигов со средней длиной 579 и 557 оснований из сорта pap1, и BR086, соответственно (Таблица 1). Распределение размеров 454-ридных и собранных контигов показано на рис. 2 (а и б).Среди всех контигов 46% pap1 и 44% BR086 длиной более 500 п.н. считались большими контигами. Помимо сборки в виде контигов, 100 685 и 73 815 прочтений со средней длиной более 274 п.н. остались одиночными. GC содержание унигенов из pap1, и BR086 составляло примерно 40% (таблица 1).

    Рис. 2. Последовательность чтения, сборки и аннотации.

    Распределение по размерам 454 высококачественных ридов (а) и собранных контигов (б). Черные и белые столбцы представляют считывания и контиги из данных транскриптома pap1, и BR086 соответственно.Аннотацию унигенов pap1, (c) и BR086 (d) проводили по базам данных TAIR, NR и CDD. Из всех аннотированных унигенов 25 343 и 19 225 унигенов из pap1, и BR086, соответственно, имели общие совпадения BLAST с аннотированными белками из разных баз данных.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g002

    Функциональная аннотация и классификация транскриптомов

    Собранные последовательности, контиги и синглтоны из линии pap1, и BR086 сравнивали с последовательностями в трех основных общедоступных базах данных белков (NR, TAIR и CDD) с использованием алгоритма Basic Local Alignment Search Tool X (BLASTX) с E- значение отсечения 10 −5 .Всего 127 342 и 106 128 уникальных генов (контиги и синглтоны; Таблица 1) из pap1, и BR086, соответственно, были использованы для аннотации с использованием базы данных NR, TAIR и CDD (Таблицы S2-S7). В совокупности в общей сложности 55 019 (43,2%) и 39 570 (37,28%) унигенов из данных транскриптомов pap1, и BR086, соответственно, были аннотированы с использованием этих баз данных (Таблица S8). Из всех 25 343 и 19 225 унигенов из pap1, и BR086, соответственно, имели общие попадания BLAST в аннотированные белки в NR, TAIR и CDD (рис. 2c и 2d).Более 38,47 и 30,95 процентов синглтонов из pap1, и BR086 также были аннотированы с использованием этих баз данных белков. Большое количество одноэлементных последовательностей с совпадениями BLAST указывает на то, что несобранные последовательности по-прежнему предоставляют множество ценной информации о последовательностях и улучшают общий охват транскриптомом.

    Назначения

    Gene Ontology (GO) описывают генные продукты с точки зрения связанных с ними молекулярных функций, биологических процессов и клеточных компонентов. Чтобы назначить предполагаемые функциональные роли унигенам из pap1, и BR086, BLASTX в протеоме Arabidopsis (TAIR) выполняли для обеспечения аннотации GO.Из присвоенных GO терминов 17,140 ( pap1 ) и 16615 (BR086) уникальных генов относились к биологическим процессам, 17084 ( pap1 ) и 16600 (BR086) унигенам относились к молекулярной функции, а также 15 294 ( pap1 ) и 14752 (BR086) присущи клеточным компонентам, что указывает на большое функциональное разнообразие генов в транскриптомных данных (рисунок S1). Среди них 7 654 и 7 428 унигенов в pap1, и BR086, соответственно, имели назначение во всех трех категориях. Остальным унигенам не удалось получить член GO, в основном из-за их неинформативности (например,грамм. «Неизвестный», «предполагаемый» или «гипотетический» белок) описание. Равномерное распределение отнесений белков к более специализированным терминам GO дополнительно указывает на то, что последовательности P.somnifera, и 454, полученные из pap1, и BR086, представляют белки из разнообразного диапазона функциональных классов. Эти три основные категории классификации GO были далее разделены на 45 функциональных групп (Рисунок 3). В каждой из трех основных категорий классификации GO доминируют термины «другой метаболический процесс», «другие клеточные процессы» и «неизвестный биологический процесс».В категории биологических процессов большое количество генов было отнесено к «другим клеточным и метаболическим процессам», «ответу на абиотический или биотический стимул» и ответу на стресс. Следовательно, установленный транскриптом из pap1, и BR086 должен существенно помочь в открытии новых генов, участвующих в биосинтезе вторичных природных продуктов, включая BIAs. У сорта pap1, и BR086 не наблюдалось существенной разницы в количестве унигенов в разных терминах GO.

    Рисунок 3. Гистограмма классификации онтологий генов.

    Результаты суммированы по трем основным категориям: биологический процесс, клеточный компонент и молекулярная функция. Столбцы представляют собой процентное соотношение унигенов в pap1, (белые столбцы) и BR086 (черные столбцы) с совпадениями BLAST в базе данных TAIR9 для каждого термина GO.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g003

    Характеристики комбинированной сборки

    pap1 и BR086

    Высококачественные (HQ) экспрессируемые теги последовательности 770,126 и 763,579 для линии pap1, и BR086, соответственно, были помечены, объединены и собраны вместе, чтобы получить больше информации о полном транскриптоме мака.Это было выполнено с целью получить более крупные контиги, увеличить глубину и проанализировать дифференциальную экспрессию генов (DGE) для специфических уникальных генов. HQ читает с обоих транскриптомов, собранных в 533 705 унигенов, состоящих из 46 846 контигов со средней длиной 567,5 п.н. и 118 841 синглетонов со средней длиной 266,2 п.н. Частотное распределение длин контигов, сгруппированных между 100–4379 п.н., а большая часть контигов находится в диапазоне от 400 до 1200 п.н. (Рисунок 4a). Длина контигов и количество считываний, собранных в этот контиг в комбинированной сборке, больше по сравнению с независимыми сборками pap1, и BR086 (таблица 1; рис.2б).

    Рис. 4. Комбинированная сборка и аннотация.

    Распределение размеров объединенных длины и частоты собранных контигов (а) с использованием высококачественных считываний из pap1, и BR086. Статистика аннотаций (b) унигенов комбинированной сборки, запрошенная в базах данных TAIR, NR и CDD.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g004

    Unigenes из комбинированной сборки Pap1, и BR086 были аннотированы различными базами данных (TAIR, NR, CDD) с помощью инструмента поиска базового локального выравнивания X ( BLASTX) с отсечкой E-значения 10 −5 .Всего 57 493 унигена (22 213 контигов и 35 280 синглетонов) были аннотированы с помощью базы данных TAIR. В базе данных NR и CDD были аннотированы 59 438 и 33 781 униген, соответственно. Общая аннотация для 33 664 уникальных генов была предоставлена ​​всеми тремя базами данных (рис. 4b). Наилучшее совпадение для каждого унигена, запрошенного в базе данных TAIR из комбинированной сборки, было использовано для назначения функциональной аннотации GO с точки зрения групп биологического процесса (17,140), молекулярной функции (17,271) и клеточного компонента (15,421).Эти три основные категории классификации GO были разделены на несколько функциональных групп и подгрупп (рисунок 5). Три основные категории классификации GO включают молекулярную функцию (рисунок 5a), клеточный компонент (рисунок 5b) и биологический процесс (рисунок 5c). В категории биологических процессов большое количество генов было отнесено к «другим клеточным и метаболическим процессам», «трансферазной активности» и «ферментативной активности». Несколько наборов унигенов были связаны с неизвестными метаболическими процессами и неизвестным клеточным компонентом.В дальнейшем они были разделены на несколько подгрупп (Таблица S9). В этих подгруппах было обнаружено, что подавляющее большинство унигенов участвует в субклеточном контроле метаболических процессов. Всего 7738 уникальных генов были общими во всех трех категориях GO (рисунок S2).

    Рисунок 5. Классификация генной онтологии унигенов из комбинированной сборки pap1 и BR086.

    Результаты суммированы по трем основным категориям: биологический процесс (а), клеточный компонент (б) и молекулярная функция (в).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g005

    Функциональная классификация и определение путей были выполнены Киотской энциклопедией генов и геномов (KEGG). Чтобы идентифицировать биологические пути, которые функционируют в маке, 57 493 аннотированных последовательности из комбинированной сборки были сопоставлены с эталонными каноническими путями в KEGG. В общей сложности все контиги и одноэлементные последовательности мака были отнесены к 124 путям KEGG. Интересно, что 3665 унигенов участвуют в биосинтезе различных вторичных метаболитов (таблица 2).Среди всех путей кластер «деградация лимонена и пинена [PATH: ko00903] представляет собой самую большую группу, за которой следуют биосинтез фенилпропаноидов [PATH: ko00940] и биосинтез алкалоидов изохинолина [PATH: ko00950] соответственно. Широкое исследование клеточного метаболизма, участвующего в превращении сахарозы в BIAs, привело к идентификации транскриптов, соответствующих значительному количеству ферментов метаболического пути. Анализ показал, что все известные гены, участвующие в биосинтезе BIA, присутствовали в объединенных данных транскриптомов, полученных в нашем исследовании (Рисунок S3).Количество прочтений, которые собраны в специфические гены, связанные с биосинтезом BIA, представлено на рисунке S4. Из всех генов фермент берберинового мостика (BBE) имел наименьшее количество прочтений (583), тогда как (S) -норкоклаурин-6-O-метилтрансфераза (6OMT) была сформирована с наибольшим числом прочтений (13 442). Аннотированные контиги, гомологичные генам первичных метаболических путей, демонстрировали высокую гомологию с арабидопсисом или другими генами двудольных растений, при этом большинство генов имели более 80% сходства на уровне белка, что позволяет предположить, что эти гены были высоко консервативными во время эволюции.

    Идентификация дифференциально экспрессирующегося транскрипта, участвующего в биосинтезе папаверина

    Перед нашим исследованием было проведено два исследования транскриптома мака, которые генерировали информацию об унигенах из культур клеток мака (93 723 унигена) для биосинтеза сангвинарина [27] и сравнительный анализ восьми различных сортов (от 58 140 до 111 841 униген) [39]. Эти исследования были ограничены выявлением генов, участвующих в этих путях, и не проводился сравнительный анализ для выяснения единственного биохимического пути конкретного алкалоида.Однако наш сравнительный анализ с использованием транскриптомов pap1, и BR086 был направлен на выявление предполагаемых генов, которые могут участвовать в биосинтезе папаверина. Для идентификации дифференциально экспрессирующихся генов был применен статистический тест R [32], и только значение R ≥8 было отфильтровано, что дало достоверность> 99%. В этом тесте синглтоны были статистически незначимыми и, следовательно, отброшены. Из 46 920 контигов из комбинированной сборки pap1, и BR086 только 3336 были достоверно (значение R ≥8; кратное изменение ≥2) дифференциально экспрессировалось.Из них 1393 гена были активированы (таблица S10) с более чем 2-кратным изменением экспрессии в pap1 по сравнению с BR086. Аналогично, 1943 гены подверглись понижающей регуляции (Таблица S11) с более чем 2-кратным изменением экспрессии в pap1 по сравнению с BR086. Из них 76 активированных и 272 подавленных гена не попали ни в одну из проанализированных баз данных, они являются новыми генами и могут участвовать в различных путях или молекулярных сетях, участвующих в первичных и вторичных метаболических путях.Наш анализ показал, что из всех известных генов, участвующих в биосинтезе BIA, TYDC, NCS и CYP80B3 не экспрессируются по-разному между pap1, и BR086. Это говорит о том, что поток субстрата для биосинтеза (S) -норкоклаурина, который является частью как NH-, так и NCH 3 -путей (Фиг.6), может не быть решающим фактором для биосинтеза папаверина.

    Рисунок 6. Предлагаемые пути биосинтеза (NH- и NCh4-пути) и экспрессия генов в мутанте pap1 .

    Ферменты, информация о кДНК которых неизвестна, показаны пунктирными стрелками. Ферменты, выделенные красным цветом, показывают повышенную регуляцию в pap1 по сравнению с BR086, тогда как зеленым (7OMT) показана понижающая регуляция. Стенограммы без изменения выражения показаны черным. Транскрипты, идентифицированные посредством сравнительного анализа транскриптомов с предполагаемым участием папаверина, подчеркнуты. Сокращения: TYDC, тирозиндекарбоксилаза; NCS, норкоклауринсинтаза; 6OMT, (S) -норкоклаурин-6-O-метилтрансфераза; CNMT, (S) -коклаурин-N-метилтрансфераза; NMCH, (S) -N-метилкоклаурин-3′-гидроксилаза; 3’ОНаза, 3′-гидроксилаза; 4’OMT, (S) -3′-гидроксиN-метилкоклаурин-4′-O-метилтрансфераза; N7OMT, норретикулин-7-O-метилтрансфераза; 7OMT, ретикулин-7-O-метилтрансфераза; 3′OMT, 3′-O-метилтрансфераза; деГаза, дегидрогеназа; LNdeMT, лауданозин-N-деметилаза.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g006

    Предполагаемые гены, участвующие в не охарактеризованных стадиях биосинтеза папаверина

    Используя различные наборы экспериментов, исследования предлагают два предполагаемых и спорных пути биосинтеза папаверина (рис. 6). Оба пути используют (S) -норкоклаурин, синтезированный из предшественника L-тирозина. Из двух путей NH-путь, в котором используются N-десметилированные промежуточные соединения, был предложен на основе экспериментов с кормлением меченых предшественников в сочетании с контролируемой деградацией меченого папаверина [40] и in vitro функциональных характеристик норретикулина-7-O- метилтрансфераза (N7OMT) [21].Второй предложенный путь (путь NCH 3 ) проходит через несколько N-метилированных промежуточных продуктов и включает (S) -ретикулин [23]. Однако принятие как (S) -ретикулина, так и (S) -норретикулина в качестве субстрата не исключает ни N-десметил, ни N-метилбензилизохинолин [24]. Споры также существуют из-за отсутствия информации, относящейся к генам / ферментам, участвующим в не охарактеризованных стадиях, таких как 3′-O-метилирование, и неизвестное дегидрирование, необходимое для биосинтеза папаверина.Эти три этапа являются узкими местами в предлагаемом пути, и идентификация генов, участвующих в этих этапах, приведет к выяснению точного пути. Было высказано предположение, что для разрешения этого противоречия необходимо использовать подход системной биологии с использованием мутантов / контрастирующих хемотипов биосинтеза папаверина, технологии NGS и функциональной геномики. Недавно такой анализ был проведен с использованием мутанта top1 (тебаин орипавин мак 1), который помог идентифицировать гены, участвующие в биосинтезе тебаина [17].В случае пути биосинтеза папаверина необходимо выяснить несколько недостающих звеньев, эти не охарактеризованные стадии включают членов семейств генов метилтрансферазы, цитохрома P450 и дегидрогеназы. В наших данных транскриптомов мы проанализировали транскрипты, кодирующие членов этих семейств генов, и изучили их дифференциальную экспрессию.

    После объединения и строгой фильтрации объединенных данных собранных транскриптомов было идентифицировано в общей сложности 363 контига, аннотированных как метилтрансферазы (Таблица S12).Из них более 100 контигов уже обнаружены в путях BIA от разных растений. Всего 36 контигов показали аннотацию с базой данных Papaver somniferum EST. Несколько контигов были аннотированы как 4’OMT, 6’OMT, CNMT, 7OMT и N7OMT, а также SAM-зависимая метилтрансфераза, уже известная в P.somniferum . Анализ кластеризации иерархии предполагает, что количество MT по-разному экспрессируется между pap1, и BR086 (Рисунок 7a). Из общего числа МТ 22 и 37 имеют как минимум 2-кратную повышенную или понижающую регуляцию в pap1 по сравнению с BR086.Активированные контиги также включают контиги, демонстрирующие гомологию с 4’OMT (contig30047; 3,4 раза), 6’OMT (contig25475; 2,2 раза), CNMT (contig 27244; 2,3 раза) и N7OMT (contig52316; 2,1 раза). (Таблица S12), которые относятся к N-десметильной группе. Из общего числа МТ с пониженной регуляцией (контиги №№ 26349, 42117 и 9735) были подавлены больше всего. В них контиг26349, кодирующий (R, S) -ретикулин-7-O-метилтрансферазу (7OMT), был подавлен (в 4,65 раза), который, как предполагается, участвует в пути N-Ch4 и использует (S) -ретикулин (рис. 6). ) для синтеза папаверина [23].Согласно предложенным путям, если путь NCH 3 участвует в усиленном биосинтезе папаверина в pap1, , ему потребуется повышающая регуляция 7OMT, чтобы направить поток в сторону биосинтеза папаверина вместо BIAs. Интересно, что наш анализ выявил более чем 4-кратное снижение уровня 7OMT в pap1. В совокупности повышающая регуляция известных 6OMT, 4OMT и N7OMT, а также понижающая регуляция 7OMT предполагает, что в мутанте pap1 (S) -ретикулин не может быть предпочтительным субстратом для биосинтеза папаверина.Однако, чтобы использовать (S) -коклаурин через путь NCH 3 для биосинтеза папаверина, требуется дополнительный 3’OMT. Этот путь требует трехступенчатого метилирования, которое может катализироваться 4’OMT, N7OMT и 3’OMT. В наших данных по транскриптому несколько унигенов, гомологов N7OMT, показали в 1,7–2,1 раза большую экспрессию (Таблица S12) в pap1 по сравнению с BR086, что свидетельствует об участии N7OMT в биосинтезе папаверина. Ранее было показано, что 4’OMT является беспорядочным, и участие того же фермента было показано в путях NH- и NCH 3 — [25].4’OMT с установленной функцией в биосинтезе BIAs активируется более чем в 3 раза в pap1 по сравнению с BR086. Вместе повышающая регуляция N7OMT и 4’OMT предполагает, что путь NCH 3 играет важную роль в биосинтезе папаверина.

    Рисунок 7. Дифференциальная экспрессия метилтрансфераз (а) и дегидрогеназ (б) с их дифференциальной экспрессией в pap1 и BR086.

    Два столбца в каждом представляют pap1, и BR086, а каждая строка представляет контиги, кодирующие элементы этих семейств (таблицы S10 и S11).Кластеризацию проводили с log значениями tpm каждого контига в транскриптоме pap1, и BR086 для визуализации дифференциальной экспрессии.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.g007

    Мы также искали предполагаемые гены-кандидаты, кодирующие 3’OMT, которые могут быть частью не охарактеризованного шага в пути NCH 3 . Интересно, что из 22 общих (более чем в 2 раза) повышающих регуляцию МТ один униген (contig23231) (Таблица S12) показал максимальную гомологию с 9-O-метилтрансферазой (9OMT) из Thalictrum tuberosum , более чем активирован более чем 5-кратный (Таблица S12; Рисунок 7a).Недавно SOMT1, обозначенный как 9-O-метилтрансфераза, принимает как (S) -норретикулин, так и (S) -ретикулин в качестве субстрата. Этот SOMT1 является единственной O-метилтрансферазой, которая эффективно действует как на N-метилированный, так и на N-десметилированный бензилизохинолин. Ген SOMT1 проявляет активность 3′-O-метилтрансферазы, а подавление SOMT1 снижает уровень папаверина [24]. Поскольку contig23231 демонстрирует гомологию с SOMT1, мы заключаем, что транскрипт, связанный с этим контигом, может кодировать 3’OMT и участвовать в биосинтезе папаверина через путь NCH 3 .

    В наших данных транскриптома присутствовало всего 584 дегидрогеназы (Таблица S13), которые относятся к семействам короткоцепочечных дегидрогеназ / редуктаз (SDR), включая тропионинредуктазу, алкогольдегидрогеназу и малатдегидрогеназу. Анализ кластеризации иерархии предполагает, что количество дегидрогеназ по-разному экспрессируется между pap1, и BR086 (фигура 7b). N-десметильный путь биосинтеза папаверина включает нехарактеризованную дегидрогеназу, которая превращает (S) -тертахидропапаверин в папаверин (рис. 6).Из общего количества дегидрогеназ 34 и 33 имеют по крайней мере 2-кратную повышенную или понижающую регуляцию в pap1 по сравнению с BR086. Активированные дегидрогеназы, идентифицированные в этом исследовании, могут участвовать в не охарактеризованном этапе, ведущем к биосинтезу папаверина из (S) -тетрагидропапаверина (рис. 6).

    Подтверждение экспрессии дифференциально экспрессируемых генов

    Анализ данных транскриптомов из pap1, и BR086 выявил гены, кодирующие членов семейств генов метилтрансферазы и дегидрогеназы, которые могут участвовать в биосинтезе папаверина.Чтобы подтвердить дифференциальную экспрессию этих идентифицированных генов, мы выбрали 10 членов семейства метилтрансфераз (5 с повышенной и 5 с отрицательной регуляцией) и 10 членов семейства дегидрогеназ (5 с повышенной и 5 с отрицательной регуляцией) для проверки экспрессии. Все эти гены показали дифференциальную экспрессию (повышающая и понижающая регуляция) в pap1 по сравнению с BR086 (Фигуры 8a и 8b; верхняя панель). Наблюдаемая дифференциальная экспрессия была аналогична результатам цифровой экспрессии (рис. 8a и 8b; нижняя панель), что позволяет предположить, что идентифицированные гены, кроме тех, которые взяты для проверки с помощью ПЦР в реальном времени, по-разному экспрессируются между pap1, и BR086.Подобный анализ посредством анализа транскриптомов из разных тканей для дифференциально экспрессируемых генов привел к идентификации генов, участвующих во вторичном биосинтезе растительных продуктов [41]. Подтверждение экспрессии выбранных генов с помощью ПЦР в реальном времени предполагает, что другие дифференциально экспрессируемые гены, идентифицированные в этом исследовании с помощью цифрового анализа экспрессии, могут участвовать в различных не охарактеризованных этапах биосинтеза папаверина.

    Фигура 8. Подтверждение дифференциально экспрессируемых транскриптов в pap1 и BR086.

    Количественная ПЦР в реальном времени выбранной дифференциально регулируемой метилтрансферазы (а) и семейства генов дегидрогеназы (b) была проведена с использованием тотальной РНК, выделенной из ткани плодоножки на стадии prehook мутанта pap1, и BR086. Цифровая экспрессия генов, используемых для проверки с помощью количественной ПЦР в реальном времени, представлена ​​на нижней панели (а) и (б). Информация о выбранных транскриптах с повышенной и пониженной регуляцией представлена ​​в таблице S1.

    https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0065622.g008

    Дополнительная информация

    Рисунок S1.

    Классификация генной онтологии транскриптов pap1 и BR086. BLASTX в протеоме Arabidopsis (TAIR) выполняли для обеспечения аннотации GO. Результаты суммированы по трем основным категориям: биологический процесс (BP), клеточный компонент (CC) и молекулярная функция (MF).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.s001

    (TIF)

    Рисунок S2.

    Классификация генной онтологии унигенов из комбинированной сборки. BLASTX в протеоме Arabidopsis (TAIR) выполняли для обеспечения аннотации GO. Результаты суммированы по трем основным категориям: биологический процесс, клеточный компонент и молекулярная функция.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.s002

    (TIF)

    Рисунок S4.

    Число высококачественных считываний, представляющих известные гены пути BIA в комбинированной сборке. Известные гены, для которых был проведен анализ, включают TYDC, тирозин / допа декарбоксилазу; NCS, норкоклауринсинтаза; CNMT, (S) -коклаурин-N-метилтрансфераза; 4’OMT, (S) -3′-hdroxy-N-метилкоклаурин-4′-O-метилтрансфераза; 6OMT, (S) -норкоклаурин-6-O-метилтрансфераза; N7OMT, норретикулин 7- O метилтрансфераза; 7OMT, ретикулин 7- O -метилтрансфераза; SalR салутаридинредуктаза; SalAT, салутаридинол-7-O-ацетилтрансфераза; T6ODM, тебаин-6-O-деметилаза; CODM, кодеин-O-деметилаза; BBE, фермент берберинового мостика и COR, кодионинредуктаза.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0065622.s004

    (TIF)

    Спазмолитическое действие сока черной смородины (Ribes nigrum L.) и его возможное использование в качестве функциональной пищи при желудочно-кишечных расстройствах — FullText — Медицинские принципы и практика 2018, Vol. 27, № 2

    Аннотация

    Цель: Целью данного исследования было изучить расслабляющее действие сока черной смородины на гладкую мускулатуру желудочно-кишечного тракта in vitro. Материалы и методы: Для приготовления сока использовали ягоды черной смородины сорта Омета. Спазмолитическую активность сока черной смородины тестировали на подвздошной кишке крыс, выделенной от самцов крыс Wistar, путем мониторинга ее влияния на спонтанные сокращения, а также сокращения, вызванные хлоридом калия (KCl), хлоридом бария (BaCl 2 ), хлоридом кальция (CaCl ). 2 ) и ацетилхолин (Ach). Результаты выражены как среднее значение ± стандартное отклонение, полученное в 6 измерениях, а статистическая значимость была определена с помощью теста Стьюдента t с p <0.05 воспринимается как значимое. Результаты: Сорт черной смородины Омета значительно снизил частоту и амплитуду спонтанных сокращений (57,94 ± 3,44%) и сокращений, вызванных ахином (42,74 ± 5,36%; p <0,05) изолированной подвздошной кишки крысы. Кумулятивные концентрации (0,01–3 мг / мл) сока Ometa также уменьшали сокращения изолированной подвздошной кишки крысы, стимулированные KCl (51,46 ± 6,87%), CaCl 2 (57,54 ± 6,47%) и BaCl 2 (58 .54 ± 10,55%). Тормозящие эффекты сока были пропорциональны применяемой концентрации. Заключение: Спазмолитический эффект сорта Омета показывает, что обычные желудочно-кишечные расстройства можно лечить с помощью функционального питания.

    © 2018 Автор (ы) Опубликовано S. Karger AG, Базель


    Значение исследования

    • В этом исследовании in vitro исследовали расслабляющее действие сока черной смородины на гладкие мышцы желудочно-кишечного тракта подвздошной кишки крысы.Фруктовый сок черной смородины снижает сократимость подвздошной кишки, вызванную ацетилхолином, хлоридом калия, хлоридом кальция и хлоридом бария. Этот спазмолитический эффект сока черной смородины поддерживает его возможное использование в качестве лечебного средства на травах при лечении распространенных желудочно-кишечных расстройств.

    Введение

    Желудочно-кишечный тракт — это система, отвечающая за прием и переваривание пищи, всасывание питательных веществ и удаление конечных продуктов пищеварения.Функциональные расстройства желудочно-кишечной системы включают симптомы, проявляющиеся в средней или нижней части пищеварительного тракта, которые нельзя отнести к анатомическим или биохимическим дисфункциям [1, 2]. Эти нарушения составляют примерно 40% диагностированных желудочно-кишечных проблем [3]. Функциональная диспепсия — наиболее частая дисфункция верхних отделов пищеварительного тракта и синдром раздраженного кишечника нижних отделов [4]. Однако функциональные желудочно-кишечные расстройства являются следствием комбинации предрасполагающих генетических факторов, условий окружающей среды и состава и / или функции кишечной микробиоты [5, 6].Пища играет важную роль как в развитии, так и в профилактике этих расстройств.

    Черная смородина ( Ribes nigrum L., Grossulariaceae) — это растение, выращиваемое внутри страны и в коммерческих целях для получения ароматных ягод. Исследования химического состава плодов черной смородины показали, что эти ягоды богаты различными классами флавоноидов, такими как антоцианы (дельфинидин-3-O -рутинозид, цианидин-3-O -рутинозид), флавонолы (мирицетин, кверцетин ), фенольные кислоты (хлорогеновая и неохлорогеновая), флаванолы (эпикатехин и катехин), а также витамин С.Флавоноиды составляют треть от общего содержания фенолов, а доминирующей группой флавоноидов являются антоцианы [7, 8]. Из-за высокого содержания антоцианов этот вид растений используется в качестве натурального красителя в пищевой промышленности.

    Черная смородина используется в традиционной европейской медицине для лечения ревматических заболеваний, гипертонии, диабетической нейропатии, опухолевых и нейродегенеративных заболеваний [9, 10]. Черная смородина повышает уровень холестерина липопротеинов высокой плотности и снижает уровень триглицеридов и общего холестерина в плазме [11].Сообщалось, что масло семян смородины снижает уровень воспалительных маркеров в сыворотке [12] и действует как потенциальный антикоагулянт [13].

    Эксперименты показали, что экстракт листьев черной смородины снижает агрегацию тромбоцитов, значительно увеличивает жизнеспособность клеток при более низких дозах полифенолов и увеличивает CD39-позитивную фракцию эндотелиальных клеток и активацию синтазы оксида азота [14]. Экстракты плодов и листьев черной смородины повышают устойчивость мембран эритроцитов к действию свободных радикалов [15].Флавоноиды черной смородины проявляют фитоэстрогенную активность [16].

    Было показано, что флавоноиды, которых много в черной смородине, вызывают расслабление гладкой мускулатуры [17-20]. Поэтому целью данной статьи было изучить влияние сока черной смородины на спонтанную моторику и сократительную способность гладкой мускулатуры кишечника крыс in vitro.

    Материалы и методы

    Растительный материал и подготовка образцов

    Плоды черной смородины ( R.nigrum L.) сорт Ometa были собраны вручную с июня по июль 2010 года на экспериментальном поле Сельскохозяйственного факультета в Белграде, расположенном в Мисложине, регион Обреновац, Сербия. Соки получали вручную из свежих неповрежденных плодов, а затем центрифугировали 10 мин при 8 050 г . Супернатанты хранили в закрытых контейнерах при –18 ° C и растворяли в растворе Tyrode до желаемой концентрации при необходимости. Раствор Тирода состоял из 150 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl (хлорид калия), 2 мМ MgCl 2 , 1.8 мМ CaCl 2 (хлорид кальция), 0,4 мМ NaH 2 PO 4 , 12 мМ NaHCO 3 и 5,5 мМ глюкозы.

    Экспериментальные животные

    Самцы крыс линии Вистар (200–250 г, возраст 12 недель) были получены из вивария медицинского факультета Нишского университета, Сербия. Крысы созревали в стандартных лабораторных условиях (температура 20–24 ° C, 12-часовой световой цикл) и имели свободный доступ к пище и воде. Все эксперименты на животных проводились в соответствии с Директивой Совета Европы от 22 сентября 2010 г. (Директива 2010/63 / EU) и были одобрены Комитетом по этике животных медицинского факультета Университета Ниша (решение No.01-206-7).

    Схема эксперимента

    В экспериментах использовались четыре сегмента подвздошной кишки каждой крысы. Животных анестезировали эфиром и открывали брюшную полость. Выделяли сегменты дистальных отделов подвздошной кишки. Затем сегменты подвздошной кишки крысы длиной 2 см помещали в ванну, наполненную раствором Тироде, аэрировали смесью 5% углекислого газа и кислорода и нагревали до 37 ° C. Сокращения изолированной подвздошной кишки измеряли с помощью датчика (TSZ-04-E, Experimetria Ltd, Будапешт, Венгрия) и анализировали с помощью системы сбора данных SPEL Advanced ISOSYS (Experimetria Ltd).После помещения сегментов подвздошной кишки в ванну адаптация к условиям длилась 30 мин до начала эксперимента. Увеличивающиеся концентрации сока (0,01–3 мг / мл) добавляли непосредственно в ванну для органов. После каждой серии экспериментов ткань промывали раствором Тироде и стабилизировали в течение 10 мин. Кривая «концентрация-ответ» была получена путем кумулятивного добавления соков, которые добавлялись с 15-минутными интервалами, так что ткань подвергалась воздействию соков в течение 1,5 часов.

    Суммарное воздействие сока черной смородины (0.01–3 мг / мл) на спонтанные сокращения подвздошной кишки крысы измеряли в первой серии экспериментов. Папаверин использовали в качестве положительного контроля (0,01–3 мкг / мл). Результаты представлены как процентное изменение базального тонуса по сравнению с исходными значениями (% ингибирования сократимости подвздошной кишки).

    Механизм релаксирующего действия сока черной смородины на сократительную способность подвздошной кишки был оценен во второй серии экспериментов. Ацетилхолин (Ach; ​​5–1 500 нМ; 0,1 мл) кумулятивно добавляли в ванну в отсутствие или в присутствии сока (1–3 мг / мл).Влияние сока черной смородины на сокращение подвздошной кишки, вызванное Ach, выражается в процентном снижении сокращений по сравнению с контрольной серией (когда применяли только Ach в отсутствие сока). Атропин (140 нМ), неселективный блокатор мускариновых рецепторов, использовали в качестве положительного контроля.

    В третьей серии экспериментов изучали влияние сока черной смородины на активность кальциевых каналов подвздошной кишки крысы. Гладкие мышцы подвздошной кишки сокращали деполяризующим раствором KCl (80 мМ).Высокая концентрация K + вызывала тонические сокращения кишечника, которые следовали за кумулятивным добавлением сока черной смородины (0,01–3 мг / мл). Эту же процедуру повторили с верапамилом (0,015–1,5 мкг / мл), блокатором кальциевых каналов. Расслабление вызванных калием сокращений подвздошной кишки соком черной смородины выражается в процентах от уменьшения сокращения, вызванного ионами калия, без добавления сока.

    Также исследовали влияние сока черной смородины на вызванные хлоридом бария (BaCl 2 ) сокращения (3–900 мкМ) подвздошной кишки крысы.Сокращения вызывали CaCl 2 в среде без Ca 2+ . Кривые кумулятивной концентрации Ca 2+ были получены путем кумулятивного добавления CaCl 2 в отсутствие и в присутствии сока (1 и 3 мг / мл) и верапамила (0,3 мкмоль / л).

    Статистический анализ

    Данные были проанализированы статистически и выражены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD), полученное в 6 измерениях. Статистическая значимость была определена с помощью теста Стьюдента t с p <0.05 воспринимается как значимое. Эффективная концентрация EC 50 (концентрация, вызывающая 50% максимального ответа) была получена с помощью регрессионного анализа. Статистическую значимость ингибирующих эффектов, вызванных употреблением сока черной смородины, изучали с помощью теста Стьюдента t . Значительные статистические различия между значениями EC 50 были получены с помощью однофакторного дисперсионного анализа или теста Стьюдента t . Анализы проводились с использованием пакета статистических программ SPSS (v.20.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс, США).

    Результаты

    Сок из сорта черной смородины Омета значительно уменьшил спонтанные сокращения изолированной подвздошной кишки крысы в ​​зависимости от дозы. Самая высокая концентрация сока черной смородины, использованная в этом исследовании, то есть 3 мг / мл, значительно уменьшала сокращение подвздошной кишки ( p <0,01; рис. 1). Значение EC 50 для этой концентрации составляло 3,23 ± 0,11 мг / мл.

    Рис. 1.

    a Записи кумулятивных кривых концентрация-реакция черной смородины ( R.nigrum л.) сока сорта Омета. b График, показывающий сократительное действие сока черной смородины на спонтанную активность изолированной подвздошной кишки крысы. Папаверин использовали в качестве положительного контроля. Каждая точка представляет собой средние процентные значения относительно спонтанных сокращений в растворе Тироде (контроль) ± стандартное отклонение 6 сегментов. * p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с Tyrode.

    Во второй серии экспериментов сок черной смородины значительно подавлял вызванное Ach сокращение подвздошной кишки (рис.2) пропорционально применяемым концентрациям. Сок омета (3 мг / мл) снижал сократимость подвздошной кишки (56 495,53 ± 633,34 против 131 294,76 ± 11 816,02; p <0,01). Значение EC 50 для Ach (0,15 ± 0,05 нМ) увеличивалось в присутствии сока до 7,64 ± 3,01 нМ. Атропин подавлял стимулирующие эффекты Ach (21 033,29 ± 1261,39 против 131 294,76 ± 11 816,02; p <0,01).

    Рис. 2.

    a Записи сокращений изолированной подвздошной кишки крысы, вызванных Ach. b График, показывающий влияние сока черной смородины и атропина на вызванные Ach сокращения изолированной подвздошной кишки крысы. Кривые, показывающие значения контроля, Ach + сок черной смородины (1 мг / мл), Ach + сок черной смородины (3 мг / мл) и Ach + атропин (в качестве положительного контроля), соответственно. Каждая точка представляет собой средние значения в процентах от максимального ответа ± стандартное отклонение 6 сегментов. * p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

    Кумулятивные концентрации сока Омета подавляли сокращения изолированной подвздошной кишки крысы, стимулированные KCl ( p <0.01) со значениями EC 50 3,04 ± 0,42 мг / мл (рис.3). Верапамил, блокатор кальциевых каналов, ослаблял вызванные KCl сокращения подвздошной кишки ( p <0,01).

    Рис. 3.

    a Записи вызванных KCl сокращений изолированной подвздошной кишки крысы. b График, показывающий влияние сока черной смородины на вызванные KCl сокращения изолированной подвздошной кишки крысы. Верапамил использовали в качестве положительного контроля. Каждая точка представляет собой средние значения в процентах от максимального ответа ± стандартное отклонение 6 сегментов.* p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

    Эффекты сока и верапамила на стимулированные Ca 2+ сокращения подвздошной кишки крысы в ​​отсутствие CaCl 2 показаны на (рис. 4). Сок омета подавлял стимулированные Ca 2+ сокращения изолированной подвздошной кишки крысы ( p <0,01). Верапамил, блокатор кальциевых каналов, также вызывал ингибирование вызванного Ca 2+ сокращения подвздошной кишки. Значение EC 50 для ионов кальция (0.61 ± 0,09 мМ) увеличивалось в присутствии сока Ometa (1,61 ± 0,31 мМ).

    Рис. 4.

    a Записи сокращений, вызванных Ca 2+ изолированной подвздошной кишки крысы. b График, показывающий влияние сока черной смородины на кривые доза-ответ Ca 2+ изолированной подвздошной кишки крысы. Верапамил использовали в качестве положительного контроля. Ca 2+ добавляли в кумулятивной концентрации в среду, не содержащую Ca 2+ . Каждая точка представляет собой средние значения в процентах от максимального ответа ± стандартное отклонение 6 сегментов.* p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

    Сок значительно снижал стимулированное BaCl 2 сокращение изолированной подвздошной кишки крысы в ​​зависимости от концентрации (рис. 5). Концентрация 3 мг / мл вызывала значительное расслабление ( p <0,01). Значение ЕС 50 для BaCl 2 (7,03 ± 0,82 мкМ) увеличивалось до 518,29 ± 62,69 мкМ в присутствии сока (3 мг / мл).

    Рис. 5.

    a Записи сокращений, вызванных BaCl 2 изолированной подвздошной кишки крысы. b График, показывающий кривые зависимости от концентрации BaCl 2 в отсутствие и в присутствии сока черной смородины в изолированных препаратах подвздошной кишки крысы. Каждая точка представляет собой средние значения в процентах от максимального ответа ± стандартное отклонение 6 сегментов. * p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с контролем.

    Все эксперименты проводились параллельно с контролем на одной и той же животной ткани. Значительные статистические различия (односторонний тест ANOVA) были обнаружены среди значений EC 50 для сока, стандартов и соответствующих контролей в сокращениях, вызванных Ach-, BaCl 2 — и CaCl 2 ( p <0.001). Тест Стьюдента t использовался для сравнения EC 50 сока и папаверина или верапамила для спонтанных и вызванных KCl сокращений, соответственно ( p <0,001), и были получены значительные статистические различия ( p <0,001).

    Обсуждение

    В этом исследовании было показано, что сок черной смородины значительно снижает сократимость гладких мышц подвздошной кишки крысы и оказывает спазмолитический эффект.Релаксантные эффекты сока были отменены после промывания ткани, показывая, что спазмолитические эффекты не были вызваны повреждением кишечника.

    Спонтанные сокращения гладких мышц подвздошной кишки вызываются циклической деполяризацией из-за проникновения ионов кальция в клетки и активации сократительных белков. Сократимость желудочно-кишечной системы регулируется рядом физиологических механизмов. Нервные и гуморальные факторы, а точнее нейротрансмиттеры кишечной нервной системы, регулируют спонтанное ритмическое сокращение и расслабление гладких мышц кишечника.Кишечная нервная система (мозг-в-кишечнике) важна для нормальной моторики тонкого кишечника [21]. Известно, что экстракты, влияющие на сократительную способность кишечника, обладают нейрофизиологической активностью [22, 23]. Кроме того, холинергические антагонисты используются для снижения перистальтики кишечника [24]. Чтобы проверить наличие холинергических компонентов в соке черной смородины, мы контролировали его влияние на вызванные Ach сокращения подвздошной кишки.

    Чтобы проверить наличие холинэргических компонентов в соке черной смородины, мы контролировали его влияние на вызванные Ach сокращения подвздошной кишки.Ач вызывал дозозависимые сокращения подвздошной кишки и достигал максимального эффекта через 30 с после применения. Сок омета показал значительное ингибирующее действие на сокращение подвздошной кишки крысы, стимулированное Ach. Тормозящие эффекты сока были пропорциональны применяемой концентрации и обратимы после промывания ткани раствором Тироде. Ах, самый распространенный нейротрансмиттер желудочно-кишечной системы, увеличивает сократимость кишечных мышц. В пищеварительном тракте Ach активирует никотиновые рецепторы, которые присутствуют в вегетативных ганглиях, или мускариновые рецепторы, обнаруженные в гладких мышцах и парасимпатических нервных волокнах [25].Стимуляция мускариновых рецепторов на мембране гладкой мускулатуры увеличивает внутриклеточную концентрацию кальция [26-28]. Мускариновые рецепторы в гладкой мускулатуре индуцируют передачу сигнала, опосредованную G-белком, и активируют фосфолипазу-C, что приводит к выработке инозитол-трифосфата и диацилглицерина. Инозитол-трифосфат увеличивает концентрацию ионов кальция в клетке [29].

    Сок черной смородины также вызывает значительное расслабление подвздошной кишки, стимулируемое высокими концентрациями KCl.Известно, что высокие концентрации ионов калия вызывают тоническое сокращение гладкой мускулатуры кишечника, вызывая открытие зависимых от напряжения кальциевых каналов L-типа, что позволяет ионам кальция проникать в клетку [30]. Следовательно, вещества, подавляющие сокращения, вызванные высокими концентрациями K + , считаются блокаторами кальциевых каналов [31]. Сок омета также подавлял сокращения гладкой мускулатуры подвздошной кишки, стимулированные CaCl 2 в отсутствие ионов кальция.Верапамил, блокатор кальциевых каналов, также ингибировал сокращений, стимулированных CaCl 2 подвздошной кишки. Результаты ингибирования сокращений, стимулированного ионами кальция, позволяют предположить, что сок черной смородины содержит ингредиенты, которые могут подавлять кальциевые каналы. Мы наблюдали, что сок черной смородины ингибировал сокращение подвздошной кишки, вызванное BaCl 2 . Барий вызывает деполяризацию гладких мышц, что приводит к открытию потенциалозависимых кальциевых каналов и проникновению ионов кальция в клетки [30].

    Фитохимический анализ сорта черной смородины Омета показал присутствие флавоноидов, среди которых мирицетин является доминирующим флавонолом [32], а цианидин-3- O -рутинозид является доминирующим антоцианом, а также витамином С [7]. Сок содержит полифенолы, флавоноиды и антоцианы, обладает хорошей антиоксидантной активностью [7, 32]. Это также ценное противомикробное и противогрибковое средство. Было показано, что флавоноиды, основные компоненты многочисленных растительных экстрактов, вызывают расслабление гладкой мускулатуры у различных видов животных.Спазмолитический эффект флавоноидов был продемонстрирован на подвздошной кишке [17-20], бронхах и матке крыс [33] in vitro и in vivo. Кверцетин, один из флавоноидов, содержащихся в соке черной смородины, оказывает ингибирующее действие на спонтанные сокращения двенадцатиперстной кишки кролика [34]. Кверцетин оказывает расслабляющее действие на изолированную подвздошную кишку морской свинки, ранее сокращавшуюся высокими концентрациями K + , и ингибирует сокращение кишечника, вызванное различными концентрациями кальция, демонстрируя антагонистический эффект по отношению к кальцию [35].Наши результаты согласуются с такими предыдущими исследованиями.

    Заключение

    Черная смородина ( R. nigrum L.) фруктовый сок сорта Омета значительно снижал сократимость гладких мышц подвздошной кишки. Сок подавлял спонтанные сокращения, а также сокращения, вызванные Ach, KCl, CaCl 2 и BaCl 2 . Следовательно, сок черной смородины может обладать спазмолитическим действием, которое можно использовать в качестве лечебного средства на травах для снижения сократительной способности желудочно-кишечной системы.

    Благодарности

    Исследование было поддержано Министерством образования, науки и технологического развития Республики Сербия (гранты № III 46013 и III 41018). Авторы также благодарны за финансовую поддержку внутреннего проекта медицинского факультета Университета Ниша, Сербия, № 25 под названием «Химическая характеристика, биологическая активность и пищевая ценность Ribes nigrum L, Salvia sclarea . L. и Foeniculum vulgare Miller.«Авторы хотели бы поблагодарить г-на Александра Йовановича за его поддержку и знания английского языка.

    Заявление о раскрытии информации

    У авторов нет конфликта интересов, о котором следует раскрывать.

    Список литературы

    1. Корацциари Э .: Определение и эпидемиология функциональных желудочно-кишечных расстройств.Лучшая Практика Рес Клин Гастроэнтерол 2004; 18: 613–631.
    2. Quigley EMM: функциональные желудочно-кишечные расстройства у взрослых; in Guarino A, Quigley EMM, Walker WA (ред.): Пробиотические бактерии и их влияние на здоровье и благополучие человека. Всемирный обзор питания и диетологии. Базель, Каргер, 2013 г., том 107, стр. 87–94.
    3. Parkman HP, Doma S: Важность нарушений моторики желудочно-кишечного тракта. Прак Гастроэнтерол 2006; 30: 23–40.
    4. Хан И., Самсон С.Е., Гровер А.К.: Антиоксидантные добавки и желудочно-кишечные заболевания: критическая оценка.Med Princ Pract 2017; 26: 201–217.
    5. Дроссман Д.А.: Функциональные желудочно-кишечные расстройства и Римский процесс III. Гастроэнтерология 2006; 130: 1377–1390.
    6. Foster JA, Lyte M, Meyer E, et al: Кишечная микробиота и функция мозга: развивающаяся область нейробиологии.Int J Neuropsychopharmacol 2016; 19: pyv114.
    7. Миладинович Б., Костич М., Шавикин К. и др.: Химический профиль, антиоксидантная и антимикробная активность соков и экстрактов 4 сортов черной смородины (Ribes nigrum L.). J Food Sci 2014; 79: 301–309.
    8. Шавикин К., Микулич-Петковшек М., Джорджевич Б. и др.: Влияние затеняющей сетки на профиль полифенолов и активность удаления радикалов в различных сортах ягод черной смородины.Sci Hortic 2013; 160: 20–28.
    9. Табарт Дж., Франк Т., Кеверс С. и др.: Антиоксидантная и противовоспалительная активность экстрактов Ribes nigrum. Food Chem 2012; 131: 1116–1122.
    10. Гопалан А., Рубен С.К., Ахмед С. и др.: Польза черной смородины для здоровья.Food Funct 2012; 3: 795–809.
    11. Zhu Y, Xia M, Yang Y и др.: Добавка очищенного антоциана улучшает функцию эндотелия за счет активации NO-cGMP у людей с гиперхолестеринемией. Clin Chem 2011; 57: 1524–1533.
    12. Тахвонен Р.Л., Шваб США, Линдерборг К.М. и др.: Добавки масла семян черной смородины и рыбьего жира различаются по своему влиянию на профили жирных кислот липидов плазмы и концентрации общих и липопротеиновых липидов в сыворотке, глюкозы в плазме и инсулина.J Nutr Biochem 2005; 16: 353–359.
    13. Stone DA, Hawke MW, LaMonte M и др.: Язвенные атеросклеротические бляшки в грудной аорте связаны с криптогенным инсультом: многоплановое чреспищеводное эхокардиографическое исследование. Am Heart J 1995; 130: 105–108.
    14. Luzak B, Boncler M, Rywaniak J и др.: Экстракты из листьев Ribes nigrum in vitro активируют синтазу оксида азота (eNOS) и увеличивают экспрессию CD39 в эндотелиальных клетках человека.J Physiol Biochem 2014; 70: 1007– 1019.
    15. Бонарска-Куджава Д., Циборан С., Зилка Р. и др.: Биологическая активность экстрактов черной смородины (Ribes nigrum L.) по отношению к мембранам эритроцитов. Bio Med Res Int 2014; 2014: 783059.
    16. Нанашима Н., Хори К., Томисава Т. и др.: Фитоэстрогенная активность антоцианов черной смородины (Ribes nigrum) опосредуется через рецептор эстрогена альфа.Mol Nutr Food Res 2015; 59: 2419–2431.
    17. Meli R, Autore G, Dicarlo G и др.: Ингибирующее действие кверцетина на кишечный транзит у мышей. Phytother Res1990; 4: 201–202.
    18. Ди Карло Дж., Масколо Н., Иззо А. и др.: Влияние кверцетина на желудочно-кишечный тракт у крыс и мышей.Phytother Res 1994; 8: 42–45.
    19. Хаммад Х, Абдалла С. Фармакологические эффекты выбранных флавоноидов на изолированной подвздошной кишке крысы: взаимосвязь структура-активность. Gen Pharmacol 1997; 28: 767–771.
    20. Revuelta M, Cantabrana B, Hidalgo A: Деполяризационно-зависимый эффект флавоноидов в сокращении гладких мышц матки крыс, вызванный CaCl 2 .Gen Pharmacol 1997; 29: 847–857.
    21. Вуд Дж. Д.: Кишечная нервная система: невропатическая перистальтика желудочно-кишечного тракта. Dig Dis Sci 2016; 61: 1803–1816.
    22. Пилия В., Раденкович М., Джурендик Бренезель М. и др.: Ингибирующее действие экстракта гинкго билоба на тонус тонкого кишечника и толстой кишки кроликов.Молекулы 2010; 15: 2079–2086.
    23. Раденкович М., Иветич В., Попович М. и др.: Нейрофизиологические эффекты омелы белой (Viscum album L.) на изолированном кишечнике крысы. Phytother Res 2006; 20: 374–377.
    24. Хант Р.: Развивающиеся концепции функциональных желудочно-кишечных расстройств: многообещающие направления для новых фармацевтических методов лечения.Лучшая практика Рес Клин Гастроэнтерол 2002; 16: 869–883.
    25. Раденкович М., Самарджич Р., Велькович С. и др.: Региональные различия в моторной реакции на гиосцина бутилбромид в изолированном тонком и толстом кишечнике кролика. Facta Univ 2003; 10: 84–87.
    26. Eglen M, Hedge S, Watson N: подтипы мускариновых рецепторов и функция гладких мышц.Pharmacol Rev 1996; 48: 531–565.
    27. Элорриага М., Ансельми Е., Эрнандес Дж. М. и др.: Источник Ca 2+ для индуцированного мускариновыми рецепторами сокращения в подвздошной кишке крысы. J Pharm Pharmacol 1996; 48: 817–819.
    28. Гилани А., Хан А., Гаюр М. и др.: Спазмолитические эффекты чая ройбуш (Aspalathus linearis) опосредуются преимущественно через активацию канала K + .Basic Clin Pharmacol Toxicol 2006; 99: 365–373.
    29. Киршштейн Т., Реберг М., Баджорат Р. и др.: Сокращение, вызванное высоким K + , требует вызванного деполяризацией высвобождения Ca 2+ из внутренних запасов в гладких мышцах кишечника крысы. Acta Pharmacol Sin 2009; 30: 1123–1131.
    30. Mori MX, Itsuki K, Hase H и др.: Динамика управляемых рецептором токов Ca 2+ через каналы TRPC, контролируемые сигнальным путем PI (4,5) P 2 -PLC. Front Pharmacol 2015; 6:22.
    31. Бранкович С., Китич Д., Раденкович М. и др.: Блокирующая активность кальция как механизм спазмолитического эффекта эфирного масла Calamintha glandulosa Silic на изолированной подвздошной кишке крысы.Gen Physiol Biophys 2009; 28: 174–178.
    32. Миладинович Б., Стоянович Д., Костич М. и др.: Содержание флавоноидов в соках черной смородины (Ribes nigrum L.); в: 49-е дни профилактической медицины: сборник тезисов. 22–25 сентября 2015 г. Ниш, Институт общественного здравоохранения, стр. 61–63.
    33. Rotondo A, Serio R, Mule F: Желудочная релаксация, вызванная апигенином и кверцетином: анализ механизма действия.Life Sci 2009; 85: 85–90.
    34. Сантос-Фагундес Д., Граса Л., Гонсало С. и др.: Различные механизмы действия генистеина и кверцетина на спонтанные сокращения двенадцатиперстной кишки кролика. Rev Esp Enferm Dig 2015; 107: 413–416.
    35. Моралес М.А., Торториелло Дж., Мекес М. и др.: Кальций-антагонистический эффект кверцетина и его связь со спазмолитическими свойствами Psidium guajava L.Arch Med Res 1994; 25: 17–21.

    Автор Контакты

    Душанка Китич

    Фармацевтический факультет

    Университет Ниша, проспект Зорана Джинджица 81

    RS – 18000 Ниш (Сербия)

    Электронная почта [email protected]


    Подробности статьи / публикации

    Предварительный просмотр первой страницы

    Получено: 18 июля 2017 г.
    Принято: 28 января 2018 г.
    Опубликовано онлайн: 28 января 2018 г.
    Дата выпуска: май 2018 г.

    Количество страниц для печати: 7
    Количество рисунков: 5
    Количество столов: 0

    ISSN: 1011-7571 (печатный)
    eISSN: 1423-0151 (онлайн)

    Для дополнительной информации: https: // www.karger.com/MPP


    Лицензия открытого доступа / Дозировка лекарства / Отказ от ответственности

    Эта статья находится под международной лицензией Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (CC BY-NC). Для использования и распространения в коммерческих целях требуется письменное разрешение. Дозировка лекарства: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор и дозировка лекарства, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Однако ввиду продолжающихся исследований, изменений в правительственных постановлениях и постоянного потока информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на них, читателю настоятельно рекомендуется проверять листок-вкладыш для каждого препарата на предмет любых изменений показаний и дозировки, а также дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендованным агентом является новый и / или редко применяемый препарат. Отказ от ответственности: утверждения, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и соавторам, а не издателям и редакторам.Появление в публикации рекламы и / или ссылок на продукты не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор (-ы) не несут ответственности за любой ущерб, нанесенный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в контенте или рекламе.

    Паргеверин | CAS # 13479-13-5 | спазмолитик

    Синоним: Паргеверин; BE-50; BE50; BE 50

    ИЮПАК / химическое название: 2- (Диметиламино) этилдифенил (2-пропинилокси) ацетат

    Ключ InChi: QNPHCSSJLHAKSA-UHFFFAOYSA-N

    Код InChi: ИнЧИ = 1С / К21х33НО3 / с1-4-16-25-21 (18-11-7-5-8-12-18,19-13-9-6-10-14-19) 20 (23) 24- 17-15-22 (2) 3 / ч2,5-14ч, 15-17х3,2-3х4

    УЛЫБКИ Код: O = C (OCCN (C) C) C (C1 = CC = CC = C1) (C2 = CC = CC = C2) OCC # C

    Появление: Твердый порошок

    Чистота: > 98% (или обратитесь к Сертификату анализа)

    Условия доставки: Поставляется при температуре окружающей среды как неопасный химикат.Этот продукт достаточно стабилен в течение нескольких недель во время обычной доставки и времени, проведенного на таможне.

    Условия хранения: Сухой, темный и при температуре от 0 до 4 ° C в течение короткого времени (дни или недели) или -20 C в течение длительного времени (от месяцев до лет).

    Растворимость: Растворим в ДМСО

    Срок годности: > 3 лет при правильном хранении

    Состав препарата: Этот препарат может быть приготовлен в ДМСО.

    Хранение стандартного раствора: 0–4 ° C для краткосрочного использования (дни или недели) или -20 ° C для длительного срока (месяцы).

    Тарифный код HS: 2934.99.9001

    Подготовка исходных растворов

    Следующие данные основаны на продукт молекулярный вес 337,42 Удельные молекулярные массы партии могут варьироваться от партии к партии из-за степени гидратации, которая влияет на объемы растворителя, необходимые для приготовления исходных растворов.

    Концентрация / объем / масса растворителя 1 мг 5 мг 10 мг
    1 мм 1.15 мл 5,76 мл 11,51 мл
    5 мм 0,23 мл 1,15 мл 2,3 мл
    10 мм 0,12 мл 0,58 мл 1,15 мл
    50 мм 0,02 мл 0,12 мл 0,23 мл

    1: de los Santos AR, Martí ML, Di Girolamo G, Diego Espinosa J, Morano MA, Tobar JC, Del Prete C. Пропинокс при желчной колике: многоцентровое, рандомизированное, проспективное и параллельное двойное слепое исследование трех доз пропинокс по сравнению с плацебо при острой боли при желчных коликах.Int J Tissue React. 1999; 21 (1): 13-8. PubMed PMID: 10463136.

    2: Di Girolamo G, de los Santos AR, Martí ML, Valdés Quintana E, Godoy MI, Morano MA, Palomino G, Fandiño D, Greggio A. Propinox при кишечных коликах: многоцентровое рандомизированное проспективное двойное слепое исследование трех доз пропинокс против плацебо при острой кишечной колике. Int J Clin Pharmacol Res. 2000; 20 (1-2): 31-40. PubMed PMID: 11146900.

    Сравнение результатов применения различных средств для лечения спазма сосудов на…: Ingenta Connect

    Фон:
    Папаверин остается популярным для лечения интраоперационного вазоспазма, но недавний дефицит вынудил хирургов испытать спазмолитики, не проверенные в микрохирургии, но обычно используемые в других областях тела. Во время этого дефицита авторы использовали лидокаин для местного применения. и никардипин для снятия интраоперационного спазма сосудов. Это исследование направлено на анализ эффективности этих препаратов в отношении осложнений, связанных с лоскутом, по сравнению с папаверином.
    Методы:
    Были проанализированы все последовательные свободные лоскуты, выполненные для реконструкции груди в одном учреждении.Собранные данные включали демографические данные пациентов, сопутствующие заболевания, осложнения и тип спазмолитического средства. Частота повторного обследования, осложнений и спасения лоскута сравнивалась между пациентами, получавшими спазмолитики, и контрольной группой, получавшей папаверин.
    Результатов:
    из 1087 лоскутов обрабатывались спазмолитиками, никардипин использовался для 59 лоскутов и лидокаин использовался для 55 лоскутов. Пациенты, получавшие лидокаин, имели более высокий индекс массы тела (31,0 кг / м 2 против 27.4 кг / м 2 ; р = 0,001). Пациенты, получавшие никардипин, имели тенденцию быть старше (64,0 против 48,5; p, p = 0,08) или предоперационным облучением (32,2 процента против 13,6 процента; p = 0,016) по сравнению с контрольной группой папаверина. Никаких различий в ставках итога или частичная потеря лоскута, незапланированное возвращение в операционную или некроз жира наблюдались между любыми группами. Однако группа никардипина продемонстрировала более высокий уровень инфицирования (15.3 процента против 3,4 процента; p = 0,027).
    Заключение:
    Замещающий лидокаин или никардипин для папаверина для лечения вазоспазма не продемонстрировали увеличения скорости выпадения лоскута или возвращения в операционную, что делает эти препараты безопасными и эффективными альтернативами папаверина.
    КЛИНИЧЕСКИЙ ВОПРОС / УРОВЕНЬ ДОКАЗАТЕЛЬСТВ:
    Терапевтический, III.

    Нет доступной справочной информации — войдите в систему для доступа.

    Информация о цитировании недоступна — войдите в систему, чтобы получить доступ.

    Нет дополнительных данных.

    Нет статей СМИ

    Без показателей

    молекул | Бесплатный полнотекстовый | In Silico, Ex vivo и In vivo исследования рофлумиласта как потенциального противодиарейного и спазмолитического средства: ингибирование фермента ФДЭ-4 и каналов потенциалзависимых ионов Са ++

    Ввиду широкого терапевтического потенциала рофлумиласта мы ранее сообщали об исследованиях, показывающих его эффективность при лечении воспалительных состояний и связанных с ними заболеваний, таких как кардио- и почечная токсичность [20,21].Настоящее исследование было запланировано для проверки возможного дополнительного терапевтического потенциала рофлумиласта при гиперактивных болезненных состояниях кишечника у мышей с подробным исследованием механизма (ов) с использованием тощей кишки кролика в экспериментах ex vivo. Вызвать диарею у нормальных мышей стало возможным с помощью касторового масла, которое после гидролиза до рицинолевой кислоты привело к возникновению спазмов в кишечнике [22]. Предварительное введение рофлумиласта защищало мышей от диареи дозозависимым образом, подобно препарату положительного контроля, лоперамиду, типичному противодиарейному средству [23].После того, как мы наблюдали противодиарейный ответ, нашей второй задачей было определить возможную фармакодинамику, участвующую в этом эффекте. Для этого метод Башира с соавт. [24] последовали испытания кумулятивных концентраций рофлумиласта в изолированной спонтанно сокращающейся тощей кишке. Интересно, что рофлумиласт проявлял полное ингибирование, таким образом проявляя спазмолитический эффект и дополнительно поддерживая наши наблюдения in vivo. Основываясь на наших предыдущих наблюдениях, что спазмолитические средства опосредуют ингибирующие эффекты кишечника за счет блокады каналов Ca ++ [23], активации калиевых каналов [25] и / или ингибирования PDE [26], мы дополнительно протестировали рофлумиласт на спровоцированных сокращениях тощей кишки кроликов с соответствующей сократимостью. агенты с высоким содержанием K +, низким K + и карбахол [27].Критический анализ паттернов ингибирующих CRC рофлумиласта против высоких K + и CCh показывает, что он проявляет статистически более высокую эффективность против высокого K + по сравнению с CCh, типичным свойством блокаторов Ca ++ каналов (CCB) [28]. Наш положительный контрольный препарат, верапамил, известный потенциалзависимый ингибитор Са ++ [29], также обращал вспять высокий K + с более высокой эффективностью, чем CCh, тем самым еще больше укрепляя наши выводы. Не наблюдалось значительной разницы в эффективности рофлумиласта в отношении высокого K + и низкого K + (данные не показаны), что исключает возможную роль активации K + -каналов как одного из спазмолитических механизмов рофлумиласта.Тестовый образец, который избирательно восстанавливает низкий уровень K + (30,31). Для дальнейшего подтверждения и подтверждения CCB-подобного действия рофлумиласт предварительно инкубировали в тканях тощей кишки, стабилизированных в буферном растворе без Ca ++. Сократительные CRC Ca ++ измеряли в тканях тощей кишки. в отсутствие и в присутствии преинкубации с увеличивающимися дозами рофлумиласта. ], был протестирован косвенно на ингибирование PDE и повышение уровней цАМФ, поскольку ингибиторы PDE, блокируя PDE, вызывают повышение уровней цАМФ в тканях.ФДЭ отвечает за преобразование цАМФ в его неактивную форму (АМФ), препятствуя расслаблению гладких мышц [32]. Рофлумиласт, однако, полностью устранял CCh-опосредованные сокращения с большей эффективностью по сравнению с его действием против высокого K +, что указывает на ингибирование PDE как дополнительный механизм подавления рофлумиласта кишечником. Хорошо известно, что ингибиторы ФДЭ подавляют спазмы гладких мышц, опосредованные ЦЧ [33]. Усиление ингибирующих CRC изопреналина в сторону более низких доз (слева) в тканях тощей кишки, предварительно инкубированных с рофлумиластом, косвенно подтверждает его ингибирующий характер PDE, который был дополнительно подтвержден, когда предварительная инкубация рофлумиласта вызывает повышение уровней цАМФ в тканях тощей кишки, аналогично папаверину, стандартному ингибитору ФДЭ [34,35].Концепция ингибирования PDE была дополнительно подтверждена результатами in silico молекулярного докинга. Исследование молекулярного докинга помогло нам понять взаимодействие белок-лиганд в активном домене PDE-4. Сообщается, что ФДЭ-4 имеет четыре подтипа (A, B, C и D), каждый из которых может разрушать цАМФ, который является вторым мессенджером, реагирующим на воспалительный эффект. Рофлумиласт — селективный и неспецифический ингибитор ФДЭ-4, который способен ингибировать все изоформы ФДЭ-4. Несмотря на свои фармакологические эффекты, рофлумиласт может вызывать побочные эффекты, такие как диарея, тошнота и головокружение, из-за отсутствия специфичности.Поскольку было обнаружено, что PDE-4B и PFDE-4D более выражены и широко изучены, они были выбраны для настоящего исследования стыковки. Стандартный лекарственный препарат папаверин показал два сродства к водородным связям, в то время как рофлумиласт продемонстрировал лучшее сродство к связыванию с двумя водородными связями и двумя связями водород-галоген. Галогеновые и водородно-галогенные связи считаются более благоприятными, и именно поэтому галогенсодержащие соединения продолжают исследоваться и считаются двойными агонистами [36].

    Синтез и спазмолитическое действие арилзамещенных N-карбамоил / тиокарбамоилизохинолинов

    Выпуск в честь проф.Т. Говиндачари ARKIVOC 2001 (viii) 129-135 Синтез и спазмолитическое действие арилзамещенных Nкарбамоил / тиокарбамоилизохинолинов Рамеш Чандра *, Джаскиран Каур, Анита Талвар и Нарендра Н. Гош Доктор Б. Центр биомедицинских исследований Амбедкара, Университет Дели 110 007, Индия E-mail: [email protected] Посвящается профессору Т. Р. Говиндачари по случаю его 85-летия (получено 29 марта 01; принято 09 октября 01; опубликовано в сети 17 октября 01) Абстрактный Была достигнута реакция тетрагидропапаверина, полученного из гомовератриламина и гомовератриновой кислоты с помощью трехстадийной процедуры с различными ароматическими изоцианатами или изотиоцианатами, с получением соответствующих арилзамещенных N-карбамоил или N-тиокарбамоильных производных изохинолина.Все соединения были проверены на их спазмолитическую активность. Ключевые слова: изохинолин, папаверин, тетрагидропапаверин, спазмолитическое действие, изоцианаты / изотиоцианаты. Вступление Химия тетрагидроизохинолиновых алкалоидов на протяжении многих лет привлекала значительный интерес из-за их высокой биологической активности. Было обнаружено, что широкий спектр N-замещенных 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинов является полезным исходным материалом для создания множества привлекательных с медицинской точки зрения промежуточных соединений.1-4 Природные алкалоиды обычно представляют собой оптически активные соединения, обладающие антигипертензивным, кровоостанавливающим, релаксантом гладких или скелетных мышц, спазмолитическим, противокашлевым, противомалярийным, наркотическим, обезболивающим или жаропонижающим действием5. Было обнаружено, что апорфиновые алкалоиды, а именно (±) талипорфин, (±) N-метилауротетанин, (±) изоболдин, представляют значительный биологический и биогенетический интерес6,7. Папаверин также является природным алкалоидом бензилизохинолина, выделенным из опия. Клинически папаверин используется как сосудорасширяющее средство из-за его расслабляющего действия на гладкие мышцы сосудов8,9.Некоторые N-ацильные производные папаверина и родственных соединений обладают разнообразной активностью против СПИДа, глюкомы и грибковых инфекций10–12. В поисках биологически более эффективных соединений мы предполагали синтезировать арилзамещенные N-карбамоил, а также N-тиокарбамоильные производные тетрагиропапаверина. В этой статье мы сообщаем о четырехэтапной процедуре, которая дает арилзамещенные N-карбамоильные или N-тиокарбамоильные производные тетрагидропапаверина и изучает их спазмолитическую активность. ISSN 1424-6376 Страница 129 © ARKAT USA, Inc.

    .
    Leave a Reply

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    2021 © Все права защищены.